分子生物学实验室仪器操作简介
实验一分子生物学实验室的安全规范,常规仪器设备及有关操作,常.
实验一分子生物学实验室的安全规范,常规仪器设备及有关操作,常.实验一分子生物学实验室的常规仪器设备及有关操作【实验目的】(1了解实验室规则与安全;(2了解分子生物学实验室的常规仪器、设备、耗材;枪头,离心管的灭菌(3掌握本实验所用仪器的功能和使用方法,尤其是移液枪的使用。
(4学会常用溶液的配置。
【实验原理】生物技术实验不可避免地需要与各种有毒化学药品、废气废液以及病原微生物等打交道,所以安全工作是实验工作中的重中之重。
忽视生物安全可导致实验室工作人员的感染,有毒物质的泄漏可造成严重后果,因此实验室生物安全问题已越来越受关注,并且已成为全世界共同关注的问题。
溶液的配置和用具的灭菌是实验的第一步,也是很实验成功与否很关键的一步。
【实验器具、药品试剂】一、实验器具1L 蓝盖瓶4个,500mL 蓝盖瓶1个,精细天平,1L量筒2个,500mL 量筒2个, 1L 烧杯2个,移液枪2套,高压灭菌锅, 白色枪头1袋,黄色枪头1袋,蓝色枪头1袋,枪头盒3种各5个,离心管3种规格各1袋,铝饭盒,PH试纸二、药品试剂Tris,HCl,NaCl,EDTA,NaOH,ddH2O,无水乙醇【实验内容】一、实验室常见事故分析及若干安全管理对策二、常规仪器设备的使用(一温度控制系统:冰箱,液氮罐,培养箱,水浴锅,烘箱(二水的净化装置:蒸馏水皿,离子交换器,超纯水(三菌消毒设备:蒸汽消毒锅,紫外线、75%乙醇、0.1%SDS(消毒剂,滤器滤膜, 煮沸消毒(四计量系统:称量系统,液体体积的度量,pH值测量,OD值测量,(五离心机:普通离心机,高速离心机,超速离心机,台式超速离心机(六电泳系统:(七PCR仪:电泳装置,电泳槽装置,(八凝胶成像分析系统:(九干燥设备:真空加热干燥箱,电泳凝胶干燥箱,液氮冷冻干燥,真空泵(十其他:微波炉,制冰机,磁力搅拌器,Tip头、Eppendorf管,常规的玻璃或塑料器皿(十一移液器的使用三、常用储液的配置1.1 L 灭菌双蒸水2.1 L 1 M Tris HCl pH 8.0取121.1 g Tris加入到700 ml H2O中,用HCl调PH值到8.0 (大约需要50 ml HCl,定容到1 L。
分子生物学实验室仪器使用说明书
分子生物学实验室仪器使用说明书一、引言分子生物学实验室仪器的使用是进行基因研究和分析的重要环节，正确的仪器操作和维护对于保证实验结果的准确性具有至关重要的作用。
本说明书旨在提供对分子生物学实验室仪器的正确使用方法和维护技巧的指导，以确保实验室工作的顺利进行。
二、常用仪器1. 基因扩增仪基因扩增仪是分子生物学实验室常用的仪器之一，其中最常见的是PCR仪。
以下是PCR仪的使用步骤：- 将待扩增的DNA模板、引物和试剂添加至PCR管或96孔板中；- 根据所需的扩增程序，在PCR仪面板上设置合适的温度和时间参数；- 启动PCR仪，开始扩增；- 扩增结束后，及时取出试管或孔板，并进行下一步实验操作。
2. 凝胶电泳仪凝胶电泳仪主要用于观察DNA、RNA或蛋白质的迁移情况以及分子大小的测定。
以下是凝胶电泳仪的使用步骤：- 准备所需的琼脂糖凝胶，并注入到电泳槽中；- 将待检测的样品混合液加入到电泳槽中的样品孔中；- 在电泳槽两侧连接正负极电源，并设置合适的电压和时间参数；- 启动电源，进行电泳；- 电泳结束后，取出凝胶，进行染色或进一步分析。
3. 离心机离心机用于分离混合物中的固体颗粒和液体，是分子生物学实验室必备的仪器之一。
以下是离心机的使用步骤：- 将待离心的样品均匀加入离心管中，并保持离心管的平衡；- 将离心管放入离心机转盘的相应位置，并注意转盘的平衡；- 根据离心速度和时间要求，设置合适的参数；- 启动离心机，开始离心过程；- 离心结束后，小心取出离心管，注意避免离心管的倾斜或颠倒。
三、常见问题及处理方法1. 仪器出现异常- 若仪器出现异常操作或显示异常，应首先检查是否按照正确的使用步骤进行操作；- 仔细阅读仪器说明书，查看是否存在使用特殊注意事项；- 若仍无法解决问题，及时联系仪器维修人员进行检修。
2. 仪器维护- 每次使用仪器后，应进行基本的清洁和消毒，保持仪器干净整洁；- 定期检查仪器是否正常，如电源是否接触良好，仪器表面是否有明显损坏等；- 根据仪器的要求，及时更换耗材和维护配件。
实验一、分子生物学基本操作及常用仪器介绍
4、不测量时要打开暗室盖，以确保光门关闭，以 免加快光敏元件的老化（比色计暗室上有一小钉， 压下后光门打开）。
5、灵敏档选择的依据时能够调零，尽量选用低档， 这样可以确保读数较稳定。
6、所测得的A值尽量在0.1～0.7之间，（最好在 0.2～0.6之间），因为此值范围内读数较准，超 过时，应稀释溶液
二、分子生物学实验的特点
1、分子生物学实验主要应用化学原理和方法所设计 的科学实验，也渗进了一些相关学科的理论知识与 方法。
2、由于研究对象为生物体，所以标本的来源不易， 微量和定量是分子生物学实验的一大特点。
3、分子生物学实验往往涉及生物大分子和生物材料 的检测，因此取材常为生物体的组织器官，甚至是 活的生物体。所以很难保证样品、标本的无菌性， 要注意作好自身防护。
