常用的试剂纯化
核酸提取与纯化试剂配方
核酸提取与纯化试剂配方核酸提取和纯化是分子生物学研究中常用的重要步骤。
核酸提取与纯化试剂包括溶解、提取、纯化和测定等步骤。
下面将详细介绍核酸提取与纯化试剂的配方和使用方法。
1. 细胞裂解缓冲液的配方：- 25mM Tris-HCl pH 8.0- 50mM EDTA- 1% SDS- 100μg/ml RNase A将以上试剂按比例混合制备成细胞裂解缓冲液，用于裂解细胞并保护核酸的完整性。
2. 提取缓冲液的配方：- 0.1M Tris-HCl pH 8.0- 0.14M NaCl- 0.001M EDTA- 1% SDS将以上试剂按比例混合制备成提取缓冲液，用于将细胞裂解液中的核酸与蛋白质分离。
3. 过滤缓冲液的配方：- 5M ammonium acetate- 100% isopropanol将5M乙酸铵与等量的100%异丙醇混合制备成过滤缓冲液，用于将核酸从提取液中沉淀。
4. 洗涤缓冲液的配方：- 70% ethanol将绝对乙醇与等量的去离子水混合制备成洗涤缓冲液，用于洗涤核酸沉淀，去除残留的盐类和蛋白质。
5. 纯化缓冲液的配方：- 10mM Tris-HCl pH 8.0- 1mM EDTA将以上试剂按比例混合制备成纯化缓冲液，用于重溶核酸并去除污染物。
使用步骤如下：1. 将待提取的细胞悬浮在细胞裂解缓冲液中，彻底裂解细胞膜。
2. 加入RNase A，在室温下孵育30分钟，酶解RNA。
3. 加入等体积的提取缓冲液，混合均匀后离心，将上清液转移至新离心管，保留上清液，其中含有DNA。
4. 加入等体积的过滤缓冲液，混合均匀后离心，将上清液抽取并丢弃，沉淀中包含核酸。
5. 加入洗涤缓冲液，混合均匀后离心，将上清液抽取并丢弃，重复一次洗涤步骤，确保去除残留的盐类和蛋白质。
6. 倒掉洗涤缓冲液，将离心管倒置在吸水纸上，待离心管底部的液滴完全干燥，避免残留的洗涤缓冲液影响纯化后的核酸。
7. 加入适量的纯化缓冲液，将沉淀重溶，确保核酸的完整性。
质粒提取 纯化试剂
质粒提取纯化试剂
质粒提取是一种从细菌中提取和纯化质粒（即小圆环状的DNA分子）的过程。
在质粒提取过程中，需要使用一系列纯化试剂来帮助分离和纯化质粒DNA。
以下是一些常用的质粒提取纯化试剂：
1. 碱裂解试剂：用于打断细菌细胞壁和细胞膜，释放内部DNA。
常见的碱裂解试剂包括盐酸（HCl）和EDTA（乙二胺四乙酸）。
2. 酚/氯仿：用于提取DNA和脂质等有机物质，并分离DNA 与其他细胞组分。
酚/氯仿会形成两相体系，DNA会在上层的水相中。
3. 氯化物：如氯化钠（NaCl）和氯化钙（CaCl2），用于增加DNA在水相中的溶解度，改善DNA的纯化。
4. 醇：如乙醇和异丙醇，用于沉淀DNA。
通过加入醇，DNA 会在醇和水的接触界面处形成团状物质，沉淀出来。
5. 洗涤缓冲液：用于洗涤DNA颗粒，去除杂质和剩余的试剂残留。
常见的洗涤缓冲液包括醇洗涤缓冲液（含乙醇）和盐洗涤缓冲液（含盐）。
6. Elution缓冲液：用于将DNA从固相材料（如硅胶柱、离心管滤膜等）上洗脱下来，使其溶解在溶液中。
常见的Elution 缓冲液包括纯水、低盐缓冲液、TE缓冲液等。
这些试剂在质粒提取纯化过程中起着重要的作用，帮助分离和纯化质粒DNA，并去除杂质和其他细胞组分。
不同的实验室和研究目的可能会选择不同的试剂和纯化方法。
化学试剂的纯化
化学试剂的纯化在化学分析、仪器分析、无机制备、有机合成以及其他的科学实验工作中经常会遇到所用的化学试剂纯度不够，或买不到所需纯度的化学试剂，这就需要在实验室自己对现有的化学试剂进行纯化，以便得到所需纯度的化学试剂。
实验室中常用的纯化化学试剂的方法有：蒸馏和精馏、重结晶、萃取、区域熔融和色谱分离等等，下面将分别加以简单介绍。
蒸馏和精馏蒸馏和精馏是一种使用广泛的纯化方法，根据液体混合物中液体和蒸汽之间混合组分的分配差别进行纯化，是纯化挥发性和半挥发性化学试剂的第一选择。
蒸馏和精馏的实际应用蒸馏和精馏主要用于液体、或是加热可成为液体的化学试剂，特别是用于有机化学试剂的纯化。
在蒸馏或精馏之前，有时可加入某些化学试剂，与欲纯化的化学试剂中的杂质发生化学反应，生成沸点更高（或更低）的物质，在蒸馏或精馏是更容易除去。
在蒸馏或精馏时，往往是除去最初馏出的馏分和最后剩下的馏分，两头除去的越多，得到的化学试剂纯度就越高，但产率越低。
下面介绍几个用蒸馏或精馏方法纯化的化学试剂：1. 盐酸的提纯：（1）除去一般杂质的盐酸用三次离子交换水将一级盐酸按盐酸：水=7：3的体积比稀释（或按1：1稀释，按此比例稀释仅得到浓度为6N的盐酸）。
将此盐酸1.5升装入2升的石英或硬质玻璃蒸馏瓶中，用可调变压器调节加热器，控制馏速为200毫升/小时，弃去前段馏出液150ml，取中段馏出液1升，所得的纯盐酸浓度为6.5-7.5N，铁、铝、钙、镁、铜、铅、锌、钴、镍、锰、铬、锡的含量在5′10-6--2′10-7%以下。
（2）除去砷的盐酸用三次离子交换水将一级盐酸按7：3的体积比稀释，加入适量氧化剂（按体积加入2.5%硝酸或2.5%过氧化氢或高锰酸钾0.3克/1.5升）。
将此盐酸1.5升装入2升的石英或硬质玻璃蒸馏瓶中，放置15分钟后，以100毫升/小时的馏速进行蒸馏。
弃去前段馏出液150毫升，取中段馏出液1升备用。
砷的含量在1′10-6%以下。
化学试剂的纯化
