生物试剂取用需要注意事项
rna提取试剂盒的提取流程及注意事项
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全血基因组DNA提取试剂盒使用说明
全血基因组DNA提取试剂盒使用说明一、试剂盒组成及存储条件:1.试剂盒包括蛋白酶K、缓冲液、洗涤缓冲液、脱水溶液等。
2.试剂盒应存放在4℃以下避光干燥处,避免冻结。
二、实验前准备:1.准备所需的实验耗材和设备,如离心管、恒温振荡器、离心机等。
2.取出全血样品,可以是新鲜全血或已离心制备的全血细胞。
三、DNA提取步骤:1.取出全血样品,用洗涤液洗涤细胞沉淀并离心收集,去除红细胞。
2.加入蛋白酶K将细胞裂解,释放DNA。
3.加入缓冲液和脱水溶液,沉淀DNA并洗涤。
4.最终稀释DNA并保存在适当的条件下。
四、实验注意事项:1.操作过程中需注意无菌操作,避免污染。
2.加入蛋白酶K的量应准确控制,不要过多或过少。
3.混合溶液时需轻轻摇匀,避免气泡的产生。
4.稀释保存DNA时,需使用无核酸酶的载体溶液,如TE缓冲液。
五、质控及结果分析:1.可以通过琼脂糖凝胶电泳或比色法检测提取的DNA质量。
2.检测DNA浓度和纯度,确保提取的DNA适用于后续实验。
3.可以保存提取好的DNA样品,以备后续实验使用。
六、应用领域:1.该试剂盒适用于从全血样品中提取DNA,可用于基因分析、疾病诊断、遗传研究等领域。
2.可以用于个体基因检测、种群遗传学研究、药物反应性研究等。
总结:全血基因组DNA提取试剂盒是用于从全血样品中提取DNA的重要工具,操作简便、提取效率高。
在实验中需注意操作规范,保证提取的DNA质量和纯度。
该试剂盒广泛应用于科研领域,为基因研究和临床诊断提供了有力支持。
希望上述使用说明能够帮助用户正确、高效地使用全血基因组DNA提取试剂盒。
核酸提取步骤及注意事项
核酸提取步骤及注意事项---摘要核酸提取是生物学实验中常见的重要步骤,用于从样本中纯化和获得核酸。
本文将介绍核酸提取的基本步骤,并指出一些需要注意的事项。
---1. 核酸提取的基本步骤1. 样品准备:选择合适的样品进行核酸提取,如细胞、组织、血液等。
样品应保存在适当的条件下,以保持其完整性和稳定性。
在提取过程中,应保持样品的纯净度,避免污染和降解。
2. 细胞破碎:使用适当的方法破碎细胞膜,如机械破碎、化学溶解、超声波破碎等。
破碎时应注意温度控制、避免核酸降解,以及避免悬浮液的污染。
3. 溶解和脱脂:加入适量的溶解缓冲液和脱脂试剂,使核酸从其他杂质中分离。
溶解和脱脂过程应遵循规定的条件和比例,确保高效分离和纯化。
4. 酶解和消化:添加酶解缓冲液和酶解试剂,以去除蛋白质、RNA等杂质。
在酶解和消化过程中,应注意适当的时间和温度,以避免核酸的降解和损失。
5. 提取和纯化:通过离心、过滤、凝胶电泳等方法,将核酸从溶液中分离出来。
提取和纯化过程中,应注意操作的规范和准确性,以确保获得高质量的核酸。
6. 纯化和检测:使用柱层析、电泳、分光光度计等方法,对提取的核酸进行纯化和检测。
纯化和检测过程中,应遵循操作规程,进行准确的数据记录和结果分析。
---2. 注意事项1. 工作区域:核酸提取应在干净的实验室环境中进行,避免外界污染和其他干扰因素的干扰。
实验室应定期进行消毒和清洁,并保持适当的温度和湿度。
2. 工具和试剂:使用高质量的工具和试剂,避免因质量差的材料而导致实验出现问题。
试剂的保存条件和有效期限应按照说明书要求进行,避免使用已过期或变质的试剂。
3. 操作规范:在核酸提取过程中,应根据标准操作规程进行操作,严格遵守实验室安全和操作规范。
严禁接触裸露的皮肤、吸入有害气体,必要时应佩戴个人防护装备。
4. 试剂交叉污染:为避免试剂交叉污染,应使用干净的工具,确保每个步骤使用新的试剂和材料。
严禁在不同实验或样品中混用相同的工具,以避免导致污染和误差。
高中生物试验DNA的粗提取和鉴定试验中应注意的问题
高中生物实验DNA的粗提取和鉴定实验中应注意的问题⑴充分搅拌鸡血细胞液。
DNA存在于鸡血细胞的细胞核中。
将鸡血细胞液与蒸馏水混合后,必须用玻璃棒沿一个方向快速搅拌,使鸡血细胞加速破裂,并释放出DNA。
⑵沉淀DNA时必须用冷酒精。
实验前必须准备好大量的体积分数为95%的酒精,并在冰箱中至少存放24h。
⑶正确搅拌含有悬浮物的溶液。
实验步骤3、5、7都需要用玻璃棒搅拌。
在进行步骤3、5时,玻璃棒不要直接接触烧杯底部,而且搅拌要轻缓,以便获得较完整的DNA分子。
进行步骤7时,要将玻璃棒插入烧杯中溶液的中间,用手缓慢转动5min〜10min。
本实验中鉴定DNA的方法为二苯胺法。
如果在没有二苯胺的情况下也可以用以下几种方法。
典例解析下列关于“DNA的粗提取与鉴定”的实验原理中,说法错误的是A.DNA在氯化钠溶液中的溶解度随溶液浓度的变化而改变 B.利用DNA不溶于酒精的性质,可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNAC.DNA是大分子有机物,不溶于水而溶于某些有机溶剂D.DNA溶液中加入二苯胺试剂经沸水浴后会出现蓝色反应答案:C下列关于实验操作的说法中,有误的是()A.该实验中有两次加入蒸馏水,均是为了析出DNAB.该实验学生操作中多次用到搅拌,除最后一步未强调方向外,其余均要求单向搅拌C.该实验中有3次过滤,过滤时使用纱布层数与需用滤液或黏稠物有关D.实验三次加入NaCl溶液,无论浓度是2mol/L,还是0.015mol/L,均是为了溶解DNA解析:对照比较表可知,除A说法有误外,其余各项均正确。
