几丁质酶活性检测试剂盒说明书 可见分光光度法
辅酶 II NADP含量检测试剂盒MTT 显色法)说明书__ 可见分光光度法UPLC-MS-4370
辅酶II NADP(H)含量检测试剂盒(MTT 显色法)说明书货号:UPLC-MS-4370规格:50T/24S可见分光光度法产品内容:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件酸性提取液液体15mL×1瓶2-8℃保存碱性提取液液体15mL×1瓶2-8℃保存试剂一液体20mL×1瓶2-8℃保存试剂二粉剂×1支-20℃保存试剂三液体12mL×1瓶2-8℃保存试剂四A 粉剂×1支-20℃保存试剂四B 液体5mL×1瓶2-8℃保存试剂五液体40mL×1瓶2-8℃保存试剂六液体70mL×1瓶2-8℃保存NADP 标准品粉剂×1支-20℃保存NADPH 标准品粉剂×1支-20℃保存溶液的配制:1、试剂二:临用前加入6mL 蒸馏水充分混匀,溶解后2-8℃保存4周。
2、试剂四:临用前将试剂四A 溶解到试剂四B 中,溶解后分装保存,避免反复冻融,-20℃保存4周。
3、NADP 标准品:临用前加入1.27mL蒸馏水,即5µmol/mL ,-20℃可以保存2周。
4、NADPH 标准品:临用前加入1.2mL 蒸馏水,即5µmol/mL ,-20℃可以保存2周。
产品说明:辅酶ⅡNADP(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,NADP +和NADPH 含量测定可以计算NADP (NADPH +NADP +)含量和NADPH/NADP +比值,其变化与磷酸戊糖途径和生物合成以及抗氧化反应密切相关。
NADPH/NADP +比值不仅是细胞氧化还原态的主要标志之一,而且在PPP 途径、生物合成和抗氧化代谢中具有重要调控作用。
分别用酸性和碱性提取液提取样品中NADP +和NADPH 。
NADPH 通过PMS 的递氢作用,使氧化型噻唑蓝(MTT )还原为甲瓒,570nm 下检测吸光值,从而测定NADPH 含量。
产几丁质酶的筛选及活力测定
产几丁质酶的筛选及活力测定一、实验材料1.菌种:白僵菌,或其他菌种及土壤采样等(菌种接种于PDA斜面上,28℃,80%RH 培养14 d后分别置于4℃和20℃备用。
)2.试剂:DNS试剂:(称取3,5-二硝基水杨酸3.15 g,加水500 mL。
,搅拌5 s,水浴至45。
然后逐步加入100 mL 0.2g/mL的氢氧化钠溶液,同时不断搅拌。
直到溶液清澈透明(注意:在加入氢氧化钠过程中,溶液温度不要超过48℃)。
再逐步加入四水酒石酸钾钠91.0 g苯酚2.5 g和无水亚硫酸钠2.5 g。
继续45"C水浴加热,同时补加水300 mL,不断搅拌,直到加入的物质完全溶解。
停止加热,冷却至室温后,用水定容至1000 mL。
用烧结玻璃过滤器过滤,取滤液,储存在棕色瓶中,避光保存。
室温下存放7 d后可以使用。
) 几丁质酶基础培养基(g/L):葡萄糖5.09,蛋白胨5.09,KH2P04、KCI、MgS04·7H20各0.59,FeS04·2H20 0.1 g,pH 7.0。
几丁质酶诱导培养基(g/L):蛋白胨5.09,KH2P04、KCI、MgS04·7H20各0.59,ZnS04·7H202 0.01 g,胶体几丁质10 ml,pH 7.0。
(胶体几丁质固体培养基。
0.5 g K2HPO4,0.5 gKH2PO4,0.5 g MgSO4·H2O,0.1 g FeSO4·7H2O,0.1 gZnSO4·7H2O 500 ml 1%胶体几丁质,500 ml蒸馏水,15 g 琼脂,pH7.2,121℃灭菌15 min,冷却至50℃左右倒平板)马铃薯培养基(PDA);去皮的马铃薯200 g切块,沸水煮30 min,纱布过滤,20 g蔗糖,209琼脂,加热至全部溶解,定容至1 L。
二、筛选1.初筛采用平板透明圈法。
用0.1 mL孢子悬液(1×107/mL)滴于几丁质平板的中央(每个样品重复3次),28℃培养7d,其菌落周围有透明圈出现。
小鼠几丁质酶3样蛋白1(CHI3L1)酶联免疫吸附测定试剂盒
5th Edition, revised in Dec, 2013(本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断!)小鼠几丁质酶3样蛋白1(CHI3L1)酶联免疫吸附测定试剂盒 使用说明书Mouse CHI3L1 (Chitinase 3-like 1) ELISA Kit 产品货号:E-EL-M0016c使用前请仔细阅读说明书。
如果有任何问题,请通过以下方式联系我们:全国免费电话400-660-4808 销售部电话************技术部电话************电子邮箱(销售) ********************电子邮箱(技术) **************************QQ 客服1037150941 网址 联系时请提供产品货号(见试剂盒标签),以便我们更高效地为您服务。
小鼠几丁质酶3样蛋白1(CHI3L1)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书产品货号:E-EL-M0016c(本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!)声明:尊敬的客户,感谢您选用本公司的产品。
本产品适用于体外定量检测小鼠血清、血浆或其它相关生物液体中天然和重组CHI3L1浓度。
使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分!如有疑问,请及时联系伊莱瑞特生物科技有限公司。