化学试剂的纯化基础知识在化学分析、仪器分析、无机制备、有机合成以及其他的科学实验工作中经常会遇到所用的化学试剂纯度不够，或买不到所需纯度的化学试剂，这就需要在实验室自己对现有的化学试剂进行纯化，以便得到所需纯度的化学试剂。
实验室中常用的纯化化学试剂的方法有：蒸馏和精馏、重结晶、萃取、区域熔融和色谱分离等等，下面将分别加以简单介绍。
第一节蒸馏和精馏蒸馏和精馏是一种使用广泛的纯化方法，根据液体混合物中液体和蒸气之间混合组分的分配差别进行纯化，是纯化挥发性和半挥发性化学试剂的第一选择。
一、蒸馏原理蒸馏的主要目的是从含有杂质的化学试剂中分离出挥发性和半挥发性的杂质或将易挥发和半挥发的主体蒸发出来，将不挥发和难挥发的杂质留下。
一种物质在不同温度下的饱和蒸气压变化是蒸馏分离的基础。
大体说来，如果液体混合物中两种组分的蒸气压具有较大差别，就可以富集蒸气相中更多的挥发性和半挥发性的组分。
两相－液相和蒸气相－可以分别地被回收，挥发性和半挥发性的组分富集在气相中而不挥发性组分被富集在液相中。
除了烃类混合物和少数其它例子之外，Raoult定律和Dalton定律可用于理想混合物体系，混合物溶液常常不遵循理想的蒸气相-液相行为。
应用这两个定律可以得到一个二元体系的两种组分的比挥发性（aAB）：a AB ＝ (YA/YB)/ (XA/XB) = P0A/ P0B其中，YA 和YB分别是平衡时气相中组分A和B的摩尔分数，XA和XB分别是平衡时液相中组分A和B的摩尔分数，P0A 和 P0B分别是平衡时组分A和B的蒸气压，均服从Raouilt定律。
随着aAB增加，富集程度也增加。
二、简单蒸馏最简单的蒸馏装置，如图－1所示。
当一个液体样品被加热并转变成蒸气时，其中有一部分被冷凝而回到原来的蒸馏瓶中，而其余的被冷凝并转入收集容器中，前者叫回流液，后者叫流出液。
由于蒸馏是连续进行，逸出的和保存在液体中的组成在慢慢地改变。
作为一种纯化化学试剂的方法，简单蒸馏只能分离具有较大的沸点差别的杂质，诸如沸点与主体差别大于50℃的杂质。
常用有机溶剂的纯化方法1.甲醇（CH3OH）工业甲醇含水量在0.5%~1%，含..
&常用有机溶剂的纯化方法1. 甲醇(CH 3OH)工业甲醇含水量在0.5%~1%，含醛酮(以丙酮计)约0.1%。
由于甲醇和水不形成共沸混合物，因此可用高效精馏柱将少量水除去。
精制甲醇中含水0.1%和丙酮0.02%，一般已可应用。
若需含水量低于0.1%，可用3A 分子筛干燥，也可用镁处理(见绝对乙醇的制备)。
若要除去含有的羰基化合物，可在500mL 甲醇中加入25mL 糠醛和60mL10%NaOH 溶液，回流6~12小时，即可分馏出无丙酮的甲醇，丙酮与糠醛生成树脂状物留在瓶内。
纯甲醇b.p. 64.95℃，n D 20 1.3288，d 4200.7914。
甲醇为一级易燃液体，应贮存于阴凉通风处，注意防火。
甲醇可经皮肤进入人体，饮用或吸入蒸气会刺激视神经及视网膜，导致眼睛失明，直到死亡。
人的半致死量LD 50为13.5g/kg ，经口服甲醇的致死量LD 为1g/kg ，15mL 可致失明。
2. 乙醇(CH 3CH 2OH)工业乙醇含量为95.5%，含水4.4%，乙醇与水形成共沸物，不能用一般分馏法去水。
实验室常用生石灰为脱水剂，乙醇中的水与生石灰作用生成氢氧化钙可去除水分，蒸馏后可得含量约99.5%的无水乙醇。
如需绝对无水乙醇，可用金属钠或金属镁将无水乙醇进一步处理，得到纯度可超过99.95%的绝对乙醇。
(1)无水乙醇(含量99.5%)的制备在500ml 圆底烧瓶中，加入95%乙醇200mL 和生石灰50g, 放置过夜。
然后在水浴上回流3小时，再将乙醇蒸出，得含量约99.5%的无水乙醇。
另外可利用苯、水和乙醇形成低共沸混合物的性质，将苯加入乙醇中，进行分馏，在64.9℃时蒸出苯、水、乙醇的三元恒沸混合物，多余的苯在68.3℃与乙醇形成二元恒沸混合物被蒸出，最后蒸出乙醇。
工业多采用此法。
(2)绝对乙醇(含量99.95%)的制备①用金属镁制备在250mL 的圆底烧瓶中，放置0.6g 干燥洁净的镁条和几小粒碘，加入10mL99.5%的乙醇，装上回流冷凝管。
常用有机试剂的纯化
常用有机试剂的纯化丙酮沸点56.2℃，折光率1.358 8，相对密度0.789 9。
普通丙酮常含有少量的水及甲醇、乙醛等还原性杂质。
其纯化方法有：⑴于250mL丙酮中加入2.5g高锰酸钾回流，若高锰酸钾紫色很快消失，再加入少量高锰酸钾继续回流，至紫色不褪为止。
然后将丙酮蒸出，用无水碳酸钾或无水硫酸钙干燥，过滤后蒸馏，收集55~56.5℃的馏分。
用此法纯化丙酮时，须注意丙酮中含还原性物质不能太多，否则会过多消耗高锰酸钾和丙酮，使处理时间增长。
⑵将100mL丙酮装入分液漏斗中，先加入4mL10%硝酸银溶液，再加入3.6mL1mol/L氢氧化钠溶液，振摇10min，分出丙酮层，再加入无水硫酸钾或无水硫酸钙进行干燥。
最后蒸馏收集55~56.5℃馏分。
此法比方法⑴要快，但硝酸银较贵，只宜做小量纯化用。
苯沸点80.1℃，折光率1.501 1，相对密度0.87865。
普通苯常含有少量水和噻吩，噻吩和沸点84℃，与苯接近，不能用蒸馏的方法除去。
噻吩的检验：取1mL苯加入2mL溶有2mg吲哚醌的浓硫酸，振荡片刻，若酸层号蓝绿色，即表示有噻吩存在。
噻吩和水的除去：将苯装入分液漏斗中，加入相当于苯体积七分之一的浓硫酸，振摇使噻吩磺化，弃去酸液，再加入新的浓硫酸，重复操作几次，直到酸层呈现无色或淡黄色并检验无噻吩为止。
将上述无噻吩的苯依次用10%碳酸钠溶液和水洗至中性，再用氯化钙干燥，进行蒸馏，收集80℃的馏分，最后用金属钠脱去微量的水得无水苯。