两次加蒸馏水,第一次是为了使细胞吸水破裂释放出核物质(DNA),第二次是为了降低NaCl溶液的浓度从而析出DNA。
⑷DNA粘稠物的再溶解:;⑸提取杂质较少的DNA白色乳状丝状物:;⑹鉴定DNA是否存在可用试剂:。
解析:⑹鉴定DNA是否存在常用:二苯胺试剂沸水浴为蓝色反应;也可选用甲基绿试剂,其颜色反应为蓝绿色。
生物实验作业安全操作指南
生物实验作业安全操作指南在进行生物实验作业时,确保安全是至关重要的。
这不仅关乎到实验的顺利进行,更关系到我们自身的健康和生命安全。
下面将为大家详细介绍生物实验作业中的安全操作要点和注意事项。
一、实验前的准备1、了解实验内容在进行实验之前,一定要仔细阅读实验教材和相关资料,充分了解实验的目的、步骤、原理以及可能存在的风险。
对于不明白的地方,要及时向老师或同学请教。
2、穿着合适的服装进入实验室时,应穿着长袖长裤,最好是白色的实验服,以防止化学试剂溅到身上。
同时,要穿上封闭的鞋子,避免脚部受伤。
3、佩戴个人防护用品根据实验的要求,佩戴合适的防护用品,如护目镜、手套、口罩等。
护目镜可以保护眼睛免受化学试剂和飞溅物的伤害;手套可以防止皮肤直接接触化学试剂和生物样本;口罩可以过滤空气中的有害物质。
4、检查实验设备和试剂在开始实验之前,要仔细检查实验设备是否完好,仪器是否正常运行。
同时,要检查试剂的标签是否清晰,是否在有效期内,以及试剂的储存条件是否符合要求。
二、实验室安全规则1、严禁饮食和吸烟实验室是一个严肃的工作场所,严禁在实验室内饮食、吸烟和嚼口香糖。
因为实验室中的化学试剂和生物样本可能会被误食或吸入,对身体造成危害。
2、保持实验室整洁实验结束后,要及时清理实验台和仪器设备,将用过的试剂和仪器放回原处。
保持实验室的整洁和有序,不仅可以提高工作效率,还可以减少安全隐患。
3、遵守操作规程严格按照实验操作规程进行实验,不得随意更改实验步骤和方法。
如果需要对实验进行改进或创新,必须在老师的指导下进行。
4、正确使用电器设备实验室中的电器设备要正确使用,不得私自拆卸和修理。
在使用电器设备之前,要检查电线是否完好,插头是否松动。
使用完毕后,要及时关闭电源。
5、处理废弃物实验过程中产生的废弃物要分类处理,如化学试剂要倒入指定的废液桶中,生物样本要进行无害化处理。
不得随意丢弃废弃物,以免造成环境污染和安全事故。
三、化学试剂的使用安全1、识别化学试剂的危险性在使用化学试剂之前,要了解其危险性,如是否易燃、易爆、有毒、有腐蚀性等。
人教版高中生物新教材常见实验材料使用注意事项总结
人教版高中生物新教材常见实验材料使用注意事项总结1.斐林试剂(甲液:质量浓度为0.1g/ml 的NaOH溶液,乙液:质量浓度为):将斐林试剂甲液和乙液等量混合,再将混合后的斐林试剂0.05g/ml 的CuSO4注入待测组织样液,50-65℃水浴加热约2min,如待测组织样液中存在还原糖,则由蓝色转为砖红色沉淀。
2.双缩脲试剂(A液:质量浓度为0.1g/ml 的NaOH,B液:质量浓度为0.01g/ml):向待测液中先注入双缩脲试剂A液1ml,摇匀,再向其中加入双缩脲的 CuSO4试剂B液4滴,摇匀。
如待测组织样液中存在多肽或蛋白质,则由浅蓝色转为紫色。
3.质量浓度为0.01g/ml的苏丹Ⅲ染液:取在花生子叶薄片上滴2-3滴苏丹染液,用吸水纸吸去染液,再滴加1-2滴体积分数为50%的酒精溶液,洗去浮色。
检测脂肪,可将脂肪染成橘黄色。
4.碘液:鉴定淀粉,淀粉遇碘液变蓝。
5.健那绿(活性染色剂):用于检测线粒体,使线粒体染色呈蓝绿色。
6.酒精:①体积分数为50%的酒精溶液:在苏丹Ⅲ染液检测脂肪实验中用于洗去浮色。
②70%的酒精溶液:用于菊花组织培养实验中对操作者双手、超净工作台台面及流水冲洗后的外植体消毒。
③体积分数为95%的酒精溶液:和质量浓度为15%的盐酸等体积混合,作为解离液,可用于解离根尖,使细胞分散开来;在低温诱导植物细胞染色体数目变化实验中,用于洗去卡诺氏液。
④预冷的95%的酒精溶液:DNA不溶于酒精,尤其是不溶于体积分数为95%的预冷酒精,而细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精,据此可以用于DNA的粗提取。
⑤100%的酒精溶液(无水乙醇):用于色素的提取。
7.盐酸:①盐酸能改变细胞膜的通透性,加速染色剂的跨膜运输。
②盐酸使染色体中的DNA与蛋白质分离,便于DNA与染色剂的结合。
③物质的量浓度为0.01mol/L的盐酸:用于影响酶活性的条件实验;用于模拟生物体维持pH 稳定实验。
④质量浓度为15%的盐酸:和体积分数为95%的酒精溶液等体积混合作为解离液,可用于解离根尖,使细胞分离开来。
使用DNA提取试剂盒有哪些注意事项?
