实验七八酵母菌形态讲义与大小测定
实验八 酵母菌细胞数量和大小的测定
实验八酵母菌细胞数量和大小的测定一、实验目的1. 学习和掌握显微镜的使用方法2. 学习和掌握酵母菌细胞数量和大小的测定方法3. 了解酵母菌作为微生物的特点和应用二、实验原理1. 显微镜使用方法显微镜是一种用于观察细小物体的仪器。
其主要部分包括光源、物镜、目镜、台架等组成部分。
在观察物体时，需要先将待观察的物体放置在载玻片上，涂上适量的药液，然后将载玻片放置在台架上，在显微镜下逐渐调整光源、物镜和目镜，直到达到最佳观察效果。
酵母菌是一种典型的单细胞真菌，其细胞大小通常在5-10微米之间。
在实验中，可以用显微镜对酵母菌进行观察和计数，也可以通过简单的模拟实验估算酵母菌细胞数量。
三、实验步骤1. 准备工作准备所需的实验器材和试剂：载玻片、盖玻片、万能药液、盐水、酵母菌培养液、移液管等。
2. 酵母菌细胞数量的估算（1）取一支移液管，吸取适量的酵母菌培养液（约0.5毫升）。
（2）加入适量的盐水（约0.5毫升），充分混合。
（3）将混合液滴在一张载玻片上。
（4）在载玻片上随意涂抹，使混合液均匀分布在玻片表面。
（5）在显微镜下对涂片进行观察，估算酵母菌细胞数量。
（1）准备一份酵母菌培养液。
（4）将盖玻片放置在载玻片上。
四、注意事项1. 实验操作过程中需要注意卫生和安全，遵守实验室安全规定。
2. 在观察酵母菌时，需要小心操作，避免将酵母菌培养液污染到实验室环境中。
3. 在显微镜操作时，需要小心调整光源和物镜，避免损坏镜头和影响观察效果。
五、实验结果分析通过上述实验，可以获得酵母菌细胞数量和大小的估算结果。
根据所得结果，可以了解到酵母菌在不同培养条件下的数量和大小变化情况，从而为后续的酵母菌研究提供参考依据。
六、实验总结通过本次实验，我学习和掌握了显微镜的使用方法和酵母菌细胞数量和大小的测定方法。
同时，我也了解了酵母菌作为微生物的特点和应用。
通过实际操作，我对科学实验有了更加深入的认识和理解，也进一步了解了微观世界的神秘和奥妙。
真核微生物的构造和形态观察--酵母菌大小的测定
六、项目实训：酵母菌大小的测定
３ 操作步骤
➢ 镜台测微尺的安装：把镜台测微尺放在显微镜载物台上，刻度朝上； ➢ 目镜测微尺的安装：把目镜上的透镜旋开，把目镜测微尺放在目镜的光阑上筒内。
六、项目实训：酵母菌大小的测定
３ 操作步骤
➢ 目镜测微尺的标定：使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度相平行。两尺在某一区域 内两线完全重合，然后分别数出两重合线之间镜台测微尺和目镜测微尺所占格数；
六、项目实训：酵母菌大小的测定
２ 基本原理
➢ 目镜测微尺：一块可以放入目镜的圆形小玻片，其中央有精确的等分刻度， 有等分为50小格和100小格的两种。在测量时将目镜测微尺放在目镜的隔板 上，即可来测量经显微镜放大后的细胞物象；
➢ 每一格实际代表的长度随目镜和物镜的放大倍数而改变，因此在测量微生物 大小前必须用镜台测微尺进行校正。
➢用同法分别标定高倍镜、油镜下的目镜测微尺各格的长度。
六、项目实训：酵母菌大小的测定
３ 操作步骤
➢ 制片：按照一般酵母菌形态观察制水浸片； ➢ 菌体大小的测量：在目镜下找到目的物，用目镜测微尺先量菌的宽度格数；然
后量长度格数。例如，目镜测微尺在油镜下标定的结果为每格相当于1.3μm， 测量结果菌体长度为目镜测微尺的2格，宽度为1.2格，则菌体的实际长度＝ 2×1.3μm=2.6μm，实际宽度=1.2×1.3μm=1.56(μm)。 ➢ 测量酵母菌大小时，通常要在同一玻片上测量10~20个菌体，求出平均值。
微生物学基础
真核微生物的构造和形态观察
项目一 酵母菌的构造和形态观察
六、项目实训：酵母菌大小的测定
1 实验目的 ➢ 学习测微尺（镜台测微尺、目镜测微尺）的使用方法；
➢ 掌握酵母菌菌体大小的测量方法。
酵母菌大小的测定及计数实验流程
酵母菌大小的测定及计数实验流程下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。
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酵母菌的形态观察与微生物大小的测定
