11种木霉菌对葡萄灰霉病菌的拮抗作用
13种杀菌剂对葡萄灰霉病病菌的室内毒力及田间防治效果
13种杀菌剂对葡萄灰霉病病菌的室内毒力及田间防治效果范昆;曲健禄;付丽;张勇;武海斌;陶吉寒【摘要】筛选当前对葡萄灰霉病有明显防治效果的杀菌剂.采用菌丝生长速率法、悬滴法分别测定杀菌剂对葡萄灰霉病病菌的室内毒力,并进行田间防治试验研究.结果表明,啶酰菌胺、咪鲜胺、咯菌腈对孢子萌发的抑制作用最强,其EC50分别为0.1204、0.1396、0.1838μg/mL;嘧菌环胺、啶酰菌胺、啶菌唑、咯菌腈对菌丝生长的抑制作用最强,其EC50分别为0.2017、0.3266、0.4592、0.5585μg/mL.田间防治试验结果表明,50％嘧菌环胺水分散粒剂、50％啶酰菌胺水分散粒剂、50％咪鲜胺锰盐可湿性粉剂、50％咯菌腈可湿性粉剂的防治效果最好,在试验浓度范围内对葡萄安全无药害,是适合推广应用于防治葡萄灰霉病的杀菌剂品种.【期刊名称】《江苏农业科学》【年(卷),期】2017(045)024【总页数】4页(P95-98)【关键词】杀菌剂;葡萄灰霉病;毒力测定;田间药效;防治效果【作者】范昆;曲健禄;付丽;张勇;武海斌;陶吉寒【作者单位】山东省果树研究所,山东泰安271000;山东省果树研究所,山东泰安271000;山东省果树研究所,山东泰安271000;山东省果树研究所,山东泰安271000;山东省果树研究所,山东泰安271000;山东省果树研究所,山东泰安271000【正文语种】中文【中图分类】S482.2;S436.631.1+9葡萄灰霉病是由灰葡萄孢霉(Botrytis cinerea Pers.)引起的葡萄生产中危害最大的病害之一，年度损失20%左右，发病严重的果园病穗率可达50%以上。
葡萄灰霉病除在生长季危害果实外，产后的贮藏阶段也能引起毁灭性地损失[1]。
目前，生产上防治葡萄灰霉病仍以化学防治为主，由于灰霉病菌繁殖速度快、遗传变异大、适合度高，加之田间连续多年使用单一药剂防治，灰霉病菌对多菌灵、腐霉利、乙霉威等杀菌剂已产生了抗药性，甚至出现了多重抗药性[2-7]。
木霉菌的功过
•
•
•生物防治应用
• 生防活性
1、 拮抗作用 木霉菌通过产生小分子的抗生素和大分子的抗菌蛋白戒胞壁降解酶类来抑制病 原菌的生长、繁殖和侵染。木霉菌在抗生和菌寄生中,可产生几丁质酶、β21 ,3 葡聚糖酶、纤维素酶和蛋白酶来分解植物病原真菌的细胞壁戒分泌葡萄糖 苷酶等胞外酶来降解病原菌产生的抗生毒素。同时，木霉菌还分泌抗菌蛋白 戒裂解酶来抑制植物病原真菌的侵染。 2、 竞争作用 木霉菌可以通过快速生长和繁殖而夺取水分和养分、占有空间、消耗氧气等,以 至削弱和排除同一生境中的灰霉病病原物。 3、 重寄生作用 研究发现木霉菌会在特定环境里形成腐霉对灰霉病菌具有重寄生作用,它进入寄 主菌丝后形成大量的分枝和有性结构,因而能抑制葡萄灰霉病症状的出现。
• 木霉菌生物农药系新型生物杀菌剂。通过产生抗生素、营养
竞争、微寄生、细胞壁分解酵素、以及诱导植物产生抗性等机制 ，对于多种植物病原菌具有拮抗作用，具有保护和治疗双重功效 ，可有效防治土传性真菌病害，在苗床使用木霉菌剂，可提高育 苗与移植的成活率，保持秧苗健壮生长。也可用于防治灰霉病。 本品特效期长，作用位点多，不产生抗药性，突破常规杀菌剂 受限条件，不怕高湿，而且湿度越大防治效果越好。杀菌谱广， 无残留毒性，对作物没有任何不良影响。
•生物农药应用
木霉菌可抑制多种植物真菌（至目前报道约29种真菌）病，研究最多的 真菌是根腐病、立枯病、猝倒病、枯萎病等土传病害、灰霉菌、腐霉菌、 丝核菌、炭疽菌、镰刀菌、菌核病。木霉菌使用于拌土、拌种、注射及喷 洒，经实验能减少土壤中病原真菌的密度，并降低病害的发生。
•
生物农药是指利用生物活体或其代谢产物对害虫、病菌、杂草、线虫、 鼠类等；生物农药是有害生物进行防治的一类农药制剂，或者是通过仿 生吅成具有特异作用的农药制剂。关于生物农药的范畴，目前国内外尚 无十分准确统一的界定。按照联吅国粮农组织的标准，生物农药一般是 天然化吅物或遗传基因修饰剂，主要包括生物化学农药(信息素、激素、 植物调节剂、昆虫生长调节剂)和微生物农药(真菌、细菌、昆虫病毒、原 生动物，或经遗传改造的微生物)两个部分，农用抗生素制剂不包括在 内。我国生物农药按照其成分和来源可分为微生物活体农药、微生物代 谢产物农药、植物源农药、动物源农药四个部分。按照防治对象可分为 杀虫剂、杀菌剂、除草剂、杀螨剂、杀鼠剂、植物生长调节剂等。就其利 用对象而言，生物农药一般分为直接利用生物活体和利用源于生物的 生理活性物质两大类，前者包括细菌、真菌、线虫、病毒及拮抗微生物 等，后者包括农用抗生素、植物生长调节剂、性信息素、摄食抑制剂、保 幼激素和源于植物的生理活性物质等。但是，在我国农业生产实际应用 中，生物农药一般主要泛指可以进行大规模工业化生产的微生物源农 药。
不同葡萄品种灰霉病抗性鉴定及褪黑素抗病机理初探
核农学报2024，38（4）：0674~0684Journal of Nuclear Agricultural Sciences不同葡萄品种灰霉病抗性鉴定及褪黑素抗病机理初探王宪璞代瑛姿郭宏扬杨志峰许丽丽 *（石河子大学农学院，特色果蔬栽培生理与种质资源利用兵团重点实验室，新疆石河子832003）摘要：灰霉病是严重危害葡萄生长和果实品质的主要病害之一。
为探究外源褪黑素（MT）缓解葡萄灰霉病发生的抗性机理，本研究以10个新疆主栽葡萄品种为试材，结合叶片、果实基本性状与病情严重度相关性分析，对不同葡萄品种灰霉病抗性进行综合评价；以成熟离体果实为试材，测定了MT对关键抗性指标的影响。
结果表明，部分参试葡萄品种灰霉病抗性水平差异显著，接种灰霉病病原菌（Botrytis cinerea）10 d后，阳光玫瑰和克瑞森葡萄叶片和果实表现感病，蓝宝石葡萄叶片表现感病，其余品种均表现不同程度的抗性，其中巨峰葡萄隶属函数综合得分最高、抗性最强。
B. cinerea侵染葡萄叶片后，不同抗性品种的叶片相对电导率、超氧阴离子、丙二醛及游离脯氨酸水平均呈上升趋势，其中阳光玫瑰和克瑞森葡萄叶片侵染前后各指标差异显著或极显著，巨峰葡萄叶片除游离脯氨酸水平在侵染前后差异显著外，其余指标均不显著。
外源100 μmol·L-1 MT提高了葡萄果实总酚含量、总抗氧化水平和苯丙氨酸淀粉酶、多酚氧化酶活性，缓解了B. cinerea对果实的危害，此外，MT显著上调了VvCu/Zn-SOD1a等活性氧清除相关基因的表达（以巨峰葡萄最为明显）。
综上所述，MT通过促进葡萄果实酚类物质代谢与维持活性氧平衡提高对灰霉病的抗性。
研究结果不仅为揭示褪黑素提高葡萄对灰霉病菌抗性的生理基础提供了理论依据，也为褪黑素提高葡萄灰霉病抗性的田间应用和优质抗病种质发掘利用提供了数据支撑。
关键词：葡萄；灰霉病；褪黑素；抗氧化性DOI：10.11869/j.issn.1000‑8551.2024.04.0674葡萄（Vitis Vinifera L.）是世界四大水果之一，也是重要的经济作物，栽培面积和产量逐年递增，截至2022年，我国葡萄栽培面积位居世界第三［1］。