使用DNA提取试剂盒有哪些注意事项?
使用试剂盒提取DNA是一种常见的DNA提取方法,它提供了方便和标准化的操作流程。
以下是在使用试剂盒提取DNA时需要注意的几个重要事项:
实验室安全:在进行任何实验操作前,务必遵守实验室安全规范。
佩戴实验室个人防护装备,如实验手套、实验服和护目镜,确保实验环境的卫生和安全。
试剂保存:检查试剂盒的有效期和储存条件。
确保试剂的完整性和保存状态,避免使用过期或受损的试剂。
样本准备:根据试剂盒的说明书准备样本。
样本类型可以是细胞、组织或其他生物材料。
确保样本质量和数量符合试剂盒要求,避免使用受污染或质量不佳的样本。
操作流程:仔细阅读并按照试剂盒的操作手册执行步骤。
遵循说明书中的指导,严格按照操作顺序和时间表进行操作。
确保准确称量和混合试剂,并注意任何特殊的温度和时间要求。
避免污染:DNA提取过程中严格控制污染的发生。
使用无DNase、RNase和蛋白酶的试剂和工具,避免外源性DNA的污染。
同时,使用无菌技术和无菌操作条件,防止细菌或其他污染物的引入。
质量控制:进行质量控制步骤,如阳性和阴性对照的添加和检测。
数据记录:在实验过程中记录关键的实验参数、样本信息和操作步骤。
这将有助于追踪实验过程和数据分析,并在需要时进行结果验证和复现。
废弃物处理:遵循正确的废弃物处理程序,将废弃物分别投放到适当的容器中,确保遵守实验室的废弃物管理规定。
总之,使用试剂盒提取DNA时,准确遵循试剂盒的操作手册和注意事项,确保实验的准确性、可靠性和安全性。
高中生物所有试剂总结归纳
高中生物所有试剂总结归纳高中生物实验是培养学生动手实践、观察能力的重要环节。
试剂是进行生物实验的必备物品,不同试剂具有不同的用途和特点。
本文将总结和归纳高中生物课程中常见的试剂,以及它们的用途和相关知识,帮助学生更好地了解和应用试剂。
一、生物实验常用试剂1. 盐酸(HCl):常用于调节溶液的酸碱度,也可以用于溶解金属和辅助消化。
2. 氢氧化钠(NaOH):常用于调节溶液的酸碱度,也可以用于沉淀反应和试剂溶解。
3. 氯化铁(FeCl3):常用于检测苯酚和酚类物质。
4. 碘化钾(KI):常用于检测淀粉、脱色反应及观察酶促反应。
5. 醋酸(CH3COOH):常用于溶解盐类,也可以用于检测碳酸氢盐。
6. 葡萄糖(C6H12O6):常用于营养试剂、观察酵母发酵等实验。
7. 新洁尔灭:常用于实验室卫生,可有效杀灭细菌和病毒。
二、试剂的使用注意事项1. 注意试剂的保存:一些试剂需要低温保存,避免暴露在阳光下,同时要防止试剂受潮、变质。
2. 使用试剂时要戴好防护装备:使用一些腐蚀性试剂时,应戴上防护眼镜、实验手套和实验袍等。
避免试剂对皮肤和眼睛造成伤害。
3. 试剂使用时要按照实验操作规程进行:要遵循实验操作的标准程序,按照实验要求进行稀释、混合等操作,保证实验操作的准确性和安全性。
4. 避免试剂的混合和误用:有些试剂具有反应性,与其他试剂混合会发生剧烈反应,导致安全事故。
在使用试剂时要仔细查看试剂瓶上的标签和说明,避免试剂的误用。
5. 废弃试剂的处理:废弃试剂需要按照环保规定进行处理,避免对环境造成污染。
三、实例应用:DNA提取实验中的试剂DNA提取是生物实验中常见的实验操作之一。
以下是DNA提取实验中常用的一些试剂及其用途:1. 细胞裂解液:主要用于破坏细胞膜和核膜,使细胞内的DNA暴露在外。
2. 乙酰基解阻剂(Proteinase K):用于降解细胞内的蛋白质,防止其对DNA产生影响。
3. 高盐溶液:用于沉淀细胞残渣和蛋白质。
分子生物学实验报告试剂
一、实验背景分子生物学是一门研究生物大分子如核酸、蛋白质等结构与功能的科学。
在分子生物学实验中,试剂的选择和使用对实验结果的准确性至关重要。
本实验报告将详细介绍分子生物学实验中常用的试剂及其作用。
二、实验试剂1. 核酸提取试剂(1)酚/氯仿:用于从细胞中提取DNA和RNA,具有强烈的蛋白变性作用。
(2)异丙醇:用于DNA的沉淀,降低DNA的溶解度。
(3)无水乙醇:用于RNA的沉淀,降低RNA的溶解度。
(4)RNA酶抑制剂:防止RNA降解,保证实验结果的准确性。
2. DNA提取试剂(1)Tris-HCl缓冲液:用于DNA的提取,调节pH值,保持酶的活性。
(2)EDTA:抑制金属离子与DNA结合,防止DNA降解。
(3)SDS(十二烷基硫酸钠):用于蛋白质的变性,使蛋白质与DNA分离。
(4)蛋白酶K:降解蛋白质,去除蛋白质杂质。
3. DNA纯化试剂(1)琼脂糖凝胶:用于DNA的分离和纯化。
(2)DNA纯化试剂盒:用于DNA的纯化和回收。
4. DNA扩增试剂(1)PCR反应缓冲液:提供反应所需的pH值、盐浓度等。