酵母菌的形态观察, 死活细胞鉴别,微生物测量技术,显微镜直接计数法一、实验目的1．观察酵母菌的形态及出芽生殖方式，学习区分酵母菌死活细胞的实验方法；掌握酵母菌的一般形态特征及其与细菌的区别。
2．了解目镜测微尺和镜台测微尺的构造及使用原理，掌握测定微生物细胞大小的方法.3. 了解血球计数板的构造和使用方法,学会用血球计数板对酵母细胞进行计数。
二、实验原理染色：美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型无色。
用美蓝对酵母的活细胞进行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。
因此，具有还原能力的酵母细胞是无色的，而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色。
测量：微生物细胞的大小是微生物重要的形态特征之一，由于菌体微小，只能在显微镜下测量。
用于测量微主物细胞大小的工具有目镜测微尺和镜台测微尺。
目镜测微尺是一块圆形玻片，在玻片中央把5mm长度刻成50等分，或把10 mm长度刻成100等分。
测量时，将其放在接目镜中的隔板上(此处正好与物镜放大的中间物像重叠)用于测量经显微镜放大后的细胞物象。
由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同，目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样，因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上的镜台测微尺校正，以求出在一定放大倍数下，目镜测微尺每小格所代表的相对长度。
计数：每一个大方格边长为1mm，则每一大方格的面积为1mm2，盖上盖玻片后，载玻片与盖玻片之间的高度为0．1mm，所以计数室的容积为0．1mm3。
在计数时，通常数五个中方格的总菌数，然后求得每个中方格的平均值，再乘上16或25，就得出一个大方格中的总菌数，然后再换算成1ml菌液中的总菌数。
下面以一个大方格有25个中方格的计数板为例进行计算：设五个中方格中总菌数为A，菌液稀释倍数为B，那么，一个大方格中的总菌数因1ml=1cm3=1000mm3，三、实验仪器1 菌种: 培养48h的酵母菌．２染色液和试剂：0.05%、0.1%吕氏碱性美蓝．3 器材：显微镜、血球计数板、目镜测微尺、镜台测微尺、盖玻片、吸水纸、计数器、移液器、擦镜纸。
实验八 酵母菌细胞数量和大小的测定
二、实验材料
1、菌种：酿酒酵母培养液 2、器材：血球计数板、目镜测微尺
三、实验原理及结果记录
1、显微直接计数法 （血球计数板）
血球计数扳的构造
0.1毫米
a.平面图(中间平台分为两半，各刻有一个方格网)
b.侧面图(中间平台与盖玻片之间有高度为0.1毫米的间隙)
1mm/20格
5X4
1/400mm2
1、记录目镜测微尺的标定结果，以及所测
量的酵母细胞大小。
物镜 4× 10× 40× 目尺格数 小方格数 目尺校正值（μm）
40 100 100
20 20 5
25 10 2.5
显微镜下对应的测微尺格数 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 平均值（μm）
长 宽
1、用血球计数板进行酵母菌液计数并记录结果。 一般在每个计数室中取5个中方格(左上、左下、右上、右下、 中间）进行计数，数两个计数室。可拍照后在电脑上数。
各中格中的菌数 1 第一室 第二室 1ml=1立方厘米 2 3 4 5 菌数 /ml 二室 平均数
A
B
A表示五个中方格的总菌数；B表示菌液的稀释倍数。
（二）酵母细胞大小的测定
1、利用血球计数板在中、高倍镜下（10×、40×）标定目镜 测微尺。 2、取一滴酵母菌菌悬液制成水浸片。 3、移去血球计数板，换上酵母菌水浸片，先在低倍镜下找到 目的物，然后在高倍镜下用目镜测微尺来测量酵母菌菌体 的长，宽各占几格（不足一格的部分估计到小数点后一位 数）。测出的格数乘上目镜测微尺每格的校正值，即等于 该菌的长和宽。选取10个不同大小酵母细胞进行大小测定 并记录结果（观察到的是平均大小）。