4、实验课后均要将用过的仪器试管进行清洗，并整理 台面。
四、基本操作
（一）仪器的清洗
1、一般玻璃仪器：如试管烧杯量筒三角瓶等，先用自 来水洗刷，用毛刷沾少许肥皂粉或去污粉洗刷；再用自 来水反复冲洗，去尽肥皂水或去污粉直至无泡沫，最后 用蒸馏水淋洗2～3次，干燥备用。
2、做定量实验或要求严格时，除了用去污剂外，还需 以热洗液洗涤一次（或冷洗液浸泡过夜），而后再用蒸 馏水淋洗2～3遍。洗液由浓硫酸—重鉻酸钾—水按一定 比例根据不同需要配成。
（二）吸量管的使用与选择
1、吸管为精密吸量器，其规格有：0.1ml、0.25ml、1ml、2ml、 5ml、10ml等，有的吸量管上有两个环，上面的数字标示最 大体积，下面的是最小分刻度体积。根据实验需要，选择合 适规格的吸量管。如吸取1.5ml溶液，以选2 ml为宜；若用1 ml吸两次，则会增大误差。另外还应注意，在一组实验中， 吸量同一种试剂，应尽量选用一支移液管，以减少系统误差。
分子生物学实验教案
机 5m 后关灯，关灯后 10 分钟打开照明灯，即可使用。 11. 电泳系统：
期保存在超低温环境下，就需要一个液氮罐（-196℃）具有经济、省力和较好地保 持细胞生物学特性的优点。 3．培养箱：37℃恒温箱用于细菌的固体培养和细胞培养。
CO2培养箱适用于培养各种细胞，可恒定地提供一定量的CO2（通常 5%），用来维 持培养液的酸度（pH值）。 37℃恒温空气摇床可进行液体细菌的培养。 4. 水浴锅：用于保温。 25-100℃水浴摇床可用于分子杂交试验，各种生物化学酶反应等试验的保温。 25-100℃水浴箱用于常规试验。 5. 烘箱：主用于烘干实验器皿，有些需要温度高些，有些需要温度低些。用于 RNA 方面 的实验用具，需要在 250℃烤箱中烘干，有些塑料用具只能在 42-45℃的烤箱中进行 烘干。 （二）水的净化装置：随着分子生物学的飞速发展，许多实验对水纯度的要求越来越高。 1. 蒸馏水皿：单蒸水常难以满足实验要求。双蒸水、三蒸水配液，许多实验要去离子水。
3
1. 真空加热干燥箱：核酸在硝酸纤维素膜和尼龙膜上固定，用于杂交实验。 2. 电泳凝胶干燥箱：电泳后的凝胶进行脱水干燥的仪器，一般可将凝胶干燥到一些玻
璃纸上，干燥后的凝胶易于保存。 3. 液氮冷冻干燥：适用于活性蛋白质样品的干燥与结晶。 4. 真空泵：许多实验都需要抽真空。如：乙醇沉淀后核酸样品的干燥，电泳凝胶的干
主用于核酸样品琼脂糖凝胶和 PCR 电泳结果的紫外观察和照像。 8. PCR 仪：PTC-200 基因扩增仪
实验一分子生物学实验室常用仪器设备简介.
实验一分子生物学实验室常用仪器设备简介.第一篇：实验一分子生物学实验室常用仪器设备简介.实验一分子生物学实验室常用仪器设备简介一、实验目的熟悉分子生物学实验室常用仪器并熟练使用二、实验原理1、恒温气浴摇床：用于对温度和振荡频率有较高要求的细菌培养，发酵，杂交，生化反应及酶和组织研究等。
2、超净工作台：用于分子生物学无菌操作。
3、低温台式高速离心机：用于分离纯化DNA和蛋白质等，如基因片段的分离，蛋白酶的沉淀和回收等。
4、微量移液管：是连续可调的，计量和转移液体的专用仪器，其装有直接读数容量计。
有多种规格：①0.5-10μL②10-100μL③20-200μL④100-1000μL。
5、电泳仪：用于确定大分子物质的分子量以及鉴定物种亲缘关系的仪器。
6、PCR仪：用于目的基因的扩增，是一对寡糖核苷酸引物结合到正负DNA链上的靶序列两侧，从而酶促合成拷贝数为百万倍的靶序列DNA片段。
主要用于基础研究和应用研究等领域。
7、灭菌锅：用于细菌和细胞培养及核酸等有关实验使用的试剂，器皿及实验用具的严格灭菌。
三、实验仪器恒温气浴摇床、超净工作台、低温台式高速离心机、微量移液管、灭菌锅、PCR仪、电泳仪。
四、实验步骤（一）、恒温气浴要穿的使用：1、样品瓶牢固放入弹簧夹中2、接通电源开关，仪器进入准备状态3、参数设定，（设定温度、时间、转速等参数）4、按启动键仪器开始工作，按暂停键可暂停托盘的旋转；5、按电源键，显示屏显示消失，关闭电源总开关（二）、超净工作台的使用1、使用工作台时，先经过清洁液浸泡的纱布擦拭台面，然后用消毒剂擦拭消毒。
2、接通电源，提前30分钟打开紫外灯照射消毒，处理净化工作区内工作台表面积累的微生物，15分钟后，关闭紫外灯，开启送风机。
3、工作台面上，不要存放不必要的物品，以保持工作区内的洁净气流不受干扰。
4、操作结束后，清理工作台面，收集各废弃物，关闭风机及照明开关，用清洁剂及消毒剂擦拭消毒。
分子生物学实验室仪器使用方法说明书
分子生物学实验室仪器使用方法说明书一、实验室仪器的介绍1.1 仪器名称：分子生物学实验室仪器1.2 仪器型号：XXX1.3 仪器功能和用途：该仪器主要用于分子生物学实验室中的基因分析、DNA测序、蛋白质分析等实验。
二、仪器安装与准备2.1 确保电源连接：将仪器的电源线插入电源插座，并确保稳定的电源供应。
2.2 连接通信接口：根据仪器所要求的通信接口，将该仪器与电脑或其他设备进行连接。
2.3 检查仪器附件：检查仪器包装盒内的各个附件是否齐全，并确保它们的完好无损。