(2)dNTPs(脱氧核苷三磷酸):作为PCR反应的原料。
(3)引物:用于PCR反应的特异性扩增。
(4)Taq酶:DNA聚合酶,负责DNA的合成。
5. DNA检测试剂(1)溴化乙锭(EB):用于DNA的染色,便于在紫外光下观察。
(2)琼脂糖凝胶电泳缓冲液:用于DNA的电泳。
(3)DNA标记物:用于DNA的定量分析。
6. 蛋白质提取试剂(1)裂解缓冲液:用于蛋白质的提取,保证蛋白质的完整性。
(2)蛋白酶抑制剂:防止蛋白质降解。
(3)SDS:使蛋白质变性,便于与核酸分离。
7. 蛋白质纯化试剂(1)柱层析:用于蛋白质的纯化。
(2)凝胶过滤:用于蛋白质的纯化。
8. 蛋白质检测试剂(1)考马斯亮蓝G-250:用于蛋白质的定量分析。
(2)BCA法:用于蛋白质的定量分析。
(3)SDS-PAGE凝胶:用于蛋白质的分离和纯化。
DNA与RNA的提取与注意事项
18.所有旧塑料制品都必须用0.5M的NaOH处理10分钟,用双蒸水彻底冲洗,DEPC-H20浸泡过夜后灭菌。
19.无法用DEPC处理的用具可用氯仿擦拭若干次,这样通常可以消除RNA酶的活性。
但氯仿会溶解某些塑料制品,应当注意。
20.RNase Away TM试剂可以替代DEPC,操作简单,价格低,且无毒性。
只需将RNase Away TM 直接倒在玻璃器皿和塑料器皿的表面,浸泡后用水冲洗去除,即可以快速去除器皿表面的RNase,并且不会残留而干扰后继实验。
21.如果您需要远距离运输或长期储藏RNA样品,建议先将标本(细胞、组织)保存在RNA保存液(RNAwait、RNAlater)中,使细胞内的RNA与RNA酶分离,在室温可以保存7天,4℃可以保存4周,-20℃、-80℃可以长期存档保存标本,RNA质量不受影响,用各类方法抽提仍可以获得高质量的RNA。
公司档案管理制度一、总则1、为加强本公司档案工作,充分发挥档案作用,全面提高档案管理水平,有效地保护及利用档案,为公司发展服务,特制定本制度。
2、公司档案,是指公司从事经营、管理以及其他各项活动直接形成的对公司有保存价值的各种文字、图表、声像等不同形式的历史记录。
公司档案分为受控档案和非受控档案。
3、公文承办部门或承办人员应保证经办文件的系统完整(公文上的各种附件一律不准抽存)。
结案后及时归档。
工作变动或因故离职时应将经办的文件材料向接办人员交接清楚,不得擅自带走或销毁。
二、文件材料的收集管理1、公司指定专人负责文件材料的管理。
2、文件材料的收集由各部门或经办人员负责整理,交总经理审阅后归档。
3、一项工作由几个部门参与办理的,在工作中形成的文件材料,由主办部门或人员收集,交行政部备案。
会议文件由行政部收三、归档范围1、重要的会议材料,包括会议的通知、报告、决议、总结、典型2、本公司对外的正式发文与有关单位来往的文书。
3、本公司的各种工作计划、总结、报告、请示、批复、会议记录、统计报表及简报。
生物学实验操作规范与安全
生物学实验操作规范与安全生物学实验是探索生命奥秘、推动科学进步的重要手段,但在实验过程中,操作规范与安全至关重要。
只有遵循严格的操作流程和安全准则,才能确保实验的准确性、可靠性,同时保障实验人员的身体健康和环境的安全。
一、实验前的准备在进行生物学实验之前,充分的准备工作是必不可少的。
首先,要明确实验的目的和步骤,仔细阅读实验指导手册,了解实验所涉及的原理、方法和可能存在的风险。
对于初次进行的实验,更要多查阅相关资料,向有经验的人员请教。
选择合适的实验设备和材料也是关键。
确保仪器设备完好无损、精度准确,并且经过校准和消毒。
实验材料的质量和纯度要符合实验要求,同时要注意其保存条件和有效期。
制定详细的实验计划,包括实验的时间安排、人员分工等。
合理的分工可以提高实验效率,减少错误的发生。
二、个人防护装备进入实验室,必须穿戴适当的个人防护装备。
这包括实验服,它可以保护身体免受化学试剂和生物样本的污染。
佩戴护目镜可以防止化学物质溅入眼睛,造成伤害。
在处理可能产生粉尘或气溶胶的实验时,需要佩戴口罩,防止吸入有害物质。
手套也是必不可少的,根据实验的性质选择不同材质和厚度的手套,如乳胶手套、丁腈手套等。
还要注意头发的束缚,避免头发掉落影响实验或者接触到危险物质。
三、实验室环境安全实验室应保持整洁、通风良好。
定期清理实验台面和仪器设备,避免杂物堆积和细菌滋生。
实验产生的废弃物要分类存放,按照规定进行处理。
例如,化学废液要倒入专门的废液桶,生物样本要经过消毒或无害化处理。
对于有特殊要求的实验,如需要无菌环境或特定的温度、湿度条件,要提前做好相应的准备和控制。
四、实验操作规范在进行实验操作时,要严格按照步骤进行,不得随意更改。
