mCherry标签抗体
基于双色荧光标签蛋白GFP和mCherry进行免疫共沉淀检测蛋白互作的方
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910825400.9(22)申请日 2019.09.02(71)申请人 江苏省农业科学院地址 210014 江苏省南京市玄武区钟灵街50号(72)发明人 付健美 施雨 纪锐 方继朝 (74)专利代理机构 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204代理人 王艳(51)Int.Cl.G01N 33/68(2006.01)G01N 33/533(2006.01)G01N 33/541(2006.01)G01N 33/58(2006.01)G01N 21/64(2006.01)(54)发明名称基于双色荧光标签蛋白GFP和mCherry进行免疫共沉淀检测蛋白互作的方法(57)摘要本发明公开基于双色荧光标签蛋白GFP和mCherry进行免疫共沉淀检测蛋白互作的方法，将目标基因分别构建到表达载体的N端，提质粒后转化农杆菌，制备农杆菌侵染液共注射模式植物，提取共注射烟草叶片蛋白，用GFP -Trap Abeads去富集带有GFP标签的目标蛋白，同时将带有mCherry标签的其他目标蛋白免疫下来，最后分别使用GFP和mCherry标签抗体检测目标蛋白在免疫前和免疫后的表达及互作情况。
本发明在实现荧光可视化实时监控目标蛋白在活细胞内表达及共定位的同时，可实时选择表达量最高的时期直接进行免疫共沉淀高效验证蛋白互作，极大提高蛋白互作验证的成功率，大幅度降低时间和经济成本。
权利要求书1页 说明书9页序列表3页 附图3页CN 110456075 A 2019.11.15C N 110456075A1.基于双色荧光标签蛋白GFP和mCherry进行免疫共沉淀检测蛋白互作的方法，其特征在于，包括以下步骤：1）分别构建含有待验证互作目标基因的载体：将两个或两个以上待验证互作的目的基因分别同源重组到表达载体pBinplus -GFP和/或pBinplus -mCherry的N端，提取质粒后分别转化农杆菌；2）将步骤1）得到的两个或两个以上的农杆菌混合制备农杆菌侵染液共注射模式植物；3）提取步骤2）共注射模式植物叶片蛋白获得蛋白粗提液，用GFP -Trap A beads去富集蛋白粗提液中带有GFP标签的目标蛋白，同时将带有mCherry标签的其它目标蛋白免疫下来，最后分别使用GFP和mCherry荧光标签抗体检测两种或两种以上的目标蛋白在免疫前和免疫后的表达及互作情况。
标签抗体该如何选择？
标签抗体标签抗体（Tag Antibody）可用于检测和纯化各种商品化表达载体上的标签序列，籍以分析检目的蛋白的表达含量及其功能。
其原理是抗原—抗体反应，这些标签抗体可以高度特异地结合对应的标签融合蛋白。
亲和性标签亲和标签大都有特异性的配基，利用这些配基可以方便的用亲和层析的方法对融合蛋白进行分离和纯化。
共同特点：●纯化方便，一般通过一步纯化就可以获得纯度和质量比较好的融合蛋白；●标签对目的蛋白的三维结构或是生物学活性影响很小；●标签易于切除；●纯化过程中可以对目的蛋白进行简单而精确的测量；●适用于大量不同蛋白质的表达。
Flag标签Flag标签是由八个亲水氨基酸构成的一段寡肽，序列为Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys，可用于蛋白纯化及检测。
★推荐南京铭研生物Flag标签抗体（MY1906），可申领免费试用免疫宿主：小鼠应用范围：WB，IP应用说明：WB: 1:500 ~ 1:10000, IP: 1:200 ~ 1:2000Lane 1: Flag Tagged Protein (0.80 μg)Lane 2: Flag Tagged Protein (0.50 μg)Lane 3: Flag Tagged Protein (0.10 μg)M: Western Blot MarkerUsing Anti- Flag antibodyHis标签His-tag由人工合成的组氨酸首尾相连构成，通常由6个氨基酸（HHHHHH）组成，也有3个和8个的情况。
另外，也存在一种由19个组氨酸构成的天然多聚组氨酸标签（HAT-tag)。
★可推荐南京铭研生物的his抗体（MY1901）,可申领免费试用，试用反馈后下单立减50！Lane 1: C-His融合蛋白Lane 2：N-His融合蛋白Lane 3：Internal-His融合蛋白稀释比例：1:3000HA标签HA融合蛋白也是一种小肽，由9个氨基酸组成( YPYDVPDYA)，其来源于流感病毒的红细胞凝集素表面抗原决定簇。
mcherry分子量
mcherry分子量Mcherry是一个红色荧光蛋白，是从石榴(Great Pomegranate)的番石榴炮果中分离出来的。
Mcherry可以被用于细胞和分子生物学中的荧光标记。
Mcherry的分子量是多少呢？这是一个很重要的问题，因为它涉及到对Mcherry 的理解和应用。
首先，要明确一下分子量的概念。
分子量是指一个分子的相对分子质量，通常以Dalton(Da)为单位。
它可以通过比较分子量为1Da的质量与该分子相对分子质量的比值来获得。
那么，Mcherry的分子量是多少呢？Mcherry的相对分子质量为28,426 Da。
这个数字是通过对Mcherry的核苷酸序列进行计算得出的。
Mcherry的结构是由238个氨基酸组成的，这些氨基酸的序列决定了Mcherry的荧光特性。
Mcherry的结构是由一个beta桶和两个alpha螺旋构成的。
beta桶是一个八个beta折叠的结构，alpha螺旋则包裹在beta桶旁边。
Mcherry的beta桶和alpha螺旋与其他绿色荧光蛋白（green fluorescent protein，GFP）的结构非常相似。
Mcherry是由荧光蛋白家族中一类称为DsRed的蛋白衍生而来的。
DsRed最初是从珊瑚上分离出来的一种荧光蛋白，它是第一个被广泛用于基因编辑研究中的红色荧光蛋白。
不过，由于DsRed在某些情况下会被“漂白”（这意味着荧光会消失），Mcherry和其他一些红色荧光蛋白成为了更好的替代品。
Mcherry可以通过基因转染或转化来在细胞中表达。
它可以被用作标记蛋白质或细胞，以便在显微镜下观察它们的位置和移动。
具有特定的激发波长和发射波长，可以通过变化激发光来调节Mcherry的荧光。
因此，Mcherry在细胞和分子生物学中被广泛应用。
总之，Mcherry是细胞和分子生物学领域中的一个非常重要的工具。
它可以通过转染或转化来在细胞中表达，并用于标记细胞和蛋白质的位置和移动。
抗体与marker结合-概述说明以及解释
抗体与marker结合-概述说明以及解释1.引言1.1 概述抗体与marker的结合在生命科学研究以及医学诊断和治疗中具有重要的作用。
