牛早期妊娠诊断新技术

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Heilongjiang Xumu Shouyi
2009年10月（下）
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超声波诊断法
主要有A 型超声波诊断仪、多普勒（Doppler ）超
声诊断仪（D 型仪
）和B 型超声波诊断仪。

用A 型超声波诊断仪对奶牛妊娠60天以后才能做出诊断。

在20世纪70年代A 超技术曾备受青睐，目前已很少应用。

D 型超声波诊断仪可通过测定胎儿和母体血流量、胎动等做较早期的诊断。

将A 型和D 型仪联合使用，可得到既早又准确的结果。

B 型超声波诊断仪可通过探查胎体、胎水、胎心搏动及胎盘等来判断妊娠阶段、胎儿数、胎儿性别及胎儿状态等。

对牛可在配种后24天探测到胚胎。

2乳胶珠凝集抑制试验
乳胶珠凝集抑制试验（LAIT ）是—种免疫测定法，可用来快速定性测定奶牛乳中或尿中类绒毛膜促性腺激素（hCG-like ）。

此法是根据奶牛胚泡的绒毛膜滋养层细胞和胎盘子叶都能分泌hCG-like 来进行早期妊娠诊断的。

其原理是将hCG 吸附于聚苯乙烯乳胶珠上作为抗原，与hCG 免疫血清配套作为试
剂，供早期妊娠诊断使用。

优点是诊断时间早、
准确率高、反应快速（10分钟可检出结果）、设备简单、操作简便，便于在生产中推广应用。

3外源性生殖激素探试法
（1）雌激素探试法。

奶牛妊娠后在体内起主导作用的是孕酮，它可以对抗适量的外源性雌激素，使奶牛不表现发情反应。

可在奶牛配种后18～20天，肌肉注射合成雌激素（苯甲酸雌二醇、己烯雌酚）2～3毫克，注射后5天不出现发情者为妊娠。

（2）三合激素探试法。

对配种后30～40天的奶牛肌肉注射三合激素制剂5毫升，如果一周内不出现发情征状，即可诊断为妊娠阳性。

（3）促性腺素释放激素-A （LRH-A ）探试法。

在奶牛配种后第21～27天后注射LRH-A 200～500微
克，然后观察配种后35天内奶牛的返情情况，
不返情母牛为妊娠。

准确率可达91.9%。

4血清酸滴定法
奶牛在妊娠后胚胎快速生长的过程中，机体产生产一种特有的免疫球蛋白，这种球蛋白具有在酸性环境中与其他蛋白质形成低溶性复合物（絮状物）的特性，据此可对奶牛做出早期妊娠诊断。

具体方法是在室温（18～25℃）环境下，取配种后16～45天的
受检母牛血清0.5毫升加入小烧杯中，再加入0.2摩
尔/升盐酸7.5毫升，
用磁力搅拌器充分混合1～2分钟，而后用13%的硝酸滴定到pH 值0.68（滴定时间不少于5分钟），最后将溶液倒入试管中静置20分钟，在透射阳光下观察反应。

如溶液呈白色或红黄色絮状物者为阳性（妊娠），妊娠确诊率为96%，呈乳白色（红色）或无色透明者为阴性（未妊娠）。

5繁殖检测器法
日本的松浦优之（1993）开发出一种繁殖检测器，用于测定阴道黏液钠离子浓度，既可用于确定配种适期，又可以进行早期妊娠诊断。

对配种后15天的奶牛妊娠诊断、未妊娠诊断准确率均达100％。

6乳汁3%硫酸铜检测法
在乳样中加入3％的硫酸铜溶液，硫酸根可使乳样中的早孕因子（EPF ）发生凝集，从而能定性地分析出乳中是否含有EPF ，以达到妊娠诊断的目的。

具体方法是：取配种后20～30天母牛中午的常乳和末把
乳的混合乳样1毫升放入平皿中，
加入3%硫酸铜溶液1～3滴混匀，观察反应。

如混合液呈现云雾状者，可判断为妊娠；如混合液无变化可判断为空怀，此方法的妊娠诊断准确率可达90%。

7电子探针法
用电子探针检测阴道内部两个不同部位的电阻值，可判断奶牛所处的生理状态，进行适时输精和早期妊娠诊断。

电子探针有多种类型，其中2009型电子探针最为常用，其柄上有一个开关可以控制两个探头间的夹角，将探头插入阴道内距子宫颈2厘米处，根据其显示的电阻值来判断奶牛是否妊娠。

8经穴皮温测定法
母牛特定穴位温度的变化在一定程度上能反映
其生殖生理信息。

研究发现妊娠牛肾俞穴和气门穴皮温发生明显变化，且肾俞穴皮温发生明显变化的时间
比气门穴温变化的早。

故初步证明肾俞穴皮温、
气门穴温变化可作为奶牛早期妊娠诊断的客观指标。

9子宫颈-阴道黏液检查法
（1）子宫颈-阴道黏液纯化水煮沸法。

在奶牛配种后1～2个月时，取子宫颈-阴道部周围的黏液（玉米粒大小）放入清洁的试管中，再加入5毫升纯
牛早期妊娠诊断新技术
饲·养·技·术
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《黑龙江畜牧兽医》综合指导版
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1育雏准备
1.1加强育雏前准备
雏鹅的生理特点是：绒毛稀少，体小娇嫩，体温高且调节能力差，呼吸快，新陈代谢旺盛，消化道容积小，消化机能不健全，对外界环境的适应能力和抗
病力差。