氯仿沸点61.7℃，折光率1.445 9，相对密度1.483 2。
氯仿在日光下易氧化成氯气、氯化氢和光气（剧毒），故氯仿应贮于棕色瓶中。
市场上供应的氯仿多用1%酒精做稳定剂，以消除产生的光气。
氯仿中乙醇的检验可用碘仿反应；游离氯化氢的检验可用硝酸银的醇溶液。
除去乙醇可将氯仿用其二分之一体积的水振摇数次分离下层的氯仿，用氯化钙干燥24h，然后蒸馏。
另一种纯化方法：将氯仿与少量浓硫酸一起振动两三次。
常用有机试剂的纯化
常用有机溶剂的纯化有机化学实验离不开溶剂，溶剂不仅作为反应介质使用，而且在产物的纯化和后处理中也经常使用。
市售的有机溶剂有工业纯、化学纯和分析纯等各种规格，纯度愈高，价格愈贵。
在有机合成中，常常根据反应的特点和要求，选用适当规格的溶剂，以便使反应能够顺利地进行而又符合勤俭节约的原则。
某些有机反应（如Grignard 反应等），对溶剂要求较高，即使微量杂质或水分的存在，也会对反应速率、产率和纯度带来一定的影响。
由于有机合成中使用溶剂的量都比较大，若仅依靠购买市售纯品，不仅价值较高，有时也不一定能满足反应的要求。
因此了解有机溶剂性质及纯化方法，是十分重要的。
有机溶剂的纯化，是有机合成工作的一项基本操作，这里介绍了市售的普通溶剂在实验室条件下常用的纯化方法。
1．无水乙醚( absolute ether )bp 34.5℃， 1.3526， 0.7137820D n 204d 普通乙醚中含有一定量的水、乙醇及少量过氧化物等杂质，这对于要求以无水乙醚作溶剂的反应（如Grignard 反应），不仅影响反应的进行，且易发生危险。
试剂级的无水乙醚，往往也不合要求，且价格较贵，因此在实验中常需自行制备。
制备无水乙醚时首先要检验有无过氧化物。
为此取少量乙醚与等体积的2%碘化钾溶液，加人几滴稀盐酸一起振摇，若能使淀粉溶液呈紫色或蓝色，即证明有过氧化物存在。
除去过氧化物可在分液漏斗中加人普通乙醚和相当于乙醚体积1/5的新配制硫酸亚铁溶液(1)，剧烈振摇后分去水溶液。
然后除去过氧化物，按照下述操作进行精制。
[步骤]在250 mL 圆底烧瓶中，放置100 mL 除去过氧化物的普通乙醚和几粒沸石，装上冷凝管。
冷凝管上端通过一带有侧槽的橡皮塞，插人盛有10 mL 浓硫酸(2)的滴液漏斗。
通人冷凝水，将浓硫酸慢慢滴人乙醚中，由于脱水作用所产生的热，乙醚会自行沸腾。
加完后摇动反应物。
待乙醚停止沸腾后，拆下冷凝管，改成蒸馏装置。
在收集乙醚的接受瓶支管上连一氯化钙干燥管，并用与干燥管连接的橡皮管把乙醚蒸气导人水槽。
酰氯的纯化——精选推荐
文献总结——酰氯的纯化应用化学08—2班殷金昌2008302052酰氯是一类活性非常高的化合物，所以酰氯的纯化比其他试剂的纯化要更难些，下面介绍三种酰氯纯化的方法。
一： 3，5一二一(N一乙酰氨基)一2，4，6一三碘苯甲酰氯（泛影酰氯）的纯化泛影酸[3，5二二一(N一乙酰氨基)一2，4，6一三碘苯甲酸]是一种具有造影功能的物质，其中的3，5一二一(N一乙酰氨基)一2，4，6一三碘苯基(泛影基)苯环上有三个原子量大的取代碘原子，可产生密度差异，为造影基团，其钠盐为常用的静脉造影剂．如若得到其他性能更好的新型造影剂，需要将泛影基连接到其他具特殊功能的物质上去，比如将其作为聚合反应的封端剂，连接到水溶性很好的含有特定端基的聚环氧乙烷(PEO)长链上，或与对肿瘤病灶具靶向，富集亲和作用的磺胺嘧啶连接，制得具靶向性的造影剂等．为此，首先需要将泛影酸酰氯化，制成易于发生反应的泛影酰氯。
泛影酰氯的纯化方法在工业上为：首先称取约586克纯化后的泛影酸于装有温度计，回流冷凝管(管口上装一氯化钙干燥管，并连一导管至计泡装置和气体吸收装置中)的三颈瓶中，加入596mL新蒸的氯化亚砜，在搅拌下于70℃反应16个小时，停止反应．控制温度，减压蒸馏出多余的氯化亚砜，得棕黄色固体产物．将该产物在冰浴条件下溶于2500ml氯仿中，用3×100ml的冰水洗涤三次，分别再用饱和的NaHC03溶液(3×100mL)，lmol·L-1的Na2C03溶液(3×lOOmL)充分洗涤三次，最后再用水(3×100mL)洗涤三次．将所得的溶液用CaCl2干燥数小时后减压下小心蒸出氯仿，最后得到棕黄色疏松的针状晶体．产率：84％，产物的熔点：108—111℃．其反应式如下：二．邻甲酸甲酯苯磺酰氯的精制工业上的方法是：在带有电磁搅拌器、回流冷凝器的三口烧瓶中加入300g甲苯，边搅拌边加入.600g 邻甲酸甲酯苯磺酰氯粗品（含量90％左右），加热溶解，静置，分去水相，有机相经过滤除去不溶物；而后，经过一特制干燥柱干燥后，降温、析出、过滤、干燥得邻甲酸甲酯苯磺酰氯精品，含量>90％，水分<50％。
生物 化学 实验室 常用试剂 大全
试剂配制方法一、实验室常用储备液（1）0.5mol/L EDTA（乙二胺四乙酸）在700ml 超纯水中溶解186.1g Na2EDT A·2H2O，在磁力搅拌器上剧烈搅拌。
用10mol/L NaOH调至PH8.0（约用10mol/L NaOH 50ml），补加超纯水至1L。
分装后高压蒸汽灭菌。
室温贮存。
注意：EDTA二钠盐需加入NaOH将溶液的PH值调至接近8.0，才会溶解。
（2）1mol/L Tri s·Cl将121.1g Tris碱溶于800ml超纯水中，用浓盐酸将PH值调至设定值。
PH值HCl7.4 70ml7.6 60ml8.0 42ml应使溶液冷却至室温后，方可最后调定PH值。
加超纯水定容至1L，分装后高压蒸汽灭菌。