抗体是一种免疫蛋白，能够识别并结合特定的分子，即抗原。
marker，亦称为生物标记物，是指在细胞或生物体中特定的分子或结构，可以用来指示某种生理或疾病的状态。
抗体的作用是通过识别和结合特定抗原，触发免疫反应并参与身体对抗原的清除及病原体的消灭。
抗体具有极高的特异性，可以识别细微差异的抗原，因此在生命科学研究中被广泛应用。
通过与特定抗原结合，抗体可以用作生物标记物检测的工具，用于检测抗原的存在和定量分析。
此外，抗体还可以用于细胞免疫学的研究，帮助科研人员了解免疫系统的功能和调控机制。
marker在生物学研究中起着关键的作用，它们可以标记和识别特定类型的细胞、分子或生物过程。
通过使用marker，研究人员可以对细胞进行分类、定位和追踪，以揭示其功能和相互作用关系。
在医学诊断中，marker也被用作疾病的诊断和治疗的指示物。
例如，血液检测中的肿瘤标记物可以帮助医生判断患者是否患有某种癌症，从而指导治疗方案的选择。
抗体与marker的结合具有重要的意义。
通过将特定抗体标记于marker上，可以实现对特定分子或细胞的高度特异性识别和定位。
这使得我们能够更加准确地研究生物过程和疾病机制，为生命科学的进步和医疗技术的发展提供了坚实的基础。
本文将重点探讨抗体与marker的结合在生命科学研究和医学应用中的作用和意义。
我们将分析抗体与marker的配对原理和技术方法，并讨论其在疾病诊断、药物研发和细胞研究方面的应用前景。
通过了解抗体与marker的结合，我们可以更好地利用这一强大工具来推动科学研究的发展，为人类健康做出更大的贡献。
1.2 文章结构文章结构部分的内容如下：文章结构：本文将按照以下结构进行论述：第一部分为引言部分，主要包括概述、文章结构和目的。
第二部分为正文部分，主要包括抗体的作用和Marker的作用。
几种常用的蛋白标签的功能和优点
重组蛋白表达技术现已经广泛应用于生物学各个具体领域。
特别是体内功能研究和蛋白质的大规模生产都需要应用重组蛋白表达载体。
美国GeneCopoeia的蛋白表达载体按照表达宿主的不同新推出3类，分别为表达宿主为大肠杆菌，哺乳动物细胞的，以及慢病毒载体，宿主可以为哺乳动物细胞和原代细胞。
除了必要的复制和筛选的元件，协助表达和翻译的元件外，本文将各类载体分别按照功能标签的不同确定种类并将个标签的功能初步介绍如下：His6：His6是指六个组氨酸残基组成的融合标签，可插入在目的蛋白的C末端或N末端。
当某一个标签的使用，一是能构成表位利于纯化和检测；二是构成独特的结构特征（结合配体）利于纯化。
组氨酸残基侧链与固态的镍有强烈的吸引力，可用于固定化金属螯合层析(IMAC)，对重组蛋白进行分离纯化。
使用His-tag有下面优点：1.标签的分子量小，只有~0.84KD，而GST和蛋白A分别为~26KD和~30KD，一般不影响目标蛋白的功能；2.His标签融合蛋白可以在非离子型表面活性剂存在的条件下或变性条件下纯化，前者在纯化疏水性强的蛋白得到应用，后者在纯化包涵体蛋白时特别有用，用高浓度的变性剂溶解后通过金属螯和亲和层析去除杂蛋白，使复性不受其它蛋白的干扰，或进行金属螯和亲和层析复性；3.His标签融合蛋白也被用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA相互作用研究；4.His标签免疫原性相对较低，可将纯化的蛋白直接注射动物进行免疫制备抗体；5.可应用于多种表达系统，纯化的条件温和；6.可以和其它的亲和标签一起构建双亲和标签。
Flag:Flag标签蛋白为编码8个氨基酸的亲水性多肽（DYKDDDDK），同时载体中构建的Kozak序列使得带有FLAG的融合蛋白在真核表达系统中表达效率更高。
FLAG作为标签蛋白，其融合表达目的蛋白后具有以下优点：1.FLAG作为融合表达标签，其通常不会与目的蛋白相互作用并且通常不会影响目的蛋白的功能、性质，这样就有利用研究人员对融合蛋白进行下游研究。
常用的几种蛋白标签
重组蛋白表达技术现已经广泛应用于生物学各个具体领域。
特别是体内功能研究和蛋白质的大规模生产都需要应用重组蛋白表达载体。
美国GeneCopoeia的蛋白表达载体按照表达宿主的不同新推出3类，分别为表达宿主为大肠杆菌，哺乳动物细胞的，以及慢病毒载体，宿主可以为哺乳动物细胞和原代细胞。
除了必要的复制和筛选的元件，协助表达和翻译的元件外，本文将各类载体分别按照功能标签的不同确定种类并将个标签的功能初步介绍如下：His6：His6是指六个组氨酸残基组成的融合标签，可插入在目的蛋白的C末端或N末端。
当某一个标签的使用，一是能构成表位利于纯化和检测；二是构成独特的结构特征（结合配体）利于纯化。
组氨酸残基侧链与固态的镍有强烈的吸引力，可用于固定化金属螯合层析(IMAC)，对重组蛋白进行分离纯化。
使用His-tag有下面优点：1.标签的分子量小，只有~0.84KD，而GST和蛋白A分别为~26KD和~30KD，一般不影响目标蛋白的功能；2.His标签融合蛋白可以在非离子型表面活性剂存在的条件下或变性条件下纯化，前者在纯化疏水性强的蛋白得到应用，后者在纯化包涵体蛋白时特别有用，用高浓度的变性剂溶解后通过金属螯和亲和层析去除杂蛋白，使复性不受其它蛋白的干扰，或进行金属螯和亲和层析复性；3.His标签融合蛋白也被用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA相互作用研究；4.His标签免疫原性相对较低，可将纯化的蛋白直接注射动物进行免疫制备抗体；5.可应用于多种表达系统，纯化的条件温和；6.可以和其它的亲和标签一起构建双亲和标签。
Flag:Flag标签蛋白为编码8个氨基酸的亲水性多肽（DYKDDDDK），同时载体中构建的Kozak序列使得带有FLAG的融合蛋白在真核表达系统中表达效率更高。
FLAG作为标签蛋白，其融合表达目的蛋白后具有以下优点：1.FLAG作为融合表达标签，其通常不会与目的蛋白相互作用并且通常不会影响目的蛋白的功能、性质，这样就有利用研究人员对融合蛋白进行下游研究。
碧云天生物技术pCMV-C-mOrange2说明书
碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology订货热线: 400-1683301或800-8283301订货e-mail:******************技术咨询: *****************网址: 碧云天网站 微信公众号pCMV-C-mOrange2 (橙色荧光蛋白)产品编号产品名称包装D2625-1µg pCMV-C-mOrange2 (橙色荧光蛋白)1µgD2625-100µg pCMV-C-mOrange2 (橙色荧光蛋白)100µg产品简介：pCMV-C-mOrange2是碧云天自行研发的哺乳动物细胞表达质粒，用于表达C端含mOrange2标签的融合蛋白。
mOrange2蛋白是一种极其明亮的桔色荧光蛋白，与mOrange蛋白相比，其蛋白稳定性得以提高。
