基因多态性的检测方法

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药物代谢酶基因多态性分析及药物治疗反应个体化研究——以某医院为例

药物代谢酶基因多态性分析及药物治疗反应个体化研究——以某医院为例随着医学技术的不断进步，药物治疗已经成为人们预防和治疗疾病的重要手段之一。

药物治疗的效果往往取决于许多因素，如药物代谢、吸收和分布等。

而药物代谢酶基因多态性分析可以帮助我们更好地了解患者的个体差异，从而个性化治疗，提高疗效。

本文将以某医院为例，介绍如何进行药物代谢酶基因多态性分析及其在药物治疗中的应用。

一、药物代谢酶基因多态性分析简介药物代谢酶基因多态性是指基因序列中存在的单核苷酸多态性（SNP），这些SNP会对药物的代谢酶的活性产生影响，从而改变药物的代谢速率和效果。

因此，药物代谢酶基因多态性分析可以帮助我们了解患者的个体差异，并选用相应的药物治疗方案，提高疗效，减少副作用。

二、药物代谢酶基因多态性分析方法药物代谢酶基因多态性分析常用的方法有PCR-RFLP、TaqMan、SNPscan等。

在某医院里，常用的是PCR-RFLP法进行分析。

PCR-RFLP是一种基于PCR扩增和酶切的方法，其步骤如下：1、提取被检测个体的基因组DNA；2、选择需要检测的药物代谢酶基因，设计引物并进行PCR扩增；3、对扩增产物进行酶切，根据切割后的DNA片段大小分析样本基因型。

