常用蛋白质分子量标准参照物
生物实验常用缓冲液和酶的配制
实验室常用技术参数资料一、核酸及蛋白质常用数据1．核苷三磷酸的物理常数2．常用核酸的长度与分子量3．常用核酸蛋白换算数据（1）重量换算1μg=10-6g1pg=10-12g1ng=10-9g 1fg=10-15g（2）分光光度换算：1A260双链DNA=50μg/ml1A260单链DNA=30μg/ml1A260单链RNA=40μg/ml（3）DNA摩尔换算：1μg 100bp DNA=1.52pmol=3.03pmol末端1μg pBR322 DNA=0.36pmol1pmol 1000bp DNA=0.66μg1pmol pBR322=2.8μg1kb双链DNA（钠盐）=6.6×105道尔顿1kb单链DNA（钠盐）=3.3×105道尔顿1kb单链RNA（钠盐）=3.4×105道尔顿（4）蛋白摩尔换算：100pmol分子量100，000蛋白质=10μg100pmol分子量50，000蛋白质=5μg100pmol分子量10，000蛋白质=1μg氨基酸的平均分子量=126.7道尔顿（5）蛋白质/DNA换算：1kb DNA=333 个氨基酸编码容量=3.7×104MW蛋白质10，000MW蛋白质=270bp DNA30，000MW蛋白质=810bp DNA50，000MW蛋白质=1.35kb100，000MW蛋白质=2.7kb DNA4．常用蛋白质分子量标准参照物5．常用DNA分子量标准参照物续上表二、常用缓冲液1．分子克隆常用缓冲液2．磷酸缓冲液（1）25℃下0.1mol/L磷酸钾缓冲液的配制※（2）25℃下0.1mol/L磷酸钠缓冲液的配制※※:用蒸馏水将混合的两种1mol/L贮存液稀释至1000ml，根据Henderson-Hasselbalch方程计算其pH 值：pH=pK’+1g([质子受体]/[质子供体])在此，pK’=6.86(25℃)。
3．电泳缓冲液测序凝胶加样缓冲液98%去离子甲酰胺10mol/L EDTA(pH8.0)0.025%二甲苯青FF0.025%溴酚蓝甲酰胺：许多批号的试剂级甲酰胺，其纯度符合使用要求，无须再进行处理。
常见蛋白质分子量参考值
常见蛋白质分子量参考值（单位：dalton）蛋白质分子量肌球蛋白[myosin]甲状腺球蛋白[thyroglobulin]β-半乳糖苷酶[β-galactosidase]副肌球蛋白[paramyosin]磷酸化酶a[phosphorylase a]血清白蛋白[serum albumin]L-氨基酸氧化酶[L-amino acid oxidase]地氧化氢酶[catalase]丙酮酸激活酶[pyruvate kinase]谷氨酸脱氢酶[glutamate dehydrogenase]亮氨酸氨肽酶[glutamae dehydrogenase]γ-球蛋白，H链[γ-globulin, H chain]延胡索酸酶（反丁烯二酸酶）[fumarase]卵白蛋白[ovalbumin]醇脱氢酶（肝）[alcohol dehydrogenase (liver)]烯醇酶[enolase]醛缩酶[aldolase]肌酸激酶[creatine kinase]220,000 165,000 130,000 100,000 94,000 68,000 63,000 60,000 57,000 53,000 53,000 50,000 49,000 43,000 41,000 41,000 40,000 40,000胃蛋白酶原[pepsinogen]D-氨基酸氧化酶[D-amino acid oxidase]醇脱氢酶（酵母）[alcohol dehydrogenase (yeast)]甘油醛磷酸脱氢酶[dlyceraldehyde phosphate dehydrogenase]原肌球蛋白[tropomyosin]乳酸脱氢酶[lactate dehydrgenase]胃蛋白酶[pepsin]转磷酸核糖基酶[phosphoribosyl transferase]天冬氨酸氨甲酰转移酶，C链[aspertate transcarbamylase, C chain]羧肽酶A[carboxypeptidase A]碳酸酐酶[carbonic anhydrase]枯草杆菌蛋白酶[subtilisin]γ-球蛋白，L链γ-blobulin,L chain[]糜蛋白酶原（胰凝乳蛋白酶原）[chymotrypsinogen胰蛋白酶[trypsin]木瓜蛋白酶（羧甲基）[papain (carboxymethyl)]β-乳球蛋白[β-lactoglobulin]烟草花叶病毒外壳蛋白（TWV外壳蛋白）[TWV coat protein肌红蛋白[myoglobin]天门冬氨酸氨甲酰转移酶，R链[aspartate transcarbamylase, R chain]血红蛋白[h(a)emoglobin]40,000 37,000 37,000 36,000 36,000 36,000 35,000 35,000 34,000 34,000 29,000 27,600 23,500 25,700 23,300 23,00018,400 17,50017,200 17,000Qβ外壳蛋白[Qβ coat protein]溶菌酶[lysozyme]R17外壳蛋白[R17 coat protein]核糖核酸酶[ribonuclease或RNase]细胞色素C[cytochrome C]糜蛋白酶（胰凝乳蛋白酶）[chymotrypsin]15,500 15,000 14,300 13,750 13,700 11,700 11,000。
与TBE的区别及在凝胶电泳的应用
TAE是Tris-乙酸，缓冲容量小，但是溶解度大，易于储存TBE是Tris-硼酸，缓冲容量大，但是溶解度小，不易长期储存，易产生沉淀TAE与TBE的区别首先要知道 TAE 与 TBE 缓冲溶液的成份如下：50x TAE Buffer (Tris-Acetate-EDTA)242 gm Tris base57.1 ml Acetic acid 100ml0.5M EDTAAdd ddH2O to 1 liter and adjust pH to 8.5.10x TBE Buffer (Tris-Borate-EDTA)108 gm Tris base55 gm Boric acid9.3 gm Na4EDTAAdd ddH2O to 1 liter.The pH is 8.3 and requires no adjustment.它们的分别有下列几点：1. TBE 不能太浓 (它只可有 10 times)，因为 borate 会很容易沉淀，但一般有少许沉淀是不会有太大问题。
2. TBE 的 buffering capacity 比 TAE 高，用 TBE 来跑出来的 gel，分辨率 (resolution) 会比较高。
3. 因为 TBE 有 borate 离子 (ion)，它会影向酵素 (enzyme) 的工作。
因此，若要为分离出的 DNA 进行下一步酵素处理，如 cloning 或 restriction cut 的话，就要切记不要让DNA 碰上 borate ion。
4. TAE的 buffer capacity 比较差，gel 一般比较模糊，但它不会对影向酵素三种缓冲液的配制方法Tris-乙酸（TAE）：50×浓贮存液（每升）：242g Tris 碱57.1ml 冰乙酸100ml 0.5mmol/L EDTA(pH8.0)使用时再稀释50倍。
Tris-磷酸（TPE）：10×浓贮存液（每升）：108g Tris 碱15.5ml 85％磷酸（1.679g /ml）40ml 0.5mmol/L EDTA(pH8.0)使用时再稀释10倍。
蛋白的分子量
蛋白的分子量蛋白是构成细胞的重要组成部分，它们在生物体内扮演着多种重要角色。
蛋白的分子量是衡量蛋白大小的一个重要指标，通常以千道尔顿（kDa）为单位表示。
不同的蛋白具有不同的分子量，下面将介绍几种常见蛋白的分子量及其功能。
1. 血红蛋白（Hemoglobin）血红蛋白是一种含铁的蛋白质，其分子量约为64 kDa。
它存在于红细胞中，负责运输氧气到全身各个组织和器官。