pCMV-C-mOrange2含有CMV启动子，可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。
pCMV-C-mOrange2在多克隆位点的后面有一个mOrange2的完整编码序列，因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达C端含有mOrange2标签的融合蛋白。
利用mOrange2的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位，也可以利用mOrange2抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。
mOrange2与GFP没有序列同源性，不能使用GFP抗体检测mOrange2，但可以尝试使用抗mcherry的抗体检测mOrange2。
pCMV-C-mOrange2为卡那霉素抗性，并且含有Neomycin筛选标记，转染细胞后，可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
pCMV-C-mOrange2质粒的主要信息如下：Feature Nucleotide PositionCMV promoter 1-602T3 promoter and T3 primer binding site 620-639Multiple cloning site 651-740mOrange2 741-1448 T7 promoter and T7 primer binding site 1498-1519 SV40 polyA signal 1531-1914 f1 origin of ss-DNA replication 2052-2356 bla promoter 2381-2505 SV40 promoter2525-2863 Neomycin/kanamycin resistance ORF 2898-3689 HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal 3690-4148 pUC origin 4277-4944pCMV-C-mOrange2质粒(4996bp)的图谱如下：pCMV-C-mOrange2的多克隆位点的详细图谱如下：SmaISacI SacII NotI XmaI BamHI HindIII651 GAGCTCCACC GCGGTGGCGG CCGCTCTAGC CCGGGCGGAT CCAAGCTTCTCTCGAGGTGG CGCCACCGCC GGCGAGATCG GGCCCGCCTA GGTTCGAAGAEcoRI EcoRV SalI XhoI XbaI mOrange2701 GCAGGAATTC GATATCGTCG ACAGATCTCT CGAGTCTAGA ATGTCTAAGGCGTCCTTAAG CTATAGCAGC TGTCTAGAGA GCTCAGATCT TACAGATTCC751 GAGAAGAAAA TAATATGGCT ATCATCAAGG AATTTATGCG TTTTAAGGTCCTCTTCTTTT ATTATACCGA TAGTAGTTCC TTAAATACGC AAAATTCCAG801 CGTATGGAAG GTTCAGTCAA TGGTCACGAA TTTGAAATTG AAGGTGAAGGGCATACCTTC CAAGTCAGTT ACCAGTGCTT AAACTTTAAC TTCCACTTCC851 AGAAGGTCGT CCATACGAAG GTTTTCAAAC TGCTAAATTG AAGGTAACCATCTTCCAGCA GGTATGCTTC CAAAAGTTTG ACGATTTAAC TTCCATTGGT901 AAGGTGGACC ATTACCTTTT GCATGGGATA TTTTGTCACC ACAGTTTACATTCCACCTGG TAATGGAAAA CGTACCCTAT AAAACAGTGG TGTCAAATGT951 TACGGAAGTA AAGCATATGT TAAGCATCCA GCTGATATTC CTGATTACTTATGCCTTCAT TTCGTATACA ATTCGTAGGT CGACTATAAG GACTAATGAA1001 TAAATTGAGT TTTCCTGAAG GTTTTAAATG GGAACGTGTC ATGAATTTTGATTTAACTCA AAAGGACTTC CAAAATTTAC CCTTGCACAG TACTTAAAAC1051 AAGATGGTGG AGTTGTCACC GTAACACAAG ATTCTTCATT GCAGGATGGATTCTACCACC TCAACAGTGG CATTGTGTTC TAAGAAGTAA CGTCCTACCT1101 GAATTTATCT ACAAGGTTAA ATTGCGTGGA ACCAATTTTC CATCTGATGGCTTAAATAGA TGTTCCAATT TAACGCACCT TGGTTAAAAG GTAGACTACC1151 TCCTGTCATG CAAAAGAAAA CAATGGGTTG GGAAGCAAGT TCTGAACGTAAGGACAGTAC GTTTTCTTTT GTTACCCAAC CCTTCGTTCA AGACTTGCAT1201 TGTACCCTGA AGATGGAGCC CTTAAAGGTG AAATCAAGAT GCGTTTGAAAACATGGGACT TCTACCTCGG GAATTTCCAC TTTAGTTCTA CGCAAACTTT1251 CTTAAGGATG GTGGACATTA CACTTCTGAA GTCAAGACAA CTTACAAGGCGAATTCCTAC CACCTGTAAT GTGAAGACTT CAGTTCTGTT GAATGTTCCG1301 CAAAAAGCCA GTACAGCTTC CTGGAGCTTA CATCGTTGGT ATCAAATTGGGTTTTTCGGT CATGTCGAAG GACCTCGAAT GTAGCAACCA TAGTTTAACC1351 ATATTACATC ACACAATGAA GATTACACTA TCGTTGAACA ATATGAACGTTATAATGTAG TGTGTTACTT CTAATGTGAT AGCAACTTGT TATACTTGCAApaI1401 GCAGAAGGTC GTCACTCTAC TGGTGGTATG GATGAACTTT ACAAGTAAG GCGTCTTCCAG CAGTGAGATG ACCACCATAC CTACTTGAAA TGTTCATTC C1451 GGGCCCGGTA CCTTAATTAA TTAAGGTACCCCCGGGCCAT GGAATTAATT