如果配制的溶液呈现黄色，应予丢弃。
并使用质量更好的Tris。
Tris溶液的PH值因温度而异，温度每升高1℃，PH值大约降低0.03个单位。
（3）10mol/L 乙酸铵(NH4C2H3O2)将771g乙酸铵溶于800ml蒸馏水中，磁力搅拌至完全溶解，用蒸馏水定容至1L，过滤除菌，室温贮存。
乙酸铵在热水中分解，含有乙酸铵的溶液不能高压蒸汽灭菌。
（4）甘油（10％，V/V）用9体积的灭菌纯水稀释1体积的分子生物学级的甘油。
用0.22μm过滤器过滤除菌。
分装成1ml每份，-20℃贮存。
（5） 10mg/ml溴化乙啶(EtBr)在20ml双蒸水中溶解0.2g溴化乙啶，磁力搅拌数小时，以确保其完全溶解。
然后用铝箔包裹容器或将溶液转移至棕色瓶中，于4℃避光保存。
注意：溴化乙啶是一种诱变剂，必须小心操作。
（6） 70％乙醇（C2H5OH）100ml70ml无水乙醇溶于30ml蒸馏水。
（7） 50×葡萄糖Glucose（150ml储备液）将54g D-葡萄糖溶于超纯水，磁力搅拌至完全溶解，并将体积调至150ml，过滤除菌，室温贮存。
（8） 10mol/L氢氧化钠（NaOH）将400g NaOH颗粒，加入到一个约含有0.9L蒸馏水的烧杯中，磁力搅拌至完全溶解。
常见试剂的制备和纯化
实验经常用到大量的试剂，包括无机试剂和有机试剂，市售的试剂有分析纯（A.R）、化学纯（C.P）、工业级（T.P）等级别，其中分析纯的纯度较高，工业级则带有较多的杂质。
在某些有机反应中，对试剂或溶剂的要求较高，即使微量的杂质或水分的存在，也会对反应的速率、产率和产品纯度带来一定的影响，因此掌握一些必要的试剂的纯化方法是十分必要的。
在实际工作中还会经常遇到无法买到某种试剂或买不到高纯度试剂的情况，影响实验工作正常进行，因此，了解一些常用试剂的制备方法也是十分必要的。
在这部分中给出了常用有机和无机试剂的制备与纯化方法，希望能给实验工作带来一些方便。
1．氨气商品的氨气一般用钢瓶盛装，使用时通过减压装置可以得到气态的氨。
气体的流速可由计泡计来控制，其中计泡计中含有少量浓氢氧化钾溶液（12g氢氧化钾溶于12mL水）。
在计泡计和反应器之间应加一安全瓶。
通过装有疏松的碱石灰或块状氧化钙的干燥塔干燥。
如果需要少量的氨可以用如下方法制备：在上端装有回流冷凝管的圆底烧瓶中加入浓氨水，缓慢加热，气体通过装有疏松的碱石灰或块状氧化钙的干燥塔干燥，然后通过安全瓶引入反应瓶。
2．丙酮沸点56℃，密度d＝0.7898，能与水、乙醇、乙醚互溶。
工业丙酮含有甲醇、乙醇、酸、水等杂质。
一般丙酮的纯化是将丙酮和高锰酸钾一起回流，直至加入的高锰酸钾的紫色不再退去为止，然后将丙酮蒸出，用无水碳酸钾干燥，再进行蒸馏。
3．钯催化剂钯催化剂是非常有效的加氢催化剂，价格比较贵。
实验室可由氯化钯制备钯催化剂。
（1）Pd-C（5%Pd）的制备：将1.7g氯化钯和1.7mL浓盐酸加入到20mL水中，水浴加热2小时溶解完全，然后将它加入到用200mL水溶解了30g乙酸钠的溶液中，盛放在500mL的烧瓶中。
加20g酸洗过的活性炭，在氢气气氛中氢化直到反应结束。
过滤收集催化剂，用5份100mL的水洗涤，吸滤抽干。
在室温下用氢氧化钾干燥或在真空干燥器中用无水氯化钙干燥。
纯化水质监测需要用到的试剂
纯化水质监测需要用到的试剂1．酸碱度甲基红溴麝香草酚蓝2．硝酸盐、亚硝酸盐、氨10%氯化钾溶液0.1%二苯胺硫酸溶液[取二苯胺0.1g，加浓硫酸100ml使溶解]标准硝酸盐溶液[取硝酸钾0.163g，加水溶解并稀释至100ml，摇匀，精密量取1ml，加水稀释成100ml，再精密量取10ml，加水稀释成100ml，摇匀，即得(每)]1ml相当于1μgNO3对氨基苯磺酰胺的稀盐酸溶液(1→100)[取1g对氨基苯磺酰胺至100ml稀盐酸(9.5%-10.5%的盐酸溶液)中，摇匀，即得]盐酸萘乙二胺溶液(0.1→100)[称取盐酸萘乙二胺0.1g至100ml称量瓶中，纯化水溶解后定容之至刻度，摇匀即得]标准亚硝酸盐溶液[取亚硝酸钠0.750g(按干燥品计算)，加水溶解，稀释至100ml，摇匀，精密量取1ml，加水稀释成100ml，摇匀，再精密量取1ml，加水稀释成50ml，摇匀，即得(每1ml相当于1μgNO2)]碱性碘化汞钾试液[取碘化钾 10 g，加水100ml，溶解后，缓缓加入二氯化汞的饱和水溶液，随加随搅拌，至生成的红色沉淀不再溶解，加氢氧化钾 30 g，溶解后，再加二氯化汞的饱和水溶液 1 ml 或 1 ml 以上，并用适量的水稀释使成 200 ml，静置，使沉淀，即得。
用时倾取上层的澄明液应用]氯化铵溶液(取氯化铵31.5mg，加无氨水适量使溶解并稀释成1000ml)3．易氧化物稀硫酸高锰酸钾滴定液(0.02mol/L)[取高锰酸钾3.2g，加水1000ml，煮沸15分钟，密塞，静置2日以上，用垂熔玻璃滤器滤过，摇匀即得。
标定：取在105℃干燥至恒重的基准草酸钠约0.2g，精密称定，加新沸过的冷水250ml与硫酸10ml，搅拌使溶解，自滴定管中迅速加入本液约25ml，待褪色后，加热至65℃，继续滴定至溶液显微红色并保持30秒钟不退；当滴定终点时，溶液温度应不低于55℃，每1ml的高锰酸钾滴定液（0.02 mol/L）相当于6.70mg的草酸钠。
关于纯化的实验报告
一、实验目的1. 学习蛋白质纯化的基本原理和方法。
2. 掌握蛋白质纯化的操作技术。
3. 了解蛋白质纯度的鉴定方法。
二、实验原理蛋白质纯化是指从复杂的蛋白质混合物中分离出目标蛋白质的过程。
