CYP2C19基因多态性检测

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CYP2C19基因多态性检测的临床实验室性能验证

ＤＯＩ：１０．１３６０２／ｊ．ｃｎｋｉ．ｊｃｌｓ．２０２１．０３．１７·质量管理研究·ＣＹＰ２Ｃ１９基因多态性检测的临床实验室性能验证李婧，李林静，刘转，杨文娟，马青梅，张安安，杨海棠，刘泽菁，刘欣跃（兰州大学第二医院检验医学中心，兰州７３００３０）摘要：目的　对人细胞色素Ｐ４５０酶等位基因（ＣＹＰ２Ｃ１９）多态性检测试剂盒进行性能验证。

方法　根据中国合格评定国家认可委员会ＣＮＡＳＧＬ０３９：２０１９《分子诊断检验程序性能验证指南》相关要求，结合试剂盒说明书，从符合率、精密度、检出限和抗干扰能力４个方面对“人ＣＹＰ２Ｃ１９基因多态性检测试剂盒（荧光ＰＣＲ法）”进行性能验证。

符合率验证采用荧光ＰＣＲ法和Ｓａｎｇｅｒ测序法检测；精密度验证选择杂合突变ＣＹＰ２Ｃ１９ｃ．６８１ＧＡ、ｃ．６３６ＧＡ样本进行检测；抗干扰能力验证判断基因型检测是否受影响。

结果　ＰＣＲ法和Ｓａｎｇｅｒ测序法的检测符合率为１００％；ＣＹＰ２Ｃ１９ｃ．６８１Ｇ和Ａ等位基因的ＦＡＭ和ＲＯＸ荧光通道精密度检测ＣＶ值分别为３．７８％、１．７６％、３．７６％和３．５６％；ＣＹＰ２Ｃ１９ｃ．６３６Ｇ和Ａ等位基因的ＦＡＭ和ＲＯＸ荧光通道精密度检测ＣＶ值分别为３．０８％、２．８１％、３．４０％和３．７３％；样本最低检出限为１０ｎｇ／μＬ；抗干扰能力验证显示基因型可以正常检测。