AATTCCATGGpCMV-C-mOrange2中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-C-mOrange2)包括：AclI AfeI AgeI AhdI AscI AsiSI BbsI BcgI BlpI BmgBI Bpu10I BsiWI BsmBI BspEI BsrGI BssHII BstZ17I EarI EcoNI Esp3I FseI PmeI PmlI PpuMI PshAI PspXI SapI SbfI SgrAI SpeI SwaI XcmIpCMV-C-mOrange2中的单酶切位点（Restriction enzymes that cut pCMV-C-mOrange2 once）包括：AccI GT’MK,AC 718 MluI A’CGCG,T 1914 AflII C’TTAA,G 1251 MscI TGG|CCA 3108 AleI CACNN|NNGTG 661 NarI GG’CG,CC3026 ApaI G,GGCC’C 1453 NheI G’CTAG,C597 ApaLI G’TGCA,C 4630 NotI GC’GGCC,GC 668 BaeI ,N)5’(N)10ACNNNNGTAYC(N)7,(N)5’ 1185 PaeR7I C’TCGA,G 729 BamHI G’GATC,C 687 PciI A’CATGT 49442 / 4 D2625pCMV-C-mOrange2(橙色荧光蛋白) 400-1683301/800-8283301 碧云天/BeyotimeBclI T’GATC,A 1685 PflFI CCAN,NNN’NTGG 3144 BglII A’GATC,T 723 PflMI G,GCGC’C 1146 BmtI G,CTAG’C 601 PluTI G,GCGC’C 3029 BsaI GGTCTCN’NNNN, 4015 PspOMI G’GGCC,C 1449 BsaXI ,NNN’(N)9AC(N)5CTCC(N)7,NNN’ 2078 PstI C’TGCA,G 703 BseRI GAGGAG(N)8,NN’ 2844 PvuI CG,AT’CG 1531 BsgI GTGCAG(N)14,NN’ 1420 RsrII CG’GWC,CG 3524 BspDI AT’CG,AT 2866 SacI G,AGCT’C 655 BstBI TT’CG,AA 3708 SacII CC,GC’GG 662 BstEII G’GTNAC,C 893 SalI G’TCGA,C 717 BstXI CCAN,NNNN’NTGG 663 SfiI GGCCN,NNN’NGGCC 2801 BtsI GCAGTG,NN’ 1867 SfoI GGC|GCC 3027 ClaI AT’CG,AT 2866 SmaI CCC|GGG 682 CspCI ,NN’(N)11CAA(N)5GTGG(N)10,NN’ 382 SnaBI TAC|GTA 346 DraIII CAC,NNN’GTG 2144 SrfI GCCC|GGGC 682 Eco53kI GAG|CTC 653 StuI AGG|CCT 2847 EcoRI G’AATT,C 705 TspMI C’CCGG,G 680 EcoRV GAT|ATC 713 Tth111I GACN’N,NGTC 3144 HindIII A’AGCT,T 693 XbaI T’CTAG,A 735 HpaI CC,TGCA`GG 1791 XhoI C’TCGA,G 729 KasI G’GCGC,C 3025 XmaI C’CCGG,G 680 MfeI C’AATT,G 1778 XmnI GAANN|NNTTC 871 pCMV-C-mOrange2质粒中推荐使用的测序引物序列如下：T3 primer (620-639): 5'-AATTAACCCTCACTAAAGGG-3'C-mOrange2 primer (852-873): 5'- AACCTTCGTATGGACGACCTTC -3'pCMV-C-mOrange2的全序列信息请参考碧云天的网站上该质粒的信息。
几种常用的蛋白标签的功能和优点资料
几种常用的蛋白标签的功能和优点重组蛋白表达技术现已经广泛应用于生物学各个具体领域。
特别是体内功能研究和蛋白质的大规模生产都需要应用重组蛋白表达载体。
美国GeneCopoeia的蛋白表达载体按照表达宿主的不同新推出3类，分别为表达宿主为大肠杆菌，哺乳动物细胞的，以及慢病毒载体，宿主可以为哺乳动物细胞和原代细胞。
除了必要的复制和筛选的元件，协助表达和翻译的元件外，本文将各类载体分别按照功能标签的不同确定种类并将个标签的功能初步介绍如下：His6：His6是指六个组氨酸残基组成的融合标签，可插入在目的蛋白的C末端或N末端。
当某一个标签的使用，一是能构成表位利于纯化和检测；二是构成独特的结构特征（结合配体）利于纯化。
组氨酸残基侧链与固态的镍有强烈的吸引力，可用于固定化金属螯合层析(IMAC)，对重组蛋白进行分离纯化。
使用His-tag有下面优点：1.标签的分子量小，只有~0.84KD，而GST和蛋白A分别为~26KD和~30KD，一般不影响目标蛋白的功能；2.His标签融合蛋白可以在非离子型表面活性剂存在的条件下或变性条件下纯化，前者在纯化疏水性强的蛋白得到应用，后者在纯化包涵体蛋白时特别有用，用高浓度的变性剂溶解后通过金属螯和亲和层析去除杂蛋白，使复性不受其它蛋白的干扰，或进行金属螯和亲和层析复性；3.His标签融合蛋白也被用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA相互作用研究；4.His标签免疫原性相对较低，可将纯化的蛋白直接注射动物进行免疫制备抗体；5.可应用于多种表达系统，纯化的条件温和；6.可以和其它的亲和标签一起构建双亲和标签。
Flag:Flag标签蛋白为编码8个氨基酸的亲水性多肽（DYKDDDDK），同时载体中构建的Kozak序列使得带有FLAG的融合蛋白在真核表达系统中表达效率更高。
FLAG作为标签蛋白，其融合表达目的蛋白后具有以下优点：1.FLAG作为融合表达标签，其通常不会与目的蛋白相互作用并且通常不会影响目的蛋白的功能、性质，这样就有利用研究人员对融合蛋白进行下游研究。
所有质粒载体汇总
