糖类的提取分离与薄层层析分析

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薄层色谱糖类 -回复

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薄层色谱（Thin-layer chromatography, TLC）是一种常用于分
离和检测化合物的色谱技术。

薄层色谱可以应用于各种不同类型的化合物，包括糖类物质。

在薄层色谱分析中，首先将待测试的样品溶解在适当的溶剂中，并通过玻璃棒或微量注射器在薄层色谱板上均匀地涂布一层薄层吸附剂，常用的吸附剂是硅胶或氧化铝。

然后将薄层色谱板置于槽中，其中槽中的混合溶液或气相通过上升或下降的方式进行色谱分离。

当混合物中的化合物在薄层吸附剂上被分离后，可以使用物理、化学或者生物方法进行检测。

对于糖类的分析，薄层色谱可以用于确定糖类的种类、结构和含量。

糖类在薄层色谱中的分离依赖于它们在薄层吸附剂上的亲和性差异，通过改变溶剂的组成、浓度和涂布的方式等条件，可以优化糖类的分离效果。

常用的糖类检测方法包括利用显色剂的染色法、利用特定反应的显色反应法、利用尺寸分离的色谱法等。

总之，薄层色谱是一种有效的用于分离和检测糖类的色谱技术，可以被广泛应用于糖类的分析。

中草药多糖的分离提取和理化性质研究

题目：中草药多糖的分离提取和理化性质研究姓名：***学院：生命科学学院学号：20110*****年级：2011级中草药的分离提取和理化性质研究生命科学学院2011级*** 201101****摘要：本实验采用热水浸提和乙醇醇沉的方法提取刺五加多糖，得到的粗多糖回收率为1.21﹪，再对得到的粗多糖进行定性、定量分析。

用苯酚—硫酸法测定已提取出的粗多糖中单寡糖与多糖的含量为14.7%；经过薄层层析分析单糖的组成，其中组成多糖的单糖多属于葡萄糖、阿拉伯糖和甘露糖；用Sepharsose CL—6B柱层析法测定多糖的相对分子量约为3.47万道尔顿。

高效液相色谱分析单糖含的结果是刺五加多糖中的单糖种类有半乳糖、葡萄糖、阿拉伯糖、甘露糖等，其中含量较多的葡萄糖和甘露糖。

关键词：刺五加多糖分离提取理化性质多糖是由单糖连接而成的多聚物，人们对多糖的研究已经有很长时间的历史，对多糖的初始研究可追溯到1936年Shear对多糖抗肿瘤活性的发现，至20世纪50年代，陆续发现一些真菌多糖和高等植物多糖具有明显的抑瘤活性。

最近又发现许多中药多糖还具有降血糖作用。

70年代以来，科学家们发现多糖及糖复合物在生物体内不仅是作为能量资源和构成材料，重要的是它存在于一切细胞膜结构中，参与生命现象中细胞的各种活动。

多糖类物质是所有生命有机体的重要组成部分，广泛存在于动物、植物和微生物细胞壁中，是生物体内除核酸和蛋白质以外的又一类重要的生物分子。

科学研究已经确认糖类物质具有许多生物活性，包括抗肿瘤、免疫、降血糖和抗病毒等，而且对机体几乎无毒副作用。

中药多糖因具有增强机体免疫功能及抗肿瘤降血糖等药理作用，而且几乎没有毒性与副作用，因此引起国内外药理学家、生物学家和化学家们的关注。

多糖的提取应根据多糖的来源和提取部位的不同确定所用提取方法。

多糖的提取方法主要有水提法、酸提法、碱提法、超声提取法和微波提取法等。

本次试验的材料为刺五加，采用水提法提取刺五加多糖，利用苯酚一硫酸比色法间对多糖含量进行测定，并依次利用薄层层析法、高效液相色谱法以及分子筛层析对刺五加多糖的理化性质进行分析。

实验二十五细胞中糖类化合物的提取及成分鉴定

实验二十五细胞中糖类化合物的提取及成分鉴定糖类是一类多羟基的醛或酮及其缩合物或衍生物的总称，可分为单糖、寡糖、多糖、复合糖及糖的衍生物如糖胺、糖酸等。

糖类是生物界分布极广，含量十分丰富的一类有机化合物，几乎所有的动物、植物、微生物体内都含有糖类，其功能也是多样的。

过去认为糖类在生物体内的作用主要是作为能量来源及结构物质，但近20年以来发现糖的复合物在细胞识别、细胞间物质的运输和免疫调节等方面有重要的作用。

糖复合物的信息量非常大，是生物的另一类重要生物大分子化合物。

因此糖的分离、纯化、结构测定、结构与功能的研究也受到科学家广泛的关注。

糖的提取分离方法很多，主要是依据不同糖分子的物理化学性质、溶解度的差异进行分离提取。

近年也发展了许多新的分离、纯化方法，如薄层层析法、各种柱层析法、气相色谱及高效液相色谱法等。

糖的定量分析方法也很多，有化学计量法如次亚碘酸法和非化学计量法如铜试剂法、硝基试剂法等方法可供选择。

本实验主要介绍单糖、蔗糖及淀粉的分离提取、鉴定和测定的一般原理和方法。

实验原理1．单糖及多糖的提取单糖：凡不能水解为更小分子的糖即为单糖。

单糖种类很多，其中以葡萄糖分布最为广泛，存在于各种水果、谷类、蔬菜和动物血液中。

由于单糖分子中有多个羟基，增加了它的水溶性，尤其在热水中溶解度很大；在乙醇中也有很好溶解性，但不溶于乙醚、丙酮等有机溶剂中。

而蔗糖等双糖分子也易溶于水和乙醇中。

因此单糖和双糖一般可用热水或乙醇将之提取出来。

多糖是由多个单糖分子失水缩合而成的大分子化合物。

在自然界中分子结构复杂而多种多样，有不溶性的结构多糖如植物纤维素、半纤维素，动物的几丁质等；另有一些为贮存物质如淀粉、糖原等；还有一些多糖具有更复杂的生理功能，在动植物的生理活动中起重要作用。

