水稻花药超薄制样标准流程
水稻花药培养的三阶段培养法
水稻花药培养的三阶段培养法
水稻花药培养是一种常用的植物无性系繁殖技术，能够利用花药培养出大量的纯合株系。
水稻花药培养的三阶段培养法包括：
1. 前处理阶段：将剪切过的花药放入含有适当营养盐和生长调节剂的无菌培养基中，经过一段时间的预培养，使花药处于对培养基适应状态。
2. 增殖阶段：将预培养后的花药转移到含有高浓度生长调节剂的培养基上，促使花药进行快速增殖。
这个阶段需要适当调整培养基的成分和生长调节剂的浓度，以提高增殖效果。
3. 分化阶段：逐渐减少生长调节剂的浓度，促使花药开始分化并形成胚性组织。
这个阶段需要控制培养基成分的平衡，并提供适当的光照和温度条件，以促进分化和形成胚性器官。
水稻幼穗发育过程中减数分裂及花药发育的电镜观察
水稻幼穗发育过程中减数分裂及花药发育的电镜观察水稻是我国主要的粮食作物之一，其生长和发育过程一直是植物学家们所关注的研究领域。
其中，水稻的花药发育和减数分裂是水稻生长和发育的重要阶段，对水稻的育种和增产具有重要的意义。
本文旨在通过电镜观察的方式，探究水稻幼穗发育过程中减数分裂及花药发育的细节和机制。
一、水稻花药的结构水稻花药是水稻雄性生殖器官的重要部分，它由四个花被片和一个花药组成，花药内部的细胞按照一定的顺序发育、分化和成熟，最终产生粉末状的花粉，为水稻的繁殖和生长提供了保障。
为了更好地观察水稻花药的结构，我们采用了电镜技术。
经过观察，我们发现水稻花药内部的细胞分布非常整齐，表现出一定的层次感。
花药外部为被子类，内部则是球形花药，由内向外依次为四个分室。
每个分室内部有着一定数量的小细胞，这些小细胞会在花药的发育过程中依次分裂、分化，最终形成花粉。
二、水稻花药的减数分裂花药内的细胞在分化、发育的过程中，主要经历了减数分裂、染色体异型分裂以及花粉粒形成等多个步骤。
而其中最关键的步骤之一就是减数分裂。
减数分裂又称减数分裂分离，是指染色体复制后，一对同源染色体的两个单倍体着丝粒之间的联接断裂，随后的步骤中染色体按照一定的规律进行组合、重组和分离，最终形成四个单倍体的分离子。
减数分裂是生殖细胞发生的过程中的一环，而花药内的生殖细胞也需要经历这一过程。
通过电镜观察，我们可以清晰地看到花药内的小胞子母细胞在减数分裂的过程中不断地膨胀和收缩，染色体也随之产生了明显的形态变化。
在第一次减数分裂结束之后，小胞子母细胞会迅速地开始第二次减数分裂，随后形成四个单倍体的花粉细胞。
三、花药中花粉粒的形成花药中的花粉粒也是花药发育和减数分裂的重要结果之一，它主要由花粉壁和花粉细胞两部分组成。
花粉壁是由多层不同形态的细胞产生，可以提供一定的保护和营养作用。
而花粉细胞则是由4个单倍体的核结合而成，最终发育成熟并散发出来。
电镜下观察花药中花粉粒发育过程中，我们可以看到花粉壁的细胞内部形态十分丰富和复杂。
杂交水稻制种技术操作规程
杂交水稻制种技术操作规程
《杂交水稻制种技术操作规程》
杂交水稻是指通过人工杂交和选择培育出的高产、抗逆、优质的水稻品种，其种子生产是杂交水稻生产过程中的关键环节。
为了保证杂交水稻的种子质量和产量，制种技术操作规程显得尤为重要。
以下是关于杂交水稻制种技术操作规程的具体内容。
一、适时筛选亲本
在杂交水稻种子的生产中，首先需要适时筛选优质的亲本以进行杂交。
亲本应当具有较高的产量、抗病性和抗逆性，且杂交组合要保持较高的杂种优势。
适时对亲本进行筛选，可以提高杂交水稻的产量和质量。
二、严格执行杂交操作
在进行杂交操作时，需要做到区分配种、花粉采集、杂交授粉以及标记亲本，严格按照操作规程进行。
特别是在杂交授粉的过程中，需要确保花粉粘附到雌穗上的正确位置，以提高杂交成功率。
三、科学管理种植和病虫害防治
在杂交水稻的种植过程中，需要科学施肥、灌溉和农药防治，确保水稻生长环境的良好；同时也需要对病虫害进行科学防治，避免对种子产量和质量的影响。
四、科学收获和处理
在水稻成熟后，需要根据成熟程度科学地进行收获和处理。
收
获时应注意避免损伤种子，处理时要进行糙米层的清除和饭芽的剔除，确保种子的质量。
五、严格的质量控制
在实施杂交水稻制种技术操作规程时，需要进行严格的质量控制，对种子的收获、处理和贮存进行监管，确保种子的生长力和纯度。
通过遵循以上的技术操作规程，可以保证杂交水稻的种子质量和产量，为推广优质杂交水稻品种提供了坚实的保障。
土壤制样操作规程
土壤制样操作规程土壤制样操作规程一、前期准备工作1. 根据采样区域和采样目的，选择适当的采样工具和器材。
2. 检查采样工具和器材的状态，确保其完好无损。
3. 获取相关采样许可，并了解采样区域的环境、土壤特性和相关安全事项。
二、现场操作1. 在采样点附近设置采样区域，并清理杂物。