三、药物治疗反应个体化研究应用个性化治疗是近年来医学界的一个热点话题，而药物代谢酶基因多态性分析则是实现个性化治疗的重要手段。

在某医院里，药物代谢酶基因多态性分析已经被应用到临床中，以下举几个例子。

1、华法林治疗华法林是一种广泛应用于预防和治疗血栓病的药物，但其剂量和用法需根据患者的代谢差异进行个体化调整。

某医院通过对CYP2C9和VKORC1基因进行分析，发现患者的个体差异较大，从而制定了更为合理的治疗方案，提高了疗效。

2、乳腺癌患者治疗对于乳腺癌患者的治疗，药物代谢酶基因多态性分析同样具有重要的应用。

某医院通过对CYP2D6基因的分析发现，部分患者的代谢能力较差，导致药物的代谢速度过慢，治疗效果欠佳。

基因多态性的检测方法

基因多态性的检测方法一、直接方法1.目标基因测序：通过对目标基因进行测序，可以直接得到其等位基因的序列信息。

目前，高通量测序技术的发展使得测序成为一种常用的基因多态性检测方法。

2.杂交技术：杂交技术可以用于检测单核苷酸多态性（SNP）和小片段插入/缺失等变异。

常用的方法包括限制性片段长度多态性（RFLP）和串联重复片段多态性（VNTR）等。

3.聚合酶链反应（PCR）：PCR可以通过扩增目标片段的方法，检测基因多态性。

例如，引物在目标序列上的配对使得PCR扩增产物的长度与目标基因的等位基因有关。

通过测定扩增产物的长度变化，可以确定基因多态性。

4.克隆测序：克隆测序是一种将目标基因克隆到载体中，并对克隆的DNA进行测序的方法。

这种技术可以用于检测较大的插入/缺失变异以及基因拷贝数变异等。

二、间接方法1.单核苷酸多态性（SNP）芯片：SNP芯片是一种高通量并行检测SNP 的技术。

它通过固定在芯片上的特异性探针与待测样品中的SNP位点进行杂交，然后使用荧光信号检测方法来确定不同等位基因的存在情况。

2.DNA芯片：DNA芯片可以广泛用于基因多态性的检测。

它可以同时测定数百甚至数千个基因，快速、准确地检测多个等位基因的存在情况。

3.高分辨率融解曲线分析：高分辨率融解曲线分析可以用来区分等位基因之间的序列差异。

该方法通过双链DNA在升温过程中解旋变性的温度差异，来分析目标序列中的等位基因。

4. 二代测序技术：二代测序技术（如Illumina和Ion Torrent）基于多组重叠的小片段测序，可以用于高通量的基因多态性检测。

它可以同时测定数百万个SNP位点，识别多个等位基因的存在情况。

综上所述，基因多态性的检测方法涵盖了直接方法和间接方法。

这些方法可以用于检测单核苷酸多态性、插入/缺失变异、基因拷贝数变异等不同类型的基因多态性。

随着技术的不断发展，基因多态性的检测方法将变得更加高效、准确和经济。

如何用PCR法检测基因的多态性

如何用PCR法检测基因的多态性PCR法（聚合酶链反应法）是一种广泛应用于分子生物学领域的基因检测技术。

它能够在短时间内扩增特定序列的DNA片段，从而实现对基因多态性的检测。

以下是使用PCR法检测基因多态性的步骤：1.设计引物首先，需要根据目标基因的序列设计引物（寡核苷酸序列）。

引物一般包括一对前、后引物，它们各自与目标序列的两侧互补配对。

引物的设计应考虑到目标基因区域的多态性，以确保引物与所有可能的变体都能配对。

2.提取DNA从目标生物体的组织样本（如血液或组织）中提取DNA。

DNA提取方法可以选择物理法或化学法，如离心法和盐析法等。

3.PCR反应将提取到的DNA作为PCR反应的模板，加入引物、四个核苷酸和聚合酶等反应物，进行PCR反应。

PCR反应由多个循环组成，每个循环包括DNA的变性、引物的结合和DNA的扩增。

4.凝胶电泳分析将PCR反应产生的扩增产物进行凝胶电泳分析。

凝胶电泳是一种将DNA分子根据大小分离的方法。

将PCR产物加载到琼脂糖凝胶槽中，然后通过电场进行电泳。

根据其大小，DNA片段将在凝胶中移动到不同的位置。

通过与大小已知的DNA分子比较，可以确定PCR产物的大小。

5.基因型分析通过比较PCR产物的大小，可以检测到基因的多态性。

在不同基因型的个体中，PCR产物的大小可能会有所不同。

可以将PCR产物分成不同的等级，以进行基因型分析。

6.数据分析最后，对PCR结果进行数据分析和解释。

根据PCR产物的大小和基因型等信息，可以确定个体的基因型。

如果一些基因型与一种特定的表型相关联，那么可以推测该基因是多态的，并且可能与该表型相关。

除了上述步骤，还可以通过引入序列特异性的限制酶切位点、单特异性引物扩增等方法，进一步确定基因多态性。

此外，PCR法还可以与其他技术如测序、SNP分析等相结合，以获得更详细的多态性信息。