目尺格数1cm100格一血球计数板计数1检查血球计数板2菌悬液加样先盖盖玻片3显微镜下计数并记录4清洗血球计数板用水冲洗不要用硬物或刷子去刷四实验方法二酵母细胞大小的测定1利用血球计数板在中高倍镜下1040标定目镜测微尺
【2017年整理】实验八酵母菌的形态观察及死活细胞鉴别
实验八酵母菌的形态观察及死活细胞鉴别一、实验目的1.观察酵母菌的形态及出芽生殖方式；2. 学习区分酵母菌死活细胞的实验方法；3.掌握酵母子囊孢子的观察方法。
二、实验原理1. 酵母菌酵母菌是不运动的单细胞真核微生物，其大小通常比常见细菌大几倍甚至十几倍，不必染色即可用显微镜观察其形态。
但由于细胞个体大，采用涂片的方法制片有可能损伤细胞，一般通过美蓝染液水浸片法或水-碘液浸片法来观察酵母细胞。
大多数酵母以出芽方式进行无性繁殖，也可以通过接合产生子囊孢子进行有性繁殖。
本实验通过美蓝染液水浸片法来观察酵母的形态和出芽生殖方式，并对酵母细胞进行死活染色鉴别。
2. 美蓝染液美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型无色。
用美蓝溶液对酵母活细胞染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型，而对代谢作用微弱或死细胞，无此还原能力或还原能力极弱，而被美蓝染成蓝色或淡蓝色。
因此，不仅用此法可观察酵母细胞形态，也可用来鉴别酵母菌的死细胞和活细胞。
三、实验材料1. 菌种酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)培养1天的麦芽汁(或豆芽汁)液体培养物。
2. 溶液或试剂0.1%吕氏碱性美蓝溶液、5%孔雀绿水溶液、0.5%番红水溶液、95%乙醇，等。
3．器材显微镜，擦镜纸，吸水纸，载玻片、盖玻片、酒精灯、接种环、镊子等等。
四、实验步骤1、酵母菌出出芽方式的观察及死活鉴定（1）在载玻片中央加一滴0.1%吕氏碱性美蓝染色液，然后按无菌操作接种蘸取取少量液体酵母放在染液中，混合均匀，染液不宜过多。
注：染液不宜过多或过少，否则，在盖上盖玻片时，菌液会溢出或出现大量气泡。
用接种环将菌体与染液混合时，不要剧烈涂抹，以免破坏细胞。
（2）用镊子取一块盖玻片，先将一边与菌液接触，然后慢慢将盖玻片放下使其盖在菌液上。
注：盖玻片不宜平放，以免产生气泡。
（3）将制片立即放在显微镜下镜检，先用低倍镜然后用高倍镜观察酵母的形态和出芽情况，并根据颜色来区别死活细胞。
实验七 酵母菌的形态观察、死活细胞鉴定及血球计数法
实验七 酵母菌的形态观察、死活细 胞鉴定及血球计数
（三）显微镜计数 3、加样品 将清洁干燥的血细胞计数板先盖上盖玻片，再 用无菌的毛细滴管将摇匀的酵母菌悬液由盖 玻片边缘滴一小滴，沿缝隙靠毛细渗透作用 自动进入计数室，再用镊子轻压盖玻片，以 免菌液过多将盖玻片顶起而改变了计数室的 容积。加样后静置5min，使细胞自然沉降。
二、实验原理
以25个中方格的计数板为例，设5个中方格中的 总菌数为A，菌液稀释倍数为B，则：
1ml菌液中的总菌数=A/5×25×104×B=50 000AB
以16个中方格的计数板为例，设5个中方格中的 总菌数为A，菌液稀释倍数为B，则：
1ml菌液中的总菌数=A/5×16×104×B=32 000AB
实验七 酵母菌的形态观察、死活细 胞鉴定及血球计数
一、实验目的
1、观察酵母菌的形态及出芽生殖方式，学 习区分酵母菌死活细胞的实验方法； 2、掌握酵母菌的一般形态特征及其与细菌 的区别；
3、明确血细胞计数板计数的原理，以及使 用血细胞计数板进行微生物计数的方法。
实验七 酵母菌的形态观察、死活细 胞鉴定及血球计数
实验七 酵母菌的形态观察、死活 细胞鉴定及血球计数
五、实验操作 （三）显微镜计数 5、清洗 使用完毕后，先用自来水冲洗血细胞计数板及 盖玻片，再用95%的乙醇棉球清洗，吸水纸 吸干后，放回盒中，以备下次使用。
实验七 酵母菌的形态观察、死活细 胞鉴定及血球计数
六、实验作业 1、将显微计数的结果记录于表1中，A表示5个中方格 中的总菌数，B表示菌液的稀释倍数。
二、实验原理 计数室的容积：