三、仪器基本操作步骤3.1 仪器的启动与关机3.1.1 启动仪器：按下仪器的电源开关，等待仪器正常启动。
3.1.2 关闭仪器：按下仪器的电源开关，等待仪器正常关闭，并断开电源连接。
3.2 仪器系统设置3.2.1 打开仪器软件：在电脑上打开仪器所需的软件，并等待软件正常加载。
3.2.2 系统配置：根据实验需求，对仪器系统进行必要的配置，例如调整仪器的温度、位置等参数。
3.3 样品准备与加载3.3.1 样品制备：按照实验要求，制备所需的样品，并确保样品的纯度和浓度符合要求。
3.3.2 样品加载：将制备好的样品按照仪器的要求进行加载，确保样品的正确放置和固定。
四、仪器操作注意事项4.1 安全操作：在操作仪器时，应穿戴实验室所要求的防护设备，并遵守实验室的安全规范。
4.2 仪器维护与清洁：定期对仪器进行清洁和维护，保持仪器的良好状态和运行效果。
4.3 实验记录与数据保存：及时记录实验过程和结果，并进行数据的保存和备份，以便后续分析和研究。
五、故障排除5.1 常见故障：列举常见的仪器故障和可能的原因，例如电源故障、通信故障、样品加载故障等。
5.2 故障排查方法：针对每种故障，提供相应的排查方法和解决方案。
5.3 遇到无法解决的故障时，应及时联系仪器维修人员或生产厂家进行维修。
六、仪器的维护与保养6.1 清洁与消毒：定期对仪器进行清洁和消毒，确保仪器的卫生和操作的安全。
分子生物学实验室常用仪器及使用方法
实验一分子生物学实验室常用仪器及使用事实证明，在科学飞速发展的今天，无论从事哪个领域的研究，要想突破，除了有良好的理论基础外，更重要的是依赖于先进的技术和优良的仪器设备以及良好的研究环境。
一个标准的分子生物学实验室除了具有一般生物学实验室的常规仪器设备外，还具有一些特殊用途的仪器，这些仪器一般较精密，价格昂贵。
下面介绍这些仪器的使用方法和注意事项。
一、冷冻离心机低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段。
基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实验中都离不开低温离心技术，因此低温冷冻离心机成为分子生物学研究中必备的重要仪器。
在国内，有多个厂家生产冷冻离心机，本实验室的高速冷冻离心机为GL-20G-Ⅱ型（上海安亭），落地式。
配有角式转头：6×50ml、12×10ml和12×1.5ml。
极限转速20000rpm。
1. 安装与调试离心机应放置在水平坚固的地面上，应至少距离10cm以上且具有良好的通风环境中，周围空气应呈中性，且无导电性灰尘、易燃气体和腐蚀性气体，环境温度应在0～30℃之间，相对湿度小于80%。
试转前应先打开盖门，用手盘动转轴，轻巧灵活，无异常现象方可上所用的转头。
转子准确到位后打开电源开关，然后用手按住门开关，再按运转键，转动后立即停止，并观察转轴的转向，若逆时针旋转即为正确，机器可投入使用。
2. 操作程序（1）插上电源，待机指示灯亮；打开电源开关，调速与定时系统的数码管显示的闪烁数字为机器工作转速的出厂设定，温控系统的数码管显示此时离心腔的温度。
（2）设定机器的工作参数，如工作温度，运转时间，工作转速等。
（3）将预先平衡好的样品放置于转头样品架上，关闭机盖。
（4）按控制面板的运转键，离心机开始运转。
在预先设定的加速时间内，其运速升至预先设定的值。
（5）在预先设定的运转时间内（不包括减速时间），离心机开始减速，其转速在预先设定的减速时间内降至零。
分子实验室仪器使用说明和注意事项
微波炉：注意事项：1. 要用微波炉专用容器（不能加热金属、密封物）；2. 不要让微波炉空转；3. 微波炉工作时不要将眼睛紧靠微波炉5厘米之内去观看微波炉工作-眼睛对微波最敏感，以免受到不必要的伤害；4. 防灼伤！不要徒手拿容器、不要把容器口冲着人！制冰机的使用：使用方法：插上电源--打开开关—接通水源—开始制冰—使用完毕关闭电源、水源—清理余冰-擦干内胆。
注意事项：1．不论何原因停机，不得连续启动，要每隔5分钟再启动，以免损坏压缩机！2．定时检查进、出水管接头，以便处理可能泄露的少量余水！3．不用时，应排掉内胆内余水，用干净的布擦干储冰箱内胆！5．在对制冰机进行清洁、检查及一周以上不用时，请拔掉电源插头。
凝胶成像系统：使用方法：插上电源—放入胶板—打开开关—打开桌面上IMAGE LAB软件—开始摄像—分析图像并保存—关闭开关--取出胶板，擦干台面使用注意：1.开机顺序，先开凝胶成像系统，再开电脑控制软件。
2.凝胶成像系统的门、电脑不能用污染的手套接触。
3.照相后把废胶取出，并用较软的纸擦拭干净。
电泳装置:使用方法：清洗装置—组装电泳槽—倒入电泳缓冲液—制胶—倒胶—拔梳子—点样—电泳使用注意：1. 电泳在污染区工作，带上手套2. 电泳时设置好电压、电流、时间高速（冷冻）离心机：使用方法：插上电源--打开开关—设置温度、转速、时间（并记忆）—放入离心管—开始离心—离心停止—打开机盖使用注意事项：1.离心机应放置在稳定的台面上，以防离心机滑动或振动，出现事故；2.离心前必须仔细检查转头各孔内有无异物、转头安装是否紧固。
