果蝇综合实验

生命与环境科学学院实验报告

实验课名称遗传学实验实验名称果蝇综合实验成绩______________

姓名王大锤实验报告系列年级学号组别时间温度

实验原理及目的

实验目的

1、掌握果蝇采集和饲养方法，了解果蝇的生活史；

2、掌握雌雄果蝇成虫的特征及性别鉴定方法；

3、掌握果蝇唾腺染色体的制备方法，熟悉其结构特征，理解其形成原因。

实验原理

1、生物学特征

果蝇（Drosophila melanogaster)，昆虫纲，双翅目，果蝇属，2n=2x=8

果蝇雌雄异体，幼虫期区分较难，成虫区别容易。

雄性的腹部环纹5节，末端钝而圆，颜色深。第一对跗节前端表面有性梳。

雌虫腹部环纹7节，末端尖，附节前端无性梳。

生活史（完全变态）：卵→幼虫→蛹→成虫。

2、唾腺染色体的特征

双翅目类昆虫（摇蚊、果蝇等）幼虫形成后，唾腺细胞数目不变，但染色体进行核内有丝分裂，染色单体数量增加，幼虫越大增加的量越大，最多一条染色体有5000条染色单体，所以称为多线染色体。

多线染色体处于间期，未高度螺旋化，经染色后，出现深浅不同、密疏各异的横纹，这些横纹的数目和位置往往是恒定的，代表着果蝇等昆虫的种的特征。如染色体的缺失、重复、倒位、易位等，容易在唾腺染色体上识别。

实验材料、仪器及试剂

仪器：

广口瓶（带棉塞、一个含有果蝇玉米粉饲料），解剖针，镊子，载玻片及盖坡片若干、显微境

材料：

用于采集果蝇的水果（皮），采集后、自己饲养的果蝇

试剂及其他：

乙醚，1%醋酸洋红，生理盐水，果蝇玉米粉饲料

实验步骤

（一）果蝇的采集

将腐烂的香蕉皮或其他含糖量高的水果装在广口瓶内，用一层白纸封口，在纸上开几个小洞，吸引果蝇进入。若将广口瓶置水果摊附近，更易采到果蝇。

（二）果蝇的饲养

将采集到的果蝇转入含有玉米粉饲料的广口瓶内（注意雌雄果蝇至少3对），室温下培养，观察并记录果蝇的生活史。

（三）果蝇的雌雄识别

1、果蝇麻醉：将果蝇成虫转至一个新的广口瓶内，在棉塞上滴几滴乙醚后迅速盖上，注意摇动广口瓶使乙醚在瓶内充分扩散。果蝇对乙醚很敏感，易麻醉。麻醉程度因需要而异，当翅膀外展45°表示已死亡。

2、成虫观察：腹部特征肉眼即可看到，性梳(♂)可在低倍境下观察。

（四）果蝇的杂交

目的：验证孟德尔定律（一、二）和伴性遗传规律。

过程：1、原种选择—纯合亲本，处女蝇挑选（成虫8h内）

2、杂交：麻醉，3～5对，20℃～25℃培养

3、根据生活史计算F1、F2的性状的数量，统计分析。

（五）果蝇唾腺染色体的制备

1、取一头三龄幼虫至干净的载玻片上，加一滴生理盐水，若虫体带有少量培养基则将其洗净。幼虫具一钝尾和带黑色口器的尖头端。

三龄幼虫是最大的幼虫，行动迟缓，贴壁，或在培养基表面爬行。

2、两手各握一把解剖针，左手的解剖针压住幼虫的后端1/3-1/2处，固定幼虫。右手的解剖针按住幼虫的头部，用力向右拉，把头部从身体拉开，唾腺随之而出，唾腺是1对透明的棒状腺体。

显微镜下，唾腺呈透明状态，由几十个单层细胞构成，细胞形状不规则，轮廓清晰，细胞核大。与脂肪体伴生存在。

3、在载玻片上除去幼虫其他组织部分，最好把唾腺周围的白色脂肪体剥离干净。

果蝇唾腺染色体的制备

果蝇的杂交

果蝇的雌雄识别

果蝇的饲养

果蝇的采集

图1雌雄果蝇对比

4、在干净的唾腺上加一滴醋酸洋红染色液，固定并染色10~15min后，盖上干净盖玻片，用滤纸先轻轻压下，以吸去多余的染液。然后放在平的桌子上，用带有橡皮的铅笔或木夹子等反复轻击打（注意不能使盖玻片移动），直至染色体散开。

5、在低倍境下找到唾腺组织，在油镜下观察多线染色体特征。

实验结果

a b

c d

e

图2果蝇综合实验图片

(a.雄蝇性梳(40×)b.c.d.果蝇幼虫唾腺(1000×) e.果蝇幼虫唾腺染色体(1000×)) 分析讨论

1.以图显示，雌雄果蝇的背部形态特征及前足的性梳。

如图1，雄蝇末端钝而圆，颜色深。第一对跗节前端表面有性梳；雌蝇末端尖，附节前端无性梳。

如图2，第一对跗节前端表面有性梳，大约为10节。

2.麻醉果蝇时应注意哪些事项？

在棉塞上滴几滴乙醚后迅速盖上，注意摇动广口瓶使乙醚在瓶内充分扩散，麻醉时注意实验室保持通风

麻醉程度的判断，当翅膀外展45°表示已死亡。

3.果蝇唾腺染色体有哪些主要特征？

（1）形状为带状；

（2）核不分裂，由于染色体不断复制，形成了多线性染色体，宽度增加，同时长度也增加，成为巨型染色体；

（3）带的全长几乎都有明显的嗜碱性的横纹，横纹的宽度有大有小，密度有疏有密，但是它的数目，位置等等对于同源染色体来说却都是同样的；

（4）各条染色体在异染色质多的着丝粒附近互相靠拢，与核仁一起在核的中央形成一个染色中心。唾腺染色体的一条或几条横纹常显著膨起。

4.观察果蝇唾腺染色体在遗传学研究上有什么意义?

唾腺染色体是遗传分析的理想材料，唾腺染色体存在于双翅目昆虫幼虫消化管（尤其是唾腺）中的巨大的、可见的染色体，要比一般的染色体大，易于观察；巨大而伸展，复制产物不分开（又称多线染色体）；具有体细胞联会现象；有深浅相见的横纹；显见Puff结构（幼虫发育出现的特殊形态的泡状结构或称染色体疏松，是正在活跃转录RNA的位置。

5.为了看清果蝇唾腺的巨大染色体上的横纹，你应该如何操作显微镜?

调整光圈及细准焦螺旋，直至清晰观察到果蝇唾腺染色体的横纹。