血红蛋白分子中的铁离子能够与氧气结合形成氧合血红蛋白，然后在肺部释放氧气，使其被组织细胞吸收和利用。
2. 抗体（Antibody）抗体是一种免疫蛋白，其分子量约为150 kDa。
它由免疫细胞产生，能够识别和结合特定的抗原分子。
抗体在免疫应答中起到关键作用，可以中和病原体，激活免疫细胞，促进宿主对抗病原体的防御。
3. 细胞色素c（Cytochrome c）细胞色素c是一种在呼吸链中发挥作用的蛋白质，其分子量约为12 kDa。
它在线粒体内定位，并参与细胞呼吸过程中的电子传递。
细胞色素c通过在不同氧化还原状态之间转变，将电子从呼吸链的一部分传递到另一部分，从而驱动ATP合成。
4. 胰岛素（Insulin）胰岛素是一种调节血糖水平的激素，其分子量约为5.8 kDa。
它由胰腺的β细胞产生，并在血液中运输到全身各个细胞。
胰岛素通过结合细胞膜上的胰岛素受体，促进葡萄糖的摄取和利用，从而降低血糖浓度。
5. 酶（Enzyme）酶是一种催化化学反应的蛋白质，其分子量各不相同。
酶可以加速生物体内化学反应的速率，但自身并不参与反应，因此可以反复使用。
例如，DNA聚合酶是一种具有分子量约为105 kDa的酶，它在DNA复制过程中起到关键作用，帮助合成新的DNA分子。
蛋白的分子量与其功能密切相关，不同分子量的蛋白在生物体内扮演着不同的角色。
了解蛋白的分子量有助于我们深入理解其结构和功能，进而揭示生命活动的奥秘。
通过研究蛋白的分子量以及其与其他生物分子的相互作用，可以为生物医学研究和药物开发提供重要的基础。
蛋白质大小范围
蛋白质大小范围蛋白质是由氨基酸链组成的生物大分子，是构成生命体的重要组成部分，具有多种功能，包括结构支撑、催化反应、信号传递等。
蛋白质具有非常广泛的大小范围，从几千达尔顿（Da）到数百万达尔顿不等。
下面将详细介绍蛋白质的大小范围。
1. 低分子量蛋白质低分子量蛋白质是指分子量小于10000 Da的蛋白质。
低分子量蛋白质通常具有短氨基酸序列和紧密折叠结构，这使得它们适合在环境中进行快速的反应。
例如，一些小型酶类就属于低分子量蛋白质，如萘乙酰胆碱酯酶（Molecular weight 67200 Da）。
中等分子量蛋白质一般指5000 Da到50000 Da间的蛋白质。
这种蛋白质通常有长氨基酸序列，它们形成的复杂结构可以传递更多的信号和信息。
例如，肌球蛋白的分子量为42000 Da左右。
高分子量蛋白质是指分子量大于50000 Da的蛋白质，通常由数百或数千个氨基酸组成。
这种大型蛋白质的折叠结构非常复杂，具有多种功能。
一些著名的高分子量蛋白质包括细胞骨架蛋白质（Molecular weight >1 million Da）、胶原蛋白（Molecular weight 300,000-400,000 Da）和人血清白蛋白（Molecular weight 66,000 Da）。
超大分子量蛋白质一般指分子量超过数百万Da以上的大分子。
这些蛋白质通常是在细胞膜上定位，可以通过跨越膜通道来形成复杂的跨膜结构。
例如，巨大的病毒鞭毛蛋白（Molecular weight > 20 million Da）就属于超大分子量蛋白质范畴。
总之，蛋白质具有非常广泛的分子量范围，从几千到数百万达尔顿的不等。
不同分子量的蛋白质具有不同的生物学功能，构建了整个生物的复杂结构。
因此，对于生物学研究来说，掌握蛋白质不同分子量范围的特点和生物学功能是非常重要的。
蛋白质的标准数据是多少
蛋白质的标准数据是多少
首先，蛋白质的标准数据包括其化学结构。
蛋白质是由氨基酸组成的，不同种类的蛋白质含有不同数量和种类的氨基酸。
一般来说，蛋白质的分子量在10,000到1,000,000之间，而其氨基酸残基的数量则在50到2,000之间。
此外，蛋白质的结构可以分为原生结构、二级结构、三级结构和四级结构，这些结构对蛋白质的功能起着决定性的作用。
其次，蛋白质的标准数据还包括其组成和含量。
人体内的蛋白质主要包括20种氨基酸，其中有9种是人体无法自行合成的必需氨基酸。
蛋白质的含量在不同的组织和器官中有所差异，肌肉、皮肤、头发等含有较高的蛋白质，而脂肪组织、骨骼等含量较低。
此外，不同种类的食物中也含有不同的蛋白质，例如动物性食物中的蛋白质含量较高，而植物性食物中的蛋白质含量较低。
再次，蛋白质的标准数据还涉及到其功能。
蛋白质在生物体内有多种功能，包括结构支持、酶催化、免疫防御、运输传导等。
不同的蛋白质具有不同的功能，这些功能对于维持生物体的正常生理活动至关重要。
例如，酶是一类重要的蛋白质，它可以催化生物体内的化学反应，是生命活动得以进行的关键。
综上所述，蛋白质的标准数据是一个综合性的概念，涉及到其化学结构、组成和含量、功能等多个方面。
对于科研工作者来说，准确了解蛋白质的标准数据对于开展相关研究具有重要意义；对于医学工作者来说，了解蛋白质的标准数据可以帮助他们更好地指导临床实践；对于普通大众来说，了解蛋白质的标准数据可以帮助他们更科学地进行膳食搭配，保持健康生活方式。
因此，深入了解蛋白质的标准数据，对于个人和社会都具有重要的意义。
蛋白质分子量标准(宽)
●保存条件
制品原液可在-20℃下长期保存，制品的 20 倍稀释液 可在-20℃下保存 2～3 个月，制品的原液和制品的 20 倍稀释液都应避免多次反复冻融。
●制品中的各种蛋白质种类
蛋白种类
肌球蛋白 β 半乳糖苷酶 磷酸酶 b 牛血清蛋白 卵清蛋白 碳酸苷酶 胰蛋白酶抑制剂 溶菌酶 抑肽酶
来源
猪 大肠杆菌 兔子肌肉
3. 均匀混合后，100℃加热处理 5 分钟，然后取 5 μl 进行 5～20％的聚丙烯酰胺凝胶电泳（for SDS-PAGE mini gel）。
4. 5~20%聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳、12%聚丙烯酰 胺凝胶电泳后，经考马斯亮蓝 R-250 染色后的结 果如下。
KDa 200
116 97.2 66.4
蛋白质分子量标准（宽）
Protein Molecular Weight Marker (Broad)
使用说明书
TaKaRa Code：D532A
●浓 度：18 μg/μl
●制品内容（约 200 次量）
Protein MW Marker（Broad） 50 μl
5×Loading Buffer
1000 μl
KDa 210106 97.2 66.4
44.3
44.3
29.0
29.0 20.1
20.1
14.3
14.3
6.5
6.5
5~20%
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
12%
V2010.04
●使用方法
1. 首先按以下方法配制“稀释液”。
1 M DTT 5×Loading Buffer
* 稀释液可于室温下放置一个月左右。
2 μl 20 μl
常用蛋白质分子量标准参照物(精)
十、常用蛋白质分子量标准参照物十一、层析法常用数据表及性质（一）离子交换纤维素*：英国Whatman厂的型号，原来有旧型号如DE-1，为长纤维性，长度1000微米。
还有DE-11，纤维性，50～250微米，对牛血清清蛋白的吸附容量仅为130毫克/克。
注：上述各种型号的凝胶都是亲水性的多孔颗粒，在水和缓冲溶液中很容易膨胀，生产厂为Bio-Rad Laboratories,Rich-mond, California, U. S. A.（三）琼脂糖凝胶的技术数据十二、常用缓冲溶液的配制方法1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）甘氨酸分子量 = 75.07，0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。
2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L）邻苯二甲酸氢钾分子量 = 204.23，0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升Na2HPO4分子量 = 14.98，0.2 mol/L溶液为28.40克/升。
Na2HPO4-2H2O分子量 = 178.05，0.2 mol/L溶液含35.01克/升。