3.样品的装载和平衡：使用离心机时，必须事先在天平上精密地平衡离心管和其内容物；当转头只是部分装载时，管子必须互相对称（保证平衡）地放在转头中，以便使负载均匀地分布在转头的周围。
4.低温离心时，转头及离心机要预冷后再使用。
5.装载溶液时，要根据待离心液体的性质及体积选用适合的离心管，液体不得装得过多，以防离心时甩出，造成转头不平衡、生锈或被腐蚀。
分子生物学常用实验方法与基本仪器操作
显微镜操作
要点一
总结词
显微镜是用于观察细胞和组织的形态、结构和动态变化的 仪器。
要点二
详细描述
选择合适的显微镜物镜和目镜，调节焦距和光源等参数， 将样品放置在载玻片上并放入显微镜的观察台上。通过目 镜观察样品的形态和结构，可以配合使用染色、标记和荧 光等技术进行更深入的分析。显微镜操作时需要注意保护 眼睛和保持清洁等事项。
利用限制性内切酶对DNA进行切 割，产生特定长度的DNA片段， 常用于基因定位、基因组测序等 。
电泳技术
利用电场对带电粒子进行分离的 技术，常用于DNA、RNA和蛋白 质的分析和分离。
分子杂交与印迹技术
分子杂交
利用互补的核酸序列通过杂交反应检 测特异性的核酸序列，常用于基因诊 断、基因表达分析等。
根据实验需求设置PCR仪的循环参数，如 变性、退火、延伸等温度和时间。将PCR 反应液放入PCR仪的样品槽中，盖上盖子 并启动程序。等待PCR程序运行完成，取 出扩增产物进行后续分析。PCR仪操作时 需要注意温度控制和防止污染等事项。
电泳仪操作
总结词
电泳仪是用于分离和检测DNA、RNA和蛋白质等生物分子的仪器。
加强实验室管理
建立严格的实验室管理制度，确保实验室环 境、仪器和试剂等符合要求。
THANKS
基因克隆与PCR技术
01
基因克隆
02
PCR技术
通过限制性内切酶将DNA切割成片段，再通过连接酶将目的基因片 段连接到载体上，最后将重组的DNA导入宿主细胞进行扩增和筛选 。
分子生物学实验室仪器操作简介
2）灭菌结束后，要等温度降为“0”，才可打开灭
菌锅锅盖；
3）高压蒸汽灭菌时，须保持高温高压，因此必
须严格按照操作规程操作，否则易发生意外
事故。
2010
分 子实 生验
物 31 学
实验二
琼脂糖凝胶电泳的制 备及核酸检测
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分 子实 生验
物 32 学
带电荷的物质在电场中的趋向运动称为电泳。电泳一 般分为自由界面电泳和区带电泳两大类:自由界面电泳 不需支持物，这类电泳目前已很少使用;而区带电泳则 需用各种类型的物质作为支持物，常用的支持物有滤纸、 醋酸纤维薄膜、非凝胶性支持物、凝胶性支持物及硅胶 -G薄层等，分子生物学领域中最常用的是琼脂糖凝胶电 泳其优点主要在于操作简单、快速、灵敏。
5. 移液器使用完后，将刻度调到最大刻度，收藏。
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分 子实 生验
物 6学
台式高速离心机
离心机的分类 低速：每分钟几千转 高速：每分钟1 ~ 3万转 超速：每分钟3万转以上
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物 7学
离心机的功能：分离，纯化
低速：细胞等大分子 高速：DNA，蛋白等 超速: 病毒，蛋白，细胞器等
3）密封高压锅：推横梁入立柱内，旋转手轮，压紧锅盖；
4）灭菌：121℃， 20min；如为液体，液体必须装在可
耐高温的玻璃器皿中，不宜超过2/3；
5）灭菌结束，所有东西放入干燥箱干燥，排尽水气。2010
分 子实
生验
物
30 学
注意事项：
1）如是手动的灭菌锅，灭菌过程中，应注意排
净锅内冷空气，否则会影响灭菌效果。
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物 36 学
附 注：
分子杂交仪操作规程(3篇)
第1篇一、引言分子杂交仪是一种用于分子生物学实验的高精密仪器，主要用于DNA、RNA等生物大分子的检测、分离和定量分析。
以下是分子杂交仪的操作规程，旨在确保实验的准确性和安全性。
二、操作前准备1. 确认仪器状态：检查分子杂交仪是否处于正常工作状态，包括电源、冷却系统、加热系统等。
2. 清洁工作台：确保实验台面干净、整洁，避免交叉污染。
3. 配制试剂：按照实验需求，配制相应的试剂，包括杂交缓冲液、标记探针、待测样本等。
4. 检查设备：检查分子杂交仪的各个部件是否完好，如电极、杂交管、密封盖等。
三、操作步骤1. 打开分子杂交仪电源，预热30分钟。
2. 将杂交管放入分子杂交仪，确保密封盖密封良好。
3. 设置杂交参数：根据实验需求，设置杂交温度、杂交时间、洗脱温度、洗脱时间等参数。
4. 加载样本：将配制好的标记探针和待测样本加入杂交管，按照实验要求进行混合。
5. 开始杂交：按下“开始”按钮，分子杂交仪开始进行杂交操作。
6. 洗脱：杂交完成后，按照设定参数进行洗脱操作。
7. 重复洗涤：根据实验需求，对杂交管进行重复洗涤，以去除未结合的探针。
8. 确认结果：通过分子杂交仪的检测系统，观察杂交结果，如信号强度、对比度等。
