分子生物学实验室仪器操作简介
分子生物学实验室常用仪器及使用方法
实验指导目录实验一分子生物学实验室常用仪器及使用方法实验二质粒DNA的提取－碱裂解法实验三琼脂糖凝胶电泳实验四限制性内切核酸酶的酶切与鉴定实验五大肠杆菌感受态细胞的制备及转化实验六动物组织细胞基因组DNA提取实验七DNA的定量实验八PCR基因扩增实验九琼脂糖凝胶电泳分离与纯化目的DNA实验十DNA重组实验十一动物组织细胞总RNA的提取实验一分子生物学实验室常用仪器及使用事实证明，在科学飞速发展的今天，无论从事哪个领域的研究，要想突破，除了有良好的理论基础外，更重要的是依赖于先进的技术和优良的仪器设备以及良好的研究环境。
一个标准的分子生物学实验室除了具有一般生物学实验室的常规仪器设备外，还具有一些特殊用途的仪器，这些仪器一般较精密，价格昂贵。
下面介绍这些仪器的使用方法和注意事项。
一、冷冻离心机低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段。
基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实验中都离不开低温离心技术，因此低温冷冻离心机成为分子生物学研究中必备的重要仪器。
在国内，有多个厂家生产冷冻离心机，本实验室的高速冷冻离心机为GL-20G-Ⅱ型（上海安亭），落地式。
配有角式转头：6×50ml、12×10ml和12×。
极限转速20000rpm。
1. 安装与调试离心机应放置在水平坚固的地面上，应至少距离10cm以上且具有良好的通风环境中，周围空气应呈中性，且无导电性灰尘、易燃气体和腐蚀性气体，环境温度应在0～30℃之间，相对湿度小于80%。
试转前应先打开盖门，用手盘动转轴，轻巧灵活，无异常现象方可上所用的转头。
转子准确到位后打开电源开关，然后用手按住门开关，再按运转键，转动后立即停止，并观察转轴的转向，若逆时针旋转即为正确，机器可投入使用。
2. 操作程序（1）插上电源，待机指示灯亮；打开电源开关，调速与定时系统的数码管显示的闪烁数字为机器工作转速的出厂设定，温控系统的数码管显示此时离心腔的温度。
生物技术实验室仪器操作简介
PCR仪
PCR仪，也称DNA热循环仪、基因扩增仪，能使 一对寡核苷酸引物结合到正负DNA链上的靶序列两 侧，从而酶促合成拷贝数为百万倍的靶序列DNA片 段，它的每一循环包括DNA变性、复性、延伸三个 反应。
PCR仪主要应用于基础研究和应用研究等许多领域， 如基因分析、序列分析、进化分析、临床诊断、法医 学等。
试剂、器皿及实验用具，应严格灭菌； 对于经过导入DNA重组分子的菌株，操作后
必须进行严格的高压消毒灭活处理 。
操作程序：
1）开盖：转动手轮，使锅盖离开密封圈，添加蒸馏水刚没 至板上； 2）通电：打开控制面板上电源开关，若水位低则红灯亮； 3）堆放物品：需包扎的灭菌物品，体积不超过 200mm×100mm×100mm为宜，各包装之间留有间隙， 利于蒸汽穿透，提高灭菌效果； 3）密封高压锅：推横梁入立柱内，旋转手轮，压紧锅盖； 4）灭菌：121℃， 20min；如为液体，液体必须装在可 耐高温的玻璃器皿中，不宜超过2/3； 5）灭菌结束，所有东西放入干燥箱干燥，排尽水气。
注意事项：
1、 不要戴“脏”手套触摸电脑鼠标、键盘及其它位置； 2、 不要戴“脏”手套触摸仓门和灯箱电源开关； 3、 不要戴“脏”手套触摸外接电源开关； 4、在图像获取过程中，若通过软件打开紫外/可见光，则
