高效液相色谱法测定烟草中烟碱含量
烟碱含量测定方法
烟碱含量测定方法烟碱（Nicotine）是烟草中的一种主要成分，也是烟草制品中的一种重要物质。
烟碱的浓度与烟草制品的烟碱含量直接相关，因此，准确测定烟碱含量对于烟草行业具有重要意义。
本文将介绍几种常用的烟碱含量测定方法。
一、气相色谱法气相色谱法是一种常用的烟碱含量测定方法。
首先，将烟草样品加入适量的溶剂中，进行提取。
然后，将提取液注入气相色谱仪中进行分析。
在气相色谱仪中，烟碱会与气相载气相互作用，通过气相色谱柱进行分离，并通过检测器进行定量分析。
最后，根据峰面积或峰高与标准曲线的关系，计算出烟草样品中烟碱的含量。
二、高效液相色谱法高效液相色谱法也是一种常用的烟碱含量测定方法。
与气相色谱法类似，首先将烟草样品加入适量的溶剂中进行提取。
然后，将提取液注入高效液相色谱仪中进行分析。
在高效液相色谱仪中，烟碱会与固定相相互作用，在流动相的作用下进行分离，并通过检测器进行定量分析。
最后，根据峰面积或峰高与标准曲线的关系，计算出烟草样品中烟碱的含量。
三、紫外分光光度法紫外分光光度法是一种简单快速的烟碱含量测定方法。
首先，将烟草样品制备成溶液，并将其置于紫外可见光谱仪中进行测定。
烟碱在紫外光波段有特定的吸收峰，通过测量吸光度，可以计算出烟草样品中烟碱的含量。
需要注意的是，由于烟草样品中可能存在其他物质的干扰，因此在测定前需要进行样品预处理，以消除干扰。
四、荧光光谱法荧光光谱法是一种高灵敏度的烟碱含量测定方法。
首先，将烟草样品制备成溶液，并将其置于荧光光谱仪中进行测定。
烟碱在激发光波长下会发射特定的荧光，通过测量荧光强度，可以计算出烟草样品中烟碱的含量。
与紫外分光光度法类似，荧光光谱法也需要进行样品预处理以消除干扰。
烟碱含量测定方法有气相色谱法、高效液相色谱法、紫外分光光度法和荧光光谱法等多种。
不同的方法适用于不同的实际情况，选择适合的方法可以提高测定结果的准确性和可靠性。
烟草行业可以根据自身需求选择合适的测定方法，确保产品质量的控制和监测。
高效液相色谱法测定烟草中烟碱含量
生物碱是植物次生代谢产生的特殊含氮有机 制品的感官评吸质量、烟气特征和安全性[1-4]．前人
化合物．烟草中的生物碱主要有烟碱、降烟碱、新 已对烟叶烟碱和降烟碱积累的影响参数及这些参
1.4 统计分析方法
采用 SPSS10.0 统计软件包进行统计特征分析、方 差分析、多重比较和相关性分析[19]．总生物碱含量为 烟碱、降烟碱、假木贼碱、新烟草碱的含量和；总微 碱含量为降烟碱、假木贼碱、新烟草碱的含量和；烟 碱转化率=降烟碱含量/(烟碱含量+降烟碱含量) [2-4]．利 用 DPS6.5 统计软件包进行趋势面分析[20]．
GAO Zhi-qiang1，DENG Xiao-hua2*，ZHOU Qing-ming1，ZHOU Ji-heng1，ZENG Zhong-ping2 (1. Research Center of Tobacco Engineering and Technology，HNAU， Changsha 410128，China；2. Hunan Yongzhou Vocational and Technical College，Yongzhou，Hunan 425000，China)
根据样本微量生物碱含量的大致范围将其分 为 4 组，统计各组样本的百分率(图 1 至图 3)，不同 等级烤烟的微量生物碱含量分布差异较大．对降烟 碱来说，B2F 大多数样本分布在＞0.04%组；X2F 主要分布在＜0.02%组；C3F 在＜0.02%组分布较 少，而在其他 3 个组分布较多．对假木贼碱，B2F 大多数样本分布在＞0.014%组；X2F 主要分布在＜ 0.01%组；C3F 在＜0.01%组分布较少，而在其他 3 个组分布较多．对新烟草碱，B2F 大多数样本分布 在 0.09%～0.12%组；X2F 主要分布在＜0.06%组； 而 C3F 主要分布在 0.06%～0.09%组．
高效液相色谱法测定卷烟烟气总粒相物中的烟碱
高效液相色谱法测定卷烟烟气总粒相物中的烟碱
谢笑天;郑萍;朱伟明;赵革玲
【期刊名称】《分析化学》
【年(卷),期】2000(028)009
【摘要】采用反相高效液相色谱内标法测定卷烟烟气总粒相物中的烟碱含量,内标物为对氨基苯磺酸,方法的平均回收率为99.7%～100.1%,精密度好,操作简便、快速,可作为检测烟碱的一种可靠方法.