2. 根据采样目的和土壤类型，确定采样深度和间隔。
3. 使用锄头或钻孔机等工具，清理表面杂质，并确保采样点的表面平整。
4. 在采样点处采用插棍插入土壤中，用刻度尺测量每个采样深度。
5. 使用干净的容器或塑料袋，将每个采样层次的土壤样品收集起来。
三、标识和记录1. 用牢固的标签或永久性墨水笔，在容器上标明采样地点、采样日期和土壤深度。
2. 记录采样点的地理坐标和采样深度的准确信息。
3. 注意区分不同的土壤层次，并将其记录在标签或采样记录表上。
四、样品处理1. 将土壤样品倒入干净的塑料袋或容器中。
2. 对于潮湿或含水率较高的土壤样品，应将其在通风处晾干或进行进一步处理。
3. 根据需要，在采样前或采样后，进行土壤样品的筛分、分割、混合等处理。
五、保存和储存1. 在采样结束后，尽快将土壤样品送至实验室进行分析。
2. 如有需要，可以选择冷藏或冷冻样品，以确保其质量和持久保存。
3. 注明样品的保存方法和期限，以便后续分析和研究。
六、清理和安全1. 在采样操作结束后，将采样工具和器材清洗干净，消毒或消毒处理。
2. 清理现场，确保采样区域不留下任何样品或垃圾。
3. 注意个人安全和卫生，穿戴适当的防护设备，如手套、口罩等。
七、数据处理和分析1. 将采集的样品和相关数据整理和记录，并进行必要的检验和品质控制。
2. 使用适当的统计方法和软件，对采样数据进行处理和分析。
3. 针对采样目的和研究要求，编制分析报告和研究结果。
八、注意事项1. 严格遵守土壤采样的规范和标准。
2. 在采样过程中，避免与污染源接触，以避免交叉污染。
3. 随时注意个人安全和环境保护，并遵守相关的法律法规。
籼稻花药培养诱导条件优化
籼稻花药培养诱导条件优化李三和; 闸雯俊; 徐华山; 刘凯; 周雷; 游艾青【期刊名称】《《湖北农业科学》》【年(卷),期】2019(058)023【总页数】6页(P218-223)【关键词】籼稻; 花药培养; 诱导效率; 交互作用【作者】李三和; 闸雯俊; 徐华山; 刘凯; 周雷; 游艾青【作者单位】湖北省农业科学院粮食作物研究所/粮食作物种质创新与遗传改良湖北省重点实验室武汉 430064; 主要粮食作物产业化湖北省协同创新中心(长江大学) 湖北荆州 434025【正文语种】中文【中图分类】S511.2+1自1968年日本Niizeki和Oono将花药培养技术应用于水稻第一次获得水稻花药培养单倍体植株以来，中国也于1975年利用花药培养育种技术第一次育成了粳稻品种单丰1号，此后花培技术在中国常规水稻育种中开始应用。
由于花药培养诱导产生的单倍体通过染色体加倍可以在当代获得稳定的纯合二倍体，同时表现出双亲性状的各种重组类型，所以将花药培养与常规育种技术相结合，可以快速纯合有益基因，提高选择效率，缩短育种周期［1-5］，或者快速得到较大的DH群体或稳定的水稻材料用于开展水稻相关基础研究。
虽然水稻花培技术已经有几十年的历史，但受制于基因型和其他多方面因素的影响，该技术在粳稻上的应用已经相对比较成熟，但籼稻的花培效率一直较低，严重影响籼稻花培在育种和相关研究中的应用。
关于如何提高花药培养的效率，国内外也有很多的文献报道，在基本培养基成分、植物生长调节剂种类和配比、低温预处理及相关过程性因素等对培养效率的影响方面作了大量的研究［6-16］，部分培养效率有所提高，但总的来说，效果都不是很稳定。
这些文献报道的试验条件探讨基本都是针对单个或多个因素的独立研究［4，12-24］，没有考虑因素间的交互作用，因而导致改变基因型时培养效果有非常大的变化。
本研究将通过正交试验法，分析低温预处理温度、预处理时间、噻重氮苯基脲（Thidiazuron，TDZ）浓度及热激温度4个因素对花药培养诱导效率的影响，探讨籼稻花药培养诱导的最佳条件，提高花培诱导效率，为水稻育种提供更好的技术支撑。
杂交水稻制种流程和原理
杂交水稻制种流程和原理下载温馨提示：该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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花药培养技术在水稻育种上的应用
案例三
总结词
通过花药培养技术，成功改良了水稻的品质特性，提高了稻米的营养价值和口感品质， 满足了消费者对高品质稻米的需求。
详细描述
在实践中，科学家利用花药培养技术，从水稻花药中诱导出单倍体植株，通过遗传转化 和基因编辑等技术手段，成功改良了水稻的品质特性。这些改良品种的稻米在营养成分 、口感、气味等方面表现出更加优良的品质，满足了消费者对高品质稻米的需求。同时
，这些品种的推广和应用，也有效提高了水稻生产的附加值和市场竞争力。
04
花药培养技术在水稻育种中的 前景与展望
未来发展方向与趋势