结论　人ＣＹＰ２Ｃ１９基因多态性检测试剂盒（荧光ＰＣＲ法）符合ＩＳＯ１５１８９质量管理要求，可以为临床提供准确可靠的检测结果。

关键词：细胞色素Ｐ４５０酶等位基因；基因多态性；性能验证中图分类号：Ｒ４４６．９文献标志码：ＡＰｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｖｅｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｆｏｒｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆＣＹＰ２Ｃ１９ｇｅｎｅｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｉｎｃｌｉｎｉｃａｌｌａｂｏｒａｔｏｒｙＬＩＪｉｎｇ，ＬＩＬｉｎｊｉｎｇ，ＬＩＵＺｈｕａｎ，ＹＡＮＧＷｅｎｊｕａｎ，ＭＡＱｉｎｇｍｅｉ，ＺＨＡＮＧＡｎａｎ，ＹＡＮＧＨａｉｔａｎｇ，ＬＩＵＺｅｊｉｎｇ，ＬＩＵＸｉｎｙｕｅ（ＣｌｉｎｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙＣｅｎｔｅｒ，ＬａｎｚｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＳｅｃｏｎｄＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｌａｎｚｈｏｕ７３００３０，Ｇａｎｓｕ，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　ＴｏｖｅｒｉｆｙｔｈｅｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｏｆｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｋｉｔｓｆｏｒｈｕｍａｎｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅＰ４５０ｅｎｚｙｍｅａｌｌｅｌｅ（ＣＹＰ２Ｃ１９）ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　ＡｃｃｏｒｄｉｎｇｔｏＣｈｉｎａ′ｓＣｏｎｆｏｒｍｉｔｙＡｓｓｅｓｓｍｅｎｔ（ＣＮＡＳ）ＮａｔｉｏｎａｌＡｐｐｒｏｖａｌＣｏｍｍｉｔｔｅｅＣＮＡＳＧＬ０３９：２０１９“ＧｕｉｄａｎｃｅｏｎｔｈｅＰｅｒｆｏｒｍａｎｃｅＶｅｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｆｏｒＭｏｌｅｃｕｌａｒＤｉａｇｎｏｓｔｉｃＰｒｏｃｅｄｕｒｅｓ”ｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈｔｈｅｒｅａｇｅｎｔｉｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ，ｆｏｕｒａｓｐｅｃｔｓｏｆｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｓｆｏｒｔｈｅｈｕｍａｎＣＹＰ２Ｃ１９ｇｅｎｅｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｄｅｔｅｃｔｉｏｎｋｉｔ（ｒｅａｌｔｉｍｅｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅＰＣＲ），ｉ．ｅ．，ｃｏｉｎｃｉｄｅｎｃｅｒａｔｅ，ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ，ｄｅｔｅｃｔｉｏｎｌｉｍｉｔａｎｄａｎｔｉｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅａｂｉｌｉｔｙ，ｗｅｒｅｖｅｒｉｆｉｅｄ．ＴｈｅｃｏｉｎｃｉｄｅｎｃｅｒａｔｅｗａｓｖｅｒｉｆｉｅｄｂｙｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅＰＣＲａｎｄＳａｎｇｅｒｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ．ＴｈｅｓａｍｐｌｅｓｏｆｈｅｔｅｒｏｚｙｇｏｕｓｍｕｔａｎｔＣＹＰ２Ｃ１９ｃ．６８１ＧＡａｎｄｃ．６３６ＧＡｗｅｒｅｓｅｌｅｃｔｅｄｔｏｖｅｒｉｆｙｔｈｅｐｒｅｃｉｓｉｏｎ．Ｔｈｅａｎｔｉｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅａｂｉｌｉｔｙｔｅｓｔｗａｓｕｓｅｄｔｏａｓｓｅｓｓｔｈｅｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅｓｏｆｇｅｎｏｔｙｐｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　ＴｈｅｃｏｉｎｃｉｄｅｎｃｅｒａｔｅｏｆｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆＰＣＲａｎｄＳａｎｇｅｒｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇｗａｓ１００％．ＣＶｖａｌｕｅｓｏｆｐｒｅｃｉｓｉｏｎｖｅｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＦＡＭａｎｄＲＯＸｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｃｈａｎｎｅｌｓｆｏｒＣＹＰ２Ｃ１９ｃ．６８１ａｌｌｅｌｅｓＧａｎｄＡｗｅｒｅ３．７８％，１．７６％，３．７６％ａｎｄ３．５６％，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＣＶｖａｌｕｅｓｏｆｐｒｅｃｉｓｉｏｎｖｅｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｆｏｒＦＡＭａｎｄＲＯＸｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｃｈａｎｎｅｌｓｏｆＣＹＰ２Ｃ１９ｃ．６３６ａｌｌｅｌｅｓＧａｎｄＡｗｅｒｅ３．０８％，２．８１％，３．４０％ａｎｄ３．７３％，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅｍｉｎｉｍｕｍｄｅｔｅｃｔｉｏｎｌｉｍｉｔｏｆｓａｍｐｌｅｓｗａｓ１０ｎｇ／μＬ．Ｔｈｅｖｅｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｆｏｒａｎｔｉｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅａｂｉｌｉｔｙｓｈｏｗｅｄｔｈａｔａｌｌｔｈｅｇｅｎｏｔｙｐｅｓｃｏｕｌｄｂｅｄｅｔｅｃｔｅｄｎｏｒｍａｌｌｙ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　ＴｈｅｋｉｔｆｏｒｈｕｍａｎＣＹＰ２Ｃ１９ｇｅｎｅｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｄｅｔｅｃｔｉｏｎ（ｒｅａｌｔｉｍｅｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔＰＣＲ）ｃｏｎｆｏｒｍｅｄｔｏＩＳＯ１５１８９ｑｕａｌｉｔｙｍａｎａｇｅｍｅｎｔｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓａｎｄｃｏｕｌｄｐｒｏｖｉｄｅａｃｃｕｒａｔｅａｎｄｒｅｌｉａｂｌｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｒｅｓｕｌｔｓｆｏｒｃｌｉｎｉｃａｌｐｒａｃｔｉｃｅ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅＰ４５０ｅｎｚｙｍｅａｌｌｅｌｅ；ｇｅｎｅｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ；ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｖｅｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ人细胞色素Ｐ４５０酶等位基因（ＣＹＰ２Ｃ１９）编码的Ｓ－美芬妥英羟化酶参与了一系列临床常用药物代谢，其中最常见的就是氯吡格雷抵抗［１］。