试剂盒组成:特别说明:*: [96T/48T](打开包装后请及时检查所有物品是否齐全完整)#:一周内使用可存于4℃,需长时间存放或多次使用建议存于-20℃.相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出!检测原理:本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。
用抗小鼠CHI3L1抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的小鼠CHI3L1会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。
依次加入生物素化的抗小鼠CHI3L1抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。
抗小鼠CHI3L1抗体与结合在包被抗体上的小鼠CHI3L1结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。
碧云天生物技术激酶活性检测试剂盒说明书
碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology 订货热线:400-168-3301或800-8283301 订货e-mail :******************技术咨询:*****************网址:碧云天网站 微信公众号Kinase-Lumi™化学发光法激酶活性检测试剂盒产品编号 产品名称包装 S0150S Kinase-Lumi™化学发光法激酶活性检测试剂盒 1000次 S0150MKinase-Lumi™化学发光法激酶活性检测试剂盒10000次产品简介:Kinase-Lumi™化学发光法激酶活性检测试剂盒(Kinase-Lumi™ Luminescent Kinase Assay Kit ),是一种通过化学发光法测定激酶反应后溶液中ATP 的剩余量(最高可达10μM)来定量检测激酶活性的试剂盒。
本试剂盒也可用于检测任何消耗ATP 的酶,例如ATPase 。
本试剂盒可以检测反应体系中浓度最高为10μM 的ATP ,并在0-10μM 范围内有良好的线性关系。
对于更高浓度的ATP ,可以选购检测浓度上限为50μM 的Kinase-Lumi™增强型化学发光法激酶活性检测试剂盒(Kinase-Lumi™ Plus Luminescent Kinase Assay Kit )或上限为200μM 的Kinase-Lumi™超强型化学发光法激酶活性检测试剂盒(Kinase-Lumi™ Max Luminescent Kinase Assay Kit ),或者需要适当稀释后再进行检测。
另外两个试剂盒分别在0-50μM 和0-200μM 范围内有良好的线性关系。
本试剂盒应用范围广,适用于各类消耗ATP 的激酶,包括以蛋白或多肽为底物的蛋白激酶和以糖、脂、醇等为底物的非蛋白激酶。
本试剂盒也同样适用于检测消耗ATP 的ATPase 。
本试剂盒的检测激酶活性的原理参考图1。
激酶在反应过程中催化ATP 上的磷酸基团转移到底物的羟基上,从而使ATP 转变为ADP ,这样就可以根据ATP 的减少量来定量激酶的活性。
几丁质酶的活性测定
几丁质酶活性的测定⑴几丁质酶几丁质是绝大多数真菌细胞壁的主要成份,而在植物中却不存在。
但高等植物普遍存在着几丁质酶,并可通过几丁质酶催化几丁质的水解,使植物具有抵御真菌侵染的能力(Shibuya and Minami, 2001)。
在正常情况下,高等植物的几丁质酶表达水平很低,而当植物体遭受到病原真菌、细菌和病毒侵染,机械创伤或乙烯处理时,其表达活性显著增强。
特别是在β-1,3-葡聚糖酶的协同作用下,可明显抑制真菌的生长(Sela-Buurlage et al., 1993)。
几丁质酶是植物体中与防御有关的一种次生水解酶,是植物广谱防御机制的一个成分(V an Loon and Van Strien, 1999),它能催化真菌细胞壁的重要成分——几丁质的水解,从而抑制真菌的生长增殖,提高植物的抗真菌能力。
而植物体中尚未发现几丁质酶作用的底物,所以,几丁质酶在植物体中诱导与积累,对于增强植物的抗病能力有重要作用。
几丁质酶主要水解几丁质多聚体β-1,4键,产生N-乙酰葡聚糖胺寡聚体,水解可以是外切作用也可以是内切作用。
⑵试剂的配制①胶状几丁质的制备称取粉末状几丁质(甲壳素,sigma)5.0 g,缓慢加入200 mL (≤4℃)预冷的浓HCl中,在磁力搅拌器上剧烈搅拌,待几丁质粉末均匀分散后,在水浴中轻度搅拌并缓慢加热至37 ℃混合物的粘度迅速增加,几分钟后粘度开始下降,混合物逐渐变得清亮。
当几丁质基本上溶解完毕时,用玻璃棉过滤,将滤液倒入2000 mL预冷(≤4℃)的蒸馏水中,搅拌,几分钟后几丁质沉淀,溶液变得混浊,30分钟后停止搅拌,将悬液置于冰箱(≤4℃)沉淀过夜。
倒掉上清,剩余部分用双层中性滤纸抽滤,沉淀用蒸馏水洗涤数次,待pH达到5以上时,加数滴1 N NaOH使溶液呈中性。
将上述中性沉淀物加到200 mL的蒸馏水中,剧烈搅拌重新悬浮,即为胶体几丁质溶液。
取该溶液5 mL, 105℃烘箱干燥至衡重,测定溶液几丁质的含量(胶体几丁质溶液的几丁质含量为: mg/mL),并将胶体几丁质溶液浓度稀释为1%。
Ca++Mg++-ATP 酶活性检测试剂盒说明书
BC0960 -- 第 1 页,共 4 页Ca Mg -ATP 酶活性检测试剂盒说明书可见分光光度法货号:BC0960 规格:50T/24S产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称 规格 保存条件 试剂一 液体30 mL×1瓶 2-8℃保存 试剂二 液体4 mL×1 瓶 2-8℃保存 试剂三 粉剂×2支 -20℃保存 试剂四 液体2 mL×1瓶 2-8℃保存 试剂五 液体3 mL×1瓶 2-8℃保存 试剂六 粉剂×1瓶 2-8℃保存 试剂七 粉剂×1瓶 2-8℃保存 试剂八 液体15 mL×1 瓶 常温保存 标准品液体1 mL×1支2-8℃保存溶液的配制:1、 试剂三:临用前取1支加入1 mL 蒸馏水充分混匀待用;现用现配。
