_大豆根瘤菌剂载体的选择及最佳施用浓度筛选
大豆根瘤菌HH103菌株培养基的筛选与优化
大豆根瘤菌HH103菌株培养基的筛选与优化肖亦农;徐琼【摘要】Quick-growing soy bean rhizobium (Rhizobium fredii) HH103 was used as a tested strain, and adopted single factor nitrogen source utilization experiment and orthogonal design experiment to confirm the optimum medium and its formula. The results showed that the strain grew well on YMA, the optimum carbon source was sucrose, and the optimum nitrogen was yeast extract with the optimum medium formula as follows (in g/L) : sucrose 11, yeast extract 0.9, K2HPO40.5, MnSO4 0.005, CaCl2 0.1, KH2PO40.5, MgSO40.2, KNO30.77, (NH4)2HPO4 0. 33, FeCl3 0.005, andpH7.2.%以快生型大豆根瘤菌HH103菌株为供试菌株,采用单因素碳氮源利用试验和正交设计试验,确定最佳培养基及其配方.结果表明:该菌株在YMA中生长良好,最佳碳源为蔗糖,最佳氮源为酵母膏,最佳培养基成分配方(g/L):蔗糖11,酵母膏0.9,K2HPO4 0.5,MnSO40.005,CaCl2 0.1,KH2PO4 0.5,MgSO40.2,KNO30.77,(NH4)2HPO4 0.33,FeCl3 0.005,pH 7.2.【期刊名称】《微生物学杂志》【年(卷),期】2011(031)006【总页数】4页(P92-95)【关键词】大豆根瘤菌;培养基筛选;培养基优化;正交试验【作者】肖亦农;徐琼【作者单位】沈阳农业大学土地与环境学院,辽宁沈阳110866;沈阳农业大学土地与环境学院,辽宁沈阳110866【正文语种】中文【中图分类】S182空气中约78%的氮气不能被植物直接利用，只有固氮微生物具有将氮气转化成氨的能力，人们称为生物固氮。
大豆根瘤菌剂应用技术培训
大豆根瘤菌剂土壤喷雾接种装置
根瘤菌剂容器
喷雾装置
根瘤菌产品使用方法之三 —— 种子包衣
种子包衣是将根瘤菌菌剂和粘着剂拌合后包在种子外面，然 后外面再拌上种子包衣材料，制成包衣种子。
常用的粘着剂有10%糖溶液、阿拉伯胶或40%羧甲基纤维素 溶液等。
使用液体根瘤菌剂拌种过程
1. 按照说明用量量取根瘤菌剂
2. 将根瘤菌剂倒入种子中
3. 将菌剂与种子拌匀
4. 混好后阴干
根瘤菌产品使用方法之一 —— 拌种
与种衣剂一起使用时则先拌种衣剂，待完全阴干后再 拌根瘤菌剂。
先包衣
再拌种根瘤菌
根瘤菌产品使用方法之二 —— 土壤接种
土壤接种是将根瘤菌剂喷/撒在垄沟内或种子下方3～5 cm处，这样种子萌发出幼根即可接触到菌剂，有利于 提高接种根瘤菌的占瘤率，增加固氮量。
4
4.7
19.2 15.7 44.3 0.38 0.60 2.59 3.19
5
5.0
23.7 19.8 52.6 0.44 0.85 3.86 3.95
6
5.3
25.4 22.3 55.9 0.47 0.99 5.02 5.03
7
4.7
16.9 15.3 45.1 0.42 0.51 1.84 2.37
世界主要大豆生产国：非常重视根瘤菌的应用
根瘤菌剂在国外主要大豆生产国应用十分普遍：美国、巴西、阿根 廷、加拿大、印度、新西兰、澳大利亚等主要大豆种植国，根瘤菌 接种面积占大豆种植面积的 50%～90%。巴西、阿根廷在大豆种 植过程中不施化学氮肥。美国仅在根瘤形成前施很少量的氮肥，以 供大豆前期使用。
大豆根瘤菌剂使用技术
大豆根瘤菌剂使用技术
根瘤菌剂是指以根瘤菌为生产菌种制成的微生物制剂产品，它能够固定空气中的氮元素，为宿主植物提供大量氮肥，从而达到减肥增产的目的。
一般在大豆播种时以拌种方式使用，也可以播种前沟施，具体操作方法和用量因品牌和菌剂类型不同而有所不同，需要按产品说明书进行操作。
1.拌种方法
（1）液体菌剂拌种
液体根瘤菌剂使用之前应先加入适量粘附剂，反复搅拌，使其完全溶解后将菌剂与大豆混合并搅拌均匀，一般每25ml液体根瘤菌剂与5kg大豆混合，于阴凉通风处将拌好的种子适当阴干后即可播种。
（2）固体菌剂拌种
常规用量(豆种:菌剂为10:1)。
拌种前，将配套的粘附剂倒入适量清水中，反复搅拌，使其完全溶解，然后倒入固体菌剂中搅拌混匀，调成糊状与大豆充分混合，使糊状菌剂均匀粘附在种子表面。
在阴凉通风处，将拌好的种子适当晾干后即可播种。
2.沟施方法
固体(及颗粒)菌剂与豆种混合后，由人工或播种机沟施；液体菌剂一般稀释200倍后（具体按说明书操作），喷洒于播种的沟穴内，液体菌剂还可以配合滴灌系统使用。
3.注意事项
（1）根瘤菌剂的有效成分是根瘤菌活细胞，可与其他生物肥料混合使用，但是不能与防治病害的农药一起使用。
（2）尽可能避免高温和阳光直射。
（3）如用于拌种，晾干后建议当天使用。
如用于沟施，要把菌剂撒在播种的沟中或穴内，不要等播完豆种，盖土后再撒在土壤表面。
不同氮肥施用量大豆根瘤菌拌种试验总结
