CLSI血培养推荐指南

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血标本的收集 1. 从静脉取血 2. 不宜从静脉导管或静脉留置口取血 3. 若导管设施取血*,必需同时静脉取血,以求对比和解 释
*不要弃去初段血,不用抗凝剂冲洗
4.不推荐静脉血直接入瓶 5.不主张换针头入瓶 6.有血的培养瓶不可放入冰箱和冻箱保存
陈民钧
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标本的收集和运送 瓶数及血量
• Cockrill 2004年报告:163位病人,血培养仪
BSOP 3715 (IVCBSI)
• 导管种类:非隧道式长期放置导管、隧道式短期放置 导管
• 很难确诊:缺少诊断标准
– 局部无迹象, – 常常是皮肤正常菌及假菌血症常见的菌
• 诊断依据:
– – – –
陈民钧
血、导管留置部位、IVCJ尖是同一菌 Sepsis、对抗菌药无反应、拔管即好了 有不同的定量培养数(静脉血:导管血=1:10) 有不同的阳性报警时间 ( 2h )
– 取两套血培养有助于医生鉴别真假阳性
• 3-5套血培养为好 • 若阴性,要怀疑、重新考虑此诊断
陈民钧
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HPA BSOP 3715建议的诊断
菌血症和真菌血症的诊断依赖于: • 优质血培养仪
• 优质的实验室操作
• 优质的信息传递
陈民钧
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HPA BSOP 3715建议的诊断
• 优质血培养仪
– 培养基质量好-少量苛氧菌均可长出 – 能中和抗菌药和血中抗菌物质 – 污染机会少 – 报警迅速 不同的全自动产品各有其优缺点 厌氧瓶最好要培养出细菌、酵母菌 成人用需氧瓶和厌氧瓶 儿童只用需氧瓶
培养
*导管尖片段MAKI法
导管Maki法 + 注解 是否 菌落数 CRBSI? 是
需15
1或2 套阳性
2套阴性 2套阴性
陈民钧

+ -
不论多 少

否 否
金葡、念珠菌 时不能否认
导管定置菌
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方法和操作步骤
导管相关性的血流感染(CRBSI) 现有诊断方法
• 1997年文献 确认导管尖片断的定量培养是最准确的, • 但需要拔管或更换导管,并需同时采静脉血做血培养。 • 已经证实当评估一次新的发热、需作血培养时时,大约75%-85% 的导管是不需要拔掉的。
• 健康人能在几分钟内将血中菌消失 • 病人则不能将病原菌控制在原发部位 • 医生未能将病原菌,如:
– 清除失败 – 引流不成功
• 死亡率与病原菌、药敏谱、基础病相关,亦即提供了 预后信息
陈民钧
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明确血培养的临床意义
按出现时间特点的菌血症的分类
• 一过性菌血症(transient):持续仅数分钟
– 感染组织、粘膜表面‘、管定居的微生物 – [钻牙、导尿、挤压毛囊]、 – 通过植入、手术进入
• 为了避免不必要地拔掉中心静脉导管,允许在不拔管的条件下尝试 其他诊断方法。
• 拔掉一个经外科手术植入的导管,也是对操作管理的一个挑战。
• 最重要的是区别是 CRBSI?是皮肤污染?是导管本身的定植菌?还 是导管外的其他污染源所致。
陈民钧
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方法和操作步骤
导管相关性的血流感染诊断评价
• 第1种方法适于希望保留导管的病人
CLSI血培养的原则和操作程 序推荐(Proposed)指南

英国HPA 的血培养的研究 及操作程序
2005-09-08出版:BSOP 37 Issue 5
• 2006年10月出版:M47-P
• 只是协商后的推荐稿 (consensus proposed)