CYP2C19临床检测意义

CYP2C19临床检测意义首先，CYP2C19的多态性在患者之间存在显著的差异。

不同的CYP2C19基因型会导致该酶活性的变化，从而对药物代谢和疗效产生不同的影响。

其中最常见的CYP2C19多态性基因型是CYP2C19*2、CYP2C19*3和CYP2C19*17、CYP2C19*2和CYP2C19*3是一种非功能性基因型，其对CYP2C19酶的活性具有抑制作用，使得有这些基因型的患者代谢药物的速度较慢。

而CYP2C19*17是一种增功能基因型，其对CYP2C19酶的活性具有增强作用，使得有这个基因型的患者代谢药物的速度较快。

因此，通过CYP2C19基因型检测，可以确定患者对一些药物代谢的速度，从而更好地个体化用药。

其次，CYP2C19的多态性与一些药物的药物动力学和药物疗效之间存在着密切的关联。

一些药物，如氯氮平和克唑吡啶，通过CYP2C19酶的代谢来产生活性代谢产物。

在代谢较慢的CYP2C19变异体患者中，这些药物的代谢会减慢，导致药物在体内的浓度增加，从而增加药物的不良反应的风险。

而在代谢较快的CYP2C19变异体患者中，这些药物的代谢会加速，导致药物的疗效降低。

因此，对于这些药物的使用，如果事先进行CYP2C19基因型检测，可以根据患者的基因型选择合适的药物剂量，更好地预测患者的药物疗效和不良反应的风险。

此外，CYP2C19的多态性与抗血小板药物如氯吡格雷的疗效也有关联。

氯吡格雷是一种常用的抗血小板药物，用于防治心血管疾病。

然而，由于CYP2C19酶对氯吡格雷的代谢具有重要的作用，CYP2C19变异体患者中氯吡格雷的疗效会明显降低。

多项临床研究表明，具有CYP2C19*2基因型的患者与敏感基因型相比，其持续使用氯吡格雷后心血管事件的风险显著增加。

再添加CYP2C19*17基因型后，氯吡格雷的疗效则会增加，与正常代谢者相比有更好的抗血小板效应。

因此，通过CYP2C19基因型检测，可以更好地指导氯吡格雷的个体化用药。

CYP2C19药物代谢酶基因多态性检测试剂注册技术审查指导原则

CYP2C19药物代谢酶基因多态性检测试剂注册技术审查指导原则CYP2C19药物代谢酶基因多态性检测试剂是一种用于检测CYP2C19基因的多态性的试剂。

CYP2C19基因是人体内编码CYP2C19酶的基因，CYP2C19酶参与了大约10%的临床药物的代谢，因此CYP2C19基因的多态性与药物的代谢差异相关。

目前，CYP2C19基因多态性检测试剂已经投入了临床应用。

对于CYP2C19药物代谢酶基因多态性检测试剂的注册技术审查，以下是一些指导原则：1.产品安全性评价：注册技术审查应对产品的安全性进行评估，确保试剂没有明显的毒副作用，并对其可能引发的不良反应进行评估。

此外，审查时还应考虑对试剂进行质量控制的要求。

2.技术验证：技术验证是注册审查的关键环节，应要求申请者提供有关试剂的技术特性、敏感性和特异性的数据。

此外，还应要求申请者提供试剂性能验证的数据，确保试剂的可靠性和准确性。

3.临床试验设计和结果分析：临床试验的设计和结果分析也是审查的重点。

注册技术审查应确认试剂是否已经进行了充分的临床试验，并根据试验结果评估试剂的准确性和预测性能。

4.试剂标定和参考范围：试剂标定和参考范围的确定也是注册技术审查的重点。

应要求申请者提供标定方法和结果，确保试剂标定的准确性，并根据标定结果确定参考范围。

5.试剂使用说明：注册技术审查还应对试剂的使用说明进行评估，确保使用说明能够引导用户正确操作试剂，并对可能产生的不良反应和错误操作风险进行警示。

6.质量管理体系：最后，注册技术审查还应对申请者的质量管理体系进行评估，确保申请者具备实施质量管理的能力和措施，以确保试剂的质量。

总之，CYP2C19药物代谢酶基因多态性检测试剂注册技术审查应对产品的安全性、技术验证、临床试验设计和结果分析、试剂标定和参考范围、试剂使用说明以及质量管理体系进行综合评估，确保试剂的安全和准确性。