常用的蛋白质纯化方法有盐析、离子交换层析、凝胶过滤层析、亲和层析等。
本实验采用盐析法对蛋白质进行初步纯化，并通过SDS-PAGE电泳和考马斯亮蓝染色对纯化效果进行鉴定。
三、实验材料1. 蛋白质样品：酶溶液、标准蛋白质样品2. 试剂：硫酸铵、SDS-PAGE电泳缓冲液、考马斯亮蓝G250、Tris-HCl、甘氨酸、丙烯酰胺、甲叉双丙烯酰胺、TEMED、尿素、十二烷基硫酸钠（SDS）、琼脂糖、双蒸水等3. 仪器：电泳仪、紫外观察分析仪、离心机、移液器、烧杯、玻璃棒、滴管、剪刀等四、实验步骤1. 盐析法纯化蛋白质（1）将酶溶液与硫酸铵溶液按照一定比例混合，室温静置一段时间。
（2）离心分离，收集沉淀。
（3）将沉淀用双蒸水洗涤，去除杂质。
（4）将洗涤后的蛋白质沉淀溶解于适量的双蒸水中，得到初步纯化的蛋白质溶液。
2. SDS-PAGE电泳鉴定纯化效果（1）配制10%的琼脂糖凝胶，加入适量的SDS-PAGE电泳缓冲液。
（2）将标准蛋白质样品和纯化后的蛋白质样品进行电泳分离。
（3）关闭电源，取出琼脂糖凝胶，用考马斯亮蓝G250染色。
（4）观察电泳图谱，比较纯化前后蛋白质的条带变化，判断纯化效果。
五、实验结果与分析1. 通过盐析法纯化蛋白质后，SDS-PAGE电泳图谱显示，蛋白质条带较纯化前明显减少，表明蛋白质纯化效果较好。
2. 纯化后的蛋白质条带与标准蛋白质样品的条带基本一致，进一步说明纯化效果良好。
六、实验结论本实验通过盐析法对蛋白质进行初步纯化，并采用SDS-PAGE电泳对纯化效果进行鉴定。
结果表明，蛋白质纯化效果较好，达到了实验目的。
七、实验讨论1. 盐析法是一种简单、经济、有效的蛋白质纯化方法，适用于初步纯化。
2. 实验过程中，蛋白质沉淀的收集和洗涤是关键步骤，直接影响纯化效果。
试剂纯化手册
试剂纯化手册一、简介试剂纯化是一项重要的实验室操作，旨在提高试剂的纯度和质量，以确保实验结果的准确性和可靠性。
本手册为您提供一些常用的试剂纯化方法和步骤，供参考和使用。
二、常用试剂纯化方法1. 晶体净化1.1 采用溶剂重结晶法，选择适当的溶剂，在合适的温度下溶解试剂，然后缓慢冷却至结晶，最后过滤收集晶体。
1.2 采用再结晶法，通过迅速加热和冷却的方法，使试剂迅速结晶，然后过滤收集晶体。
2. 溶液净化2.1 采用溶液过滤法，使用尼龙或玻璃纤维滤纸过滤溶液，去除杂质和固体颗粒。
2.2 采用活性炭吸附法，将试剂溶液与活性炭混合搅拌一段时间，然后使用滤纸或滤膜过滤，去除杂质和有机物。
2.3 采用离心沉淀法，将试剂溶液在离心机中转速设为合适的数值，离心一段时间后，将上清液取出，去除杂质和不溶性物质。
3. 蒸馏纯化3.1 采用常压蒸馏法，将试剂溶液倒入蒸馏瓶中，加热至沸腾，然后收集蒸馏液。
3.2 采用真空蒸馏法，将试剂溶液倒入蒸馏瓶中，连接真空泵，加热至沸腾，然后收集蒸馏液。
此方法适用于易挥发性的试剂。
4. 色谱纯化4.1 采用气相色谱法，将试剂溶液注入气相色谱仪中，通过分离柱将目标物与杂质分离。
4.2 采用液相色谱法，将试剂溶液通过液相色谱仪柱，利用不同成分在固定相中的分离性质，将目标物与杂质分离。
三、操作步骤1. 根据试剂的物理性质和纯化方法的选择，合理安排设备和试剂准备工作。
2. 严格按照纯化方法的步骤进行操作，注意安全和卫生。
3. 在操作过程中，遵循实验室规程，注意防护措施。
4. 纯化完成后，及时记录纯化方法和步骤，以备将来参考和追溯。
四、注意事项1. 在进行试剂纯化前，应详细了解试剂的性质和特点，选择适合的纯化方法。
2. 在操作过程中，注意个人安全，避免接触有害物质和危险操作。
3. 严格遵守实验室的规章制度，做好实验室清洁和废弃物处置工作。
以上是一些常用的试剂纯化方法和操作步骤，希望对您有所帮助。
常用有机溶剂的纯化-甲醇常用有机溶剂的纯化-乙醇常用有机试剂
常用有机溶剂的纯化－甲醇沸点 64.96℃，折光率 1.328 8，相对密度 0.791 4。
而工业甲醇中这些杂质的含量达0.5%~1%。
普通未精制的甲醇含有0.02%丙酮和0.1%水。
为了制得纯度达 99.9%以上的甲醇，可将甲醇用分馏柱分馏。
收集 64℃的馏分，再用镁 去水（与制备无水乙醇相同）。
甲醇有毒，处理时应防止吸入其蒸汽。
常用有机溶剂的纯化－乙醇沸点 78.5℃，折光率1.361 6，相对密度 0.789 3。
制备无水乙醇的方法很多，根据对无水乙醇质量的要求不同而选择不同的方法。
若要求 98%~99%的乙醇，可采用下列方法：⑴利用苯、水和乙醇形成低共沸混合物的性质，将苯加入乙醇中，进行分馏，在64.9℃ 时蒸出苯、水、乙醇的三元恒沸混合物，多余的苯在68.3 与乙醇形成二元恒沸混合物被蒸 出，最后蒸出乙醇。
工业多采用此法。
⑵用生石灰脱水。
于100mL95%乙醇中加入新鲜的块状生石灰 20g，回流 3~5h，然后进 行蒸馏。
若要 99%以上的乙醇，可采用下列方法：⑴在 100mL99%乙醇中，加入 7g金属钠，待反应完毕，再加入 27.5g 邻苯二甲酸二乙酯 或 25g 草酸二乙酯，回流 2~3h，然后进行蒸馏。
金属钠虽能与乙醇中的水作用， 产生氢气和氢氧化钠，但所生成的氢氧化钠又与乙醇发 生平衡反应，因此单独使用金属钠不能完全除去乙醇中的水，须加入过量的高沸点酯，如邻 苯二甲酸二乙酯与生成的氢氧化钠作用，抑制上述反应，从而达到进一步脱水的目的。
⑵在 60mL99%乙醇中，加入 5g镁和 0.5g 碘，待镁溶解生成醇镁后，再加入 900mL99% 乙醇，回流 5h 后，蒸馏，可得到 99.9%乙醇。
