应用斐林试剂与碘液时的几点注意问题
关于斐林试剂的几点思考
关于斐林试剂的几点思考江苏省兴化中学（225700）王健［摘要］以“生物组织中的还原糖检测”实验为例，围绕斐林试剂的主要成分、作用原理及其使用方法等展开讨论，旨在帮助学生更好地完成还原糖检测的实验。
［关键词］斐林试剂；还原糖；检测［中图分类号］G633.91［文献标识码］A［文章编号］1674-6058（2019）05-0096-01人教版高中生物必修1第一章的“生物组织中的还原糖检测”实验，主要是利用斐林试剂来检测生物组织中的还原糖，实验结果中产生砖红色沉淀证明有还原糖产生。
本实验要能取得成功，需充分了解斐林试剂的相关内容。
对此，笔者有以下几点思考。
一、斐林试剂是含有Cu2+的碱性溶液人教版高中生物必修1第18页中提到，斐林试剂是由质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液和质量浓度为0.05 g/mL的CuSO4溶液等量混合配制而成。
等量混合均匀是否意味着刚好完全反应？由反应式2NaOH+CuS04= Na2S04+Cu（OH）2↓计算可知，当完全反应时，CuS04与NaOH的质量比应该是2∶1，实际上CuS04与NaOH的质量比为1∶2，NaOH过量3倍，故推测斐林试剂是碱性溶液［1］。
又因为斐林试剂的本质是新配制的Cu（OH）2悬浊液，Cu（OH）2是弱电解质，在水溶液中存在着如下沉淀溶解平衡：Cu（OH）2（s）⇌Cu2+（aq）+2OH-（aq），故推测斐林试剂中含有Cu2+。
“斐林试剂是含有Cu2+的碱性溶液”这一说法在不少文献中出现，如人教版高中生物必修1《分子与细胞》的教师教学用书第31页提到：“班氏试剂是斐林试剂的改良（也是含有Cu2+的碱性溶液），能使具有自由醛基或酮基的糖类氧化。
”王镜岩《生物化学（第三版）》上册第16页也提到：“在碱性溶液中，Cu2+是一种弱氧化剂，能将醛糖的醛基氧化成羧基。
”二、斐林试剂中NaOH溶液的作用还原糖是指含有自由醛基（如葡萄糖）或酮基（如果糖）的单糖和某些二糖（如乳糖、麦芽糖）。
斐林试剂的使用方法
斐林试剂的使用方法斐林试剂是一种常用的生化试剂，在生物医学研究和临床诊断中具有重要的应用价值。
正确的使用方法能够确保试剂的准确性和稳定性，从而保证实验结果的可靠性。
下面将为大家详细介绍斐林试剂的使用方法。
首先，在使用斐林试剂之前，需要仔细阅读产品说明书，了解试剂的性质、用途、储存条件、稳定性等信息。
同时，检查试剂的包装是否完好，过期的试剂不得使用。
接着，根据实验需求准备好所需的试剂和实验材料，确保实验环境的清洁和整洁。
在进行实验操作之前，需要进行必要的实验准备工作，包括校准仪器、准备实验用具等。
在使用斐林试剂时，需要严格按照产品说明书中的使用方法进行操作，避免操作失误导致实验失败。
在取用试剂时，应避免直接用手接触试剂，以免污染试剂。
使用专用的试剂枪或移液器进行取用，并避免产生气泡。
在配制试剂溶液时，需要按照产品说明书中的配制比例和方法进行操作，严格控制溶液的浓度和 pH 值。
在配制过程中，注意溶解度和稳定性，避免产生沉淀或发生分解反应。
在使用斐林试剂进行实验时，需要严格控制实验条件，包括温度、湿度、光照等因素。
避免外界环境的影响对实验结果产生干扰，确保实验的准确性和可重复性。
在实验结束后，将剩余的试剂妥善保存，避免受到污染或变质。
按照产品说明书中的要求进行试剂的处理和废弃，确保实验过程的安全和环保。
总之，正确的使用方法对斐林试剂的实验结果具有重要的影响。
只有严格按照产品说明书中的要求进行操作，才能确保实验结果的准确性和可靠性。
希望大家在使用斐林试剂时能够严格遵守操作规程，做好实验准备工作，确保实验顺利进行，取得理想的实验结果。
斐林试剂甲乙两液使用方法探索
斐林试剂甲乙两液使用方法探索
斐林试剂甲乙两液是用于检测硫酸盐的试剂，其中甲液用于铵盐
的检测，乙液用于硫酸盐的检测。
以下是斐林试剂甲乙两液的使
用方法探索：
1. 甲液使用方法：
- 取一小量待测溶液，加入试管中。
- 加入甲液，滴加至溶液颜色变化停止。
- 观察溶液颜色变化，如果溶液变为深蓝色，表示存在铵盐。
2. 乙液使用方法：
- 取一小量待测溶液，加入试管中。
- 加入乙液，滴加至溶液颜色变化停止。
- 观察溶液颜色变化，如果溶液变为红褐色，表示存在硫酸盐。
需要注意的是，在使用斐林试剂甲乙两液时应遵循以下操作要点：
- 使用前应将试剂摇匀，以确保试剂均匀混合。
- 使用时应避免接触皮肤和眼睛，如果不慎接触到皮肤或眼睛，应
立即用水冲洗。
- 使用过程中要注意试管的清洁，确保溶液不受外部杂质的污染。
- 在观察结果时，要有足够的光线和背景对比，以便准确判断溶液
的颜色变化。
斐林试剂甲乙两液使用方法的探索需要根据实际情况进行试验和
观察，以找到最适合的使用条件和结果判读标准。
5.1.3 探究影响酶活性的条件高一上学期生物人教版必修一
第3课时 探究影响酶活性的条件
3、酶的作用条件较温和
细胞中几乎所有的化学反应都是由酶催 化的。酶催化特定化学反应的能力称为酶 活性。可用在一定条件下酶所催化某一化 学反应的速率表示。
若细胞生活的环境条件发生改 变，酶活性会怎样变化呢?