多糖中的淀粉不溶于冷水及乙醇，但可溶于热水中形成胶体溶液。

因此可以用乙醇提取单糖及低聚糖，然后提取淀粉等多糖。

样品中的蛋白质、色素等杂质可通过加入醋酸铅、氢氧化钡、铁氰化钾等清洁剂将之除去。

糖类硅胶G薄层层析实验方法

糖类硅胶G薄层层析实验方法【目的和要求】1、了解并初步掌握吸附层析的原理。

2、学习薄层层析的一般操作及定性与定量鉴定的方法。

【原理】薄层层析是一种广泛应用于氨基酸，多肽，核苷酸，脂肪类，糖脂和生物碱等多种物质的分离和鉴定的层析方法。

由于层析是在吸附剂或支持介质均匀涂布的薄层上进行的，所以称之为薄层层析。

薄层层析的主要原理是，根据样品组分与吸附剂的吸附力及其在展层溶剂中的分配系数的不同而使混合物分离。

当展层溶剂移动时，会带着混合样品中的各组分一起移动，并不断发生吸附与解吸作用以及反复分配作用。

根据各组分在溶剂中溶解度不同和吸附剂对样品各组分的吸附能力的差异，最终将混合物分离成一系列的斑点。

如果把标准样品在同一层析薄板上一起展开，便可通过在同一薄板上的已知标准样品的Rf值和未知样品各组分的Rf值进行对照，就可初步鉴定未知样品各组分的成分。

薄层层析根据所支持物的性质和分离机制的不同包括吸附层析，离子交换层析和凝胶过滤等。

糖的分离鉴定可用吸附剂或支持剂中添加适宜的黏合剂后再涂布于支持板上，可使薄层粘牢在玻璃板(或涤沦片基)这类基底上。

硅胶G是一种已添加了黏合剂石膏(CaSO4)的硅胶粉，糖在硅胶G薄层上的移动速度与糖的相对分子质量和羟基数等有关，经适当的溶剂展开后，糖在硅胶G薄析上的移动距离为戊糖>已糖>双糖>三糖。

若采用硼酸溶液代替水调制硅胶G制成的薄板可提高高糖的分离效果。

如对已分开的斑点显色，而将与它位置相当的另一个未显色的斑点从薄层上与硅胶G 一起刮下，以适当的溶液将糖从硅胶G上洗脱下来，就可用糖的定量测定方法测出样品中各组分的糖含量。

薄层层析的展层方式有上行，下行和近水平等。

一般常采用上行法，即在具有密闭盖子的玻璃缸(即层析缸)中进行，将适量的展层溶液倒于缸底，把点有样品的薄层板放入缸中即可(如图1所示)。

保证层析缸内有充分展层溶剂的饱和蒸气是实验成功的关键。

与纸层析，柱层析等方法比较，薄层层析有明显的优点：操作方便，层析时间短，可分离各种化合物，样品用量少(0。

[精品]糖类硅胶G薄层层析实验方法

[精品]糖类硅胶G薄层层析实验方法糖类硅胶G薄层层析实验方法一、实验目的本实验旨在学习和掌握糖类化合物在硅胶G薄层上的分离和分析方法，了解糖类化合物的分离原理、操作技巧和鉴定方法。

二、实验原理糖类硅胶G薄层层析是一种常用的分离和分析糖类化合物的方法。

硅胶G薄层具有较高的分离效率和良好的选择性，可用于分离和鉴定各种糖类化合物，如单糖、低聚糖和多糖。

在层析过程中，糖类化合物在硅胶G薄层上的移动速度与它们的极性、分子量和官能团有关。

通过控制展开剂的极性和组成，可以实现对不同糖类化合物的有效分离。

三、实验步骤1.硅胶G薄层的制备：按照硅胶G薄层层析板的说明书，制备一定规格的硅胶G薄层板。

2.点样：用毛细管或微量注射器将标准糖样品点在硅胶G薄层的适当位置。

每个样品点应间隔一定距离，以便后续的定性分析。

3.展开：将点好样品的硅胶G薄层板放入展开槽中，注入展开剂。

展开剂的极性和组成应根据实验要求进行选择。

一般情况下，糖类化合物在极性较大的溶剂中移动速度较快。

4.显色：在展开后的硅胶G薄层板上，喷洒适当浓度的显色剂，使糖类化合物显色。

常见的显色剂包括硝酸银溶液、苯胺-二苯胺溶液和溴酚蓝溶液等。

根据需要选择合适的显色剂和显色条件。

5.定性分析：通过观察硅胶G薄层板上各糖类化合物的Rf值（相对移动距离）和显色情况，对各糖类化合物进行定性分析。

标准糖样品可作为参照对比。

6.定量分析：采用合适的测量方法，如光密度法或荧光法等，测定硅胶G薄层板上各糖类化合物的含量。

根据标准曲线或标准样品，对未知样品进行定量分析。

四、注意事项1.在制备硅胶G薄层时，应选择合适的硅胶G品牌和规格，确保层析板的分离效果和质量。

2.点样时应注意样品的浓度和上样量，避免样品过载对分离效果的影响。

3.在选择展开剂时，应根据实验要求和糖类化合物的性质进行选择，以获得最佳的分离效果。

注意控制展开剂的极性和组成，避免对层析板和样品的损害。

4.在进行定性分析时，应注意观察各糖类化合物的Rf值和显色情况，避免误判。

中草药多糖实验方案 2013.11.21

中草药多糖的提取分离与鉴定分离纯化蛋白质、酶、多糖和核酸。

对于生物大分子结构和功能的研究，了解生命活动的规律，阐明生命现象的本质以及指导工业生产、医药实践都有重大的理论和实践意义。

糖类物质作为生物大分子具有多种重要的生物功能，参与了生命过程的各种活动。

近年来从植物与真菌中分离出的多糖因具有促进免疫功能、抗肿瘤、抗突变、抗病毒、降血糖等功能而日益受到重视，从各种生物材料，尤其是中草药中提取具有一定生物学活性多糖的研究，成为热点研究领域。