C4H2O7·H2O分子量 = 210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。
①使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH值有变化，再用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。
柠檬酸C6H8O7·H2O：分子量210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。
柠檬酸钠Na3 C6H5O7·2H2O：分子量294.12，0.1 mol/L溶液为29.41克/毫升。
Na2Ac·3H2O分子量 = 136.09，0.2 mol/L溶液为27.22克/升。
7．磷酸盐缓冲液Na2HPO4·2H2O分子量 = 178.05，0.2 mol/L溶液为85.61克/升。
Na2HPO4·2H2O分子量 = 358.22，0.2 mol/L溶液为71.64克/升。
常见蛋白质分子量参考值
常见蛋白质分子量参考值（单位：dalton）蛋白质分子量肌球蛋白[myosin]甲状腺球蛋白[thyroglobulin]β-半乳糖苷酶[β-galactosidase]副肌球蛋白[paramyosin]磷酸化酶a[phosphorylase a]血清白蛋白[serum albumin]L-氨基酸氧化酶[L-amino acid oxidase]地氧化氢酶[catalase]丙酮酸激活酶[pyruvate kinase]谷氨酸脱氢酶[glutamate dehydrogenase]亮氨酸氨肽酶[glutamae dehydrogenase]γ-球蛋白，H链[γ-globulin, H chain]延胡索酸酶（反丁烯二酸酶）[fumarase]卵白蛋白[ovalbumin]醇脱氢酶（肝）[alcohol dehydrogenase (liver)]烯醇酶[enolase]醛缩酶[aldolase]220,000 165,000 130,000 100,000 94,000 68,000 63,000 60,000 57,000 53,000 53,000 50,000 49,000 43,000 41,000 41,000 40,000肌酸激酶[creatine kinase]胃蛋白酶原[pepsinogen]D-氨基酸氧化酶[D-amino acid oxidase]醇脱氢酶（酵母）[alcohol dehydrogenase (yeast)]甘油醛磷酸脱氢酶[dlyceraldehyde phosphate dehydrogenase]原肌球蛋白[tropomyosin]乳酸脱氢酶[lactate dehydrgenase]胃蛋白酶[pepsin]转磷酸核糖基酶[phosphoribosyl transferase]天冬氨酸氨甲酰转移酶，C链[aspertate transcarbamylase, C chain]羧肽酶A[carboxypeptidase A]碳酸酐酶[carbonic anhydrase]枯草杆菌蛋白酶[subtilisin]γ-球蛋白，L链γ-blobulin,L chain[]糜蛋白酶原（胰凝乳蛋白酶原）[chymotrypsinogen胰蛋白酶[trypsin]木瓜蛋白酶（羧甲基）[papain (carboxymethyl)]β-乳球蛋白[β-lactoglobulin]烟草花叶病毒外壳蛋白（TWV外壳蛋白）[TWV coat protein肌红蛋白[myoglobin]天门冬氨酸氨甲酰转移酶，R链[aspartate transcarbamylase, R chain]40,000 40,000 37,000 37,000 36,000 36,000 36,000 35,000 35,000 34,000 34,000 29,000 27,600 23,500 25,700 23,300 23,00018,400 17,50017,200血红蛋白[h(a)emoglobin]Qβ外壳蛋白[Qβ coat protein]溶菌酶[lysozyme]R17外壳蛋白[R17 coat protein]核糖核酸酶[ribonuclease或RNase]细胞色素C[cytochrome C]糜蛋白酶（胰凝乳蛋白酶）[chymotrypsin]17,000 15,500 15,000 14,300 13,750 13,700 11,700 11,000。
实验室常用试剂的配方
常用试剂的配方常用贮液与溶液 (1)1mol/L亚精胺（Spermidine） (1)1mol/L精胺（Spermine） (1)10mol/L乙酸胺（ammonium acetate） (1)10mg/ml牛血清蛋白(BSA） (1)1mol/L二硫苏糖醇（DTT） (1)8mol/L乙酸钾（potassium acetate） (1)1mol/L氯化钾（KCl） (1)3mol/L乙酸钠（sodium acetate） (1)0.5mol/L EDTA (1)1mol/L HEPES (1)1mol/L HCl (1)25mg/ml IPGT (1)1mol/LMgCl2 (1)100mmol/L PMSF (1)20mg/ml蛋白酶K（proteinase K） (1)10mg/mlRnase（无DNase）（DNase－free RNase） (1)5mol/L氯化钠（NaCl） (1)10N氢氧化钠（NaOH） (1)10％SDS（十二烷基硫酸钠） (1)2mol/L山梨（糖）醇（Sorbitol） (2)100％三氯乙酸（TCA） (2)2.5％ X－gal（5-溴-4-氯-3-吲哚－β-半乳糖苷） (2)100×Denhardt试剂（Denhardt’s regent） (2)10×标准DNA连接酶缓冲液（standard DNA ligase buffer）（粘端、平端连接） (2)100 mmol/L dNTP 溶液（dNTP solutions） (2)20％PEG 8000/2.5M NaCl (2)20×SSC (2)DEPC（焦碳酸二乙酯）处理水 (3)甲酰胺（deionized formamide） (3)TE（用于悬浮和贮存DNA） (3)Tris缓冲液（Tris-HCl buffer） (3)30%丙烯酰胺溶液 (3)40%丙烯酰胺 (3)放线菌素D溶液 (4)0.1mol/L腺苷三磷酸（ATP）溶液 (4)10mol/L乙酸酰溶液 (4)10%过硫酸铵溶液 (4)BCIP溶液 (4)2×BES缓冲盐溶液 (4)1mol/L CaCl2溶液 (5)2.5mol/L CaCl2溶液 (5)1mol/L二硫苏糖醇（DTT）溶液 (5)脱氧核苷三磷酸（dNTP）溶液 (5)0.5mol/L EDTA(pH8.0)溶液 (6)2×HEPES缓冲盐溶液 (6)IPTG溶液 (6)1mol/L乙酸镁溶液 (6)1mol/L MgCl2溶液 (6)β-巯基乙醇（BME）溶液 (7)NBT溶液 (7)酚/氯仿溶液 (7)10mmol/L苯甲基磺酰氟（PMSF）溶液 (7)磷酸盐缓冲溶液（PBS）溶液 (7)1mol/L乙酸钾（pH7.5）溶液 (8)乙酸钾溶液（用于碱裂解） (8)3mol/L乙酸钠（pH5.2和pH7.0）溶液 (8)5mol/L NaCl溶液 (8)10%十二烷基硫酸钠（SDS）溶液 (8)20×SSC溶液 (8)20×SSPE溶液 (9)100%三氯乙酸溶液 (9)1mol/L Tris溶液 (9)Tris缓冲盐溶液（TBS）（25mmol/L Tris） (9)X-gal溶液 (9)PBS: (10)TBS： (10)枸橼酸盐缓冲液（Citrate buffer）： (10)胰酶（Trypsin）： (10)胃酶（Pepsin）： (10)DAB： (10)AEC： (10)RIPA： (11)9、Blotto A： (11)10、Blotto B： (11)电泳缓冲液、染料和凝胶加样液 (11)电泳缓冲液 (11)染料 (11)10mg/ml的溴化乙锭（ethidium bromide） (11)凝胶上样液（gel loading solutions） (12)6×聚蔗糖凝胶上样液（室温贮存） (12)6×溴酚蓝/二甲苯青/聚蔗糖凝胶上样液（室温贮存） (12)6×甘油凝胶上样液（4℃贮存） (12)6×蔗糖凝胶上样液（室温贮存） (13)10×十二烷基硫酸钠/甘油凝胶上样液（室温贮存） (13)常用培养基 (13)LB培养基 (13)SOC培养基 (13)TB培养基 (14)YPD培养基 (14)常用抗生素 (14)羧苄青霉素（carbenicillin）（50mg/ml） (14)甲氧西林（methicillin）（100mg/ml） (14)卡那霉素（kanamycin）（10mg/ml） (14)氯霉素（chloramphenicol）（25mg/ml） (14)链霉素（streptomycin）（50mg/ml） (14)萘啶酮酸（nalidixic acid）（5mg/ml） (15)四环素（tetracyyline）（10mg/ml） (15)实验室常用贮存液的配制参数 (15)一、核酸及蛋白质常用数据 (15)2．