必须再通过软件关闭，若通过紫外与可见分析装置上 打开紫外/可见光，则从分析装置上关闭，严禁互用， 导致紫外灯长亮。
0.5～10μl
10～100μl 常见规格
20～200μl
100～1000μl
量液的操作步骤：
第一停点 第二停点
A 保持微量移液器垂直，将按钮压至第一停点； B 微量移液器头尖端浸入溶液，缓慢释放按钮； C 保持微量移液器垂直，将微量移液器头与容器壁接触，慢
实验一、分子生物学基本操作及常用仪器介绍
4、不测量时要打开暗室盖，以确保光门关闭，以 免加快光敏元件的老化（比色计暗室上有一小钉， 压下后光门打开）。
5、灵敏档选择的依据时能够调零，尽量选用低档， 这样可以确保读数较稳定。
6、所测得的A值尽量在0.1～0.7之间，（最好在 0.2～0.6之间），因为此值范围内读数较准，超 过时，应稀释溶液
二、分子生物学实验的特点
1、分子生物学实验主要应用化学原理和方法所设计 的科学实验，也渗进了一些相关学科的理论知识与 方法。
2、由于研究对象为生物体，所以标本的来源不易， 微量和定量是分子生物学实验的一大特点。
3、分子生物学实验往往涉及生物大分子和生物材料 的检测，因此取材常为生物体的组织器官，甚至是 活的生物体。所以很难保证样品、标本的无菌性， 要注意作好自身防护。
4、实验课后均要将用过的仪器试管进行清洗，并整理 台面。
四、基本操作
（一）仪器的清洗
1、一般玻璃仪器：如试管烧杯量筒三角瓶等，先用自 来水洗刷，用毛刷沾少许肥皂粉或去污粉洗刷；再用自 来水反复冲洗，去尽肥皂水或去污粉直至无泡沫，最后 用蒸馏水淋洗2～3次，干燥备用。
2、做定量实验或要求严格时，除了用去污剂外，还需 以热洗液洗涤一次（或冷洗液浸泡过夜），而后再用蒸 馏水淋洗2～3遍。洗液由浓硫酸—重鉻酸钾—水按一定 比例根据不同需要配成。
（二）吸量管的使用与选择
1、吸管为精密吸量器，其规格有：0.1ml、0.25ml、1ml、2ml、 5ml、10ml等，有的吸量管上有两个环，上面的数字标示最 大体积，下面的是最小分刻度体积。根据实验需要，选择合 适规格的吸量管。如吸取1.5ml溶液，以选2 ml为宜；若用1 ml吸两次，则会增大误差。另外还应注意，在一组实验中， 吸量同一种试剂，应尽量选用一支移液管，以减少系统误差。
分子生物学实验室的常规仪器设备及有关操作
分子生物学实验室的常规仪器设备及有关操作一、验室的常规仪器、设备（一）温度控制系统:1. 冰箱：根据药品、试剂及多种生物制剂保存的需要，必须具备不同控温级别的冰箱，最常使用的有：4℃、—20℃、—80℃冰箱。
4℃适合储存某些溶液、试剂、药品等。
—20℃适用于某些试剂、药品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白质样品等.-80℃适合某些长期低温保存的样品、纯化的样品、特殊的低温处理消化液等的保存。
0—10℃的冷柜适合低温条件下的电泳、层析、透析等实验.2．液氮罐:有些实验材料、某些器官组织、细胞株、菌株及纯化的样品等，要求速冻和长期保存在超低温环境下,就需要一个液氮罐(—196℃）具有经济、省力和较好地保持细胞生物学特性的优点.3．培养箱：37℃恒温箱用于细菌的固体培养和细胞培养。
CO2培养箱适用于培养各种细胞，可恒定地提供一定量的CO2(通常5%)，用来维持培养液的酸度(pH值).37℃恒温空气摇床可进行液体细菌的培养。
4。
水浴锅：用于保温。
25—100℃水浴摇床可用于分子杂交试验,各种生物化学酶反应等试验的保温.25-100℃水浴箱用于常规试验。