http://www.hpastandards.org.uk/pdf_sops.asp
INVESTIGATION OF BLOOD CULTURES (FOR ORGANISMS OTHER THAN MYCOBACTERIUM SPESIES)
• 收集来自全球的评论和建议
• 收集截止日期:2007年1月29日 • 下一步要出版投票通过的试行指
• 参编单位:
• 医学微生物协会, 临床微生物协会 苏格兰微生物协会, IBMS, Welsh 微生物协会 • 统一由卫生防护署 (Health Protection Agency)领导
展为心内膜炎
• 常见菌:口腔链球菌、金葡、肠球、牛链等
陈民钧 26ຫໍສະໝຸດ Baidu
方法和操作步骤
感染性心内膜炎(IE)的血流感染
Native瓣膜心内膜炎 • 真菌心内膜炎
– 很少见 – 抗菌药不正确使用 – 严重的基础病
Native瓣膜心内膜炎 • HACEK 菌群心内膜炎
– Haemophilus aphrophilus – Actinobacillus actinomycetemcomitans – Cardiobacterium hominis – Eikenella corrodens – Kingella kingae – 艾滋病病人的Bartonella spp.
• 第2种方法适于已决定要拔出导管的病人
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方法和操作步骤
HPA BSOP 3715
感染性心内膜炎(IE)的血流感染
• 原因:易感的心内膜病灶或先天缺损部位,血流紊乱, 进而心内膜表面损坏,微生物驻扎,形成赘生物,并 常进入血流,治疗困难 • 急性:正常的心瓣膜被病原菌驻扎导致瓣膜快速损坏、 小病灶播散、心衰、快速死亡 • 亚急性:不正常的瓣膜被少数的几种病原菌感染。小
陈民钧
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明确血培养的临床意义 其它菌血症的分类 BSOP 3715
污染瓶: • 约2%
• 这些菌(阳性杆菌、棒状杆菌、 丙酸杆菌、气球菌、凝固酶-葡 萄球菌、微球菌)也引起全身感 染 • 污染瓶只见于一套瓶中的1-2瓶 • 只有第二套来鉴别 • 不作药敏 • 保留此瓶几天,等待第2套结果 • JCM 2002:40:2437-2444 如何减少污染瓶
• 不包括寄生虫,病毒,生物战、及分 枝杆菌
• 不提名任何商业血培养系统 • 明确血培养的临床意义 • 标本的收集和运送 • 上机后一系列程序:孵育,结果显 示,镜检,分离,鉴定,药敏
• 结果解释(污染、仪器故障…..)
• 报告结果方法
陈民钧
2
大纲
• 明确血培养的临床意义 • 标本的收集和运送 • 最佳的培养基和操作程序 • 自动化血培养仪的评估 • 结果解释(污染、仪器故障…..)
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• • • •
陈民钧
HPA BSOP 3715建议的标本收集
优质的实验室操作
• 取血合适的时间
– 尽可能抗菌药使用前 – 寒颤和发热初起;心内膜炎(持续性菌血症)例外
• 标本类型和取血方法
– 不要和测血气及血沉的取血同时进行(或在先) – 穿刺点消毒: 以醇类、洗必泰为好
陈民钧
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优质的实验室操作
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方法和操作步骤
感染性心内膜炎的血流感染特殊要求
亚急性心内膜炎 • 血培养的病原学诊断极其重要 • 30-60分钟内取两次两套血, • 然后才开始抗菌药的经验治疗
陈民钧
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方法和操作步骤 感染性心内膜炎的血流感染特殊要求
• 取血的血培养瓶数 • 取一次、一瓶血显然是不对的
– 血量不够
– 血培养的污染菌通常在两套血培养中只有一瓶发生
陈民钧
PVE 常见病原菌
– MRSCON
– MRSA – 革兰阴性菌 – 念珠菌、曲霉菌 – 链球菌、肠球菌 – 棒状杆菌属菌
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方法和操作步骤 感染性心内膜炎的血流感染特殊要求
急性心内膜炎 • 可能的病原菌-金黄色葡萄球菌MRSA • 要立即取血作血培养 • 立即抗菌药的经验治疗 • 抗菌药治疗前取1-2套血,不得超过30分钟。
• • • • • • • • • 大肠 肺链 金葡 肠杆菌科菌 脑膜炎奈瑟菌 乙链 伤寒杆菌 布氏杆菌 淋球菌
医院获得性菌血症
• 凝固酶阴性葡萄球菌 • 大肠、 • 金葡、 • 肠杆菌科菌、 • 绿脓杆菌、 • 肠球菌 • 厌氧菌 • 肺链、 • 酵母菌
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陈民钧
明确血培养的临床意义 儿童菌血症的分类 BSOP 3715 儿童:
静脉血 A套 静脉血 B套 同一菌
导管血 菌量
导管血 时间早
其它部 位感染 特征
CRBSI
1
2 3 4 5