常用核酸的长度与分子量 (15)3．常用核酸蛋白换算数据 (16)4．常用蛋白质分子量标准参照物 (17)5．常用DNA分子量标准参照物 (17)二、常用缓冲液 (18)1．分子克隆常用缓冲液 (18)2．磷酸缓冲液 (18)3．电泳缓冲液 (20)4．凝胶加样缓冲液 (21)5．各种pH值的Tris缓冲液的配制 (22)7．温度对常用缓冲液pH的影响 (24)三、常用酶的配制 (25)1．溶菌酶 (25)2．蛋白水解酶类 (25)3．无DNA酶的RNA酶 (25)四、常用抗生素溶液 (25)五、杂交试验中用于降低背景的封闭剂 (26)六、常用凝胶的技术参数 (27)1．葡聚糖凝胶的某些技术数据 (27)2.聚丙烯酰胺凝胶的技术数据 (29)3．琼脂糖凝胶的技术数据 (29)4．各处凝胶所允许的最大操作压 (30)5．琼脂糖凝胶浓度与线性DNA分辨范围 (30)6．染料在变性聚丙烯酰胺凝胶中的迁移速度 (30)7．染料在非变性聚丙烯酰胺凝胶中的迁移速度 (31)七、氨基酸的特性 (31)八、遗传密码 (32)九、常用酸碱技术参数 (33)1．常见的市售酸碱的浓度 (33)2．各种浓度的酸碱贮存液的近似pH值 (34)常用贮液与溶液1mol/L亚精胺（Spermidine）溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。
常见蛋白质分子量参考1 PDF
常见蛋白质分子量参考1PDF
原理
与Southern或Northern杂交方法类似，但WesternBlot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。
经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝#纤维素薄膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。
以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。
该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。
分类普通蛋白质分子量标准（低范围，5-66kDa）现常用的有底物化学发光ECL和底物DAB呈色，体同水平和实验条件的是用*种方法，目前发表文章通常是用底物化学发光ECL。
只要买现成的试剂盒就行，操作也比较简单，原理如下（二抗用HRP标记）：反应底物为过氧化物+鲁米诺，如遇到HRP，即发光，可使胶片曝光，就可洗出条带。
—1—。
蛋白质组学标准品-概述说明以及解释
蛋白质组学标准品-概述说明以及解释1.引言1.1 概述概述部分：蛋白质组学作为生物科学领域中的一个重要分支，研究蛋白质在整个生物体中的表达、功能和相互作用，是理解生物体内部复杂生物过程的关键。
近年来，蛋白质组学研究受到广泛关注，并在疾病诊断、新药研发、生物标记物发现等领域展现出巨大的应用潜力。
蛋白质组学的发展离不开蛋白质组学标准品的支持和推动。
蛋白质组学标准品是指用于蛋白质组学研究中作为参照物的一类物质，具有一定的特定性、稳定性和可比性。
通过与标准品进行对照，研究人员可以准确评估样品中的蛋白质表达水平以及各个蛋白质之间的相对数量。
蛋白质组学标准品的分类和特点多种多样。
根据其来源可以分为人源标准品、动物源标准品和细菌源标准品等；根据其制备方法可以分为合成标准品和天然标准品等。
不同类型的标准品具有不同的应用场景和优势，可以满足不同研究需求。
标准品的制备方法和质量控制对于蛋白质组学研究的可靠性和稳定性至关重要。
标准品的制备需要选择合适的蛋白质样本、提取和纯化标准品，以确保蛋白质的质量和纯度；同时，还需要根据实验要求对标准品的质量进行严格的质量控制，以保证标准品的准确性和可靠性。
蛋白质组学标准品在蛋白质组学研究中具有重要的意义和应用前景。
它可以用于蛋白质定量和鉴定的标准化，提高实验的可比性和结果的可靠性；同时，通过与标准品比对，也可以发现新的蛋白质指标和生物标记物，为疾病诊断和新药研发提供更多可能性。
本文将详细介绍蛋白质组学标准品的概念、意义、分类和特点，以及其制备方法和质量控制等内容。
通过对蛋白质组学标准品的研究，我们可以更全面地认识蛋白质组学研究的重要性和应用前景，为相关领域的科学研究和发展提供有力支持。
1.2 文章结构文章结构指的是文章主体部分的组织方式和内容安排。
本文的结构分为引言、正文和结论三个部分。
在引言部分，我们将对蛋白质组学标准品的概述、文章结构和目的进行介绍。
在正文部分，我们将分为四个小节来探讨蛋白质组学标准品的相关内容。
遗传密码子表
1．遗传密码子表第一个核苷酸（5′端）第二个核苷酸第三个核苷酸（3′端）U C A GU 苯丙氨酸丝氨酸酪氨酸半胱氨酸U 苯丙氨酸丝氨酸酪氨酸半胱氨酸 C 亮氨酸丝氨酸终止码终止码 A 亮氨酸丝氨酸终止码色氨酸GC 亮氨酸脯氨酸组氨酸精氨酸U 亮氨酸脯氨酸组氨酸精氨酸 C 亮氨酸脯氨酸谷氨酰胺精氨酸 A 亮氨酸脯氨酸谷氨酰胺精氨酸GA 异亮氨酸苏氨酸天冬酰胺丝氨酸U 异亮氨酸苏氨酸天冬酰胺丝氨酸 C 异亮氨酸苏氨酸赖氨酸精氨酸 A 蛋氨酸苏氨酸赖氨酸精氨酸GG 缬氨酸丙氨酸天冬氨酸甘氨酸U 缬氨酸丙氨酸天冬氨酸甘氨酸 C 缬氨酸丙氨酸谷氨酸甘氨酸 A 缬氨酸丙氨酸谷氨酸甘氨酸GAUG位于mRNA启动部位时为启动信号。
真核生物中此密码子代表蛋氨酸，原核生物中代表甲酰蛋氨酸。
2．氨基酸的特性氨基酸名称三字母缩写单字母缩写质量侧链电离的pHa值结构式丙氨酸（alanine）Ala A 89.09精氨酸Arg R 174.2 12.48 （arginine）天冬酰氨Asn N 132.1 （asparagine）天冬氨酸Asp D 133.1 3.86 （asparticacid）半胱氨酸Cys C 121.12 （systeine）谷氨酰胺Gln Q 146.15 （glutamine）谷氨酸Glu E 147.13 4.25 （glutamicacid）甘氨酸Gly G 75.07 （glycine）组氨酸His H 155.16 6.0 （histidine）异亮氨酸lle I 131.17 （isoleucine）亮氨酸Leu L 131.17 （leucine）赖氨酸Lys K 146.19 （lycine）甲硫氨酸Met M 149.21 （methionine）苯丙氨酸Phe P 165.19 （phenylanaline）脯氨酸Pro P 115.13 （proline）丝氨酸Ser S 105.06 （serine）苏氨酸Thr T 119.12 (threonine)色氨酸Trp W 204.22 （tryptophan）酪氨酸Tyr Y 181.19 10.07 （tyrosine）缬氨酸（valine）Val P 117.151．核苷三磷酸的物理常数化合物分子量λmax(pH7.0)1摩尔溶液（pH7.0）中λmax时的最大吸收值OD280/OD260ATP 507 259 15400 0.15 CTP 483 271 9000 0.97 GTP 523 253 13700 0.66 UTP 484 262 10000 0.38 dATP 494 259 15200 0.15 dCTP 467 271 9300 0.98 dGTP 507 253 13700 0.66 dTTP 482 267 9600 0.712．