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
实验探究：影响酶活性的条件
资料一:实验证明用加酶洗衣粉时，温水的洗涤效果要比冷水好。
更强的氨苄青霉素。
1、人体胃蛋白酶的最适pH为2.0，某同学将胃蛋白酶溶液的
B pH从10.0调至2.0，此时胃蛋白酶的活性将(
)
A．不断上升 B．没有活性 C．先升后降 D．先降后升
提示：每种酶都有一个最适pH，此时活性最强，若所处的环 境过酸或过碱均会使酶分子结构遭到破坏，从而失活。胃蛋白 酶的最适pH为2.0，当其处于pH为10.0的溶液中时，已失去活 性。
3、加酶洗衣粉： 提高去污效果，减少污染
4、加酶牙膏： 可以分解残留在口腔中的细菌。
5、多酶片： 含有多种消化酶，可治疗消化不良。
整片吞服，切勿嚼碎。
6、胰蛋白酶： 可用于促进伤口愈合和溶解血凝块，还可用
于去除坏死组织，抑制污染微生物的繁殖。
7、脂肪酶： 处理废油脂，制造生物柴油。
8、青霉素酰化酶： 将易形成抗性的青霉素改造成杀菌力
以植物叶肉细胞为例，与光合作用有关的 酶在叶绿体中，与呼吸作用有关的酶在细胞质 基质和线粒体中，这样，光合作用和呼吸作用 就可以互不干扰了。
酶为生活添姿彩（酶在生活中的应用）
1、溶菌酶：
能够溶解细菌的细胞壁，具有抗菌消 炎的作用。在临床上和抗生素联用，能增 强抗生素的疗效。 2、果胶酶：
高中生物课程中常见染色剂染色原理及使用注意事项
高中生物课程中常见染色剂染色原理及使用注意事项朱秋霖，马天兵兰州二中，兰州 730000 摘要：目的：探究高中生物试验中常见染色剂的使用方法及常见问题与注意事项方法：通过一些简单的实验验证与参考文献得出结论。
结果：验证与总结出生物试验中常见染色剂的染色原理及所遇到的染色问题的原因。
关键词：高中生物学实验染色剂显色原理注意事项The common dye staining principle and precautions in the highschool biology curriculumZhu Qiulin，Ma TianbingLanzhou NO.2 middle secondary school class8 grade2，lanzhou 730000Abstract:Objective: To explore the use of high school biology test stains and FAQs Notemethod: through some simple experiments verify references concluded.Results:Validation andsummed up a common biological test stain dyeing principle and coloring problem encountered byreason.Keywords:high school biology experiment stain color rendering principle Precautions1.常见染色剂常见的高中生物染色显色反应，其实质是化学反应或者物理反应，按照其反应本质，可分为下列几类[5]：1.1 氧化还原反应类染色剂通过氧化还原反应生成某些具有特殊颜色的物质，利用其与生物组织中某些具有还原性的物质或代谢产物进行化学反应，宏观上产生颜色变化，通过颜色变化,鉴别某些生物组织中的目标物质。
应用斐林试剂与碘液时的几点注意问题
成砖红色的氧化亚铜沉淀。
用淀粉酶分别催化淀粉和蔗糖的水解反应， 再用斐林试剂鉴定溶液中有无还原性糖生成， 就可以看出淀粉酶是否只能催化特
定的化学反应。
试剂分析： 底物用淀粉和蔗糖做对照，不但要证明淀粉酶能催化淀粉水解，还要证明淀粉酶不能催化蔗糖水解。用碘液只能检验 淀粉的存在， 从而证明淀粉酶能否催化淀粉水解， 不能证明蔗糖是否被水解， 而用斐林试剂能够检验淀粉和蔗糖到底哪一个被水 解， 还是都被水解， 进而证明淀粉酶是否只能催化特定的化学反应。
子萌发时释放的 ＣＯ２ 量。 用具： 若干锥形瓶、塞子、小试管、有刻度的玻璃
管、红色酒精。 材料： 萌发的消毒过的（ 不影响种子活力） 小麦种
子、消毒过的死种子、水 过程： 略。
所谓定量实验， 是为了深入了解事物和现象的性
实验装置如图 ５ 所示。
质， 揭露各因素之间的数量关系， 确定某些因素的数
值而进行的实验。
验淀粉是否存在，有淀粉存在则水解反应没有进行， 说明此条件下酶失活； 也可以用斐林试剂来检验是否生成了还原性糖，有还原性 糖生成， 则进行了水解反应， 证明淀粉酶在此条件下具有活性。