Z i x u n t a i 豆科植物共生固氮是自然界中最强的生物固氮体系。
大豆从根瘤菌中得到的氮素营养可占其一生氮素营养的30%～70%。
大豆根瘤菌肥增产机理明确，在大豆播种前接种根瘤菌是国际公认的生物固氮技术。
推广大豆根瘤菌是促进大豆增产、提质、环保和可持续发展的实用技术，是一件利国利民的好事。
由于重迎茬面积大，大豆表现为根瘤少、病害多，产量一直徘徊不前。
因此在我县推广使用该技术意义重大。
大豆根瘤菌接种是一项增产节肥、投资少、收益大、简而易行的措施。
是降低大豆生产成本。
提高大豆产量的有效措施。
它对于大豆有两个方面的作用。
一是通过将空气中丰富的氮素资源转化为大豆可以直接利用的铵态氮，解决大豆的氮肥供应；二是根瘤菌分泌的酶，促进大豆的生长发育。
一、试验目的通过试验，检验大豆根瘤菌在不同地区的固氮效果，及其对大豆的增产效果的作用。
二、试验方法。
采用小区试验和生产田对比试验同步进行。
1、基本情况试验在呼玛县农业技术推广中心院内和福利院南地，生育期期间降雨量为461毫米。
生育期100天，有效积温2000℃。
土壤均为暗棕壤土。
地势平坦，土壤肥力中上等，土壤养分含量为有机质，速效氮162mg/kg，速效磷30mg/kg，速效钾129mg/kg。
前茬为大豆，60cm垄上双行精量点播。
采用品种昊江166、北豆23。
2、试验材料根瘤菌包衣剂：由哈尔滨华龙科技有限公司提供；用菌量225ml/垧供试材料：大豆：昊江166、北豆23号，公顷保苗40万株；播种量为100kg/垧。
化肥：尿素（含量46%），重过磷酸钙(含量46%),硫酸钾（含量50%）3、试验设计试验设3个处理，常规施肥无根瘤菌剂作对照，试验无重复。
小区顺序排列，每个处理6行，行长30米，行距65cm，垄上播双行，5月10日播种施肥，播前精细整地，机械精量播种。
其它田间管理按垄三栽培技术规程操作。
处理1、施肥量为：尿素30kg/公顷、磷酸二铵100kg/公顷,硫酸钾50kg/公顷。
大豆根瘤菌应用技术
大豆根瘤菌应用技术作者：张再峰金重明来源：《农民致富之友》2010年第22期豆科植物共生固氮是自然界中最强的生物固氮体系。
大豆从根瘤菌中得到的氮素营养可占其一生氮素营养的30～70%。
大豆根瘤菌肥增产机理明确，在大豆播种前接种根瘤菌是国际公认的生物固氮技术。
推广大豆根瘤菌是促进大豆增产、提质、环保和可持续发展的实用技术，是一件利国利民的好事。
一、根瘤菌的作用1、固氮作用大豆根瘤菌以大豆光合作用产物为能源，将空气中的氮素转变成大豆生长发育所需要的营养元素，根瘤菌与大豆是共生固氮的关系，开始大豆根瘤菌固氮很少，到开花至鼓粒初期是大豆根瘤菌固氮的高峰，以后由于豆粒发育消耗了大量植株光合产物，限制了对根瘤菌养分的供应，根瘤菌逐渐衰老，固氮能力下降。
大豆根瘤菌在大豆生长中起着非常重要的作用。
大豆一生需要氮肥60%左右是大豆根瘤菌提供的，其余的由土壤和肥料提供。
而大豆籽粒中的氮素，根瘤菌提供80%左右，土壤和肥料中的氮素大部分供给大豆根、茎、叶的生长。
2、增产作用大豆应用根瘤菌，可以使大豆产量提高10%以上，同时大豆的蛋白质提高2%、粗脂肪含量提高1—2%，每亩净收入增加40—50元。
经过施用根瘤菌增加了根瘤菌的数量和重量，提高了大豆固氮能力。
表现出大豆生长旺盛，产量增加。
2008年9月由东北农业大学等5个单位的专家对大豆应用根瘤菌剂示范项目进行田间鉴评。
结果表明：大豆应用根瘤菌剂拌种，株高、植株干重分别增加了4～12cm、7～27克，单株根瘤数明显增加。
3、减少氮肥施用量大豆根瘤菌在固氮之前，植株生长需要一定的氮素，但施氮过多会抑制根瘤菌生长，从而影响根瘤菌固氮能力，影响产量，所以在施根瘤菌条件下应施多少氮肥，使作物既不缺氮，又不出现氮素过剩。
科研站以前做了这方面的研究，认为接种根瘤菌后，施纯氮1kg左右大豆增产最多，根据我们现在施肥水平施入根瘤菌可节省2kg左右的尿素。
二、技术要点1、选择合适的大豆根瘤菌品种采集大豆生产区的主要土壤类型，进行土壤、根瘤菌匹配试验，筛选活性强、效果好、适应当地土壤和气候的大豆根瘤菌品种。
大豆根瘤菌应用技术
大豆根瘤菌应用技术
大豆生产中使用根瘤菌是一项成熟的、广泛使用的技术，能够大幅度地提高大豆生长期中的自身固氮能力，供给充足的氮素，供大豆生产所需。
大豆根瘤菌有液体、固体两种剂型。
固体型根瘤菌采用拌种或土施方式应用。
液体型根瘤菌采用浸种方式使用。
也可以在种子包衣时加入大豆根瘤菌剂，但是要注意包衣剂和根瘤菌剂之间应相互匹配，不能因种衣剂药效抑制根瘤菌的活性。
一、增产增效情况
根据大田示范结果，大豆应用根瘤菌，可以使大豆产量提高10%以上，同时大豆的蛋白质含量提高2%、粗脂肪含量提高1～2%，每亩净收入增加40～50元。
二、技术要点
1、选择合适的大豆根瘤菌品种采集大豆生产区的主要土壤类型，进行土壤、根瘤菌匹配试验，筛选活性强、效果好、适应当地土壤和气候的大豆根瘤菌品种。
2、采用适宜的施用方法根据大豆根瘤菌的剂型，固体菌剂采用拌种或造粒后随大豆种子、肥料穴施；液体菌剂采用
浸种方式使用。
也可以在种子包衣时加入大豆根瘤菌菌剂，但是要注意包衣剂和根瘤菌剂之间应相互匹配，不能因种衣剂药效抑制根瘤菌的活性。
3、合理用量菌剂拌种时每亩用量0.5千克，菌剂造粒
后随大豆种子、肥料穴施时每亩用量1～2千克；液体菌剂浸种时用量0.5千克；种子包衣时用量根据包衣剂要求的用量。
大豆根瘤菌是一种活的微生物制剂，在储藏、运输、使用过程中，要避免温度过高或者过低；同时不能与杀菌剂类农药混用。
三、适宜区域和范围