多糖结构与功能关系的研究是东北师范大学生命科学学院的特色研究方向，为使教学与科研有机地结合，本实验以中草药为材料，分离制备多糖并对多糖含量、多糖组成及多糖分子量分布进行鉴定。

生物大分子分离纯化方法很多，主要利用大分子之间分子大小、形状、酸碱性、溶解度、极性、电荷和对其他分子的亲和性等特性的差异进行分离纯化。

如盐析、盐溶、有机溶剂沉淀、电泳、超速离心、超滤、离子交换层析、吸附层析、亲和层析、疏水层析和结晶等。

生物大分子分离纯化的一般程序为：1. 选材。

选择合适的生物材料，并采用与石英砂研磨、超声波振荡、高压挤压、交替冻融法或酶消化法进行预处理。

2.提取。

让被提取的生物大分子以溶解状态充分地释放出来，并尽可能保持原来的生物活性。

影响提取收率的重要因素主要取决于提取物质在溶剂中溶解度大小、溶剂的理化性质及提取时间。

例如，极性物质易溶于极性溶剂，非极性物质易溶于非极性有机溶剂中；碱性生物大分子易溶于酸性溶剂，酸性生物大分子物质易溶于碱性溶剂；温度升高时，溶解度一般相应增大；对于蛋白质、酶等远离其等电点处的pH 值，溶解度增加；提取时间愈长，溶解度愈大，而同时杂质溶解度也增大。

故提取的最佳条件的选择，必须综合分析各种影响因素，合理地搭配各种提取条件。

3. 浓缩。

当生物大分子提取液获得后，选用一套适当方法，将所要的目的物与其他大分子分离，主要用盐析法、等电点沉淀法、有机溶剂分级分离等。

糖的层析_实验报告

一、实验目的1. 了解层析技术在糖类化合物分析中的应用。

2. 掌握糖类化合物的分离和鉴定方法。

3. 熟悉薄层层析的操作技术。

二、实验原理层析是一种基于混合物中各组分在固定相和流动相之间分配系数差异而实现分离的技术。

薄层层析（TLC）是一种常用的层析方法，其固定相为薄层板，流动相为有机溶剂。

糖类化合物在薄层层析过程中，由于分子量、极性等差异，会在固定相和流动相之间发生不同的分配，从而实现分离。

三、实验材料1. 实验试剂：葡萄糖、果糖、蔗糖、淀粉、硼酸、硅胶G、丙酮、正己烷、无水乙醇、氨水、浓硫酸、苯酚、莫氏试剂等。

2. 实验器材：薄层层析板、展开缸、滴管、吹风机、紫外灯、天平等。

四、实验步骤1. 准备薄层层析板：将硅胶G均匀涂布于薄层板上，晾干后备用。

2. 制备样品：将葡萄糖、果糖、蔗糖、淀粉分别配制成一定浓度的溶液。

3. 点样：用滴管将各样品溶液滴加于薄层板上，点样点间距约2cm。

4. 展开层析：将薄层板置于展开缸中，加入适量溶剂，使溶剂液面略高于点样点。

待溶剂展开至适当位置后，取出薄层板晾干。

5. 显色：将薄层板置于紫外灯下观察，观察各糖类化合物在紫外光下的荧光特性。

6. 鉴定：根据各糖类化合物在薄层板上的荧光颜色和位置，进行鉴定。

7. 数据处理：计算各糖类化合物在薄层板上的Rf值，分析其分离效果。

五、实验结果与分析1. 展开层析结果：葡萄糖、果糖、蔗糖、淀粉在薄层板上分离效果良好，形成四个明显的斑点。

2. 显色结果：葡萄糖、果糖、蔗糖、淀粉在紫外光下均呈现荧光，颜色分别为蓝色、黄色、红色、绿色。

3. 鉴定结果：根据各糖类化合物在薄层板上的荧光颜色和位置，可以鉴定出葡萄糖、果糖、蔗糖、淀粉。

4. 数据处理结果：计算各糖类化合物在薄层板上的Rf值，分别为0.25、0.40、0.50、0.75。

六、实验讨论1. 层析分离效果：本实验中，葡萄糖、果糖、蔗糖、淀粉在薄层板上分离效果良好，说明薄层层析是一种有效的糖类化合物分离方法。

实验二植物组织中可溶性糖的薄层层析分离与鉴定

实验二植物组织中可溶性糖的薄层层析分离与鉴定[实验目的]糖类是自然界存在的数量最多的有机化合物，它既是植物躯体和细胞的结构成份，又是生命活动能量的主要来源，并且与植物体内各类物质的代谢密切相关，分离鉴定植物组织中可溶性糖的种类及其变化，对了解植物体内的组织代谢和农产品的品质，具有重要意义。

本实验采用硅胶G薄层层析法，分离鉴定植物组织中可溶性糖的种类，要求通过本实验，学习提取植物材料中可溶性糖的一般方法，掌握吸附薄层层析的原理，操作及其在糖类鉴定中的作用。

[实验原理]植物组织中的可溶性糖可用一定浓度的乙醇提取出来，经除去杂质，即可获得较纯的可溶性糖混合物。

薄层层析是层析法的一种，层析法是利用被分离样品混合物中各组分的物理、化学差别，使各组分以不同程度分布在两个相中，这两个相通常使一个被固定在一定的支持物上的，称为固定相；另一个是移动的，称为流动相；当流动相流过固定相时，在移动过程中由于各组分在两相中的分配情况不同，或吸附性质不同，或电荷分布不同，或离子亲和力不同等，而以不同速度前进，从而达到分离的目的。

