植物组织培养基本操作图解

1、点着酒精灯
2、双手擦拭消毒
3、剪刀灭菌
外焰
4、酒精中冷却
5、把酒精烧去
6、打开三角瓶——铝箔纸的拿法a
8、瓶口在火焰上烧过
9、铝箔纸的放法
11、镊出苗
12、放入培养皿中
13 、 幼 苗 形 态 生 长 点
——
14、剪取茎段
15、剪好的苗
培养皿的拿法
16、茎段接种a
17、茎段接种b
植物组培基本操 作图解
植物组织培养的内容
植物组织培养包括以植物和它的离
体器官、组织、细胞和原生质体为外植
体的离体无菌培养，拥有几种不同水平
的培养技术，即整体的、器官的、组织
的、细胞和原生质的培养技术。（植株 培养、胚胎培养、器官培养、组织培养、 细胞培养、原生质体培养 ）
植物组织培养中的重要概念
目镜
放大倍数 旋钮 物镜 焦距旋钮
底光源开关 解剖载物台
上光源调节 旋钮
显 微 解 剖 镜 使 用 图 解
愈伤组织：指由植物的一种组织或器官
经历脱分化形成的原始胚样组织，它具
Leabharlann Baidu
有再分化成为完整植物体的潜能；
外植体：植物组织培养中用来进行无菌
培养的离体材料，可以是器官、组织、 细胞和原生质体等；
无菌和消毒： 无菌操作要注意：每
次操作前，将双手用酒精棉球擦拭 消毒；解剖针、解剖刀等金属工具 用火焰烧过灭菌，在酒精中冷却， 再将酒精烧去方可使用；尽量减少 无菌三角瓶和培养皿在空气中的暴 露时间；所有无菌操作尽量快速完 成，并请在酒精灯附近进行。
成，用封口膜将培养皿封好。
３、在恒温培养箱中，26℃下,培养六周，可形成
簇生芽丛。
1、幼苗形态
2、剪取茎尖
茎尖
3、剪好的茎尖
4、倒入70%酒精处理1分钟
5、倒去酒精
6、倒入消毒液(一般为升汞）处理15分钟
7、倒去消毒液
8、无菌水冲洗5次
9、取出茎尖
10、在滤纸上吸干水分
11 、 双 目 解 剖 镜 下 解 剖 茎 尖
组 培 实 验 用 品
一、无菌苗的快速切繁
1、点着酒精灯，双手擦拭消毒，打开长有无菌苗 的三角瓶，三角瓶瓶口使用前后需在酒精灯外焰 上烧过灭菌。 2、用灭菌的镊子轻轻捏出幼苗，放在无菌的培养 皿中，用灭菌的剪刀将主茎剪成若干0.5-1cm的 小段，要求每段至少包含一个生长点，接入盛有 MS培养基的三角瓶中，每一个切段必须直接接触 培养基，三角瓶口重新烧过灭菌，并重新封好。 3、在光照培养箱中，25℃，16小时光照条件下培 养4周，可长成完整植株。
1、将苗剪出伤口
2、剪好的叶片和茎段
3、打开培养皿
5、愈伤组织接种
6、培养皿封口
三、苗的茎尖培养
１、取幼苗10株，剪取1cm左右的茎尖→浸入70% 的酒精1分钟→消毒液中15分钟→无菌水冲洗5次 →灭菌的滤纸上吸干→放入灭菌的培养皿。 ２、在双目解剖镜下，用灭菌的解剖针剥去幼叶露 出生长锥，挑取带着两至三个叶原基的生长锥。 移到盛有B5培养基的培育皿中，诱导愈伤组织形
18、接种好的苗a
19、接种好的苗b
20、重新封好瓶口a
21、重新封好瓶口b
22、重新封好瓶口c
二 愈伤组织的培养
１、挑选生长健康的无菌叶或茎，在 灭菌的培养皿中→剪成0.5-1cm2的 小块或相当大小的茎段(造成伤口), →接种在盛有MS培养基的培养皿中 →将培养皿用封口膜封住。 ２、在光照培养箱中，25℃下,16小 时光照，培养两周，可形成愈伤组 织。