在我国的黑龙江、吉林、辽宁、内蒙古以及黄淮海的大豆主产区，均可广泛使用大豆根瘤菌。
2002～2004年，在辽宁、吉林、黑龙江和内蒙古的大豆生产区示范推广800万亩，取得很好效果，应用前景广阔。
工艺方法——大豆根瘤菌接种及配套施肥技术
工艺方法——大豆根瘤菌接种及配套施肥技术工艺简介大豆根瘤菌是能与豆科植物共生形成根瘤，并进行生物固氮的一类革兰氏阴性杆菌。
通过接种大豆根瘤菌及科学合理施肥，能够增强根瘤菌共生固氮能力，提高产量、改善品质、培肥地力。
一、大豆根瘤菌剂要求选用取得农业农村部肥料登记的大豆根瘤菌剂产品，产品质量符合《农用微生物菌剂（GB20287-2006）》要求，已按《根瘤菌生产菌株质量评价技术规范（NY/T1735-2009）》完成质量评价，在保质期内、包装完好。
二、接种方式（一）拌种适用于现拌现用的小规模种植农户。
1、拌种剂量及时间根据播种量，按大豆根瘤菌剂产品说明书确定用量。
应在大豆播种前12小时内进行根瘤菌拌种作业。
2、拌种器械根据用种量和当地生产条件，使用干净的盆、桶、袋子等容器或拌种机械进行拌种。
拌种容器或机械进行过农药种衣剂作业的，应用水清洗3次以上。
3、拌种作业拌种地点应在阴凉处，避免阳光直射。
将适量根瘤菌剂与大豆种子混合，轻轻搅拌至所有种子表面都附着根瘤菌剂，种子阴干后播种。
拌种时应避免碰破种皮。
（二）喷施适用于使用带喷施设备播种机具的种植农户。
1、菌液配制根据喷施面积和大豆根瘤菌剂产品说明书确定根瘤菌剂和水的用量。
使用自来水配制菌液时，提前将自来水接入容器静置1-2天。
将根瘤菌剂加入水中，搅拌均匀后即可使用。
喷施菌液应现用现配。
2、喷施设备用喷施设备在大豆播种时将根瘤菌液喷洒在大豆种子表面及周围土壤。
使用过抑菌或灭活作用药剂的喷施设备，应用清水将容器、管路和喷头清洗3次以上。
3、喷施作业喷施作业前应检查喷施设备的压力部件、控制部件、喷头和接口，保证喷施设备正常运行。
喷施时，作业人员应注意观察喷头是否堵塞、各接口是否有滴漏现象，发现问题及时排除。
（三）种子包衣适用于种子企业对大豆种子包衣操作。
1、包衣剂要求包衣剂所用材料应对根瘤菌、大豆植株、人畜和环境无毒无害，并能保证包衣1个月后每粒大豆种子根瘤菌存活数量在1×104以上。
大豆根瘤菌接种技术
大豆根瘤菌接种技术大豆是一种重要的农作物，在全球范围内广泛种植。
为了提高大豆的产量和品质，大豆根瘤菌接种技术逐渐受到重视。
根瘤菌能够与大豆植株形成共生关系，将空气中的氮气转化为植物可利用的氮素，从而减少化肥的使用，降低生产成本，同时还有利于环境保护。
下面就来详细介绍一下大豆根瘤菌接种技术。
一、根瘤菌的作用及特点根瘤菌是一类能够与豆科植物共生形成根瘤并固定空气中氮气的细菌。
当大豆种子萌发后，根瘤菌会侵入大豆的根部，刺激根部形成根瘤。
在根瘤内，根瘤菌将氮气转化为氨，然后提供给大豆植株使用。
根瘤菌具有特异性，不同的大豆品种可能需要不同种类的根瘤菌与之匹配，才能达到最佳的共生效果。
此外，根瘤菌的存活和繁殖需要适宜的环境条件，如温度、湿度、酸碱度等。
二、大豆根瘤菌接种的时机1、种子接种在播种前，将根瘤菌剂与大豆种子充分混合，使每粒种子表面都能沾上根瘤菌。
这种方法操作简单，易于推广。
2、土壤接种在播种前，将根瘤菌剂均匀撒施在土壤表面，然后通过耕翻等措施将其混入土壤中。
这种方法适用于土壤中根瘤菌数量较少的情况。
一般来说，春季播种的大豆在播种前 1-2 天进行接种；夏季播种的大豆在当天接种效果较好。
三、大豆根瘤菌接种的方法1、液体接种法将根瘤菌剂稀释成一定浓度的菌液，然后将种子浸泡在菌液中一段时间，使种子充分吸收根瘤菌。
这种方法接种效果较好，但操作相对复杂。
2、固体接种法将根瘤菌剂与一定量的细土、泥炭或蛭石等载体混合均匀，制成固体菌剂。
然后将固体菌剂与种子直接混合，使种子表面沾上菌剂。
这种方法操作简单，成本较低。
四、大豆根瘤菌接种的注意事项1、选择合适的根瘤菌剂要根据当地的土壤条件、大豆品种以及种植季节等因素，选择合适的根瘤菌剂。
同时，要选择质量可靠、活菌数量高的菌剂产品。
2、严格按照说明书操作不同的根瘤菌剂使用方法和剂量可能有所不同，一定要严格按照说明书的要求进行操作，避免因操作不当影响接种效果。
3、避免与杀菌剂、杀虫剂同时使用杀菌剂和杀虫剂可能会杀死根瘤菌，影响接种效果。
高效大豆根瘤菌的筛选
高效大豆根瘤菌的筛选作者：张欣，李玉文转贴自：本站原创(1．东北林业大学林学院；2．黑龙江省科学院生物肥料研究中心，黑龙江哈尔滨150086)摘要：将选取的10株大豆根瘤菌菌株(HLJN1001，HLJN1002，HLJN1003，HLJN1004，HLJN10 05，HLJN1006，HLJN1007，HLJN1008，HLJN1009，HLJN10010)与在黑龙江省大面积栽培的5 个大豆品种（垦农18号，垦鉴豆25号，合丰25号，疆丰21-1381号，绥农4号）进行最佳共生匹配双瓶筛选试验，测定了大豆植株株高、叶片颜色、结瘤数、瘤干重和植株地上部分干重等生物学指标并进行统计分析，从中筛选出共生固氮结瘤能力强的优良菌株HLJN1001和HLJN 1003。
关键词：大豆根瘤菌；大豆品种；共生匹配；筛选中图分类号：S565.1 文献标识码：A 文章编号：1007—6921(2011)10—0125—03根瘤菌(Rhizobium)是一类广泛分布于土壤中的革兰氏阴性细菌，它可以侵染豆科植物根部，形成根瘤，固定空气中的分子态氮形成氨，为植物提供氮素营养。