高效花药培养体系的建立
通过优化培养基组成、激素配比等条件，提 高花药诱导率和小孢子发育成功率，缩短育 种周期。
基因编辑技术的应用
利用基因编辑技术对花药培养获得的水稻材料进行 基因改造，提高抗逆性、产量和品质等性状。
发展阶段
20世纪70年代，花药培养技术在多个 作物上获得成功，并应用于育种实践 。
花药培养技术的优势与局限性
优势
能够快速获得单倍体材料，缩短育种周期；可结合基因工程 技术进行分子标记和基因定位；可提高育种效率和品质改良 。
局限性
技术难度较大，需要较高的实验技能和经验；诱导产生的单 倍体植株染色体数目不整齐，需要加倍后筛选纯合体；受基 因型限制，某些品种可能不适合采用花药培养技术。
特点
具有高效、快速、稳定等优点， 能够快速获得单倍体材料，缩短 育种周期，提高育种效率。
花药培养技术的发展历程
起始阶段
成熟阶段
20世纪50年代，科学家开始探索花药 培养技术，成功诱导花粉形成单倍体 。
21世纪初，随着分子生物学和基因工 程技术的发展，花药培养技术更加成 熟，广泛应用于作物育种领域。
花药培养和花粉培养
梯度离心前 （小孢子形态、活力不一致）
30%蔗糖梯度离心后 （获得均一的小孢子群体）
(二)花粉培养方式
1、平板培养 花粉置琼脂固化培养基上培养。 2、液体培养 花粉悬浮在液体培养基中培养，需震荡，以利通气。 3、双层培养 花粉置固体-液体双层培养基上培养。培养基制作方法： 先铺一层琼脂固体培养基，凝固后，在表面加入少量液体培养基。 4、看护培养 利用花药或花药愈伤组织释放出的活性物质促进花粉 小孢子发育。 5、微室培养 利用小的盖玻片和凹穴载玻片形成微室进行花粉培养 6、条件培养基培养 利用培养过花药的液体培养基或含失活花药提 取物的培养基上培养。花药条件培养基、子房条件培养等。
双单倍体（DH）群体是永久性群体，能有效
例如：水稻、小麦、大麦等禾本科植物，主茎穗比分蘖穗花药愈伤组织的诱导率明显地提高，同步化程度高。
左手持穗，右地手用用镊子于取遗出花传药，图无谱菌培的养皿构中建
1、影响花药诱导频率的因素
5、用于遗传转化 能直接表达外源基因，不受显隐性影响
花药培养简史
1964年：印度学者古哈(Guha)和马斯瓦瑞 （Maheswari ） 将南洋金花花药培养发育成胚 1967年：包金(Bourgin)和尼奇(Nitsch)花药培养获得烟草植 株 1973年：我国首次报道了小麦花药培养获得再生植株 目前：许多农作物及经济植物通过花粉培养都能诱导成植 株
〔优选〕花药培养和花粉培养
花的结构
处于不同发育时期的烟草小孢子
四分体: 醋酸洋红染色
四分体: Alexander’s 染 色
单核期
双核期
成熟花粉粒
一、概 述
花药是花的雄性器官，花药培养属器官培养； 花粉是单倍体细胞，花粉培养与单细胞培养相似 花药和花粉都可以在培养过程中诱导单倍体细胞系和单倍 体植株。 单倍体植株经过染色体加倍就成为纯合二倍体植株，这样 可缩短育种周期，获得纯系。花培已成为植物育种的一种 重要手段。
农作物种子检验能力验证样品制备规范
附件5：农作物种子检验能力验证样品制备规范为贯彻实施《农作物种子质量检验机构能力验证办法》，保证能力验证样品可靠均匀，参照《国际种子检验协会能力验证样品制备规范》的有关要求，制定本规范。
本规范附录A和附录B，分别对大粒和中粒种子混合和分取步骤给出了图示，可供参考。
本规范自2009年1月1日起施行。
1 范围本规范规定了农作物种子检验能力验证样品制备的程序及其质量控制要求。
本规范适用于能力验证样品的制备和管理。
2 制备材料选择依据能力验证计划，应当选择符合《农作物种子检验能力验证技术规范》要求的、作物种类适宜的种子批作为验证样品的制备材料。
对于同一验证项目不同验证样品，其批次材料的质量水平应当有所差异。
制备材料一般直接采用商品种子，不需要事先进行处理。
对于种子事先需经消毒处理的，应当在检验指导书上注明；对于种子事先需经水分调节的，应当保证调节后的批次水分平衡均匀。
注：种子水分调节可以通过烘干、吸湿方法。
例如：样品A不需经过水分调节，样品B可以在30℃烘箱中放置6周调低水分，样品C可以在20℃、RH95%下放置7天调高水分。
烘干或者吸湿的温度和时间可根据作物种类、原始水分等因素进行确定。
3 批次重量确定制备验证样品所需的每一批次种子重量，可以按照下列公式计算：批次种子重量＝样品重量×样品数目×缓冲系数（F）样品重量依据《农作物种子检验规程》（GB/T 3543）规定的送验样品最低重量要求进行确定。
验证项目只安排发芽率的，需取900粒种子的重量；验证项目只安排水分测定的，可以取《农作物种子检验规程》规定送验样品最低重量的一半。
样品数目主要由参加能力验证活动的检验机构数目所决定，适当考虑样品异质性测定、备用样品更换所需的数目。