1mm（大方格的边长）×1mm（大方格的边长）×0.1mm（盖 玻片与载玻片之间的厚度）=0.1mm3（10-4ml）
实验酵母菌形态结构观察微生物大小测定和微生物PPT文档共21页
血球计数板计数操作步骤
实验指导：p70
实验内容 1、水浸片法（美兰染色法）观察酵母菌形态大小、出芽生
殖并计算酵母细胞的存活率（一个视野中）。 2、用血球计数板计算酵母菌悬液中，每毫升原液的菌数。 3、用测微尺测量酵母菌细胞的大小。
实验报告 •绘出酵母细胞的形态结构图 •P70-71:六、七 •P67:六、七(2)
实验酵母菌形态结构观察微生物大小 测定和微生物
41、俯仰终宇宙，不乐复何如。 42、夏日长抱饥，寒夜无被眠。 43、不戚戚于贫贱，不汲汲于富贵。 44、欲言无予和，挥杯劝孤影。 45、盛年不重来，一日难再晨。及时 当勉励 ，岁月 不待人 。
用油镜不能观察到目标
观察目标不在视野内 没有调好焦距 镜头不干净
酿酒酵母形态结构（40× 10），美蓝染色法
▪
26、要使整个人生都过得舒适、愉快，这是不可能的，因为人类必须具备一种能应付逆境的态度。——卢梭
▪
27、只有把抱怨环境的心情，化为上进的力量，才是成功的保证。——罗曼·罗兰
▪
28、知之者不如好之者，好之者不如乐之者。——孔子
▪
29、勇猛、大胆和坚定实验及实验报告总结
革兰氏染色结果： 大肠杆菌
革兰氏阴性细菌 苏云金芽孢杆菌
革兰氏阳性细菌
革兰氏染色的要点
❖ 涂片务求均匀，切忌太厚 ❖ 染料必须覆盖所有涂片区域，染料不要干
枯 ❖ 脱色时间要把握好 ❖ 必须选用适龄菌体 ❖ 设置对照
第一次实验报告总结
• 90分以上—— • 主要问题：
❖没有按照要求画图 ❖没有写出最终实验结果 ❖分析讨论部分太笼统，不具体
光线没有调好
注意：在进行微生物显微观察时，一定要 区分微生物和杂质
实 验7 酵母菌的形态观察
实验7酵母菌的形态观察、大小测定和直接计数一、实验目的酵母菌的形态及出芽生殖，学习区分酵母菌死活细胞的实验方法；学习并掌握用测微尺测定微生物大小和使用血球计数板进行微生物计数的方法。
二、实验原理1.酵母菌形态观察酵母菌个体较大，常规涂片方法可能损伤细胞，因此用美蓝染液水浸片法观察其出芽生殖。
美蓝染液的氧化形式蓝色，还原形式无色。
活细胞由于新陈代谢，细胞内还原性物质还原美蓝而呈现无色，死细胞或代谢能力弱的细胞不能将美蓝还原呈现蓝色。
2.细胞大小测量微生物大小的测定需借助测微尺：目镜测微尺和镜台测微尺。
镜台测微尺用于矫正目镜测微尺，总长1mm，分100个小格，每小格10μm。
目镜测微尺是一块可放入目镜的圆形玻片，有50小格和100小格2种。
由于不同显微镜或不同的目镜和物镜组合放大倍数不同，目镜测微尺每小格代表的实际长度也不一样。
因此，用目镜测微尺测量微生物大小时，必须先用镜台测微尺进行校正，以求出该显微镜在一定放大倍数的目镜和物镜下，目镜测微尺每小格所代表的相对长度，然后根据微生物细胞相当于目镜测微尺的格数，计算出细胞的实际大小。
3.细胞计数血细胞计数板，大格1.0mm，体积0.1m3。
三、步骤1.酵母菌观察1)在载玻片中央加一滴0.05%吕氏碱性美蓝染色液，用滴管取1滴酵母菌菌液于染液中，混合均匀。
2)加盖玻片。
3)将制片放置约3min后镜检，先用低倍镜然后用高倍镜观察酵母菌的形态和出芽情况，并根据颜色区别死、活细胞。
4)染色约0.5h后再次进行观察，观察死细胞数量是否增加。
5)形态记录，计算0.5h后酵母菌的死亡率。
2.细胞大小测量1)装目镜测微尺：把目镜上的透镜旋下，将目镜测微尺刻度朝下放在目镜镜筒内的格板上，然后旋上目镜透镜，再将目镜插入镜筒内。
2)校正目镜测微尺：将镜台测微尺刻度面朝上放在显微镜载物台上。
校正：先用低倍镜观察，将镜台测微尺有刻度的部分移至视野中央，调节焦距，当清晰地看到镜台测微尺的刻度后，转动目镜使目镜测微尺的刻度与镜台测微尺的刻度平行。
实验七 酵母菌细胞大小的测定
实验七酵母菌细胞大小的测定一、实验目的1.了解测量微生物大小的原理；2.学习并掌握接目测微尺的校正方法及微生物大小的测定方法，增强微生物细胞大小的感性认识。
