常用蛋白质分子量标准参照物

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十、常用蛋白质分子量标准参照物

十一、层析法常用数据表及性质

(一)离子交换纤维素

*:英国Whatman厂的型号,原来有旧型号如DE-1,为长纤维性,长度1000微米。还有DE-11,纤维性,50~250微米,对牛血清清蛋白的吸附容量仅为130毫克/克。

注:上述各种型号的凝胶都是亲水性的多孔颗粒,在水和缓冲溶液中很容易膨胀,生产厂为Bio-Rad Laboratories,Rich-mond, California, U. S. A.

(三)琼脂糖凝胶的技术数据

十二、常用缓冲溶液的配制方法

1.甘氨酸–盐酸缓冲液(0.05mol/L)

甘氨酸分子量= 75.07,0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。

2.邻苯二甲酸–盐酸缓冲液(0.05 mol/L)

邻苯二甲酸氢钾分子量= 204.23,0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升

Na2HPO4分子量= 14.98,0.2 mol/L溶液为28.40克/升。

Na2HPO4-2H2O分子量= 178.05,0.2 mol/L溶液含35.01克/升。

C4H2O7·H2O分子量= 210.14,0.1 mol/L溶液为21.01克/升。

①使用时可以每升中加入1克克酚,若最后pH值有变化,再用少量50% 氢氧化钠溶液

或浓盐酸调节,冰箱保存。

柠檬酸C6H8O7·H2O:分子量210.14,0.1 mol/L溶液为21.01克/升。

柠檬酸钠Na3 C6H5O7·2H2O:分子量294.12,0.1 mol/L溶液为29.41克/毫升。

Na2Ac·3H2O分子量= 136.09,0.2 mol/L溶液为27.22克/升。

7.磷酸盐缓冲液

Na2HPO4·2H2O分子量= 178.05,0.2 mol/L溶液为85.61克/升。

Na2HPO4·2H2O分子量= 358.22,0.2 mol/L溶液为71.64克/升。

Na2HPO4·2H2O分子量= 156.03,0.2 mol/L溶液为31.21克/升。

Na2HPO4·2H2O分子量= 178.05,1/15M溶液为11.876克/升。

KH2PO4分子量= 136.09,1/15M溶液为9.078克/升。

8.磷酸二氢钾–氢氧化钠缓冲液(0.05M)

巴比妥钠盐分子量=206.18;0.04M溶液为8.25克/升

10.Tris–盐酸缓冲液(0.05M,25℃)

50毫升0.1M三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液与X毫升0.1N盐酸混匀后,加水稀释至100毫

三羟甲基氨基甲烷(Tris)HOCH2 CH2OH

C

HOCH2 NH2

分子量=121.14;

0.1M 溶液为12.114克/升。Tris 溶液可从空气中吸收二氧化碳,使用时注意将瓶盖严。

硼砂Na 2B 4O 7·H 2O,分子量=381.43;0.05M 溶液(=0.2M 硼酸根)含19.07克/升。 硼酸H 2BO 3,分子量=61.84,0.2M 溶液为12.37克/升。 硼砂易失去结晶水,必须在带塞的瓶中保存。

硼砂Na 2B 4O 7·10H 2O,分子量=381.43;0.05M 溶液(=0.2M 硼酸根)含19.07克/升。 硼酸H 2BO 3,分子量=61.84, 0.2M 溶液为12.37克/升。 硼砂 易

失去结晶水,必须在带塞的瓶中保存。 12.甘氨酸–氢氧化钠缓冲液(0.05M )

甘氨酸分子量=75.07;0.2M 溶液含15.01克/升。 13.硼砂-氢氧化钠缓冲液(0.05M 硼酸根)

X 毫升0.05M 硼砂+Y 毫升0.2NNaOH 加水稀释至200毫升

硼砂Na 2B 4O 7·10H 2O,分子量=381.43;0.05M 溶液为19.07克/升。 14.碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液(0.1M )

2+2+Na 2CO

2·10H 2O 分子量=286.2;0.1M 溶液为28.62克/升。 N 2HCO 3分子量=84.0;0.1M 溶液为8.40克/升。

十四、硫酸铵饱和度的常用表

①在25℃下,硫酸铵溶液由初浓度调到终浓度时,每升溶液所加固体硫酸铵的克数。

①在0℃下,硫酸铵溶液由初浓度调到终浓度时,每100毫升溶液所加固体硫酸铵的克数。

r为离心机头的半径(角头),或离心管中轴底部内壁到离心机转轴中心的距离(甩平头),单位为厘米。

rpm为离心机每分钟的转速。

RCF为相对离心力,以地心引力即重力加速度的倍数来表示,一般用g(或数字×g)表示。

附图11是由下述公式计算而来的:

RCF = 1.119 × 10-5× r × (rpm)2

将离心机转数换算为离心力时,首先,在r标尺上取已知的半径和rpm标尺上取已知的离心机转数,然后,将这两点间划一条直线,在图中间RCF标尺上的交叉点即为相应离心力数值。注意,若已知转数值处于rpm标尺的右边,则应读取RCF标尺右边的数值。同样,转数值处于rpm标尺左边,则读取RCF标尺左边的数值。

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