据此，新建育雏舍地面要抹上水泥并打扫干净，已有雏舍要及时清除舍内粪便，补好裂缝，堵死鼠洞，擦净门窗，墙壁用20%石灰乳刷白消毒，用2%热火碱水反复消毒3～5次。

将水槽、饲槽、用具洗刷干净后搬入舍内，封闭门窗，将室温升到20~22℃，相对湿度65%~75%，然后用甲醛溶液加20克高锰酸钾（40～45毫升/立方米）熏蒸消毒24小时。

进雏前1～2天对育雏舍进行预温，若平养应准备新鲜的未发霉垫料。

1.2雏鹅选购
选购原则：①查清种蛋来源、种群健康状态，从无疫病、无污染场进雏；②选择绒毛干净、个头大、眼
睛明亮有神有光泽、反应灵敏、腹部大小适中柔软、
脐部收缩良好、无血斑、无水肿和脐炎、挣扎有力、叫
声响亮的雏鹅。

同时根据雏鹅大小强弱分群饲养，以免弱、
病雏因挤、压、饿而致死。

2加强管理
2.1控制适宜的温度、
湿度和密度育雏温度要求：3日龄内舍温28～30℃，4~10日龄25～28℃，湿度60%～65%，密度为由20～25只/平方米减少到15～20只/平方米；11～20日龄舍温要求20～25℃，湿度65%～70%，密度为12～15只/平方米；21～30日龄舍温18～20℃，并逐渐过渡到自然温度，湿度65%～70%，密度为8～12只/平方
米。

在实际生产中可据雏鹅的动态、叫声和吃食状况来判定温度的高低，并作相应调整。

另外，在温度较低的地区，应在冬季或温度变化较大的阶段注意在舍内挂上布帘保温，但应注意室内的CO 和CO 2浓度，防上中毒现象发生。

控制雏鹅死亡率的关键技术措施
化水，置于酒精灯上加热煮沸1分钟。

如果试管中黏液不溶解，呈白色棉絮状漂浮在透明的溶液中，即可确诊为妊娠阳性；如果试管中黏液全部溶解，溶液呈无色透明状态，则为空怀或发情；如果黏液和纯化水混合液呈混浊状态或凝结成块状，是生殖道有炎症的表现。

确诊率可达80%～95%。

（2）子宫颈-阴道黏液苛性钠煮沸法。

在母牛配
种后1～2个月时，
取子宫颈-阴道部周围的黏液放入清洁的试管中，再加入10%或25%苛性钠溶液5毫升，置于酒精灯上加热煮沸1分钟。

如果试管中黏液完全溶解，呈橙黄色或褐色，即可确诊为妊娠阳性；如果试管中黏液全部溶解，溶液呈淡黄色，则为空怀。

确诊率可达85%～90%。

（3）子宫颈-阴道黏液比重测定法。

母牛妊娠1～9个月的子宫颈-阴道分泌物的比重为1.016～1.013，而空怀牛的子宫颈-阴道分泌物的比重小于1.008。

将比重为1.008的硫酸铜溶液装入试管中，然后将子宫颈-阴道部周围的黏液（玉米粒大小）投入硫酸铜溶液中，如果黏液呈块状沉淀可判断为妊娠，如果黏液呈块状漂浮物可判断为空怀。

（4）子宫颈-阴道黏液抹片检查法。

取少量的母牛子宫颈-阴道黏液，置于清洁的载玻片上，用另一块载玻片的边缘将黏液均匀的推涂成抹片，自然风
干后，加几滴10%硝酸银，
停留1分钟后用纯化水漂洗，再加姬姆萨染色液3～5滴染色30分钟，用纯化
水漂洗并晾干，然后放于200～400倍显微镜下观
察。

如抹片上有短而细的毛发状纹路，且呈紫红色或淡红色者判断为妊娠；如抹片上的纹路较粗，为发情周期的黄体期或妊娠6个月以上的征状；如抹片上出现羊齿植物状纹路者为发情征状；如抹片上出现上皮细胞团者是炎症表现。

这种方法对妊娠23～60天的母牛妊娠诊断准确率可达90%以上。

10尿液7%碘酊测定法
取配种后23天以上母牛早晨的尿液10毫升放入试管中，加入7%碘酊1～2毫升混合，反应5～6分钟，观察颜色变化。

如混合液呈棕褐色或青紫色，可判断为妊娠；如混合液颜色无变化，可判断为空怀。

此方法的妊娠诊断准确率可达93%左右。

11眼巩膜血管观察法
经检查，母牛配种妊娠后25～90天，其一侧眼球瞳孔正上方的巩膜表面上，表现有显露突起的1～3条纵向血管（简称“生殖血管”），颜色深红或紫红，直径1厘米左右，呈直线状，有的稍有倾斜弯曲，或下端有小而细的分支。

配种后未妊娠的母牛则不出现这种血管。

因此，应用此法，可对母牛进行早期妊娠诊断，其确诊率可达95%。

梁书文，郭洪丽（辽宁医学院畜牧兽医学院，辽宁锦州121001）（013）
饲·养·技·术
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