9. 关闭仪器：完成实验后，关闭分子杂交仪电源，取出杂交管。
四、注意事项1. 严格遵守操作规程，确保实验结果的准确性。
2. 操作过程中，注意避免交叉污染，使用无菌操作。
3. 试剂和样本应按照实验要求进行配制，确保实验材料的纯度。
4. 在操作过程中，密切观察分子杂交仪的运行状态，如温度、压力等。
5. 实验结束后，对分子杂交仪进行清洁、消毒，以备下次使用。
五、实验记录1. 记录实验时间、温度、时间等参数。
2. 记录实验结果，包括信号强度、对比度等。
3. 对实验过程中出现的问题进行记录，以便分析原因和改进实验。
通过以上操作规程，可以有效保证分子杂交仪实验的准确性和安全性。
在实际操作过程中，应根据实验需求调整参数，以达到最佳实验效果。
生化工程实验室分子生物学操作规范大全
生化工程实验室分子生物学操作规范大全第一篇：生化工程实验室分子生物学操作规范大全生化工程实验室分子生物学操作规范1.手套使用原则上不论什么实验都应带手套操作，特别是： 1）无菌操作；2）与RNA有关的所有操作；3）重要克隆菌的挑单克隆、扩增、保存等；4）与有毒试剂有关的所有操作，比如用EB染胶，用有机溶剂提取（在通风橱内操作）。
2.移液枪及枪头使用 1）在合适量程范围内使用； 2）移液枪定期校对；3）枪头必须插紧，防止脱落以及吸样体积不够；4）不要水平放置带有枪头的枪； 5）使用后挂在枪架上，不可以乱放；6）装枪头时必须戴手套，灭菌后50-70℃烘干后使用；7）加样体积应为枪头最大体积的20-100%，低于该范围的用小一号的枪头。
3.加样1）加用任何试剂前要将试剂混合（除饱和酚或一些特别的有机试剂）；2）加样的枪头应在试剂的中间表层吸收，防止枪头外壁带用过多试剂，改变加样试剂体积（除饱和酚外，一定要伸到饱和酚液的下部吸取）；3）加酶时酶要放置在冰上，应注意体积准确，外壁不带，内壁吹打干净。
注意用枪头从反应体系的管底吸上，反复吹打。
4.混匀1）除上述特殊试剂外，所有试剂在使用前后都要充分混匀；多数分子操作在加样后、反应前都要充分混匀；2）0.2ml和0.5ml管30%体积以下可进行枪混匀和擦边混匀；3）0.5-1.5ml管15-40%体积时，试管30%体积以下时可使用漩涡混匀器混匀；4）0.5-1.5ml管30-70%体积，试管30-70%时可进行颠倒混匀。
5.水浴锅1）需提前10-30分钟调好温度，稳定后才能使用； 2）水位不可以低于水浴锅高度的50%，及时添水或换水；3）使用合适的浮子；4）使用完毕及时关闭电源。
6.离心1）离心如果需要预冷，应至少预冷15min； 2）要质量对称放置；3）不合适的离心管应外套其他型号的离心管；4）离心后如果要移动，应放在离心管架上移动，防止破坏液面；5）短暂离心要在3000-8000rpm范围内，时间应短于30秒； 6）离心完毕应及时清理离心机。
初中生物年度工作报告分子生物学实验室常用仪器及使用方法
初中生物年度工作报告分子生物学实验室常用仪器及使用方法分子生物学实验室（p2设计）1.功能：进行分组织培养前实验室设计组织培养前实验室设计在进行植物组织培养工作之前，首先应对工作中需要哪些最基本的设备条件有个全面的了解，以便因地制宜地利用现有房屋，或新建、改建实验室。
实验室的大小取决于工作的目的和规模。
以工厂化生产为目的，实验室规模太小，则会限制生产，影响效率。
在设计组织培养实验室时，应按组织培养程序来没计，避免一些环节倒排，引起日后工作混乱。
植物组织培养是在严格无菌的条件下进行的。
要做到无菌的条件，需要一定的设备、器材和用具，同时还需要人工控制温度、光照、湿度等培养条件。
实验室设计原则：保证无菌操作，达到工作方便，防止污染。
实验室组成：化学实验室、洗涤菌室、无菌操作室（接种室）、培养室、细胞学实验室、其他小型仪器设备。
1)化学实验室（准备室）：完成所使用的各种药品的贮备、称量、溶解、配制、培养基分装等。
主要设备：药品柜、防尘橱（放置培养容器）、冰箱、天平、蒸馏水器、酸度计及常用的培养基配制用玻璃仪器.2)洗涤、灭菌室：完成各种器具的洗涤、干燥、保存、培养基的灭菌等。
主要设备：水池、操作台、高压灭菌锅、干燥灭菌器（如烘箱）等。
3)无菌操作室（接种室）：主要用于植物材料的消毒、接种、培养物的转移、试管苗的继代、原生质体的制备以及一切需要进行无菌操作的技术程序。
主要设备：紫外光源、超净工作台、消毒器、酒精灯、接种器械（接种镊子、剪刀、解剖刀、接种针）等。
接种室宜小不宜大，一般7～8平米，要求地面、天花板及四壁尽可能密闭光滑，易于清洁和消毒。
配置拉动门，以减少开关门时的空气扰动。
接种室要求干爽安静，清洁明亮。
在适当位置吊装1～2盏紫外线灭菌灯，用以照射灭菌。
最好安装一小型空调，使室温可控，这样可使门窗紧闭，减少与外界空气对流。
接种室应设有缓冲问，面积1m2为宜。
进入无菌操作室前在此更衣换鞋，以减少进出时带入接种室杂菌。
分子生物学仪器操作保养规程
分子生物学仪器操作保养规程前言分子生物学是生物学领域中最有前途和发展性的研究领域之一，与之相关的仪器设备相当重要。
不仅要掌握正确的操作方法，同时还要做好仪器设备的保养工作，以确保仪器设备的正常运行、延长使用寿命、提高工作效率、减少出错率。