总之，PCR法是一种快速、敏感且广泛应用的检测基因多态性的方法。

通过合理的引物设计、PCR反应、凝胶电泳和数据分析等步骤，可以确定基因的多态性及其与表型相关性，为遗传研究和疾病诊断等领域提供重要信息。

CYP2C19基因多态性(SNP)检测

2005年3月，在完全堵塞的右冠状动脉又植入了两个支架 (3.0mmX23mm，3.0mmX13mm)；
2005年12月，病人感到胸痛，但冠脉造影未发现血管狭窄；
2007年11月，病人出现了持续性的胸痛和非ST段抬高的心梗。冠脉造影发现在弯曲的支架处出现血栓，只好更换新的药物缓释支架(2.75mmX18mm)；
3、为什么要检测CYP2C19基因多态性?
多中心，随机对照，双盲试验，研究增加剂量（up to 300mg）对CYP2C19突变患者血小板聚集抑制的改善情况。
*1/*1
*1/*2
*2/*2
结论：CYP2C19 *1/*2型患者，维持剂量增加至225mg，其对血小板活性的抑制程度方可达到*1/*1型患者的水平。而对于*2/*2型患者，即使维持剂量增加至300mg，仍然难以达到相当的血小板抑制水平。
2009年7月，病人在打曲棍球时，又发生胸痛，并在弯曲的支架处再次发生血栓，入院进行球囊扩张，重新安放支架 (2.25mmX12mm)；
2009年8月对病人进行了CYP2C19基因型检测，结果为 *2/*2型，这提示他是个氯吡格雷的慢代谢患者。因此停用氯吡格雷，改用普拉格雷；
2011年6月接受心脏造影，一切正常。
• 换用新药替格瑞洛（已在国内上市）； • 联用西洛他唑（cilostazol），两联改为
三联抗血小板治疗； • PCI效果不佳者，可考虑改做搭桥手术。
病例一：慢代谢患者使用5个支架后换用普拉格雷
2005年2月，医生为他进行经皮冠脉介入手术，植入一个药物缓释支架 (2.75mmX16mm)，并开始服用氯吡格雷；
伏立康唑 Nelfinavir 那非那韦 Proguanil
氯胍
Thank you!

CYP2C19基因多态性检测

CYP2C19基因多态性检测项目简介：CYP2C19是CYP450酶第二亚家族中的重要成员，是人体重要的药物代谢酶，在肝脏中有很多表达。

CYP2C19基因座位于染色体区10q24.2上，由9个外显子构成。

CYP2C19具有很多SNP位点，最常见的是CYP2C19*2和CYP2C19*3。

CYP2C19*2会导致转录蛋白的剪切突变失活，而CYP2C19*3能构成一个终止子，破坏转录蛋白的活性。

据统计，CYP2C19*2和CYP2C19*3两个突变位点能解释几乎100%的东亚人和85%的高加索人种的相关弱代谢遗传缺陷，而其他两种等位基因CYP2C19*4和CYP2C19*5主要在高加索人种中分布。

大量证据证实，不同人种在CYP2C19的底物的代谢能力有很大差异；2–5%高加索人是弱代谢者，而13–23%的亚洲人是弱代谢者。

这是由于在亚洲人口中CYP2C19*2和CYP2C19*3等位基因的高频率造成的。

通过CYP2C19基因检测，判断患者对相关药物的代谢能力，可以指导临床用方案的制定，实现个体化用药治疗。

临床上常用的经由CYP2C19酶代谢的药物：1、治疗胃酸相关性疾病：如质子泵抑制剂：奥美拉唑（omeprazole）、兰索拉唑（lansoprazole）、泮托拉唑（pantoprazole）、雷贝拉唑（rabeprazole）、埃索美拉唑（Esomeprazole）。

2、治疗心血管疾病：Clopidogrel、氯吡格雷、抗凝血药物。

3、抗真菌药物：Voriconazole、伏立康唑、广谱抗真菌药物。

4、神经类药物：①S-美芬妥英mephenytoin为乙内酰脲类抗癫痫药，在体内的羟化代谢主要由单基因CYP2C19编码表达的CYP2C19酶蛋白介导，由羟化酶CYP2C19氧化生成4’-羟基美芬妥英；②地西泮diazepam，一种长效的镇静、安眠药；③丙米嗪imipramine ，抗抑郁药，N-去甲基化和2-羟化；④苯巴比妥phenobarbital，传统的抗癫痫药；⑤抗心律失常药,抗抑郁药,抗精神病药，β受体阻断剂,抗高血压药和止痛剂。

基因多态性分析

人基因多态性分析一、实验目的1. 了解基因多态性在阐明人体对疾病、毒物的易感性与耐受性、疾病临床表现的多样性以及对药物治疗的反应性中的重要作用。

2. 了解分析基因多态性的基本原理和研究方法。

二、实验原理基因多态性（gene polymorphism）是指在一个生物群体中，同时存在两种及以上的变异型或基因型或等位基因，也称为遗传多态性（genetic polymorphism）。