【总页数】3页(P1085-1087)
【作者】谢笑天;郑萍;朱伟明;赵革玲
【作者单位】云南师范大学化学系,昆明,650092;云南师范大学化学系,昆
明,650092;云南师范大学化学系,昆明,650092;云南省烟草质量监督检验站,昆明,650106
【正文语种】中文
【中图分类】O65
【相关文献】
1.光度法测定卷烟烟气总粒相物中烟碱有关问题的讨论 [J], 海晓民
2.用HPLC法测定卷烟总粒相物及烟碱盐中的烟碱含量 [J], 黄注传;朱子高
3.气相色谱法测定卷烟烟气总粒相物中的烟碱 [J], 黄晖;黄海东
4.卷烟烟气总粒相物中烟碱含量的测定方法研究 [J], 马明;穆怀静
5.气相色谱-质谱法测定卷烟烟气总粒相物中14种芳香胺 [J], 石杰;程玉山;刘婷;刘惠民;夏巧玲;徐鹏
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱法测定烟草中烟碱含量
我国是烟草大国,每年烟草产量在500万t 以上。
烟草中含有多种生物碱,其中烟碱又名尼古丁(nicotine ,NTC ),含量最高,约占烟草生物碱总量的95%。
我国新的国家标准对卷烟及其烟气提出了较为严格的要求,增加了烟气中烟碱含量的考核项目,并要求使用气相色谱法测定总粒相物中的烟碱。
目前,烟草行业测定烟草中烟碱含量的方法主要有硅钨酸重量法[1]、流动分析法[2]、紫外分光光度法[3-4]及气相色谱法[5-6]。
其中,用紫外分光光度法测定烟碱的前处理较为费时,不利于快速分析。
硅钨酸重量法可得到较为准确的结果,但缺点一是分析时间过长(一次分析周期为24~48h );二是不能区分烟碱和降烟碱,测定结果是烟碱类植物碱的总和;三是当溶液中有铰盐等无机盐存在时,不易形成沉淀,干扰测定。
气相色谱法具有快速、准确、灵敏的特点,但其易受到样品中物质沸点的限制。
高效液相色谱法已广泛应用于各个行业,不仅试剂使用量少,灵敏度高,还可以批量检测,因而开发液相色谱法测定烟草中烟碱含量具有重要意义。
1材料与方法1.1试验材料烟草样品由江苏中烟工业有限责任公司淮阴卷烟厂提供。
甲醇、0.01mol/L 氢氧化钠溶液、0~350mg/L 的五级烟碱工作溶液、磷酸盐缓冲溶液;试验用水均为超纯水。
主要仪器:Agilent1200高效液相色谱仪(美国Agilent 公司);电子天平,精确至0.1mg (瑞士梅特勒-托利多公司);振荡器。
1.2试验方法1.2.1试验准备与色谱条件。
称取烟末0.20g ,置于50mLPET 小瓶中,用定量加液器准确加入50mL 0.01mol/L 氢氧化钠溶液,在振荡器上以200r/min 的速度振荡30min ,静置后取清液过0.45μm 无机滤膜,滤液作分析备用,同时作为空白试剂对照。
色谱条件:流动相为等体积甲醇和0.02mol/L缓冲磷酸盐混合溶液,并添加硫酸铵,含量为0.5%,pH 值为6.8,以使烟碱的出峰时间较合适,同时硫酸铵的加入可以消除拖尾影响,检测波长为259nm ,流速0.5mL/min ,进样量5.0μL ,柱温35℃。
超高效液相色谱法测定环境香烟烟雾中植物叶中的烟碱和可替宁
，
Ｌ ｈ Ｕ Ｓ ｅ—ｍｉ ｇ Ｌ Ｕ Ｃ ｕ １ ｏ ， ＨＡＯ Ｙｕ ｎ ， Ｉ ｈ Ｉ 一ｂ Ｚ ｎ—ｆｎ ’ ａ ｇ一
，
Ｗ ＡＮ Ｈａ —ｌ ， ＩＪｎ —ｍｉ ｇ ＭＩ ｎ Ｇ ｉ ｉ Ｌ ｉ ｎ ， Ａ０ Ｍｉｇ—ｍｉ ｇ ｎ
（ ． ｅｈ ０ ｇ ｅｔｒ ｆ ｏ ａＴ ｂｃ０ Ｇ ｐ ｃ ．Ｌｄ ， ｕ ｉ ５ １０， ｈｎ ； １ Ｔ ｃｎｌ ｙｃ ｎｅ ｏ Ｈ ｎ ０ ａｃ（ ｍｕ ） ｏ ， ｔ． Ｙ ｘ ６ ３０ ｃ ｉａ ｏ
出可替宁和烟碱。表明植物长期暴露于环境香烟烟雾 中 ， 会对其 机体产 生危害 ； 可替宁 在植物 叶 中检 出 ， 还说明植物机体对烟碱具有代谢作用 。
关键词 ： 超高效液相色谱 ； 烟碱 ； 可替 宁； 绿萝
中 图 分 类 号 ：６ ７７ ０ ５ ． 文 献标 识 码 ： Ａ
Ｓ ｍｕ ｔ ｎ ０ ｌ ｄ ｔ Ｈｎ ｎ ｔＯ ｆ ｎ ｃ ｔ ｅ ａ ｄ ｃ ｔ ｉ ｅ ｉ ｅ ｖ ｓ０ ｌｎ ｓ ｉ ｉ ｌ ｅ ｌ ｅｅ ｉ ａ ｉ ｎ Ｏ ｉ０ ｉ ｎ ｏ ｉ ｎ ｎ ｌａ ｅ ｆｐ ａ ｔ ｎ ＥＴＳ ｂ ａ ｓ ｎ ｎ ｙ ＵＰＬ Ｃ Ｉ Ｕ Ｚ ｅ ｇ—ｃ ｎ ’ Ｊ ｈｎ Ｉ ｏ ｇ一
Ｋｅ ｙｗＯ ｄｓ： ｒ ＵＰＬＣ； ｎｃ ｔｎ ｉｏ ｉｅ；ｃ ｔｎｎｅ； Ｅｐ Ｐ ｅ ｎ ｍ ｕ ｅ ｍ ｏｙａｄＢｏｅｈ ｏ ｇ ， ｕ ｎｎＮａｏ ａｔ ｓＵ ｉ ｒ ，Ｋ ｎ ｎ ５）３ ，ｈｎ ） ． ｃｏ１ ｆ ｈｍｉｒ ｎ ｉ ｃ ｎｌ ｙ Ｙ ｎａ ｉｎｈｉ ｎｖ ｓｙ ｕｍｉｇ６（ １Ｃ ｉａ ｔ ｔ ｏ Ｉ ｅ ｅｉ ｏ
反相高效液相色谱法测定烟碱的含量
反相高效液相色谱法测定烟碱的含量用反相高效液相色谱法测定烟碱含量的方法，外标法，等都洗脱，色谱柱为Kromasil C18 ( 250 mm×4.6 mm, 5 μm) 烟碱的检测条件、柱温35 ℃, 设置参数流速1.0 mL/min, 检测波长259 nm, 进样量20μL .1、仪器与试剂.仪器: 高效液相色谱Agilent 1100 Series LC sys- tem;甲醇( 色谱纯) ; 超纯去离子水; 0.2mol磷酸二氢钠、0.2mol磷酸氢二钠、三乙胺( 均为分析纯)。
2、样品和标准溶液的配制精确称取烟碱标准品10.0 mg ,置于25 mL 容量瓶中, 用甲醇溶液定容至刻度。
标准品称取两份。
精确称取烟碱待测品20.0 mg ,置于25 mL 容量瓶中, 用甲醇溶液定容至刻度。
（均需超声）。
3、流动相及配比甲醇 300Ml、（三乙胺1.0mL）磷酸缓冲液 200mL【磷酸缓冲液（取0.2 mol/L 磷酸二氢钾溶液62mL，加氢氧化钠30mL，用水稀释至250mL）】流动相配好后超声30min去气泡。
（流动相为甲醇: 0.02 mol/L- 1 磷酸缓冲溶液( 添加三乙胺, 含量为0.46 %, pH=6.5) = 60∶40,）( 1.安徽工业大学化学与化工学院, 安徽马鞍山243002; 2.复旦大学环境科学与工程系, 上海200433 文章编号: 1672- 2043(2006)增刊- 0751- 04 )4、配好的流动相超声10min。