缓冲系数（F）是在考虑种子大小、验证项目等因素基础上依据经验进行确定。
注：考虑F的目的是增加样品制备成功的保险系数。
下列依据经验确定的F值可供参考：只进行发芽率验证的，F可为1.05；中粒种子（千粒重介于10g和100g之间）进行净度和发芽率验证的，F可为1.25；小粒种子（千粒重小于10g的）进行净度和发芽率验证的，F可为1.5。
水稻种子生产基本技术—花粉镜检技术
正常花粉的花粉粒圆形，大小正常，染色部分为2／3以上，染色深。
防止人为误差，要求同一类型材料由同一个人完成花粉镜检，并保持操 作的一致性。
四、镜检
将制片置于100倍左右显微镜下进行全视野观察后，再选3个有代表性视野计 数各类花粉的概数，凡染色花粉较多的植株，复检一次。
典败花粉的花粉粒形状不规则，粒小，不染色。
圆败花粉的花粉粒圆形，大小基 本正常，不染色。
染败花粉的 花粉粒圆形， 染色不正常 （染色Байду номын сангаас或 花粉内仅2 ／3以下染 色）或染色 的花粉形状 不正常。
花粉镜检操作方法
在不育系原种生产中常用碘-碘化钾染色，通 过显微镜观察，鉴定不育系花粉的育性。
一、仪器与药品
1、仪器 显微镜、镊子、载玻片
显微镜
镊子
载玻片
2、药品 碘化钾和碘
药品配制 取 2 g KI 溶于5~10 mL蒸馏水中，然后加入1 g I2，待全部溶解后，再加 蒸馏水定容至500 mL。贮于棕色瓶中备用。
二、取样
三系不育系选种圃取样每个初选合格单株，株行圃取样20％单株，株系圃五 点取样20株。对被选不育系单株，于始穗期取期主穗上、中、下3个未开颖 花共18个花药。
三、制片
在载玻片上滴0.2 ％的I2-KI溶液1~2 滴，将花药置于其 中。
三、制片
用镊子捣碎花药挤出花粉，捡出花粉囊残渣物，使花粉均匀分布。
水稻标本科普
水稻标本科普全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：水稻是人类主要的粮食作物之一，是世界上种植面积最广泛的作物之一。
水稻标本是研究和保护水稻遗传资源的重要途径，通过对水稻标本的收集、保存和分类，可以有效地保留和利用水稻的遗传多样性，促进水稻的遗传改良和品种创新。
水稻标本通常包括种子样本、叶片样本、花粉样本和细胞样本等。
种子样本是最常见的水稻标本，用于保存水稻的遗传信息。
叶片样本可以用于研究水稻的形态特征和生理生化特性，花粉样本可用于研究水稻的花部结构和生殖特性，细胞样本则可以用于研究水稻的遗传基因和染色体结构。
水稻标本按照其保存方式可以分为冷藏标本、干燥标本和冷冻标本等。
冷藏标本适用于长期保存，通常保存在4°C左右的低温条件下，可以保存数年甚至数十年。
干燥标本则适用于保存种子和花粉等干燥物质，可以保存在室温下数年不变质。
冷冻标本适用于保存细胞样本等易变物质，通常保存在-20°C或更低的温度下，可以长期保存不变性。
水稻标本的收集和分类工作通常由专业机构和科研人员负责，他们通过实地调查和采集，建立水稻标本库，为水稻的遗传研究提供强有力的支持。
水稻标本还可以用于水稻种质资源的评价和鉴定，加速水稻品种的选育和推广。
水稻标本科普工作的开展，不仅可以促进水稻品种的遗传改良和品种创新，还可以促进水稻的生产、研究和保护工作。
希望广大科研人员和农民朋友们共同关注水稻标本科普工作，为水稻的绿色发展和保护贡献自己的力量。
【注：文章内容仅供参考，具体内容以实际情况为准。
】第二篇示例：水稻标本是指经过特殊处理和保存的水稻植物样本，通常用于科研研究、教学教材和植物分类等领域。
水稻标本是对水稻植物进行系统收集、分类、保存和展示的重要手段，具有重要的科学研究和教育意义。
下面将介绍一些关于水稻标本的科普知识。
一、水稻标本的制作过程1. 采集水稻标本：首先需要在水稻生长季节去水稻田或稻香园等地采集水稻标本。
在采集时需要注意选择健康的、完整的水稻植株，避免受损或有病虫害的植株。
水稻育种的工艺流程是什么
水稻育种的工艺流程是什么水稻育种是通过对种质资源进行筛选、选育、杂交、选择、测定表型和分子标记等手段，利用生物学、遗传学和分子生物学等学科知识，经过一系列技术处理和管理，目的是筛选出高产、优质、抗逆性强的杂交稻和自交稻品种，以适应不同气候条件和不同的用途需要。
其工艺流程可以分为以下七个步骤。
第一步：筛选品种和资源材料水稻育种的第一步是筛选品种和资源材料。
这一步的目的是选取具有较高产量、较好的品质和强的逆境耐受性等优良性状的种质资源，作为后续育种工作的材料基础。
同时，还需要依据品种的特点和使用需求，进行多角度的筛选和评估，以寻找出最符合育种目标的基础材料。
第二步：对资源材料进行评估对筛选出的资源材料进行评估是水稻育种的重要环节。