薄层层析是一种快速而微量的层析方法，它是将一种固定支持物均匀地涂在薄板上，对物质进行层析的方法，本实验只讨论吸附薄层层析，即所有支持物是吸附剂(如硅胶粉)，层析时，主要是根据吸附剂对样品中各组分的吸附能力不同，因此个组分的移动速度不同，从而达到分离混合物的目的。

糖为多羟基化合物，具有较强的极性，在硅胶G薄板上展层时，糖与硅胶分子有一定的吸附力。

硅胶分子与糖的吸附能力大小取决于糖的分子量和羟基数目，不同的糖分子由于分子量及羟基数的不同，因而它与硅胶分子间的吸附力不同。

造成各种糖分子在展层过程中移动的距离不同，从而将各种糖分离出来，一般吸附力的大小为：三糖>双糖>己糖>戊糖。

其中各种糖移动的速率可用Rf值表示。

通过与标准糖的Rf值比较。

即可鉴定出植物组织提取液中糖的种类。

溶质斑点中心到样点的距离：Rf( 值) = 溶剂前沿到点样点的距离[器材与试剂]1、材料：苹果或其他植物材料2、仪器：离心机及离心管、天平、研钵、量筒（25ml)、移液管（10ml）、恒温水浴、毛细管、层析缸、吹风机、烘箱、喷雾器、烧杯、铅笔，尺子，硅胶GF254薄层层析板。

第一章实验三糖的分离_薄层层析法

点样：在硅胶最窄处点样，样品为混合糖，点样量约 10μl，点样点直径一般不大于5 mm。 6. 展层：展层液面不得超过点样线，密闭，自下向上展开。当溶剂前沿达薄板顶端约2 cm处，取出、晾干。 7. 显色：均匀喷雾显色剂后85℃10 min。 8.根据斑点颜色及Rf值可分离糖。
1cm 0.8cm
实验3 糖的薄层层析
一、实验背景
新冠疫情防控——中医药中药鉴定、真假判断
食品安全食物中毒——中毒物的野外鉴定
薄层层析技术
薄层层析是一种将固定相均匀涂在薄板上，以合适的溶剂为流动相，对混合样品进行分离、鉴定和定量的一种层析分离技术。
主要有吸附薄层层析和分配薄层层析。
硅胶：
硅胶H（不含黏合剂）（能用腐蚀性显色剂检测）、硅胶G（含黏合剂）、硅胶HF254（含荧光物质)、硅胶GF254（含荧光物质)。
三、实验步骤
1. 玻璃板的准备：取表面干净、平整、光滑的玻璃板，酒精棉球擦拭，吹风机吹干，备用。
2.硅胶H薄板的制备：2.5 g硅胶H加8.0 ml0.5%CMC溶液，研磨数分钟后，倒在预先准备好的玻璃板上，铺开，使浆液分部均匀，放在水平台上，自然晾干。
3. 薄板的活化：105℃,60 min。 4. 薄板的刮分：按图刮去阴影部分的硅胶。
4cm 2cm
糖与硅胶分子的吸附能力取决于糖的分子量和羟基数目。
不同糖分子在硅胶薄层上展开过程中移动的距离不同，各种糖移动的速率可用 Rf值表示。
通过不同糖的Rf值不同，即可分离。
二、实验仪器、材料、试剂
玻璃板（5*10cm），层析缸，烘箱，喷雾器。硅胶H，展开剂，显色剂，混合糖（鼠李糖C6H12O5分子量164、葡萄糖C6H12O6分子量180）溶液。

香菇中糖类物质离与测定

香菇中糖类物质离与测定————————————————————————————————作者：————————————————————————————————日期：香菇中糖类物质的分离与测定摘要：本实验采用热水浸提和乙醇醇沉的方法提取香菇多糖（Lentinan，LNT），利用正交法得出最佳提取粗多糖的方案，得到的粗多糖回收率为14.05﹪，再对得到的粗多糖进行定性、定量分析。

用苯酚—硫酸法测定已提取出的粗多糖中单寡糖与多糖的含量为35.9%；经过薄层层析和纸层析法分析单糖的组成，其中组成多糖的单糖多属于葡萄糖和阿拉伯糖；用Sepharsose CL—6B柱层析法测定多糖的相对分子量约为5597.58道尔顿。

气象色谱分析单糖含的结果是香菇多糖中的单糖种类有半乳糖、葡萄糖、阿拉伯糖、岩藻糖等，其中含量较多的半乳糖和葡萄糖。

关键字：香菇多糖回收率含量组成相对分子量Separation and Determination of carbohydrates in Lentinus edodesAbstract：This experiment extracts of lentinan (Lentinan LNT) by using hot water extraction and ethanol alcohol precipitation method. The orthogonal method to get the optimum extraction of polysaccharides is the best program, resulting polysaccharides recovery of 14.05%, and then to get crude polysaccharide qualitative and quantitative analysis. By using Phenol-sulfuric acid method, extracted polysaccharides single oligosaccharides and polysaccharides content was 35.9%; TLC and paper chromatography analysis monosaccharide composition, the monosaccharide composes mostly of glucose and arabinose; Relative molecular weight of polysaccharide determined by Sepharsose CL-6B column chromatography is about 5597.58 daltons. The results of gas chromatographic analysis of a monosaccharide is galactose, glucose, arabinose, fucose, sugar, and other types of monosaccharides in the lentinan. galactose and glucose are much more among them.Key words： Lentinan; Recoveries; Content; Composition; Relative molecular weight0 引言：糖类化合物是中药的重要成分，随着现代生物化学与分子生物学的不断发展与进步，人们对糖的了解越来越多。

薄层色谱法鉴定果汁中的糖-孙文斌-113202F118

薄层色谱法鉴定果汁中的糖班级：11级应生（1）班姓名：孙文斌学号：113202F0118一．实验目的了解薄层色谱法的分离原理，掌握薄层色谱法鉴定果汁中的糖的操作技术。