5、用20%的甲醇冲洗柱子30min （每换一次流动相要排一次气）。
6、换配好的流动相冲洗柱子待基线平稳后开始进样。
7、分析处理峰，计算含量8、检测完换20%、60%、80%、甲醇冲洗柱子，（基线平稳后换）附注：烟碱分子由两个氮杂环构成, 其中吡啶环上的氮原子由于芳香化的结果, 碱性较弱, pKb 值为8, 而吡咯氮杂环连接一个甲基, 且没有芳香性, 在水溶液中其pKb 值约为3[ 2] . 吡咯氮与色谱柱上残余硅羟基的氢键键合、质子化烟碱与硅羟基发生交换导致了拖尾。
高效液相色谱法测定烟草中烟碱含量
高效液相色谱法测定烟草中烟碱含量摘要：建立一种高效液相色谱法测定烟草中烟碱的含量。
方法:色谱柱C18 (250mmX 4．6 mm，5．0um)，流动相为甲醇：0．02 mol／L磷酸氢二钠缓冲溶液(用磷酸调节pH 6．0)=70：30；检测波长259 nm；流速1．0 mL／min；进样量20 uL；柱温30℃。
结果:溶液浓度在27．568~165．408 mg／L时峰面积与烟碱浓度呈良好的线性关系，相关系数r为0．999 0，方法的检测限(s／n=3)为0．011 mg／L，平均回收率为97．9％，相对标准偏差(兄 )为1．1％(n=5)。
结论:该方法简便易行，结果准确，可作为烟草中烟碱含量的检测方法。
关键词：HPLC：烟草；烟碱；含量烟草中含有多种生物碱，其中烟碱(又名尼古丁Nicotine，简称NTC)含量最高，约占烟草生物碱总量的95％。
其化学名称为1一甲基一2一(2一吡啶基)吡咯烷。
烟碱含量的高低不仅关系到烟草制品的质量，而且关系到人体健康。
所以，选择快速准确测量烟碱含量的方法具有重要意义。
目前测定烟草中烟碱含量的方法很多，包括有高效液相色谱法、重量分析法[51、分光光度法I6]以及连续流动法同等。
其中重量分析方法操作繁锁、耗时。
分光光度法可测量的浓度范围小，且需要蒸馏或萃取等复杂的前处理，易受外界条件影响。
目前烟草行业采用连续流动法测定烟草中的烟碱，采用的仪器昂贵，试剂剧毒，对人体不安全。
采用高效液相色谱法对烟草中的烟碱含量进行测定，该方法既能将烟碱与共存生物碱等组份分开，又能准确快速得到分析结果，同时与连续流动法的测定结果相比，无明显差异。
1 材料与方法1．1 仪器和试剂‘仪器：LC7000高效液相色谱仪，LC7020紫外/可见检测器，色谱柱 C 18(250．0 mm×4．6 mm，5．0 m)，空气浴振荡器试剂：烟碱标准品，甲醇(色谱纯)，磷酸(分析纯)、磷酸氢二钠(分析纯)，二次蒸馏水，烟草样品1、2、3号1.2 色谱条件流动相为甲醇：0．02 mol／L磷酸氢二钠缓冲溶液(用磷酸调节pH 6．0)=70：30；检测波长259 nm；流速1．0 mL／min；进样量20uL；柱温30℃。
烟碱检查操作规程(3篇)
第1篇一、目的为确保烟碱含量的准确测定，保证产品质量，特制定本操作规程。
二、适用范围本规程适用于本公司生产过程中烟碱含量的检测。
三、仪器与设备1. 高效液相色谱仪（HPLC）2. 超纯水系统3. 精密电子天平4. 色谱柱5. 色谱工作站6. 检测器7. 注射器8. 标准溶液配制容器9. 样品处理容器四、试剂与材料1. 烟碱标准品2. 甲醇（色谱纯）3. 水为超纯水4. 磷酸5. 氢氧化钠6. 标准溶液五、操作步骤1. 样品准备- 称取约0.1g（精确至0.0001g）的烟碱样品，置于50mL具塞锥形瓶中。
- 加入10mL甲醇，超声提取30分钟。
- 静置，待甲醇层与水层分离。
- 将甲醇层转移至另一个50mL具塞锥形瓶中，用少量甲醇洗涤原锥形瓶，合并甲醇层。
- 将甲醇层在40℃水浴中蒸干，残渣用少量水溶解，转移至10mL容量瓶中，定容至刻度。
2. 标准溶液配制- 称取适量的烟碱标准品，用甲醇溶解并定容至100mL容量瓶中，配制成浓度为1000mg/L的标准储备液。
- 根据需要，用甲醇稀释标准储备液，配制成适当浓度的标准溶液。
3. 色谱条件- 流动相：甲醇-水（含0.1%磷酸）。
- 流速：1.0mL/min。
- 柱温：30℃。
- 检测波长：260nm。
4. 样品分析- 将样品溶液和标准溶液依次进样，记录色谱图。
- 根据样品溶液和标准溶液的峰面积，计算样品中烟碱的含量。
六、注意事项1. 严格操作，确保实验数据的准确性。
2. 实验过程中应佩戴防护用品，如手套、口罩等。
3. 使用的仪器设备应定期校准，确保其性能稳定。
4. 样品处理过程中，应避免样品污染。
5. 实验数据应详细记录，以便后续查询。
七、结果判定根据烟碱含量的测定结果，对照国家或行业标准，判定样品是否符合要求。
八、记录与报告实验操作过程和结果应详细记录，并形成实验报告。
九、附则本规程由质量管理部负责解释，自发布之日起实施。
第2篇一、目的为确保烟碱含量的准确测定，保障产品质量，本规程规定了烟碱检查的操作流程和注意事项。
高效液相色谱法测定烟草中烟碱含量
高效液相色谱法测定烟草中烟碱含量杨 娟 张迪清 何照范 吴谋成杨娟,吴谋成.华中农业大学食品科学系 430070 武汉市武昌狮子山;张迪清,何照范.贵州大学南区生化营养研究所 550025 贵州省贵阳市修回日期:1998-09-22 责任编辑:刘惠清 摘要 研究了用高效液相色谱法测定烟草中烟碱的方法。
该方法与UV 法相比,具有重现性好、准确、灵敏度高的特点。
测定结果的标准偏差S =±0.007,变异系数CV =1.2%,回收率为(100±3)%。
关键词 高效液相色谱法 烟草 烟碱含量烟碱的测定方法有多种[1～6],多数采用蒸馏-紫外分光光度计法测定,手续繁杂。
本文拟建立起用高效液相色谱法测定烟草中烟碱的方法。
1 仪器与试剂仪器:高效液相色谱仪(日本岛津LC -3A 型)、日本岛津C -RIB chromatopac 记录仪;试剂:烟碱标准品(美国Sigma 公司)、分析纯的甲醇、磷酸、硫酸铵。
2 实验方法与结果2.1 测定方法(1)色谱条件:色谱柱Lichrosorb RP187μm (250×4I.D.),流动相为甲醇∶0.02mol/L 磷酸缓冲液[p H6.8,含0.02mol/L (N H 4)2SO 4]=55∶45,检测波长254nm ,流速1.0ml/min ,进样量7μl ,柱温40℃。