5。
烘箱：主用于烘干实验器皿,有些需要温度高些，有些需要温度低些.用于RNA方面的实验用具,需要在250℃烤箱中烘干，有些塑料用具只能在42—45℃的烤箱中进行烘干。
（二)水的净化装置:随着分子生物学的飞速发展,许多实验对水纯度的要求越来越高。
1。
蒸馏水皿：单蒸水常难以满足实验要求。
双蒸水、三蒸水配液,许多实验要去离子水。
多次蒸馏水可除去水中挥发性杂质，不能完全除去水中溶解的气体杂质（Mn2+、Cu2+、Zn2+、Fe3+、Mo(Ⅵ））.2. 离子交换器：去离子水—用离子交换法制取的水，称去离子水。
去离子效果好，但不能除去水中的非离子型杂质，其中常含有微量的有机物（树脂等）。
3．超纯水:用蒸馏水、离子交换水、反渗透纯水做为供水，磁铁耦合齿轮泵作用使水循环.用于PCR、PCR氨基酸分析、DNA测序、酶反应、组织和细胞培养等。
分子生物学实验室常用仪器及使用方法
实验指导目录实验一分子生物学实验室常用仪器及使用方法实验二质粒DNA的提取－碱裂解法实验三琼脂糖凝胶电泳实验四限制性内切核酸酶的酶切与鉴定实验五大肠杆菌感受态细胞的制备及转化实验六动物组织细胞基因组DNA提取实验七DNA的定量实验八PCR基因扩增实验九琼脂糖凝胶电泳分离与纯化目的DNA实验十DNA重组实验十一动物组织细胞总RNA的提取实验一分子生物学实验室常用仪器及使用事实证明，在科学飞速发展的今天，无论从事哪个领域的研究，要想突破，除了有良好的理论基础外，更重要的是依赖于先进的技术和优良的仪器设备以及良好的研究环境。
一个标准的分子生物学实验室除了具有一般生物学实验室的常规仪器设备外，还具有一些特殊用途的仪器，这些仪器一般较精密，价格昂贵。
下面介绍这些仪器的使用方法和注意事项。
一、冷冻离心机低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段。
基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实验中都离不开低温离心技术，因此低温冷冻离心机成为分子生物学研究中必备的重要仪器。
在国内，有多个厂家生产冷冻离心机，本实验室的高速冷冻离心机为GL-20G-Ⅱ型（上海安亭），落地式。
配有角式转头：6×50ml、12×10ml和12×。
极限转速20000rpm。
1. 安装与调试离心机应放置在水平坚固的地面上，应至少距离10cm以上且具有良好的通风环境中，周围空气应呈中性，且无导电性灰尘、易燃气体和腐蚀性气体，环境温度应在0～30℃之间，相对湿度小于80%。
试转前应先打开盖门，用手盘动转轴，轻巧灵活，无异常现象方可上所用的转头。
转子准确到位后打开电源开关，然后用手按住门开关，再按运转键，转动后立即停止，并观察转轴的转向，若逆时针旋转即为正确，机器可投入使用。
2. 操作程序（1）插上电源，待机指示灯亮；打开电源开关，调速与定时系统的数码管显示的闪烁数字为机器工作转速的出厂设定，温控系统的数码管显示此时离心腔的温度。
(推荐)分子生物学常用仪器介绍
医学领域
• 疾病基因检测 / 遗传病的产前诊断 • 致病病原体的检测 • 肿瘤治疗中癌基因的检测
会推广到大部分疾病治疗前的检测
• DNA指纹、个体识别、亲子关系鉴别、 法医物证
• 其他: 动、植物检疫（转基因动植物检测）
PCR具有极高的灵敏度
污染是PCR实验的常见问题。只要实验室里曾经扩增过某个 片段，就有可能以后的实验中发生污染。