评估主要包括形态、农艺特性、耐受性、品质等方面，通过不同的测定指标，来确定资源的性状和潜在价值，为后续的育种选择、杂交和改良提供基础数据。
第三步：株系选择和纯化株系选择和纯化是水稻育种的基础环节之一。
在株系选择和纯化过程中，育种人员通过与品种测定标准相匹配的方式，选择具备优异性状和遗传优势的个体，建立高品质和高层次的纯系，为后期的育种工作打下基础。
第四步：杂交制种杂交是水稻育种的核心环节。
通过选取具备不同遗传特点的亲本，在经过杂交组合和筛选后，得到既具有杂种优势又符合生产和市场需求的新品种。
同时，育种人员还可利用基因克隆和转化等技术，控制育种个体的遗传变异，实现对水稻品质和产量的更加精细修饰。
第五步：对杂交后代进行选择对杂交后代进行选择，是确定新水稻品种中最为优异个体的重要环节。
该环节涉及到对水稻种植物的性状、耐受性、产量和品质等多种因素进行测定和评估，筛选出最优个体作为新品种的代表。
第六步：品种抗逆性测试水稻育种不仅要考虑产量、品质等基础性状，更要注重水稻对自然灾害和病害的逆境耐受性。
在该阶段，需要对新品种进行气候适应性、病虫害抗性、盐碱耐受性等一系列测试，通过评估这些因素，来确定新品种的实际生产价值。
土壤样品制备操作规程
土壤样品制备操作规程一、制样室要求制样室应设在向阳(但严防阳光直射样品)、通风、整洁、无扬尘、无易挥发化学物质的房间。
为便于晾样，面积最好不小于10平方米。
二、制样所需的工具与容器晾样用白色搪瓷盘；敲样用木棰、压样用木棒；磨样用样品研磨机、玛瑙研磨机或玛瑙研钵、白色搪瓷研钵；过筛用尼龙筛，规格为20-100目；装样用具塞磨口玻璃瓶、具塞无色聚乙烯塑料瓶或特制牛皮纸袋(装样量不低于200克)；装样用牛角勺；样品标签。
三、制样程序１、土样接交：采样人将样品送交管理人员后，样品管理人应进行样品登记，然后填写制样通知单交制样人员，制样人员按下列步骤制样。
2、湿样晾干：在晾干室将湿样放置晾样盘中，摊成2厘米厚的薄层，并间断地用木棰敲碎、翻拌、拣出碎石，砂砾及植物残体等杂质。
3、一个样品准备四个装样瓶(或样品袋)，把装样瓶洗净晾干，填好样品标签并贴好(20目二瓶，60目一瓶，100目一瓶)，标签均一式二份，瓶外贴一份，瓶内装一份。
4、样品缩分：将晾干敲碎的样品反复混合均匀，然后铺成一圆形，过圆心画十字线将圆分为四等分，取对角线二份(另二份弃去)，照此方法继续缩分，最终留500克左右制样。
5、样品粗磨：将风干样于白色搪瓷盘中用木棰、木棒再次压碎样品，全部过20目尼龙筛。
过筛后的样品全部置于有机玻璃板上混匀。
6、样品细磨：取粗磨样品100克，用磨样机或研钵磨至全部过60目尼龙筛；再取粗磨样品100克，用磨样机或研钵磨至全部过100目尼龙筛。
7、样品分装：将过20目、60目和100目样品分别装入相应的样品瓶中(各100克)，作为检测样品，剩余的约200克过20目筛样品装入另一个样品瓶中，作为自备库存样备用。
过20目筛(孔径0.9毫米)粗磨样可直接用于土壤pH、土壤代换量、土壤速测养分含量、元素有效性含量分析；过60目筛(孔径0.25毫米)样品用于农药或土壤有机质、土壤全氮等分析；过100目(孔径0.149毫米)土样，用于土壤重金属和元素全量分析。
水稻人工杂交的操作流程
水稻人工杂交的操作流程一、准备工作1.筛选亲本品种在进行水稻人工杂交前，首先要选择两个亲本品种作为父本和母本。
父本应该具有较高的抗病、耐寒、抗旱等性状，母本则应该具有较高的产量、品质等性状。
亲本的选择对杂交后代的品质和性状有着直接的影响，因此需要认真筛选。
2.准备工具和材料进行水稻人工杂交需要用到一些特殊的工具和材料，包括玻璃棒、剪刀、胶水、袋子、标签等。
在操作前要将这些工具和材料准备好，以便顺利进行杂交操作。
3.选定交配时间水稻的开花期一般在6-8月份，对于南方地区可能会稍早一些。
要在水稻开花前选择适当的交配时间进行人工杂交。
二、花药处理1.准备花药材料选取开花健壮的母本和父本植株，取下其花药放入袋子中储备。
2.花药处理先取出母本的花药，然后再在同一时间内取出父本的花药。
将母本花药拿来振荡，以去除花药中的空气，并使其变得比较干燥。
三、授粉操作1.授粉前的预处理挑选母本水稻的稻穗，将其中未开花的水稻花蕾用石蜡带住。
用手掌把水稻花苞挤扁，并用胶水均匀涂抹于挤扁好的水稻花蕾上，以防止花粉的外来污染。
2.授粉操作取出父本的花药，将其用棒杆振动，使花粉飞起，然后将振动好的花药均匀地撒在母本花蕾上。
待授粉完成后，将稻穗用纱布袋子包裹好，防止杂交后的粒子再次受到外来花粉的污染。
四、后续处理1. 标记用标签标记好这批经过杂交处理后的稻穗，以便后续的管理和观察。
2. 撤除无效果的杂交穗在杂交后的两周内，对经过杂交处理的稻穗进行观察，如果发现有无果的穗子，则及时撤除以免浪费资源。