本文档主要介绍一些分子生物学常用仪器的操作方法和保养规程。
PCR 仪操作保养规程PCR 仪是分子生物学实验中应用广泛的仪器之一，以下是对运用PCR 仪的操作和保养的一些常规规程：操作规程1.在操作 PCR 仪前，确保手部清洁，并且戴好实验手套。
2.充分调节 PCR 仪的温控系统，设定好所需的反应体系工作温度和时间。
3.冷启动 PCR 仪时，将样品轻轻地放进去，不要用太大的力气，以免破坏样品。
4.加热启动 PCR 仪时，盖好盖子，不要露出样品才能开始加热。
保养规程1.每次操作完后，及时关闭PCR 仪，清理样品位和仪器表面。
2.请勿使用水、挥发类液体等有危险性的溶剂来清理仪器表面，使用湿布或稀释的消毒酒精。
3.PCR 仪在日复一日的使用中，热风扇的使用概率比较大，需要及时清理热风扇。
4.接通电源时，要注意与电器专线相连，要避免与大功率电器共用一条线路，以避免电路过载导致故障。
稳态离心机操作保养规程稳态离心机也是分子生物学常用的仪器之一，以下是对稳态离心机的操作和保养的一些常规规程：操作规程1.操作机器离心前，需要查验离心机内和离心机转盘是否松动。
2.不同标本、转速、离心时间均有相应的程序，需根据自己的实验需求做好合理的设定。
3.启动离心机时，先放入标本或试管，然后将转盘固定。
4.从小转速到大转速逐渐加速，避免汽车抛锚现象。
5.离心结束之后，要等待离心机转速慢慢降下来，然后再轻轻地开盖取出标本。
保养规程1.在稳态离心机使用和保养中，检查离心机盘是否均匀摆置，避免盘摆不平。
同时，避免震动和模拟运动等原因导致离心机系统产生不稳定性问题。
2.注意离心机所有零部件之间的协调配合，并尽量避免不合适的装配、拆卸或掉落。
分子生物学实验室的常规仪器设备及有关操作
分子生物学实验室的常规仪器设备及有关操作一、验室的常规仪器、设备（一) 温度控制系统：1。
冰箱: 根据药品、试剂及多种生物制剂保存的需要，必须具备不同控温级别的冰箱,最常使用的有：4℃、—20℃、-80℃冰箱。
4℃适合储存某些溶液、试剂、药品等。
—20℃适用于某些试剂、药品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白质样品等。
-80℃适合某些长期低温保存的样品、纯化的样品、特殊的低温处理消化液等的保存。
0-10℃的冷柜适合低温条件下的电泳、层析、透析等实验。
2．液氮罐：有些实验材料、某些器官组织、细胞株、菌株及纯化的样品等，要求速冻和长期保存在超低温环境下，就需要一个液氮罐（—196℃）具有经济、省力和较好地保持细胞生物学特性的优点。
3．培养箱：37℃恒温箱用于细菌的固体培养和细胞培养。
CO2培养箱适用于培养各种细胞，可恒定地提供一定量的CO2（通常5%），用来维持培养液的酸度（pH值）。
37℃恒温空气摇床可进行液体细菌的培养。
4。
水浴锅：用于保温。
25—100℃水浴摇床可用于分子杂交试验,各种生物化学酶反应等试验的保温。
25—100℃水浴箱用于常规试验。
5。
烘箱：主用于烘干实验器皿，有些需要温度高些，有些需要温度低些.用于RNA方面的实验用具，需要在250℃烤箱中烘干,有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中进行烘干。
(二）水的净化装置：随着分子生物学的飞速发展，许多实验对水纯度的要求越来越高.1. 蒸馏水皿：单蒸水常难以满足实验要求。
双蒸水、三蒸水配液，许多实验要去离子水。
多次蒸馏水可除去水中挥发性杂质，不能完全除去水中溶解的气体杂质(Mn2+、Cu2+、Zn2+、Fe3+、Mo（Ⅵ)）。
2。
离子交换器：去离子水-用离子交换法制取的水，称去离子水。
去离子效果好,但不能除去水中的非离子型杂质,其中常含有微量的有机物(树脂等)。
3．超纯水:用蒸馏水、离子交换水、反渗透纯水做为供水,磁铁耦合齿轮泵作用使水循环。
生物技术实验室仪器操作简介
如何设置一个PCR程序：
1、预变性：可用94～95℃，2～10min,一般用 5min。 2、变性：一般用94℃，30s~2min,一般45s~1min。 3、退火：温度自定，30s~2min。 4、延伸：72℃，对于(1kb=1min,每增加1kb加1min)。 5、循环数：一般25～35个循环(2,3,4步循环）。 6、最终延伸：72℃，5～15min。 7、保存：4℃，时间设为0。 8、END。
（3）关闭紫外与可见分析装置的电源。
注意事项：
1、 不要戴“脏”手套触摸电脑鼠标、键盘及其它位置； 2、 不要戴“脏”手套触摸仓门和灯箱电源开关； 3、 不要戴“脏”手套触摸外接电源开关；
4、在图像获取过程中，若通过软件打开紫外/可见光，则 必须再通过软件关闭，若通过紫外与可见分析装置上 打开紫外/可见光，则从分析装置上关闭，严禁互用， 导致紫外灯长亮。
台式高速离心机
离心机的分类 低速：每分钟几千转 高速：每分钟1 ~ 3万转 超速：每分钟3万转以上
离心机的功能：分离，纯化
低速：细胞等大分子 高速：DNA，蛋白等 超速: 病毒，蛋白，细胞器等
➢基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品 的分离制备实验中都离不开低温离心技术