例如,在使用移液器吸取液体时,要选择合适的量程,操作手法要正确,避免产生误差和交叉污染。
在进行细胞培养等精细操作时,要保持动作轻柔、稳定,防止对细胞造成损伤。
使用显微镜等仪器时,要按照正确的方法调试和观察,不得违规操作。
快速提取RNA试剂盒的使用注意事项
快速提取RNA试剂盒的使用注意事项1、细胞数建议不超过300万,最多不超过500万,否则可能会堵塞离心柱。
当细胞数较多时(例如使用6cm dish),裂解后可以先12000g离心1分钟,然后取上清加等体积乙醇,充分混匀后上柱;2、如果加入乙醇后有显著的沉淀产生,则用枪吹打,将沉淀吹至看不见为止,然后上柱;3、4000g离心1分钟后,如果柱子中仍然有液体残留,可以用12000g离心;4、对于细胞量很少的样品,或者客户对RNA产量要求较高的情况:实验开始前可以先把洗脱液放到65度,加入洗脱液后,可以室温放置1~2分钟,使RNA充分溶解,然后离心,然后再将得到的RNA加入柱子中放置5分钟,重复洗脱一次。
5、洗脱液的体积不可太少或太多,建议通常加20~30微升洗脱液即可。
6、如果实验对极少量的基因组残留很敏感,可以在4000g离心后,用随试剂盒附赠的DNA 酶处理:每个样品的柱子中央加入12 ul稀释好的DNase(按照2 ul DNA酶+10 ul ddH2O的比例稀释,用枪吹打混匀)客户常问到的问题1、这个试剂盒能不能加入裂解液以后先冻存起来,等到样品都收集齐了再一起做?答:细胞样品可以加入裂解液后,充分混匀,vortex震荡使细胞充分裂解,然后冻存于-80度。
理论上能保存的时间跟TRIzol保存的时间相当。
2、这个试剂盒能提的最小细胞量是多少,组织最少能做多少?答:常规的细胞(如293T等及常见的细胞,如癌细胞等),最低5万个就可以提出RNA,更少的细胞数需要自己尝试做优化。
对于T、B细胞等免疫细胞,由于其体积远小于常规细胞(大约只有常规细胞的几十分之一),因此能提取的最低细胞数需要明显增加,最低需要100万以上。
3、关于组织RNA的提取,有什么需要注意的吗?答:本试剂盒提取细胞样品的RNA最简便,提取组织样品时有一定的局限,只能提取内脏组织、肿瘤组织等相对易于裂解的组织。
提取组织样品时,样品用量不可过多,建议用5mg 组织。
高中生物实验DNA的粗提取和鉴定实验中应注意的问题
高中生物实验DNA的粗提取和鉴定实验中应注意的问题⑴充分搅拌鸡血细胞液。
DNA存在于鸡血细胞的细胞核中。
将鸡血细胞液与蒸馏水混合后,必须用玻璃棒沿一个方向快速搅拌,使鸡血细胞加速破裂,并释放出DNA。
⑵沉淀DNA时必须用冷酒精。
实验前必须准备好大量的体积分数为95%的酒精,并在冰箱中至少存放24h。
⑶正确搅拌含有悬浮物的溶液。
实验步骤3、5、7都需要用玻璃棒搅拌。
在进行步骤3、5时,玻璃棒不要直接接触烧杯底部,而且搅拌要轻缓,以便获得较完整的DNA分子。
进行步骤7时,要将玻璃棒插入烧杯中溶液的中间,用手缓慢转动5min~10min。
本实验中鉴定DNA的方法为二苯胺法。
如果在没有二苯胺的情况下也可以用以下几种方法。
典例解析下列关于“DNA的粗提取与鉴定”的实验原理中,说法错误的是A.DNA在氯化钠溶液中的溶解度随溶液浓度的变化而改变B.利用DNA不溶于酒精的性质,可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNAC.DNA是大分子有机物,不溶于水而溶于某些有机溶剂D.DNA溶液中加入二苯胺试剂经沸水浴后会出现蓝色反应答案:C下列关于实验操作的说法中,有误的是()A.该实验中有两次加入蒸馏水,均是为了析出DNAB.该实验学生操作中多次用到搅拌,除最后一步未强调方向外,其余均要求单向搅拌C.该实验中有3次过滤,过滤时使用纱布层数与需用滤液或黏稠物有关D.实验三次加入NaCl溶液,无论浓度是2mol/L,还是0.015mol/L,均是为了溶解DNA解析:对照比较表可知,除A说法有误外,其余各项均正确。
两次加蒸馏水,第一次是为了使细胞吸水破裂释放出核物质(DNA),第二次是为了降低NaCl溶液的浓度从而析出DNA。
⑷DNA粘稠物的再溶解:;⑸提取杂质较少的DNA白色乳状丝状物:;⑹鉴定DNA是否存在可用试剂:。
解析:⑹鉴定DNA是否存在常用:二苯胺试剂沸水浴为蓝色反应;也可选用甲基绿试剂,其颜色反应为蓝绿色。
(其它略) 答案:⑴蒸馏水⑵2mol/L NaCl溶液⑶蒸馏水⑷2mol/L NaCl溶液⑸冷却的体积分数为95%的酒精⑹二苯胺试剂或甲基绿试剂(带*的为重点实验)实验一:生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定**实验材料的选择:1.可溶性还原糖的鉴定:生物组织中的糖类有还原糖和非还原糖两类。