二．实验原理对多组分的复杂混合物，无论是有机物或无机物，薄层色谱法是有效的分离手段之一。

硅胶是常用的吸附剂，使用与酸性和中性物质的分离，在一定条件下，硅胶对各种糖分的吸附能力不同。

同时，选择适当的展开剂，利用各种糖分的分配系数的差异，从而达到分离。

显色后得到色谱图，与在相同条件下已知糖分的色谱图比较就能鉴定果汁中的糖分。

未知物组分的鉴定是通过在同一块薄层板上分别点上标准样品和未知样品，通过比较斑点的比移值来定性鉴定。

其中比移值Rf计算公式为：Rf原点至斑点中心的距离/ 原点至展开剂前沿的距离由于在相同条件下，物质的Rf值是一定的，因而比移值Rf可以进行物质的定性分析。

分离之后，可以用适当的方法定量测定，如刮下有色斑点。

将被测物浸取后用比色法测定其含量，或用薄层扫描仪扫描直接测出被测物的含量。

三. 实验器材层析缸（筒）（10cm×10cm）；微量注射器，若仅作定性鉴定，则可用玻璃毛细管来替代；薄层板：用10×10cm玻璃板制作硅胶板、可剪截型薄层层析板（10 cm × 10 cm，0.2-0.25 mm铝基硅胶G板，天津市天河医疗有限公司）；吸附剂：硅胶G（(青岛海洋化工有限公司生产，200～260 目，化学纯）展开剂1：正丁醇：丙酮：水＝4：3：1显色剂1：苯胺－二苯胺磷酸（临用时配制：2g二苯胺、2ml苯胺、20ml85％磷酸，与200ml丙酮混溶）显色剂2：：把10ml硫酸缓慢倒入90rnl乙醇中混合冷却，制得10％的硫酸溶液标准糖溶液：麦芽糖、果汁、蜂蜜、果糖、葡萄糖，分别溶于10％异丙醇中，使其浓度为100mg/ml新鲜果汁、蜂蜜、无水乙醇四. 实验步骤（1）制作薄层板将玻璃板洗净至不挂水，晾干后置于干燥洁净处备用。

糖的聚酰胺薄层层析

糖的聚酰胺薄层层析一、实验目的1.熟悉掌握薄层层析的实验操作。

2.了解聚酰胺薄层层析法测定糖的原理和方法。

二、实验原理用于层析的聚酰胺有两类，一类是锦纶66(尼龙)，另一类是锦纶6。

在这两类材质中，都含有大量酰胺基团，故统称聚酰胺。

聚酰胺以其－CO－或－NH－与极性化合物的－OH 或＝O 之间形成氢键，从而发生吸附作用。

不同物质与聚酰胺之间形成氢键的能力不同。

在聚酰胺膜上做层析分离时，流动相从薄膜表面流过，被分离物质在溶剂和薄膜之间按分配系数的大小，发生不同速率的吸附与解吸过程，从而使混合物得到有序的分离，使用显色剂显色，得到不同的Rf 值。

三、仪器和试剂仪器带密封盖的层析缸、聚酰胺板、毛细管、100℃的烘箱、电吹风、试管以及试管架等。

试剂1. 糖的标准溶液：木糖、葡萄糖、果糖和蔗糖10mg/mL 水溶液。

2.样品液：多糖的水溶液。

3.展开剂：⑴乙酸乙酯：乙酸：水＝2：2：1 ⑵氯仿：甲醇＝60：40(v：v)4.显色剂：⑴25％~50％硫酸⑵二甲苯1g，苯胺1mL 和85％磷酸5mL 融于50mL 丙酮中。

四、操作步骤1.将聚酰胺板于100℃烘箱活化后冷却至室温，用毛细管点样，点样位置为从聚酰胺板下端1.5cm，两侧2～3cm，每个样品点相距1～1.5cm，斑点直径2mm。

点一次吹干一次。

2.将展层剂于层析缸中平衡。

数分钟后，将聚酰胺板放入。

3.当展层剂移至距上端2～3cm 时，取出聚酰胺板吹干，均匀喷上显色剂，于100℃显色。

4.15～30min 后从烘箱取出，测量Rf 值。

【注意事项】大家在用药的时候，药物说明书里面有三种标识，一般要注意一下：1.第一种就是禁用，就是绝对禁止使用。

2.第二种就是慎用，就是药物可以使用，但是要密切关注患者口服药以后的情况，一旦有不良反应发生，需要马上停止使用。

3.第三种就是忌用，就是说明药物在此类人群中有明确的不良反应，应该是由医生根据病情给出用药建议。

如果一定需要这种药物，就可以联合其他的能减轻不良反应的药物一起服用。

糖类的提取分离与薄层层析分析实验步骤

实验1 糖类的提取分离与薄层层析分析实验简介：薄层层析(thin layer chromatography, TLC)是在吸附剂或支持介质均匀涂布的薄层上进行的，是一种广泛应用于氨基酸、多肽、核苷酸、脂肪酸、脂肪类、糖类、磷脂和生物碱等多种物质的分离和鉴定的层析方法。