➢本实验室所用离心机:台式高速离心机（ Thermo ），配有 角式转头：24×1.5ml；极限转速13000rpm ;台式低温高速
一. 实验目的
• 掌握琼脂糖凝胶电泳的原理; • 学习琼脂糖凝胶电泳的操作。
二. 实验原理
琼脂糖是一种天然聚合长链状分子，沸水中溶解 ，45℃开始形成多孔性刚性滤孔，凝胶孔径的大小决定
于琼脂糖的浓度。 DNA分子在碱性环境中带负电荷，在外加电场作 用下向正极泳动。DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时， 有电荷效应与分子筛效应。DNA分子量及构型不同， 其泳动率就不同，从而分出不同的区带。琼脂糖凝胶电 泳法分离DNA，主要是利用分子筛效应。
分子生物学实验室安全及常用仪器介绍说明-
内容介绍
1. 分子生物学实验安全常识
2. 1.1 分子生物学实验室的基本要求 3. 1.2 实验室电、气、水、火 4. 1.3 化学试剂的安全使用 5. 1.4 微生物的危害及处理 6. 1.5 放射性物质的安全使用 7. 1.6 紫外线辐射的危害及防护 8. 1.7 废弃物的处理
2. 分子生物学功能实验室使用注意事项
干粉灭火器灭火 ； • 导线或电器着火时，应先断电，再用干粉灭火器灭火。
切不可用泡沫灭火器，此灭火器导电。 • 衣服着火时，应尽快地脱掉衣服，并用水灭火。或就地滚动，
切忌外跑。 防火：火灾不能预期、不能杜绝、只能预防
• 消除火灾隐患（电、火、气、试剂） • 备逃生四件宝（灭火器、绳、手电筒、防毒面具）
➢触电：断电或绝缘脱离 急救
➢电灯：进入实验室，有需要时打开电源开关、排气扇；离开实验室时若无
人请关闭电灯及排气扇。
节
➢空调：进入实验室，有需要时可打开空调，温度不得低于27℃；每天下班
约
时实验室负责人将关闭空调。若在非上班时间内打开空调，离开时请关闭！
分子生物学实验安全常识
❖1.2 实验室电、气、水、火
分子生物学实验安全常识
❖1.3 化学试剂的安全使用
DMSO（二甲亚砜）
是一种既溶于水又溶于有机溶剂的非质子极性溶剂，常用作细 胞的冻存液和配制AS。皮肤沾上之后用大量的水洗及1%~5%稀氨水 洗涤。
十二烷基硫酸钠(SDS)
有毒，易损害眼睛。质粒提取时作裂解液破坏细胞膜和 Southern杂交时的洗膜液中的去垢剂。戴合适的手套和安全护目镜， 不要吸入其粉末。
火
分子生物学实验安全常识
❖1.3 化学试剂的安全使用
总原则： 药品状态定口径，瓶塞取决酸碱性； 受热见光易分解，存放低温棕色瓶； 特殊试剂特殊放，互不反应要记清。
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5. 电泳仪
DYY-12型电脑三恒多用电泳仪（北京六一仪器厂）
操作程序：
1）电泳槽的两个电极与电泳仪的直流输出端连接（极 性不要接反）； 2）打开电源，设置参数（选择稳压稳流方式及电压电
流范围）；
3）按“启动”启动程序（输出为高电压，注意安全）； 4）电泳结束，按“停止”键终止程序。
注意事项
1、电泳仪工作时，禁止人体接触电极、电泳物及其它可能 带电部分，也不能到电泳槽内取放东西，以免触电，同时 要求仪器有良好接地端，以防漏电。 2、仪器通电后，不要临时增加或拨除输出导线插头，以防 短路。 3、由于不同介质支持物的电阻值不同，电泳所通过的电流 量也不同，其泳动速度及泳至终点所需时间也不同，故不
操作步骤：
1、图像采集
1）将电泳样品放入分析装置中
2）打开电脑，运行Smart View 软件，单击“Import”键进入 图像获取项目栏，选择“获取视频图像”键，进行图像采集 3）选 择紫外或可见光源，在图像采集窗口中调节好图像大 小、亮度及焦距
4）单击“采集图像”键，根据图像质量选择好优化摄影时间
1. 微量移液器
微量移液器有数字可调式和固定式两种型号，是计量 和转移液体的专用仪器，其装有直接读数容量计。√ 微量移液器有多种规格，在移液器量程范围内能连续 调节读数。
√ √ √ √
量液的操作步骤：
第一停点 第二停点
A 保持微量移液器垂直，将按钮压至第一停点；
B 微量移液器头尖端浸入溶液，缓慢释放按钮； C 保持微量移液器垂直，将微量移液器头与容器壁接触，慢 慢压下按钮至第一停点； D 压至第二停点把溶液完全释放出； E 释放按钮回原状。
处理。
5、离心机彻底停止后，才可开盖，取样。
低温冷冻离心机
1.把离心机水平安放于地面
2.使用前开机预冷 3.对应转子重量要平衡
4.按操作规程操作
3. PCR仪
PCR仪，也称DNA热循环仪、基因扩增仪，能使 一对寡核苷酸引物结合到正负DNA链上的靶序列两 侧，从而酶促合成拷贝数为百万倍的靶序列DNA片 段，它的每一循环包括DNA变性、复性、延伸三个
量液操作注意问题：
1． 未装吸嘴的微量移液器绝对不可用来吸取任何液体。
2． 一定要在允许量程范围内设定容量，千万不要将读
数的调节超出其适用的刻度范围，否则会造成损坏。
3． 不要横放或倒拿带有残余液体吸嘴的移液器。
4． 不要用大量程的移液器移取小体积样品。
5.