但根瘤菌与豆科植物独立存在时，不能利用大气中的N2，而当根瘤菌侵入豆科植物的根细胞并在其中迅速增殖后，可产生类菌体，并在根瘤内出现豆血红蛋白，同时具备类菌体和豆血红蛋白的根瘤便具有固氮能力。
研究表明，不同的根瘤菌与大豆品种间的共生固氮能力存在着较大的差异［1,2］ 。
因此，筛选与豆科作物品种匹配、固氮能力好、竞争结瘤能力强的优良菌株，是提高根瘤菌应用效果的重要途径［3］。
现选取10株大豆根瘤菌菌株，与5个在黑龙江省大面积栽培的大豆品种进行共生匹配性研究，从中筛选出优良菌株，为大豆育种材料的选择和共生固氮作用的发挥提供依据。
1 材料与方法1.1 试验材料1.1.1 供试菌株HLJN1001，HLJN1002，HLJN1003，HLJN1004，HLJN1005，HLJN1006，HLJN1007，HLJN1008，HLJN1009，HLJN10010，共10株，由黑龙江省科学院生物肥料研究中心提供。
大豆根瘤菌的筛选及分离鉴定
大豆根瘤菌的筛选及分子鉴定韩孝强（天津农学院农学系）1 前言根瘤菌是可以与豆科植物共生形成根瘤，将空气中的氮还原成氨，提供植物营养并能促使植物异常增生的一类革兰氏阴性菌。
如根瘤菌属和慢性根瘤菌属都能从豆科植物根毛侵入根内形成根瘤，并在根瘤内成为分枝的多态细胞，称为类菌体[1]。
常制成细菌制剂即一种生物肥料在田间施用，作为作物或牧草增产的一种手段。
美国、澳大利亚、新西兰、日本、意大利、奥地利、加拿大、法国、荷兰、芬兰、泰国、韩国、印度及非洲的一些国家，至少有70多个国家研究、生产和应用豆科根瘤菌，不仅面积不断扩大，而且应用的豆科植物种类也日益繁多。
在美国、巴西等大豆种植的主要国家，根瘤菌接种率达到95%以上[2]。
世界各国一直在研究与豆科作物及其品种相匹配的优良根瘤菌生产用菌株，根瘤菌剂产品在稳步提高[3]。
我国微生物肥料的研究始于20世纪40年代，其研究与应用已有几十年的历史，在我国的农业生产中起了非常重要的作用。
最早研究应用的是根瘤菌制剂，代表和奠基人有张宪武先生、陈华癸院士和樊庆笙先生等[4]。
众所周知，大豆是富含蛋白质的一种作物，构成蛋白质的主要元素就是氮，而空气有80%都是由氮气组成的，根瘤菌正是利用了这种最廉价的原料来满足了大豆生长过程中氮元素的需要[5]。
而且根瘤菌产生的氨态氮没有环境污染，吸收率相当高，使用过程中没有氮流失，而人工施用化学氮肥流失率往往大于50%，且氮肥为产酸肥料，施用后会造成土壤酸化问题[6]。
因此使用了根瘤菌后可以不施或大量减少化学氮肥的用量，在显著提高亩产量的同时还能减少因使用化肥对土壤结构造成的破坏和对水源的污染，节省能源、改良土壤、实现可持续发展的目标[7]。
传统的微生物系统分类是根据菌落的形态特征和生理生化特性，对菌种进行纯培养分离，然后从形态学、生理生化反应特征以及免疫学特性加以鉴定[8]。
但近几十年来，随着分子遗传学和分子生物学技术的迅速发展，给传统微生物分类鉴定带来了巨大的革新，许多新技术和方法在微生物分类中己得到广泛应用，使微生物分类鉴定从一般表型特征的鉴定，深化到遗传特性的鉴定[9]。
大豆根瘤菌剂作用功效
大豆根瘤菌剂作用功效【摘要】大豆根瘤菌是一类能够与豆科作物共生，通过固定大气中的氮来满足作物生长所需氮素的微生物。
大豆接种根瘤菌后，可减少一半以上的氮肥投入，有效缓解和改善大豆重迎茬及根腐病，同时具有改良土壤、提高地力的作用。
本文就大豆根瘤菌剂作用机理、注意事项、使用方法等技术要点做了简要概述。
【关键词】大豆根瘤菌;作用功效大豆生产中使用根瘤菌是一项成熟的、广泛使用的技术，能够大幅度地提高大豆生长期中的自身固氮能力，供给充足的氮素，供大豆生产所需。
大豆根瘤菌有液体、固体两种剂型。
固体型根瘤菌采用拌种或土施方式应用。
液体型根瘤菌采用浸种方式使用。
也可以在种子包衣时加入大豆根瘤菌剂，但是要注意包衣剂和根瘤菌剂之间应相互匹配，不能因种衣剂药效抑制根瘤菌的活性。
多年来，我县一直把大豆使用根瘤菌作为抵抗重迎茬、增加产量的重要技术来抓，并且取得了实实在在的效益。
１．大豆根瘤菌剂作用机理大豆根瘤菌剂属于无污染、无公害、低成本、肥沃土壤的环境友好型制剂，可增强作物抗病、抗逆性，显著提高作物的品质与产量。
根据我县大田示范结果，大豆应用根瘤菌，可以使大豆产量提高10%以上，同时大豆的蛋白质含量提高2%、粗脂肪含量提高1～2%，每亩净收入增加40～50元。
1.1制造和协助农作物吸收营养根瘤菌在豆科植物根部结瘤并高效率的固定空气中的氮素，供作物直接吸收利用；与此同时根瘤菌在繁殖过程中产生大量的植物生长激素，可刺激和调节作物生长，促使植株生长健壮，并促进作物对其它营养的吸收利用，提高了土壤养分利用效率。
1.2增强作物抗病和抗旱能力根瘤菌由于在作物根部大量生长繁殖，减少或抑制了病原微生物的繁殖机会，起到抗病原微生物的作用。
根瘤菌还可诱导植物产生系统抗性，从而减轻作物发生病害的几率。
根瘤菌还可促使作物抗旱能力提高，可增强作物抗逆能力。
1.3改良土壤及增进土壤肥力根瘤菌可以增加土壤中的氮元素来源，同时根瘤菌脱落、残留及分泌到土壤中的氮，可增加土壤肥力从而改良土壤，生产上用豆科植物与其它作物间作、轮作，就是利用根瘤菌的固氮作用，并且减少了化学氮肥的施入，可有效降低土壤板结。
大豆根瘤菌对不同微肥及pH耐性的筛选
０ ． １ ｇ ， Ｃ ａ Ｃ １ ２ ０ ． ０ ５ ｇ， Ｒ ｈ微量元 素液 ４ ｍＬ ， Ｈ ２ ０ １ ０ ０ ０ ｍ Ｌ， ｐ Ｈ ６ ． ８～ ７ ． ０ （ Ｒ ｈ微 量元 素液 ： Ｈ ３ Ｂ Ｏ ３ ５ ｇ ， Ｎ ａ ２ Ｍｏ Ｏ ４