酿酒酵母表达载体pYES2,pYES2/NT,pYES2/CT,pYES3,pYES6, pYCplac22-GFP,酵母载体pAUR123,pRS303TEF,pRS304, pRS305,pRS306,pY13TEF,pY14TEF，pY15TEF，pY16TEF,酵母基因重组表达载体pUG6, pSH47,酵母单杂载体pHISi,pLacZi,pHIS2, pGAD424, 酵母双杂交系统:酿酒酵母Y187, 酿酒酵母AH109；质粒pGADT7,pGBKT7；对照质粒pGBKT7-53，pGBKT7-lam，pGADT7-T，PCL1，酿酒酵母菌株INVSc1,YM4271, AH109,Y187,Y190,毕赤酵母表达载体pPIC9K,pPIC9K-His,pPIC3.5K,pPICZalphaA,B,C,pPICZA,B,C,pGAPZαA,pAO815,pPIC9k-His,pHIL-S1,pPink hc，配套毕赤酵母Pichiapink,毕赤酵母宿主X33，KM71，KM71H，GS115，原核表达载体pQE30,31,32,40,60,61,62,等原核表达载体,包括pET系列，pET-GST，pGEX系列（含GST标签），pMAL系列pMAL-c2x,-c4x,-c4e,-c5x,-p5x,pBAD,pBADHis,pBADmycHis系列，pQE系列,pTrc99a,pTrcHis系列，pBV220,221,222,pTXB系列，pLLP-ompA,pIN-III-ompA （分泌型表达系列）,pQBI63（原核表达带荧光）pET3a, pET 3d, pET 11a, pET 12a, pET 14b, pET 15b, pET 16b, pET 17b, pET 19b, pET 20b, pET 21a,b,d, pET 22b, pET 23a, pET 23b, pET 24a,b, pET 25b, pET 26b, pET 27b, pET 28a,b, pET 29a, pET 30a, pET 31b, pET 32a, pET 35b, pET 38b, pET 39b, pET 40b, pET 41a,b pET 42a, pET 43.1a,b pET 44a, pET 49b pET302,303 pET His,pET Dsb,pET GST,pET Trx pQE2, pQE9 pQE30,31,32, pQE 40 pQE70 pQE80L pQETirs system pRSET-A pRSET-B pRSET-C pGEX4T-1,-2,-3,5x-1,6p-1,6p-2,2tk,3c pBV220,221,222 pTrcHisA,B,C pBAD24,34,43 pBAD HisA,B,C pPinPoint-Xa1,Xa2,Xa3 pMALc2x, p2x pBV220 pGEM Ex1, pGEM7ZF（+）, pTrc99A, pTwin1, pEZZ18 pkk232-8,pkk233-3,pACYC184,pBR322,pUC119 pTYB1,pTYB2,pTYB4,pTYB11 pBlueScript SK （+）,pBlueScript SK（-）pLLP ompA, pINIIIompA, pMBP-P ,pMBP-C, 大肠杆菌冷激质粒： pColdI pColdII pColdIII pColdTF 原核共表达质粒：pACYCduet-1,pETduet-1,pCDFduet-1，pRSFduet-1 Takara公司大肠杆菌分子伴侣： pG-KJE8 pGro7 pKJE7 pGTf2 pTf16 大肠杆菌宿主细胞： DH5a JM101 JM103JM105 JM107 JM109 JM110 Top10 Top10F BL21（DE3）HB101 ER2529 E2566 C2566 MG1655 XL-10gold XL blue M15 JF1125 K802 SG1117 BL21（AI）BL21（DE3）plysS TG1 TB1 DH5a（pir）Tuner（DE3）Bl21 codonplusRIPL Novablue （DE3）Rosetta Rosetta（DE3）Rosetta（DE3）plys Rosetta-gami（DE3）Rosetta-gamiB（DE3）, Rosetta-gamiB（DE3）plysS Orgami（DE3）OrgamiB（DE3）HMS174（DE3）植物表达/RNAi载体农杆菌pBI121,pBI121-GFP,pBI101,pBI221,pSN1301,pUN1301,pRTL2 , pRTL2-GFP , pRTL2-CFP, pRTL2-RFP , pRTL2-YFP,pCAMBIA 1300, 1301, 1302,1303,1304,1305, 1381Z,1391Z,2300, 2301,3300,3301,pCAMBIA super1300,pCAMBIAsuper1300-GFP,pPZP212,pPZP2121,pPZP212-GFP,pGDG,RNAi载体pART27,pHANNIBAL,pKANNIBAL, pFGC5941,pTCK303, pTRV1,pTRV2,T-DNA插入载体（随机突变体库）pSKI015,pSKI074,真菌ATMT载体pBIG2RHPH2-GUS-GFP,pBHt1枯草芽孢杆菌表达载体pWB980,pHT43,pHP13,pHP43,pBE2,pMUTIN4,pUB110,pE194,pMA5, pMK3,pMK4,pHT304,pHY300PLK,pBest502,pDG1363,pSG1154,pAX01, pSAS144,pDL,pDG148-stu,pDG641,pAL12,pUCX05-bgaB,pHT01，配套菌株BS 168,WB600,WB800,WB700,WB800N,1012,FZB42,1A747,广宿主质粒pVLT33RNAi基因沉默干扰敲除载体pSilencer1.0，pSilencer 2.1-U6 hygro， pSilencer 3.1-H1 hygro，pSilencer 3.1-H1 neo， pSilencer 4.1-CMV neo， pSilencer 4.1-CMV puro pMIR-REPORT Luciferase RNAi载体（oligoengine）pSuper-puro RNAi逆转录病毒载体（clontech）: RNAi-Ready pSIREN-Retro Q， RNAi-ReadypSIREN-RetroQ-ZsGreen（Luciferase shRNA Annealed Oligonucleotide）RNAi慢病毒载体（addgene）: pLKO.1哺乳动物表达载体pcDNA3.1+/-,pcDNA4/HisMax B，pSecTag2 A，pVAX1，pBudCE4.1,pTracer CMV2，pcDNA3.1（-）/myc-His A ，pcDNA6-Myc/His B，pCEP4， pIRES，pIRESneo，pIRES hyg3，pCMV-myc，pCMV-HA，pIRES-puro3，pIRES-neo3,pCAGGS哺乳动物双杂交系统pACT，pBIND，pACT-MyoD，pBIND-Id，pG5luc,pCMV-BD, pCMV-AD, pBD-p53, pFR-luc,Cytotrap Two-Hybrid