+ + + -
- 重作

+ + + -
- 重作

是 + + 是 5倍 +
金葡菌、 定量培 加Maki 养 法证明 念珠菌

120


是 可能


120‘

是 定置菌
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陈民钧

是?
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方法和操作步骤
BSOP 3715
• 多次一过性菌血症(intermittent)
– 未引流的腹腔脓肿 – 肺炎球菌肺炎
• 持续性菌血症(Continuoys)
– 感染性心内膜炎 – 化脓性 凝血性脉管炎 – 防御低下的严重感染
陈民钧
6
明确血培养的临床意义 其它菌血症的分类 BSOP 3715
• Sepsis:具有全身反应,如发热、心动过速, 的感染 • Sepsis syndrome:Sepsis 加任何一器官功能 不正常,加以下症状之一:血乳酸盐升高,尿 少,意识障碍,动脉压低 (hypoxia) • Sepsis shock: Sepsis syndrome 加低血压
Pseudobacteraemia: • 病原菌来源于病人血流之 外
– 不正确采血 – 实验室操作 – 可产生暴发性,消毒液被菌 污染
• 仪器问题
– 白细胞过多 – 过量的血量 – 其它
陈民钧
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血培养瓶可疑污染菌
细菌室如何分析研究污染瓶
没收到
48小时内又收 到第2套否? 收到了 生长菌是同一 菌? 是同一菌 草绿色链球菌? 是病原菌

陈民钧
1
CLSI及总结了 30年来工作
• 不包括寄生虫,病毒,生物战、及分 枝杆菌
• 不提名任何商业血培养系统 • 明确血培养的临床意义 • 标本的收集和运送 • 最佳的培养基和操作程序 • 自动化血培养仪的评估
英国血培养研究和操作程序 www.evaluationsstandards.org.uk
• • • • 肺链 脑膜炎奈瑟菌 金葡菌 大肠杆菌
新生儿
• • • • B群链球菌 大肠杆菌 凝固酶阴性葡萄球菌 酵母菌
陈民钧
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方法和操作步骤
导管相关性的血流感染的血培养 • CRBSI是医院相关性最常见的原因 • 美国每年有25万病人发生 • 死亡率12-35%
陈民钧
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导管相关性菌血症
(CRBSI)
按菌谱评 估
没生长
可能污染菌, 不作药敏,除 非医生要求
不是
按菌谱评 估
评估内容: 阳性瓶数 第2套结果 病史 白细胞数 体温 影像学 病理 与医生讨论
是病原菌,作药敏
陈民钧
Richer JCM, 2002; 40:2437-2444
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明确血培养的临床意义 成人菌血症的分类 BSOP 3715
社区获得性菌血症
陈民钧
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方法和操作步骤
感染性心内膜炎(IE)的血流感染
人工瓣膜心内膜炎(PVE)
– – – – 人工瓣膜病人的2%得PVE 占全体心内膜炎病人的20% PVE多见于人工主动脉瓣 PVE手术后的任何时间均可发 生,越后越少,细菌种类也不 同 – 早期PVE(几个月内)死亡率高于 晚期PVE (几年后) – 多为医院感染耐药株
导管相关性的血流感染(CRBSI) 现有第2种方法
短期外周导管的方法
• 用静脉采血法采集2套外周血作血培养,

用Maki半定量培养法对导管尖片段进行培养(即查导
管表面的定植菌引起的感染)
陈民钧
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方法和操作步骤
导管相关性的血流感染(CRBSI) 现有第2种方法
• 结果解释: 血培养 1或2 套阳性
陈民钧
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明确血培养的临床意义
• 血培养查病原菌对诊断以下疾病很重要:
– – – – – – – 菌血症 感染性心内膜炎 临床不明原因感染 假体植入后感染〔人工关节、人工瓣膜〕 静脉导管相关性菌血症 Septic关节炎 肺炎
• 血培养是最好的工具帮助它们用药、减少死亡 率
陈民钧 4
明确血培养的临床意义 指示预后
病灶播散不常见。但此典型描述不常见;因此“亚急
性”一词不再使用。Duke1994年曾推荐此词作诊断用。 现认为只作为疾病、病原菌、病理过程的描述。
陈民钧 25
方法和操作步骤
感染性心内膜炎(IE)的血流感染
Native瓣膜心内膜炎 • 病因中不再提慢性风湿心脏病一词 • 敏感因素为:充血性心脏病;二尖瓣下垂;老 人中的退行性瓣膜病(80%为二尖瓣下垂) • 20%的金葡败血症病人、虽有正常瓣膜,可发
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方法和操作步骤 导管相关性的血流感染诊断方法之一
对非隧道式、隧道式的中心静脉导管、静脉留置口(VAP) 可疑有CRBSI的患者推荐的培养方法: 至少2套血培养 • 经外周静脉穿刺 采血1套 • 从导管中心或静脉留置口隔膜采血1套 • 二者的采血时间应该接近(建议 5分钟)
陈民钧
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方法和操作步骤 导管相关性的血流感染诊断方法之一
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