结论： 鉴定试剂中碘液和斐林试剂都可以用。 （ 单林兰 河北省滦南县扒齿港中学 ０６３５０２）
４０
能用斐林试剂来检验是否生成了还原性糖（ 麦芽糖和葡萄糖） ，因为用斐林试剂检验还原性糖要加热而改变了前后温度的一致性。 结论： 鉴定试剂用碘液， 而不用斐林试剂。
３ 探索酸碱条件影响淀粉酶活性 实验原理： 淀粉遇碘后， 形成紫蓝色的复合物； 还原性糖能与斐林试剂发生氧化还原反应， 生成砖红色的氧化亚铜沉淀。 试剂分析： 实验证明酸性、中性、碱性条件下淀粉酶的活性的变化， 通过淀粉酶催化淀粉水解是否进行来证明。可以用碘液来检
斐林试剂的使用技巧
斐林试剂的使用技巧斐林试剂是一种常用的化学试剂，主要用于检测生物体中铁离子的含量。
下面介绍一些斐林试剂的使用技巧。
1. 准备试剂：斐林试剂是由1%的溴己烷溶液和0.1%的吖啶溶液组成的，因此需要事先准备好这两种溶液。
2. 取样：首先需要将待测样品（例如血液、植物组织等）进行提取，通常使用氯仿等溶剂进行提取。
提取过程中要注意避免将水分、金属离子等杂质带入样品中，以免影响最后的试剂反应。
3. 添加试剂：将提取得到的生物样品溶液滴加到试管中，然后向其中加入适量的斐林试剂。
一般情况下，斐林试剂的用量为样品溶液的10倍体积。
加入试剂后，要轻轻摇晃试管使试剂充分混合。
4. 观察反应：斐林试剂与铁离子形成红色或紫色络合物，反应后试管中溶液的颜色会发生变化。
反应时间一般为10-15分钟，但具体时间要根据所检测的样品类型和样品中铁离子的含量来确定。
5. 测定浓度：通过光谱法或比色法，可以测定试管中溶液的吸光度或颜色深浅，从而判断样品中铁离子的浓度。
一般情况下，吸光度越高或颜色越深，说明样品中铁离子的含量越多。
6.注意事项：（1）斐林试剂对眼睛和皮肤有刺激性，使用时要戴上手套和护目镜，避免直接接触皮肤和眼睛。
（2）试剂使用后要尽快密封保存，避免阳光直射和潮湿。
（3）斐林试剂对样品的溶剂要求较高，通常需要使用无机溶剂如氯仿等进行提取。
（4）在使用斐林试剂时要控制试剂用量和反应时间，避免试剂过量或反应时间过长导致结果不准确。
总之，使用斐林试剂对生物样品中的铁离子进行检测时，需要准备好试剂和样品，合理控制试剂的用量和反应时间，注意安全操作，并根据测定结果进行相应数据分析。
人教版新教材高中常见生物药品及试剂使用注意事项总结
人教版新教材高中常见生物药品及试剂使用注意事项总结1.斐林试剂（甲液：质量浓度为0.1g/ml 的NaOH溶液，乙液：质量浓度为0.05g/ml 的CuSO4）：将斐林试剂甲液和乙液等量混合，再将混合后的斐林试剂注入待测组织样液，50-65℃水浴加热约2min，如待测组织样液中存在还原糖，则由蓝色转为砖红色沉淀。
2.双缩脲试剂（A液：质量浓度为0.1g/ml 的NaOH，B液：质量浓度为0.01g/ml的 CuSO4）：向待测液中先注入双缩脲试剂A液1ml，摇匀，再向其中加入双缩脲试剂B液4滴，摇匀。
如待测组织样液中存在多肽或蛋白质，则由浅蓝色转为紫色。
3.质量浓度为0.01g/ml的苏丹Ⅲ染液：取在花生子叶薄片上滴2-3滴苏丹染液，用吸水纸吸去染液，再滴加1-2滴体积分数为50%的酒精溶液，洗去浮色。
检测脂肪，可将脂肪染成橘黄色。
4.碘液：鉴定淀粉，淀粉遇碘液变蓝。
5.健那绿（活性染色剂）：用于检测线粒体，使线粒体染色呈蓝绿色。
6.酒精：①体积分数为50%的酒精溶液：在苏丹Ⅲ染液检测脂肪实验中用于洗去浮色。
②70%的酒精溶液：用于菊花组织培养实验中对操作者双手、超净工作台台面及流水冲洗后的外植体消毒。
③体积分数为95%的酒精溶液：和质量浓度为15%的盐酸等体积混合，作为解离液，可用于解离根尖，使细胞分散开来；在低温诱导植物细胞染色体数目变化实验中，用于洗去卡诺氏液。
④预冷的95%的酒精溶液：DNA不溶于酒精，尤其是不溶于体积分数为95%的预冷酒精，而细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精，据此可以用于DNA的粗提取。
⑤100%的酒精溶液（无水乙醇）：用于色素的提取。
7.盐酸：①盐酸能改变细胞膜的通透性，加速染色剂的跨膜运输。
②盐酸使染色体中的DNA与蛋白质分离，便于DNA与染色剂的结合。
③物质的量浓度为0.01mol/L的盐酸：用于影响酶活性的条件实验；用于模拟生物体维持pH 稳定实验。
④质量浓度为15%的盐酸：和体积分数为95%的酒精溶液等体积混合作为解离液，可用于解离根尖，使细胞分离开来。
斐林试剂和碘液的注意
斐林试剂和碘液的注意