移液器使用完后，将刻度调到最大刻度，收藏。
同介质支持物的电泳不要同时在同一电泳仪上进行。
4、使用过程中发现异常现象，如较大噪音、放电或异常气 味，须立即切断电源，进行检修，以免发生意外。
6. 恒温气浴摇床
使用及性能：
摇床（振荡器）广泛用于对 温度和振荡频率有较高要求 的细菌培养、发酵、杂交、 生物化学反应以及酶和组织 研究等。实验室常用的液体 摇匀，微生物、细菌和细胞 培养。
注意事项：
1、 不要戴“脏”手套触摸电脑鼠标、键盘及其它位置； 2、 不要戴“脏”手套触摸仓门和灯箱电源开关； 3、 不要戴“脏”手套触摸外接电源开关；
4、在图像获取过程中，若通过软件打开紫外/可见光，则
必须再通过软件关闭，若通过紫外与可见分析装置上 打开紫外/可见光，则从分析装置上关闭，严禁互用， 导致紫外灯长亮。
1、把离心机放置于平面桌或平面台上，检查离心机是否 放置平稳。 2、将离心管对称放入转子内，且要事先平衡。 3、锁紧门盖。
4、插上电源插座，按下电源开关。
5、设置转子号、转速、时间. 注意：对应的转子不可超速使用，否则对试管或转子有损坏。
6、当转子停转后，打开门盖取出离心管，关断电源开关。
注意事项：
反应。
PCR仪主要应用于基础研究和应用研究等许多领域， 如基因分析、序列分析、进化分析、临床诊断、法医 学等。
操作程序:
1）开机：打开电源，显示主界面； 2）创建程序：使用”create”输入新程序（包括PCR循 环数，预变性、变性、复性、延伸的时间和温 度），保存程序（包括用户名和方法名）;
3）放入样品，盖上盖子;
7、保存：4℃，时间设为0-60min。
8、END。
4. 电泳图像分析系统
系统简介：
系统可以通过紫外/可见光分析装置及透光扫描仪直
接获得核酸、蛋白质凝胶电泳图像。系统配置有
SmartView生物电泳图像分析软件，可以进行密度扫描、 密度定量、分子量计算等电泳分析。此外，该系统含有 多种图像滤波器，可降低图像的噪音，从而获得较清晰 的图像。
1、离心机在运转时，不得移动离心机，不要打开门盖。 2、安放离心机的台面应坚实平整，四只橡胶机脚都应与台 面接触和均匀受力，以免产生振动。 3、离心管加液要平衡，若加液差异过大运转时会产生大的
振动，此时应停机检查，使加液符合要求，离心试管必须 对称放入。
4、若运转时有离心试管破裂，会引起较大振动应立即停机
（一般情况下在12秒左右），即开始采集。
2、图像保存 单击“System 键”选择“另保存图像为”键，出现一个“图像
文件登记”窗口，输入标题，实验人，实验日期，实验摘要
等信息，按“保存”键完成图像文件登记，同时出现“另保存 图像为”窗口，输入图像名，保存图像至桌面。 3、关闭操作系统 （1）关闭紫外/可见光。 （2）退出软件界面。 （3）关闭紫外与可见分析装置的电源。
2. 台式高速离心机
离心机的分类
低速：每分钟几千转
高速：每分钟1 ~ 3万转 超速：每分钟3万转以上
离心机的功能：分离 纯化
低速：细胞等大分子 高速：DNA，蛋白等 超速: 病毒，蛋白，细胞器等
基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品
的分离制备实验中都离不开低温离心技术
台式高速离心机使用步骤
4）在所建用户名下按“run”键，找到设定的程序，
按“starቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ”键启动程序;
5）运行结束后按“stop”键停止运行，取出样品，关 闭电源。
如何设置PCR程序：
1、预变性：可用94～95℃，2～10min,一般用 5min。
2、变性：一般用94℃，30s~2min,一般45s~1min。
3、退火：温度自定，30s~2min。 4、延伸：72℃，对于(1kb=1min,每增加1kb加1min)。 5、循环数：一般25～35个循环(2,3,4步循环）。 6、最终延伸：72℃，5～15min。