第十三章 蛋白质的生物合成共78页文档
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一、mRNA和遗传密码
原核生物mRNA的结构:4个特点
mRNA的半衰期很短,很不稳定,一旦完成其使 命后很快就被水解掉。 mRNA的分子大小差 异大。mRNA的合成是在DNA指导下的RNA 聚合酶的催化下先合成mRNA的前体,即核内 不均一RNA(hnRNA)。 hnRNA在细胞核 内加工成mRNA,然后转移到细胞质中。
生物的遗传信息以密码的形式储存在DNA分子上,表现为特定 的核苷酸排列顺序。在细胞分裂的过程中,通过DNA复制把 亲代细胞所含的遗传信息忠实地传递给两个子代细胞。在子 代细胞的生长发育过程中,这些遗传信息通过转录传递给 RNA,再由RNA通过翻译转变成相应的蛋白质多肽链上的氨 基酸排列顺序,由蛋白质执行各种各样的生物学功能,使后 代表现出与亲代相似的遗传特征。后来人们又发现,在宿主 细胞中一些RNA病毒能以自己的RNA为模板复制出新的病毒 RNA,还有一些RNA病毒能以其RNA为模板合成DNA,称 为逆转录这是中心法则的补充。
mRNA
mRNA(messenger RNA)是蛋白质生物合成过程 中直接指令氨基酸掺入的模板,是遗传信息的载体。
原核生物和真核生物mRNA的比较
原核细胞mRNA的结构特点
SD区
顺反子
5´
AGGAGGU
顺反子
顺反子
3´
先导区
插入顺序
插入顺序
末端顺序
帽子结构功能
① 半衰期短 ② 许多原核生物mRNA以多顺反子形式存在 ③ AUG作为起始密码;AUG上游7~12个核苷酸处有一被称为SD序列
U C A G
U C A G
3.三核苷酸诱导安酰tRNA对核糖体的特异结合
技术要点:人工合成三核苷酸为模板+核糖体+AA-tRNA 保温
硝酸纤维滤膜过滤
分析留在滤膜上的核糖体-AAtRNA
确定与核糖体结合的AA
பைடு நூலகம்
(二)遗传密码的性质
1、密码是无标点符号的且相邻密码子互不重叠。 编码一个肽链的所有密码子是一个接着一个地 线形排列,密码子之间既不重叠也不间隔,从 起始密码子到终止密码子(不包括终止子)构 成一个完整的读码框架,又称开放阅读框架 (ORF)。方向:从mRNA的5’到3’。
翻译过程十分复杂,需要mRNA、 tRNA、rRNA和多种蛋白因子参 与。在此过程中mRNA为合成的 模板,tRNA为运输氨基酸工具, rRNA 和 蛋 白 质 构 成 核 糖 体 , 是 合成蛋白质的场所,蛋白质合成 的方向为N—C端。
遗传信息传递的中心法则
复制
DNA
转录
逆转录
RNA 复制
翻译
蛋白质
如果利用poly(UC),则得到多聚Ser-LeuSer-Leu,推测UCU编码Ser,CUC编码Leu.
到1965年就全部破译了43 = 64组密码子。
M.W.Nirenberg等,1968年获诺贝尔生理医学 奖.
第一位
(5ˊ)
U
U
C
A
G
遗传密码字典
第二位
C
A
G
第三位
(3ˊ)
U C A G
U C A G
合成蛋白质 ③ 被蛋白质合成的起始因子所识别,从
而促进蛋白质的合成。
AAAAAAA-OH
(一)遗传密码的破译
1.三联体密码与阅读框 遗传密码: DNA(或mRNA)中的核苷
酸序列与蛋白质中氨基酸序列之间的对 应关系称为遗传密码。
密码子(codon):mRNA上每3个相邻 的核苷酸编码蛋白质多肽链中的一个氨 基酸,这三个核苷酸就称为一个密码子 或三联体密码。
B、可以使DNA上的碱基组成有较达的变化余 地,而仍然保持多肽上氨基酸序列不变(意 思基本同上)。
3、密码的摆动性:
密码子中第三位碱基与反密码子第一位 碱基的配对有时不一定完全遵循A-U、 G-C的原则,Crick把这种情况称为摇 摆性,有人也称摆动配对或不稳定配对。
反密码子第一位的G可以与密码子第三位 的C、U配对,U可以与A、G配对,I可 以和密码子的U、C、A配对,这使得 该类反密码子的阅读能力更强。
中心法则总结了生物体内遗传信息的流动规律,揭示遗传的分 子基础,不仅使人们对细胞的生长、发育、遗传、变异等生 命现象有了更深刻的认识,而且以这方面的理论和技术为基 础发展了基因工程,给人类的生产和生活带来了深刻的革命 。
遗 DNA
传
信
息
流
mRNA
动
示
核糖体
意
图
tRNA
第一节 RNA在蛋白质生物 合成中的重要功能
tRNA分子上三个特定的碱基组成一个反 密码子,位于反密码子环上。