System:pSos, pSos MAFB, pMyr蜕皮激素诱导系统pIND, pVgRxR,LacSwith II哺乳动物诱导表达系统:pOPRSVI ，pOPI3CAT，pCMVLacI,GeneSwitch System:pSwitch哺乳动物表面展示系统:pDisplay, 四环素调控系统（Invitrogen）：pcDNA4/TO/Myc-His A，pcDNA4/TO/Myc-His B，pcDNA4/TO/Myc-His C，pcDNA4/TO/Myc-His/LacZ，pcDNA6/TR四环素调控系统（Clontech）：pTet-On，pTet-Off，pTRE2,pRevTRE，pRevTet-On，pRevTet-off信号通路报告载体:pGAS-TA-Luc，pSTAT3-TA-Luc, pISRE-TA-Luc, pTA-Luc，pIκB-EGFP，pNFAT-TA-Luc，pCaspase3-sensor，pAP1（PMA）-Luc;pGL4.26[luc2P/minP/Hygro],pGL4.29[luc2P/CRE/Hygro],pGL4.30[luc2P/NFA T-RE/Hygro]，pGL4.75;p53-Luc，pAP-1-Luc， pNF-κB-Luc，pSRE-Luc，pFA2-Elk1，pFC-MEKK，pFR-luc,Gateway系统（invitrogen）pcDNA6.2-GWEmGFP-miR negative, pLenti 6/TR,pcDNA 6.2-GW EmGFP-miR，乳酸菌表达载体及各种乳酸菌乳酸杆菌菌株，pNZ8148,pLEISS,pMG36e,pBBR1MCS-5,pBBR1MCS-6,pRV610,pLEM415,pHY3 00PLK,分泌型乳酸菌表达载体pVE5523，pPG611.1,pPG612.1等和乳酸杆菌菌株宿主菌NZ9000,MG1363,Lactobacillus casei 1.539,Lactobacillus casei,acidophilus NCFM,1.2,Lactobacillus sakei 23K,L.plantarum,L.rhamnosusGG,B.coagulans,Bifidobacterium bifidum,Bifidobacterium infantis,Lactococcus lactis M17,1663,Lactobacillus reuterii广宿主表达载体链球菌表达敲除载体假单胞菌表达载体pVLT33,pBBR1MCS-2,3,4,5,6, pJRD215,pJN105,pME6032,Cos载体pLAFR3,pMP2444（GFP）, pHY300PLK,pRT102,pRL1063a, 转座子载体pUT-miniTn5,pMGS100, pWHM10,pKC1139,pSET152,pOJ260,pPG611.1,pPG612.1，腺病毒载体/慢病毒，逆转录病毒表达载体及包装包膜质粒，腺病毒系统（Stratagene）: pAdEasy-1,pShuttle-CMV,pShuttle,pAdTrack, pAdTrack-CMV, pShuttle-IRES-hrGFP-1、pShuttle-IRES-hrGFP-2、pShuttle-CMV-lacZ,pShuttle-CMV-EGFP-C,pXC1, pBHGE3, 配套大肠杆菌BJ5183,293,293T cellline 腺相关病毒系统（Stratagene）： pAAV-MCS，pAAV-RC，pHelper，pAAV-LacZ，pAAV-IRES-hrGFP，pCMV-MCS，慢病毒载体:pLVX-DsRed-Monomer-N1,pLVX-IRES-ZsGreen1,pLVX-AcGFP1-N1,Lenti6/v 5-EDST-EGFP,pWPXL, FUGW,pLentilox 3.7,RNAi-Ready pSIREN-Retro Q,RNAi-Ready pSIREN-Retro Q-ZsGreen,pSUPER.Retro-GFP/Neo,pSUPER-Retro-Neo, pSUPER.Retro-puro,PLNCX PLNCX2 pMSCV-HYG pMSCV-neo pMSCV-puro pLEGFP-C1 pLOX-CW-CRE pLOX-GFP-IRES-TK pRetroX-IRES-DsRedExpress, pLVX-IRES-mCherry质粒载体。
标签抗体汇总综述
标签抗体汇总综述自20世纪70年代中期融合标签技术出现以来，亲和标签已成为一种重组蛋白纯化十分有效的工具，具有结合特性高、纯化条件温和、纯化步骤简单、适用性广泛等显著优势。
目前为止已出现了种类众多，功能各异、用途多样的亲和标签，极大的促进了重组蛋白的有效纯化。
常用亲和标签列表一、亲和标签分类根据自身分子量大小的不同可分为两类：①一类为大的蛋白质分子如GST-tag、SPA-tag、GFP-tag等。
使用时会增加目标蛋白的溶解性，但在蛋白结晶和抗体生产的过程中，标签必须去除。
②另一类为小的多肽标签如6*His-tag、HA-tag、c-myc tag等。
多数情况下由于多肽标签相对较小，对融合蛋白质结构影响小，不需要从融合蛋白质中切除，因而多肽标签较蛋白质标签更为常用。
二、常用亲和标签Flag-tagFlag标签是由八个亲水氨基酸（DYKDDDDK）组成的一个短肽，分子量很小，因此不会遮盖融合蛋白中其他蛋白表位与结构域。
该标签具有天然的亲水特性，可位于蛋白质的C端或N端，利于抗体检测，同时含有一个肠激酶切割位点，可通过肠激酶切除标签。
His-tagHis-tag由人工合成的组氨酸首尾相连构成，通常由6个氨基酸（HHHHHH）组成，也有3个和8个的情况。
His融合标签与其他标签相比有很多明显优势，是目前用于纯化的融合标签中使用最为广泛的一种。
His标签融合蛋白一般采用固定化金属离子亲和层析进行分离纯化，操作较为简便。
StrepⅡ-tagStrepⅡ即链霉亲和素结合肽，是一个小分子的短肽标签，由8个氨基酸（WSHPQFEK）组成，可位于融合蛋白的任一位置。
广泛应用于多种目标蛋白在原核表达系统、哺乳动物表达系统等的纯化。
GST-tagGST即谷胱甘肽-S-转移酶，具有解毒作用，可将谷胱甘肽中的硫基转移至含硝基或卤化物的复合物中。
其天然大小为26KD。
近年来，商品化的GST融合蛋白表达体系以及GST标签抗体系统至今仍被广泛应用。
碧云天生物技术产品说明书 - pCMV-mCherry-p62
碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology 订货热线：400-168-3301或800-8283301 订货e-mail ：******************技术咨询：*****************网址：碧云天网站 微信公众号pCMV-mCherry-p62产品编号 产品名称 包装 D2818-1μg pCMV-mCherry-p62 1μg D2818-100μgpCMV-mCherry-p62100μg产品简介：pCMV-mCherry-p62是碧云天研发的在哺乳动物细胞中表达红色mCherry 标签的人源p62融合蛋白的质粒。