由于乙醇具有非常强的吸湿性，所以在操作时，动作要迅速，尽量减少转移次数以防止 空气中的水分进入，同时所用仪器必须事前干燥好。
常用有机试剂的纯化-丙酮沸点 56.2℃，折光率1.358 8，相对密度 0.789 9。
分子生物学实验报告试剂
一、实验背景分子生物学是一门研究生物大分子如核酸、蛋白质等结构与功能的科学。
在分子生物学实验中，试剂的选择和使用对实验结果的准确性至关重要。
本实验报告将详细介绍分子生物学实验中常用的试剂及其作用。
二、实验试剂1. 核酸提取试剂（1）酚/氯仿：用于从细胞中提取DNA和RNA，具有强烈的蛋白变性作用。
（2）异丙醇：用于DNA的沉淀，降低DNA的溶解度。
（3）无水乙醇：用于RNA的沉淀，降低RNA的溶解度。
（4）RNA酶抑制剂：防止RNA降解，保证实验结果的准确性。
2. DNA提取试剂（1）Tris-HCl缓冲液：用于DNA的提取，调节pH值，保持酶的活性。
（2）EDTA：抑制金属离子与DNA结合，防止DNA降解。
（3）SDS（十二烷基硫酸钠）：用于蛋白质的变性，使蛋白质与DNA分离。
（4）蛋白酶K：降解蛋白质，去除蛋白质杂质。
3. DNA纯化试剂（1）琼脂糖凝胶：用于DNA的分离和纯化。
（2）DNA纯化试剂盒：用于DNA的纯化和回收。
4. DNA扩增试剂（1）PCR反应缓冲液：提供反应所需的pH值、盐浓度等。
（2）dNTPs（脱氧核苷三磷酸）：作为PCR反应的原料。
（3）引物：用于PCR反应的特异性扩增。
（4）Taq酶：DNA聚合酶，负责DNA的合成。
5. DNA检测试剂（1）溴化乙锭（EB）：用于DNA的染色，便于在紫外光下观察。
（2）琼脂糖凝胶电泳缓冲液：用于DNA的电泳。
（3）DNA标记物：用于DNA的定量分析。
6. 蛋白质提取试剂（1）裂解缓冲液：用于蛋白质的提取，保证蛋白质的完整性。
（2）蛋白酶抑制剂：防止蛋白质降解。
（3）SDS：使蛋白质变性，便于与核酸分离。
7. 蛋白质纯化试剂（1）柱层析：用于蛋白质的纯化。
（2）凝胶过滤：用于蛋白质的纯化。
8. 蛋白质检测试剂（1）考马斯亮蓝G-250：用于蛋白质的定量分析。
（2）BCA法：用于蛋白质的定量分析。
（3）SDS-PAGE凝胶：用于蛋白质的分离和纯化。
质粒提取和纯化及质粒转染所需试剂及操作规范
二、质粒的提取和纯化所需1. 液体LB培养基（1）配方蛋白胨（TRYPONE）1%(g/ml)NaCl1%酵母粉（YEAST EXTRACT）0.5%加蒸馏水定容（2）将配好的培养基高压后，恢复室温后置于4度保存备用，使用时恢复室温（3）配液体LB培养基时，一般不加抗生素（高温会使抗生素失活，也不宜4度保存），因此若要在此培养基中加抗生素，应该在使用时根据比例添加2. 固体LB培养基（1）配方蛋白胨（TRYPONE）1%(g/ml)NaCl1%酵母粉（YEAST EXTRACT）0.5%加蒸馏水定容时（装到可以高压的瓶中），由于加入的琼脂粉有一定的体积，因此定容时，注意略微少加点水，根据要加入的琼脂粉而定（琼脂粉只有在高压后溶解）（2）直接向以上配好的LB中加入加琼脂粉1.5%，以配成固体培养基（3）高压：高压完注意保温，温度过低培养基会凝固，因此从高压锅里取出后应立即铺板（4）铺板此操作在细胞室安全柜中无菌操作，铺板前应提前开紫外灯照台子15min，点燃酒精灯。
若铺的是无抗生素的阴性平板，则在铺板时直接铺板；若铺的是含有抗生素的平板，则在铺板时，应等到高压后的培养基温度降到不烫手时（高温会使抗生素失效），根据比例加入抗生素后在铺板。
培养基铺到平板上，每个平板约25ml，注意保温，一定要在培养基凝固成固体前铺到平板上，铺板时还应不时的摇匀培养基以防止瓶底的培养基因温度过低而凝固，铺好后敞开平板的盖子，待培养基凝成固体后再盖上（约15min）（5）待LB培养基在平板中凝固后，盖上平板的盖子，并用封口膜封好后放到4℃保存备用3. 配置含有抗生素的LB培养基Amp配制时一般为100μg/μl,使用时稀释1000倍Kana配制时一般为50mg/ml，使用时稀释1000倍二、质粒转染真核细胞1、lipo2000（以6孔板转染为例，其他用量请参考说明书）（1）将覆盖率为90-95%的细胞提前用only饥饿3h，转染前换新鲜培养液。
常用溶剂除水方法
常用有机试剂的纯化1.丙酮沸点56.2℃，折光率1.3588，相对密度0.7899。
普通丙酮常含有少量的水及甲醇、乙醛等还原性杂质。
其纯化方法有：⑴.于250mL丙酮中加入2.5g高锰酸钾回流，若高锰酸钾紫色很快消失，再加入少量高锰酸钾继续回流，至紫色不褪为止。
然后将丙酮蒸出，用无水碳酸钾或无水硫酸钙干燥，过滤后蒸馏，收集55~56.5℃的馏分。
用此法纯化丙酮时，须注意丙酮中含还原性物质不能太多，否则会过多消耗高锰酸钾和丙酮，使处理时间增长。
⑵.将100mL丙酮装入分液漏斗中，先加入4mL10%硝酸银溶液，再加入3.6mL1mol/L 氢氧化钠溶液，振摇10min，分出丙酮层，再加入无水硫酸钾或无水硫酸钙进行干燥。
最后蒸馏收集55~56.5℃馏分。
此法比方法⑴要快，但硝酸银较贵，只宜做小量纯化用。
2.二氧六环沸点101.5℃，熔点12℃，折光率1.4424，相对密度1.0336。
二氧六环能与水任意混合，常含有少量二乙醇缩醛与水，久贮的二氧六环可能含有过氧化物（鉴定和除去参阅乙醚）二氧六环的纯化方法，在500mL二氧六环中加入8mL浓盐酸和50mL水的溶液，回流6~10h，在回流过程中，慢慢通入氮气以除去生成的乙醛。
