(精品)结核分枝杆菌与实验室生物安全
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在BSL-1 设备条件上增加：
① 生物安全柜 ② 高压灭菌器 ③ 洗眼装置
实验室位置：与公共场所分隔开； 通风: 有方向性。
18
（二）实验室管理要素
实验室入口处贴上生物 安全标志，注明实验室生 物安全级别，负责人姓名， 负责人姓名和电话，需要 接种的免疫种类，进入实 验室的特殊要求等； •正在进行感染性试验时 禁止他人进入，或经负责 人同意后进行安全防护后 进入；
3
2. 新加坡 SARS感染
➢ 事件说明： • 2003年8月23日某国立大学博士研究生从事西尼罗
研究，感染SARS病患检体； ➢ 事件原因： • 实验室安全程序不当，同一时间进行不同活性病毒
研究，造成其交叉感染； • 对于人员生物安全教育训练不足，人员对所有病原
体警觉性不够，无自我监测症状观念。
制度； • 实验室人员：① 注意潜在的危害；② 熟知操作规
程，精通操作技术。 20
（三）标准操作程序
➢《人间传染的病原微生物名录》：
• 结核分枝杆菌危害程度第二类，高致病性病原微 生物；
• 少量细菌的分离培养、样品检测和药敏实验在 BSL-2实验室进行；
• 大量细菌培养在BSL-3实验室，动物感染实验在 ABSL-3实验室；
• 二级防护屏障 实验室的设施结构和通风系统等构成的防 护屏障。
一级防护屏障
生物安全柜是最重要的安全设备，形成最主要 的防护屏障；
为消除或减少人员暴露于有害生物材料所配备 其他安全设备（如离心机负压罩等）；
必须给实验室工作人员配备必要的个体防护用 品：手套、口罩、鞋套、面罩、正压服等。
感（结节）； • 创伤物质培养处B族结核杆菌； ➢ 事件原因： • 防护措施不到位； • 个人防护装备不全； • 实验人员安全意识不强。
5. 结核杆菌感染2
➢ 事件说明： • 戴一次性乳胶手套在安全柜准备操作鉴定结核分
枝杆菌； • 操作时，左手桡骨背侧被安全柜的前窗边缘划伤，
皮肤上有小的擦伤； • 停止工作，70%酒精清洗伤口； • 3周后，出现局部红肿，有无痛的硬结； • 在伤口处取标本进行培养，6周后培养阳性； • 限制性片段多态性分析，与操作的结核杆菌一致；
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BSL-2 结构设计常规要求
① 实验室有带锁的门； ② 有洗手水槽； ③ 工作面易于清洁； ④ 天棚不渗水； ⑤ 实验室台结实； ⑥ 按照要求放置生物安全 柜； ⑦ 适当的照明系统； ⑧ 眼睛冲洗装置； ⑨ 实验室排除的气体不能 循环到非实验区； ⑩ 窗户安装有纱窗。
17来自百度文库
BSL-2 设备条件
23
2. 混匀：吸管吸吹 菌液时不要产生气 泡，应沿容器壁排 出。
3. 研磨：最 好使用组织研 磨器，乳钵易 产生气溶胶。
4. 移液：吸管上端的棉花松紧要适度，吸液时要 从管底吸取，吹出时要轻缓，不要全部吹净，以免 产生气泡，形成气溶胶。
4
• 3. 台湾SARS感染
➢ 事件说明： • 2003年12月，某研究所研究人员感染SARS。为清
理运输舱内溢出物，仅作一般消毒，穿戴一般防护 装备，将头与躯干伸入运输舱中清理。 ➢ 事件原因： • 未使用适当除污程序； • 未使用合适消毒剂； • 未报告所有溢出意外。
5
4. 结核杆菌感染1
➢ 事件说明： • 1952年，细菌学家两年从事B族结核杆菌工作； • 血清1:160稀释度下凝集，无典型症状； • 1955年，右手红色伤口（丘疹），右腋下轻微痛
12
个体安全防护措施
各类口罩：需做个体适配性试验
医用外科口罩
杯罩式随弃口罩
折叠式随弃口罩
13
手套穿脱:戴前检漏、盖住衣袖
14
脱隔离衣程序
手部表面消毒后由内向外翻卷脱去外层手套 注意退出胳膊时让隔离衣内面朝外向中间覆盖， 两手持领、将隔离衣清洁面在外向内翻卷，投入污物袋中。
15
二级防护屏障
选址与平面布局； 围护结构； 送、排风系统； 消毒、灭菌设备； 污水处理设备； 尸体处理设备； 其他安全装置。
➢ 事件原因：
• 意外事故—皮肤损伤；
• 虽抗结核治疗，但证实实验室感染；
• 意外事故感染预案—做好评估、处理和监测。
二、结核杆菌的生物安全防护
➢实验室生物安全：