这些指导原则对于试剂的注册技术审查提供了明确的方向。

CYP2C19基因多态性(SNP)检测

2005年3月，在完全堵塞的右冠状动脉又植入了两个支架 (3.0mmX23mm，3.0mmX13mm)；
2005年12月，病人感到胸痛，但冠脉造影未发现血管狭窄；
2007年11月，病人出现了持续性的胸痛和非ST段抬高的心梗。冠脉造影发现在弯曲的支架处出现血栓，只好更换新的药物缓释支架(2.75mmX18mm)；
3、为什么要检测CYP2C19基因多态性?
多中心，随机对照，双盲试验，研究增加剂量（up to 300mg）对CYP2C19突变患者血小板聚集抑制的改善情况。
*1/*1
*1/*2
*2/*2
结论：CYP2C19 *1/*2型患者，维持剂量增加至225mg，其对血小板活性的抑制程度方可达到*1/*1型患者的水平。而对于*2/*2型患者，即使维持剂量增加至300mg，仍然难以达到相当的血小板抑制水平。
2009年7月，病人在打曲棍球时，又发生胸痛，并在弯曲的支架处再次发生血栓，入院进行球囊扩张，重新安放支架 (2.25mmX12mm)；
2009年8月对病人进行了CYP2C19基因型检测，结果为 *2/*2型，这提示他是个氯吡格雷的慢代谢患者。因此停用氯吡格雷，改用普拉格雷；
2011年6月接受心脏造影，一切正常。
• 换用新药替格瑞洛（已在国内上市）； • 联用西洛他唑（cilostazol），两联改为
三联抗血小板治疗； • PCI效果不佳者，可考虑改做搭桥手术。
病例一：慢代谢患者使用5个支架后换用普拉格雷
2005年2月，医生为他进行经皮冠脉介入手术，植入一个药物缓释支架 (2.75mmX16mm)，并开始服用氯吡格雷；
伏立康唑 Nelfinavir 那非那韦 Proguanil
氯胍
Thank you!

CYP2C19 基因检测

2006 2007 2008 2009 2010
May, 2008
Trenk et al find CYP2C19 polymorphism is associated with adverse outcomes for patients on clopidogrel followed for one year
4
精品文档
药物安全与个体化医疗
因药物不良反应住院的病人
250万/每年
直接死亡 20万
25-30%的药物代谢基因为慢代谢型
5
精品文档
药物代谢可能特别慢，造成代谢产物堆积或有效活性浓
度不足等不良反应
合理用药影响因素
性别
年龄老年、儿童、新生
儿
身高、体重合并症
遗传结构与基因型
环境因素食物/ 吸烟 /
4. Eur Heart J, 2003, 24:193 5. Circulation, 2004, 109:3171
Emerging information established a role for CYP2C19 in clopidogrel response
October, 2006
Hulot et al identify CYP2C19 polymorphisms as major determinant of variability in platelet aggregation in healthy subjects; additional publications later confirm this finding
剂量 300/75 300/75 600/75 75 300/75
发生率 28% 31-35% 5-11% 31% 25% 5-35%

11 CYP2C19基因检测标准操作流程

药物代谢酶多态性检测标准操作规程一、检验目的为保证本实验室检测药物代谢酶基因型时DNA提取、PCR扩增及扩增产物杂交、显色、芯片扫描实验操作的标准化，确保检测结果的准确性、重复性，制定本规程。

二、适用范围适用于血液样本基因组DNA的提取、PCR扩增、杂交显色及报告。

三、方法原理采用基因芯片技术，测序原理是杂交测序方法，即通过与一组已知序列的核酸探针杂交进行核酸序列测定的方法，在一块基片表面固定了序列已知的靶核苷酸的探针。

当溶液中带有荧光标记的核酸序列TATGCAATCTAG,与基因芯片上对应位置的核酸探针产生互补匹配时，通过确定荧光强度最强的探针位置，获得一组序列完全互补的探针序列，据此可重组出靶核酸的序列。

CYP2C19基因在体内主要表达细胞色素P450（Cytochrome P450,CYP）同功酶也称药酶，是由一系列结构和功能相关的酶组成的超家族，是体内药物代谢的主要酶系。