(2)烟碱标准溶液配制:精确称取烟碱标准品约10mg ,置于100ml 容量瓶中,用流动相溶解并定容至刻度。
烟碱标准品在上述色谱条件下的色谱图见图1。
图1 烟碱标准品 (3)样品处理:准确称取在50℃下烘干的烟末0.6g ,置于100ml 容量瓶中,加入0.05mol/L 的NaOH80ml ,常温下在振荡器上振荡30min 后定容、过滤,滤液供色谱分析用。
2.2 线性关系移取上述烟碱标准溶液2.0,4.0,6.0,8.0和10.0ml ,用流动相定容至15ml ,每个实验点重复进样3次,在同一条件下进行色谱测定。
超声提取-高效液相色谱法测定烟草中烟碱含量
１ ４ 烟碱提 取率 计算公 式 ．
Ｒ一 ￣１ ０ ０
式 中 ： 为烟碱 提取 率 ； 根据 烟 碱标 准 曲线 公 Ｒ ｃ为 式计算 出 的所 测样 品 中烟 碱浓 度 ， ｍｇ・ｍ
品体 积 ， ｍＬ； 为烟 草粉末 质量 ， 。 Ｗ ｇ
； 为样 Ｖ
２ 结 果 与讨 论
、
４ｈ 。采 用 高教 液相 色谱 法 检 测 烟 碱 含 量 ， 均 加 样 回收 率 为 ９ ． ． 对 标 准 偏 差 为 １２ 。 结 果 表 明超 声提 取 一 高 平 ８８ 相
．
效液相 色谱 法制 定烟草 中烟碱含 量准确度 高、 速度快。 关键词 ： 烟草 ； 烟碱舍 量； 超声提取法 ｉ 高效液相 色谱法（ Ｌ ＨＰ Ｃ）
品， 并用 ＨＰ Ｃ法 测定 了其 中 的烟碱 含量 。 Ｌ
准 系列 。按照 上述 条 件测 定 以 上标 准 浓 度 系 列样 品 ，
标 准 品谱 图见 图 １测 定峰 面积 ， 复 ３次 ， 平均 值 。 ， 重 取 拟 合峰 面积 （ 与烟碱 浓 度 （ ｍｇ・ ｙ） Ｘ， ｍ ） 的线性 回
２ １ 提取方 法和 溶剂 的选择 ．
收 稿 日期 ：０ ６ ９ ｌ ２ ０ …０ 一 ４
作 者 简 介 ： 志兵 （ ９ １ ） 男 ， 苏 盐城 人 ． 士研 究 生 ． 究方 向 ： 洁 生 产 和 资 源 综 合 刊 用 ； 系人 ： 恒 福 ， 建 氏 Ｅｍａ 。 储 １８ 一 ， 江 硕 研 清 联 水 陈 — ｉ ｌ
归 方程 为 ： ｙ＝８ ４ ． Ｘ＋６ ６ ７ （ ＝１ ４２３ ． ２ ４ Ｒ。 ）
１０ ５
＿
１ 实验
高效液相色谱同时检测不同类型烟叶中的多种生物碱含量
高效液相色谱同时检测不同类型烟叶中的多种生物碱含量作者：林雨晟金洪石张皓楠金江华郭伟李玉娥赵铭钦刘鹏飞来源：《中国烟草科学》2021年第03期摘要：为快捷准确地测定烟叶中生物碱的含量，本研究通过优化提取条件，建立了测定烟草中烟碱、新烟草碱、假木贼碱和降烟碱的高效液相色谱检测方法。
优化后的检测步骤为：干烟叶和5%甲醇的料液比为100 mg/20 mL，在25 ℃下振荡提取30 min，色谱条件：C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相A（90%水+10%甲醇，pH 6.8，0.15%醋酸钠），流动相B（90%甲醇+10%水，pH 3.8）。
烟碱在0.1～50 μg/mL、其余3种在0.005～2 μg/mL的范围内，4种生物碱均具有较好的线性关系（R2>0.99）;烟碱检出限为0.000 65 μg/mL，平均回收率100.79%，RSD 3.11%;新烟草碱检出限0.088 4 μg/mL，平均回收率98.53%，RSD 3.75%;假木贼碱检出限0.034 8 μg/mL，平均回收率98.70%，RSD 3.63%;降烟碱检出限0.150 9 μg/mL，平均回收率101.33%，RSD 4.61%。
对4种不同类型烟叶共11个不同样品进行检测验证，检测结果可靠。
该方法前处理简单快捷，灵敏度高，重复性较好，可以满足烟草样品中4种生物碱的检测要求。
关键词：烟草;烟碱;新烟草碱;假木贼碱;降烟碱;液相色谱法Abstract： In order to quickly and accurately determine the content of alkaloids in tobacco leaves， the extraction conditions were optimized， and a method for the determination of nicotine，anatabine， anabasine and nornicotine contents in tobacco by HPLC was established. The optimized detection steps are as follows： 100 mg/20 mL solid-liquid ratio， 5% methanol was extracted by oscillation at 25 ℃ for 30 min， the chromatographic conditions were C18 column （250 mm×4.6 mm，5 μm）， mobile phase A （90% water +10% methanol， pH 6.8， 0.15% sodium acetate）， mobile phase B （90% methanol +10% water， pH 3.8）. Nicotine was in the range of 0.1-50 μg/mL and the other three alkaloids were in the range of 0.005-2 μg/mL， with the standard curves of the four alkaloids all havig good linear relationship （R2 > 0.99）. The limits of detection （LOD） of nicotine were 0.000 65 μg/mL， and the average recoveries were 100.79%， RSD3.11%; the LOD of anatabine were 0.088 4 μg/mL， and the average recoveries were 98.53%， RSD 3.75%; the LOD of anabasine were 0.034 8 μg/mL， and the