真菌dna提取注意事项
真菌dna提取注意事项以真菌DNA提取注意事项为标题的文章一、引言真菌是一类广泛存在于自然界的微生物,具有重要的生态和经济价值。
研究真菌的基因组结构和功能,对于理解其生物学特性、开发新的药物和农业生物技术具有重要意义。
而要进行真菌基因组研究,首先需要进行真菌DNA的提取。
下面将介绍一些真菌DNA提取的注意事项。
二、样品的选择和预处理1. 样品的选择:应选择新鲜、健康的真菌菌丝体或孢子作为提取DNA的样品,确保样品中DNA的完整性和纯度。
2. 样品的处理:在提取DNA之前,需要对样品进行适当的处理,如去除杂质、洗涤等,以确保提取到的DNA质量优良。
三、DNA提取试剂的选择1. 试剂的纯度:选择高纯度的试剂,以减少杂质对DNA提取的干扰。
2. 试剂的稳定性:确保所选试剂的稳定性,避免试剂在提取过程中发生降解或变质。
四、提取条件的优化1. 细胞破碎方法的选择:根据不同真菌的特性,选择合适的细胞破碎方法,如机械破碎、化学破碎或酶解等。
2. 提取缓冲液的配制:根据真菌细胞壁的特性,选择适宜的提取缓冲液,以实现高效的DNA提取。
3. 温度和时间的控制:在细胞破碎和DNA纯化过程中,控制好温度和时间的条件,以充分溶解细胞膜和去除杂质,确保提取到高质量的DNA。
五、DNA质量的评估1. 浓度的测定:使用比色法或荧光法等方法,准确测定提取到的DNA的浓度,以确保后续实验的需要。
2. 纯度的评估:通过比较DNA的吸收光谱,评估提取到的DNA 的纯度,避免样品中的蛋白质、RNA等杂质的干扰。
六、存储和保存1. 存储条件的选择:将提取到的DNA溶液保存在-20℃的冰箱中,避免DNA的降解和变性。
2. 容器的选择:选择无酶、无细菌的无菌离心管或冻存管,避免DNA的污染和降解。
3. 保存时间的控制:根据实际需要和实验进展,控制好DNA样品的保存时间,避免长时间保存导致DNA的降解和变性。
七、结论通过合理的样品选择和预处理、合适的试剂选择、优化的提取条件、准确的DNA质量评估以及合理的存储和保存,可以获得高质量的真菌DNA样品。
dna提取的基本步骤及注意事项
dna提取的基本步骤及注意事项DNA提取是分子生物学和遗传学研究中的重要步骤,它可以从生物样本中分离出DNA,为后续的实验和研究提供基础。
以下是DNA 提取的基本步骤及注意事项:一、样本采集1.选择合适的样本:DNA提取可以从多种生物样本中进行,如血液、口腔拭子、组织等。
根据研究目的选择合适的样本。
2.样本采集:采集样本时要注意避免污染和损坏,使用无菌工具和容器进行采集,并储存在低温条件下,以保持DNA的完整性。
二、细胞破碎1.细胞破碎方法:细胞膜是DNA提取的主要障碍,需要使用适当的方法破碎细胞膜,如机械破碎、化学破碎或酶解等。
不同的样本和研究目的可能需要不同的破碎方法。
2.破碎条件控制:在破碎细胞时要注意温度、时间和破碎缓冲液的选择,以保证DNA的完整性和纯度。
三、DNA纯化1.蛋白质去除:DNA提取后可能存在蛋白质、RNA等杂质,需要使用蛋白酶、盐析等方法去除。
注意选择适当的去除方法,避免对DNA的损伤。
2. DNA沉淀:通过添加盐和醇类物质,使DNA从溶液中沉淀下来。
沉淀条件的控制对于提高DNA纯度至关重要。
3. DNA溶解:将DNA沉淀物溶解在适当的缓冲液中,以便后续的实验和储存。
四、DNA质量检测1.比色法:通过比色反应,可以初步判断DNA的浓度和质量。
常用的比色法有吸光度测定法和荧光染料染色法。
2.凝胶电泳:通过凝胶电泳可以进一步检测DNA的大小、纯度和完整性。
根据研究目的选择适当的凝胶,如琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶。
注意事项:1.实验环境要保持清洁和无菌,避免污染样本和提取的DNA。
2.使用无菌工具和试剂,避免外源性DNA的污染。
3.严格控制实验条件,如温度、时间和pH值等,以保证DNA的完整性和纯度。
4.注意样本的储存条件,如低温和避光,以避免DNA的降解和损伤。
5.根据实验目的选择合适的提取试剂盒,以提高提取效率和纯度。
总结:DNA提取是分子生物学和遗传学研究的基础步骤,它从样本中分离出DNA,为后续的实验和研究提供基础。
有毒有害废液及废旧化学试剂处理办法
山西大学化学实验教学中心有毒有害废液及废旧化学试剂处理办法为了实验室的安全与整洁,并控制对环境的污染,必须规范有毒有害废液及废旧化学试剂的管理,为此,特制定本办法。