其中，CYP2C19基因由于遗传多态性，不同个体间表达的药酶活性存在显著不同。

通过该酶代谢的药物（如质子泵抑制剂，抗惊厥药等）随患者基因型不同，其疗效和副作用也有明显不同。

本项目检测患者基因组DNA中CYP2C19基因型，通过对患者基因分型检测，判定患者的药物代谢速率类型，从而帮助医生正确选择药物并合理调整药物剂量，提高药物使用有效性，并降低毒副作用。

四、性能指标1. 最低检出限：20ng基因组DNA。

2. 准确度：以6种CYP2C19基因型的DNA样品分别检测试剂盒，结果符合相应型别；以10份企业标化的阴性质控品进行平行两次检测，结果一致且均为阴性；以浓度为8ng/ul 的CYP2C19基因型基因组DNA样品分别检测试剂盒，结果符合相应型别。

2. 精密度：以6种CYP2C19基因型的DNA样品分别对同一批试剂盒平行检测20次，每天4次，分为5天，检测结果一致。

五、标本收集1. 标本类型：静脉血的全血标本作为检测标本(抗凝剂为EDTA，抗凝剂的质量应符合化试药品要求——化学纯或分析纯，使用的比例以厂家推荐为准)。

氯吡格雷代谢基因(CYP2C19-2-3-17)多态性检测结果说明

中间代谢型（IM）
提示该受检者在接受氯吡格雷治疗时发生心血管不良事件的风险增加，请医生结合临床综合考虑用药情况。
2*/2*、2*/*3、3*/3*
弱代谢型（PM）
提示该受检者在接受氯吡格雷治疗时发生心血管不良事件的风险明显增加，请医生结合临床综合考虑用药情况。
基因型
代谢型
风险和建议
1*/17*、17*/17*
超快代谢型（UM）
提示该送检者在接受氯吡格雷治疗时出血风险可能会增加，请医生结合临床综合考虑用药情况。
1*/1*
广泛代谢型（EM）
提示该受检者在接受氯吡格雷治疗时发生心血管不良事件的风险同一2*/17*

CYP2C9和VKORC1基因多态性检测

CYP2C9和VKORC1基因多态性检测项目简介：CYP2C19基因是CYP450酶第二亚家族中的重要成员，是人体重要的药物代谢酶；CYP2C9能羟化代谢许多不同性质的药物，主要是酸性底物，据统计，目前约有16%的的临床药物由CYP2C9负责代谢。

VKORC1是维生素K依赖性凝血因子生成的限速酶。

华法林在体内是被不同的CYP同工酶羧基化而代谢成非活性产物的，目前已经证实在人的肝脏，抗凝作用更强的S-对映体85%以上经由CYP2C9代谢转化为无活性的6-与7-羧化产物；华法林作为维生素K拮抗剂通过阻断维生素K还原，使得含有谷氨酸残基的凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ，以及蛋白C和蛋白S停留在没有抗凝血生物活性的前体阶段，从而起到抗凝作用；CYP2C9和VKORC1基因产生的蛋白活性影响华法林在人体内的抗凝疗效。

美国FDA推荐CYP2C9和VKORC1基因多态性检测指导华法林个体差异化用药，检测患者基因组DNA中CYP2C9和VKORC1基因多态性和患者基本信息，指导医生正确给出华法林用药剂量，大幅降低华法林用药风险，提高患者生活质量。

华法林通过抑制维生素K依赖性凝血因子的合成起到抗凝作用临床使用法华林现存在的问题：1、治疗窗窄，有效治疗浓度2.2±0.4 μg/mL。

2、个体化差异大：一般服用剂量：初始量，每日0.5—20mg，维持量，每日2.5—7.5mg。

3、药物起效和失效缓慢。

4、需要频繁调整药物剂量：应用凝血酶原时间（PT）和国际标准化比值（INR）调整药物剂量时间过长，增加了患者出血的发生率，甚至是危及生命，尤其是在治疗初期的数周到数月内。