average recoveries were 98.70%，RSD3.63%; the LOD of nor nicotine were 0.150 9 μg/mL， and the average recoveries were101.33%， RSD 4.61%. A total of 11 different samples of 4 different types of tobacco leaves were tested， and the results were reliable. The method is simple and fast， sensitive and repeatable， and can meet the requirements of detecting four alkaloids in tobacco samples.Keywords： tobacco; nicotine; anatabine; anabasine; nornicotine; HPLC生物碱是一类存在于植物体中的特殊的含氮有机物，是植物体随外界环境变化合成的次生代谢产物，一般具有特殊的生理活性，如抗炎、镇痛和成瘾性[1]。
超声提取-高效液相色谱法测定烟草中烟碱含量
式 中 ： 烟碱提 取率 ； Ｒ一 Ｃ 根据 烟碱 标 准 曲线 公 式 计 算 出 的 所 测 样 一 品烟 碱 的浓度 ， ｇｍＬ １ ｒ ・ ＿； ｎ Ｖ 一样品体积 ， ； ｍＬ
Ｗ 一 烟草粉 末重 量 ，。 ｇ ２ ２ 色谱 条件 ．
是甲醇一 酸盐 体 系和 纯 水一 酸盐 体 系 ， 磷 磷 前者 常
时间 ４ｈ 。确定 了高效液 相色谱法 检测烟碱含量的条件 为 Ｋ ￣ｎｓ ｌ色谱柱（ ５ ｎ ×４ ６ｌｎ， ｎ ， ｒ ａｉＣｓ ｘ ｌ ２ ０ｌ ｌ ． ｌ５ｔ ）检测 波长 ｎ ｎ ａ ２ ９ｎｌ检测温度 ３ ５ ｎ ， ５℃ ， 流动相 Ｃ Ｏ ０ ０ ｏ－ 磷酸盐缓 冲溶液 （ ｖ） ６ ／０ 流速 １ ０ｍＬ・ ｎ 。进样 Ｈｓ Ｈ／ ．２ｔ ｌ ｏ Ｌ ｖ／ 为 ０ ４ ， ． ｍｉ＿ ，
的标 准系列 。按 照上 述条 件测 定 以上标 准浓 度 系列
样 品 ， 准 品谱 图见 图 １ 测定 峰面 积 ， 复 ３次 ， 标 ， 重 取
１０ ５
清洗仪 。 ， 试剂 ： 烟碱 标 准 品 （ 国 Ｓｇ 公 司 ） 甲醇 （ 美 ｉｍａ 、 色 谱纯 ）超纯去离子水 ； 、 磷酸、 磷酸氢二钠 、 氢氧化钠 、 三乙胺（ 均为分析纯 ）烟草样 品由福建三明复烤厂 ； 提供 。
色谱 柱 为 Ｋｍｍａｉｃ８ ２０Ｉｎ ×４６ｒｌ， ｓ ｌ（５ ｌ ｌ Ｔ ｌ ． ｎ ｌ５ Ｔ ｔ ， ｔ 流动 相为 甲醇 ： ．２ｔｏ・ １ 酸盐 缓 冲溶 液 ｍ） ００ ｌＬ＿磷 ｏ （ 添加 三 乙胺 ， 量 为 ０ ４ ％，Ｈ ．） ０ ４ ， 含 ．６ ｐ ６ ５ ＝６ ：０ 检
目前烟 草 中 主要化 学 成分测 定采 用硅 钨 酸重量 法［ 、 外 分 光 光 度 法 （ Ｖ） 气 相 色 谱 法 ¨紫 Ｕ ［ 、 （ Ｃ） ］ 高 效 液 相 色 谱 法 （ Ｐ Ｃ ｔ ８， 中 以 Ｇ Ｅ、 ３ Ｈ Ｌ ） － ］其 ４ ＨＰ Ｃ法 占多 数 。烟 草 中 主要 有 效 成 分 是 烟碱 ， Ｌ 所 以研 究 烟碱 的分 析 方 法 很 多 ， 要 的 ＨＰ Ｃ流动 相 主 Ｌ
亲水作用色谱分离-高效液相色谱法测定烟草不同部位中烟碱的含量
亲水作用色谱分离-高效液相色谱法测定烟草不同部位中烟碱的含量王尉;刘赟;王覃;赵新颖;冯文宁;张经华【摘要】提出了亲水作用-高效液相色谱法测定不同烟草部位中烟碱含量的方法.采用Atlantis HILIC色谱柱(150mm×4.6mm,5μm)分离,以乙腈、10 mmol·L-1乙酸铵溶液和冰乙酸以体积比72比28比2组成的混合液为流动相,在检测波长260 nm处进行测定.烟碱的质量浓度在0.001～0.1 g·L-1范围内与峰面积呈线性关系,方法检出限(3S/N)为0.17 mg·L-1.进行3个浓度水平的加标回收试验,测得回收率在98.2％～98.9％之间,相对标准偏差(n=6)小于2.0％.从烟草的不同部位取样,按本法分析,结果表明:其烟碱含量从烟叶的上部、中部、下部至烟梗逐渐减少.【期刊名称】《理化检验-化学分册》【年(卷),期】2014(050)004【总页数】3页(P488-490)【关键词】高效液相色谱法;亲水作用;烟碱;烟草【作者】王尉;刘赟;王覃;赵新颖;冯文宁;张经华【作者单位】北京市理化分析测试中心,北京100089;北京理工大学,北京100081;北京市理化分析测试中心,北京100089;北京化工大学,北京100029;北京市理化分析测试中心,北京100089;北京理工大学,北京100081;河北中烟工业有限责任公司,石家庄050051;北京市理化分析测试中心,北京100089【正文语种】中文【中图分类】O652.63烟碱又称尼古丁（Nicotine），具有较强的水溶性，是烟草中重要的生物碱成分，是一种生理兴奋剂，具有收缩血管，促进血液循环，调节中枢神经的作用［1－2］。
烟碱还是一种低毒、高效、低残留、环境相容性好的农药添加剂，对菜蚜等害虫有较强的趋避和毒杀作用［3－4］。
因此，建立一种高效、快速、选择性强的分析方法对烟草及其相关产品的质量控制是十分必要的。
反相高效液相色谱法测定烟草中烟碱的含量_储志兵
２．１ 样品溶液的配制
胺（ＴＥＡ）， 具有重现性好， 准确， 灵敏度高的特点， 达到
烟草样品于 ８０ ℃下烘干， 放置于研钵中研磨后 了改善宽峰和减少拖尾的效果。另外， 在缓冲体系中
过 １００ 目筛备用。称取烟末 ０．３０ ｇ， 置于 ５０ ｍＬ 容量 加入三乙胺可改变缓冲液的 ｐＨ， 从而使烟碱以合适
２８０
３００
波长（ ｎｍ）
图 ３ 烟碱紫外吸收扫描图 Ｆｉｇｕｒｅ ３ ＵＶ ｓｃａｎ－ ｓｐｅｃｔｒｕｍ ｏｆ ｎｉｃｏｔｉｎｅ
０．Ｅ＋００ ０
０．２
０．４
０．６
０．８
烟碱 Ｃ 浓度／ｍｇ·ｍＬ－１
图 ５ 烟碱的标准曲线 Ｆｉｇｕｒｅ ５ ＨＰＬＣ Ｓｔａｎｄａｒｄ ｃｕｒｖｅ ｏｆ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ａｒｅａｓ ａｇａｉｎｓｔ ｉｎｊｅｃｔｅｄ