人类基因多态性对于阐明人体对疾病的易感性、毒物的耐受性、药物代谢差异及遗传性疾病的分子机制有重大意义；与致病基因连锁的多态性位点可作为遗传病的诊断标记，并为分离克隆致病基因提供依据；病因未知的疾病与候选基因多态性的相关性分析，可用于辅助筛选致病易感基因。

聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction—Restriction Fragment Length Polymorphism，PCR-RFLP)分析是一种常用的DNA分子标记。

原理是通过PCR扩增获得目的基因。

若目的基因存在等位变异（多态性），且变异正好发生在某种限制性内切酶识别位点上，使酶切位点增加或者消失，则酶切结果就会产生大小不同的片段，即片段长度多态性，再利用琼脂糖凝胶电泳分离，可呈现出多态性电泳图谱。

若将患者与正常的多态性图谱比较，可确定是否变异。

应用PCR-RFLP，可检测某一致病基因已知的点突变，进行直接基因诊断，也可以此为遗传标记进行连锁分析进行间接基因诊断。

三、器材与试剂1. 器材⑴离心机。

⑵DNA扩增仪。

⑶电泳仪。

⑷水平电泳槽。

⑸紫外检测仪。

⑹移液器。

2. 试剂⑴口腔拭子DNA抽提试剂盒。

⑵琼脂糖。

⑶1×TAE电泳缓冲液：980ml蒸馏水中加入50×TAE母液20ml。

⑷50×TAE母液：Tris 121g，0.5M EDTA（pH8.0）50ml，冰醋酸28.55ml，定容至500ml。

DNA多态性分析基础详解

DNA多态性分析基础详解DNA多态性分析（Polymorphism Analysis of DNA）是一种用以研究个体之间基因组差异的分析方法。

DNA多态性是指DNA序列的差异，这些差异可能会导致个体之间的遗传差异。

DNA多态性可以作为人类遗传学、分子进化学和医学研究的重要工具之一DNA多态性分析可以通过不同的方法进行。

其中常用的方法包括限制性片段长度多态性（Restriction Fragment Length Polymorphism，RFLP）、单点突变（Single Nucleotide Polymorphism，SNP) 分析、序列分析和扩增子长度多态性（Amplified Fragment Length Polymorphism，AFLP）等。