5、医生主观上不愿使用华法林治疗、患者依从性不好。

CYP2C9和VKORC1基因多态性检测标本采集及出报告时间：病人抽静脉血2ml（用EDTA-K2抗凝）送检验科分子生物诊断室，4个工作日出报告。

电话：8801063 手机：余宗涛65327 高波 64444华法林剂量计算：国际华法林药物基因组学联合会(the International Warfarin Pharmaeogenetics Consortium)通过大量数据，根据CYP2C9和VKORC1的检测结果和临床信息，制定个体华的华法林剂量方案，如下：基于基因型和临床信息的华法林剂量计算公式：未来临床用药剂量模式：临床意义：华法林的抗凝疗效一特点是其稳定剂量在不同种族间及个体间存在着较大差异。

CYP2C19药物代谢酶基因多态性检测试剂注册技术审查指导原则

CYP2C19药物代谢酶基因多态性检测试剂注册技术审查指导原则CYP2C19药物代谢酶基因多态性检测试剂是一种用于检测CYP2C19基因酶活性的检测试剂，可以用于指导临床用药过程中的剂量调整和药物选择。

为了确保这类检测试剂的质量和安全性，需要进行注册技术审查。

以下是CYP2C19药物代谢酶基因多态性检测试剂注册技术审查的原则指导。

首先，注册技术审查应该对该检测试剂的原理进行评估。

这种检测试剂一般采用基因分型或序列分析技术，通过检测CYP2C19基因的多态性位点，预测个体的药物代谢能力。

因此，在注册技术审查中需要评估该技术的准确性、灵敏度和特异性，确保检测结果的可靠性和可重复性。

其次，注册技术审查应对试剂的质量控制体系进行评估。

质量控制是确保试剂生产过程中的一致性和可靠性的重要环节。

注册技术审查应要求试剂生产商建立完善的质量控制体系，包括原材料的采购、检测方法的验证、批次样品的质量控制等。

此外，还需要评估试剂的稳定性和保存条件，确保试剂在使用寿命内的有效性。

再次，注册技术审查应对试剂的临床应用评估进行审查。

试剂注册后将广泛应用于临床医疗实践中，因此需要对其临床应用的效果进行评估。

这包括通过对大样本人群进行临床试验，评估这种基因检测对药物治疗的个体化和安全性的影响。

此外，还需要评估试剂在临床实践中的使用效果和意义，包括指导用药调整和预防药物不良反应的效果等。

最后，注册技术审查应对试剂的市场供应能力进行评估。

注册后的试剂需要能够满足市场需求，并确保供应的稳定性和可靠性。

此外，还需要确保试剂的市场定价合理，并对其市场竞争情况进行评估。

总之，CYP2C19药物代谢酶基因多态性检测试剂注册技术审查需要对试剂的原理、质量控制、临床应用评估和市场供应能力等方面进行评估。

只有在各个方面都符合要求，才能确保该试剂在临床实践中的准确性和有效性。

这样有助于促进个体化用药的发展，并提高临床用药的安全性和疗效。

CYP2C19基因多态性

CYP2C19基因多态性（SNP）检测
（PCR-溶解曲线法）
1、什么是CYP2C19基因？ 2、如何检测CYP2C19基因多态性? 3、为什么要检测CYP2C19基因多态性?
1、什么是CYP2C19基因？
CYP2C19是细胞色素P450酶第二亚家族中的一员，存在于肝脏当中，是人体主要的药物代谢酶。比如氯吡格雷、尿激酶等药物代谢都与之相关。 CYP2C19基因是指导合成CYP2C19酶的基因，表现为遗传多态性，导致酶变异，酶活下降或完全失活，影响药物代谢。
Clomiplamin
氯米帕明 Clobazam
Voriconazole
伏立康唑 Nelfinavir
氯巴占
那非那韦
Proguanil
氯胍
Thank you!
1、什么是CYP2C19基因？
CYP2C19有六种突变型，药物代谢速度存在差异。基因型 *1/*1 *1/*2 *1/*3 *2/*2 *3/*3 *2/*3 图示野生型单突变杂合 IM 单突变杂合单突变纯合单突变纯合双突变杂合 PM 慢 14.2% 中 43.4% 备注 EM 代谢速度快中国人频率 (n=283) 42.4%
病例二：慢代谢患者使用2个支架后改做搭桥手术
2006年10月接受了冠脉扩张手术，并放入了一个金属支架。期间出现心室纤维性颤动，但恢复良好，并开始服用氯吡格雷；
2007年4月，病人开始有运动性胸痛的症状，进而出现长时间缺血性胸痛，转至另一医院治疗，植入了药物缓释支架。 2009年5月，他再次出现急性心肌梗死症状，再次转院，冠状造影发现血管堵塞狭窄，因此在放置支架的地方清除了血栓，同时做了球囊扩张处理；
CYP2C19基因检测
快代谢 (*1/*1)，42%