葡萄病虫害防治的对应农药
葡萄病虫害防治的对应农药1．葡萄害虫防治对应杀虫剂1．1葡萄透翅蛾：阿灭灵、安绿宝、阿托力、阿耳发特、虫赛死、敌杀死、高效氯氰菊酯、保得、功夫等；1．2斑衣蜡蝉：融蚧、速扑杀、速蚧克、杀扑磷、马拉硫磷、杀螟硫磷、辛硫磷、阿灭灵、阿托力、阿耳发特、绿百事、安绿宝、功夫、歼灭、高效氯氰菊酯、保得等；1．3葡萄根瘤蚜：敌敌畏、辛硫磷、好劳力、安民乐、乐斯本、毒死蜱等；1．4葡萄短须螨：石硫合剂、机油乳剂、硫悬浮剂、多硫化钡、尼索朗、农螨丹、双甲脒、螨涕、霸螨灵、唑螨酯、溴螨酯、扫螨净、哒螨灵、卡死克、浏阳霉素、苦参碱、阿维菌素、克螨特、噻螨酮、螨死净、苯丁锡等；1．5葡萄瘿螨：石硫合剂、硫悬浮剂、尼索朗、螨涕、双甲脒、扫螨净、四螨嗪、三唑锡、噻螨酮、螨死净等；1．6二星叶蝉：马拉硫磷、杀螟硫磷、喹硫磷、蚜虱净、吡虫啉、阿灭灵、安绿宝、阿耳发特、阿托力、天王星、虫赛死、敌杀死、功夫、高效氯氰菊酯、保得、百树菊酯等；介壳虫：石硫合剂、柴油乳剂、矿物油乳剂、蚧螨灵、融蚧、杀扑磷、速扑杀、蚧死净、优乐得、噻嗪酮等；1．7叶螨（二斑叶螨、山楂叶螨）：石硫合剂、机油乳剂、硫悬浮剂、多硫化钡、螨涕、炔螨特、克螨特、噻螨酮、尼索朗、农螨丹、霸螨灵、阿波罗、双甲脒、速螨酮、扫螨净、哒螨灵、苦参碱、苯丁锡、三唑锡、三磷锡、倍乐霸、灭扫利、天王星、联苯菊酯、氟丙菊酯、吡螨胺、螨死净、螨即死、双甲脒、卡死克、浏阳霉素、阿维菌素、阿维虫清、爱福丁、虫螨光、害通杀等。
1．8金龟子：①辛硫磷、二嗪农、林丹、好劳力、安民乐、乐斯本等；②树上用药：辛硫磷、氰戊菊酯、杀灭菊酯、安绿宝、歼灭、兴棉宝、灭百可、保得等；1．9绿盲蝽：吡虫啉、康福多、艾美乐、蚜虱净、安棉特、好年冬、丙硫克百威、啶虫脒、好劳力、安民乐、毒丝本、乐斯本、安绿宝、兴棉宝、保得等。
2．葡萄病害防治对应杀菌剂2．1葡萄霜霉病：波尔多液、克菌宝、可杀得2000、绿乳铜、绿得保、铜大师、铜帅、普德金、保加新、代森锌、大丰、喷富露、大生富、丙森锌、代森联、品润、安泰生、猛杀生、大生M-45、科博、易保、噻菌酮、必备、多菌灵、特哈、纳米欣、玛贺、甲基托布津、安克、克露、霉多克、普力克、阿米西达、乙霉威、菌立灭、甲霜灵、三乙磷酸铝、杀毒矾、雷多米尔、抑快净、烯酰吗啉、氟吗啉、霜脲氰、霜霉威、氟吗啉、缬霉威等；2．2葡萄黑痘病：保加新、普德金、金纳海、大丰、喷富露、大生富、安泰生、喷克、易保、新万生、大生M-45、福美双、特哈、多菌灵、纳米欣、甲基托布津、金力士、烯唑醇、霉能灵、福星、世高、敌力脱、好力克、甲基硫菌灵、多菌灵等；2．3葡萄灰霉病：普德金、喷富露、保加新、金纳海、福美双、大丰、喷克、扑海因、大生富、大生M-45、易保、百可得、速克灵、腐霉利、纳米欣、多菌灵、甲基硫菌灵、金力士、敌力脱、农利灵、嘧霉胺、宝丽安、多抗霉素、戴挫霉、施佳乐、乙霉威、乙烯菌核利、过氧乙酸、武夷霉素、木霉菌等；2．4葡萄炭疽病：波尔多液、金纳海、福美双、普德金、大生富、保加新、大丰、安泰生、大生M-45、喷克、新万生、鸽哈、多菌灵、易保、纳米欣、甲基硫菌灵、甲基托布津、金力士、炭疽福美、溴菌清、丙环唑、施保功、溴菌清、咪鲜胺、苯菌灵、世高、醚菌酯、福星、好力克、仙生等；2．5葡萄白粉病：石硫合剂、硫悬浮剂、保加新、普德金、百菌清、达克宁、鸽哈、氯苯嘧啶醇、金力士、速保利、丙环唑、翠贝、特富灵、敌力脱、粉锈宁、己唑醇、百理通、好力克、福星、烯唑醇、腈菌唑、氟菌唑、稳歼菌、十三吗啉、信生、仙生等；2．6葡萄白腐病：波尔多液、克菌宝、金纳海、福美双、普德金、保加新、代森锌、大生富、大丰、丙森锌、代森联、安泰生、易保、喷克、特哈、科博、必备、金力士、纳米欣、烯唑醇、苯菌灵、氟硅唑、福星、万兴、多菌灵、甲基硫菌灵、世高、稳歼菌、霉能灵、烯唑醇、多菌灵、恶醚唑等；2．7葡萄褐斑病：石硫合剂、多硫化钡、波尔多液、金纳海、绿得保、绿乳铜、科博、普德金、保加新、大丰、鸽哈、大生富、安泰生、大生M-45、喷克、新万生、猛杀生、易保、多菌灵、纳米欣、烯唑醇、甲基硫菌灵、甲基托布津等；2．8葡萄黑腐病：石硫合剂、索利巴尔、多硫化钡、波尔多液、金纳海、百菌清、退菌特、普德金、普德金、保加新、鸽哈、多菌灵、苯菌灵、纳米欣、金力士、甲基托布津、甲基硫菌灵等；2．9葡萄蔓枯病：石硫合剂、多硫化钡、波尔多液、普德金、普德金、保加新、金纳海、鸽哈、喷富露、大丰、大生富、喷克、猛杀生、新万生、易保、大生M-45、敌菌丹、克菌丹、多菌灵、苯菌灵、纳米欣、金力士、甲基托布津、中生霉素、福星、好力克等；2．10葡萄房枯病：石硫合剂、波尔多液、碱式硫酸铜、普德金、保加新、大丰、金纳海、绿得保、绿乳铜、科博、必备、鸽哈、纳米欣、苯菌灵、金力士、世高、醚菌酯、福星、好力克、仙生、甲基硫菌灵等；2．11葡萄穗轴褐枯病：普德金、金纳海、保加新、大丰、喷富露、喷克、扑海因、大生富、大生M-45、新万生、易保、猛杀生、多菌灵、甲基硫菌灵、纳米欣、鸽哈、金力士等；2．12葡萄毛毡病：石硫合剂、多硫化钡、索利巴尔、硫胶悬剂、螨涕、灭扫利、天王星、联苯菊酯、氟丙菊酯、吡螨胺、螨死净、卡死克、浏阳霉素、阿维菌素、阿维虫清等。
葡萄灰霉病发病时间原因及防治技巧
葡萄灰霉病发病时间原因及防治技巧葡萄种植过程中，总会出现各种病害，对葡萄的产量和品质造成很大影响，而葡萄灰霉病一年共有3次高发时期，分别是花期、幼果期、转色期至成熟，下面一起来了解葡萄灰霉病的症状及防治方法。
葡萄灰霉病的症状灰霉病主要为害葡萄花穗、幼果和接近成熟果穗或果梗，新稍及叶片。
果穗染病初呈灰色水浸状，很快变成暗褐色，整个果穗软腐。
新梢、叶片染病后，产生淡褐色，或不规则病斑。
有时会出现不明显轮纹，上生稀疏灰色霉层。
成熟果和果梗染病时，果面上出现褐色凹陷斑，整个果实很快软腐，果梗变黑，病部很快长出黑色菌核。
葡萄灰霉病发病原因1、葡萄园内排水不良、栽植密度过大，郁蔽不透风，更容易发病。
2、土壤粘性重、酸化严重时易发病。
3、葡萄园干透再浇水，造成裂梗或者裂果也易导致病害发生。
4、保护地内通风不良，湿度过大时易发病。
5、管理粗放、施磷钾肥不足、虫伤较多的葡萄园容易发病。
6、地势低洼、枝稍徒长，通风透光不足果园发病重。
葡萄灰霉病的防治方法1、预防措施结合秋季修剪清除病残体，摘除病花穗，减少菌核量，可以结合其它病害防治，做好越冬期的预防工作。
多施有机肥，增施磷钾肥，控制速效肥使用量，防止徒长，对生长过旺的枝蔓适当进行修剪，使葡萄园通风降湿，抑制发病。
2、药剂防治灰霉病防治时期是在花期前后、封穗期、转色后3个关键时期，及时喷洒40%嘧霉胺悬浮剂900倍液、41%聚砹.嘧胺水剂800倍液、50%异菌脲可湿性粉剂500~600倍液或25%异菌脲悬浮剂300倍液。
果实采收前喷洒60%噻菌灵可湿性粉剂1000倍液、10%多抗霉素可湿性粉剂600倍液即可防治。