５ ｇ ， Ｈ ０ １ ０ ０ ０ ｍ Ｌ ） ， 琼脂 ｌ ５— ２ ０ ； ＠Ｙ Ｍ Ａ液体培养基 ： 不加琼脂的 Ｙ Ｍ Ａ培养基 ； ￣Ｙ Ｍ Ａ固体平板培养基 ： 与斜 面培养 基相 同 。
（ Ｉ ｎ ｓ ｔ ｉ ｔ ｕ ｔ ｅ ｏ ｆ Ａ ｐ ｐ ｌ ｉ ｅ ｄ Ｍｉ ｃ ｒ ｏ ｂ ｉ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ， Ａ ｎ ｈ ｕ ｉ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ａ ｎ ｄ Ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｙ ｇ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ， Ｆ ｅ ｎ ｙａ ｇ ｎ ｇ ２ ３ ３ １ ０ ０ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ） Ａ ｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ： Ｔ ｏ ｌ ｅ ｒ ａ ｎ ｃ ｅ ｅ ｘ ｐ ｅ ｉ ｒ ｍ ｅ ｎ ｔ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ １ ４ ｒ ｈ ｉ ｚ ｏ ｂ ｉ ａ ｌ ｓ ｔ ｒ ａ ｉ ｎ ｓ ｆ ｏ ｒ ｉ ｆ ｖ ｅ ｍｉ ｃ ｒ ｏ ｅ ｌ ｅ ｍ ｅ ｎ ｔ （ ｉ ｒ ｏ ｎ ， ｃ ｏ ｂ ａ ｌ ｔ ， ｂ ｏ ｒ ｏ ｎ ， ｍ ｏ ｌ ｙ ｂ ｄ ｅ —
大豆根瘤菌实施方案
大豆根瘤菌实施方案大豆根瘤菌是一种对大豆生长有益的微生物，它能够与大豆根系共生，并固氮，为大豆提供养分。
因此，对大豆根瘤菌的实施方案具有重要意义。
本文将对大豆根瘤菌实施方案进行详细介绍，以便广大农户和农业专业人士能够更好地了解和应用这一方案。
首先，大豆根瘤菌的选择非常重要。
在选择大豆根瘤菌时，应优先选择对大豆生长有益的优质菌种，确保其对大豆的固氮效果良好。
同时，还应注意菌种的适应性和稳定性，以便在不同环境条件下都能够发挥作用。
此外，要注意避免使用过期或劣质的菌种，以免对大豆生长造成不良影响。
其次，大豆根瘤菌的施用方法也需要注意。
一般来说，大豆根瘤菌可以通过种子浸种、根部浇灌或土壤施用等方式进行施用。
在选择施用方法时，应根据具体情况进行综合考虑，确保菌种能够有效接触到大豆根系，并且能够在根系附近迅速生长和定殖。
此外，施用时需要注意适量适时，避免过量施用或施用时间不当导致浪费或影响效果。
另外，合理的管理措施也是大豆根瘤菌实施方案中不可忽视的一部分。
在大豆栽培过程中，应注意合理施肥、灌溉和病虫害防治等措施，以创造良好的生长环境，为大豆根瘤菌提供良好的生长条件。
此外，还应注意避免对大豆根瘤菌造成不利影响的农药使用，保证菌株能够正常生长和固氮。
最后，对大豆根瘤菌的效果进行监测和评估也是实施方案中的重要环节。
在大豆生长期间，应定期对大豆根系和根瘤进行观察和检测，了解大豆根瘤菌的定殖情况和固氮效果。
同时，也可以通过土壤和植株组织的化验分析等方法，对大豆根瘤菌的效果进行评估，及时调整和改进实施方案。
综上所述，大豆根瘤菌实施方案的成功与否，关键在于菌种的选择、施用方法、管理措施和效果监测等方面的合理安排和落实。
只有在这些方面都做到位，才能够确保大豆根瘤菌能够充分发挥作用，为大豆的生长和产量提供有力支持。
希望本文所述内容能够对大豆根瘤菌实施方案的制定和应用提供一定的参考和帮助。
高效大豆根瘤菌的筛选
此 方法 温室最 佳共 生 匹配试验 方案 。
１ ２ ３ １ 选 取 优 良 的 大 豆 种 子 ， 人 无 菌 培 养 皿 ． ．． 放 中 ， 入 ９ ％ 的 乙 醇 ， 枪 头 反 复 冲 洗 ， 使 种 子 表 加 ５ 用 以
２１ ０ １年 ５月
内 蒙 古 科 技 与 经 ห้องสมุดไป่ตู้
Ｉ ｅ ｏ ｇ ｌ ｃｅ ｃ ｃ ｎ ｌｇ ＆ Ｅｃ ｎ ｍｙ ｎｎ ｒＭ ｎ ｏ ｉ Ｓ ｉｎ ｅＴｅ ｈ ｏｏ ｙ ａ ｏｏ
Ｍａ ｙ ２０１ １
第１ ｏ期 总 第 ２ ６ ３ 期
Ｎｏ． ０ Ｔ ｏ ａ １ ｔ ｌＮｏ．２ ３６
筛 选 与 豆 科 作 物 品 种 匹 配 、 氮 能 力 好 、 争 结 瘤 能 固 竞
力 强 的 优 良菌 株 ， 提 高 根 瘤 菌 应 用 效 果 的 重 要 途 是
基 中 ， 摇 瓶 培 养 法 在 ３ 培 养 条 件 下 ２ ０ｐ 摇 床 用 ０Ｃ ０ ｒｍ
中培养 至 发酵液 菌 体密 度 ５ ０亿 个 ／ ｍ］以 上 后 ， 于 置 ４ 的冰箱 中低温保 存备 用 。 ℃
豆 血 红 蛋 白 ， 时 具 备 类 菌 体 和 豆 血 红 蛋 白 的 根 瘤 同
１ ２ １ 大 豆 根 瘤 菌 的 培 养 ．． 将 大 豆 根 瘤 菌 ＨＬＪ １ ０ ， ＨＬ Ｎ １ ０ ， Ｎ ０１ Ｊ ０ ２
Ｈ ＬＪ １ ０３， Ｈ ＬＪ １ ４， Ｈ ＬＪ １ ０ Ｎ ０ Ｎ ００ Ｎ ０ ５， Ｈ ＬＪ １ ６， Ｎ ００
固氮作用 的发挥 提供 依据 。 １ 材 料 与 方 法 １１ 试 验材料 ． １１１ ．． 供 试 菌 株
黑龙江省土著根瘤菌制剂最佳施用浓度筛选