CYP2C19药物代谢酶基因多态性检测试剂注册技术审查指导原则2022年

CYP2C19药物代谢酶基因多态性检测试剂注册技术审查指导原则（2022年）本指导原则是在现行法规和标准体系以及当前认知水平下制定的，随着法规和标准的不断完善，以及科学技术的不断发展，本指导原则相关内容也将适时进行调整。

一、适用范围药物代谢酶在药物体内代谢过程中起着重要作用，其活性强弱是药物代谢速率的重要影响因素，直接决定了药物作用的强度和持久性。

人体内的药物代谢酶主要有细胞色素P450（CYP450）同工酶和N- 乙酰转移酶（NAT）等。

CYP2c19酶是一种重要的CYP450同工酶，临床以CYP2c19酶为主要代谢酶的药物包括抗血小板药物（如：氯吡格雷）和质子泵抑制剂等。

氯吡格雷是一种抗血小板药物，广泛用于：急性冠脉综合征（ACS）患者，包括非ST段抬高性ACS （不稳定性心绞痛UA或非Q波心肌梗死）和ST段抬高性心肌梗死（NSTEMI）患者，其中，非ST段抬高性ACS包括经皮冠状动脉介入术后置入支架的患者；外周动脉性疾病患者；近期心肌梗死或近期缺血性卒中患者。

氯吡格雷作为一种前体药物，本身并无药理活性，主要经CYP2c19酶代谢活化，产生活性代谢产物，后者与血小板表面的P2Y12受体不可逆结合，抑制血小板聚集，干扰ADP介导的血小板活化，发挥抗血小板效应。

CYP2C19酶的编码基因为CYP2C19基因，位于人类10号染色体上。

CYP2c19基因含有42个等位基因，CYP2C19*1为野生型等位基因，其编码的酶具有正常活性。

CYP2C19*2（rs4244285，c.681G>A）和CYP2C19*3 （rs4986893，c.636G>A）编码的CYP2c19酶活性降低，是中国人群中存在的2种主要的等位基因，在中国人群的发生频率分别为23.1%〜35%和2%〜7%。

CYP2C19*17 （rs12248560,c.-806C>T）编码的 CYP2c19 酶活性增强，在中国人群的发生频率约为0.5%〜4%。

CYP2C19知情同意书

CYP2C19基因多态性检测知情同意书
姓名：性别：年龄：床号：登记号：
CYP2C19基因的遗传变异导致CYP2C19酶活性的个体差异，使人群出现超快代谢者（UM）、快代谢者（EM）、中间代谢者（IM）和慢代谢者（PM）4种表型。

氯吡格雷已确认是前体药物，需要经过CYP2C19酶的活化后才能产生抗血小板作用。

临床血小板反应存在多样性与CYP2C19基因相关， CYP2C19慢代谢情况与氯吡格雷的作用降低相关。

通过CYP2C19基因多态性检测，可将服药人群分为上述4类氯吡格雷代谢患者，从而用于氯吡格雷的用药指导，实现个体化用药治疗。

受检者知情同意：
1. 我已知晓该检测的性质、预期目的和必要性，对其产生的疑问已经得到医生的解答。

2. 我已知晓将要进行的检测项目相关内容；且知晓该检测的准确率并非百分之百。

3.我同意在去掉所有个人信息后，检测数据可供研究参考，我同意授权医院及检测机构对检测涉及的血液、血浆和医疗废弃物等进行处理。

4. 受检者抽静脉血2ml，送我院药学部检测，2个工作日出报告，每周一至周五进行。

5．检测费用800元人民币，目前尚未纳入医保。

受检者声明：
我已知晓上述所有内容，愿意进行该项检测，并承担相关检测费用。

受检者/授权亲属签名：与受检者关系：
日期：年月日
医生声明：
我已告知受检者（或其授权亲属）该检测性质、目的，并且解答了受检者（或其授权亲属）的相关问题，我已征得受检者（或其授权亲属）的同意来开展该检测项目。