密码子与反密码子的 阅读方向均为5‘ 3’, 两者反向平行配对。3’ 5’
5’
CCG
I
GGC
CCA-OH 3’
4、密码子是近于完全通用的。
这是如火如荼的转基因的前提。 目前只发现线粒体和叶绿体内有列外情况。
64组密码子中,AUG既是编码蛋氨酸的 密码,又是起始密码;有三组密码不编 码任何氨基酸,而是多肽链合成的终止 密码子:UAG、UAA、UGA。
2.人工合成多核苷酸和
无细胞体系蛋白质合成
1961年,M.W.Nirenberg等人,大肠杆菌的无 细胞体系中外加poly(U)模板、20种标记的 氨基酸,经保温后得到了多聚phe-phe-phe, 于是推测UUU编码phe。利用同样的方法得 到 CCC 编 码 pro , GGG 编 码 gly , AAA 编 码 lys。
的保守区, 16S rRNA3’- 端反向互补而使mRNA与核糖体结合。
真核细胞mRNA的结构特点
m7G-5´ppp-N-3 ´ p
顺反子
Poly(A)尾巴的功能 ① 是mRNA由细胞核进入细胞质所
必需的形式 ② 它大大提高了mRNA在细胞质中
的稳定性
5´ “帽子”
PolyA 3´
帽子结构功能
① 使mRNA免遭核酸酶的破坏 ② 使mRNA能与核糖体小亚基结合并开始
二、t RNA
tRNA在蛋白质合成中处于关键地位,它不 但为每个三联体密码子译成氨基酸提供接合体, 还为准确无误地将所需氨基酸运送到核糖体上 提供运送载体。
5‘
3‘
起始密
码子
如果在阅读框中插入或删除一个碱基 就会使其后的读码发生移位性错误 (称为移码)。
2.密码的简并性
由一种以上密码子编码同一个氨基酸的现象称 为简并,对应于同一氨基酸的一组密码子称 为同义密码子(Synonymous codon)。
简并性的生物学意义?
A、可以降低由于遗传密码突变造成的灾难性 后果
原核生物mRNA的结构:4个特点
mRNA的半衰期很短,很不稳定,一旦完成其使 命后很快就被水解掉。 mRNA的分子大小差 异大。mRNA的合成是在DNA指导下的RNA 聚合酶的催化下先合成mRNA的前体,即核内 不均一RNA(hnRNA)。 hnRNA在细胞核 内加工成mRNA,然后转移到细胞质中。
生物的遗传信息以密码的形式储存在DNA分子上,表现为特定 的核苷酸排列顺序。在细胞分裂的过程中,通过DNA复制把 亲代细胞所含的遗传信息忠实地传递给两个子代细胞。在子 代细胞的生长发育过程中,这些遗传信息通过转录传递给 RNA,再由RNA通过翻译转变成相应的蛋白质多肽链上的氨 基酸排列顺序,由蛋白质执行各种各样的生物学功能,使后 代表现出与亲代相似的遗传特征。后来人们又发现,在宿主 细胞中一些RNA病毒能以自己的RNA为模板复制出新的病毒 RNA,还有一些RNA病毒能以其RNA为模板合成DNA,称 为逆转录这是中心法则的补充。
mRNA
mRNA(messenger RNA)是蛋白质生物合成过程 中直接指令氨基酸掺入的模板,是遗传信息的载体。
原核生物和真核生物mRNA的比较
原核细胞mRNA的结构特点
SD区
顺反子
5´
AGGAGGU
顺反子
顺反子
3´
先导区
插入顺序
插入顺序
末端顺序
帽子结构功能
① 半衰期短 ② 许多原核生物mRNA以多顺反子形式存在 ③ AUG作为起始密码;AUG上游7~12个核苷酸处有一被称为SD序列
U C A G
U C A G
3.三核苷酸诱导安酰tRNA对核糖体的特异结合
技术要点:人工合成三核苷酸为模板+核糖体+AA-tRNA 保温
硝酸纤维滤膜过滤
分析留在滤膜上的核糖体-AAtRNA
确定与核糖体结合的AA
பைடு நூலகம்
(二)遗传密码的性质
1、密码是无标点符号的且相邻密码子互不重叠。 编码一个肽链的所有密码子是一个接着一个地 线形排列,密码子之间既不重叠也不间隔,从 起始密码子到终止密码子(不包括终止子)构 成一个完整的读码框架,又称开放阅读框架 (ORF)。方向:从mRNA的5’到3’。
翻译过程十分复杂,需要mRNA、 tRNA、rRNA和多种蛋白因子参 与。在此过程中mRNA为合成的 模板,tRNA为运输氨基酸工具, rRNA 和 蛋 白 质 构 成 核 糖 体 , 是 合成蛋白质的场所,蛋白质合成 的方向为N—C端。
遗传信息传递的中心法则
复制
DNA
转录
逆转录
RNA 复制
翻译
蛋白质
如果利用poly(UC),则得到多聚Ser-LeuSer-Leu,推测UCU编码Ser,CUC编码Leu.