黑龙江省土著根瘤菌制剂最佳施用浓度筛选刘庆莉;王金生;吴俊江;刘丽君;胡国华;王红蕾;张俐俐【期刊名称】《黑龙江农业科学》【年(卷),期】2014(000)006【摘要】为了解黑龙江省土著根瘤菌制剂对大豆生长的影响,筛选出最佳使用浓度,以结瘤能力较强的根瘤菌菌株为试材,通过活化、摇床培养设定4个浓度梯度,混拌接种于大豆,在结荚期测定其植株生物量、根瘤鲜重、根瘤干重和根瘤数,并于成熟期对其产量构成因子进行测定分析.结果表明:大豆接种根瘤菌后,叶片颜色深绿、株高升高,单株根瘤数目增加,并在结荚期达到结瘤高峰.根瘤干鲜比随着根瘤菌液浓度的变化呈现抛物线状,菌细胞0.8×108个·mL-1浓度处理的根瘤干鲜比最高,对照根瘤菌液处理的根瘤干鲜比明显高于试验中各菌液处理的根瘤干鲜比.接入根瘤菌处理的大豆生物量均高于菌液对照处理及清水对照处理,菌细胞0.6×108个·mL-1处理的生物量达到最高.低浓度菌液处理的根冠比小于高浓度菌液处理.株高、单株荚数、单株粒数随着根瘤菌液浓度的变化也呈现出抛物线状,菌细胞均以0.6×108个·mL-1根瘤菌液浓度处理最高.根瘤菌液各浓度处理的百粒重变化不大,略高于菌液对照处理而显著高于清水对照处理.因此,黑龙江省土著根瘤菌制剂推荐使用浓度菌细胞0.6×108个·mL-1.【总页数】5页(P35-39)【作者】刘庆莉;王金生;吴俊江;刘丽君;胡国华;王红蕾;张俐俐【作者单位】黑龙江省农业科学院大豆研究所,黑龙江哈尔滨150086;黑龙江省农业科学院大豆研究所,黑龙江哈尔滨150086;黑龙江省农业科学院大豆研究所,黑龙江哈尔滨150086;黑龙江省粮食产能提升协同创新中心,黑龙江哈尔滨150030;黑龙江省农业科学院大豆研究所,黑龙江哈尔滨150086;黑龙江省农垦科研育种中心,黑龙江哈尔滨150090;黑龙江省农业科学院信息中心,黑龙江哈尔滨150086;黑龙江省农业科学院,黑龙江哈尔滨150086【正文语种】中文【中图分类】S144.3【相关文献】1.黑龙江省土著大豆根瘤菌数量分布及接种菌在土壤中生存定殖能力… [J], 李新民;窦新田2.高效土著花生根瘤菌筛选的初步研究 [J], 刘世旺;刘建英;徐艳霞;徐君驰3.高产高蛋白大豆与高效固氮根瘤菌和菌根菌最佳联合共生体筛选 [J], 常从云;卢增辉;戴蜀珏;赵长军;郭鼎新4.大豆品种—根瘤菌株最佳组合筛选试验 [J], 唐东阶5.高效固氮根瘤菌与高产高蛋白大豆最佳共生体筛选研究简报 [J], 常从云;孙克用;卢增辉;戴蜀珏;赵长军;杨孟佩;李奇真因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
不同施氮量条件下大豆品种接种根瘤菌筛选
不同施氮量条件下大豆品种接种根瘤菌筛选土壤、肥料与共生固氮是大豆整生长过程所需氮素的主要来源，共同为大豆生长发育提供了氮素营养需求；三者既紧密相连，又互相制约。
合理调配共生固氮、土壤供氮和氮肥施用三者之间的使用量，是提高大豆稳产、高产和大豆品质的关键。
每产生100 kg大豆则需要吸收大约6.5〜8.5 kg氮素。
大豆根瘤具有较强的固氮能力，大豆与根瘤菌共生固氮作用所固定的氮素约占大豆一生对氮素需求的50%〜60%[1] 。
我国的生产现实是大豆共生固氮和土壤氮素未能满足大豆生长发育的需求，生产上常常配合施用氮肥。
施用氮肥和大豆接种根瘤菌均可增加大豆产量，因此氮肥合理施用就显得十分关键。
通过对氮素与根瘤关系的研究得知，氮肥对根瘤的结成、数量有抑制作用，氮肥施用过量会明显减少根瘤数目[2-3] 。
宁夏地区生产上对大豆田间管理很粗放，大豆整个生育期间一次性施基肥或不施肥，这样没有起到节本增效的效果。
前人对氮肥施用对大豆产量和品质影响的研究较多[4-14] ，但对不同的施氮量及施氮方式对大豆根瘤生长及产量的影响研究较少[15-16] ，本研究旨在探讨不同施氮量下，接种大豆根瘤菌对大豆生育期的结瘤情况、大豆产量和产量构成因素的影响，如何利用合理解决三方面氮素之间的矛盾关系，解决氮肥利用效率不高所导致的负面效应[17-19] 。
本研究初步为宁夏地区生产上建立了一套合理施用氮肥技术，对如何使大豆有效利用氮素，增加干物质积累量、氮素积累量、氮素含量等提供理论依据，并对氮肥高效率合理应用，减少经济投入和减轻对环境的污染，提高产量均具有现实意义。
1 材料与方法1.1 试验区基本概况试验于2014 年在宁夏农林科学院农作物研究所王太试验基地（38.15N，106.15E ）进行。
2014年前茬作物为向日葵。
土质为粉（沙）壤土，土壤有机质含量为 1.58% ，速效磷含量19.9 mg/kg，速效钾含量195 mg/kg ,全氮含量0.094%,全磷含量0.09%, 全钾含量1.92%，全盐含量0.048%, pH值8.33。
大豆根瘤菌剂应用技术培训
4
4.7
19.2 15.7 44.3 0.38 0.60 2.59 3.19
5
5.0
23.7 19.8 52.6 0.44 0.85 3.86 3.95
6
5.3
25.4 22.3 55.9 0.47 0.99 5.02 5.03
7
4.7
16.9 15.3 45.1 0.42 0.51 1.84 2.37
大豆根瘤菌剂应用技术培训
提纲
一、大豆根瘤共生固氮的重要性 二、大豆根瘤菌剂的选择与使用 三、大豆配套施肥建议
一、大豆根瘤共生固氮的重要性—— 提供大豆氮素养分
大豆的根瘤（见图A）是由根瘤菌（见图B）通过大豆根毛进入，经过双方共 同作用，形成的具有固氮功能的特定结构。大豆根瘤的功能是能够将吸收 空气中的氮气并转化为作物可以直接利用的氨态氮。
8
5.1
20.2 18.1 50.3 0.47 0.73 2.44 3.02
9
5.4