ｍａｓｉｌ Ｃ１８ 色 谱 柱 （ ２５０ ｍｍ ×４．６ ｍｍ， ５μｍ） ； Ｔｈｅｒｍｏ ＵＶ５００ 型紫外分光光度计。
与杂质峰分离较好， 拖尾现象并不严重， 在 ｐＨ＝６．５ 时， 杂质峰与烟碱峰基线完全分离， 峰型尖锐而对称，
试剂： 烟碱标准品（ 美国 Ｓｉｇｍａ 公司） 、甲醇（ 色谱 对称因子达到 ０．８０， 保留时间及分析时间适中， 回收
Ｄｅｔｅｒ ｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｎｉｃｏｔｉｎｅ Ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ Ｔｏｂａｃｃｏ ｂｙ ａ Ｒｅｖｅｒ ｓｅｄ Ｐｈａｓｅ－ Ｈｉｇｈ Ｐｅｒ ｆｏｒ ｍａｎｃｅ Ｌｉｑｕｉｄ Ｃｈｒ ｏｍａｔｏｇｒ ａ－ ｐｈｙ （ＲＰ－ ＨＰＬＣ）
ＣＨＵ Ｚｈｉ－ｂｉｎｇ１， ＺＨＯＵ Ｘｉｎ－ｇｕａｎｇ２， ＳＨＵＩ Ｈｅｎｇ－ｆｕ１， ＣＨＥＮ Ｊｉａｎ－ｍｉｎ２ （１． Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ＆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ， Ａｎｈｕｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， Ｍａ’ａｎｓｈａｎ ２４３００２， Ｃｈｉｎａ； ２． Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎ－ ｔａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ ＆ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ， Ｆｕｄａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｓｈａｎｇｈａｉ ２００４３３， Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒ ａｃｔ： Ａ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｎｉｃｏｔｉｎｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ ｔｏｂａｃｃｏ ｂｙ ａ ｒｅｖｅｒｓｅ ｐｈａｓｅ ＨＰＬＣ ｗａｓ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ． Ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｎｉｃｏｔｉｎｅ ｉｎ ｓａｍｐｌｅｓ ｗａｓ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ． Ｔｈｅ ｃｏｌｕｍｎ ｗａｓ Ｋｒｏｍａｓｉｌ Ｃ１８ ｃｏｌｕｍｎ （ ２５０ ｍｍ×４．６ ｍｍ， ５ μｍ） ａｎｄ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｗａｓ ３５ ℃， ｍｅｔｈａｎｏｌ （Ａ）－ ＴＥＡ／ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｂｕｆｆｅｒ （Ｂ） （２．４２ ｇ Ｎａ２ＨＰＯ４， ３．５ ｍＬＨ３ＰＯ４ ａｎｄ ６．５ ｍＬ ＴＥＡ ｄｉｓｓｏｌｖｅｄ ｉｎ １ ０００ ｍＬ Ｈ２Ｏ） （ Ａ∶Ｂ ３∶２，Ｖ／Ｖ） ａｓ ｔｈｅ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ ａｔ ａ ｆｌｏｗ ｒａｔｅ ｏｆ １ ｍＬ·ｍｉｎ－１ ａｎｄ ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ａｔ ２５９ ｎｍ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ， ｓｔａｂｉｌｉｔｙ， ｒｅｐｅｔｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｗｅｒｅ ｇｏｏｄ． Ｔｈｅ ＲＳＤ， ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ｏｆ ｖａｒｉａｔｉｏｎ， ｌｉｎｅａｒ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｗｅｒｅ ０．０１４， １．２％， １．０ ａｎｄ ９８．８％， ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ． Ｋｅｙｗｏｒ ｄｓ： ｎｉｃｏｔｉｎｅ； ＲＰ－ ＨＰＬＣ； ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ
超声提取高效液相色谱法测定烟草中烟碱含量
实验中氟离子电 极 响 应 很 好’已 知 氟 碳 树 脂 类 型 的氟碳漆中的氟碳树脂含量检测结果相当准确#
+! 结 论
采用氧弹燃烧法配合氟离子电极对已知氟碳树脂
类型的有机溶剂型氟碳漆及经过特殊方法处理后的水
溶性氟碳漆中氟碳树脂含量均能够进行准确测定#
关 键 词 !烟 草 %烟 碱 含 量 %超 声 提 取 法 %高 效 液 相 色 谱 法 !GHL)" 中 图 分 类 号 !*D+//!<#?&>&! ! ! ! 文 献 标 识 码 !$! ! ! ! 文 章 编 号 !/#&!-?+!?!!""#"/!-""?.-"!
!!目前烟草中化学成分测定主要采用硅钨酸重量 法#/$%紫外分光光度法!gh"#!$%气相 色 谱 法!d)"#,$和 高效液相 色 谱 法 !GHL)"#+"’$&其 中 GHL) 法 应 用 最 广泛’烟草中主 要 有 效 成 分 是 烟 碱&GHL) 法 检 测 烟 碱采用的流动相有甲醇 - 磷 酸 盐 体 系%纯 水 - 磷 酸 盐 体系等&前者更常用 ’ #?"&$
!下 转 第 #! 页 "
&!"
