实验四 果蝇的三点测交 一、实验目的 掌握三点测交的原理及方法;学习

实验四果蝇的三点测交

一、实验目的

掌握三点测交的原理及方法；学习三点测交的数据统计处理及分析方法；了解绘制遗传学图的原理和方法。

二、实验材料

果蝇品系：野生型果蝇（+++）：红眼、长翅、直刚毛

三隐性果蝇（wmsn3）：白眼、小翅、焦刚毛

三、实验原理

位于同一条染色体上的基因一般是随染色体一起传递的，即这些基因是连锁的，而同源染色体上的基因之间会发生一定频度的交换，因此其连锁关系发生改变，使子代中出现一定数量的重组型。重组型出现的多少反映出基因间发生交换的频率的高低。而基因在染色体上是呈直线排列的，基因间距离越远，其间发生交换的可能性就越大，即交换频率越高，反之则小，交换频率就低。也就是说基因间距离与交换频率有一定对应关系。基因图距就是通过重组值的测定而得到的。如果基因座位相距很近，重组率与交换率的值相等，可以直接把重组率的大小作为有关基因间的相对距离，把基因顺序地排列在染色体上，绘制出遗传连锁图。如果基因间相距较远，两个基因间往往发生二次以上的交换，这时如简单地把重组率看作交换率，那么交换率就会被低估，图距就会偏小。这时需要利用实验数据进行校正，以便正确估计图距。基因在染色体上的相对位置的确定除进行两个基因间的测交外，更常用的是三点测交法，即同时研究三个基因在染色体上的位置。如m、sn3、w三个基因是连锁的（它们都在X染色体上），要测定三个基因的相对位置可以用野生型果蝇（+++，表示三个相应的野生型基因）与三隐性果蝇（msn3w，三个突变型基因）杂交，制成三因子杂种msn3w /＋＋＋，再用三隐性个体对雌性三因子杂种进行测交，以测出三因子杂种在减数分裂中产生的配子类型和相应数目。由于基因间的交换，除产生亲本类型的2种配子外，还有6种重组型配子，因而在测交后代中有8种不同表型的果蝇出现，这样，经过数据的统计和处理，一次试验就可以测出3个连锁基因的距离和顺序，这种方法就叫做三点测交或三点试验。

四、实验步骤

1．选处女蝇：每组做正，反交各1瓶，正交选野生型为母本，三隐性雄蝇为父本。反交选三隐性雌蝇为母本，野生型为父本，将母本旧瓶中的果蝇全部麻醉处死，在8-12h内收集处女蝇5只，将处女蝇和5只雄蝇转移到新的杂交瓶中，贴好标签，于25℃培养。

2．7d后，释放杂交亲本（一定要干净）。

3．再过4-5天，F1成蝇出现，在处死亲本7天后，集中观察记录F1表型及性别。

4．选取5对F1代果蝇，转入一新培养瓶，于25℃培养，其余F1代果蝇处死。

5．7d后，处死F1亲本。

6．再过5d，F2成蝇出现，观察记录，连续统计7d，观察眼色，翅形及刚毛形态。正交只需统计雄性个体。要求每组至少统计250只果蝇。

五、作业：写出实验观察数据及结果的统计分析。