22.5 20.6 52.8 0.51 0.91 3.40 3.56
接种根瘤菌对根系和土壤剖面的效果：增加根瘤 数量，促进作物根系生长，提高大豆产量。
对照(未接种)
接种根瘤菌
经过一年的试验看出，大豆应用根瘤 菌可以促进大豆生长发育、表现为根瘤 数量、重量增加，植株长势健壮，单株 粒数增多，具有提高大豆抗逆性及显著 的增产增收作用。尤其是今年，在7-8月 份持续高温多雨季节，施用氮肥多的处 理表现出徒长、结荚部位增高等现象， 且有一定程度的菌核病发生，而应用根 瘤菌拌种的处理，植株生长健壮，结荚 部位降低，菌核病发病率也明显降低。
二、大豆根瘤菌剂的选择与使用
(一) 大豆根瘤菌剂选择的 2 个原则 (二) 大豆根瘤菌剂的使用
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Abstract： In order to screen the carrier that was more appropriate for the absorption of rhizobia，improving yield and quality of inoculated soybean，and screen the best soybean rhizobia bacterial concentration at levels of quality carrier，three carriers absorbed different soybean rhizobia bacterial concentration with seed dressing were performed according to the biomass，nodular rate and yields of soybean plant by soil pot experiments． The results showed that different carriers and inoculating soybean rhizobia could improve the biomass and nodular rate of soybean plant． Peat and vermiculite were used as carriers of rhizobia could remarkably promote the growth of soybean plant and enhance dry matter accumulation； thus the lasting effect of nodular was the longest，followed by vermiculite and liquid． Low level bacterial concentration could remarkably increased soybean yield and quality with peat and vermiculite as carriers，however the opposite when used liquid as carriers． In conclusion，in view of the cost，peat was more appropriate for soybean rhizobia，and the best bacterial concentration was 1． 4 × 108 cells·mL －1 ． Key words： Soybean rhizobia； Nodulation； Carrier
摘 要： 为筛选出适宜根瘤菌吸附且能促进大豆生长、提高产量的优质载体，并且在优质载体的条件下，筛选出大豆
根瘤菌液的最佳使用浓度，通过 3 种载体吸附不同浓度根瘤菌液拌种大豆盆栽播种后，对大豆的生物量、结瘤及产量
的对比发现： 不同载体介入、大豆接入根瘤菌后均对大豆的生物量及结瘤产生一定的促进作用。根瘤菌以草炭和蛭
图 1 以不同载体接入根瘤菌大豆的生物量变化趋势 Fig． 1 The tendency of biomass of soybean inoculated rhizobia with different carriers
2． 2 不同载体及根瘤菌处理大豆根瘤数变化 由图 2 可看出，不同载体和根瘤菌均可促进大
本文的研究目的是筛选出适宜根瘤菌吸附且 接种大豆 能 促 进 大 豆 生 长、提 高 产 量 的 优 质 载 体，
收稿日期： 2013-10-11 基金项目： 国家“十二五”科技支撑计划（ 2012BAD14B06） ； 现代农业产业技术体系（ CAＲS-004） ； 黑龙江省自然科学基金（ C201104） ； 哈尔
技术不成熟、质量不过关等问题限制了根瘤菌剂的 产业化和大面积推广应用。其中，菌种质量的高低 一直是影响其应用效果的一个突出问题； 载体也是 大豆根瘤 菌 肥 料 质 量 控 制 的 一 个 关 键 因 素［6］。 作 为根瘤菌的载体很多，如草炭、蛭石、珍珠岩、煤炭、 草炭、膨润 土 和 高 岭 土 等。 草 炭、蛭 石 由 于 其 营 养 与 pH 适中，表面积比较大和吸附性好，有利于根瘤 菌的存活及菌剂保存，是理想的载体［7-9］。另外，草 炭和蛭石等 资 源 丰 富，价 格 低 廉，适 合 于 在 根 瘤 菌 剂生产中应用推广，已成为当代根瘤菌类肥料的主 要类型。