3. 结实的水稻籽粒的收集等到水稻籽粒成熟时，用小袋子将其收集起来，并经过空调室等条件，使其自然干燥。
以上即是水稻人工杂交的操作流程，杂交成功后获得的新种质资源将具有良好的抗逆性，产量性等特点，能够为水稻育种工作提供更多的选择和可能。
水稻植株样品的采集和测产方法
水稻植株样品的采集和测产方法水稻植株样品的采集和测产方法一、植株样品的采集为研究形成100kg水稻籽粒所需吸收养分量，在成熟期需取样进行N、P、K 养分的测定。
1、取样数量选择1个有代表性的典型重复，所选重复的所有小区全部取样。
2、取样方法在所选择重复的每个小区中，避开田边，按梅花形或“S”形采样法采样。
采样区内采取10个样点的样品组成一个混合样，每样点3株，共30株。
连根拔起（注意茎、叶、穗部的完整性），用塑料纸包扎好。
带回室内后从茎基部将根剪掉，样品自然干燥后取出籽粒，然后分别在65o C下烘干8小时，分别称量籽粒重量（W1，kg）、茎叶与穗部剩余物的总重量（W2，kg），并将各处理的称重结果准确记录。
称重后将籽粒单独包装，把茎叶剪碎与穗部剩余物混合后包装，统一进行分析化验。
3、田间生物量估测在所选择的试验点的每个小区中，选择三个典型样点，每样点准确量1m2拔取整个植株（注意茎、叶、穗部的完整性，从茎基部将根剪掉），三点植株混合，自然干燥后称量其重量（W3，kg）。
取其中的少部分（约500g），准确称其重量（W4，kg），在65o C下烘干8小时，取出后称其总量（W5，kg），生物产量（W6）（kg/亩）=（W3×W5/W4）×666.7/34、形成100kg水稻籽粒所需吸收养分量的计算[（W1×F1+W2×F2）/（W1+W2）]×W6×100 形成100kg籽粒所需养分量（kg）=籽粒产量（kg/亩）（实测产量）×1000 F1：籽粒中养分含量（g/kg）；F2：茎叶与穗部剩余物的养分含量（g/kg）二、测产方法测产要在所有试验田的所有小区中进行。
1、理论产量的测定每亩有效穗数×每穗粒数×千粒重（g）理论产量（kg/亩）=1000×1000每亩有效穗数通过5个点、每个点0.25m2的有效穗数的平均值换算，每穗粒数通过小区内典型50穗平均，千粒重可从这50穗籽粒中测定。
一种水稻花药长度的取样,保存及测量方法
一种水稻花药长度的取样,保存及测量方法水稻花药长度是衡量水稻雄性生殖器官之一的重要指标，对于研究水稻花粉发育和生殖特性具有重要意义。
下面是关于水稻花药长度取样、保存和测量的详细描述：1. 取样时选择处于花药发育中期的水稻植株，以保证样本的可代表性。
2. 使用剪刀或手动剪除花药，确保取样过程中不会损伤花药。
3. 取样后，立即将花药放入含有50%乙醇的离心管中，用乙醇进行固定，以避免花药的变形或干燥。
4. 将固定后的花药转移到含有甘油的离心管中，浸泡一段时间，以保证花药的柔软和可测量性。
5. 取出花药时用吸水纸轻轻抹去表面的多余甘油，以减少影响测量结果的误差。
6. 准备一台精密测量仪器，如显微镜或规定尺寸的显微目镜。
7. 将花药放置在显微镜或显微目镜下，通过调整焦距和放大倍数，确保花药清晰可见。
8. 在显微镜下，使用扫描电子显微镜或其他高分辨率设备可以更准确地测量花药的长度。
9. 通过使用适当的软件或图像处理工具，在图像上标记花药的两个端点，然后测量两个端点之间的距离。
10. 通过重复测量多个花药，以获取准确的平均值，以确保测量结果的可靠性。
11. 将花药的长度数据记录在记录表中，包括每个花药的编号和测量值。
12. 对于同一植株的不同花药，进行比较和统计分析，以了解水稻花药的变异性和遗传背景。
13. 在数据处理过程中，可以使用统计软件进行数据分析和绘制相关图表。
14. 对于较大规模的研究，可能需要使用自动测量设备（平台系统）进行花药长度测量。
15. 在测量前后，应定期对测量设备进行校准，以确保测量值的准确性和可重复性。
16. 保存已测量的花药样品时，应将其转移到干燥的离心管中，并尽量防止其与湿度或阳光直接接触。
17. 在保存期间，可使用防水标签标记每个花药样本的信息，以便后期数据的整理和检索。
18. 花药样品可以冷冻保存，以避免药物的降解和样品的污染。
19. 在使用前，应将冷冻的样品缓慢解冻，并将其恢复到室温下。
粮油作物植物样品田间采集及制备技术规范(第一部分)
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
LY/T 1210-1999 森林土壤样品的采集及制备
LY/T 1210-1999 森林作物（包括森林枯枝落叶层）样品的采集及制备
NY/T 398-2000 农、畜、水产品污染监测技术规范
12
12.1