用不完的试剂-20℃分装保存一周。
2、 试剂六:临用前加入15 mL 蒸馏水,溶解后2-8℃保存两周。
3、 试剂七:临用前加入15 mL 蒸馏水,溶解后2-8℃保存两周。
4、 标准品:10mmol/L 标准磷贮备液。
将标准品 20倍稀释,即取0.1 mL 标准品加1.9 mL 蒸馏水充分混匀,配成0.5 μmol/mL 标准磷应用液,现用现配。
5、 定磷剂的配制:按H 2O :试剂六:试剂七:试剂八=2:1:1:1的比例配制,配好的定磷剂应为浅黄色。
若无色则试剂失效,若是蓝色则为磷污染,定磷剂根据样本量现用现配。
注意:配试剂最好用新的烧杯、玻棒和玻璃移液器,也可以用一次性塑料器皿,避免磷污染。
产品说明:Ca ++Mg ++-ATP 酶广泛分布于植物、动物、微生物和细胞中,可催化ATP 水解生成ADP 和无机磷。
根据Ca ++Mg ++-ATP 酶分解ATP 生成ADP 及无机磷,通过测定无机磷的量来确定ATP 酶活性高低。
ATP ADP + Pi注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
碱性磷酸酶活性测定试剂盒说明书
碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP/ALP)活性测定试剂盒说明书分光光度法50管/24样注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:AKP/ALP是一种含锌的糖蛋白酶,在碱性环境中可水解各种天然及人工合成的磷脂单酯化合物。
AKP/ALP 广泛分布于人体各脏器中,以肝脏为主。
测定原理:在碱性环境中,AKP/ALP催化磷酸苯二钠生成游离酚;酚与4-氨基安替比林和铁氰化钾反应红色亚醌衍生物,在510nm有特征光吸收;通过测定510 nm吸光度增加速率,来计算AKP活性。
自备仪器和用品:可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。
试剂组成和配制:试剂一:液体×1瓶,4℃保存。
试剂二:液体×1瓶,4℃避光保存。
试剂三:液体×1瓶,4℃避光保存。
试剂四:液体×1瓶,4℃避光保存,未变成蓝绿色之前均可使用。
标准品:液体×1支(EP管中),2 μ mol/mL酚标准液,4℃保存。
粗酶液提取:1. 组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆,4℃、8000g离心10min,取上清液待测。
2. 细菌或细胞:按照细菌或细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后8000g,4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。
3. 血液可直接测定,或者适当稀释后测定。
测定步骤:1. 分光光度计预热30min,调节波长到510 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂三置于37℃水浴中预热30 min。
3. 空白管:取EP管,加入20μL蒸馏水,200μL试剂二,200μL试剂三,混匀后置于37℃水浴中保温15min;加入试剂四600μL,混匀后于510 nm测定吸光度,记为A空白管。
土壤几丁质酶活性检测试剂盒说明书__可见分光光度法UPLC-MS-4040
土壤几丁质酶活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
货号:UPLC-MS-4040规格:50T/24S产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件试剂一液体3mL×1瓶(自备)常温保存试剂二液体10mL×1瓶2-8℃保存试剂三液体18mL×1瓶2-8℃保存试剂四液体4mL×1瓶2-8℃保存试剂五A粉剂×2瓶2-8℃保存试剂五B液体55mL×1瓶2-8℃保存标准品粉剂×1支2-8℃保存溶液的配制:1、试剂一:自备甲苯。
2、试剂三:悬浊液,使用前摇匀。
3、试剂四为饱和溶液,低温(2-8℃)取出可能会有晶体析出,加热使其溶解即可。
4、试剂五:临用前取1瓶加入25mL试剂五B,充分溶解,现配现用。
用不完的试剂2-8℃可以保存4周。
5、标准液:5mg N-乙酰氨基葡萄糖。
临用前加入1mL试剂二配制成5mg/mL的标准溶液,即5000μg/mL的标准溶液,2-8℃可以保存4周。
产品说明:几丁质来源非常丰富,是自然界中仅次于纤维素的第二大类生物高聚物,由于其分解非常缓慢而大量堆积容易造成环境严重污染。
几丁质酶是影响土壤中氮矿化的一种重要的酶,其分解几丁质控制着氮循环的关键步骤。
几丁质酶水解几丁质产生N-乙酰氨基葡萄糖,N-乙酰氨基葡萄糖与碱共热产生的中间化合物可进一步与对二甲氨基苯甲醛反应产生显色物质,该显色物质在585nm处有特征吸收峰,吸光值增加速率反映了几丁质酶的活性。
Chitin Chitinase N-Acetyl Glucosamine OH-Glucose OxazolineGlucose Oxazoline+P-Dimethylaminobenzaldehyde H+585nm 注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