葡萄灰霉病是大量引起葡萄落果的一种病害，近年有日趋严重之势，尤其是降雨量大的低温地区发病更重，引起果穗腐烂，影响葡萄储存。
因此要做好防治工作。
7种杀菌剂对葡萄灰霉病的抑菌试验
采用生 长速率法进行生 物测定 。根据试验需 要 ， 先将各
收 稿 日期 ：２ ０ １ ４ － ０ ２ —２ ７
药剂或作用机理 相同的药剂 。
在４ ０ ℃以上温度 下，根结线虫 很少活动 ，在约 ５ ０℃ 的条 件下 ， 线虫 的代谢活动基 本停止 ， 直至死 亡。 因此 。 在 移栽前 ， 使用热水浇 洒土壤 ， 可 降低土壤 中的线虫密 度 。 在 盛夏 时 ， 将吸光 能力 强的黑 色薄膜 覆盖在潮 湿的土壤 上 ， 能 使土壤升温 ， 从 而杀死土壤 中的根结 线虫 ， 同时还可 杀死病 原菌与杂草种子 。
菌素 ｌ ５ ０ ０ 倍 液对发病株 灌根 ， 每 株用量 ２ ５ ０ ｍＬ以上 ， 一 般 灌根 １ 次即可治愈 。
一
１ ４ ５—
１ 材料 与方 法 Ｉ ． １ 供试 病原 茵
７ 种杀菌 剂的抑菌 试验结果表 明 ， 当药剂有效成分 浓度 为１ ｍｇ ／ Ｌ时，异菌脲 、腐霉利 、多菌灵和 嘧霉胺对葡萄灰
霉病菌具有较高 的抑菌效果 ， 其 中以多菌灵和嘧霉胺的抑菌
效 果最好 ，抑制率达 １ Ｏ ０ ％（ 见表 １ ） 。 表１ ７ 种杀菌剂 对葡萄灰霉 病菌的抑制情 况
引起 的真菌病 害 ． 在大部 分葡萄栽 培地均有 发生 ， 能侵染葡
萄花穗 、 幼 果及近成熟果 穗或果梗 、新梢 及叶片 ， 尤 其在春 季下雨 、 湿度 大时 ， 花穗易 发病 ， 严重 时病 穗率达 ７ ０ ％以上； 有明显加重趋 势。 特 别是温室和大 棚葡萄发病 较为普遍 。笔
１ ． ３ ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ 验 方 法
３ 结
论
采用生长速率法 测定了 ７ 种 杀菌剂对葡萄灰霉病菌的抑
12种杀菌剂对葡萄灰霉病菌的室内毒力测定
12种杀菌剂对葡萄灰霉病菌的室内毒力测定姜彩鸽;杨小伟;张怡;王国珍;王广录;方治永【摘要】为筛选出对葡萄灰霉病有良好防治效果的杀菌剂,本试验采用菌丝生长速率法和离体叶片法分别测定12种不同作用机制的杀菌剂对葡萄灰霉病菌的室内毒力.结果表明:生物制剂在离体叶片法预防作用试验中的毒力效果远好于治疗作用,可见该种制剂的保护作用更优,适于病前预防.化学药剂在试验中均表现出了较稳定且较强的毒力,尤其是咯菌腈、啶酰菌胺、啶菌恶唑、腐霉利及氟啶胺对葡萄灰霉病菌的抑制作用明显高于其他药剂,可在生产中协调施用.【期刊名称】《宁夏农林科技》【年(卷),期】2017(058)008【总页数】4页(P33-35,封2)【关键词】杀菌剂;葡萄;灰霉病菌;毒力;EG50值【作者】姜彩鸽;杨小伟;张怡;王国珍;王广录;方治永【作者单位】宁夏农林科学院植物保护研究所,宁夏银川 750002;宁夏大学农学院,宁夏银川 750021;宁夏农林科学院植物保护研究所,宁夏银川 750002;宁夏农林科学院植物保护研究所,宁夏银川 750002;御马国际葡萄酒业(宁夏)有限公司,宁夏青铜峡751600;御马国际葡萄酒业(宁夏)有限公司,宁夏青铜峡751600【正文语种】中文【中图分类】S436.631.1葡萄是我国果树中的大树种之一，其产量和栽培面积居世界前列[1]，但葡萄灰霉病已成为葡萄生产中常见、危害最大的病害之一，在我国南方地区和北方温室葡萄生产中发生尤为严重[2]，是制约我国葡萄生产的一大障碍。
灰霉病菌的腐生性强，它可以通过侵染果实、幼苗及贮藏器官等途径导致病害发生，从而造成巨大的经济损失。
虽然有高效杀菌剂和先进的贮藏技术，但每年因灰霉病造成的葡萄产后损失依然高达50%，一般损失在20%～30%[3-4]。
另外，它还给葡萄酒带来不良味感，同时使葡萄酒不耐陈酿，降低葡萄酒的质量[5]。
宁夏贺兰山东麓地区是全国最大的葡萄酒地理标志保护产区，随着葡萄种植面积不断扩大以及单一的生态环境的持续，有害生物的生态适应性也不断提高，葡萄灰霉病已成为宁夏葡萄生产中的主要病害之一。
腐霉利对木霉菌控制草莓灰霉病防治效果的影响
腐霉利对木霉菌控制草莓灰霉病防治效果的影响袁水霞;张佳佳;冯纪年【摘要】生防菌木霉与灰霉病菌具有较强的拮抗作用,本试验通过盆栽试验和大田试验,研究单独施用木霉菌、化学杀菌剂腐霉利以及二者以不同比例混合配制对草莓灰霉病的防治效果,探究化学杀菌剂腐霉利对生防菌防效的影响.结果表明:盆栽试验中,单独施用木霉菌对灰霉病的防效为81.40％,当木霉菌与腐霉利以质量比8∶1混配时,防效高达88.32％,二者以其他比例混配的防效在65％～80％之间,均高于单独施用腐霉利.木霉菌与腐霉利以8∶1或3∶1的质量比混配,对灰霉病的田间防治效果较好,在80％左右,且对草莓安全、无药害.以一定比例添加化学杀菌剂腐霉利可提高生防菌木霉防效的稳定性,并且可延缓病原菌对化学杀菌剂抗药性的产生.【期刊名称】《中国蔬菜》【年(卷),期】2018(000)009【总页数】5页(P46-50)【关键词】草莓灰霉病;杀菌剂;腐霉利;木霉菌;病情指数;防治效果【作者】袁水霞;张佳佳;冯纪年【作者单位】河南农业职业学院,河南郑州451450;河南农业职业学院,河南郑州451450;西北农林科技大学植物保护学院,植保资源与病虫害治理教育部重点实验室,陕西杨凌712100【正文语种】中文草莓（Fragaria ananassa Duch）是多年生草本植物，具有生产周期短、经济效益高、采摘期长、适于设施栽培等特点，近年来种植面积不断扩大（王玉坤等，2003）。
灰霉病（Botrytis cinerea）是草莓的常见病害，主要为害叶片、果实和花蕾等，造成叶片腐烂、枯死，果实脱落等症状，传播迅速，危害严重，一般可使草莓减产10%～20%，严重时减产50%以上（王凌宇等，2015；曹婷婷等，2016）。
灰霉病病原菌为灰葡萄孢菌，属半知菌亚门葡萄孢菌属，具有遗传变异大、繁殖速率快和适应性强等特点（孟飞等，2006），并且其侵染方式多样化，寄主多样化，可以利用菌丝体、分生孢子或者菌核在土壤或病残体上越冬或越夏，这些特点均为灰霉病的防治带来困难（邱莉萍等，2018）。
哈茨木霉菌、枯草芽孢杆菌对人参灰霉病和根腐病病原菌的拮抗作用
哈茨木霉菌、枯草芽孢杆菌对人参灰霉病和根腐病病原菌的拮抗作用关一鸣;潘晓曦;王莹;吴连举【期刊名称】《江苏农业科学》【年(卷),期】2014(42)5【摘要】已有研究表明，从健康人参根际土壤筛选的哈茨木霉菌SF-08和枯草芽孢杆菌B11是有较高抑菌活性和广谱作用的生防菌。
初步研究表明，哈茨木霉菌SF-08及其代谢物可以抑制人参灰霉病病菌和根腐病病菌菌丝的生长，枯草芽孢杆菌B11可以抑制人参灰霉病病菌和根腐病病菌菌丝的生长和孢子萌发，且均表现出强烈的抑制作用。
SF-08对人参灰霉病病菌、根腐病菌菌丝生长的抑制率分别达到71．4％、72．0％，其代谢产物原液的抑制率分别达到71.3％、70．5％。