工具类：不锈钢剪刀、不锈钢切刀、冰壶以及适合特殊采样要求的工具。
器材类：GPS、照相机、卷尺、样品箱塑料袋、布袋或透气网袋等。
文具类：样品标签、采样记录表、现场调查表、铅笔、资料夹等。
12.4
12.4.1
12.4.2
12.4.3
表1主要粮、油作物的采集时间和采样部位
作物种类
采样时间
采样部位
采样株数
备注
茎叶及有关部分
果实或块茎、块根
水稻
完熟期
茎叶
带壳籽粒
20株以上
风干后样品量不得少于500克
玉米
完熟期
茎叶和玉米轴、玉米须、玉米苞叶
玉米粒
5株
小麦
完熟期
茎叶和脱粒后的颖壳
麦粒
20株以上
13.1.2
(a)晾干：用白色搪瓷盘或木盘。
(b)脱粒、去壳、切碎：用小型脱粒机、小型脱壳机、不锈钢刀剪、木滚、硬质木搓板、无色聚乙烯薄膜等。
(c)磨样：用玛瑙球磨机、玛瑙研钵、白色瓷研钵、石磨、不锈钢磨、旋风磨。
(d)过筛：用尼龙筛，规格为20～60目。
(e)分装用具塞磨口玻璃瓶、具色无色聚乙烯瓶、具色玻璃瓶、无色聚乙烯塑料袋或特制牛皮纸袋，规格视样量而定。
水稻CHIP实验方法
水稻CHIP实验方法1.收集约2g植物材料，放入50ml离心管(可以在管口塞入尼龙布防止材料在抽真空时浮起)；2.加入37ml Cross Linking Buffer(含1%甲醛)，室温下抽真空10min；3.加入2.5ml 2M Glycine使终浓度至0.125M，中止反应，继续抽真空5min；4.超纯水清洗3遍，用多层滤纸尽量吸干材料表面水分；5.液氮研磨样品(样品可保存在-80℃，或进行后续实验)；6.取干净50ml离心管，向研磨好的样品中加入25ml预冷的Nuclei IsolationBuffer，短暂涡旋后冰浴10min；7.用双层Micracloth过滤溶液至新的50ml离心管(保持冰浴)；8.4℃4400rpm离心20min，弃上清，沉淀用1ml预冷的Nuclei Lysis Buffer重悬(用移液枪反复吸打，尽量避免产生气泡)；9.将样品等分入10个新离心管(500µl)，每管100µl，超声破碎(破碎条件需要根据仪器自行调整)，将DNA打断为200-1000bp的片段；10.4℃13000rpm离心10min沉淀碎片；11.取100µl解交联进行琼脂糖凝胶电泳检测(附录)，打断的染色质可以-80℃保存，最多3个月，或进行后续实验；12.在2ml离心管中加入200µl样品，加入1.8ml ChIP Dilution Buffer(含proteaseinhibitor)稀释10倍，即加入900µl，阴性对照同上，另取80µl作为input(稀释倍数可以根据实际条件进行调整，最终定容为2 ml即可)；13.在2ml样品中加入75µl Protein A Agarose/Salmon Sperm DNA，于4℃振荡30min，4℃静置，1000*g低速离心使其完全沉淀，小心转移上清液至一新管中；14.在预处理过的上清液中加入一抗，4℃振荡6h(或过夜)；15.加入60µl Protein A Agarose/Salmon Sperm DNA，4℃振荡1h，收集抗体/组蛋白复合物；16.沉淀琼脂糖珠(1000*g，1min)，小心去除上清液(包含未交联的染色质)；17.轮流使用以下试剂清洗Protein A Agarose/Salmon Sperm DNA，每个过程之间沉淀琼脂糖珠(1000*g,1min)，弃废液；A.Low Salt Immune Complex Wash BufferOne wash(at 4℃)-1mlB.High Salt Immune Complex Wash BufferOne wash(at 4℃)-1mlC.LiCl Immune Complex Wash BufferOne wash(at 4℃)-1mlD.TE BufferTwe wash(at 4℃)-1ml each18.去除TE Wash Buffer，加入250µl新鲜的Elution Buffer(现配现用)重悬琼脂糖珠，混合于室温下振荡孵育15min，每次取上清液，并重新加入Elution Buffer，直到洗出液达到500µl，步骤12中的阴性对照在此步骤中相同处理；NaHCO30.1mol/L0.0084g0.042SDS1%100µl500µl19.加入20µl 5M NaCl于65℃加热4h解交联，再加入10µl 1M Tris-HCl(pH 6.5)和2µl 10mg/ml Proteinase K，45℃孵育1h；20.使用三氯甲烷：异戊醇(24:1)抽提收集的DNA，酒精沉淀，70%酒精洗涤并晾干，继续后续试验。
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水稻花药超薄制样标准流程