1 检测酶的专一性
淀粉和蔗糖，淀粉酶用碘液检测不能检测出酶的专一性，因为检测的是底物。
淀粉和蔗糖，淀粉酶用斐林试剂可以检测，检测的是反应物。
2 淀粉是否完全水解
只能使用碘液，不能使用斐林试剂。
3 “探究温度对酶活性的影响”可以使用斐林试剂代替碘液么？
《探究温度对酶活性的影响》实验，只能用碘液，不能用斐林试剂因为斐林试剂使用时要加热，这会对温度为冰点的实验组带来影响，在加热时，温度上升，酶活性恢复，导致淀粉被分解，结果和温度为60℃的实验组一对酶活性的影响样，影响了实验结论的正确性。
使用斐林试剂注意：探究酶的专一性，先加斐林试剂，后加淀粉酶，然后水浴加热，造成的影响是酶被破坏了，可能是斐林试剂和水浴两种情况破坏的。
4 探究PH对酶活性的影响”实验中可以使用碘与淀粉的染色反应么？
（在一定的PH调件下碘与淀粉的染色反应会受到干扰。
因为碘会与氢氧化钠反应，不能与淀粉生成蓝色物质，这样强碱组与中性组实验结果是一样的。
鉴定淀粉酶活性大小时，使用碘液，不能使用斐林试剂，无论大小，都会出现还原糖而产生反应。
）。
斐林试剂的使用方法
斐林试剂的使用方法斐林试剂（Folin-Ciocalteu试剂）是一种用于测定和分析多酚类化合物的试剂。
下面将详细介绍斐林试剂的使用方法。
一、试剂的制备和保存1.试剂的制备- 延胡索酮标准品（约10 mg/mL）：用少量甲醇溶解，制备成浓度为约10 mg/mL的储备溶液。
-还原性试剂为磷钼酸铵（十二水合物）：称取4.0g磷钼酸铵和0.8g磷酸，在100mL滚动的温水浴中溶解，并加热使之除去气泡。
冷却至室温后，将试剂倒入50mL量瓶中。
-硫酸磷酸标准溶液：将0.50mL磷酸倒入50mL容量瓶中，然后加硫酸至刻度。
用于稀释延胡索酮标准品的储备溶液，并在一小时内使其稀释。
-稀酸：制备1%（体积/体积）的稀硫酸溶液。
2.保存二、实验前的准备1.样品的制备样品可以是植物中的提取物、食品中的多酚成分、茶叶中的儿茶素、咖啡中的咖啡因等。
根据样品的性质，可采用适当的提取方法。
一般来说，将0.1g样品加入10mL甲醇中，用超声波溶解器处理片刻，离心后取上清液即可。
2.实验器材的准备-3mL离心管-恒温水浴（42-43°C）-量瓶-离心机三、实验步骤1.准备试管取5个3mL离心管，称取5mL适量的富里酚试液（0.2M）。
在第1个离心管中加入0.5mL的稀酸，作为零点试管。
在其他4个离心管中分别加入1mL、1.5mL、2mL和3mL的稀酸。
2.反应过程-首先，在上述试管中分别加入0.1mL样品提取液。
- 在室温下，密闭离心管，用4500 rpm的速度进行离心，离心5分钟。
-确保离心完成后，将离心管置于恒温水浴中，并调整水浴的温度至42-43°C。
放置15分钟。
3.增色-将稀硫酸稀释液（2.0mL）均匀地加入每个离心管中，并甩混。
-加入0.2mL还原性试剂磷钼酸铵溶液，并迅速混合或旋转离心管10秒以确保混合均匀。
4.保温和反应-将离心管再次放入恒温水浴内，并在水浴中反应30分钟。
5.分析和测量-分别用每个样品的上清液和零点试管中的上清液，通过分光光度计测量吸光度。
2022届高考生物二轮复习专题综合练(二)：细胞代谢
2022届高考生物二轮复习专题综合练(二)：细胞代谢一、单选题1.酶是活细胞产生的具有催化作用的有机物，细胞代谢受酶的调节和控制。
下列有关细胞中酶的叙述，错误的是()A.同一个体的不同细胞中参与细胞呼吸的酶的种类可能不同B.同一个体的细胞在不同的分化阶段合成的酶的种类有差异C.同一基因在不同生物体内指导合成的酶的空间结构可能不同D.同一条mRNA上不同的核糖体翻译出的酶的氨基酸序列不相同2.在适宜的条件下，某实验小组在一定量的淀粉溶液中加入少量淀粉酶，酶促反应速率随反应时间的变化如图所示。
下列相关叙述错误的是()A.A B段对应的时间内，限制酶促反应速率的主要因素是酶的数量B.BC段对应的时间内，酶促反应速率下降的原因是底物浓度逐渐降低C.若在D点对应的时间加入适量的淀粉酶，则曲线的走势不会发生明显改变D.若增加淀粉酶的用量并进行重复实验，则B点会向右上方移动3.ATP为主动运输提供能量，下列关于ATP的说法叙述错误的是()A.ATP与ADP相互转化的能量供应机制体现了生物界的统一性B.ATP水解释放的磷酸基团能使载体蛋白发生磷酸化，导致其空间结构发生改变C.ATP的特殊化学键由于两个磷酸基团都带负电荷等原因而非常稳定D.ATP末端的磷酸基团具有较高的转移势能4.反应式ADP+Pi+能量—ATP是在所有生活细胞中均发生的反应，下列与反应式中“能量”相关的叙述正确的是()A.向右反应需要的能量可以来自细胞内蛋白质水解为氨基酸的过程B.向右反应需的的能量可以来自葡萄糖的氧化分解C.向左反应产生的能量可以用于植物细胞对水的吸收D.向左反应产生的能量可以用于人体肺泡内的气体交换过程5.细胞呼吸与生产、生活密切相关，细胞呼吸原理的应用也比较广泛。