B11菌株对人参灰霉病病菌、根腐病病菌的菌丝生长有较强的抑制作用，原液对人参灰霉病病菌、根腐病病菌菌丝的生长抑制作用均达到80％以上，对孢子萌发抑制率均超过85％；显微观察显示，SF-08、B11菌株通过重寄生作用、竞争作用、溶菌作用使病原菌菌丝生长受到影响，从而起到抑菌作用。
【总页数】3页(P123-124,125)【作者】关一鸣;潘晓曦;王莹;吴连举【作者单位】中国农业科学院特产研究所，吉林长春 130112; 吉林农业大学，吉林长春130118;中国农业科学院特产研究所，吉林长春 130112;吉林农业大学，吉林长春130118;中国农业科学院特产研究所，吉林长春 130112【正文语种】中文【中图分类】S435.675【相关文献】1.枯草芽孢杆菌ge25对两种人参病原菌的抑制作用及脂肽类抑菌代谢产物的鉴定2.枯草芽孢杆菌对三种水产动物病原菌体外拮抗作用的研究3.人参内生细菌GS-1的分离鉴定及对灰霉病菌的拮抗作用4.两种木霉对陇南花椒根腐病病原菌的拮抗作用研究5.木霉菌株NF9和TC3对芋艿根腐病病原菌的体外拮抗作用因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
枯草芽孢杆菌和哈茨木霉菌对番茄灰霉病的防治效果
摘要：利用生物药剂防治番茄灰霉病可降低致病菌的抗药性，且对果品安全健康，对环境无污染。
为了研究枯草芽孢杆菌和哈茨木霉菌对番茄灰霉病的防治效果，在室内条件下研究枯草芽孢杆菌和哈茨木霉对番茄灰霉病致病菌灰葡萄孢菌拮抗作用的基础上，在田间条件下研究了二者不同用量对番茄灰霉病的防治效果。
室内对峙试验结果显示，枯草芽孢杆菌和哈茨木霉均对灰葡萄孢菌具有拮抗作用，且均对灰葡萄孢菌菌丝有直接的破坏作用；枯草芽孢杆菌发酵无菌滤液的抑菌效果随着稀释倍数的增大而逐渐降低，其中10倍稀释液的抑菌率达到80.95%，50倍稀释液的抑菌率仅为28.57%。
田间防效试验结果显示，枯草芽孢杆菌和哈茨木霉均对番茄灰霉病具有防治作用，其中枯草芽孢杆菌用量为1125g/hm 2、哈茨木霉用量为18000g/hm 2时防效最好，对叶片的防病效果分别为84.91%和85.85%，对果实的防病效果分别为90.00%和96.00%。
生物药剂枯草芽孢杆菌和哈茨木霉菌均可用于番茄灰霉病的防治。
关键词：番茄灰霉病；枯草芽孢杆菌；哈茨木霉菌；拮抗作用；防治效果中图分类号：S436.412文献标识码：A 文章编号：1008-1631（2024）01-0066-08收稿日期：2023-08-28基金项目：河北省蔬菜产业技术体系冀南高品质蔬菜技术提升岗位项目（HBCT2023100205）；石家庄市科技计划项目（229490132N ）作者简介：王丹丹（1991-），女，河北沧州人，农艺师，硕士，主要从事设施蔬菜栽培与生理研究。
E-mail ：yuwenhanzhu@126.com 。
通讯作者：耿晓彬（1973-），男，河北赵县人，高级农艺师，主要从事农业技术推广工作。
E-mail ：*****************。
Control Effects of Bacillus subtilis and Trichoderma harzianum on Tomato Gray MoldWANG Dan-dan 1，ZHANG Qing-yin 1，LI Yan 1，TIAN Dong-liang 1，CHEN Chang 2，QI Lian-fen 1，SHI Jian-hua 1，GAO Xi-biao 3，GENG Xiao-bin 1*（1.Shijiazhuang Academy of Agriculture and Forestry Sciences ，Shijiazhuang 050041，China ；2.Institute of Coastal Agriculture ，Hebei Academy of Agriculture and Forestry Sciences ，Caofeidian 063200，China ；3.Zhao County Agri-cultural Technology Service Center ，Zhao County 051530，China ）Abstract ：The use of biological agents to control tomato gray mold can reduce the resistance of pathogenic bac-teria ，and is safe and healthy for fruits ，without polluting the environment.In order to study the control effects of Bacillus subtilis and Trichoderma harzianum on tomato gray mold ，the antagonistic effects of B.subtilis and T.harzianum on the pathogenic bacterium Botrytis cinerea were studied under indoor condition.The control effects of different dosages of B.subtilis and T.harzianum on tomato gray mold was studied under field condition.The in-door confrontation test results showed that both B.subtilis and T.harzianum had antagonistic effects on B.cinerea ，and both had a direct destructive effect on its mycelium.The antibacterial effects of sterile filtrate from B.subtilis fermentation gradually decreased with the increasing of dilution ratio.Among them ，the antibacterial rate of 10fold dilution solution reached 80.95%，while the antibacterial rate of 50fold dilution solution was only 28.57%.The results of field control tests showed that both B.subtilis and T.harzianum had control effects ontomato