• 指实验室的生物安全条件和状态不低于容许 水平，可避免实验室人员、来访人员、社区 及环境受到不可接受的损害，符合相关法规、 标准等对实验室生物安全责任的要求。
结核分枝杆菌与实验室生物安全
广东检验检疫技术中心BSL-3实验室 师永霞
一、实验室感染典型案例 二、结核杆菌的生物安全防护 三、生物安全柜的安全使用 四、意外事故处理
一、实验室感染典型案例
1. 中国CDC SARS感染
➢ 事件说明： • 2004年4月，安徽、北京发现新的SARS病例，其中
两名CDC实验室人员。 ➢ 事件原因： • 采用未经论证确实有效的SARS灭活方法； • 在不符合防护要求之实验室内操作SARS。
19
• 工作人员接受必要的免疫接种，免疫耐受或正在 进行免疫抑制剂治疗的病人须经同意方可进入工 作；必要时留本底血清；
• 新员工必须接受培训方可进入工作，老员工必须 接受再培训；
• 尽量减少利器使用，严格按照规范操作； • 消毒物品需放在容器内运输、进行有效灭菌消毒
和效果监测，交给有资质单位进行处理； • 建立实验室感染应急预案、意外事故报告、登记
• 无感染性材料的操作在BSL-1实验室。
• 结核病传播途径可由呼吸道、消化道、皮肤等途径 感染，但其主要传播途径是以空气为传播因子的呼 吸道传染，而排菌的肺结核病人传染性更大，是传 播感染的主要传染源。
• 实验室感染以气溶胶形式的呼吸道感染和皮肤感染。
22
产生气溶胶的操作及预防
• 1. 接种：应使用无弹力的铂丝接种环，结核菌接种 后接种环火焰灭菌易崩散，酒精灯烧灼时要特别注 意。
➢实验室获得性感染： • 人类感染病原微生物源自于实验室或实验室
相关活动，不论其表现为有症状或无症状， 都属于实验室获得性感染。
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实验室生物风险管理要素
9
实验室生物安全控制要素
设施设备
防护屏障
管理
个人防护装备
标准操作程序
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（一）设施设备和个人防护装备
• 一级防护屏障 实验室的生物安全柜和个人防护装备等构 成的防护屏障。
① 生物安全柜 ② 高压灭菌器 ③ 洗眼装置
实验室位置：与公共场所分隔开； 通风: 有方向性。
18
（二）实验室管理要素
实验室入口处贴上生物 安全标志，注明实验室生 物安全级别，负责人姓名， 负责人姓名和电话，需要 接种的免疫种类，进入实 验室的特殊要求等； •正在进行感染性试验时 禁止他人进入，或经负责 人同意后进行安全防护后 进入；
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2. 新加坡 SARS感染
➢ 事件说明： • 2003年8月23日某国立大学博士研究生从事西尼罗
研究，感染SARS病患检体； ➢ 事件原因： • 实验室安全程序不当，同一时间进行不同活性病毒
研究，造成其交叉感染； • 对于人员生物安全教育训练不足，人员对所有病原
体警觉性不够，无自我监测症状观念。
制度； • 实验室人员：① 注意潜在的危害；② 熟知操作规
程，精通操作技术。 20
（三）标准操作程序
➢《人间传染的病原微生物名录》：
• 结核分枝杆菌危害程度第二类，高致病性病原微 生物；
• 少量细菌的分离培养、样品检测和药敏实验在 BSL-2实验室进行；
• 大量细菌培养在BSL-3实验室，动物感染实验在 ABSL-3实验室；
• 二级防护屏障 实验室的设施结构和通风系统等构成的防 护屏障。
一级防护屏障
生物安全柜是最重要的安全设备，形成最主要 的防护屏障；
为消除或减少人员暴露于有害生物材料所配备 其他安全设备（如离心机负压罩等）；
必须给实验室工作人员配备必要的个体防护用 品：手套、口罩、鞋套、面罩、正压服等。
感（结节）； • 创伤物质培养处B族结核杆菌； ➢ 事件原因： • 防护措施不到位； • 个人防护装备不全； • 实验人员安全意识不强。
5. 结核杆菌感染2
➢ 事件说明： • 戴一次性乳胶手套在安全柜准备操作鉴定结核分
枝杆菌； • 操作时，左手桡骨背侧被安全柜的前窗边缘划伤，
皮肤上有小的擦伤； • 停止工作，70%酒精清洗伤口； • 3周后，出现局部红肿，有无痛的硬结； • 在伤口处取标本进行培养，6周后培养阳性； • 限制性片段多态性分析，与操作的结核杆菌一致；
16