常用核酸的长度与分子量核酸核苷酸数分子量λDNA48502（双链环状）3.0×107pBR3224363（双链） 2.8×10628SrRNA4800 1.6×10623SrR3700 1.2×106NA18SrR1900 6.1×105 NA19SrR1700 5.5×105 NA125SrRNA3.6×104tRNA（大肠杆75 2.5×104菌）3．常用核酸蛋白换算数据（1）重量换算1μg=10-6g 1pg=10-12g1ng=10-9g 1fg=10-15g（2）分光光度换算：1A260双链DNA=50μg/ml1A260单链DNA=30μg/ml1A260单链RNA=40μg/ml（3）DNA摩尔换算：1μg 100bp DNA=1.52pmol=3.03pmol末端1μg pBR322 DNA=0.36pmol1pmol 1000bp DNA=0.66μg1pmol pBR322=2.8μg1kb双链DNA（钠盐）=6.6×105道尔顿1kb单链DNA（钠盐）=3.3×105道尔顿1kb单链RNA（钠盐）=3.4×105道尔顿（4）蛋白摩尔换算：100pmol分子量100，000蛋白质=10μg100pmol分子量50，000蛋白质=5μg100pmol分子量10，000蛋白质=1μg氨基酸的平均分子量=126.7道尔顿（5）蛋白质/DNA换算：1kb DNA=333 个氨基酸编码容量=3.7×104MW蛋白质10，000MW蛋白质=270bp DNA30，000MW蛋白质=810bp DNA50，000MW蛋白质=1.35kb100，000MW蛋白质=2.7kb DNA4．常用蛋白质分子量标准参照物（1）高分子量标准参照（2）中分子量标准参照（3）低分子量标准参照肌球蛋白分子量磷酸化酶B 97，400 碳酸酐酶31，00 肌球蛋白212，000 牛血清白蛋白66，200 大豆脻蛋白酶21，500 β-半乳糖甘酶B 116，000 谷氨酶脱氢酶55，000 抑制剂磷酸化酶B 97，400 卵白蛋白42，700 马心肌球蛋白16，900 牛血清白蛋白66，200 醛缩酶40，000 溶菌酶14，400 过氧化氢酶` 57，000 碳酸酐酶31，000 肌球蛋白（F1）8，100 醛缩酶40，000 大豆脻蛋白酶21，500 肌球蛋白（F2）6，200抑制剂肌球蛋白（F3）2，500溶菌酶14，4005．常用蛋白质等电点参考值（单位：pH）蛋白质等电点蛋白质等电点鲑精蛋白[salmine] 12.1 α1-粘蛋白[α1-mucoprotein] 1.8-2.7 鲱精蛋白[clupeine] 12.1 卵黄类粘蛋白[vitellomucoid] 5.5鲟精蛋白[sturline] 11.71 尿促性腺激素[urinary3.2-3.3gonadotropin]胸腺组蛋白[thymohistone] 10.8 溶菌酶[lyso zyme] 11.0-11.2 珠蛋白（人）7.5 肌红蛋白[myoglobin] 6.99 [globin(human)]7.07卵白蛋白[ovalbuin] 4.71; 4.59 血红蛋白（人）[hemoglobin(human)]伴清蛋白[conal bumin] 6.8;7.1 血红蛋白（鸡）[hemoglobin(hen)] 7.23血清白蛋白[serum albumin] 4.7-4.9 血红蛋白（马）[hemoglobin(horse)]6.92肌清蛋白[myoal bumin] 3.5 血蓝蛋白[hemerythrin] 4.6-6.4 肌浆蛋白[myogen A] 6.3 蚯蚓血红蛋白[chlorocruorin] 5.6β-乳球蛋白[β-lactoglobulin]5.1-5.3 血绿蛋白[chlorocruorin] 4.3-4.5卵黄蛋白[livetin] 4.8-5.0 无脊椎血红蛋白[erythrocruorins]4.6-6.2γ1—球蛋白（人）[γ1-globulin(human)]5.8;6.6 细胞色素C[cytochrome C] 9.8-10.1γ2—球蛋白（人）[γ2-globulin(human)]7.3;8.2 视紫质[rhodopsin] 4.47-4.57 肌球蛋白A[myosin A] 5.2-5.5 促凝血酶原激酶[thromboplastin] 5.2原肌球蛋白[myosin A] 5.1 α1-脂蛋白[α1-lipoprotein] 5.5铁传递蛋白[siderophilin] 5.9 β1-脂蛋白[β1-lipoprotein] 5.4胎球蛋白[fetuin] 3.4-3.5 β-卵黄脂磷蛋白[β-lipovitellin]5.9血纤蛋白原[fibrinogen] 5.5-5.8 芜菁黄花病毒[turnip yellowvvirus]3.75α-眼晶体蛋白[α-crystallin]4.8 牛痘病毒[vaccinia virus]5.3β-眼晶体蛋白[β-crystallin]6.0 生长激素[somatotropin] 6.85胰岛素[insulin] 5.35 催乳激素[prolactin] 5.73花生球蛋白[arachin] 5.1 胃蛋白酶[pepsin] 1.0左右伴花生球蛋白[conarrachin] 3.9 糜蛋白酶（胰凝乳蛋白酶[chymotrypsin]8.1角蛋白类[keratins] 3.7-5.0 牛血清白蛋白[bovine serumalbumin]4.9还原角蛋白[keratein] 4.6-4.7 核糖核酸酶（牛胰）[ribonuclease或Rnase(bovine pancreas)]7.8胶原蛋白[collagen] 6.5-6.8 甲状腺球蛋白[thyroglobulin] 4.58鱼胶[ichthyocol] 4.8-5.2 胸腺核组蛋白[thymonucleohistone]4左右白明胶[gelatin] 4.7-5.0 β-酷蛋白[β-casein] 4.5α-酷蛋白[α-casein] 4.0-4.1 γ-酷蛋白[γ-casein] 5.8-6.0 α-卵清粘蛋白[α-ovomucoid]3.83-4.416．常用DNA分子量标准参照物λDNA/Hi ndⅢλDNA/EcoRⅠλ/HindⅢ+EcoRⅠpBR322/HaeⅢ23130 21226 21227 587 123 9416 7421 5148 405 104 6557 5804 4973 504 89 4361 5643 4268 458 80 2322 4843 3530 434 64 2027 3530 2027 267 57 564 1904 234 51 125 1584 213 211375 192 18974 184 11831 124 75641257．核苷和脱氧核苷三磷酸的物化常数化合物相对分子质量最大吸收波长（pH7）×10-3摩尔消光系数（pH7）吸收比值（280/260）碱基pKaATP 507.2 259 15.4 0.15 4.1CTP 483.2 271 9.1 0.97 4.8GTP 523.2 253 13.7 0.66 3.3,9.3 UTP 484.2 262 10.0 0.38 9.5dATP 491.2 259 15.2 0.15 4.1dCTP 467.2 271 9.1 0.97 4.8dGTP 507.2 253 13.7 0.67 3.3,9.3 TTP 482.2 267 9.6 0.73 9.38．嘌呤、嘧啶碱基、核苷和核苷酸相对分子质量嘌呤、嘧啶碱基核苷核苷酸H-型Na2-型腺嘌呤135.11 腺苷267.24 腺苷酸347.22 391.22 鸟嘌呤151.15 鸟苷283.26 二磷酸腺苷427.20黄嘌呤152.11 黄苷284.24 三磷酸腺苷507.20次黄嘌呤136.11 次黄苷268.24 3’,5’-环腺苷酸329.20胞嘧啶111.10 胞苷243.23 鸟苷酸363.24 407.22 尿嘧啶112.09 尿苷244.20 肌苷酸348.22胞腺嘧啶126.11 脱氧腺苷251.24 尿苷酸323.21 367.31 脱氧鸟苷267.24 脱氧腺苷酸324.18 368.18脱氧肌苷252.24 脱氧鸟苷酸331.22脱氧胞苷227.22 脱氧胞苷酸347.23脱氧尿苷228.20 脱氧胞腺苷酸307.20脱氧胸腺苷242.223 332.211．