gray mold.Among them ，the best control effect was achieved when the dosage of B.subtilis was 1125g/hm 2and T.harzianum was 18000g/hm 2.The control effectson leaves were 84.91%and 85.85%，respectively ，andon fruits were 90.00%and 96.00%，respectively.Bio-logical agents B.subtilis and T.harzianum can both control tomato gray mold ，reduce the resistance of pathogenic bacteria ，ensure the safety and health of fruits ，and have no pollution to environment.Key words ：Tomato gray mold ；Bacillus subtilis ；Trichoderma harzianum ；Antagonism ；Control effect王丹丹1，张庆银1，李燕1，田东良1，陈昶2，齐连芬1，师建华1，高西彪3，耿晓彬1*（1.石家庄市农林科学研究院，河北石家庄050041；2.河北省农林科学院滨海农业研究所，河北曹妃甸063200；3.赵县农业技术服务中心，河北赵县051530）枯草芽孢杆菌和哈茨木霉菌对番茄灰霉病的防治效果DOI ：10.12148/hbnykx.20240022河北农业科学，2024，28（1）：66-73，80Journal of Hebei Agricultural Sciences第1期番茄（Lycopersicon esculentum）是世界范围内栽培面积很广的蔬菜作物之一，也是中国设施栽培的主要蔬菜之一[1]。
木霉菌功能简介
木霉菌
【适用范围】生物农药、生物肥料、腐熟剂、生物饲料的应用。
【产品特点】
木霉菌是一种重要的腐生型丝状真菌，广泛存在于土壤、根围、叶围、种子和球茎等生态环境中。
木霉菌种被认为具有普遍性，具有适合不同环境和广泛温度范围的能力。
木霉菌大都有很强的生防能力和生物刺激素功能，菌种优势主要表现在生物防治、植物营养和抗逆功能等方面，兼有生物农药、生物肥料和生物刺激素的功能。
1、抑制农作物土传性真菌病害，对丝核菌引起的苗期立枯病、镰刀菌引起的瓜类枯萎病、疫霉菌引起的辣椒疫霉病、刺盘孢引起的草莓炭疽病、轮枝孢菌引起的棉花黄萎病等防控效果显著。
另外在减少高温高湿型叶部病害上也有明显的效果，如玉米大斑病，以及温室大棚里的蔬菜常见病害，如白粉病，灰霉病，霜霉病等。
2、木霉菌能诱导植物抗性、改善根部吸收磷和氮，增加土壤营养物质的溶解，与其他微生物联合可以促进作物生长。
3、用于降解农作物秸秆、棉籽壳、木屑等纤维含量高的物料。
木霉菌是产纤维素酶活性最高的菌种之一，能产生多种具有生物活性的酶系，如：纤维素酶、几丁质酶、木聚糖酶等，在木质素、纤维素丰富的基质上生长快，传播蔓延迅速。
【主要成分】木霉菌分生孢子、发酵代谢产物、固态发酵基质。
木霉菌剂与多菌灵协同防治灰霉病试验
吸性苯并咪唑类 真菌杀菌剂 ， 可有效控制多种植物病 害 ， 同时
也能杀灭木霉菌。为了获得耐药性 木霉菌株 ， 达到 与多菌灵 复合使用的 目的 ， 需要 对野生 菌株加 以改 良 。 。笔者 所在
Ｐ Ｄ Ａ培养 基 ： ２ ０ ０ ｇ土豆 、 ２ ０ ｇ 葡 萄糖 、 ｌ Ｏ ０ Ｏ ｍ Ｌ水 ， ｐ Ｈ值
收稿 日期 ： ２ ０ １ ３— ０ ４—１ ９
基金项 目： 江苏省扬 州市科 技攻关 项 目（ 编 号： Ｙ Ｚ ２ ０ １ ０ ０ ５ １ ） ； 江苏 省 高等学校大学生实践创新项 目（ 编号 ： ２ ０ １ ２ Ｊ Ｓ Ｓ Ｐ Ｉ Ｔ Ｐ ４ ０ ２ ９ ） 。
作者简介 ： 田连生（ １ ９ ６ ２ 一） ， 男， 河 北保定人 ， 教授 ， 从事 生物农药及
中图分类号 ： ｓ ４ ８ ２ ． ２ 文献标志码 ： Ａ 文章编 号 ： １ ０ ０ ２—１ ３ ０ ２ （ ２ ０ １ ３ ） １ ２— ０ １ ３ ２— ０ ２
拮抗性木霉 （ Ｔ ｈ ｉ ｃ ｈ ｏ ｄ ｅ ｒ ｍ ａ ｓ ｐ ｐ ． ） 对 多种植物病原 菌具有
依据 。
１ ． ３ 耐 药性木霉茵剂的制备
效果 ， 为农业生产中生物农 药和化学农 药的综合 防治提供 了
在５ ０ ０ ｍ Ｌ三角瓶 中放入 ２ ０ ｇ固体 培养基 ， 调 节初 始 ｐ Ｈ
值为 ５ ， 灭菌后以 ５ ％接种量接入 Ｔ ２—２种子液 ， 混合 均匀 于 ２ ５℃发酵培养 ６ ｄ ， 取样干燥 后用血球 计数板测 分生孢 量达
到１ ０ Ｃ Ｆ Ｕ ／ ｇ 时终 止发酵 。固体 发酵物 自然风 干后 经稀
释即可制成分生孢子量为 １ ０ Ｃ Ｆ Ｕ ／ ｇ的木霉 Ｔ ２ —２菌剂。 １ ． ４ 耐药性 木霉 茵与 多茵灵的协 同作用测定
木霉菌对土传病害病原真菌的拮抗作用
霉 （ Ｔ．ｖｉｒｉｄｅ） 、长 枝 木 霉 （ Ｔ．ｌｏｎｇｉｂｒａｃｈｉａｔｕｍ） 、康 氏 木霉（ Ｔ．ｋｏｎｉｎｇｉｉ） 、拟康氏木霉（ Ｔ．ｐｓｅｕｄｏｋｏｎｉｎｇｉｉ） 、 顶 孢 木 霉 （ Ｔ．ｆｅｒｔｉｌｅ） 、黄 绿 木 霉 （ Ｔ．ａｕｒｅｏｖｉｒｉｄｅ） 、深 绿 木 霉 （ Ｔ．ａｔｒｏｖｉｒｉｄｅ） 、钩 状 木 霉 （ Ｔ．ｈａｍａｔｕｍ） 以 及 两种未知名木霉种 Ｔ．ｓｐ１ 和 Ｔ．ｓｐ２（ 可能为新种） 。
中哈茨木霉、黄绿木霉、康氏木霉、绿色木霉、拟康
对峙培养试验中观察到， 对峙培养 ２～３ｄ 即可见 氏 木 霉 和 待 鉴 定 种 （ Ｔ．ｓｐ２） 同 时 对 ３ 种 病 原 菌 具
到木霉菌对病原菌的抑制作用， 之后木霉菌继续 有 很 强 的 抑 制 作 用 ， 其 抑 菌 率 高 达 ６３．６４％ ～
不同接种时间菌落直径（ ｃｍ）
２ｄ
３ｄ
４ｄ
５ｄ
６ｄ
７ｄ
８ｄ
９ｄ
３．６
７．４
８．０（＋）
＋
＋
＋
＋
＋
４．０
７．８（＋）
＋
＋
＋
＋
＋
＋
４．４
７．６（＋）
＋
＋
＋
＋
＋
＋
６．０
７．８（＋）
＋
＋
＋
＋
＋
＋
６．２
哈茨木霉菌对灰葡萄孢菌生长的抑制及培养基优化研究