医生签名：日期：年月日。

CYP2C19和CYP2C9VKORC1基因多态性检测在临床中应用

CYP2C19﹡1/﹡1：636GG，681GG
636
野生型
突变型 681
﹡1 ﹡1
CYP2C19不同等位基因类型
2、野生型基因与突变基因杂合子：中代谢型
（中国人占 43.4%）
1. CYP2C19﹡1/﹡2 ： 636GG，681GA 2. CYP2C19﹡1/﹡3 ： 636GA，681GG
636
经由CYP2C19代谢的药物
• CYP2C 1 9参与几十种药物代谢 • 抗血小板药物：氯吡格雷 • 抗癫痫药：美芬妥英、苯巴比妥、丙戊酸； • 质子泵抑制剂：奥美拉唑、雷贝拉唑； • 抗抑郁药：丙咪嗪、氯丙咪嗪、阿米替林、西酞普兰； • 镇静催眠药：地西泮、去甲地西泮； • 抗疟疾药：氯胍、氯二胍； • 降糖药：甲苯磺丁脲； • 抗真菌药：伏立康唑； • 抗肿瘤药：环磷酰胺、异环磷酰胺等
CYP2C19基因检测的其他临床意义
• 西酞普兰或艾司西酞普、质子泵抑制剂（奥美拉唑、兰索拉唑、泮托拉唑兰）主要是药物原形起作用，快代谢类型者（*1/*1），按常规给药剂量可能不足，建议适当加量或者换药。
• 突变基因携带者服用正常剂量伏立康唑可能产生较高血药浓度导致肝毒性，建议适当减量
• 突变基因携带者尽可能避免同时服用两种经 CYP2C19酶代谢药物
亚单位1 ☆ CYP2C19酶可影响氯吡格雷代谢 ☆ CYP2C9/VKORC1酶可影响华法林代谢
CYP2C19
• CYP2C19酶，是 P450药物代谢酶家族中的重要一员，存在于肝微粒体中
• CYP2C19野生型等位基因：CYP2C19﹡1 • 存在CYP2C19﹡2～CYP2C19﹡28等多种突变等
（150mg/d），之后改为
75mg/d

cyp2c19基因结果解读

cyp2c19基因结果解读（原创版）目录一、CYP2C19 基因概述1.1 CYP2C19 基因编码的酶1.2 CYP2C19 基因在肝脏中的作用1.3 CYP2C19 基因多态性的分类二、CYP2C19 基因突变与药物代谢2.1 CYP2C192 和 CYP2C193 等位基因在东方人中的分布2.2 CYP2C19 基因突变对药物代谢的影响2.3 药物疗效和副作用与患者基因型的关系三、CYP2C19 基因检测3.1 CYP2C19 基因检测的目的3.2 CYP2C19 基因检测的方法3.3 CYP2C19 基因检测在氯吡格雷用药指导中的应用正文一、CYP2C19 基因概述1.1 CYP2C19 基因编码的酶CYP2C19 是一种编码细胞色素 P450 酶的基因，它在肝脏中发挥着重要的代谢作用。

CYP2C19 酶参与许多药物和内源性化合物的氧化代谢，对于药物在体内的吸收、分布、代谢和排泄具有重要的影响。

1.2 CYP2C19 基因在肝脏中的作用CYP2C19 基因在肝脏中表达，其编码的酶参与药物代谢过程。

肝脏是药物代谢的主要场所，CYP2C19 酶的活性和代谢能力对药物在体内的代谢速度和效果具有重要作用。

1.3 CYP2C19 基因多态性的分类CYP2C19 基因多态性是指该基因存在不同的突变形式，这些突变形式被称为等位基因。

CYP2C19 基因多态性可以分为三种类型：正常代谢型（em）、慢代谢型（pm）和快代谢型（um）。

二、CYP2C19 基因突变与药物代谢2.1 CYP2C192 和 CYP2C193 等位基因在东方人中的分布CYP2C192 和 CYP2C193 等位基因在东方人中占弱代谢表型（PM）的99% 以上。

这两种等位基因编码的酶无活性，因此可能导致药物代谢缓慢。

2.2 CYP2C19 基因突变对药物代谢的影响CYP2C19 基因突变会影响药物代谢速度和效果。

例如，CYP2C192 等位基因变异的外显子 5 第 681 位处的碱基发生变异，使得在翻译时丢失了 215-227 位氨基酸，使 215 位氨基酸下游第 20 个氨基酸处提前产生 1 个终止密码，使蛋白合成过早被终止，导致酶活性丧失。