RFLP是一种具有高度位点特异性的分析技术。

这种方法是基于限制酶特异性切割DNA，然后通过电泳将产生的DNA片段分离，并通过染色剂将其可视化。

RFLP可以用于检测DNA序列的特定变异位点，从而确定个体之间的差异。

SNP分析是目前最常用的DNA多态性分析方法之一、这种方法利用PCR扩增待检测的DNA片段，然后使用特异性引物结合DNA序列进行扩增。

产生的扩增产物将通过电泳分离，并通过测序或其它方法来检测SNP位点的具体变异。

序列分析是一种直接检测DNA序列的方法。

它利用测序技术来确定个体之间的差异，通常应用于长序列的DNA分析。

序列分析可以提供更精确的结果，但是相对较为耗时和费用较高。

AFLP则是一种无需基因序列信息即可研究DNA多态性的方法。

这种方法将限制酶切割DNA，然后使用引物对产生的DNA片段进行扩增。

产生的扩增产物经过电泳分离并可视化，从而了解个体之间的差异。

DNA多态性分析在人类遗传学研究中具有广泛的应用。

它可以用于亲子鉴定、个人特征分析、基因功能研究以及疾病易感性筛查等领域。

在医学研究中，DNA多态性分析可以用于确定特定基因变异与特定疾病之间的关系，从而为疾病的早期诊断和个体化治疗提供依据。

药物不良反应基因检测方法

药物不良反应基因检测方法
一、基因多态性检测
基因多态性检测是一种研究人类基因多态性与疾病易感性的关系的方法。

在药物不良反应方面，基因多态性可以影响个体对药物的代谢和反应能力，从而导致不同的药物不良反应。

因此，基因多态性检测对于预测和预防药物不良反应具有重要意义。

二、基因突变检测
基因突变是指基因DNA序列的碱基对发生改变，从而导致基因编码的蛋白质发生变化。

基因突变检测可以揭示与药物不良反应相关的突变基因及其变异等位基因，从而预测个体对特定药物的反应。

三、基因表达检测
基因表达是指基因转录和翻译的过程，即DNA序列转化为蛋白质的过程。

基因表达检测可以研究与药物不良反应相关的基因在特定组织或细胞中的表达情况，从而了解药物不良反应的分子机制。

四、基因融合检测
基因融合是指两个或多个基因合并成一个基因的现象。

基因融合检测可以研究与药物不良反应相关的基因融合现象，从而揭示新的药物不良反应机制。

五、基因测序检测
基因测序是指测定DNA序列的过程，可以用于检测与药物不良反应相关的基因变异和突变。

基因测序检测可以揭示个体基因组的变异和突变情况，从而预测个体对药物的反应和不良反应风险。

总之，以上五种方法都可以用于药物不良反应的基因检测，帮助医生和患者更好地了解个体对特定药物的反应和不良反应风险，从而制定更加个性化的治疗方案。

人类遗传学中多态性位点鉴定方法

人类遗传学中多态性位点鉴定方法人类遗传学是研究人类基因组中的遗传变异并探索其对个体表型和疾病形成的影响的学科。

其中，多态性位点（polymorphic loci）鉴定方法是人类遗传学研究中的重要工具之一。

本文将介绍多态性位点的概念及其在人类遗传学中的应用，包括多态性位点的鉴定方法、应用领域和意义。

多态性位点是指基因组中存在的具有多种等位基因（alleles）的位点。

这些位点上的等位基因频率在人群中存在显著差异，即具有多态性。

多态性位点的发现和鉴定可以用于遗传多样性的研究、群体遗传结构的分析、人类进化的推断以及疾病易感性的评估等方面。

多态性位点的鉴定方法主要有遗传标记法、DNA测序法和基因芯片技术。

遗传标记法是通过利用已知的多态性位点进行间接鉴定，常用的方法包括限制性片段长度多态性（Restriction Fragment Length Polymorphism，RFLP）、微卫星标记法（Microsatellite Marker）和单核苷酸多态性（Single Nucleotide Polymorphism，SNP）等。