试剂准备
1.0.2M NaH2PO4: NaH2PO4·2H2O 31.2g/L
2.0.2M Na2HPO4: Na2HPO4·12H2O 71.6g/L
3.pH 7.2的0.2M PB 250ml=0.2M NaH2PO4 70ml+0.2M Na2HPO4 180ml
4.pH 7.2的0.1M PB 500ml= pH 7.2的0.2M PB 250ml +ddH2O 250ml
5. 2.5%戊二醛固定液1L=0.1M PB 500ml+25%戊二醛100ml+ ddH2O 400ml
（配制后的固定液pH应为7.3-7.4）
6.0.8%锇酸=10ml 4%锇酸+15ml ddH2O+25ml 0.2M PB
7.812树脂
实验步骤
一、取材
取尽可能快速（田中采样，材料运输时保存在冰盒中）和体积尽量小（准确时期和部位，尽量去除内外稃）的样品于2.5%戊二醛固定液（制备方法见后面配方）中，用注射器充分抽真空，至材料完全沉底，将材料移至2ml EP管后，置于4度层析柜内转动过夜（可于4度冰箱放置最多2周）。
二、制样流程
注意：以下吸液全部采用一次性滴管，禁止使用移液器！！准备好专门处理锇酸污染物品的废弃桶，并提前在废弃桶内倒入适量的玉米油。
第一天
1.漂洗。
于冰上尽可能的快速和完全吸去前固定液（戊二醛固定液），加2
ml 0.1M PB缓冲液，加好后置于4度层析柜中摇床振荡1h。
2.将EP管置于室温下，吸去前溶液，加2ml 0.1M PB缓冲液，于摇床振荡
1.5h。
3.后固定（锇酸固定）。
换适量（约3滴）0.8%锇酸（已经由老师配好，须
严格操作，具体见注意事项）没过材料，置于摇床轻轻震荡，常温避光过夜（晚5:30至次日早8:30）。
由于锇酸易挥发，此步骤需用封口膜紧紧封住试管口，并取一塑料泡沫盒覆盖EP管架避光。
注意事项：锇酸有剧毒，放置于专用冰箱内，必须在通风橱内才可开盖，取一次性滴管，小心吸取锇酸溶液后加在试管中，千万不要滴到试管外壁或通风橱内，且接触过锇酸的手套和吸管不可再触碰任何地方，直接扔在锇酸专用废弃桶内，待实验结束后统一处理，具体见后面“锇酸废液处理方法”。
（清理方法：用玉米油充分涂抹被污染的区域，涂抹好后在表面覆盖一层保鲜膜，该状态保持一个月）。
第二天
注意：经锇酸固定后的材料很脆，请小心操作！！
4.漂洗。
用吸管小心并尽量完全吸去锇酸溶液，扔入锇酸专用废液桶内，常
温下加2ml 0.1M PB 没过材料进行漂洗，共漂洗3次，每次置于摇床振荡15min。
最后一次漂洗时更换新的试管（为了置换掉被锇酸污染的试管）。
注意事项：锇酸废液与接触过锇酸的手套和EP管必须扔在锇酸专用废弃桶内（第一天和第二天所用的物品和废液全部扔在锇酸专用废液桶内，第三天及以后的废液扔在普通废液瓶内）。
5.于摇床常温梯度脱水，各梯度皆为2ml量。
20%乙醇30min，40%乙醇
30min，60%乙醇30min，加70%乙醇，换新的试管（因为后面要放入4度冰箱，为了充分排除可能的锇酸污染），于4度冰箱过夜或保存材料（可保存2-3周）。
第三天
6.换2ml新鲜70%乙醇30min，90%乙醇30min，100%乙醇3次，每次30min。
常温摇床振荡。
提前配置好所需比例的【无水乙醇/环氧丙烷】【环氧丙烷/树脂】溶液
7.换1ml【无水乙醇：环氧丙烷（2:1）】溶液没过材料，摇床振荡10min。
注意事项：环氧丙烷有一定毒性且极易挥发，因此在配制溶液时需要在通风橱内快速操作并拧紧试剂瓶盖，在步骤6-9中加液时也需要快速添加并盖紧试管盖。
8.换1ml【无水乙醇：环氧丙烷（1:1）】溶液没过材料，摇床振荡10min。
9.换1ml【无水乙醇：环氧丙烷（1:2）】溶液没过材料，摇床振荡10min。
10.换500ul纯环氧丙烷没过材料，摇床振荡10min，共重复3次。
11.在最后一次的500ul纯环氧丙烷追加2滴树脂，盖好盖子摇床低速振荡2h。
12.EP管中追加3滴树脂，盖好盖子摇床低速振荡2h。
13.EP管中追加5滴树脂，盖好盖子摇床低速振荡2h。
14.吸去部分混合液使其剩余500ul，加入500ul纯树脂，盖好盖子摇床低速振
荡过夜。
注意事项：未聚合的树脂有一定毒性，避免直接接触皮肤。
第四天
15.开盖1h挥发掉EP管中的环氧丙烷。
16.换500ul纯树脂没过材料，常温低速振荡4h。
17.换500ul纯树脂没过材料，常温低速振荡4h。
18.换500ul纯树脂没过材料，常温低速振荡过夜。
第五天
19.将渗透好的材料在模具中进行包埋，置于37℃烘箱5h-12h（除树脂气泡，
此时可随时调整样品位置），45℃烘箱2h，65℃烘箱48h。
注意事项：包埋时尽量保证样品处于包埋孔两端的中间位置，垂直于两端，并避免出现气泡。