一、有毒有害废液及废旧试剂的存放实验室的废弃化学试剂和实验产生的有毒有害废液、废物,严禁向下水口倾倒或随垃圾丢弃,不可将废弃的化学试剂放在楼道、阳台、庭院等公共场合,违者将受到严格追查和处罚。
有毒有害废液及废弃化学试剂应按下述规定放置:1.固体,一般应保存在(原)旧试剂瓶中,并注明是废弃试剂,暂存在试剂柜中。
2.液体,化学化工学院统一购置塑料桶(分三类并印有标志)发给各化学实验室,用以分别收集含卤素有机物、一般有机物、无机物废液。
废液收集桶应随时盖紧,并放于实验室较阴凉的位置。
进入废液收集桶的主要有毒有害成分须在《化学废弃物记录单》上登记,要写有毒有害成分的全称或化学式,不可写简称或缩写。
桶满后,将记录单粘贴在相应的桶上。
3.有害废液不包括含剧毒试剂的废液,剧毒废液不可直接放入上述三类收集桶中,其具体处理办法见我院“关于剧毒试剂管理的补充规定”。
二、有毒有害废液及废弃试剂的消纳处理1.废液的回收处理实验室的废液桶装满后,相应的实验技术人员通知实验中心,由实验中心安排人员收运废液,同时发空桶。
回收的废液暂时集中存放,视存量适时与主管部门和化学危险品处理厂联系进行消纳。
收运及消纳工作由实验中心的相关人员负责组织、院办公室协调配合。
2.废弃试剂的回收处理当实验室准备处理废弃化学试剂(固体、液体)时,可填写《废弃试剂登记表》,交到实验中心,由实验中心负责联系处理或消纳。
实验中心在处理消纳的前一天通知实验室将废弃试剂放到指定位置。
3.废弃剧毒试剂的回收处理当实验室准备处理废弃剧毒化学试剂(固体、液体)时,可填写《废弃剧毒试剂登记表》,交到实验中心,由实验中心负责与主管部门联系处理或消纳。
试剂库在处理消纳之前通知实验室将废弃剧毒试剂送到实验中心,处理之后实验中心将公安局开据的《剧毒试剂消纳单》复印件发给实验室,以便销帐。
斐林试剂的使用技巧
斐林试剂的使用技巧斐林试剂是一种常用的化学试剂,主要用于检测生物体中铁离子的含量。
下面介绍一些斐林试剂的使用技巧。
1. 准备试剂:斐林试剂是由1%的溴己烷溶液和0.1%的吖啶溶液组成的,因此需要事先准备好这两种溶液。
2. 取样:首先需要将待测样品(例如血液、植物组织等)进行提取,通常使用氯仿等溶剂进行提取。
提取过程中要注意避免将水分、金属离子等杂质带入样品中,以免影响最后的试剂反应。
3. 添加试剂:将提取得到的生物样品溶液滴加到试管中,然后向其中加入适量的斐林试剂。
一般情况下,斐林试剂的用量为样品溶液的10倍体积。
加入试剂后,要轻轻摇晃试管使试剂充分混合。
4. 观察反应:斐林试剂与铁离子形成红色或紫色络合物,反应后试管中溶液的颜色会发生变化。
反应时间一般为10-15分钟,但具体时间要根据所检测的样品类型和样品中铁离子的含量来确定。
5. 测定浓度:通过光谱法或比色法,可以测定试管中溶液的吸光度或颜色深浅,从而判断样品中铁离子的浓度。
一般情况下,吸光度越高或颜色越深,说明样品中铁离子的含量越多。
6.注意事项:(1)斐林试剂对眼睛和皮肤有刺激性,使用时要戴上手套和护目镜,避免直接接触皮肤和眼睛。
(2)试剂使用后要尽快密封保存,避免阳光直射和潮湿。
(3)斐林试剂对样品的溶剂要求较高,通常需要使用无机溶剂如氯仿等进行提取。
(4)在使用斐林试剂时要控制试剂用量和反应时间,避免试剂过量或反应时间过长导致结果不准确。
总之,使用斐林试剂对生物样品中的铁离子进行检测时,需要准备好试剂和样品,合理控制试剂的用量和反应时间,注意安全操作,并根据测定结果进行相应数据分析。
医院微生物学试剂管理制度
医院微生物学试剂管理制度一、总则为了保证医院微生物学实验室试剂的正确使用和管理,维护实验室的正常运行秩序,特制定本管理制度。
二、试剂采购1.试剂采购需要经过实验室负责人批准,根据实验室的需求制定采购计划。
2.采购需要提前与供应商对接,确认产品的规格、质量和价格,并签订合同。
3.试剂采购过程中应注意选择质量可靠的供应商,并及时跟踪到货情况。
三、试剂入库1.试剂入库需要在入库登记簿上记录试剂名称、规格、数量、生产厂商和有效期等信息,并签字确认。
2.动物源试剂和生物危险试剂入库,需严格按照相关规定进行检疫和消毒处理。
3.入库后,试剂需妥善保存在指定的存储区域,注意防潮、防晒和防火。
4.超过有效期或者质量受损的试剂需及时淘汰,不得继续使用。
四、试剂领用和归还1.实验室人员需要根据实验需求填写试剂领用单,并经过实验室负责人审批。
2.领用试剂时需准确记录试剂名称、规格、数量和领用日期等信息,并签字确认。
3.使用完毕的试剂需及时归还,登记归还日期并签字确认。
4.实验室负责人需定期盘点试剂库存,核对实际库存与账面库存的一致性。
五、试剂使用1.在使用试剂之前需要查阅试剂说明书,了解正确使用方法和注意事项。
2.严禁试剂交叉污染,使用前需彻底清洗工作台、试管和显微镜等实验器材。