• 3－ 待测样品中有相当含量的杂质。A260/A280 和 260/A230是DNA 纯度的指示值，纯度好的DNA，在 pH7-8.5下其比值应该在2.0 或2.5，A230 是多肽、芳香 基团、苯酚和一些碳氢化合物的吸光度，A280 是蛋白 质的吸光度
• 答：产生四个加号的原因是因为测量的数值超过 了测量上限>3.0A，请检查
DNA酶的活性，防止PCR扩增产物降
解
33
核酸电泳的指示剂
• 指示剂：ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
– 溴酚兰 – 二甲苯青
• 溴酚兰：在碱性液体中呈紫兰色 • 二甲苯青：水溶液呈兰色 • 电泳时，其迁移速率与双链线性
DNA大致相当
34
载样缓冲液
• 指示剂一般与蔗糖、甘油或聚蔗糖400组成 载样缓冲液
• 作用： – ①增加样品密度，使其比重增加，以确保 DNA均匀沉入加样孔内 – ②在电泳中形成肉眼可见的指 示带，可预测核酸电泳的速度和位置 – ③使样品呈色，使加样操作更方便
13
原位PCR扩增
• 在PCR仪上增加原位PCR模块就 可以在玻片上进行原位PCR扩增，
14
多槽式高通量PCR仪
• 随着基因组高通量研究的需求的提高
• MJ有一种一拖四，就是1个主机带4个扩增槽， 每个槽可以独立控温，一次可以作96x4个样品的 PCR，不过一旦出现问题4个都不能用了。
关于分子生物学实验室常用仪器及使用方法
实验指导目录实验一分子生物学实验室常用仪器及使用方法实验二质粒DNA的提取－碱裂解法实验三琼脂糖凝胶电泳实验四限制性内切核酸酶的酶切与鉴定实验五大肠杆菌感受态细胞的制备及转化实验六动物组织细胞基因组 DNA提取实验七 DNA的定量实验八 PCR基因扩增实验九琼脂糖凝胶电泳分离与纯化目的DNA实验十 DNA重组实验十一动物组织细胞总RNA的提取实验一分子生物学实验室常用仪器及使用事实证明，在科学飞速发展的今天，无论从事哪个领域的研究，要想突破，除了有良好的理论基础外，更重要的是依赖于先进的技术和优良的仪器设备以及良好的研究环境。
一个标准的分子生物学实验室除了具有一般生物学实验室的常规仪器设备外，还具有一些特殊用途的仪器，这些仪器一般较精密，价格昂贵。
下面介绍这些仪器的使用方法和注意事项。
一、冷冻离心机低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段。
基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实验中都离不开低温离心技术，因此低温冷冻离心机成为分子生物学研究中必备的重要仪器。
在国内，有多个厂家生产冷冻离心机，本实验室的高速冷冻离心机为GL-20G-Ⅱ型（上海安亭），落地式。
配有角式转头：6×50ml、12×10ml和12×1.5ml。
极限转速20000rpm。
1. 安装与调试离心机应放置在水平坚固的地面上，应至少距离10cm以上且具有良好的通风环境中，周围空气应呈中性，且无导电性灰尘、易燃气体和腐蚀性气体，环境温度应在0～30℃之间，相对湿度小于80%。
试转前应先打开盖门，用手盘动转轴，轻巧灵活，无异常现象方可上所用的转头。
转子准确到位后打开电源开关，然后用手按住门开关，再按运转键，转动后立即停止，并观察转轴的转向，若逆时针旋转即为正确，机器可投入使用。
2. 操作程序（1）插上电源，待机指示灯亮；打开电源开关，调速与定时系统的数码管显示的闪烁数字为机器工作转速的出厂设定，温控系统的数码管显示此时离心腔的温度。
分子生物学实验室仪器操作简介