二、实验材料1.菌种：啤酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）菌悬液2.仪器或其他用具：显微镜，接目测微尺，镜台测微尺，载玻片，盖玻片三、实验原理微生物细胞的大小是微生物基本的形态特征，也是分类鉴定的依据之一。
微生物细胞个体较小，需要在显微镜下借助于特殊的测量工具—测微尺来测定其大小。
测微尺包括镜台测微尺和接目测微尺。
镜台测微尺是一张中央部分刻有精确等分线的载玻片，专门用于校定接目镜测微尺每小格的相对长度。
通常，刻度的总长是1mm，被等分为100格，每格0.01mm（即10μm）。
镜台测微尺不直接用来测量细胞的大小。
接目测微尺是一块可以放入接目镜的圆形小玻片，其中央有精确的等分刻度，有等分为50小格和100小格的两种。
在测量时将接目测微尺放在目镜的隔板上，即可来测量经显微镜放大后的细胞物象。
也有专用的目镜，里面已经安放好了接目测微尺。
由于接目测微尺所测量的是经显微镜放大后的细胞物象，因此，在不同的显微镜或不同的目镜和物镜组合放大倍数不同，接目镜测微尺每一小格所代表的实际长度也不一样。
所以，在用接目测微尺测量微生物大小之前，必须先用镜台测微尺校定接目镜测微尺，以确定该显微镜在特定放大倍数的目镜和物镜下，接目镜测微尺每一小格所代表的实际长度，然后根据微生物细胞相当于的接目镜测微尺格数，计算出微生物细胞的实际大小。
图7-1测微尺的安装图7-2目镜测微尺图7-3用镜台测微尺校正接目测微尺四、操作步骤1.装接目测微尺：取下显微镜的目镜，换上专用目镜。
如果没有专用的目镜，则取下显微镜的目镜，旋下透镜，将接目镜测微尺刻度朝下放在接目镜的隔板上，再旋上目镜透镜，将装有测微尺的目镜装回镜筒。
2.接目测微尺的标定：1)放镜台测微尺：将镜台测微尺刻度面朝上固定在显微镜的载物台上，注意不可放反。
实验七 酵母菌的形态观察及微生物的显微直接计数法
美蓝是一种无毒的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型无色。用美蓝 对酵母的活细胞进行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较 强的还原能力，使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。因此，具有 还原能力的酵母活细胞是无色的，而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞 则呈蓝色，借此即可对酵母菌的死活细胞进行鉴别。
（二）微生物显微镜直接计数
1．视待测菌悬液浓度，加无菌水适当稀释（斜面一般稀释到 10-2，每个小方格5－10个菌体为宜），以每小格的菌数可数 为度。 2．取洁净的血球计数板一块，在计数区上盖上一块盖玻片。 3．将酵母菌悬液摇匀，用滴管或毛细吸管吸取少许，由盖玻 片边缘滴一小滴，让菌液沿缝隙靠毛细渗透作用自动进入计 数室，使计数室充满菌液。
实验六 酵母菌的形态观察及微生物的显 微直接计数法
一、实验目的
1
2
学习并掌握形态观察及死活细胞的鉴别方法。
了解血球计数板的构造、计数原理和计数方法，掌握显微镜下微生
物直接计数的方法。 二、实验原理 1 酵母菌形态观察及死活细胞的鉴别 酵母菌是不运动的单细胞真核微生物，其大小通常比细菌大几十倍 甚至十几倍。大多数以出芽方式进行无性繁殖，有的分裂繁殖；有性繁 殖是通过接合产生子囊孢子。本实验是通过美蓝染液水浸片或水—碘液 水浸片来观察酵母的形态和出芽生殖方式。
2、美蓝镜片的观察 1 ）在载玻片中央加一滴 0.1%吕氏碱性美蓝染色掖，然后按无菌操作
用接种环挑取少量酵母菌苔放在染液中，混合均匀。
2）用镊子取一块盖玻片，先将一边与菌液接触，然后慢慢将盖玻片放 下使其盖在菌液上。
3）将制片放置约3min后镜检，先用低倍镜然后用高倍镜观察酵母的形
态和出芽情况，并根据颜色来区别死活细胞。 4）染色约0.5h后再次进行观察，注意死活细胞数量是否增加。
微生物实验酵母菌的计数形态观察
微生物学实验开课时间： 2015 年3 月20 日实验名称：功能微生物的形态观察（三）酵母菌的形态观察、大小测定和直接计数1.实验记录（包括实验现象和原始记录）1）观察酵母菌形态。