亚硝酸还原酶(NiR)活性检测试剂盒说明书__可见分光光度法UPLC-MS-4522
22亚硝酸还原酶(NiR )活性检测试剂盒说明书注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
货号:UPLC-MS-4522规格:50T/24S可见分光光度法产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体30mL×1瓶2-8℃保存试剂一液体8mL×1瓶2-8℃保存试剂二粉剂×2瓶2-8℃保存试剂三粉剂×1瓶2-8℃保存试剂四液体25mL×1瓶2-8℃保存试剂五液体25mL×1瓶2-8℃保存标准品液体1mL×1支2-8℃保存溶液的配制:1、试剂二:临用前加入6mL 蒸馏水充分溶解,2-8℃保存2周;2、试剂三:临用前加入15mL 蒸馏水,可70-80℃加热溶解;2-8℃保存3个月。
3、试剂五:若出现沉淀,可70-80℃加热溶解;4、标准品:10µmol/mL 亚硝酸钠标准溶液;5、工作液:临用前根据样本量将试剂四和试剂五按1:1的比例混合,现用现配。
产品说明:亚硝酸还原酶(Nitrite reductase ,NiR )是亚硝态氮还原过程中的关键酶,在自然界氮素循环过程中发挥着重要作用,其广泛存在于微生物及植物体内,能够催化亚硝酸盐还原,减少亚硝态氮在环境中的积累,降低其对生物体生长发育的毒害作用。
亚硝酸还原酶可将NO -还原为NO ,使样本中参与重氮化反应生成紫红色化合物的NO -减少,即540nm 处吸光值的变化可反应样本中亚硝酸还原酶的活性。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:可见分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、天平、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤:一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)1.组织:按样本质量(g ):提取液体积(mL )1:5~10比例(建议称取0.1g 样本,加入1.0mL 提取液)加入提取液,冰浴匀浆后,于4℃,10000g ,离心10min ,弃沉淀,取上清液置于冰上待测。
多酚氧化酶(PPO)活性检测试剂盒说明书 可见分光光度法
多酚氧化酶(PPO)活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定货号:BC0190规格:50T/24S产品简介:PPO主要存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是一种含铜的氧化酶,能使一元酚和二元酚氧化产生醌,从而引起褐化,与果蔬加工、茶叶品质和组培等密切相关。
PPO能够催化邻苯二酚产生醌,后者在410nm有特征光吸收。
试验中所需的仪器和试剂:可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
产品内容:提取液:液体60mL×1瓶,4℃保存,用前混匀;试剂一:液体40mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体10mL×1瓶,4℃保存。
操作步骤:一、粗酶液提取:1.收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照每500万细菌或细胞加入1mL提取液,超声波破碎细菌或细胞(功率20%,超声3秒,间隔10秒,重复30次);8000g4℃离心10分钟,取上清,置冰上待测。
2.称取约0.1g组织,加入1mL提取液进行冰浴匀浆。
8000g4℃离心10分钟,取上清,置冰上待测。
二、测定操作表:1、分光光度计预热30min以上,调节波长至410nm,蒸馏水调零。
2、样本测定(在EP管中依次加入下列试剂)试剂名称(μL)测定管对照管试剂一600600试剂二150150样本150煮沸的样本15037℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)中准确水浴10min后,迅速放入沸水中加热10min。
冷却后,5000g,常温离心10min,收集上清,用蒸馏水调零,410nm处检测测定管和对照管吸光度,计算ΔA=A测定-A对照。
注意:每个测定管需要设置一个对照管,可以在不同对照管中加入不同样品的粗酶液,然后集中进行5 min沸水浴处理。
PPO活性计算:(1)按样本蛋白浓度计算:单位的定义:每分钟每mg组织蛋白在每mL反应体系中使410nm处吸光值变化0.01定义为一个酶活力单位。
辅酶 I NAD 含量检测试剂盒(WST 显色法)说明书__ 可见分光光度法UPLC-MS-6007
辅酶I NAD(H)含量检测试剂盒(WST显色法)说明书货号:UPLC-MS-6007规格:50T/24S可见分光光度法产品内容:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件酸性提取液液体15mL×1瓶2-8℃保存碱性提取液液体15mL×1瓶2-8℃保存试剂一液体20mL×1瓶2-8℃保存试剂二液体6mL×1瓶2-8℃保存试剂三液体12mL×1瓶2-8℃保存试剂四液体3mL×1瓶-20℃保存试剂五液体40mL×1瓶2-8℃保存NAD标准品粉剂×1支-20℃保存NADH标准品粉剂×1支-20℃保存溶液的配制:1、NAD标准品:临用前加入1.5mL蒸馏水,即2µmol/mL。
-20℃可以保存2周。
2、NADH标准品:临用前加入1.4mL蒸馏水,即2µmol/mL。
-20℃可以保存2周。