某科研小组将小的完整马铃薯块茎放入保温桶中，测定了初始O2、CO2的浓度以及温度，然后密闭放置，一段时间后观测保温桶中02的减少量与CO2的增加量相等，并且保温桶壁上出现了水珠。
用“碘液”还是“斐林试剂”
５
解析 ： 实验设 计 只要验 证 ｐ 本 Ｈ对 淀粉 酶活性 有
影响即可。设计强酸、 强碱条 件的实 验组 ， 中性条件的
对 照组 ， 本实验 中有过酸 、 碱对 酶活性 影响 的设 计 ， 过 但缺少为 ６ ８的对 照组 。具体实验步 骤需严 格控制酶 ． 作为实验研究 变量 的实 验设 定 ｐ Ｈ条件 ， 液 中先 加 酶 入 酸（ ） 混合 均匀后 ， 与 淀粉 溶 液混 合。整个 实 碱 ， 再 验操作步骤是不正确 的 ， ２ — 应 — 一ｌ ＋ －５或 １ — —
１２ 斐林试 剂鉴定可 溶性还原糖 ． 糖 分子的半缩 醛 羟基 比其他羟基 活泼 ， 的还原性 一般就是指 半缩 醛 糖 羟基 。葡萄糖 、 果糖 、 麦芽糖 的分子 内都含有游离 的半 缩醛羟基 ， 是还原 性糖 。蔗糖 分子 内没有游离 的半缩 醛羟基 ， 非 还 原性糖 。斐林 试剂 由 ０ １／ ＬＮ Ｏ 是 ．ｇｍ ａＨ
答案 ： 。 Ｄ ３ 在“ 温度对淀粉酶活性影响 ” 酶的专一性” 及“ 实验
中。 选择斐林试剂
例 １ 为验证 ｐ Ｈ对 唾液淀粉 酶活性的影 响 ， 某学
生设计 了下 表 中 的实验 方法 步骤 。提 出的下 列评 价 中， 不合理的是 ：表 １ （ ） Ａ 缺少 ｐ ． Ｈ为 ６ ８的对照组 ．
・
４ ６・
生 物学 教学 ２１年（ ５ 第８ ０ ０ 第３ 卷） 期
用 “ 液 ＂ 是 “ 林试 剂 ＂ 碘 还 斐
刘 向华 （ 南 新 县 一 级 学 ４１０ 河 省 安 第 高 中 ７０） ８
人教版普通高中《 分子与细胞》 的探究性实验 “ 影
响酶活性的条件” ， 中 材料用具可根据实验方案进行增
“影响淀粉酶活性条件”疑难解答
“探索影响淀粉酶活性的条件”的疑难解答高三生物复习中,老师和学生经常遇到这类实验——酶需要适宜条件,也就是酶的活性与温度、ph值的关系。
该类实验老师和学生的疑难问题较多,教师解答也有一定的难度。
笔者结合这些疑问,查阅了大量资料,整理了该实验的疑难解答。
希望有助于学生的学习,并与各位生物老师交流。
“探索影响淀粉酶活性的条件”这一实验的主要目的是:探索淀粉酶在不同温度和ph下催化淀粉水解的情况。
根据该实验中学生的疑问,现解答如下:一、温度对酶活性的影响的实验步骤为1.取3支洁净的试管并编号,分别注入2ml可溶性淀粉溶液。
2.将3支试管分别放入60℃左右的热水、沸水和冰块中,维持各自的温度5min。
3.在3支试管中各注入1ml新鲜的淀粉酶溶液,摇匀后,维持各自的温度5min。
4.在3支试管中各滴入1滴碘液,然后摇匀。
5.观察并记录这3支试管中溶液颜色的变化情况。
问题一:上述步骤的②③两步次序能否颠倒?解析:不能。
3支试管各注入2ml可溶性淀粉后要先放入不同温度环境保温5min,使淀粉液达到所处不同环境的温度,然后再加新鲜淀粉酶,摇匀并维持5min,否则若加入淀粉酶后再放入不同温度环境中,由于酶的高效性,在升温或降温的过程中已把淀粉分解了,3支试管内都有麦芽糖生成,结果3支试管都不变蓝,从而看不出来温度对酶的影响。
问题二:该实验能否用斐林试剂(或班氏试剂)来检测还原性糖的产生?解析:不能。
因为若用斐林试剂则步骤4为:在3支试管中各加入2ml斐林试剂(或班氏试剂),摇匀后将3支试管的下半部放进盛有热水的大烧杯中,用酒精灯加热,煮沸并保持1min。
在此加热过程中,放冰块的试管内在升温过程中酶的活性会升高,从而会分解淀粉产生麦芽糖;结果60℃热水和加冰块的试管内都有砖红色沉淀,造成了错觉,使实验结果与温度对酶活性影响的事实不相符。
另外,试验中2、4都有温度在起作用,其结果到底是哪一步骤造成?无法确定。
问题三:淀粉酶的最适温度是多少?解析:淀粉酶有不同类型。
应用斐林试剂与碘液时的几点注意问题
初级会计证报名步骤
1. 资格条件，首先，报名者需要满足初级会计证考试的资格条件，通常是年满18周岁，具有高中以上学历或者具有同等学力的条件。
有些地区还要求报名者具有相关会计从业资格或者相关工作经验。