①取一干净的载玻片，滴一滴蒸馏水，轻轻挑取老师准备好的酵母菌适量，蘸于蒸馏水上制成水玻片，盖上盖玻片，直接在显微镜下观察②先在10倍镜下找到酵母菌，然后40倍镜拍照下图为酵母菌的形态（放大倍数：15×40）2）酵母菌的大小测定①将盒子里的镜台测微尺置于载物台上，注意刻度朝上，分别在4、10、40倍下数出它与目镜测微尺的重合格数，完成目镜测微尺的校正②记录观察到的酵母菌大小，主要数酵母菌的长与宽所占的格数，注意尽量找大小不同，范围较大的酵母菌10个③酵母菌的数量计数取清洁无油的血细胞计数板，盖上盖玻片，将酵母菌液摇匀，在盖玻片边缘滴几小滴，注意让菌液自行渗入计数室内，静置5min，在40倍镜下计数，选取9宫格中央的小室，计数如下（只数上边和左边的酵母菌）A室注：上面的图片均摄于2015 年4月10 日。
2.结果与分析1）酵母菌在显微镜下要比细菌大得多，不具有鞭毛，明显有细胞核，在显微镜下形成一个明亮的光圈2）校正目镜测微尺后，根据公式：目镜测微尺每格长度（um）=两重和线间镜台测微尺格数*10/两重合线间目镜测微尺格数，计算出每格长度分别是4倍（25）、10倍（10）、40倍（2.5），即酵母菌大小计算每格为2.5um因此菌体大小范围为（4.8—9.5）×（5.3-11.8）um3）酵母菌的计数结果如下图3.结论1）酵母菌的形态特征：对比细菌，酵母菌要大得多，并且酵母菌细胞核而细菌只有拟核，有些细菌还有鞭毛而酵母菌没有，呈椭圆状2）酵母菌的大小：酵母菌的大小经实验得出，大概范围为（4.8—9.5）×（5.3-11.8）um3）酵母菌数量：本实验中酵母菌的数量大致为7.9×108 个/ml4.思考题1）当接目镜不变，目镜测微尺也不变，只改变接物镜，目镜测微尺每格所量的镜台上物体的实际长度是否相同？为什么？答：不同，物镜成实像于目镜前方，标尺即位于物镜所成实像的位置（在对好焦后），目镜成虚像于明视距离，所以物镜倍数增大以后，原来占一个单位长度的实像现在会占不同的单位，即测微尺每格所代表的长度不同2）结合你的实验体会，总结哪些因素会造成血细胞计数板的计数误差，应如避免？答：1.活细胞和死细胞不易分开，数出来的是活死细胞的总和2.细胞溶液必须均匀，再用之前要震荡均匀，否则细胞沉在试管底部，容易出现误差应该避免操作误差，实验时每次使用细胞溶液都要震荡均匀5.认识与体会1）熟练操作显微镜，并可以在观察时计数2）掌握了血细胞计数法的使用3）了解了酵母菌一般的大小和形态特征。
实验七酵母菌的形态观察大小测定及直接计数护理课件
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利用血球计数板在显微镜下直接计数酵母菌的数量。血球计数板上有不同规格的方格，每个方格内可以容纳一定数量的酵母菌。通过数方格内的酵母菌数量，可以计算出一定体积内的酵母菌数量。
利用电子计数器对酵母菌进行计数。该方法可以快速准确地计数大量酵母菌的数量，但需要使用专门的仪器设备。
血球计数板法
电子计数器法
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实验步骤
Chapter
显微镜
取一滴酵母菌培养液滴在盖玻片上，放在显微镜下观察。
注意观察酵母菌的形态特征，如细胞壁、细胞膜、细胞核等。
记录观察结果，并绘制酵母菌形态图。
取一滴酵母菌培养液滴在血球计数板上，用吸管轻轻吹散。
在显微镜下观察，使用记号笔在血球计数板的方格边缘上标记酵母菌。
本实验为护理学领域提供了观察和计数酵母菌的方法，有助于了解酵母菌的分布和数量。
感谢观看
THANKS
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由于显微镜的放大倍数和观察者的主观因素，可能导致形态描述存在误差。
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在测量酵母菌大小时，由于细胞形状的不规则性，可能导致测量结果存在误差。
本实验结果可以为护理学领域提供参考，指导护理实践中的消毒和清洁工作。
未来可以进一步研究酵母菌在不同环境下的生长和繁殖情况，为护理学领域提供更全面的数据支持。
形态观察总结