这些方法通过PCR扩增等技术手段，测定位点上等位基因的特定序列或长度，从而实现位点的鉴定。

DNA测序法是直接测定多态性位点的等位基因序列，其中Sanger测序法和下一代测序技术是最常用的方法。

Sanger测序法是通过链终止法将DNA片段逐个碱基测序，并最终确定等位基因序列。

下一代测序技术包括Illumina测序、Ion Torrent 测序和454测序等，具有高通量、高灵敏度和低成本等优点，广泛应用于多态性位点的鉴定与研究。

基因芯片技术是通过将大量特异性探针固定在芯片表面，检测样品中目标序列的方法。

其中，DNA芯片和SNP芯片是最常用的两种类型。

DNA芯片通过比较样品与探针之间的杂交情况，从而确定目标序列的等位基因分布情况。

SNP芯片利用探针固定在芯片上的SNP位点，通过鉴定样品中SNP位点上的等位基因，实现多态性位点的鉴定。

生物大数据分析中的遗传多态性检测方法与技巧

生物大数据分析中的遗传多态性检测方法与技巧遗传多态性是生物学研究中非常重要的一个概念，它指的是个体或群体基因组中存在的多个变异形式或等位基因。

遗传多态性不仅与个体间的差异有关，还与个体在适应环境和抵抗疾病方面的差异密切相关。

因此，在生物大数据分析中，准确检测和分析遗传多态性至关重要。

本文将介绍一些常用的遗传多态性检测方法与技巧。

1. 单核苷酸多态性（SNP）的检测方法：SNP是最为常见的遗传多态性形式之一，它是DNA中单个核苷酸（A、T、C或G）的变异。

SNP的检测可通过基于测序技术的方法，如Sanger测序、测序用探针芯片和下一代测序技术等。

这些方法可以快速、准确地检测出SNP位点上的碱基变异情况。

此外，还可以利用聚合酶链式反应（PCR）结合限制性内切酶（RFLP）方法，通过分析产生的DNA片段长度差异来检测SNP位点。

2. 微卫星序列的分析方法：微卫星序列是在基因组中广泛分布的、重复的DNA序列，由于个体间的插入、缺失或重复次数的差异，微卫星序列具有高度多态性。

检测微卫星序列的多态性可以通过PCR扩增方法，使用特异性引物扩增目标微卫星位点，然后通过电泳检测扩增片段的长度差异。

此外，还可以利用基于测序的方法来检测微卫星序列的变异情况。

3. 多态性标记的选择与筛选：在生物大数据分析中，选择适当的多态性标记对于准确检测遗传多样性至关重要。

一种常用的多态性标记是限制性片段长度多态性（RFLP），其基本原理是利用限制性内切酶切割DNA产生的不同长度的片段。

此外，还有单序列重复多态性（SSR）和随机扩增多态性（RAPD）等多态性标记可以选择。

在筛选多态性标记时，通常考虑标记的多态性、位点的连锁关系、扩增效果等因素。

4. 基于群体遗传学的分析方法：群体遗传学是研究个体在群体中遗传结构和动态变化的学科。

在生物大数据分析中，利用群体遗传学的方法可以检测遗传多样性和演化过程。

例如，可以通过计算群体间的遗传距离和群体结构来判断不同种群间的基因流程度。

基因多态性的检测方法

基因多态性的检测方法基因多态性指的是一个基因的表现型可以在个体之间或同一物种的不同个体之间存在多种变异形式的特点。

这些基因变异可能与遗传疾病的发生风险、药物反应差异、环境适应能力以及其他生物学特征有关。

因此，基因多态性的检测对于了解疾病风险、个体差异以及定制个体化治疗方案非常重要。

下面介绍一些主要的基因多态性检测方法：1. 基因测序（Sequencing）基因测序是一种检测细胞或个体基因组DNA序列的方法，可用于鉴定基因多态性。

最常用的方法是Sanger测序和高通量测序技术，如Illumina测序、Ion Torrent测序等。

这些技术能够高效、准确地测定基因组DNA序列，找出基因中各种不同的多态性位点（Single Nucleotide Polymorphisms，SNPs）。

2. 基因芯片（Microarray）基因芯片是一种高通量并行检测技术，可以在同一基因芯片上同时测定多个基因的多态性。

基因芯片是在玻璃片或硅芯片上固定着大量的DNA探针，这些探针可以与待测样品中的DNA特异性结合，从而测定目标基因的多态性。

通常，通过比较样本与已知探针的结合特性，可以确定待测基因的多态性。

3. 聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）PCR是一种快速复制DNA片段的方法，在基因多态性检测中广泛应用。

PCR可以选择性地扩增DNA片段，使其能够更容易进行后续分析。

对于基因多态性检测，PCR常用于扩增特定位点的基因DNA片段，并通过电泳或DNA测序等方法检测DNA的多态性。

4. 串联重复序列分析（Tandem Repeat Analysis）在人类基因组中，一些位点的DNA序列可能会重复出现多次，这种重复的DNA序列被称为串联重复序列。