2. 报名时间，考生需要在规定的时间内进行报名，通常初级会
计证考试每年有两次考试机会，报名时间一般会在考试前3-4个月
左右开始，具体时间以当年考试院校发布的公告为准。
3. 报名材料，报名者需要准备好相关的报名材料，包括身份证、学历证明、报名费等。
有些地区可能还需要提供近期的一寸免冠照
片等。
4. 报名渠道，报名者可以通过线上或者线下的方式进行初级会
计证的报名。
线上报名通常是通过当地相关考试院校的官方网站进行，需要填写个人信息并上传相关资料；线下报名则需要前往指定
的报名点进行报名。
5. 缴费，报名者需要按照规定的标准缴纳报名费用，一般可以
通过银行转账、支付宝或者现金等方式进行缴费。
6. 确认报名，报名完成后，考生需要及时确认报名信息是否准确无误，并注意查收有关的准考证等信息。
总的来说，初级会计证报名步骤主要包括资格条件的核实、报名时间的选择、报名材料的准备、报名渠道的选择、缴费以及确认报名信息等环节。
希望对你有所帮助。
斐林试剂的使用方法
斐林试剂的使用方法
首先，使用斐林试剂前需要准备好所需的实验材料和试剂。
在
进行实验前，需要将斐林试剂从-20℃的冰箱中取出，避免反复冻融，避免日光直射。
同时，需要准备好离心管、移液器、显微镜、离心
机等实验设备，以确保实验的顺利进行。
接下来，我们来介绍斐林试剂的使用步骤。
首先，将斐林试剂
放置于室温下解冻，避免在高温条件下解冻，以免影响试剂的活性。
解冻后，轻轻振荡均匀，避免产生气泡，以确保试剂的质量。
在使
用前，需要将试剂离心，去除其中的沉淀物，以确保实验结果的准
确性。
在使用斐林试剂进行实验时，需要根据实验的具体要求进行稀释。
一般来说，斐林试剂的稀释倍数为1:1000-1:5000，具体稀释
倍数需根据实验要求来确定。
在稀释时，需要将试剂均匀混合，并
避免产生气泡，以确保稀释后的试剂质量稳定。
在实验中，需要注意斐林试剂的保存和处理方法。
使用完斐林
试剂后，需要将剩余的试剂放置于-20℃的冰箱中保存，避免日光直
射和高温。
同时，需要避免反复冻融，以免影响试剂的活性。
在处
理斐林试剂时，需要注意避免接触皮肤和吸入试剂，以免对健康造
成影响。
最后，使用完斐林试剂后需要做好实验设备的清洁和消毒工作。
将使用过的离心管、移液器等实验设备进行彻底清洁和消毒，以确
保下次实验的准确性和可靠性。
总之，斐林试剂是一种常用的生物化学试剂，在使用时需要注
意解冻、稀释、保存和处理方法，以确保实验结果的准确性和可靠性。
希望以上介绍能对大家在实验中的使用有所帮助。
斐林试剂测定还原糖注意事项
斐林试剂测定还原糖注意事项
1. 嘿，你可一定要注意斐林试剂得现配现用啊！这就好比做菜，食材新鲜才能做出美味佳肴呀，要是放久了失效了，那还怎么测还原糖呢？就像你拿着过期的食材做饭，能好吃吗？
2. 千万别把斐林试剂和其他试剂弄混啦！这就跟你出门不能穿错鞋一样重要呀！不然搞错了，还怎么准确测定还原糖呢？你说是不是？
3. 斐林试剂测定的时候温度可不能乱来呀！冷了热了都不行，就好像你洗澡水，太凉或太热你都受不了吧，得恰到好处才行！
4. 实验过程中注意力要集中呀！不能分心，要不斐林试剂都不开心啦，就像你跟别人聊天，对方老走神，你也会不高兴呀！
5. 你用来检测的样本可得准备好呀！不能马马虎虎的，这就跟打仗要准备好武器一样，没准备好怎么能胜利呢？你想想看！
6. 斐林试剂测定还原糖，操作步骤千万不能错哟！一步错步步错，就跟盖房子一样，根基歪了房子还能稳吗？你仔细想想这道理！
7. 操作环境也很重要啊！别在乱七八糟的地方做，就好比你做作业得在安静的地方，环境不好怎么能做好实验呢？难道不是吗？
8. 每次做完斐林试剂测定还原糖，都要好好总结经验呀！这样下次才能做得更好，就像你学习，只有不断总结才能进步呀！总之，斐林试剂测定还原糖可不简单，这些注意事项你可得牢记在心呀！。
斐林试剂使用方法
斐林试剂使用方法斐林试剂是一种常用的生化试剂，广泛应用于生物医学研究和临床诊断中。
它具有高灵敏度、高特异性和易操作等优点，因此备受科研工作者和临床医生的青睐。
在使用斐林试剂时，我们需要严格按照规定的方法操作，以确保实验结果的准确性和可靠性。
首先，准备工作。
在使用斐林试剂之前，首先要准备好所需的实验材料和设备，包括试剂、标本、离心管、移液器、显微镜等。
同时，要检查试剂的有效期和保存条件，确保试剂的质量符合要求。
在进行实验操作之前，还要做好个人防护措施，佩戴实验手套和口罩，避免对人体造成伤害。
其次，操作步骤。
在使用斐林试剂时，需要严格按照操作步骤进行。
首先是样本处理，将待测样本加入到含有斐林试剂的离心管中，并进行混匀。
