2019年乙型肝炎病毒标志物表面抗原、表面抗体、e抗原、e抗体、核心抗体检测试剂盒(胶体金法)

血清乙型肝炎病毒HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc检测作业指导书

1.目的：建立乙型肝炎病毒HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc定性检测标准操作规程，确保检测结果的准确。

2.范围：适用于检验科免疫实验室。

3.规程：

3.1标本的收集与准备：

3.2用未加抗凝剂的真空抽血管抽取静脉血2ml。

3.3标本完全凝固后才能离心，并分离血清。

3.4如试验8小时内不能完成，血清标本放2~8℃保存。

3..5标本拒收标准：严重脂血、溶血、黄疸。

4、测定原理：

本试剂盒采用胶体金标记免疫层析技术，将HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc单项胶体金标记免疫层析检测条组装成联合检测卡。样品加到检测卡各项加样孔后,再借助毛细作用移行至层析区,于检测区和对照区,胶体金标记颗粒由于抗原抗体反应形成富聚,形成或不形成肉眼可见的胶体金颗粒反应带,从而实现

对HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc的检测，并作出存在与否的判定。HBsAg用双抗体夹心法检测，胶体金标记抗HBs(鼠单抗)与样品中的HBsAg结合形成复合物,再借助毛细作用复合物沿层析条向前移行,与检测线区预包被的抗HBs(鼠单抗)形成“Au-抗HBs(鼠单抗)-HBsAg-抗HBs(鼠单抗)-固相材料”夹心物而凝聚显色。游离胶体金标记抗HBs(鼠单抗)则在对照线处与羊抗鼠IgG抗体结合而富集显色。阴性标本则仅在对照线处显色。结果于30分钟内判定。

抗HBs用双抗原夹心法检测胶体金标记HBsAg与样品中的抗HBs结合形成复合物,再借助毛细作用复合物沿层析条向前移行,与检测线区预包被的HBsAg形成“Au-HBsAg-抗HBs-HBsAg-固相材料”夹心物而凝聚显色。游离胶体金标记HBsAg 则在对照线处与羊抗HBs结合而富集显色。阴性标本则仅在对照线处显色。结果于30分钟内判定。

与样品中的)鼠单抗HBe(胶体金标记抗用双抗体夹心法检测 HBeAg

HBeAg结合形成复合物,再借助毛细作用复合物沿层析条向前移行，与检测线区

预包被的抗HBe(鼠单抗)形成“Au-抗HBe(鼠单抗)-HBeAg-抗HBe(鼠单抗)-固相材料”夹心物而凝聚显色。游离胶体金标记抗HBe(鼠单抗)则在对照线处与羊抗鼠IgG抗体结合而富集显色。阴性标本则仅在对照线处显色。结果于30分钟内判定。

抗HBe用竞争法检测样品中的抗HBe与胶体金标记1号抗HBe(鼠单抗)竞争性地与HBeAg结合，形成复合物，再借助毛细作用沿层析条向前移行，与检测线区预包被的2号抗HBe(鼠单抗)二次竞争结合，这样抗HBe阳性时检测线区不能形成“Au-抗HBe(鼠单抗)-HBeAg-抗HBe(鼠单抗)-固相材料”胶体金颗粒凝聚反应物而显色。与HBeAg相结合的胶体金标记1号抗HBe(鼠单抗)复合物于对照线与羊抗鼠IgG抗体结合而富集显色。阴性标本则在检测线区及对照线处均显色。结果于30分钟内判定。

抗HBc用竞争法检测样品中的抗HBc与胶体金标记抗HBc(鼠单抗)借助毛细作

用沿层析条向前移行，于检测线处竞争性地与HBcAg结合，形成复合物，这样抗HBc阳性时检测线处不能形成“Au-抗HBc(鼠单抗)-HBcAg-固相材料”胶体金颗粒凝聚反应物,结果无着色；样品抗HBc阴性时，则形成有色沉淀。与此同时，游离的胶体金标记抗HBc(鼠单抗)于对照线与羊抗鼠IgG抗体结合而富集显色。阴性标本则在检测线处及对照线处均显色。结果于30分钟内判定。

5、试剂：哎康生物技术有限公司

5.1组成：

5.1.1 乙型肝炎病毒HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc联合检测卡 5项/卡

5.1.1.1HBsAg胶体金标记免疫层析检测条 1条/卡

5.1.1.2抗HBs胶体金标记免疫层析检测条 1条/卡

5.1.1.3HBeAg胶体金标记免疫层析检测条 1条/卡

5.1.1.4抗HBe胶体金标记免疫层析检测条 1条/卡

5.1.1.5抗HBc胶体金标记免疫层析检测条 1条/卡

5.1.2.采样吸管 1支/卡

5.1.3.说明书 1份/盒

℃中避光保存，有效期十八个月。30℃～4储存：试剂盒应置 5.2．

6、试验方法：

6.1.检测前将待测标本和检测卡恢复至室温；

6.2.自铝箔袋中将检测卡取出，水平放置并作好标记；

6.3.用吸管吸取血清/血浆标本，逐滴加入检测卡的五个加样孔内，每孔1～2

滴(50～100ul)。

7、注意事项

7.1乙型肝炎病毒HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc检测试剂盒适用于测试血清或血浆标本，用其他标本或溶液测试可能出现异常结果。

7.2检测结果的质量控制:对照线无显色时，表示实验失败；

7.2.本品仅供体外诊断用；

7.3.试剂启用后应尽快用完；

7.4.临床标本均应视为有潜在传染性，请按传染疾病实验室检查规程操作。

7.5本产品为目视读取结果，为保证判断结果的正确，请勿在光线昏暗处对结果进行判断。

7.6测试结果应在测试开始后15分钟开始读取，30分钟后判断无效。

7.7请保证适量标本进行检测，过多过少的标本量都有可能导致结果出现偏差。

8、临床意义：

用于人血清或血浆样品中HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc的

联合检测，适用于急性、慢性乙型肝炎的辅助诊断。

乙型肝炎病毒是乙型肝炎的病原体。乙型肝炎是一种严重危害人类健康的疾病。其严重后果是直接导致急性乙型肝炎、慢性乙型肝炎、肝硬化、肝衰竭或死亡，并与某些人群的肝细胞癌(HCC)的发生密切相关,构成复杂的乙型肝炎疾病谱。乙型肝炎病毒还可通过母婴传播，危害极大。大样本调查显示我国HBsAg携带率约10%，慢性无症状HBV携带者(AsC)可能超过1.2亿人，成为HBV传播最重要

的传染源。

乙型肝炎病毒为DNA病毒，其负链上有S、C、P、及X这4个开放读码框架，