胡 ! 滨 等 !氟 碳 漆 中 氟 碳 树 脂 含 量 的 分 析 方 法 研 究"#))* 年 第 !# 期
表 !!
高效液相色谱 烟草 成分
高效液相色谱烟草成分
高效液相色谱（HPLC）是一种广泛应用于化学分析领域的分离技术。
在烟草中，HPLC可以用于分离和鉴定各种化合物，如尼古丁、烟碱、苯甲酸、水杨酸等。
这些化合物不仅是烟草中的主要成分，也是烟草中的生物活性成分。
HPLC的分离原理是利用不同化合物在固定相和流动相中的亲疏性不同，从而实现对化合物的分离。
在烟草中，HPLC通常采用反相色谱柱作为固定相，以水和有机溶剂作为流动相。
通过调整流动相的组成和流速，可以实现对不同化合物的分离和定量。
除了分离和定量化合物外，HPLC还可以用于研究烟草中的化合物在不同条件下的变化，比如在不同烟草品种、不同生长阶段和不同加工工艺下。
这有助于了解烟草中化合物的来源和变化规律，为烟草的质量控制和改进提供依据。
总之，HPLC是烟草化学分析中不可或缺的一种技术，可以用于分离、鉴定和定量烟草中的化合物，同时也可以为烟草的质量控制和改进提供重要的数据支持。
- 1 -。
反相高效液相色谱法测定烟草中烟碱的含量
Ｋｅ ｗｏ ｄ ： ｉｏｉ ｅ ＲＰ ＨＰ Ｃ； ｅｅｍｉ ａｉ ｎ ｙ ｒ ｓ ｎ ｃ ｔ ； — Ｌ ｄ ｔｒ ｎ ｔ ｎ ｏ
我国是烟草大国， 烟草每年 的产量在 ５０ ｔபைடு நூலகம்０ 万 以
上。烟草 中的烟碱（ 又名尼古丁 ｎ ｏ ｎ ） ｉ ｔ ｅ是烟草和卷 ｃｉ 烟的重要成分之一 ， 也是衡量烟草和卷烟质量高低的
ｔｌ ｃ ｎ ｅ ａ Ｓ ｉ ｃ ＆Ｅ ｇｎ ｅ ｎ ， ｕ ａ ｎｖ ｒ ｔ， ｈ ｎ ｈ ｉ ０ ３ ， ｈｎ ） ｅ ｎ ｉｅ ｒ ｇ Ｆ ｄ ｎ Ｕ ｉｅ ｉ Ｓ ａ ｇ ａ ２ ０ ３ Ｃ ｉａ ｉ ｓ ｙ ４
Ａｂ ｔａ ｔ Ａ ｎｅｈ ｄｆｒ ｅｅｍｉａｉｎｏ ｉｏｉ ｅｃ ｎｅ ｔｎｔｂ Ｃ Ｏｂ ｅ Ｐ ｅｐ ａ ｅＨＰ Ｃ ｗ ｓｅ ｔｂｉｈ ｄ Ｔ ｅｃｎ ｅ ｔ ｆ ｉｏｉ ｅｉ ｓｒ ｃ： １ｔｏ ｏ ｔｒ ｎ ｔ ｆ ｃ ｔ ｏ ｔｎ ａ Ｃ ｙａｒｖ￣ ｈ ｓ Ｌ ａ ｓａ ｌ ｅ ． ｈ ｏ ｔｎ ｃ ｔ ｎ ｄ ｏ ｎ ｎ ｉ ｏ ｓ ｒ ｓ ｏｎ ｎ
一种烟草中苦参碱残留量的高效液相色谱检测方法[发明专利]
![一种烟草中苦参碱残留量的高效液相色谱检测方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/0e935c8f7e21af45b207a8b9.png)
专利名称：一种烟草中苦参碱残留量的高效液相色谱检测方法专利类型：发明专利
发明人：李义强,王秀国,王凤龙,孔凡玉,孙惠青,徐金丽,徐光军,郑晓
申请号：CN201310086150.4
申请日：20130318
公开号：CN103163264A
公开日：
20130619
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明提供了一种烟草中苦参碱残留量的高效液相色谱检测方法，包括以下步骤：（1）标准溶液的配制：称取一定质量苦参碱标准品，用甲醇溶解定容，制成苦参碱标准储备液，将苦参碱标准储备液逐级稀释，配制成系列浓度标准工作液；（2）提取：以二氯甲烷作为提取剂提取烟叶中苦参碱；（3）净化：采用氧化铝SPE固相萃取小柱对提取液进行净化；（4）液相色谱检测；（5）建立标准曲线；（6）计算分析苦参碱残留量。
本发明的检测方法具有简便、准确、迅速、可靠的特点，对控制烟草中苦参碱残留、指导苦参碱在烟草上的安全合理使用具有重要价值。
申请人：中国农业科学院烟草研究所
地址：266101 山东省青岛市崂山区科苑经四路11号
国籍：CN
代理机构：青岛联智专利商标事务所有限公司
代理人：崔滨生
更多信息请下载全文后查看。
超高效液相色谱-串联质谱法同时快速测定卷烟烟丝中的6种生物碱
超高效液相色谱-串联质谱法同时快速测定卷烟烟丝中的6种生物碱张瑞;陆舍铭;丁丽婷;招云芳;孟昭宇【期刊名称】《分析测试学报》【年(卷),期】2011(30)7【摘要】建立了超高效液相色谱-串联质谱( UPLC - MS/MS)同时快速测定烟草中6种生物碱的方法.对样品前处理条件和仪器分离条件进行了优化,样品经去离子水超声提取后,于UPLC BEH C18色谱柱上分离,在多反应监测模式下采用同位素内标法定量以排除基质效应.结果表明,6种生物碱的线性范围为0.1～8 000 μg/L,样品的加标回收率为87%～115%,相对标准偏差为1.9%～9.7%,检出限为50～1 250μg／kg.该方法前处理简单,分析时间短,具有良好的灵敏度和准确性,适用于烟草中该6种生物碱的测定.【总页数】5页(P760-763,768)【作者】张瑞;陆舍铭;丁丽婷;招云芳;孟昭宇【作者单位】昆明理工大学化学工程学院,云南昆明650224;红塔烟草(集团)有限责任公司技术中心,云南玉溪653100;红塔烟草(集团)有限责任公司技术中心,云南玉溪653100;昆明理工大学化学工程学院,云南昆明650224;红塔烟草(集团)有限责任公司技术中心,云南玉溪653100;红塔烟草(集团)有限责任公司技术中心,云南玉溪653100;云南大学化学科学与工程学院,云南昆明650091;红塔烟草(集团)有限责任公司技术中心,云南玉溪653100【正文语种】中文【中图分类】O657.63;0629.3【相关文献】1.