到1965年就全部破译了43 = 64组密码子。
M.W.Nirenberg等,1968年获诺贝尔生理医学 奖.
第一位
(5ˊ)
U
U
C
A
G
遗传密码字典
第二位
C
A
G
第三位
(3ˊ)
U C A G
U C A G
合成蛋白质 ③ 被蛋白质合成的起始因子所识别,从
而促进蛋白质的合成。
AAAAAAA-OH
(一)遗传密码的破译
1.三联体密码与阅读框 遗传密码: DNA(或mRNA)中的核苷
酸序列与蛋白质中氨基酸序列之间的对 应关系称为遗传密码。
密码子(codon):mRNA上每3个相邻 的核苷酸编码蛋白质多肽链中的一个氨 基酸,这三个核苷酸就称为一个密码子 或三联体密码。
B、可以使DNA上的碱基组成有较达的变化余 地,而仍然保持多肽上氨基酸序列不变(意 思基本同上)。
3、密码的摆动性:
密码子中第三位碱基与反密码子第一位 碱基的配对有时不一定完全遵循A-U、 G-C的原则,Crick把这种情况称为摇 摆性,有人也称摆动配对或不稳定配对。
反密码子第一位的G可以与密码子第三位 的C、U配对,U可以与A、G配对,I可 以和密码子的U、C、A配对,这使得 该类反密码子的阅读能力更强。
中心法则总结了生物体内遗传信息的流动规律,揭示遗传的分 子基础,不仅使人们对细胞的生长、发育、遗传、变异等生 命现象有了更深刻的认识,而且以这方面的理论和技术为基 础发展了基因工程,给人类的生产和生活带来了深刻的革命 。
遗 DNA
传
信
息
流
mRNA
动
示
核糖体
意
图
tRNA
第一节 RNA在蛋白质生物 合成中的重要功能
tRNA分子上三个特定的碱基组成一个反 密码子,位于反密码子环上。
密码子与反密码子的 阅读方向均为5‘ 3’, 两者反向平行配对。3’ 5’
5’
CCG
I
GGC
CCA-OH 3’
4、密码子是近于完全通用的。
这是如火如荼的转基因的前提。 目前只发现线粒体和叶绿体内有列外情况。
64组密码子中,AUG既是编码蛋氨酸的 密码,又是起始密码;有三组密码不编 码任何氨基酸,而是多肽链合成的终止 密码子:UAG、UAA、UGA。
2.人工合成多核苷酸和
无细胞体系蛋白质合成
1961年,M.W.Nirenberg等人,大肠杆菌的无 细胞体系中外加poly(U)模板、20种标记的 氨基酸,经保温后得到了多聚phe-phe-phe, 于是推测UUU编码phe。利用同样的方法得 到 CCC 编 码 pro , GGG 编 码 gly , AAA 编 码 lys。
的保守区, 16S rRNA3’- 端反向互补而使mRNA与核糖体结合。
真核细胞mRNA的结构特点
m7G-5´ppp-N-3 ´ p
顺反子
Poly(A)尾巴的功能 ① 是mRNA由细胞核进入细胞质所
必需的形式 ② 它大大提高了mRNA在细胞质中
的稳定性
5´ “帽子”
PolyA 3´
帽子结构功能
① 使mRNA免遭核酸酶的破坏 ② 使mRNA能与核糖体小亚基结合并开始
二、t RNA
tRNA在蛋白质合成中处于关键地位,它不 但为每个三联体密码子译成氨基酸提供接合体, 还为准确无误地将所需氨基酸运送到核糖体上 提供运送载体。
5‘
3‘
起始密
码子
如果在阅读框中插入或删除一个碱基 就会使其后的读码发生移位性错误 (称为移码)。
2.密码的简并性
由一种以上密码子编码同一个氨基酸的现象称 为简并,对应于同一氨基酸的一组密码子称 为同义密码子(Synonymous codon)。
简并性的生物学意义?
A、可以降低由于遗传密码突变造成的灾难性 后果