细胞培养的应用和培养细胞的特性及条件

动物细胞的环境敏感性
动物细胞与微生物和植物细胞相比，其培养难度要大一些， 其主要原因是动物细胞只有细胞膜，而没有细胞壁的保护。
动物相比对培养环境十分敏感，一切影响细胞膜变形的因 素都会影响动物细胞存活。
动物细胞培养对营养条件的要求也十分复杂。
1. 动物细胞培养的环境要求
1）无污染环境 2）温度
昆虫细胞培养温度一般是25～28℃ 哺乳动物细胞的培养温度一般是37℃。 总体上讲，动物细胞忍受低温的能力比忍受高温的能力 强。如哺乳动物细胞在45℃下只能存活1小时，但在25℃条件 下仍然能慢速生长，并维持长时间不死，甚至在4℃下数小时 后，再置于适宜温度下细胞仍然可以正常生长。液氮冻存。
5ຫໍສະໝຸດ Baidu渗透压
动物细胞培养渗透压包括两个方面的问题：
培养基的渗透压维持 细胞体内的渗透压维持 大多数动物细胞对渗透压的忍耐程度较强，只要培养基的渗 透压变化不是很剧烈，一般对培养物不会造成致命伤害。动物细 胞渗透压的维持一般采用平衡盐溶液。
细 胞 培 养
主要讲3方面问题：
为什么要做细胞培养？ 培养细胞的特性 细胞在体外生长的基本条件
培养条件下细胞的特性
离体培养的动物细胞可分为：
贴壁依赖型(anchorage-dependent) 非贴壁依赖型(anchorage-independent) 兼性贴壁细胞
1）贴壁依赖型 简称为贴壁细胞，包括成纤维细胞型、上 皮细胞型、游走细胞型、多形性细胞型。
2）接触抑制(contact inhibition)现象 除少数悬浮培养细胞外，大多数正常二倍体细胞的生长都需
要在一定的基质（如玻璃、塑料等）上贴附，伸展后才能增殖。 当细胞在基质上分裂增殖，逐渐汇合成片即每个细胞与其周围 的细胞相互接触时，细胞就停止增殖，即细胞密度不再增加， 这一现象称之为接触抑制或密度依赖抑制现象。
3）pH
动物细胞培养适宜的pH一般在7.2-7.4，低于6.8 或高于7.6都不利于细胞生长，严重时会导致细胞死 亡。 培养细胞对pH的要求因培养时间长短有关，一 般原代细胞要求较严格，而永久细胞系对pH具有较强 的忍耐性。
4）气体环境及溶氧
一般细胞在培养初期要求较低的溶氧水平，而在对数生 长期或培养后期，对溶氧水平要求增加，如果供氧不足，将 导致细胞缺氧而死亡。 除了氧气供应外，还应注意培养基 的氧气和CO2的平衡。