产品说明:辅酶I包括还原型和氧化型两种形式,在生物氧化中起传递氢的作用。
氧化型辅酶I又称烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)是脱氢酶的辅酶,它在糖酵解、糖异生、三羧酸循环和呼吸链中发挥着不可替代的作用。
中间产物会将脱下的氢递给NAD,使之成为NADH(还原型辅酶I)。
而NADH则会作为氢的载体,在呼吸链中通过化学渗透偶联的方式,合成ATP。
NAD(H)在机体内有重要的生理意义,与物质代谢、能量代谢、抗细胞衰老、抗氧化以及一些疾病的发生密切相关。
体内辅酶I含量降低会导致细胞损伤或衰亡。
分别用酸性和碱性提取液提取样本中NAD+和NADH,在1-mPMS作用下,WST-1可与NADH反应,产生水溶性formazan,在450nm下有特征吸收峰,而NAD+可被乙醇脱氢酶还原为NADH,进一步采用WST-1检测。
Ethanol+NAD+Alcohol Dehydrogenase Acetaldehyde+H++NADHNADH+WST-1+1-mPMS Formazan(450nm)注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒说明书
Beijing Solarbio Science & Technology Co., LtdTel: 400-968-6088超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
货号:BC0170规格:50T/24S产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体60 mL×1瓶2-8℃保存试剂一液体15 mL×1瓶2-8℃保存试剂二液体160 μL×1支2-8℃保存试剂三液体11 mL×1瓶2-8℃保存试剂四液体0.5mL×1支2-8℃保存溶液的配制:1、试剂二:使用前先离心再吹打混匀。
根据样本量将试剂二用蒸馏水稀释10倍后使用,当天用完。
2、试剂四:根据样本量将试剂四用蒸馏水稀释5倍后使用,当天用完。
产品说明:SOD(EC 1.15.1.1)是一种广泛存在于生物体内的金属酶,是重要的氧自由基清除剂,能催化超氧化物阴离子发生歧化作用,生成H2O2和O2。
SOD不仅是超氧化物阴离子清除酶,也是H2O2主要生成酶,在生物抗氧化系统中具有重要作用。
通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子(O2-),O2-可还原氮蓝四唑生成蓝色甲臜,后者在560nm 处有吸收;SOD可清除O2-,从而抑制了甲臜的形成;反应液蓝色越深,说明SOD活性愈低,反之活性越高。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、细胞超声破碎仪、冰和蒸馏水。
操作步骤:一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)1.细菌或细胞样本:收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500-1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率200W,超声3s,间隔10s,重复30次),8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
土壤淀粉酶(S-AL)活性检测试剂盒说明书__可见分光光度法UPLC-MS-4038
可见分光光度法土壤淀粉酶(S-AL)活性检测试剂盒说明书注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
货号:UPLC-MS-4038规格:50T/24S产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件试剂一液体10mL×1瓶2-8℃保存试剂二粉剂×1瓶2-8℃保存试剂三液体65mL×1瓶2-8℃保存标准品粉剂×1支2-8℃保存溶液的配制:1、试剂二:临用前加入5mL蒸馏水,置于常温水中并加热至煮沸,期间不断搅拌或震荡至粉剂溶解,用不完的试剂2-8℃保存4周。
2、标准品:10mg麦芽糖。
临用前加入1.38mL蒸馏水配制成20μmol/mL的储备液,2-8℃保存两周。
产品说明:淀粉酶(EC3.2.1.1)是催化淀粉水解的一类酶的总称。
土壤中的淀粉酶主要来自于微生物,是一种重要的酶制剂,广泛应用于粮食加工、食品、酿造、发酵、纺织品工业和医药行业。
淀粉酶水解淀粉产生还原糖,可与3,5-二硝基水杨酸反应生成红棕色物质,在540nm处有特征吸收峰,颜色深浅在一定范围内与还原糖量成正比。
3,5-Dinitrosalicylic AcidSucrose S-AL Reducing Sugare3-Amino-5-Nitrosalicylic acid(540nm)注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:天平、恒温培养箱/水浴锅、低温离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、30~50目筛、研钵、甲苯(不允许快递)。
操作步骤:一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干,过30~50目筛。
二、测定步骤1.分光光度计预热30min,波长调至540nm,蒸馏水调零。
2.将20μmol/mL的麦芽糖储备液用蒸馏水稀释为1、0.9、0.8、0.7、0.6、0.5、0.4、0.3μmol/mL的标准溶液备用。