BSL-2 结构设计常规要求
① 实验室有带锁的门； ② 有洗手水槽； ③ 工作面易于清洁； ④ 天棚不渗水； ⑤ 实验室台结实； ⑥ 按照要求放置生物安全 柜； ⑦ 适当的照明系统； ⑧ 眼睛冲洗装置； ⑨ 实验室排除的气体不能 循环到非实验区； ⑩ 窗户安装有纱窗。
17来自百度文库
BSL-2 设备条件
23
2. 混匀：吸管吸吹 菌液时不要产生气 泡，应沿容器壁排 出。
3. 研磨：最 好使用组织研 磨器，乳钵易 产生气溶胶。
4. 移液：吸管上端的棉花松紧要适度，吸液时要 从管底吸取，吹出时要轻缓，不要全部吹净，以免 产生气泡，形成气溶胶。
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• 3. 台湾SARS感染
➢ 事件说明： • 2003年12月，某研究所研究人员感染SARS。为清
理运输舱内溢出物，仅作一般消毒，穿戴一般防护 装备，将头与躯干伸入运输舱中清理。 ➢ 事件原因： • 未使用适当除污程序； • 未使用合适消毒剂； • 未报告所有溢出意外。
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4. 结核杆菌感染1
➢ 事件说明： • 1952年，细菌学家两年从事B族结核杆菌工作； • 血清1:160稀释度下凝集，无典型症状； • 1955年，右手红色伤口（丘疹），右腋下轻微痛
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个体安全防护措施
各类口罩：需做个体适配性试验
医用外科口罩
杯罩式随弃口罩
折叠式随弃口罩
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手套穿脱:戴前检漏、盖住衣袖
14
脱隔离衣程序
手部表面消毒后由内向外翻卷脱去外层手套 注意退出胳膊时让隔离衣内面朝外向中间覆盖， 两手持领、将隔离衣清洁面在外向内翻卷，投入污物袋中。
15
二级防护屏障
选址与平面布局； 围护结构； 送、排风系统； 消毒、灭菌设备； 污水处理设备； 尸体处理设备； 其他安全装置。
➢ 事件原因：
• 意外事故—皮肤损伤；
• 虽抗结核治疗，但证实实验室感染；
• 意外事故感染预案—做好评估、处理和监测。
二、结核杆菌的生物安全防护
➢实验室生物安全：
• 指实验室的生物安全条件和状态不低于容许 水平，可避免实验室人员、来访人员、社区 及环境受到不可接受的损害，符合相关法规、 标准等对实验室生物安全责任的要求。
结核分枝杆菌与实验室生物安全
广东检验检疫技术中心BSL-3实验室 师永霞
一、实验室感染典型案例 二、结核杆菌的生物安全防护 三、生物安全柜的安全使用 四、意外事故处理
一、实验室感染典型案例
1. 中国CDC SARS感染
➢ 事件说明： • 2004年4月，安徽、北京发现新的SARS病例，其中
两名CDC实验室人员。 ➢ 事件原因： • 采用未经论证确实有效的SARS灭活方法； • 在不符合防护要求之实验室内操作SARS。
19
• 工作人员接受必要的免疫接种，免疫耐受或正在 进行免疫抑制剂治疗的病人须经同意方可进入工 作；必要时留本底血清；
• 新员工必须接受培训方可进入工作，老员工必须 接受再培训；
• 尽量减少利器使用，严格按照规范操作； • 消毒物品需放在容器内运输、进行有效灭菌消毒
和效果监测，交给有资质单位进行处理； • 建立实验室感染应急预案、意外事故报告、登记
• 无感染性材料的操作在BSL-1实验室。
• 结核病传播途径可由呼吸道、消化道、皮肤等途径 感染，但其主要传播途径是以空气为传播因子的呼 吸道传染，而排菌的肺结核病人传染性更大，是传 播感染的主要传染源。
• 实验室感染以气溶胶形式的呼吸道感染和皮肤感染。
22
产生气溶胶的操作及预防
• 1. 接种：应使用无弹力的铂丝接种环，结核菌接种 后接种环火焰灭菌易崩散，酒精灯烧灼时要特别注 意。
➢实验室获得性感染： • 人类感染病原微生物源自于实验室或实验室
相关活动，不论其表现为有症状或无症状， 都属于实验室获得性感染。
8
实验室生物风险管理要素
9
实验室生物安全控制要素
设施设备
防护屏障
管理
个人防护装备
标准操作程序
10
（一）设施设备和个人防护装备
• 一级防护屏障 实验室的生物安全柜和个人防护装备等构 成的防护屏障。