冷却后，加入固体氢氧化钾，直到不能再溶解为止，分去水层，再用固体氢氧化钾干燥24h。
然后过滤，在金属钠存在下加热回流8~12h，最后在金属钠存在下蒸馏，压入饥丝密封保存。
精制过的1,4‐二氧环己烷应当避免与空气接触。
3.吡啶沸点115.5℃，折光率1.5095，相对密度0.9819。
分析纯的吡啶含有少量水分，可供一般实验用。
如要制得无水吡啶，可将吡啶与粒氢氧化钾（钠）一同回流，然后隔绝潮气蒸出备用。
干燥的吡啶吸水性很强，保存时应将容器口用石蜡封好。
4.石油醚石油醚为轻质石油产品，是低相对分子质量烷烃类的混合物。
其沸程为30~150℃，收集的温度区间一般为30℃左右。
有30~60℃，60~90℃，90~120℃等沸程规格的石油醚。
常用溶剂提纯方法
常用溶剂的纯化方法1．无水乙醚( absolute ether )bp 34.5℃，1.3526，0.71378 20D n204d普通乙醚中含有一定量的水、乙醇及少量过氧化物等杂质，这对于要求以无水乙醚作溶剂的反应（如Grignard反应），不仅影响反应的进行，且易发生危险。
试剂级的无水乙醚，往往也不合要求，且价格较贵，因此在实验中常需自行制备。
制备无水乙醚时首先要检验有无过氧化物。
为此取少量乙醚与等体积的2%碘化钾溶液，加人几滴稀盐酸一起振摇，若能使淀粉溶液呈紫色或蓝色，即证明有过氧化物存在。
除去过氧化物可在分液漏斗中加人普通乙醚和相当于乙醚体积1/5的新配制硫酸亚铁溶液(1)，剧烈振摇后分去水溶液。
然后除去过氧化物，按照下述操作进行精制。
[步骤]在250 mL圆底烧瓶中，放置100 mL除去过氧化物的普通乙醚和几粒沸石，装上冷凝管。
冷凝管上端通过一带有侧槽的橡皮塞，插人盛有10 mL浓硫酸(2)的滴液漏斗。
通人冷凝水，将浓硫酸慢慢滴人乙醚中，由于脱水作用所产生的热，乙醚会自行沸腾。
加完后摇动反应物。
待乙醚停止沸腾后，拆下冷凝管，改成蒸馏装置。
在收集乙醚的接受瓶支管上连一氯化钙干燥管，并用与干燥管连接的橡皮管把乙醚蒸气导人水槽。
加人沸石，用事先准备好的水浴加热蒸馏。
蒸馏速度不宜太快，以免乙醚蒸气冷凝不下来而逸散室内(3)。
当收集到约70 mL乙醚，且蒸馏速度显著变慢时，即可停止蒸馏。
瓶内所剩残液，倒人指定的回收瓶中，切不可将水加人残液中（为什么？）。
将蒸馏收集的乙醚倒入干燥的锥形瓶中，加入1g钠屑或1g 钠丝，然后用带有氯化钙干燥管的软木塞塞住，或在木塞中插入一末端拉成毛细管的玻璃管，这样可以防止潮气侵入并可使产生的气泡逸出。
放置24 h以上，使乙醚中残留的少量水和乙醇转化为氢氧化钠和乙醇钠。
如不再有气泡逸出，同时钠的表面较好，则可储放备用。
如放置后，金属钠表面已全部发生作用，需重新压入少量钠丝，放置至无气泡发生。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
常用溶剂的纯化
化学供应商提供的常用试剂仅可满足一般化学反应的需要。
为了确保一些有机合成反应的顺利进行，常常要对试剂进行进一步的纯化处理。
常用的溶剂处理方法是蒸馏。
如果反应要求仅仅是无水，可在冷凝管上加干燥管，油封或充氮气球即可，如果需要达到无水无氧的条件，溶剂则需要脱氧处理。
一般在氮气氛下进行。
试剂级溶剂的纯化无水的试剂级溶剂常有足够的纯度，有时可以不用蒸馏。
为保证充分的干燥度，可在储藏时向其加入活性分子筛。
欲使溶剂脱氧，可利用注射器或玻璃管向其中鼓入氮气约五分钟。
一般溶剂的纯化大多数溶剂，只要在惰性气氛中将其从干燥剂中蒸馏出来，就可以达到足够的纯度。
1. 烷烃
如己烷、戊烷等。
首先用浓硫酸洗涤几次以除去烯烃，水洗，CaCl2干燥，必要时用钠丝或P2O5干燥，蒸馏。
存放于带塞的试剂瓶中。
2. 芳香烃类
如苯、甲苯、二甲苯等。
CaCl2干燥，必要时用钠丝或P2O5干燥，蒸馏。
存放于带塞的试剂瓶中。
3. 氯代烷烃类
如二氯甲烷、氯仿、四氯化碳、二氯乙烷等。
水洗除去醇等，CaCl2干燥，在
P2O5，或CaH2中回流蒸出。
绝对不能用钠丝干燥，否则会发生爆炸。
长期储藏应放于密闭的瓶中，并保存于黑暗中。
4. 醚类及呋喃类
如乙醚、四氢呋喃等。
许多醚类在和空气接触下会慢慢生成不易挥发且结构不明的过氧化物。
过氧化物在加热下容易分解而爆炸。
因此贮藏过久的醚类和呋喃类化合物在使用前，尤其是在蒸馏前应当检验是否有过氧化物的存在。
检验的方法：用包含一滴淀粉指示剂的1 mL 10% KI 溶液和10 mL 醚液混合，没有颜色变化，则没有过氧化物。
或者用1%硫酸亚铁铵溶液，硫酸亚铁和硫氰化钾溶液测试。
若有，则加入5% FeSO4 或偏亚硫酸氢钠溶液于醚中并摇动，使过氧化物分解。
CaCl2预干燥，在钠丝或LiAlH4中回流蒸出。
储藏于密闭的瓶中，并保存于阴凉黑暗中。
常用有机溶剂的纯化－乙醚沸点34.51℃，折光率1.3526，相对密度
0.71378。
普通乙醚常含有2%乙醇和0.5%水。
久藏的乙醚常含有少量过氧化物。
过氧化物的检验和除去：在干净和试管中放入2~3滴浓硫酸，1mL 2%碘化钾溶液（若碘化钾溶液已被空气氧化，可用稀亚硫酸钠溶液滴到黄色消失）和1~2
滴淀粉溶液，混合均匀后加入乙醚，出现蓝色即表示有过氧化物存在。
除去过氧
化物可用新配制的硫酸亚铁稀溶液（配制方法是FeSO47H2O 60g，100mL水和6mL浓硫酸）。