哈茨木霉菌对灰葡萄孢菌生长的抑制及培养基优化研究牛东东;冯振群;翟清云;冀娜【摘要】哈茨木霉菌是一种重要的生防菌,灰葡萄孢菌是番茄灰霉病的病原菌,通过对峙试验研究哈芡木霉菌对灰葡萄孢菌的抑制作用.结果表明,该哈茨木霉菌在室内能够很好地抑制灰葡萄孢菌的生长.哈茨木霉菌的培养采用固液双相培养的方法,用正交试验优化法分别对液体培养基和固体培养基进行优化.结果表明,该哈茨木霉菌在优化好的固液双相培养基上能产生5.6×109个孢子.【期刊名称】《现代农业科技》【年(卷),期】2017(000)014【总页数】2页(P98,102)【关键词】哈茨木霉菌;灰葡萄孢菌;抑制作用;培养基优化【作者】牛东东;冯振群;翟清云;冀娜【作者单位】河南省济源白云实业有限公司,河南济源 454652;河南省济源白云实业有限公司,河南济源 454652;河南省济源白云实业有限公司,河南济源 454652;河南省济源白云实业有限公司,河南济源 454652【正文语种】中文【中图分类】Q93-335番茄灰霉病是危害番茄的主要病害之一，该致病菌为灰葡萄孢菌（Botrytis cinereaPers），能够侵染番茄叶片、茎和青果等植株地上部分，发病严重时会造成大量烂花、烂果，直接影响产量。
木霉菌作为一类重要的生防真菌，广泛存在于土壤、空气和植物体表面等生态环境中，具有适应性强、存在范围广和广谱、高效等优点[1]。
哈茨木霉菌（Trichoderma harzianum）是木霉菌中应用最早、最广的一个菌种，可以用于预防由腐霉菌、立枯丝核菌、镰刀菌、灰葡萄孢菌、黑根霉和柱孢霉等病原菌引起的植物病害[2-3]。
哈茨木霉孢子耐受性强，易于加工成制剂，是一类重要的生防真菌，其真菌孢子培养主要采用固体发酵。
固体发酵虽然操作简单，但易受杂菌污染，产生孢子低，发酵时间长，经济效率低。
目前，主要采用先用液体发酵产生菌丝，再将菌液接种到固体培养基上培养产生孢子的固液双相发酵培养模式。
防治葡萄灰霉病特效药剂介绍
和瑞是一种有效的内吸性杀菌剂，作用在孢子萌发和刚刚开始穿透叶片表皮时。
无交互抗性
与已知杀菌剂无交叉抗性:
– 咪唑类 – 二甲酰亚氨酸 – 三唑类 – 氨基甲酸盐 – 吗啉类 – 甲氧基丙烯酸酯类 – 苯并咪唑类 – 喹啉类
嘧菌环胺－新颖且有价值的工具:
– 用于可持续性病害管理程序 – 用于防治已对常用杀菌剂产生抗性的病原菌
葡萄灰霉病
天数
灰霉病 最佳用药适期:
02 09 12 15
早
期
60
69
75
79
中期
和瑞1000倍液2－3次
89
99
后期
开花期是灰霉病防治的一个关键时期。果实近成熟期是灰霉病防治的另一个
关键时期。
使用方法，从花序分离开始至果穗期，用药2－3次，间隔7－10天左右一次，
每次和瑞1000倍液。葡萄盛花期慎用。
开始
结束
防治葡萄灰霉病
福建福安巨峰葡萄研究所2005
四川龙泉怿区植保站2005
100
和瑞500倍液
100
90 80
90
和瑞1000倍液
80
70
70
60
和瑞1500倍液
60
50
50
40
和瑞2000倍液
40
30
30
20
乙烯菌核利1000 20
10
倍液
10
0
腐霉利1000倍液
0
和瑞500倍液 和瑞1000倍液 和瑞2000倍液 腐霉利1000倍液 嘧霉胺1000倍 扑海因1000倍液
3次
辣 灰霉 45-720 60-90毫升/亩或 侵染初期叶面均匀喷
椒病
生防木霉菌防治番茄灰霉病
• 3、为了更好地去理解微环境对木霉菌在土壤和植物根围 的生存和增值的影响，这需要计算机化的模型的发展；
• 4、在分子和生物化学水平上研究木霉菌的生防机制，使 用这些信息来预测木霉菌的生防能力；
生防木霉菌防治番茄灰霉病
• 5、研究木霉菌和其他生防因子的相互作用，可以对多种 疾病的进行综合治理；
• 6、拮抗木霉菌株厚垣孢子产生机制， 用厚垣孢子替代分 生孢子， 延长木霉菌活体制剂有效期。
• 7、考虑木霉菌作为生防制剂的经济因素，例如：成本和 效益的比率，发展和投资的分配，登记的所需要的时间和 投资，来自化学农药的经济效益的竞争，毒物学方面和种 植者的可接受性，等等。
生防木霉菌防治番茄灰霉病
木霉菌的应用
（1）制剂与加工 总起来看，木霉菌的制剂与加工技术研 究较少，木霉菌的大量培养技术尚处于模仿阶段，一般采 用液体或半固体生产方法，以得到大量的菌丝、厚垣孢子 或分生孢子。有关木霉菌菌剂的载体也有一些研究工作， 如麸皮等营养性物质，旨在刺激木霉菌在土壤中的增殖。 其他剂型与加工技术也正在发展之中，有的已取得成功， 如以色列的Richodex可湿性粉剂以及我国的1.5亿/克木霉 菌可湿性粉剂。
尽管目前已有大量研究报道木霉菌对植物真菌病害具 有良好的防病效果，但在实际应用过程中仍存在许多 问题。例如：对土壤微生态环境的安全问题、生防菌 剂的有效期短、田间防效不稳定等。
生防木霉菌防治番茄灰霉病
• 在木霉菌作为生防均投入使用之时，研究的重点应包括以 下几个方面：
• 1、适用基因操作来增强木霉菌的对植物病害的控制能力， 适应多变的外界环境条件，并增强其对杀虫剂的忍耐力；
哈茨木霉菌对灰葡萄孢菌生长的抑制及培养基优化研究
番茄灰霉病是危害番茄的主要病害之一,该致病菌为灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea Pers ),能够侵染番茄叶片、茎和青果等植株地上部分,发病严重时会造成大量烂花、烂果,直接影响产量。
木霉菌作为一类重要的生防真菌,广泛存在于土壤、空气和植物体表面等生态环境中,具有适应性强、存在范围广和广谱、高效等优点[1]。
哈茨木霉菌(Trichodermaharzianum )是木霉菌中应用最早、最广的一个菌种,可以用于预防由腐霉菌、立枯丝核菌、镰刀菌、灰葡萄孢菌、黑根霉和柱孢霉等病原菌引起的植物病害[2-3]。
哈茨木霉孢子耐受性强,易于加工成制剂,是一类重要的生防真菌,其真菌孢子培养主要采用固体发酵。
固体发酵虽然操作简单,但易受杂菌污染,产生孢子低,发酵时间长,经济效率低。
目前,主要采用先用液体发酵产生菌丝,再将菌液接种到固体培养基上培养产生孢子的固液双相发酵培养模式。
正交试验优化法是优化培养基常用的方法。
因此,采用正交试验优化法对哈茨木霉的培养进行初步优化,为其在生防中的应用提供依据。
1材料与方法1.1试验材料与仪器供试菌种为哈茨木霉菌、番茄灰葡萄孢菌,由河南省生物农药工程研究中心分离获得;试验仪器有恒温培养箱、恒温摇床、冰箱;试剂有葡萄糖、酵母粉、琼脂粉、NaCl 、NaOH 、HCl ;培养基为PDA 培养基、营养肉汤培养基。
1.2试验方法1.2.1哈茨木霉菌对番茄灰葡萄孢菌的抑制作用。
平板对峙培养是研究生防菌效价最常用的方法之一,该方法操作简单,能直接观察抑制效果,因而本试验采用平板对峙培养测定哈茨木霉菌对番茄灰葡萄孢菌的抑制效果[4]。
具体操作如下:在PDA 培养基中心位置接种直径为6mm 的番茄灰葡萄孢菌菌饼,距离平板中心两侧2cm 处,分别接种一块直径为6mm的哈茨木霉菌菌饼,以只接种番茄灰葡萄孢菌菌饼为对照,28℃恒温培养6~9d 后,与对照对比,观察记载哈茨木霉菌对番茄灰葡萄孢菌的抑制情况,每组处理3次重复。
5种木霉对番茄灰霉病拮抗作用的测定
８Ｃ —ｄ 拮 抗性 真 菌 ，很 早 就有 很 多关 于 木霉 的 拮抗 作用 报 道 。木 霉 在植 ２ ￣下 培 养２ ５ ，然 后 测量 菌 落直 径并 观 察菌 落 形状 和颜 色 等 。 （ ）形态 鉴 定 ：在 菌落 刚变 绿而 没有 变 为深绿 之前 挑取 分生 孢子 ２ 物 病害 生 物 防治 中 具有 重要 的地位 ，能 用于 防 治 多种真 菌 病 害 。