然后是离心沉淀，将混合液进行离心，使沉淀物沉积到离心管底部。
接着是上清液处理，将上清液吸取出来，避免带入沉淀物。
最后是结果判读，根据斐林试剂的使用说明书，对实验结果进行判读和记录。
最后，注意事项。
在使用斐林试剂时，需要注意一些实验细节和注意事项。
首先是试剂的保存和使用，要避免受潮和高温，保持试剂的稳定性。
其次是操作规范，严格按照操作步骤进行，避免操作失误导致实验结果不准确。
另外，要注意个人防护，避免接触试剂对健康造成危害。
最后是实验废液的处理，要按照规定的方法处理废液，避免对环境造成污染。
总之，斐林试剂是一种重要的生化试剂，在生物医学研究和临床诊断中发挥着重要作用。
在使用斐林试剂时，我们需要严格按照规定的方法操作，做好准备工作，严格操作步骤，注意事项，确保实验结果的准确性和可靠性。
希望本文对斐林试剂的使用方法有所帮助，谢谢！PS，以上内容仅供参考，具体操作时请严格按照试剂说明书和实验室操作规程进行。
备战2023年高考等级考生物考试易错题(全国通用)精练05 酶相关实验分析(解析版)
易错点05 酶相关实验分析关于“酶相关实验分析”的试题常常以选择题或非选择题形式考查酶的本质、特性和影响因素，这类试题具有较强的综合性，而且以曲线图、表格、相关试验设置试题情境。
错误原因有对酶的相关知识掌握不全、获取信息不足、实验分析不到位等等。
在复习备考中，需要梳理相关知识，加强动手实验和实验专题练习，切实提高获取信息能力和实验分析能力，同时关注易错点，弄清易错易混知识，这样才能通过复习提高得分率。
常见易错陷阱有：易错陷阱1：酶的化学本质是蛋白质或RNA。
忽略RNA造成错误判断。
易错陷阱2：温度对酶活性的影响。
误以为低温和高温均会破坏酶的空间结构，误以为不同温度下酶促反应速率不可能相同。
易错陷阱3：酶起催化作用的原理。
误以为温度、PH值、酶浓度、底物浓度、酶活性抑制剂均影响酶的活性从而影响酶促反应速率；误以为提高反应速率，就能提高生成物的量。
易错陷阱4：酶制剂的保存条件。
误以为酶适于在最适温度和最适PH值条件下保存。
易错陷阱5：酶相关实验材料、试剂、操作步骤。
例如：选择用淀粉和淀粉酶探究酶的最适温度，检测底物被分解的试剂能否选用斐林试剂或能否选择过氧化氢(H2O2)和过氧化氢酶作实验材料探究酶的最适温度。
易错陷阱6：曲线图中酶促反应速率限制因素的判断。
例如：下图曲线中，限制ABC点酶促反应速率增加的因素是否相同。
易错陷阱7：确定酶作用的最适温度（PH）。
误以为曲线最大值就是最适宜温度（PH）——曲线未出现拐点；一组数据中产物量最大值就是最适宜温度（PH）——梯度还可以变化。
例题1、（2022 全国乙卷·T4）某种酶P 由RNA 和蛋白质组成，可催化底物转化为相应的产物。
为探究该酶不同组分催化反应所需的条件。
某同学进行了下列 5 组实验（表中“+”表示有，“－”表示无）。
根据实验结果可以得出的结论是A．酶P 必须在高浓度Mg2+条件下才具有催化活性B．蛋白质组分的催化活性随Mg2+浓度升高而升高C．在高浓度Mg2+条件下RNA 组分具有催化活性D．在高浓度Mg2+条件下蛋白质组分具有催化活性【解析】A、由①组可知酶在低浓度Mg2+条件下也有产物的生成，说明不一定要高浓度Mg2+才具有催化活性，A 项错误；B、由第③组和第⑤组实验对比可知，只有蛋白质组分的酶存在时，在低浓度Mg2+和高浓度Mg2+的条件下，均无产物的生成，说明在两种条件下都没有催化活性，B 项错误；C、由第④组和第⑤组实验对比可知，在高浓度Mg2+条件下，第④组有产物的生成，第⑤组没有产物的生成，说明 RNA 组分具有催化活性，C项正确；D、由第④组和第⑤组实验对比可知，在高浓度Mg2+条件下，第④组有产物的生成，第⑤组没有产物的生成，说明在高浓度Mg2+条件下蛋白质组分没有催化活性，D项错误。
斐林试剂比色法实验注意事项
斐林试剂比色法实验注意事项
1. 哎呀呀，做斐林试剂比色法实验的时候可一定要注意试剂的新鲜度呀！就像你总不会拿过期的食物招待客人吧？要是试剂不新鲜，那得出的结果能靠谱吗？
2. 嘿，在进行实验操作时，可千万别毛手毛脚的呀！这又不是小孩子过家家，你想想，要是不小心弄洒了试剂，那不就白费功夫啦！
3. 注意啦注意啦，斐林试剂比色法实验对反应条件要求很严格的呀！这就好比是娇嫩的花朵需要适宜的环境才能绽放，温度不合适、时间不准确，那可不行哟！
4. 哇塞，实验过程中一定要仔细观察颜色变化呀！这可马虎不得，就好比你在看一场精彩的魔术表演，稍不留意就错过关键瞬间啦！
5. 拜托拜托，做完实验一定要及时清洗仪器呀！你总不能穿着脏衣服去参加派对吧？仪器不清洗干净，下次还怎么用呀！