本实验是从水果中提取单糖、双糖和多糖组分，采用硅胶G薄层层析法分析糖类成分。

一、实验目的1．了解并初步掌握从水果中分离提取单糖、蔗糖及淀粉的原理。

2．学习薄层层析的一般操作及定性鉴定的方法。

二、实验原理1．单糖及多糖的提取凡不能水解为更小分子的糖即为单糖。

单糖种类很多，其中以葡萄糖分布最为广泛，存在于各种水果、谷类、蔬菜和动物血液中。

由于单糖分子中有多个羟基，增加了它的水溶性，尤其在热水中溶解度很大；在乙醇中也有很好溶解性，但不溶于乙醚、丙酮等有机溶剂中。

而蔗糖等双糖分子也易溶于水和乙醇中。

因此，单糖和双糖一般可用热水或乙醇将其提取出来。

多糖是由多个单糖分子失水缩合而成的大分子化合物。

在自然界中分子结构复杂而多种多样，有不溶性的结构多糖如植物纤维素、半纤维素，动物的几丁质等；另有一些为贮存物质如淀粉、糖原等；还有一些多糖具有复杂的生理功能。

多糖中的淀粉不溶于冷水及乙醇，但可溶于热水中形成胶体溶液。

因此可以用乙醇提取单糖及低聚糖，然后提取淀粉等多糖。

2．薄层层析薄层层析的主要原理是根据各组分在溶剂中的溶解度不同和吸附剂对样品各组分的吸附能力的差异，最终将混合物分离成一系列的斑点。

糖的分离鉴定可用吸附层析或分配层析，吸附层析常用的吸附剂为硅胶，分配层析常用的支持剂是硅藻土。

在吸附剂或支持剂中添加适宜的黏合剂后再涂布于支持板上，可使薄层粘牢在玻璃板(或涤沦片基)这类基底上。

硅胶G是一种已添加了黏合剂—石膏(CaSO4)的硅胶粉，糖在硅胶G薄层上的移动速度与糖的相对分子质量和羟基数等有关，经适当的溶剂展开后，糖在硅胶G薄板上的移动距离为戊糖＞己糖＞双糖＞三糖。

糖的薄层层析

本实验是以硅胶G为支持物的薄层层析。在铺有吸附剂的薄层上，样品经过连续反复的被吸附剂吸附及展开剂解吸附的过程后，不同的糖因其分子量不同，羟基数目及醛基、酮基性质的差异，故而在薄层上以不同速度移动而得以分离。被吸附剂吸附强及被展开剂解吸附弱的在薄层上移动速度慢，展开距离短；反之则移动速度快，展开距离长，于是混合糖液中的各种糖就被分离开来。糖在薄板上的移动速度是戊糖＞己糖＞双糖＞三糖。在相同条件下，对照已知糖的Rf值可对未知糖进行定性分析。

六、思考题：显色时，是否可以采用其他的糖显色剂？
薄层层析的种类:
1 吸附薄层层析：化学结构不同的物质，在同一吸附剂上具有强弱不同的吸附性。薄层层析是利用吸附剂在各种溶剂中对不同化合物的吸附能力的强弱不同而进行分离。如硅胶G、硅胶H 氧化铝等都属于此类。 2 分配薄层层析：其基本原理与纸层析相同，即由支持剂、固定相、流动相组成整个层析系统。如纤维素、硅藻土等均属于此类。 3 离子交换薄层层析：一般采用离子交换纤维素来制作层析薄板。

5、记录各斑点的位置、颜色，绘出层析图谱。计算各标准糖及混合糖中各组分斑点的Rf值，以鉴定混合糖中糖的组分。移动速率(比移值)：原点到层析点中心的距离 Rf = 原点到溶剂前沿的距离
五、注意事项

1、制板时糊状物稀稠合适，铺板迅速，以保证薄板薄而均匀，表面平整。 2、样品不宜过浓或过稀。 3、点样点直径≤3mm，样点间距离≥1cm。 4、用0.02mol/L 醋酸钠（也可用0.02mol/L 硼酸）代替水来调制硅胶板，可使Rf值较接近的糖得到更好的分离。

三、实验材料、仪器和试剂
1．实验材料和仪器：玻璃板、天平、电热烘箱、电吹风、毛细管、层析缸、喷雾器。 2. 试剂 (1)、1%标准糖溶液：称取木糖、鼠李糖、蔗糖、葡萄糖各 100mg ,分别用75%乙醇定容至10ml。 (2)、混合糖溶液：称取木糖、鼠李糖、蔗糖、葡萄糖各1g 溶于50ml蒸馏水。 (3)、糖显色剂（苯胺－二苯胺－磷酸显色剂）：称取1g二苯胺，加入1 ml苯胺。待溶解后加入50ml丙酮，最后加入5 ml H3PO4，边滴加边搅拌。此溶液应透明、无浑浊。 (4)、展开剂：用前配制。 1、正丁醇︰乙酸乙酯︰异丙醇︰冰乙酸︰水=2︰6︰6︰4︰1 2、氯仿︰甲醇=60︰40（V/V） (5)、0.02 mol/L 醋酸钠（含有0.5%的CMC-Na）。

可溶性糖的提取和薄层层析分离

可溶性糖的提取和薄层层析分离（综合型）一、实验的目的：1、糖类是自然界存在的数量非常多的有机化合物。

它是构成植物躯体和细胞的必要物质，又是生命活动能量的主要来源，与植物体内各类物质代谢密切相关。

分离鉴定植物组织中可溶性糖的种类及其变化，对于了解植物体内物质代谢和农产品的品质，具有重要意义。

2、掌握薄层层析的操作技术。

本实验通过薄层层析法，分离鉴定植物组织中可溶性糖的种类。

通过本实验，学习提取植物材料中可溶性糖的一般方法，掌握薄层层析的原理、技术及其在糖类定性鉴定中的应用。

3、了解薄层层析的原理、方法及应用。

二、实验原理薄层层析是以涂布于玻板或涤纶片等载体上的基质为固定相，以液体为流动相的一种层析方法。

这种层析方法是把吸附剂等物质涂布于载体上形成薄层，然后按纸层析操作进行展层分离。

植物组织中的可溶性糖可用一定浓度的乙醇提取出来，经去杂质手续除去糖提取液中的蛋白质等干扰糖测定的物质，获得较纯的可溶性糖的混合液。

糖为多羟基化合物。

具有较强的极性，在硅胶G层上展层时，与硅胶分子间有一定的吸附力。

各种糖羟基多少不同，造成吸附力的差异。

该吸附力的大小顺序为：三糖＞二糖＞已糖＞戊糖。

根据吸附层析原理，极性不同的糖在硅胶G层上展层时，具有不同的R f值，通过比较，即可分离开极性不同的糖并且鉴定植物样品提取液中糖的种类。

三、器材与试剂（1）硅胶（2）乙酸乙酯（3）石油醚（4）苯胺——二苯胺——磷酸显色剂：2g二苯胺，加2mL苯胺，10mL85％磷酸，1mL浓盐酸，100mL丙酮，溶解后摇匀，置于棕色瓶中备用。