在观察过程中，我们发现酵母菌的形态会随着培养环境和生长阶段的变化而有所差异。例如，在营养丰富的环境下，酵母菌的形态可能会更加饱满，而在营养匮乏的环境下，酵母菌的形态可能会变得细长。这些形态特征的变化可以帮助我们了解酵母菌的生长状况和适应环境的能力。
形态观察结果分析
酵母形态观察及死活细胞鉴别微生物大小测定显微镜直接计数法
三、实验器材
1 菌种：酿酒酵母
2 仪器：显微镜、载玻片、盖玻片等
四、实验步骤
美蓝浸片的观察 (1) 在载玻片中央加一滴0.1％吕氏碱性美蓝染色液，然后 按无菌操作用接种环挑取少量酵母菌苔放在染液中，混 合均匀。（染液不宜过多或过少，否则，在盖上盖玻片 时，菌液会溢出或出现大量气泡而影响观察。） (2) 用镊子取一块盖玻片，先将一边与菌液接触，然后慢慢 将盖玻片放下使其盖在菌液上。镜检。 (3) 将制片放置约3min后再次镜检并对照，先用低倍镜然后 用高倍镜观察酵母的形态和出芽情况，并根据颜色来区 别死活细胞。 •滴加染液－涂片－加盖玻片－镜检－3min后再次镜检
计算 次数左 上右 上源自右 下左 中 下 间
中方格 中细胞 总数
稀释 菌浓度 倍数 （个/ml）
第 1次 第 2次 第 3次 平均值
结 束
请注意实验台面清洁！ 请值日生留下来打扫卫生！
二、基本原理
酵母菌是单细胞真核微生物，通常以出芽方式进 行无性繁殖，有的进行分裂繁殖；通过接合产生 子囊孢子进行有性繁殖，有性繁殖要在特定培养 条件下才能进行。
染料美蓝氧化型呈蓝色，还原型无色。用美蓝对 酵母活细胞染色时，由于细胞分泌的还原酶，能 使美蓝由蓝色的氧化型转变为无色的还原型。借 此即可对酵母菌的死活细胞进行鉴别。
三、实验器材
1 菌种：酿酒酵母 2 仪器：血球计数板、显微镜、载玻片、盖 玻片等
实验七、八 酵母菌形态与大小测定
实验结果
• 设计一个表格，内容：不同浓度、不同时间下酵 母菌的活细胞数和死亡细胞数。 • 绘制一张图，该图可明确区分出活细胞和死细胞， 标明美兰的浓度、作用时间、放大倍数，
分析讨论
• 相同浓度不同时间进行活细胞和死细胞计数有无 差别，可能原因是什么？ • 不同浓度相同时间进行活细胞和死细胞计数有无 差别，可能原因是什么？
镜台测微尺
• 镜台测微尺是中央部分刻有精确等分 线的载玻片。 • 一般将1cm等分为100格，每格长度等 于0．01cm（即100μm）。是专用于校 正目镜测微尺每格长度的。
目镜测微尺
• 目镜测微尺是一块可放在接目镜内的隔板上的 圆形小玻片，其中央刻有精确的刻度，有等分 50小格或100小格两种，每5小格间有一长线相 隔。 • 由于所用接目镜放大倍数和接物镜放大倍数的 不同，目镜测微尺每小格所代表的实际长度也 就不同，因此，目镜测微尺不能直接用来测量 微生物的大小，在使用前必须用镜台测微尺进 行校正，以求得在一定放大倍数的接目镜和接 物镜下该目镜测微尺每小格的相对值，然后才 可用来测量微生物的大小。
实验八 微生物大小的测定
一、目的要求
• 1、学习并掌握用测微尺测定微生物 大小的方法。 • 2、了解目镜测微尺和镜台测微尺的原理 • 3、增强对微生物细胞大小的感性认识。
二、实验器材及用品
• 1、菌种 酵母菌 • 2、仪器或其它用具 目镜测微尺，镜台测微尺，显微镜。
三、基本原理
• 微生物细胞大小，是微生物的形态特征之一，也 是分类鉴定的依据之一。由于菌体很小，只能在 显微镜下测量。用来测量微生物细胞大小的工具 有目镜测微尺和镜台测微尺。
实验七 酵母菌的形态观察及 死活细胞的鉴别、细胞活力测定
实验目的
酵母菌大小的测定及细胞计数实验目的学会测ppt课件
(6)当遇到位于大格线上的酵母菌，一般只计数大 方格的上方和右方线上的酵母细胞(或只计数下方 和左方线上的酵母细胞)。 (7)对每个样品计数三次，取其平均值，按下列公 式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数。
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3.计算公式 (1)16格×25格的血球计数板计算公式：
酵母细胞数／ml=100小格内酵母细胞个数／ 100×400×104×稀释倍数 (2)25格x16格的血球计数板计算公式：