放射性核素衰变表3H35S32P125I131I时间(年)剩余活性(%)时间(年)剩余活性(%)时间(年)剩余活性(%)时间(年)剩余活性(%)时间(年)剩余活性(%)194.5298.4195.3495.50.298.3 289.3596.1290.8891.20.496.6 384.41092.3386.51287.10.695.0 479.81588.7482.51683.1 1.091.8 575.42085.3578.52079.4 1.687.2 671.32582.0674.82475.8 2.381.2 767.43178.1771.22872.4 3.176.7 863.73774.5867.83269.1 4.071.0 960.24371.0964.73666.0 5.065.2 1056.95067.01061.24063.0 6.159.3 1153.85763.61158.74460.27.353.4 1250.96559.61255.94857.48.150.0 12.350.07356.01353.25254.88152.51450.75652.487.150.014.350.06050.02．放射性测定单位单位定义换算吸收放射线剂量（拉得rad）100尔格/克（电离辐射传给单位质量物质的能量）0.87rad=1r伦琴（r）使1克空气产生1.6×1012离子对的X或γ-射线的照射剂量r/0.87=1rad居里（Ci）每秒放射性衰变3.7×1010个原子的量1Ci=103mCi=106μCi 毫居（mCi）千分之一居里1mCi=10-3Ci=103μCi 微居（μCi）百万分之一居里（每分钟衰变2.2×106次）1μCi=10-6Ci=10-3M Ci 伯克莱尔（Bq）每秒衰变1个原子的量1Bq=3.7×10-10Ci千伯克莱尔（kBq）1kBq=103Bq百万伯克莱尔（MBq）1MBq=106Bq兆伯克莱尔（GBq）1GBq=109Bq每分钟衰变数（dpm）每分钟衰变的原子数 2.2×106dpm=1μCi每分钟计数（cpm）测量仪测出每分钟β粒子数Cpm=dpm×计数器效率常用的缓冲液［作者：佚名转贴自：本站原创更新时间：2004-3-25 编辑：supi］常用缓冲溶液的配制方法测序凝胶加样缓冲液常用的电泳缓冲液2×SDS凝胶加样缓冲液凝胶加样缓冲液各种pH值的Tris缓冲液常用缓冲液的pKa值温度对常用缓冲液pH的影响标准缓冲液pH值与温度对照表常用作缓冲剂的酸解离常数1．常用缓冲溶液的配制方法（1）甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）X毫升0.2 mol/L甘氨酸+Y毫升0.2 mol/L HCI，再加水稀释至200毫升pH X Y pH X Y2.0 50 44.03.0 50 11.42.4 50 32.43.2 50 8.22.6 50 24.23.4 50 6.42.8 50 16.83.6 50 5.0甘氨酸分子量 = 75.07，0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。
2019年遗传密码子表
精氨酸ArgR174.212.48（arginine）天冬酰氨AsnN132.1）（asparagine天冬氨酸（aspartic AspD133.13.86acid）半胱氨酸CysC121.12）（systeine谷氨酰胺Gln Q146.15）glutamine（谷氨酸E 147.13 4.25（glutamic Gluacid）甘氨酸 G75.07Glyglycine）（组氨酸H 155.16 6.0His（histidine）异亮氨酸lleI131.17）（isoleucine亮氨酸LeuL131.17（leucine）赖氨酸LysK146.19（lycine）甲硫氨酸Met M149.21）（methionine苯丙氨酸（phenylanaliPhe P165.19ne）氨酸脯 PPro115.13proline）（酸氨丝 SSer105.06（serine）苏氨酸ThrT119.12(threonine)色氨酸W 204.22 Trp（tryptophan）酪氨酸TyrY181.19 10.07）tyrosine（缬氨酸ValP117.15（valine）124 5SrRNA3.6×100（大肠杆tRNA4 752.5×10 菌）3．常用核酸蛋白换算数据 1）重量换算（-12-6g 1pg=10 μg=10g 1-15-9g 1fg=10 1ng=10g2 （）分光光度换算：g/ml 双链DNA=50μ 1A260g/ml μDNA=30 1A单链260g/ml RNA=40 1A单链μ260（3）摩尔换算：DNA g 100bpDNA=1.52pmol=3.03pmol末端 1μg pBR322 DNA=0.36pmol μ 1g 1pmol 1000bp DNA=0.66μg1pmol pBR322=2.8μ5道尔顿1kb双链DNA（钠盐）=6.6×105道尔顿单链1kbDNA（钠盐）=3.3×105道尔顿单链1kbRNA（钠盐）=3.4×10 （）蛋白摩尔换算：4g μ，100000蛋白质=10分子量 100pmolg =5000100pmol 分子量50，蛋白质μg =1μ蛋白质，分子量 100pmol10000 道尔顿氨基酸的平均分子量=126.7 /DNA换算：）蛋白质5（4蛋白质MW个氨基酸编码容量=3.7×101kb DNA=333血清白蛋白[serum albumin] 4.7-4.9 血红蛋白（马）6.92[hemoglobin(horse)]肌清蛋白[myoal bumin] 3.5 血蓝蛋白[hemerythrin] 4.6-6.45.6 [chlorocruorin] 肌浆蛋白[myogen A] 蚯蚓血红蛋白6.34.3-4.5血绿蛋白[chlorocruorin]5.1-5.3β-乳球蛋白[β-lactoglobulin]卵黄蛋白[livetin]4.8-5.0无脊椎血红蛋白4.6-6.2[erythrocruorins]γ—球蛋白（人）5.8;6.6细胞色素C[cytochrome C]9.8-10.1γ14.47-4.571-globulin(human)] [）[rhodopsin]7.3;8.2视紫质γ—球蛋白（人2-globulin(human)] [γ25.2 促凝血酶原激酶[thromboplastin] 5.2-5.5 肌球蛋白A[myosin A] 5.5 脂蛋白[α原肌球蛋白[myosin A] 5.1 -lipoprotein] -α115.4 铁传递蛋白[siderophilin] β5.9 -lipoprotein] 脂蛋白β[11-5.93.4-3.5卵β-黄[fetuin]胎球蛋白脂磷蛋白[β-lipovitellin]血纤蛋白原[fibrinogen]5.5-5.8芜菁黄花病毒[turnip yellow 3.75vvirus]α-眼晶体蛋白4.8牛痘病毒[vaccinia virus]5.3[α-crystallin]β-眼晶体蛋白6.0生长激素[somatotropin]6.85[β-crystallin]胰岛素[insulin] 5.35 催乳激素[prolactin] 5.73 1.0左右[pepsin]5.1 花生球蛋白[arachin] 胃蛋白酶8.1乳胰蛋生伴花球白3.9酶蛋糜白（凝蛋酶白[conarrachin] [chymotrypsin]1257．