6. 记住哦，实验数据一定要准确记录呀！这可不是能随便糊弄的，就像考试的时候要认真答题一样，每一个数据都很重要呢！
我的观点结论就是：做斐林试剂比色法实验要认真仔细，注意这些事项，才能得出可靠准确的结果呀！。
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ＮａＯＨ 溶液
ＮａＯＨ 溶液
萌发的种子
等量的死种子
实验组
对照组
图 ４ 实验装置示意图
请你在上述实验的基础上设计一个实验测量种
（ ３） 在相同的条件下， 对 ３ 组呼吸作用实验释放 出的 ＣＯ２ 进行分析。
预测结果： 第二、三组中的 ＣＯ２ 中的 Ｏ 是 １８Ｏ。 结论： 有氧呼吸产物 ＣＯ２ 中的 Ｏ 不是来自 Ｏ２， 而 是来自 Ｈ２Ｏ 和 Ｃ６Ｈ１２Ｏ６。 2 定量实验
请你设计一个实验测量种子萌发时吸收的 Ｏ２ 量。 用具： 若干锥形瓶、塞子、小试管、有刻度的玻璃 管、红色酒精。
ＮａＯＨ 溶液种子活力） 小麦种 子、消毒过的死种子。
过程： 略。
萌发的种子
萌发的种子
实验组
对照组
图 ５ 实验装置示意图
实验装置如图 ４ 所示。
通过一系列的实验设计， 学生不但加深了对课本
请你设计一个实验验证有氧呼吸产物 ＣＯ２ 中的 Ｏ 不是来自 Ｏ２， 而是来自 Ｈ２Ｏ 和 Ｃ６Ｈ１２Ｏ６。
步 骤 ： （ １） 用 氧 的 同 位 素 １８Ｏ 分 别 标 记 Ｈ２Ｏ、 Ｃ６Ｈ１２Ｏ６ 和 Ｏ２， 使它们分别成为 Ｈ２１８Ｏ、Ｃ６Ｈ１２１８Ｏ６、１８Ｏ２。
（ ２） 然后进行 ４ 组有氧呼吸实验： 第一组向萌发 的 种 子 提 供 １８Ｏ２； 第 二 组 向 同 样 的 萌 发 的 种 子 提 供 Ｈ２１８Ｏ； 第三组向同样的萌发的种子提供 Ｃ６Ｈ１２１８Ｏ６； 第 四组作为对照。
成砖红色的氧化亚铜沉淀。
用淀粉酶分别催化淀粉和蔗糖的水解反应， 再用斐林试剂鉴定溶液中有无还原性糖生成， 就可以看出淀粉酶是否只能催化特
定的化学反应。
试剂分析： 底物用淀粉和蔗糖做对照，不但要证明淀粉酶能催化淀粉水解，还要证明淀粉酶不能催化蔗糖水解。用碘液只能检验 淀粉的存在， 从而证明淀粉酶能否催化淀粉水解， 不能证明蔗糖是否被水解， 而用斐林试剂能够检验淀粉和蔗糖到底哪一个被水 解， 还是都被水解， 进而证明淀粉酶是否只能催化特定的化学反应。
实验的理解， 同时也提高他们的实验设计能力。
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教学一得
应用斐林试剂与碘液时的几点注意问题
１ 探索淀粉酶对淀粉和蔗糖水解的作用 实验原理： 淀粉和蔗糖为非还原性糖， 它们在酶的作用下， 都能水解成还原性糖， 还原性糖能与斐林试剂发生氧化还原反应， 生
验淀粉是否存在，有淀粉存在则水解反应没有进行， 说明此条件下酶失活； 也可以用斐林试剂来检验是否生成了还原性糖，有还原性 糖生成， 则进行了水解反应， 证明淀粉酶在此条件下具有活性。
结论： 鉴定试剂中碘液和斐林试剂都可以用。 （ 单林兰 河北省滦南县扒齿港中学 ０６３５０２）
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子萌发时释放的 ＣＯ２ 量。 用具： 若干锥形瓶、塞子、小试管、有刻度的玻璃
管、红色酒精。 材料： 萌发的消毒过的（ 不影响种子活力） 小麦种
子、消毒过的死种子、水 过程： 略。
所谓定量实验， 是为了深入了解事物和现象的性
实验装置如图 ５ 所示。
质， 揭露各因素之间的数量关系， 确定某些因素的数
值而进行的实验。
结论： 鉴定试剂用斐林试剂， 而不用碘液。 ２ 探索温度条件影响淀粉酶活性
实验原理： 淀粉遇碘后， 形成紫蓝色的复合物。淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖， 麦芽糖和葡萄糖遇碘后不形成
紫蓝色的复合物。 试剂分析： 由于实验探索在不同温度条件下淀粉酶催化淀粉的情况，实验前后应保持温度不变，要用碘液来检验淀粉的有无，不
能用斐林试剂来检验是否生成了还原性糖（ 麦芽糖和葡萄糖） ，因为用斐林试剂检验还原性糖要加热而改变了前后温度的一致性。 结论： 鉴定试剂用碘液， 而不用斐林试剂。
３ 探索酸碱条件影响淀粉酶活性 实验原理： 淀粉遇碘后， 形成紫蓝色的复合物； 还原性糖能与斐林试剂发生氧化还原反应， 生成砖红色的氧化亚铜沉淀。 试剂分析： 实验证明酸性、中性、碱性条件下淀粉酶的活性的变化， 通过淀粉酶催化淀粉水解是否进行来证明。可以用碘液来检