该质粒含有CMV 启动子，为卡那霉素抗性，转染后能够在靶细胞中高效表达带有红色荧光蛋白mCherry 标签的p62融合蛋白，呈现明亮的红色荧光，可以用于细胞自噬(autophagy)的研究。
本质粒转染细胞后，可以使用G418筛选稳定表达融合蛋白的细胞株。
p62也称sequestosome I (SQSTM1)，在多细胞生物(不包括植物和真菌)中高度保守，主要分布于细胞质，也可以定位于细胞核、自噬体(autophagosome)和溶酶体(lysosome)中。
p62是一种应激诱导的蛋白，可以作为信号枢纽(signaling hub)在氨基酸感应(amino acid sensing)和氧化应激等许多细胞事件中发挥重要作用，并且还可以作为PKC 、ERK1、mTORC1、NF-кB 和caspase-8等的支架蛋白(scaffold protein)而参与相应的信号转导。
p62全长440个氨基酸，包含一个PB1(Phox1/Bem1p)结构域，一个锌指结构域(ZZ)，两个核定位信号(NLS1和NLS2)，一个TB (TRAF6 binding)结构域，一个LIR 结构域(LC3-interacting region)，一个KIR 结构域(Keap1-interacting region)，和一个C 端的UBA(Ubiquitin-associated)结构域。
gfp mcherry 流程
gfp mcherry 流程
GFP（绿色荧光蛋白）和mCherry（红色荧光蛋白）是两种广泛应用于生物学研究的荧光标记蛋白。
以下是使用GFP和mCherry进行荧光标记的一般流程：
1. 获得GFP和mCherry基因：可以通过购买或从其他实验室获取这两种蛋白的基因。
2. 克隆GFP和mCherry基因：将GFP和mCherry基因插入到适当的表达载体中，例如质粒或病毒载体。
3. 转染细胞：将表达GFP和mCherry的载体转染到目标细胞中。
转染方法可以是化学转染、电转染或病毒转染等。
4. 选择稳定表达细胞系：在转染后，使用适当的选择剂筛选和培养稳定表达GFP和mCherry的细胞系。
5. 荧光显微镜观察：使用荧光显微镜检查细胞是否成功表达GFP和mCherry。
GFP通常在蓝光激发下发出绿色荧光，而mCherry在红光激发下发出红色荧光。
6. 其他应用：根据实验需要，可以对GFP和mCherry标记的细胞进行进一步的研究和分析，如荧光激活细胞分选、共定位研究等。
需要注意的是，具体的实验流程可能会因研究目的、细胞类型和实验条件等因素而有所不同。
因此，在进行实验前最好参考相关文献
或咨询经验丰富的研究人员。
mcherry基因序列
mcherry基因序列随着生物技术的不断发展，基因工程在生物学领域中得到了广泛的应用。
在基因工程中，基因序列的分析和研究是非常重要的一环。
mcherry基因是近年来被广泛应用的一种基因，本文将对其基因序列进行详细的介绍和分析。
一、mcherry基因的来源和功能mcherry基因是从海葵（Anthozoa）的一种红色荧光蛋白（RFP）中克隆出来的。
mcherry基因的编码区域长为711个碱基，其中含有两个起始密码子和一个终止密码子，编码了237个氨基酸。
该基因的蛋白质产物是一种红色荧光蛋白，可以被广泛应用于基因标记、药物筛选、蛋白质定位等领域。
二、mcherry基因的序列分析1.基因组结构mcherry基因位于染色体上，其基因组结构包括启动子、编码区、终止密码子和3'非翻译区。
启动子是一个重要的调控元件，可以影响基因的转录和表达。
编码区是mcherry基因最重要的部分，包含了蛋白质的全部氨基酸序列。
终止密码子是编码区的结尾，它指示着蛋白质的合成终止。
3'非翻译区则包含了一些重要的调控元件，如转录终止信号、多聚腺苷酸尾部和RNA稳定性元件等。
2.氨基酸序列分析mcherry基因编码的蛋白质是一种红色荧光蛋白，由237个氨基酸组成。
通过氨基酸序列分析，我们可以了解到mcherry蛋白质的结构和功能。
mcherry蛋白质的N端含有一个启动子序列，该序列可以调控mcherry基因的转录和表达。
蛋白质的中间部分是一个β-桶结构，其中包含了荧光色团，可以发出红色荧光。
C端则含有一个终止密码子，指示着蛋白质的合成终止。
3.同源序列比对同源序列比对是一种非常重要的序列分析方法，可以帮助我们了解mcherry基因在不同物种中的保守性和变异性。
通过将mcherry基因序列与其他物种的RFP基因序列进行比对，可以发现mcherry基因在不同物种中的保守性较高，表明其在进化过程中具有一定的优势和适应性。
三、mcherry基因的应用mcherry基因作为一种新型的荧光标记物，被广泛应用于生物学领域中。
融合蛋白标签
在蛋白质功能及结构研究过程中，研究的首要任务就是利用多种方法获得纯化的具有完整结构及生物学功能并能够正确折叠的高度纯化蛋白质。
除了蛋白质的研究，具有特定生物活性的高价值蛋白质的生产也需要对蛋白质产品进行纯化。
因此，科研人员和工业生产往往大量采用多种多样的表达系统来获得高表达的蛋白质，对其纯化后进行研究或加工，这些表达系统包括原核表达系统、酵母菌表达系统、昆虫动物细胞表达系统、真核细胞表达系统等。
如何将系统中表达的目标蛋白质与其他蛋白分离，一直是表达纯化中的一个重点。
为了克服从复杂样品中纯化单一蛋白质这种困难，科学家利用生物物质，特别是酶和抗体等蛋白质，具有识别某种特定物质并与该物质分子特异性结合的能力，利用生物分子间的这种特异性结合能力而形成的亲和纯化技术。
亲和标签纯化技术已广泛应用于蛋白质，特别是重组蛋白的分离纯化中。
在重组蛋白的亲和纯化中，利用基因工程技术，将经过改造优化的亲和标签与目标蛋白融合表达，通过一步简单快速的亲和层析，直接获得纯度较高的重组融合蛋白，已成为重组蛋白纯化的一个通用方法，具有结合特异性高、纯化步骤简便、纯化条件温和、适用性广泛等优点，为蛋白质的有效纯化提供了一条解决的途径，广泛应用于蛋白质结构与功能的研究及重组蛋白纯化工艺的开发中。
自从20世纪70年代中期融合标签技术出现以来，亲和标签已成为一种重组蛋白纯化十分有效的工具，具有结合特异性高、纯化条件温和、纯化步骤简便、适用性广泛等显著优势。
通常，亲和标签定义为对特定的生物或化学配基具有高度亲和力的一段氨基酸序列。
到目前为止，已经出现了种类众多、功能各异、用途多样的亲和标签，极大地促进了对重组蛋白的有效纯化。
根据自身分子量大小的不同，亲和标签可以分为两大类：一类是结合固定化配基的短肽标签，如His-tag、FLAG-tag、Strep-tagⅡ等；另一类是识别小分子配基的蛋白标签，如GST、MBP等。