肌酸激酶(CK)活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法
肌酸激酶(CK)活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号:BC1140规格:50T/48S产品内容:提取液:液体60mL×1瓶,4℃保存;试剂一:粉剂×1瓶,-20℃避光保存,临用前加10mL蒸馏水溶解;用不完的分装后-20℃保存,禁止反复冻融;试剂二:粉剂×1支,-20℃保存,临用前加入0.5mL蒸馏水溶解;用不完的分装后-20℃保存,禁止反复冻融;试剂三:粉剂×1支,-20℃保存,临用前加入1mL蒸馏水溶解;用不完的分装后-20℃保存,禁止反复冻融;试剂四:粉剂×2支,-20℃避光保存,临用前加入0.65mL蒸馏水溶解;用不完的分装后-20℃保存,禁止反复冻融;试剂五:液体15mL×1瓶,4℃保存。
产品说明:C肌酸激酶(Creatine Kinase,CK)(EC2.7.3.2)也成为肌酸磷酸激酶,主要存在于心脏、肌肉以及脑等组织中,能可逆地催化肌酸与ATP之间的转磷酰基反应,是一个与细胞能量运转、肌肉收缩、ATP再生有直接关系的重要激酶。
CK催化磷酸肌酸和ADP生成肌酸和ATP,己糖激酶催化ATP与葡萄糖形成6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化6-磷酸葡萄糖与NADP+生成NADPH,导致340nm光吸收值增加,以此来表示CK酶活。
自备实验用品及仪器:天平、低温离心机、恒温水浴锅、紫外分光光度计、1mL石英比色皿、恒温水浴锅和蒸馏水。
操作步骤:一、粗酶液提取1.组织样本:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液)进行冰浴匀浆,然后10000g,4℃离心15min,取上清,置冰上待测。
2.血清样本:直接测定。
3.细胞样本:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL提取液)加入提取液,冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后于4℃,10000g离心10min,取上清待测。
几丁质酶检测
迪信泰检测平台
几丁质酶检测
几丁质酶(Chitinase)是能够催化几丁质中β-1,4糖苷键水解为N-乙酚寡糖和
葡萄糖的酶系,主要存在于甲壳类动物的外壳与软体动物的器官、真菌类的细胞壁、以及受侵染的高等植物中,具有降解真菌细胞壁抵御真菌侵染的作用,同时其降解产物氨基糖寡糖素在调节动植物细胞代谢中起着重要作用。
迪信泰检测平台采用生化法,可高效、精准的检测几丁质酶的活性变化。
此外,我们还提供其他糖代谢类检测服务,以满足您的不同需求。
生化法测定几丁质酶样本要求:
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期:2~3周。
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告,报告包括:
1. 实验步骤(中英文)。
2. 相关参数(中英文)。
3. 图片。
4. 原始数据。
5. 几丁质酶活性信息。
迪信泰检测平台可根据需求定制其他物质测定方案,具体可免费咨询技术支持。
碧云天Casapase 3活性检测试剂盒说明书
碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology订货热线:400-168-3301或800-8283301订货e-mail:******************技术咨询:*****************碧云天网站微信公众号网址:Caspase 3活性检测试剂盒产品编号产品名称包装C1115 Caspase 3活性检测试剂盒20次产品简介:Caspase 3活性检测试剂盒(Caspase 3 Activity Assay Kit)是采用分光光度法检测细胞或组织裂解液中caspase 3酶活性或纯化的caspase 3酶活性的试剂盒。
Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是一个在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。
Caspase 3也称CPP32、Yama或apopain,有时被写作caspase-3或caspase 3,属于caspase家族的CED-3亚家族(CED-3 subfamily),是细胞凋亡过程中的一个关键酶。
Caspase 3是哺乳动物细胞中研究最多的一个caspase。
Caspase 3可以剪切procaspase 2、6、7和9,并可以直接特异性剪切许多caspase底物,包括PARP (poly(ADP-ribose) polymerase),ICAD (Inhibitor of caspase-activated deoxyribonuclease),gelsolin和fodrin等。
这些由caspase 3介导的蛋白剪切是细胞凋亡分子机制的重要组成部分。
另外,caspase 3在细胞核凋亡过程中也起到了关键作用,包括染色质固缩(chromatin condensation),DNA片段化(DNA fragmentation)等。
同时caspase 3对细胞起泡(cell blebbing)也起到关键作用。
碧康生物 α-半乳糖苷酶(α-GAL)活性检测试剂盒说明书-可见分光光度法 50T 24S