2）灭菌结束后，要等温度降为“0”，才可打开灭
菌锅锅盖；
3）高压蒸汽灭菌时，须保持高温高压，因此必
须严格按照操作规程操作，否则易发生意外
事故。
2010
分 子实 生验
物 31 学
实验二
琼脂糖凝胶电泳的制 备及核酸检测
2010
分 子实 生验
物 32 学
带电荷的物质在电场中的趋向运动称为电泳。电泳一 般分为自由界面电泳和区带电泳两大类:自由界面电泳 不需支持物，这类电泳目前已很少使用;而区带电泳则 需用各种类型的物质作为支持物，常用的支持物有滤纸、 醋酸纤维薄膜、非凝胶性支持物、凝胶性支持物及硅胶 -G薄层等，分子生物学领域中最常用的是琼脂糖凝胶电 泳其优点主要在于操作简单、快速、灵敏。
5. 移液器使用完后，将刻度调到最大刻度，收藏。
2010
分 子实 生验
物 6学
台式高速离心机
离心机的分类 低速：每分钟几千转 高速：每分钟1 ~ 3万转 超速：每分钟3万转以上
2010
分 子实 生验
物 7学
离心机的功能：分离，纯化
低速：细胞等大分子 高速：DNA，蛋白等 超速: 病毒，蛋白，细胞器等
3）密封高压锅：推横梁入立柱内，旋转手轮，压紧锅盖；
4）灭菌：121℃， 20min；如为液体，液体必须装在可
耐高温的玻璃器皿中，不宜超过2/3；
5）灭菌结束，所有东西放入干燥箱干燥，排尽水气。2010
分 子实
生验
物
30 学
注意事项：
1）如是手动的灭菌锅，灭菌过程中，应注意排
净锅内冷空气，否则会影响灭菌效果。
2010
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物 36 学
附 注：
分子杂交仪操作规程(3篇)
第1篇一、引言分子杂交仪是一种用于分子生物学实验的高精密仪器，主要用于DNA、RNA等生物大分子的检测、分离和定量分析。
以下是分子杂交仪的操作规程，旨在确保实验的准确性和安全性。
二、操作前准备1. 确认仪器状态：检查分子杂交仪是否处于正常工作状态，包括电源、冷却系统、加热系统等。
2. 清洁工作台：确保实验台面干净、整洁，避免交叉污染。
3. 配制试剂：按照实验需求，配制相应的试剂，包括杂交缓冲液、标记探针、待测样本等。
4. 检查设备：检查分子杂交仪的各个部件是否完好，如电极、杂交管、密封盖等。
三、操作步骤1. 打开分子杂交仪电源，预热30分钟。
2. 将杂交管放入分子杂交仪，确保密封盖密封良好。
3. 设置杂交参数：根据实验需求，设置杂交温度、杂交时间、洗脱温度、洗脱时间等参数。
4. 加载样本：将配制好的标记探针和待测样本加入杂交管，按照实验要求进行混合。
5. 开始杂交：按下“开始”按钮，分子杂交仪开始进行杂交操作。
6. 洗脱：杂交完成后，按照设定参数进行洗脱操作。
7. 重复洗涤：根据实验需求，对杂交管进行重复洗涤，以去除未结合的探针。
8. 确认结果：通过分子杂交仪的检测系统，观察杂交结果，如信号强度、对比度等。
9. 关闭仪器：完成实验后，关闭分子杂交仪电源，取出杂交管。
四、注意事项1. 严格遵守操作规程，确保实验结果的准确性。
2. 操作过程中，注意避免交叉污染，使用无菌操作。
3. 试剂和样本应按照实验要求进行配制，确保实验材料的纯度。
4. 在操作过程中，密切观察分子杂交仪的运行状态，如温度、压力等。
5. 实验结束后，对分子杂交仪进行清洁、消毒，以备下次使用。
五、实验记录1. 记录实验时间、温度、时间等参数。
2. 记录实验结果，包括信号强度、对比度等。
3. 对实验过程中出现的问题进行记录，以便分析原因和改进实验。