短肽标签：His-tag：His标签是目前高通量蛋白纯化最普遍使用的亲和标签，广泛用于多种重组蛋白在各种表达系统的表达与纯化中。
一种检测免疫性坏死性肌病血清抗HMGCR抗体的方法[发明专利]
![一种检测免疫性坏死性肌病血清抗HMGCR抗体的方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/ec0bb22a4028915f814dc21c.png)
专利名称：一种检测免疫性坏死性肌病血清抗HMGCR抗体的方法
专利类型：发明专利
发明人：吕杰,韩森森,高峰,张婧,赵雪,张迎娜,方华,张琳媛,杨浩楠,王淑敏,王璐璐,贺笑笑,周淑娴,纪莹
申请号：CN202110105865.4
申请日：20210126
公开号：CN112684172A
公开日：
20210420
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明提供了一种检测免疫性坏死性肌病血清抗HMGCR抗体的方法，该检测方法首先获取得到HMGCR基因，并通过分子生物学方法与重组荧光标签pSJMY‑mCherry载体构建得到具有红珊瑚荧光性质的pSJMY‑H‑mCherry载体，并将上述载体瞬时转染HEK293T细胞，然后将转染细胞中表达得到的HMGCR蛋白抗原与待测血清进行免疫反应。
本发明利用红色荧光蛋白基因构建的双色间接免疫荧光检测人体内抗HMGCR抗体，具有灵敏度高的特点，对患者的早期诊断和疗效评价均有明确的指导意义，具有显著的社会效益和巨大的经济效益。
申请人：郑州大学
地址：450000 河南省郑州市高新技术开发区科学大道100号
国籍：CN
代理机构：郑州芝麻知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：史丽利
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eGFPeCFPeYFPmCherry标签介绍
eGFPeCFPeYFPmCherry标签介绍
分别是增强型绿色荧光蛋白（eGFP）、增强型黄绿色荧光蛋白（eCFP）、增强型黄绿色荧光蛋白（eYFP）、单体红色荧光蛋白（mCherry）,具有不同的激发波长发射波长为，均由野生型荧光蛋白通过氨基酸突变和密码子优化而来。
就eGFP而言，相对于GFP，其荧光强度更强、荧光性质更稳定。
同时载体中构建的Kozak序列使得含有eGFP的融合蛋白在真核表达系统中表达效率更高。
mCherry是从DsRed演化来的性能最好的一个单体红色荧光蛋白，可以和GFP系列荧光蛋白共用，实现多色标记体内、外实验表明，mCherry在N端和C端融合外源蛋白时，荧光蛋白活性和被融合的目标蛋白功能相互没有明显影响。
mcherry 蛋白结构
mcherry 蛋白结构标题：mCherry蛋白结构mCherry蛋白是一种广泛应用于生物学研究中的荧光蛋白，它源自于海底珊瑚。
mCherry蛋白结构的解析为我们研究其荧光性质和应用提供了重要的基础。
mCherry蛋白的结构由238个氨基酸残基组成，分子量约为27千道尔顿。
其结构包含一个核心染色体蛋白的结构域，这个结构域被称为β桶。
β桶由11个折叠的β片段组成，这些片段通过氢键和茎区相互连接形成一个稳定的结构。
在β桶的内部存在一个色素分子，这个色素分子被称为biliverdin，它在mCherry蛋白的荧光产生中起到了关键作用。
mCherry蛋白的结构中，biliverdin分子通过多种氢键和疏水作用与周围的氨基酸残基相互作用。
这些相互作用使得biliverdin分子紧密嵌入在蛋白结构中，同时也为mCherry蛋白的荧光提供了必要的条件。
biliverdin的存在使得mCherry蛋白能够吸收蓝绿光谱范围内的光，并在橙红光谱范围内发出荧光。
这种荧光特性使得mCherry蛋白成为生物标记、蛋白定位和蛋白相互作用研究等领域中最常用的工具之一。
mCherry蛋白的结构中还存在一个重要的特点，即其荧光蛋白家族的标志性结构特征。
这个特征是由于蛋白分子的环状顺式连接，使得分子形成了一个环形结构。
这种环形结构为mCherry蛋白的稳定性和荧光特性提供了重要的保障。
mCherry蛋白的结构研究不仅对于了解其荧光产生机制具有重要意义，同时也为我们设计和开发新的荧光蛋白提供了借鉴。
通过对mCherry蛋白结构的深入研究，我们可以揭示荧光蛋白的晶体结构、色素分子的结构与功能关系等方面的信息，为生物学研究提供了重要的理论依据。
除此之外，mCherry蛋白的结构还为我们研究蛋白质的折叠和组装提供了有益的参考。
通过分析mCherry蛋白的结构，我们可以了解到蛋白质中各个氨基酸残基的相对位置和相互作用，从而揭示蛋白质的折叠规律和稳定性。
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mCherry标签抗体—可进行WB/IF应用的mCherry单抗
mCherry是一种被广泛用于生物技术作为示踪剂的红色荧光染料，包括分子的标记和细胞组分的定位等。
不同于其它从维多利亚水母中分离的GFP蛋白和其它绿色荧光蛋白变体，mCherry以及其它大多数红色荧光蛋白是从Discosoma菌种中分离出来的蛋白。
mCherry因为其颜色和单体分子的光稳定性，比其它荧光蛋白标签更优异，其最大激发光和发射光分别为587nm和610nm。
如何选择合适的mCherry标签抗体？
我们在选择mCherry抗体时，主要根据自己的需要，特别是实验应用上的需要。
其中需要考虑的因素包括了，mCherry抗体的应用检测类型、mCherry抗体的克隆性及制备来源等。
比如该mCherry抗体是否能用于免疫荧光的检测？是否可以用于免疫沉淀IP实验？我是否需要特异性更好的单克隆GST标签抗体？我是否需要考虑下是选择小鼠来源的还是兔来源的？
另外，抗体的效价也是考察该抗体性价比的重要方面，也即相当于实际应用时的稀释比率。
一个效价高的100μl mCherry 抗体（假如其WB检测的稀释比率是1:4000，最终使用液相当于400ml），要比效价低的1ml的mCherry抗体（假如WB检测的稀释比率是1:200，最终使用液相当于200ml）性价比更高。
我买了Abbkine的mCherry标签抗体做WB和IF实验的，都比较理想；后来试了一下IP实验，虽然说明书上没有写，但是效果也超出预期，很不错。
——武汉同济医院一客户
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美国Abbkine品牌是一家提供高性价比免疫学和细胞学科研产品及解决方案的品牌，艾美捷将其引入中国，作为其中国区域代理，将为客户提供最具性价比的常规免疫学试剂，如各种标签抗体、内参抗体、常规一抗以及全系列二抗，抗体检测底物以及相关试剂盒等。
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