用 。随着 现代 生 物 技术 的不 断发 展 ，木 霉菌 的生 防效 果和 稳 定性 的 。 １ ２２ 木 霉菌株 和病 原菌株 生长 速度 的测 定 将分 离鉴 定后 的木 霉 ．． 有 了显 著的提 高 ，并将 展 示出更 广 阔的应 用前 景。
Ｄ 平板 上 ，３ 次重 复 ，３ 后 测 ｄ 近 年 来 ， 由于化 学 农药 公 害 问题 的 日趋严 重 ，生 物 防治 作 为 菌 株和 病 原菌 株分 别接 种 在无 菌 的Ｐ Ａ ｃ ／ ） 植 物病 害 防 治 的一 项重 要 措施 已引起 人 们 的高 度重 视 。研 究 木霉 定各 菌株 生长 所形 成菌 落 的线性 生长 速度 。菌 丝生 长速度 （ｍｄ ＝ 生长 时 间。 对 病 原真 菌 的拮 抗 作用 ，有利 于 木霉 菌 在植 物 生 防领 域 的开 发利 平均 菌落 直径／
２ １ 年第０ 期 ０２ ４ （ 总第２ ６ ） ６期
吉 林 农 业
ＪＬｌ ＡＧＲＩ Ｉ Ｎ ＣＵＬ ＴＵＲＥ
Ｎ Ｏ ． ４． ２ １ ０ ０２
ｆ
ｖｔＮ ２６ ｅ Ｏ． ） ｙ ６
５ 种木霉对番茄灰霉病拮抗作用的测定
胡启 国
（ 商丘 工 学院 ，河 南 商丘 ４ ６ ０ ） ７ ０ ０
的菌株 ，对 番茄灰 霉病 菌 防治具 有重 要 的理论和 实 践意义 。
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ｈｕｎｄｒｅｄ ｓｅｖｅｎｔｙ ｓａｍｐｌｅｓ
ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ
ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｗｏｒｋ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ
ｔｈａｔ ｔｈｅｙ ｂｅｌｏｎｇｅｄ ｔｏ ｎｉｎｅ ｓｐｅｃｉｅｓ ｏｆ Ｔｒ／ｃｈｏｄｅｒｍａ ａｎｄ ｔｗｏ ｕｎｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ Ｔｒ／ｃｈｏｄｅｒｍａ ｓｐｅｃｉｅｓ，ｎａｍｅｌｙ Ｔｒｉ－ ｃｈｏｄｅｒｍａ
ｃｉｎｅｒｃａ
Ｐｅｒｓ．）２００６年从宁夏
２．１木霉菌拮抗作用测定结果
２．１．１竞争作用测定木霉菌体外竞争作用测定结果 （表１）表明：木霉菌与葡萄灰霉病菌相比，生长速度很
贺兰山东麓酿酒葡萄基地葡萄灰霉病株上分离得到。
．
２００６年对采自宁夏１４个市县的１７０份土样及其 它材料进行分离，得到９６株木霉菌株，采用形态分类 方法鉴定出９种木霉菌０，４１，分别为哈茨木霉
２．１．２对峙培养观察结果及拈抗系数测定木霉菌与葡
萄灰霉菌的对峙培养结果（表２）表明：各木霉菌种对 葡萄灰霉菌均有不同程度的抑制作用，在木霉菌接种 后５ｄ时所测对病原菌的抑菌率在３１．６％尸７７．６％之间， 其中哈茨木霉、康氏木霉、绿色木霉、长枝木霉的抑制 作用尤为显著，抑菌率分别达７７．６％、６４．５％、６１．８％、
生自２００１年以来呈上升趋势，尤其２００４年发生较重， 其发病品种主要为霞多丽、赤霞珠等。此病主要在葡萄
花前期或开花期侵染，７月中旬开始在田间表现明显
因此，通过大量筛选和利用抗灰霉有益微生物及其代
谢物，使生物防治日益成为葡萄灰霉病控制中的一条
基金项目：宁夏回族自治区自然科学基金项目“宁夏木霉菌多样性及其生防菌研究”部分内容（ＮＺ０６４３）． 第一作者简介：康萍芝，女，１９７２年出生，宁夏中宁人，硕士，助理研究员，主要从事植物病害及其生物防治方面的研究工作。通信地址：７５０００２宁夏银
ｈａｒｚｉａｎｕｍ，Ｔ．ｖｉｒｉｄｅ，Ｔ．１０ｎｇｉｂｒａｃｈｉａｔｕｍ，Ｔ．ｋｏｎｉｎｇｉｉ，Ｔ．ｐｓｅｕｄｏｋｏｎｉｎｇｉｉ、Ｔｆｅｒｔｉｌｅ、Ｚａｕｒｅｏｖｉｒｉｄｅ、Ｚａ－
ｔｒｏｖｉｒｉｄｅ、Ｔ．ｈａｍａｔｕｍ、Ｔ．ｓｐｌ ａｎｄ Ｔ．ｓｐ２．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｃｏｍｐｅｔｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｆａｃｅ—ｔｏ－ｆａｃｅ－ｃｕｌｔｕｒｉｎｇ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ
ｓｐ２。竞争及对峙培养结果表明：１１种木霉茵种对葡萄灰霉病菌（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ ｃｉｎｅｍａ屁乃．）均有不同程度的 拮抗作用，尤其前四种木霉茵表现出了很强的竞争优势，在对峙培养中对葡萄灰霉菌的拮抗系数为Ｉ 一Ⅱ，抑菌率达６１．８％～７７．６％。在光学显微镜下可观察到木霉菌或缠绕或穿入葡萄灰霉菌菌丝生长，并 发生茵丝断裂、消解以及细胞原生质浓缩等现象。 关键词：木霉；葡萄灰霉病菌；拮抗作用
川市金风区黄河东路５９０号宁夏农科院植保所，Ｅ－－ｍｉｌ：ｋａｎｇｐｉｎｇｚｈｉ＠１６３．ＣＯｌｌｌ。
收稿日期：２００７－０４－０１，修回日期：２００７－－０４—２８。
万方数据
中回垂学ｃｉＩ报第２３卷第８期２００７年８月
ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｏａｓｂ．ｏｒｇ．ｃｌｒｉ ・３９３・
重要而有效的途径是势在必行的。木霉菌是一种对多 种植物病原菌都有较强拮抗作用的生防菌，由于此类
（Ｔｒ／ｃｈｏｄｅｒｍａ ｈａｒｚ／ａｎｕｍ）、绿色木霉（Ｚｖｉｒ／ｄｅ）、长枝木
快，其速度比病原菌平均快２．叫．２倍，３ｄ时木霉菌落
几乎布满平皿以哈茨木霉（Ｚ
ｈａｒｚｉａｎｕｍ）、绿色木霉（Ｔ．ｖｉｒｉｄｅ）、长枝木霉（Ｚ ｌｏｎ＃ｂｒａｃｈｉａｔｕｍ）、康氏木霉（Ｚｋｏｎｉｎｇｉｉ）的生长速度为 最快。
中图分类号：￥４７６ 文献标识码：Ａ
Ａｎｔａｇｏｎｉｓｍ ｏｆ Ｅｌｅｖｅｎ Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ Ｓｐｅｃｉｅｓ Ａｇａｉｎｓｔ Ｂｏｔｒｙｔｉｓ Ｃｉｎｅｒｅａ ｉｎ Ｇｒａｐｅ
Ｋａｎｇ Ｐｉｎｇｚｈｉ，Ｚｈａｎｇ Ｌｉｒｏｎｇ，Ｓｈｅｎｇ Ｒｕｉｑｉｎｇ
（Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆＰｌａｎｔ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ，Ｎｉｎｇ池Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ
。