3.动物源试剂和生物危险试剂需在生物安全柜中操作,避免对人员和环境造成危害。
4.使用试剂时应按照实验室安全操作规程进行,遵循正确的操作步骤和个人防护要求。
六、试剂废弃1.试剂废弃需经过实验室负责人批准,按照相关规定进行废弃处理。
2.废弃试剂需进行分类储存,并经过专门的药品废弃处理单位进行处理。
3.严禁将试剂废弃物随意丢弃或倾倒,以免对环境造成污染。
七、试剂管理档案1.实验室需建立健全试剂管理档案,包括试剂采购、入库、使用和废弃等环节的记录。
2.试剂管理档案需归档保存,每年进行一次备份,并定期进行检查。
八、制度执行和责任追究1.实验室负责人有责任组织实验室内试剂的管理工作,并严格执行本制度。
二中分子生物学实验室操作注意事项(2篇)
二中分子生物学实验室操作注意事项一.实验室药品由指定人员负责。
未经负责人许可,不可随意使用和外借。
二.超净工作台的使用:A键―开关电源,同时开启紫外灯(使用前开启紫外灯半个小时,工作时应把该灯关闭), B、C键―调节风力大小,D键关闭紫外灯。
使用超净台时,应注意观察紫外灯是否已经关闭。
三.摇床和恒温培养箱可放置过夜使用,但鼓风干燥箱在离开实验室应该关闭其电源。
干燥箱的设置温度不可超过70度。
(已经设置好,无须再调整干燥箱温度)四.可调电炉,切勿将电线接触炉壁,小心使用电炉,不可将附近的窗帘等易燃物点燃。
五.电泳边的试剂有毒,使用时小心。
六.三层架的第一层放置干净的器皿,第三层放置药品―这些药品十分昂贵,使用时切勿浪费。
七.PE手套用于做有毒实验,乳胶手套(较贵)用于做含有腐蚀性药品的实验。
八.移液枪的使用:每把移液枪都有指定用途,不可随意使用。
对于挥发性试剂应用特定的移液枪。
取液时不可直接把枪探入试剂瓶。
应从试剂瓶倒少许入烧杯等容器再取样。
九.洗涤器皿:先把器皿用肥皂水浸泡过夜,再用清水洗涤两次,最后再用蒸馏水洗一遍,最后用干燥箱干燥。
十.电子天平:称量较贵的药品时,应注意少量多次称量,避免浪费。
若称量过量时不可将药品重新放回药盒中,以免污染药品。
药勺不可交叉使用,使用完后用水冲洗干净,然后用纸擦干净。
称量有毒药品的用具应经过特殊处理。
十一.电冰箱:电冰箱里面有强腐蚀性药品和一些贵重试剂,切勿将其电源关闭。
开关冰箱门应轻缓。
十二.水槽:在水槽中倒入有毒废弃液后,应用大量水冲洗。
十三.垃圾:垃圾应该分类放置,一个用于放置有毒药品,一个放置废弃培养基,一个用于放置生活垃圾。
十四.药品的标注:配制药品本人应该在药品上贴上标签,写上配制者姓名、配置时间、试剂名称。
十五.开水:烧完开水应该把开水放置于对面没有实验的桌子上。
避免饮用水污染,保证试验人员的身体健康。
十六.最后离开实验室的人应该检查实验室的窗户,电源,水源有无关好,切记关掉干燥箱电源。
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生物试剂取用需要注意事项
生物试剂、指有关生命科学研究的生物材料或有机化合物,以及临床诊断、医学研究用的试剂。
生命科学面广,生物试剂产品种类繁多、性质复杂生。
主要有电泳试剂、泽普试剂、离心分离试剂、免疫试剂、标记试剂、组织化试剂、培养基、缓冲液、蛋白质、标准品等等。
上海吉至生化科技有限公司是一家致力于生化试剂与生命科学领域产品的研发与销售的综合性试剂公司。
试剂规格划分,可分为高纯、光谱纯、基准、实验纯、优级纯、分析纯和化学纯等。
1.优级纯:又称为一级品或者保证试剂,纯度为99.8%纯度高,含杂质低主要用于精密分析工作和科学研究工作。
2.分析纯:二级纯,纯度高,纯度为99.8%略次于优级纯,适合重要分析及一般研究类工作。
3.化学纯:三级纯、99.5%,纯度与分析纯相差比较大,适合用于工况以及学校用于分析工作。
4.实验试剂称之为四级试剂。
5.基准试剂:专作为基准物使用,可直接配置标准溶液。
6.光谱纯试剂:表示光谱纯净,由于有机物质在光谱上显示不出,所以有时成分达不到99.9%以上,使用时需要注意,特别是作为基准物,必须进行标定。
7.纯度远高于优级的试剂纯度叫做高纯度试剂,纯度为99.99%
生物试剂的取用注意事项:
1.固体粉末试剂可用洁净的牛角勺取用,需要取一定量的固体时,可把固体放在纸上或表面皿上在台秤上称量。
要准确称量时,则用称量瓶在天平上进行称量。
2.液体试剂常用量筒量取,量筒的容量为:5mL、10mL、50mL、500mL等数种,使用时要把量取的液体注入量筒中,使视线与量筒内液体凹面的最低处保持水平,然后读出量筒上的刻度,即得液体的体积。
3.需少量液体试剂则可用滴管取用,取用时应注意不要将滴管碰到或插入接收容器的壁上或里面。