超高效液相色谱-串联质谱法高通量快速测定调料中罂栗壳生物碱含量 [J], 王力清;郦明浩;李锦清;陈洪涛;樊垚;赵丹霞2.超高效液相色谱法测定卷烟烟丝中的生物碱 [J], 刘正聪;陆舍铭;桂永发;倪朝敏;杨国荣;李忠任;缪明明3.高效液相色谱-串联质谱法快速测定食品中5种罂粟壳生物碱 [J], 林黛琴;王婷婷;万承波;邱萍4.超高效液相色谱-串联质谱法快速测定火锅底料中的5种罂粟壳生物碱残留 [J], 李兴根;乔勇升;陈伟;冯寅洁;朱渊;胡慧5.超高效液相色谱-串联质谱法快速测定调味料中5种罂粟壳生物碱残留量 [J], 宁焕焱; 黄秀丽; 赖政炀; 罗月珍; 赵智锋因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
高效液相色谱法测定烟草中烟碱含量
摘要：建立一种高效液相色谱法测定烟草中烟碱的含量。
方法:色谱柱C18 (250mmX 4．6 mm，5．0um)，流动相为甲醇：0．02 mol／L磷酸氢二钠缓冲溶液(用磷酸调节pH 6．0)=70：30；检测波长259 nm；流速1．0 mL／min；进样量20 uL；柱温30℃。
结果:溶液浓度在27．568~165．408 mg／L时峰面积与烟碱浓度呈良好的线性关系，相关系数r为0．999 0，方法的检测限(s／n=3)为0．011 mg／L，平均回收率为97．9％，相对标准偏差(兄 )为1．1％(n=5)。
结论:该方法简便易行，结果准确，可作为烟草中烟碱含量的检测方法。
关键词：HPLC：烟草；烟碱；含量
烟草中含有多种生物碱，其中烟碱(又名尼古丁Nicotine，简称NTC)含量最高，约占烟草生物碱总量的95％。
其化学名称为1一甲基一2一(2一吡啶基)吡咯烷。
烟碱含量的高低不仅关系到烟草制品的质量，而且关系到人体健康。
所以，选择快速准确测量烟碱含量的方法具有重要意义。
目前测定烟草中烟碱含量的方法很多，包括有高效液相色谱法、重量分析法[51、分光光度法I6]以及连续流动法同等。
其中重量分析方法操作繁锁、耗时。
分光光度法可测量的浓度范围小，且需要蒸馏或萃取等复杂的前处理，易受外界条件影响。
目前烟草行业采用连续流动法测定烟草中的烟碱，采用的仪器昂贵，试剂剧毒，对人体不安全。
采用高效液相色谱法对烟草中的烟碱含量进行测定，该方法既能将烟碱与共存生物碱等组份分开，又能准确快速得到分析结果，同时与连续流动法的测定结果相比，无明显差异。
1 材料与方法
1．1 仪器和试剂‘
仪器：LC7000高效液相色谱仪，LC7020紫外/可见检测器，色谱柱 C 18(250．0 mm×4．6 mm，5．0 m)，空气浴振荡器
试剂：烟碱标准品，甲醇(色谱纯)，磷酸(分析纯)、磷酸氢二钠(分析纯)，
二次蒸馏水，烟草样品1、2、3号
1.2 色谱条件
流动相为甲醇：0．02 mol／L磷酸氢二钠缓冲溶液(用磷酸调节pH 6．0)=70：30；检测波长259 nm；流速1．0 mL／min；进样量20uL；柱温30℃。
1。
3 样品的处理
称取过100目筛烟草样品0．1 g，置于25 mL容量瓶中，加15 mL甲醇，25℃下空气浴振荡2 h 后定容，静置分层后取上清液进行色谱分析。
1．4 标准溶液的配制
精密称量烟碱标准品0．689 2 g置于500 mL容量瓶中，用甲醇溶解，稀释至刻度，即得。
2 结果与分析
2_1 标样和样品色谱
按照“1．2”下色谱条件测定烟碱标准品溶液和样品溶液，烟碱标样和样品色谱见图1和2。
由图l、2可知，烟碱色谱峰与杂质峰分离较好，保留时间较适宜。
2．2 精密度
在上述色谱条件下对同一待测样品进行5次重复测定，其RSD为1．1％，表明方法精密度良好。
2．3 回收率
采用标准添加法，在已知烟碱含量的3批样品中加人烟碱标准品。
按照“1．2”下色谱条件进行测定，结果见表1。
由表1可知，平均回收率为97．9％。
2．4 线性关系
分别精密吸取“1．4”下标准品溶液0．5、1．0、1．5、2．0、2．5、3,0 mL于25 mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度后摇匀，
按“1．2”下色谱条件分别测定，得到烟碱测定工作曲线的线性方程及相关系数。
以烟碱浓度为横坐标，峰面积为纵坐标y绘制标准曲线。
线性回归方程为Y=0．379 9X一3．775 9，r=0．999 0，表明在27．568～165．408 mg／L时，峰面积与烟碱浓度呈良好的线性关系。
2．5 方法定量限与检测限
对27．568 mg／L的标准品溶液进行测定，方法的定量限(S／n=10)为0．28 mg／L，检测限(S ／n=3)为0．01 1 mg／L。
2．6 样品含量
取样品按照“1．3”下方法处理后，按“1_2”下色谱条件测定烟碱含量，结果见表2。
由表2可知，连续流动学与HPLC法测定结果无明显差异。
3 结论与讨论
(1)采用该方法测定烟草中烟碱含量，精密度符合要求，平均回收率为97．9％，溶液浓度在27．568～165．408 mg／L时峰面积与烟碱浓度呈良好的线性关系。
方法的检测限为O．01 1 mg ／L，定量限为0．28 mg／L。
操作快速简便，样品处理简单，可作为烟草中烟碱含量的检测方法。
连续流动法对同3批样品进行烟碱含量的检测，结果表明，连续流动学与HPLC法测定结果无明
显差异.。