α-半乳糖苷酶(α-GAL)活性检测试剂盒说明书可见分光光度法BC257050T/24S试剂名称规格保存条件提取液液体50 mL×1瓶2-8℃保存试剂一粉剂×2瓶-20℃保存试剂二液体15 mL×1瓶2-8℃保存试剂三液体80 mL×1瓶2-8℃保存标准品液体1 mL×1支2-8℃保存溶液的配制:1、试剂一:临用前取1瓶加入2.67 mL蒸馏水,充分溶解备用;用不完的试剂-20℃分装保存4周,避免反复冻融;2、标准品:5 μmol/mL的对硝基苯酚溶液。
α-GAL (EC 3.2.1.22)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,能专一地催化α-半乳糖苷键的水解,主要参与棉子糖、水苏糖、蜜二糖和半乳甘露聚糖等半乳糖苷的降解。
α-GAL对于植物种子的萌发至关重要,种子萌发初期,其催化产生的D-半乳糖通过糖酵解途径迅速转化和消耗,为种子的萌发提供最初的能量来源,后期则主要参与细胞壁储藏多糖水解。
α-GAL分解对-硝基苯-α-D-吡喃半乳糖苷生成对-硝基苯酚,后者在400nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算α-GAL活性。
α-GALp-Nitrophenyl α-D-Galactopyranoside p-Nitrophenol(400nm) 注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
可见分光光度计、低温离心机、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、超声破碎仪、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)1、细菌或培养细胞的处理:收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照每1000万细菌或细胞加入1mL 提取液,超声波破碎细菌或细胞(功率200W,超声3s,间隔10s,重复30次),15000g,4℃,离心20min,取上清,置冰上待测。
β-1,3 葡聚糖酶(β-1,3-GA活性检测试剂盒说明书__可见分光光度法UPLC-MS-4216
β-1,3葡聚糖酶(β-1,3-GA)活性检测试剂盒说明书可见分光光度法:UPLC-MS-4216:50T/24S试剂名称规格保存条件提取液液体50mL×1瓶2-8℃保存试剂一粉剂×2支2-8℃保存试剂二液体42mL×1瓶2-8℃保存标准品粉剂×1支2-8℃保存溶液的配制:1.试剂一:临用前取1支加1.6mL蒸馏水溶解,用不完的试剂2-8℃保存4周;2.标准品:10mg无水葡萄糖。
临用前加入1mL蒸馏水溶解,配制成10mg/mL葡萄糖溶液备用,2-8℃保存2周。
β-1,3-GA(EC3.2.1.73)主要存在植物中,催化β-1,3-葡萄糖苷键水解。
在植物染病或处于其他逆境条件下,可诱导细胞大量合成β-1,3-GA,因此β-1,3-GA活性测定广泛应用于植物病理和逆境生理研究。
β-1,3-GA水解昆布多糖,内切β-1,3-葡萄糖苷键,产生还原末端,通过测定还原糖生成速率,来计算其酶活性。
Fucoidanβ-1,3-GA Reducing SugarReducing Sugar+3,5-Dinitrosalicylic Acid3-Amino-5-Nitrosalicylate(540nm)注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、超声破碎仪、冰和蒸馏水。
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)1.组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。
12000g,4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2.细菌或细胞:收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照每500万细菌或细胞加入1mL提取液,超声波破碎细菌或细胞(功率200w超声3s,间隔10s,重复30次);12000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
过氧化氢酶(CAT)活性检测试剂盒(钼酸铵法)可见分光光度法UPLC-MS-4534
过氧化氢酶(CAT)活性检测试剂盒说明书(钼酸铵法)可见分光光度法货号:UPLC-MS-4534规格:50T/24S产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体50mL×1瓶4℃保存试剂一液体25mL×1瓶4℃保存试剂二粉剂×2瓶4℃保存标准品液体0.5mL×1瓶4℃保存溶液的配制:1、试剂二:临用前取1瓶试剂二加入17.5mL蒸馏水,充分溶解,用不完的试剂4℃保存一周。
2、20μmol/mL标准液的配制:液体置于试剂瓶内EP管中,使用前需先离心。
本试剂盒所提供标准品为1mmol/mL H2O2标准溶液,临用前取0.2mL标准品加入9.8mL试剂一稀释或者根据样本量按照比例配制,充分混匀,即为20μmol/mL标准液,现配现用。
产品说明:CAT(EC1.11.1.6)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是最主要的H2O2清除酶,在活性氧清除系统中具有重要作用。
H2O2可与钼酸铵反应形成稳定的黄色复合物,在405nm处有强烈吸收峰,且其吸光值大小与过氧化氢浓度成正比。