了解串联重复序列的变异形式可以提供关于个体间遗传差异的信息。

串联重复序列分析可以通过PCR扩增、电泳、测序等方法来检测和分析串联重复序列的多态性。

检测基因多态性的方法

检测基因多态性的方法基因多态性是指一个基因在个体或种群中存在两个或更多的等位基因，并且这些等位基因的频率大于1％。

基因多态性在人类的特征和疾病的研究中具有重要意义，因为它可以帮助我们了解基因对特定特征和疾病的贡献程度以及个体对药物治疗的反应程度。

下面将介绍几种常见的基因多态性检测方法。

1.PCR-RFLP（聚合酶链反应限制性片段长度多态性）PCR-RFLP是一种基于聚合酶链反应（PCR）和限制性酶切的技术。

首先，通过PCR扩增目标DNA区域，然后使用限制性内切酶切割PCR产物。

由于不同的等位基因可能在限制性酶切位点处有不同的序列，因此切割后的片段长度也会不同。

通过电泳分离不同长度的片段后，可以通过比较不同样本的片段模式来确定等位基因型。

2.SNP（单核苷酸多态性）芯片3.测序技术传统的测序技术，如Sanger测序，已被广泛用于检测基因多态性。

通过PCR扩增目标基因区域并分离纯化PCR产物后，使用测序方法确定其序列。

通过与已知参考序列比较，可以确定等位基因的存在和基因型。

近年来，高通量测序技术的快速发展，如Illumina测序和Ion Torrent测序等，使得更大规模的基因多态性检测成为可能。

4.扩增片段长度多态性（AFLP）AFLP是一种通过PCR扩增特定DNA片段来检测多态性的方法。

它结合了限制性酶切和PCR扩增的原理。

首先，使用特定的限制性酶切割DNA样本，然后使用一对特定的引物进行PCR扩增。

由于每个DNA片段在PCR 扩增时会加上特定的引物顺带序列，因此PCR产物的长度会有差异。

通过电泳分离PCR产物后，可以通过比较不同样本的PCR产物长度模式来确定等位基因型。

5.基因芯片基因芯片是基因多态性检测的一种常用方法，特别适用于密集编码的基因区域。

基因芯片使用固定的DNA探针，通过和样品DNA杂交检测目标基因区域的多态性。

探针可以是PCR产物、cDNA或合成的oligonucleotide。

叶酸代谢相关基因多态性的检测方法与设计方案

本技术提供了一种叶酸代谢相关基因多态性的检测方法，包括：提取受试者的基因组DNA；配置单碱基延伸反应体系和聚合酶链式反应PCR扩增体系；顺次进行扩增反应；顺次进行消化处理；顺次混合消化处理后的体系和单碱基延伸反应体系，进行延伸反应，并进行纯化；利用液相色谱质谱联用仪检测纯化处理后的产物，确定基因组DNA特定SNP位点的基因型；其中，洗脱流动相为含1％～5％(v/v)六氟异丙醇和0.05％～0.3％(v/v)三乙胺的蒸馏水，以及含1％～5％(v/v)六氟异丙醇和0.05％～0.3％(v/v)三乙胺的甲醇，洗脱方式为梯度洗脱。

本方案能够灵敏、简便的对目标基因的SNP位点进行基因分型。

权利要求书1.一种叶酸代谢相关基因多态性的检测方法，其特征在于，包括：提取受试者的基因组DNA；配置包含SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.3所示的单碱基延伸引物序列的单碱基延伸反应体系，并配置包含SEQ ID NO.4～SEQ ID NO.9所示的特异性扩增引物序列和所述基因组DNA的聚合酶链式反应PCR扩增体系；顺次对所述PCR扩增体系进行扩增反应；顺次对扩增反应后的体系进行消化处理；顺次混合消化处理后的体系和所述单碱基延伸反应体系，获得混合液，并对所述混合液进行延伸反应；顺次对延伸反应后的体系进行纯化处理；利用液相色谱-质谱联用仪检测纯化处理后的产物，确定所述基因组DNA特定SNP位点的基因型；其中，所述液相色谱-质谱联用仪的洗脱流动相为含1％～5％(v/v)六氟异丙醇和0.05％～0.3％(v/v)三乙胺的蒸馏水，以及含1％～5％(v/v)六氟异丙醇和0.05％～0.3％(v/v)三乙胺的甲醇，洗脱方式为梯度洗脱。

2.根据权利要求1所述的叶酸代谢相关基因多态性的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱仪的色谱条件包括：C18反相色谱柱，所述C18反相色谱柱的柱温为：40～70℃，所述纯化产物的进样量为：10～50μl。