表２木霉菌对葡萄灰霉病菌的抑制作用
葡萄灰霉菌（
ｃ
Ｒ坩．）
木霉菌种‘撇ｂ如～妒ｊ———丐鬲磊鬲ｉ石荔＿————————荪Ｂ吾ｏｔｒ辜ｙｔ／ｉｓ厂ｉｒＷ—ｒ—ｅａ——————磊磊；磊磊石ｊｉ—＿Ｊ
注：木霉菌侵入病原菌覆盖程度：＋＋＋＋：１００％；＋＋＋：６０９６以上；＋＋：３嘶以上Ｉ＋：１０％以上；－－：０（无侵入）．
症状，最终引致成熟期果实腐烂或裂果，严重发生时造 成产量损失达３０％以上，对葡萄产量影响极大。 目前，对于葡萄灰霉病的防治，生产上仍主要以化 学防治为主，这无疑会造成农药抗药性、果实农药残留 严重和环境污染以及对人们的健康极为不利等问题。
ｃｉｎｅｒｅａ
宁夏贺兰山东麓自大面积发展酿酒葡萄以来，随 着葡萄树龄的延长，由灰葡萄孢菌（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ Ｐｅｒｓ．１引起的葡萄灰霉病日趋严重，首次成为宁夏酿酒 葡萄上的主要病害之一。据调查，宁夏葡萄灰霉病的发
第２４ｈ开始，每天１次定时测量各菌落直径，并计算其
生长速度。
１．３．２木霉菌的对峙培养观察及拮抗系数测定咖采
用对峙培养法。将已保存的各木霉菌种和葡萄灰霉菌 分别单独接入ＰＤＡ平板，在２６。Ｃ人工气候箱中培养 ３￣５ｄ后取出，然后用ｄ＝０．５ｃｍ的无菌打孔器切取病原 菌菌块，接种于ＰＤＡ平板一侧距离中心２ｃｍ处，每处 理重复３次ｊ并设只接种病原菌为对照，培养３天后将
菌的抑制、包围、侵人并占领病原菌营养空间的过程。 拮抗系数的分级标准（５级）：Ｉ木霉菌丝占平皿 的１００％；Ⅱ木霉菌丝占平皿的＞２／３；Ⅲ木霉菌丝占平 皿的＜２／３，＞ｌ／３：ＩＶ木霉菌丝占平皿的＜１／３；Ｖ病原菌 丝占平皿的１００％。 抑菌率％＝【（病原菌对照菌落半径一病原菌落指 向木霉菌的半径）／病原菌对照菌落半径］ｘ１００ １．４木霉茵重寄生作用机制显微观察嗍 将采用对峙培养法培养的两两相对的木霉菌和葡 萄灰霉菌在２６℃恒温下培养，并逐日观察，待两菌落 相交时，挑取交界处病菌菌丝在光学显微镜下观测二 者的相互作用。 ２结果与分析
ｏｒ ｒｅ－
ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ
ｉｎ ｃｏｉｌｅｄ
ｏｒ
ｐｅｎｅｔｒａｔｅｄ Ｂｏｔｒｙｔ／ｓ ｃｉｎｅｍａ’ｓ ｈｙｐｈａｅ，ａｎｄ
ｄｉｓｓｏｌｖｉｎｇ ａｎｄ ｃｅｌｌ ｃｙｔｏｐｌＳｉｌｌ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ．
Ｋｅｙ
ｗｏｒｄｓ：Ｔｒ／ｃｈｏｄｅ嗍Ｂｏｔｒｙｔｉｓ ｃｉｎｅｒｅａ，Ａｎｔａｇｏｎｉｓｍ
ａｎｄ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ
ｏｎｅ
Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｙｉｎｃｈｕａｎ ７５０００２） ｏｆ ｓｏｉｌ ａｎｄ
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｎｉｎｅｔｙ－ｓｉｘ ｓｔｒａｉｎｓ ｏｆ Ｔｒ／ｃｈｏｄｅｒｍａ ｗｅｒｅ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｆｒｏｍ ｏｔｈｅｒ ｍａｔｅｒｉａｌｓ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｆｒｏｍ ｆｏｕｒｔｅｅｎ ｒｅｇｉｏｎｓ ｉｎ Ｎｉｎｇｘｉａ．Ｔｈｅ
发现：木霉菌菌丝缠绕在葡萄灰霉菌菌丝体上或穿入 葡萄灰霉菌菌丝体内寄生生长，吸取内部养分，使病原 菌菌丝变细，发生断裂、消解及原生质浓缩等现象（表
３）。另挑取对峙培养中距界面较远处病原菌菌丝镜检， 发现有大量的木霉菌孢子存在。 ３结论与讨论 ３．１对峙培养结果表明：１１种木霉菌对葡萄灰霉病菌 均具有较明显的拮抗作用，但不同木霉种之间抑菌效 果存在差异，其中哈茨木霉、绿色木霉、康氏木霉、长枝 木霉的拮抗作用尤为显著，抑菌率高达６１．８０／ｏ－－，７７．６％， 是具有潜力的防治葡萄灰霉病的生防菌株。
Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｂｕｌｌｅｔｉｎ Ｖ０１．２３ Ｎｏ．８ ・３９２・ ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃａｓｈ．ｏｒｇ．ｃｎ
２００７ Ａｕｇｕｓｔ
１
１种木霉菌对葡萄灰霉病菌的拮抗作用
康萍芝，张丽荣，沈瑞清
（宁夏农林科学院植物保护研究所，银川７５０００２）
摘要：对采自宁夏１４个市县的１７０份土样及其它材料进行分离，得到９６株木霉菌株，采用形态分类
陷，部分木霉菌种已有较多菌丝侵入病原菌内部；在对
峙培养７一ｌＯｄ时，木霉菌菌丝向病原菌内部扩展数量 迅速增加，对病原菌的拮抗系数表现为Ｉ一Ⅲ，其中哈 茨木霉、康氏木霉、绿色木霉、长枝木霉对葡萄灰霉菌 的抑制作用较强，其拮抗系数为Ｉ一Ⅱ，覆盖程度达 ６０％以上。
平皿取出，分别在另一侧使用同样方法接入同质等量
的木霉菌菌块，继续置于２６℃人工气候箱中进行培
２．２木霉菌对葡萄灰霉菌重寄生作用机制显微观察 在对峙培养试验中发现：葡萄灰霉菌的生长明显 受到抑制，其菌落生长半径明显低于对照半径，二者相
接触后，病原菌菌落不再扩展，与木霉菌处于僵持状态 或逐渐萎缩。 在两菌交界处挑取混合菌丝在光学显微镜下镜检
养，逐日观察木霉菌和病原菌的生长情况，并分别测量
方法鉴定出９种木霉菌以及２种未知名茵种，它们分别为哈茨木霉（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｈａｒｚｉａｎｕｍ）、绿色木霉 （Ｔ．ｖｉｒｉｄｅ）、长枝木霉（Ｔ．１０ｎｇｉｂｒａｃｈｉａｔｕｍ）、康氏木霉（Ｔ．ｋｏｎｉｎｇｉｉ）、拟康氏木霉（Ｔ．ｐｓｅｕｄｏｋｏｎｉｎｇｉｉ）、顶孢木 霉（Ｔ．ｆｅｒｔｉｌｅ）、黄绿木霉（Ｔ．ａｕｒｅｏｖｉｒｉｄｅ）、深绿木霉（Ｔ．ａｔｒｏｖｉｒｉｄｅ）、钩状木霉（Ｔ．ｈａｍａｔｕｍ）以及Ｔ．ｓｐｌ和Ｔ．
霉（Ｔ．１０ｎｇｉｂｒａｃｈｉａｔｕｍ）、康氏木霉（Ｔ．ｋｏｎｉｎｇｉｉ）、拟康氏 木霉（Ｔ．ｐｓｅｕｄｏｋｏｎｉｎｇｉｉ）、顶孢木霉（Ｔ．ｆｅｒｔｉｌｅ）、黄绿木霉 （ｚｍ胛铡沉如）、深绿木霉（Ｔ．ａｔｒｏｖｉｒ／ｄｅ）、钩状木霉（Ｚ ｈａｍａｔｕｍ）以及两种未知名木霉种Ｔ．ｓｐｌ和Ｔ．ｓｐ２（可能 为新种）。 １．３木霉菌的拮抗作用测定
ｔｈｅｒｅ ｗｅｒｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ａｎｔａｇｏｎｉｓｍｓ ｂｅｔｗｅｅｎ ｅｌｅｖｅｎ Ｔｒ／ｃｈｏｄｅｒｍａ ｓｐｅｃｉｅｓ ａｎｄ Ｂｏｔｒｙｔｉｓ ｃｉｎｅｍａ，ｅｓｐｅｃｉａｌｌｙ，ｉｎｈｉ—