通过测定反应体系中剩余的H2O2量,得出被CAT催化分解的H2O2量,进而反映CAT的活性。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、恒温水浴锅、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤:一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)1、细菌、细胞或组织样本的制备:a、细菌或培养细胞:收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照每500万细菌或细胞加入1mL提取液,超声波破碎细菌或细胞(功率200W,超声3s,间隔9s,重复30次);8000g,4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
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几丁质酶活性检测试剂盒说明书可见分光光度法
注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号:BC0820
规格:50T/24S
产品内容:
提取液:液体80mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体40mL×1瓶,4℃保存,使用前摇匀。
试剂二:液体15mL×1瓶,4℃保存。
标准品:粉剂×1瓶。
5mg N-乙酰氨基葡萄糖,4℃保存。
临用前加入2.27mL蒸馏水配成10μmol/mL 的标准溶液。
产品说明:
几丁质酶主要存在于虾、蟹、昆虫等甲壳类动物的外壳与软体动物的器官(例如乌贼的软骨),以及真菌类的细胞壁中。
而几丁质酶(EC3.2.1.14)可催化几丁质水解,具有抵御真菌侵染的作用,成为抗真菌病害的研究热点。
几丁质酶水解几丁质产生N-乙酰氨基葡萄糖,进一步与3,5-二硝基水杨酸产生棕红色化合物,在540nm 处有特征吸收峰,吸收值增加速率反映了几丁质酶的活性。
自备实验用品及仪器:
天平、水浴锅、离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、蒸馏水。
操作步骤:
一、粗酶液提取
1.组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.15g组织,加入1.5mL
提取液)进行冰浴匀浆,然后10000pm,4℃离心20min,取上清,置冰上待测。
2.真菌:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议750万细胞加入1.5mL
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提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3s,间隔7s,总时间3min);然后12000rpm,4℃,离心20min,取上清置于冰上待检。
3.培养液:直接测定。
二、测定操作表:
1、可见分光光度计预热30min。
波长调至540nm,蒸馏水调零。
2、将标准溶液稀释为4、
3、2.5、2、1μmol/mL的标准溶液备用。
3、在EP管中分别加入:
试剂名称测定管对照管标准管空白管
样品(mL)0.50.5--标准溶液(mL)--0.5-
蒸馏水(mL)---0.5
试剂一(mL)0.5-0.50.5
混匀,37℃水浴1h,沸水浴5min。
试剂一(mL)-0.5--
8000rpm常温离心10min,分别取上清液0.8mL于新的EP管中。
试剂二(mL)0.20.20.20.2
混匀,沸水浴反应10min,立即置于冰上至室温。
测定每管在540nm下的吸光度,记为A测定管、A 对照管、A标准管、A空白管。
计算ΔA测定=A测定管-A对照管,ΔA标准=A标准管-A空白管。
三、计算公式
1、标准曲线的绘制:
以ΔA标准为y轴,标准溶液浓度为x轴,绘制标准曲线,得到标准方程y=kx+b。
将ΔA测定带入标准方程中,得到x(μmol/mL)
2、几丁质酶活的计算:
(1)按照样本重量计算
酶活性定义:37℃下,每g组织每小时分解几丁质产生1μmol N-乙酰氨基葡萄糖的酶量为一个酶活性单位。
几丁质酶活性(U/g鲜重)=x×V样÷(V样÷V样总×W)÷T=1.5×x÷W。
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(2)按照蛋白质浓度计算
酶活性定义:37℃下,每毫克蛋白每小时分解几丁质产生1μmol N-乙酰氨基葡萄糖的酶量为一个酶活性单位。
几丁质酶活性(U/mg prot)=x×V样÷(V样×Cpr)÷T=x÷Cpr。
(3)按照细胞数量计算
酶活性定义:37℃下,每104个细胞每小时分解几丁质产生1μmolN-乙酰氨基葡萄糖的酶量为一个酶活性单位。
几丁质酶活性(U/104cell)=x×V样÷(V样÷V样总×细胞数量)÷T=1.5×x÷细胞数量。
(4)按照培养液体积计算
酶活性定义:37℃下,每毫升培养液每小时分解几丁质产生1μmol N-乙酰氨基葡萄糖的酶量为一个酶活性单位。
几丁质酶活性(U/mL)=x×V样÷V样÷T=x。
V样:反应体系中样本体积,0.5mL;V样总:加入提取液体积,1.5mL;
W:样本质量,g;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;
T:反应时间,1h;细胞数量:以104为单位,万个。
注意事项:
1、反应结束后尽快进行比色。
2、吸光值大于1.5时,样品适当稀释再测定,注意计算公式里乘以稀释倍数;或者缩短37℃水浴时间到X
小时(如0.5小时),按照原先计算公式得到的结果再除以X。
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