将100mL乙醚和10mL新配制的硫酸亚铁溶液放在分液漏斗中洗数次，至无过氧化物为止。
醇和水的检验和除去：乙醚中放入少许高锰酸钾粉末和一粒氢氧化钠。
放臵后，氢氧化钠表面附有棕色颗粒，即证明有醇存在。
水的存在用无水硫酸铜检验。
先用无水氯化钙除去大部分水，再经金属钠干燥。
其方法是：将100mL乙醚放在干燥锥形瓶中，加入20~25g无水氯化钙，瓶口用软木塞塞紧，放臵一天以上，并间断摇动，然后蒸馏，收集33~37℃的馏分。
用压钠机将1g金属钠直接压成钠丝放于盛乙醚的瓶中，用带有氯化钙干燥管的软木塞塞住。
或在木塞中插一末端拉成毛细管的玻璃管，这样，既可防止潮气浸入，又可使产生的气体逸出。
放臵至无气泡发生即可使用；放臵后，若钠丝表面已变黄变粗时，须再蒸一次，然后再压入钠丝。
常用有机溶剂的纯化－四氢呋喃（THF)沸点67℃(64.5℃)，折光率1.4050，相对密度0.8892。
四氢呋喃与水能混溶，并常含有少量水分及过氧化物。
如要
制得无水四氢呋喃，可用氢化铝锂在隔绝潮气下回流（通常1000mL约需2~4g 氢化铝锂）除去其中的水和过氧化物，然后蒸馏，收集66℃的馏分（蒸馏时不
要蒸干，将剩余少量残液即倒出）。
精制后的液体加入钠丝并应在氮气氛中保存。
处理四氢呋喃时，应先用小量进行试验，在确定其中只有少量水和过氧化物，作用不致过于激烈时，方可进行纯化。
！！！四氢呋喃中的过氧化物可用酸化的碘化钾溶液来检验。
如过氧化物较多，应另行处理为宜。
可现用CuCl回流，除去大量的过氧化物。
常用有机溶剂的纯化——二氧六环沸点101.5℃，熔点12℃，折光率1.4424，相对密度1.0336。
二氧六环能与水任意混合，常含有少量二乙醇缩醛与水，久
贮的二氧六环可能含有过氧化物（鉴定和除去参阅乙醚）。
二氧六环的纯化方法，在500mL二氧六环中加入8mL浓盐酸和50mL水的溶液，回流6~10h，在回流过程中，慢慢通入氮气以除去生成的乙醛。
冷却后，加入固体氢氧化钾，直到不能再溶解为止，分去水层，再用固体氢氧化钾干燥24h。
然后过滤，在金属钠存在下加热回流8~12h，最后在金属钠存在下蒸馏，压入饥丝密封保存。
精制过的1,4-二氧环己烷应当避免与空气接触。
5. 酰胺类
如二甲基甲酰胺，二甲基乙酰胺，HMPT等。
加入CaH2回流，减压蒸出，否则其容易分解。
加入新活化的分子筛储藏于瓶中，并注明日期。
常用有机溶剂的纯化，N，N-二甲基甲酰胺－DMF N，N-二甲基甲酰胺沸点149~156℃，折光率1.4305，相对密度0.9487。
无色液体，与多数有机溶剂和水可任意混合，对有机和无机化合物的溶解性能较好。
N，N-二甲基甲酰胺含有少量水分。
常压蒸馏时有些分解，产生二甲胺和一氧化碳。
在有酸或碱存在时，分解加快。
所以加入固体氢氧化钾（钠）在室温放臵数小时后，即有部分分解。
因此，最常用硫酸钙、硫酸镁、氧化钡、硅胶或分子筛干燥，然后减压蒸馏，收集76℃/4800Pa(36mmHg)的馏分。
其中如含水较多时，可加入其1/10体积的苯，在常压及80℃以下蒸去水和苯，然后再用无水硫酸镁或氧化钡干燥，最后进行减压蒸馏。
纯化后的N，N-二甲基甲酰胺要避光贮存。
N，N-二甲基甲酰胺中如有游离胺存在，可用2，4-二硝基氟苯产生颜色来检查。
6. 二甲基亚砜
加入CaH2搅拌过夜，然后减压分馏。
加入新活化的分子筛储藏于小瓶中，并注明日期。
7. 吡啶
可以用KOH，NaOH, CaO, BaO 或钠，然后蒸出。
加入新活化的5Å分子筛密闭保存，并注明日期。
常用有机溶剂的纯化－吡啶沸点115.5℃，折光率1.509 5，相对密度
0.9819。
分析纯的吡啶含有少量水分，可供一般实验用。
如要制得无水吡啶，可将吡啶与氢氧化钾（钠）一同回流，然后隔绝潮气蒸出备用。
干燥的吡啶吸水性很强，保存时应将容器口用石蜡封好。
8. 乙醇
主要杂质为杂醇油，醛，醇，酮和水。
可用的纯化方法为镁屑和碘回流，与CaO 一同回流并蒸出。
加入新活化的3A分子筛储藏于小瓶中。
常用有机溶剂的纯化－乙醇沸点78.5℃，折光率1.3616，相对密度0.7893。
制备无水乙醇的方法很多，根据对无水乙醇质量的要求不同而选择不同的方法。
若要求98%~99%的乙醇，可采用下列方法：
⑴利用苯、水和乙醇形成低共沸混合物的性质，将苯加入乙醇中，进行分馏，在
64.9℃时蒸出苯、水、乙醇的三元恒沸混合物，多余的苯在68.3与乙醇形成二元恒沸混合物被蒸出，最后蒸出乙醇。
工业多采用此法。
⑵用生石灰脱水。
于100mL95%乙醇中加入新鲜的块状生石灰20g，回流3~5h，然后进行蒸馏。
若要99%以上的乙醇，可采用下列方法：
⑴在100mL99%乙醇中，加入7g金属钠，待反应完毕，再加入27.5g邻苯二甲酸二乙酯或25g草酸二乙酯，回流2~3h，然后进行蒸馏。
金属钠虽能与乙醇中的水作用，产生氢气和氢氧化钠，但所生成的氢氧化钠又与乙醇发生平衡反应，因此单独使用金属钠不能完全除去乙醇中的水，须加入过量的高沸点酯，如邻苯二甲酸二乙酯与生成的氢氧化钠作用，抑制上述反应，从而达到进一步脱水的目的。
⑵在60mL 99%乙醇中，加入5g镁和0.5g碘，待镁溶解生成醇镁后，再加入900mL99%乙醇，回流5h后，蒸馏，可得到99.9%乙醇。
由于乙醇具有非常强的吸湿性，所以在操作时，动作要迅速，尽量减少转移次数以防止空气中的水分进入，同时所用仪器必须事前干燥好。
注意：在应用金属化合物作为纯化剂时，蒸馏时蒸馏瓶中的溶剂应最少保持在四分之一的体积，绝不允许蒸干，否则会发生危险。