核苷和脱氧核苷三磷酸的物化常数摩尔消光系数吸收比值相对分子化合最大吸收波长pKa 碱基-3（280/260）（物质量（pH7）×10 pH7）0.15 259 507.2 15.4 ATP 4.14.8 9.1 483.2 0.97 271 CTP3.3,9.3 523.2 13.7 GTP 253 0.669.5 UTP 262 0.38 484.2 10.04.1 0.15 dATP 259 15.2 491.24.8 271 467.2 9.1 dCTP 0.973.3,9.3 507.2 13.7 253 dGTP 0.679.3482.20.732679.6TTP．嘌呤、嘧啶碱基、核苷和核苷酸相对分子质量8核苷酸核苷嘌呤、嘧啶碱基H-型 Na-型2391.22 267.24 135.11 腺嘌呤腺苷腺苷酸347.22鸟嘌呤鸟苷二磷酸腺苷 151.15 427.20 283.26507.20 三磷酸腺苷黄嘌呤152.11 黄苷 284.24环腺苷酸3',5' 268.24 次黄嘌呤136.11 -329.20 次黄苷407.22 111.10 鸟苷酸胞嘧啶胞苷363.24 243.23 肌苷酸尿苷112.09 244.20 尿嘧啶348.22367.31 251.24 胞腺嘧啶323.21 尿苷酸脱氧腺苷126.11368.18 267.24 脱氧鸟苷脱氧腺苷酸324.18脱氧肌苷331.22 脱氧鸟苷酸252.24脱氧胞苷酸脱氧胞苷227.22 347.23脱氧胞腺苷酸228.20307.20脱氧尿苷脱氧胸腺 332.21 242.223苷．常用的缓冲液［作者：佚名转贴自：本站原创更新时间：2004-3-25 编辑：supi］常用缓冲溶液的配制测序凝胶加样缓冲液凝胶加样缓冲液2×SDS常用的电泳缓冲液方法的pH温度对常用缓冲液值的各种pHTris缓冲pKa凝胶加样缓冲液常用缓冲液的值液影响值与温pH标准缓冲液常用作缓冲剂的酸解离常数度对照表．1．常用缓冲溶液的配制方法（1）甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）X毫升0.2 mol/L甘氨酸+Y毫升0.2 mol/L HCI，再加水稀释至200毫升pH X Y pH X Y11.4 50 3.0 44.0 50 2.08.2 50 3.2 50 2.4 32.46.4 50 3.4 24.2 2.6 505.016.8502.83.650甘氨酸分子量 = 75.07，0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。
常用蛋白质分子量标准参照物
中分子量标准参照
低分子量标准参照
名 称
Mr
名 称
Mr
名 称
Mr
肌球蛋白
212,000
磷酸化酶B
97,000
碳酸酐酶
31,000
β-半乳糖苷酶
116,000
牛血清清蛋白
66,200
大豆胰蛋白酶抑制剂
21,000
磷酸化酶B
97,400
谷氨酸脱氢酶
55,000
马心肌球蛋白
16,000
牛血清清蛋白
66,200
卵清蛋白
42,Байду номын сангаас00
溶菌酶
14,000
过氧化氢酶
57,000
醛缩酶
40,000
肌球蛋白（F1）
8,100
醛缩酶
40,000
碳酸酐酶
31,000
肌球蛋白（F2）
6,200
大豆胰蛋白酶抑制剂
21,000
肌球蛋白（F3）
2,500
溶菌酶
14,000
分子量标准参照中分子量标准参照低分子量标准参照名称mr名称mr名称mr肌球蛋白212000磷酸化酶b97000碳酸酐酶31000半乳糖苷酶116000牛血清清蛋白66200大豆胰蛋白酶抑制剂21000磷酸化酶b97400谷氨酸脱氢酶55000马心肌球蛋白16000牛血清清蛋白662
常用蛋白质分子量标准参照物
常用蛋白质分子量标准参照物
分子量标准参照中分子量标准参照低分子量标准参照名 称Mr名 称Mr名 称Mr肌球蛋白212,000 磷酸化酶B97,000 碳酸酐酶31,000 β-半乳糖苷酶116,000 牛血清清蛋白66,200 大豆胰蛋白酶抑制剂21,000 磷酸化酶B97,400 谷氨酸脱氢酶55,000 马心肌球蛋白16,000 牛血清清蛋白66,2
常用蛋白质分子量标准参照物[参照材料]
![常用蛋白质分子量标准参照物[参照材料]](https://img.taocdn.com/s3/m/33653d39fe4733687e21aaf4.png)
2×106
15×106
150×106
1×104~2.5×105
2.5×104~7×105
5×104~2×106
2×105~15×106
5×105~15×107
Seravac Laboratories,
Maidenhead, England
Bio-GelA-0.5M
Bio-GelA-1.5M
Bio-GelA-5M
Bio-GelA-15M
Bio-GelA-50M
Bio-GelA-150M
10
8
6
4
2
1
0.5×105
1.5×106
5×106
15×105
50×106
150×106
<1×104~2.5×106
<1×104~1.5×106
1×104~5×106
4×104~15×106
1×105~50×106
60000~20×106
70000~40×106
60000~20×106
10000~4×106
70000~40×106
60000~20×105
10000~4×106
24~44
24~44
24~44
20~40
20~40
25~75
25~75
25~75
25~75
平均90
平均90
60~200
45~165
45~165
（二）聚丙烯酰胺凝胶的技术数据
型号
排阻的下限
（Mr）
分级分离的范围
（Mr）
膨胀后的床体积
（mL/g干凝胶）
膨胀所需最少时间
（室温，小时）
球蛋白与白蛋白分子量
球蛋白和白蛋白的分子量有所不同。
白蛋白的分子量约为66458，而球蛋白的分子量则在16万-20万的范围内。
白蛋白是肝脏合成的，它是血浆中含量最高的蛋白质之一，也是血浆中很重要的载体，许多水溶性差的物质可以通过与白蛋白的结合而被运输。
白蛋白的生理功能主要是维持血液胶体渗透压，为机体提供营养物质，还可以保持机体内的酸碱平衡。
球蛋白也是由肝脏合成，其在人体血浆中的含量也很多。
球蛋白的生理功能主要是免疫作用，能够帮助机体抵抗外来病原体的入侵。
请注意，不同类型的球蛋白和白蛋白的分子量可能有所不同，以上数据仅供参考。
如果需要更详细或具体的信息，建议咨询相关领域的专家或查阅专业文献。
蛋白质大小范围
蛋白质大小范围
蛋白质是生物体中最重要的分子之一，它们执行着各种不同的功能，包括运输、维护、代谢等等。
蛋白质的大小范围相当广泛，从几个氨基酸残基的小肽链到数百个氨基酸残基的大蛋白质。
其中，小肽链通常被称为寡肽，分子量一般在1,000 Da以下；中等大小的蛋白质分子量在10,000-100,000 Da之间，而大蛋白质则超过了100,000 Da。
此外，还有一些特殊的蛋白质，如超大分子量蛋白质、超低分子量蛋白质等等。
蛋白质的大小范围影响着它们的结构、功能和应用领域，深入了解蛋白质的大小范围也有助于更好地理解生命的奥秘。
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【免费下载】常见蛋白质分子量参考值