出，不同载体根瘤菌处理结瘤能力表现为草炭强于 蛭石，液体的最低； 同一载体不同根瘤菌液浓度对 大豆结瘤 能 力 的 影 响 各 异，以 草 炭 和 蛭 石 为 载 体， 较小的根瘤菌液浓度（ 2 OD、1． 4 OD） 产瘤高于较高 的根瘤菌液浓度（ 5 OD、10 OD） ，而液体载体较高的 根瘤菌液浓度产瘤高于较低根瘤菌液浓度。
（ 1． Soybean Ｒesearch Institute，Heilongjiang Academy of Agricultural Sciences，Harbin 150086，China； 2． Information Center of Heilongjiang Academy of Agricultural Sciences，Harbin 150086，China； 3． Heilongjiang Academy of Agricultural Sciences，Harbin 150086，China）
第 33 卷 第 2 期 2014 年 4 月
大豆科学 SOYBEAN SCIENCE
Vol． 33 No． 2 Apr． 2014
大豆根瘤菌剂载体的选择及最佳施用浓度筛选
刘庆莉1 ，王金生1 ，刘丽君1 ，林蔚刚1 ，王红蕾2 ，张俐俐3 ，吴俊江1
（ 1． 黑龙江省农业科学院 大豆研究所，黑龙江 哈尔滨 150086； 2． 黑龙江省农业科学院 信息中心，黑龙江 哈尔滨 150086； 3． 黑龙江省农业科学 院，黑龙江 哈尔滨 150086）
豆结瘤，各生育时期均高于对照处理。以草炭为载
体的各处理根瘤数增长最快的生长阶段出现在大 豆花期至结荚期； 以液体为载体的各处理根瘤数增 长最快的生长阶段出现在苗期至花期； 而以蛭石为
2期
刘庆莉等： 大豆根瘤菌剂载体的选择及最佳施用浓度筛选
209
载体的各处理根瘤数各生育时期变化较为平稳，载 体的不 同 保 菌 能 力 可 能 是 产 生 这 种 现 象 的 原 因。 草炭的保菌能力最强，在大豆生长发育的后期仍保 有大量富有活力的根瘤菌以结瘤，液体的保菌能力 最差只能在大豆生长前期产生强烈的影响，而蛭石 的保菌能力则相对比较稳定居中。从图 2 还可以看
关键词： 大豆根瘤菌； 结瘤； 载体
中图分类号： S565． 1
文献标识码： A
文章编号： 1000-9841（ 2014） 02-0207-04
Chosen of Soybean Ｒhizobia Carrier and Screening of the Best Concentration
LIU Qing-li1 ，WANG Jin-sheng1 ，LIU Li-jun1 ，LIN Wei-gang1 ，WANG Hong-lei2 ，ZHANG Li-li3 ，WU Jun-jiang1
1． 3 测定项目与方法 分别于大 豆 期、花 期、结 荚 期、鼓 粒 期 取 样。
每次取样时，将 整 株 大 豆 用 清 水 冲 洗 干 净，将 植 株 分为地上、根和根瘤 3 部分，分别测定鲜重、干重和 根瘤数。并于成熟期对其产量构成因子进行测定 分析。 1． 4 数据分析
采用 Excel 2003 作图并应用 DPS 7． 5 进行方差 分析和显著性检验。
滨市科技创新人才研究专项资金（ 2013ＲFXYJ043） 。 第一作者简介： 刘庆莉（ 1971-） ，女，技师，主要从事大豆耕作与栽培研究。E-mail： liuqingli1971@ 126． com。 通讯作者： 吴俊江（ 1970-） ，男，博士，研究员，主要从事大豆耕作与栽培研究。E-mail： nkywujj@ 163． com。
208
大豆科学
2期
并且在使用优质载体的条件下，筛选出大豆根瘤菌 液的最佳使用浓度，为根瘤菌肥的研发和使用提供 参考和帮助。
1 材料与方法
1． 1 材料 蛭石除去杂质、过筛、灭菌； 草炭除去杂质，用
NaOH 调 pH 为中性，灭菌； 供试菌株 001-1 为加拿 大优势菌株。对照药剂为由黑龙江华龙生物科技 有限公司生产的“富思德”根瘤菌液剂。 1． 2 试验设计
将根瘤 菌 接 入 YMA 固 体 平 板 培 养 基 活 化 培 养，再 转 入 YMA 液 体 培 养 基，置 于 转 速 120 r·min － 1 、温度 28℃ 的摇床中培养，测定根瘤菌悬浮 液的 光 密 度 值 （ OD600 ，1 OD 大 约 含 有 108 菌 细 胞·mL － 1 ） 。试验共设置 5 个根瘤菌液浓度处理，根 瘤菌悬浮液的光密度值分别为 0（ 培养基对照，YMA 液体培养基） ，1． 4，2，5 和 10 OD600 ，将 5 个不同浓度 的根瘤菌 液 分 别 与 干 燥、粉 碎 过 筛 且 灭 菌 的 草 炭、 蛭石及 清 水 （ 液 体 ） 进 行 混 拌，即 菌 液 ∶ 载 体 = 1 /3∶ 4，拌入 0． 05% 钼酸铵。混拌后精选无病、饱满 的大豆种子用 95% 的乙醇表面灭菌后再与之混拌， 阴干后盆栽播种。以不含根瘤菌液的清水混拌的 大豆作为 对 照，即 清 水 对 照。 采 用 随 机 区 组 排 列， 每盆留苗 3 株，3 次重复。
施用根瘤菌菌剂能促进大豆结瘤，有效提高豆 科植物的产 量，减 少 生 产 中 的 化 肥 使 用 量，降 低 生 产成本，而且可以提高土壤肥力，同时，由于根瘤菌 剂耐污染能力强［1］，还可以减少因长期使用化肥对 环境的破 坏［2-3］，对 无 公 害 大 豆 生 产 以 及 降 低 农 民 投人，保护环境等具有十分重要的作用［4-5］。因 此 引起了人们的极大兴趣和广泛关注，已成为豆科植 物增产的主要研究方向。