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4.酵母菌大小的测定 (1)取下物镜测微尺，换上酵母菌水浸制片。 (2) 测 量 菌 体 的 长 度 和 宽 度 各 占 目 镜 测 微 尺 几 格 ， 然后换算出菌体的实际长度。 (3)在同一标本上测定5-10个菌体，求其平均值。
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(二)酵母细胞数的测定操作方法 1.血球计数板的构造
血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制 玻片制成的。玻片中有四条下凹的槽，构成三个 平台。中间的平台较宽，其中间又被一短横槽隔 为两半，每半边上面个刻有一个方格网。方格网 上刻有9个大方格，其中只有中间的一个大方格 为计数室，供微生物计数用。这一大方格的长和 宽各为1m，深度为，其体积为0.1mm3。
酵 母 细 胞 数 ／ ml=80 小 格 内 酵 母 细 胞 个 数 ／ 80×400×104×稀释倍数
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4.血球计数板的清洁 血球汁数板使用后，用自来水冲洗，切勿用硬
物洗刷，洗后自行晾干或用吹风机吹干，或用95％ 的乙醇、无水乙醇、丙酮等有机溶剂脱水使其干燥。 通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物。 Βιβλιοθήκη 不干净，则必须重复清洗直到干净为止。
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计数室通常有两种规格。一种是大方格内分为16中格， 每一中格又分为25小格；另一种是大方格内分为25中 格，每一中格又分为16小格。但是不管计数室是哪一 种构造；它们都有一个共同的特点，即每一大方格都 是由16×25=25×16=400个小方格组成，见图。
酵母菌大小的测定和细胞计数
(2)25格x16格的血球计数板计算公式： 酵母细胞数／ml=80小格内酵母细胞个数／ 80×400×104×稀释倍数
4.血球计数板的清洁 血球汁数板使用后，用自来水冲洗，切勿用硬 物洗刷，洗后自行晾干或用吹风机吹干，或用95％ 的乙醇、无水乙醇、丙酮等有机溶剂脱水使其干燥。 通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物。 若不干净，则必须重复清洗直到干净为止。
实验二 酵母菌大小的测定和细胞计数 一、实验目的 1、学会测微尺和血球计数板的使用方法。 2、建立对微生物大小的概念。
二、实验材料 1、显微镜、物镜测微尺、目镜测微尺、血球计数 板、载玻片等。 2、麦芽汁培养基、酵母菌。 3、吸管、吸水纸等。
三、实验原理 (一)酵母菌大小的测定原理 所有微生物的大小需要用刻有一定刻度的测微 尺来测量，先用绝对长度的物镜测微尺来校正不表 示绝对长度的目镜测微尺，计算后者每格所代表的 实际长度，然后放上待测的标本，用目镜测微尺测 定标本上微生物细胞占目镜测微尺的格数，就可计 算该微生物的大小。酵母菌的直径约8-10μ m。
2.目镜测微尺的标定 (1)取下接目镜，旋下目镜上的目透镜，将目镜测微 尺放人接目镜的中隔板上，使有刻度的一面朝下， 再旋上目透镜，并装入镜筒内。 (2)将物镜测微尺置于显微镜的载物台上，使有刻度 的一面朝上，同观察标本一样，使具有刻度的小圆 圈位于视野中央。 (3)先用低倍镜观察，对准焦距，待看清物镜测微尺 的刻度后，转动目镜，使目镜测微尺的刻度与物镜 测微尺的刻度相平行，并使两尺的左边第一条线相 重合，再向右寻找两尺的另外一条重合线。如图 (4)记录二条重合线间的目镜测微尺的格数和物镜测 微尺的格数。
(二)酵母细胞计数原理 微生物常用的计数方法有两种，即直接计数法 和间接计数法。前者利用血球计数板在显微镜下直 接计数，能立即得到数值，但死活细胞都计数在内。 后者是在乎板上长成菌落后再计数，反应较真实， 但费时太长。本实验是利用血球计数板进行直接计 数。计数前需对样品做适当稀释，按照规定方法及 计算公式运算后，即可得出实际数值。