常见蛋白质分子量参考值（单位：dalton）蛋白质分子量肌球蛋白[myosin]甲状腺球蛋白[thyroglobulin]β-半乳糖苷酶[β-galactosidase]副肌球蛋白[paramyosin]磷酸化酶a[phosphorylase a]血清白蛋白[serum albumin]L-氨基酸氧化酶[L-amino acid oxidase]地氧化氢酶[catalase]丙酮酸激活酶[pyruvate kinase]谷氨酸脱氢酶[glutamate dehydrogenase]亮氨酸氨肽酶[glutamae dehydrogenase]γ-球蛋白，H链[γ-globulin, H chain]延胡索酸酶（反丁烯二酸酶）[fumarase]卵白蛋白[ovalbumin]醇脱氢酶（肝）[alcohol dehydrogenase (liver)]烯醇酶[enolase]醛缩酶[aldolase]肌酸激酶[creatine kinase]220,000 165,000 130,000 100,000 94,000 68,000 63,000 60,000 57,000 53,000 53,000 50,000 49,000 43,000 41,000 41,000 40,000 40,000胃蛋白酶原[pepsinogen]D-氨基酸氧化酶[D-amino acid oxidase]醇脱氢酶（酵母）[alcohol dehydrogenase (yeast)]甘油醛磷酸脱氢酶[dlyceraldehyde phosphate dehydrogenase]原肌球蛋白[tropomyosin]乳酸脱氢酶[lactate dehydrgenase]胃蛋白酶[pepsin]转磷酸核糖基酶[phosphoribosyl transferase]天冬氨酸氨甲酰转移酶，C链[aspertate transcarbamylase, C chain]羧肽酶A[carboxypeptidase A]碳酸酐酶[carbonic anhydrase]枯草杆菌蛋白酶[subtilisin]γ-球蛋白，L链γ-blobulin,L chain[]糜蛋白酶原（胰凝乳蛋白酶原）[chymotrypsinogen胰蛋白酶[trypsin]木瓜蛋白酶（羧甲基）[papain (carboxymethyl)]β-乳球蛋白[β-lactoglobulin]烟草花叶病毒外壳蛋白（TWV外壳蛋白）[TWV coat protein肌红蛋白[myoglobin]天门冬氨酸氨甲酰转移酶，R链[aspartate transcarbamylase, R chain]血红蛋白[h(a)emoglobin]40,000 37,000 37,000 36,000 36,000 36,000 35,000 35,000 34,000 34,000 29,000 27,600 23,500 25,700 23,300 23,00018,400 17,50017,200 17,000Qβ外壳蛋白[Qβ coat protein]溶菌酶[lysozyme]R17外壳蛋白[R17 coat protein]核糖核酸酶[ribonuclease或RNase]细胞色素C[cytochrome C]糜蛋白酶（胰凝乳蛋白酶）[chymotrypsin]15,500 15,000 14,300 13,750 13,700 11,700 11,000。
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十、常用蛋白质分子量标准参照物
十一、层析法常用数据表及性质
（一）离子交换纤维素
*：英国Whatman厂的型号，原来有旧型号如DE-1，为长纤维性，长度1000微米。
还有DE-11，纤维性，50～250微米，对牛血清清蛋白的吸附容量仅为130毫克/克。
注：上述各种型号的凝胶都是亲水性的多孔颗粒，在水和缓冲溶液中很容易膨胀，生产厂为Bio-Rad Laboratories,Rich-mond, California, U. S. A.
（三）琼脂糖凝胶的技术数据
十二、常用缓冲溶液的配制方法
1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）
甘氨酸分子量= 75.07，0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。
2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L）
邻苯二甲酸氢钾分子量= 204.23，0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升
Na2HPO4分子量= 14.98，0.2 mol/L溶液为28.40克/升。
Na2HPO4-2H2O分子量= 178.05，0.2 mol/L溶液含35.01克/升。
C4H2O7·H2O分子量= 210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。
①使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH值有变化，再用少量50% 氢氧化钠溶液
或浓盐酸调节，冰箱保存。
柠檬酸C6H8O7·H2O：分子量210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。
柠檬酸钠Na3 C6H5O7·2H2O：分子量294.12，0.1 mol/L溶液为29.41克/毫升。
Na2Ac·3H2O分子量= 136.09，0.2 mol/L溶液为27.22克/升。
7．磷酸盐缓冲液
Na2HPO4·2H2O分子量= 178.05，0.2 mol/L溶液为85.61克/升。
Na2HPO4·2H2O分子量= 358.22，0.2 mol/L溶液为71.64克/升。
Na2HPO4·2H2O分子量= 156.03，0.2 mol/L溶液为31.21克/升。
Na2HPO4·2H2O分子量= 178.05，1/15M溶液为11.876克/升。
KH2PO4分子量= 136.09，1/15M溶液为9.078克/升。
8．磷酸二氢钾–氢氧化钠缓冲液（0.05M）
巴比妥钠盐分子量=206.18;0.04M溶液为8.25克/升
10．Tris–盐酸缓冲液（0.05M，25℃）
50毫升0.1M三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液与X毫升0.1N盐酸混匀后，加水稀释至100毫
三羟甲基氨基甲烷（Tris）HOCH2 CH2OH
C
HOCH2 NH2
分子量=121.14;
0.1M 溶液为12.114克/升。
Tris 溶液可从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。
硼砂Na 2B 4O 7·H 2O,分子量=381.43;0.05M 溶液（=0.2M 硼酸根）含19.07克/升。
硼酸H 2BO 3,分子量=61.84,0.2M 溶液为12.37克/升。
硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。
硼砂Na 2B 4O 7·10H 2O,分子量=381.43;0.05M 溶液（=0.2M 硼酸根）含19.07克/升。
硼酸H 2BO 3，分子量=61.84, 0.2M 溶液为12.37克/升。
硼砂 易
失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。
12．甘氨酸–氢氧化钠缓冲液（0.05M ）
甘氨酸分子量=75.07;0.2M 溶液含15.01克/升。
13．硼砂-氢氧化钠缓冲液（0.05M 硼酸根）
X 毫升0.05M 硼砂+Y 毫升0.2NNaOH 加水稀释至200毫升
硼砂Na 2B 4O 7·10H 2O,分子量=381.43;0.05M 溶液为19.07克/升。
14．碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（0.1M ）
2+2+Na 2CO
2·10H 2O 分子量=286.2;0.1M 溶液为28.62克/升。
N 2HCO 3分子量=84.0;0.1M 溶液为8.40克/升。
十四、硫酸铵饱和度的常用表
①在25℃下，硫酸铵溶液由初浓度调到终浓度时，每升溶液所加固体硫酸铵的克数。
①在0℃下，硫酸铵溶液由初浓度调到终浓度时，每100毫升溶液所加固体硫酸铵的克数。
r为离心机头的半径（角头），或离心管中轴底部内壁到离心机转轴中心的距离（甩平头），单位为厘米。
rpm为离心机每分钟的转速。
RCF为相对离心力，以地心引力即重力加速度的倍数来表示，一般用g(或数字×g)表示。
附图11是由下述公式计算而来的：
RCF = 1.119 × 10-5× r × (rpm)2
将离心机转数换算为离心力时，首先，在r标尺上取已知的半径和rpm标尺上取已知的离心机转数，然后，将这两点间划一条直线，在图中间RCF标尺上的交叉点即为相应离心力数值。
注意，若已知转数值处于rpm标尺的右边，则应读取RCF标尺右边的数值。
同样，转数值处于rpm标尺左边，则读取RCF标尺左边的数值。