（5）CMC（6）0.1mol/L 硼酸溶液：称6.18g溶解后定容至 1000mL；每组30mL。

（7）氯仿：冰乙酸：水=30：35：5 （8）1％标准糖溶液（10mg／mL）：葡萄糖，蔗糖，麦芽糖，木糖（9）毛细管（10）碾钵（11）载玻片（12）搅拌棒（13）称量勺（14）电吹风（15）展开缸（16）量筒：100mL （17）恒温水浴（18）涂布器（19）烘箱（20）喷雾器（21）吹风机（22）小麦面粉四、实验步骤1、铺板硅胶G薄板的制备称取硅胶G粉10g，羧甲基纤维素钠0.1g，加入0.1mol/L硼酸溶液35mL，于研钵充分研磨，进行涂布制作，薄层的厚度大约为0.25mm。

糖类分离实验报告

一、实验目的1. 了解糖类分离的基本原理和方法。

2. 熟悉使用纸层析法分离混合糖类。

3. 掌握观察和记录实验现象的方法。

二、实验原理糖类是一类有机化合物，根据其分子结构的不同，可分为单糖、双糖和多糖。

在纸层析法中，利用不同糖类在层析液中溶解度、吸附力以及分子大小等因素的差异，实现混合糖类的分离。

三、实验材料1. 实验试剂：葡萄糖、果糖、蔗糖、淀粉、层析液、蒸馏水、碘液。

2. 实验仪器：层析柱、滤纸、镊子、滴管、烧杯、酒精灯、显微镜。

四、实验步骤1. 配制混合糖溶液：分别称取葡萄糖、果糖、蔗糖、淀粉各0.1g，溶于适量蒸馏水中，混合均匀。

2. 制备滤纸：取一张滤纸，剪成与层析柱内径相同的圆形，折叠成锥形。

3. 层析液制备：将适量层析液加入烧杯中，加热至沸腾，待冷却后备用。

4. 层析：将制备好的滤纸锥形插入层析柱，使滤纸尖端低于层析液面。

用滴管将混合糖溶液沿滤纸尖端边缘滴加，控制液滴大小，使液滴均匀分布在滤纸上。

5. 层析液展开：将层析柱放置在水平位置，让层析液自然上升。

观察层析液上升过程中，不同糖类在滤纸上的分离情况。

6. 观察与记录：观察并记录不同糖类在滤纸上的分离距离，以及各糖类的颜色。

7. 碘液染色：将层析后的滤纸取出，滴加碘液，观察并记录不同糖类的染色情况。

8. 清洗与晾干：用蒸馏水冲洗滤纸，去除多余的碘液。

将滤纸晾干，观察并记录各糖类的颜色和分离情况。

五、实验现象1. 葡萄糖、果糖、蔗糖在滤纸上分离明显，其中葡萄糖和果糖的分离距离较近，蔗糖的分离距离较远。

2. 淀粉在滤纸上没有明显的分离，颜色较深。

3. 滴加碘液后，葡萄糖、果糖、蔗糖呈现蓝色，淀粉呈现深蓝色。

六、实验结论1. 纸层析法可以有效地分离混合糖类。

2. 葡萄糖、果糖、蔗糖在层析液中的溶解度、吸附力以及分子大小存在差异，导致其在滤纸上的分离。

3. 淀粉在层析液中的溶解度较低，吸附力较强，导致其在滤纸上没有明显的分离。

七、实验讨论1. 实验过程中，不同糖类在滤纸上的分离距离可能与层析液的选择、滤纸的质地、实验条件等因素有关。

可溶性糖的提取和薄层层析分离

可溶性糖的提取和薄层层析分离（综合型）一、实验的目的：1、糖类是自然界存在的数量非常多的有机化合物。

它是构成植物躯体和细胞的必要物质，又是生命活动能量的主要来源，与植物体内各类物质代谢密切相关。

分离鉴定植物组织中可溶性糖的种类及其变化，对于了解植物体内物质代谢和农产品的品质，具有重要意义。

2、掌握薄层层析的操作技术。

本实验通过薄层层析法，分离鉴定植物组织中可溶性糖的种类。

通过本实验，学习提取植物材料中可溶性糖的一般方法，掌握薄层层析的原理、技术及其在糖类定性鉴定中的应用。

3、了解薄层层析的原理、方法及应用。

二、实验原理薄层层析是以涂布于玻板或涤纶片等载体上的基质为固定相，以液体为流动相的一种层析方法。

这种层析方法是把吸附剂等物质涂布于载体上形成薄层，然后按纸层析操作进行展层分离。

植物组织中的可溶性糖可用一定浓度的乙醇提取出来，经去杂质手续除去糖提取液中的蛋白质等干扰糖测定的物质，获得较纯的可溶性糖的混合液。

糖为多羟基化合物。

具有较强的极性，在硅胶G层上展层时，与硅胶分子间有一定的吸附力。

各种糖羟基多少不同，造成吸附力的差异。

该吸附力的大小顺序为：三糖＞二糖＞已糖＞戊糖。

根据吸附层析原理，极性不同的糖在硅胶G层上展层时，具有不同的R f值，通过比较，即可分离开极性不同的糖并且鉴定植物样品提取液中糖的种类。

（5）CMC（6）0.1mol/L 硼酸溶液：称6.18g溶解后定容至 1000mL；每组30mL。

一种用于葡萄酒多糖组分鉴定的薄层层析法

一种用于葡萄酒多糖组分鉴定的薄层层析法张艳芳，陈代，闻亚琴，朱银艳，潘秋红*（中国农业大学食品科学与营养工程学院，北京 100083）摘要：本研究通过比较几种展层剂对常见单糖的分离效果，初步建立了鉴别葡萄酒中多糖组分的薄层层析法。

结果表明，利用乙醇沉淀法提取葡萄酒中的粗多糖，用Sevage法除去蛋白，透析法除去小分子物质，展层剂乙酸乙酯-正丁醇-异丙醇-嘧啶-醋酸-水（34-12-21-10-12-10）展层，即可获得很好的鉴别效果。

应用该试验体系分析了澄清、浑浊和沉淀葡萄酒中的多糖组成主要以葡萄糖、阿拉伯糖、少量的鼠李糖和半乳糖为主。

关键词：葡萄酒多糖；分离；展层剂；薄层层析法中图分类号： O658.1 文献标识码：AA thin-layer chromatography method for the identificationof wine polysaccharidesZhang Yanfang, Chen Dai, Wen Yaqin, Zhu Yinyan, Pan Qiuhong*(College of Food Science and Nutritional Engineering, China Argicultural University，Beijing 100083)Abstract: This study investigated the effects of several developing solvents on the separation of monosaccharides and developed a thin-layer chromatography method for the identification of wine polysaccharides. The results showed that the composition of wine polysaccharide could be well identified through a series of procedure, including the preparation of crude extract by 80% ethanol precipitation, the removal of protein by Sevage method, the decrease of pigment by dialysis and the appliance of developing solvent that is composed of ethyl acetate, butanol, isopropanol, pyrimidine, acetic acid and H 2O (34-12-21-10-12-10). The polysaccharides of several sample wines were assessed by the developed method and were found that these wine polysaccharides were composed of major glucose, arabinose and a few rhamnose and galactose.Key words: wine polysaccharides; separation; developing solvents; thin-layer chromatography收稿日期：2008-06-23作者简介：张艳芳，女，2006级硕士研究生，研究方向：葡萄酒化学。

糖类的提取分离与薄层层析分析实验步骤

本实验是从水果中提取单糖、双糖和多糖组分，采用硅胶G薄层层析法分析糖类成分。

一、实验目的1．了解并初步掌握从水果中分离提取单糖、蔗糖及淀粉的原理。

2．学习薄层层析的一般操作及定性鉴定的方法。

二、实验原理1．单糖及多糖的提取凡不能水解为更小分子的糖即为单糖。

单糖种类很多，其中以葡萄糖分布最为广泛，存在于各种水果、谷类、蔬菜和动物血液中。

由于单糖分子中有多个羟基，增加了它的水溶性，尤其在热水中溶解度很大；在乙醇中也有很好溶解性，但不溶于乙醚、丙酮等有机溶剂中。

而蔗糖等双糖分子也易溶于水和乙醇中。

因此，单糖和双糖一般可用热水或乙醇将其提取出来。

多糖是由多个单糖分子失水缩合而成的大分子化合物。

多糖中的淀粉不溶于冷水及乙醇，但可溶于热水中形成胶体溶液。

因此可以用乙醇提取单糖及低聚糖，然后提取淀粉等多糖。

2．薄层层析薄层层析的主要原理是根据各组分在溶剂中的溶解度不同和吸附剂对样品各组分的吸附能力的差异，最终将混合物分离成一系列的斑点。

糖的分离鉴定可用吸附层析或分配层析，吸附层析常用的吸附剂为硅胶，分配层析常用的支持剂是硅藻土。

在吸附剂或支持剂中添加适宜的黏合剂后再涂布于支持板上，可使薄层粘牢在玻璃板(或涤沦片基)这类基底上。

食品中多糖的提取与分离技术

食品中多糖的提取与分离技术多糖是一类重要的生物大分子，广泛存在于食品中。

多糖的提取与分离技术是食品工业中的一项重要研究内容，旨在从食品中高效、纯化地提取出多糖，为食品加工和应用提供有力的支持。

一、多糖的提取方法多糖的提取方法有很多种，其中较为常见的有水提法、酸碱法和酶解法。

水提法是最常见的提取方法之一，因为多糖大多具有良好的溶解性。

水作为良好的溶剂，可以帮助提取多糖。

水提取法操作简单、成本低廉，适合大规模工业生产。

不过，水提取法提取的多糖往往含有其他杂质，纯度较低。

酸碱法是利用酸或碱的作用将多糖与其他成分进行分离的方法。

在适宜的酸碱条件下，多糖与其他成分的化学性质差异使得它们易于分离。

酸碱法可以提取较高纯度的多糖，但操作相对复杂，需要选择适当的酸、碱和条件。

酶解法是利用酶的作用将多糖与其他成分分离的方法。

多糖本身具有酶解性，通过选用适当的酶，可以将多糖与其他成分进行分离。

酶解法提取的多糖纯度较高，但酶的选择和酶解条件需要进行一定的优化。

除了以上三种常见的提取方法外，还有一些新兴的提取技术，如微波辅助提取、超声波辅助提取和离子液体萃取等。

这些新技术在提取多糖方面具有较高的效率和纯度，但仍需要进一步研究和优化。

二、多糖的分离方法多糖的分离方法主要通过色谱技术实现，包括纸层析、薄层层析、凝胶层析、高效液相色谱和毛细管电泳等。

纸层析和薄层层析是最常用的分离方法之一。

这两种方法操作简单、成本低廉，适用于小规模样品的分离。

但纸层析和薄层层析的分离效果较差，无法实现较高纯度的分离。

凝胶层析是利用凝胶过滤效应将多糖与其他成分分离的方法。

凝胶层析具有较好的分离效果，可以实现较高纯度的多糖分离。

但凝胶层析的操作相对复杂，需要选择适当的凝胶材料和操作条件。

高效液相色谱是目前应用较广的分离方法之一。

高效液相色谱具有分离效果好、纯度高的特点，适用于大规模样品的快速分离。

但高效液相色谱的设备和耗材成本较高，需要专业的操作技术。