通过以上操作规程，可以有效保证分子杂交仪实验的准确性和安全性。
在实际操作过程中，应根据实验需求调整参数，以达到最佳实验效果。
分子生物学实验室常用仪器设备简介
分子生物学实验室常用仪器设备简介实验一分子生物学实验室常用仪器设备简介实验目的：1了解分子生物学实验室的常用仪器设备的类型及用途。
2 掌握常用仪器设备的正确操作方法。
实验原理：分子生物学实验室常用仪器设备是顺利完成各项分子生物学实验的保障。
若不会或错误地使用设备，不仅会使实验结果错误，还会给他人带来不便，有些还会带来经济损失。
因此，正确使用操作仪器设备应是每位学生必须首先学会的技能。
实验室主要仪器：微量移液器、低温离心机、PCR仪、电泳仪、恒温气浴摇床、超净工作台、灭菌锅实验内容及操作步骤：微量移液器：微量移液器是连续可调的、计量和转移液体的专用仪器，其装有直接读数容量计。
微量移液器有多种规格，在移液器量程范围内能连续调节读数。
移液器常见的四种规格分别是：0.5～10μl(读数窗显示0.5～10.0,每转1档为0.1μl);10～100μl(读数窗显示10.0～100, 每转1档为1μl);20～200μl(读数窗显示20～200, 每转1档1μl);100～1000μl(读数窗显示100～1000, 每转1档为5μl).量液的操作步骤：1．将微量移液器装上吸头（不同规格的移液器用不同的吸头）2．将微量移液器按钮轻轻压至第一停点；3．垂直握持微量移液器，使吸嘴浸入液样面下几毫米，千万不要将吸嘴直接插到液体底部；4．缓慢、平稳地松开控制按钮，吸上样液。
否则液体进入吸嘴太快，导致液体倒吸入移液器内部，或吸入体积减少；5．等一秒钟后将吸嘴提离液面6．平稳地把按钮压到第一停点，再把按钮压至第二停点以排出剩余液体；7．提起微量移液器，然后按吸嘴弹2．量液操作注意问题：1．未装吸嘴的微量移液器绝对不可用来吸取任何液体。
2．一定要在允许量程范围内设定容量，千万不要将读数的调节超出其适用的刻度范围，否则会造成损坏。
3．不要横放带有残余液体吸嘴的移液器。
4．不要用大量程的移液器移取小体积样品。
5. 移液器使用完后，将刻度调到最大刻度，收藏。
分子生物学实验室常用仪器设备简介
分子生物学实验室常用仪器设备简介一、实验目的熟悉分子生物学实验室常用仪器并熟练使用二、实验原理1、恒温气浴来靠：用作对温度和震荡频率存有较低建议的细菌培养，蒸煮，杂交，生化反应及酶和非政府研究等。
2、超净工作台：用于分子生物学无菌操作。
3、低温台式高速离心机：用作拆分提纯dna和蛋白质等，例如基因片段的拆分，蛋白酶的结晶和废旧等。
4、微量移液管：是连续可调的，计量和转移液体的专用仪器，其装有直接读数容量计。
有多种规格：①0.5-10μl②10-100μl③20-200μl④100-1000μl。
5、电泳仪：用作确认大分子物质的分子量以及鉴别物种亲缘关系的仪器。
6、pcr仪：用于目的基因的扩增，是一对寡糖核苷酸引物结合到正负dna链上的靶序列两侧，从而酶促合成拷贝数为百万倍的靶序列dna片段。
主要用于基础研究和应用研究等领域。
7、杀菌锅：用作细菌和细胞培养及核酸等有关实验采用的试剂，器皿及实验用具的严苛杀菌。
三、实验仪器恒温气浴来靠、无尘室工作台、低温台式高速离心机、微量移液管、杀菌锅、pcr仪、电泳仪。
四、实验步骤（一）、恒温气浴必须穿着的采用：1、样品瓶稳固放进弹簧缠中2、接通电源开关，仪器进入准备状态3、参数设定，（设定温度、时间、转速等参数）4、按启动键仪器已经开始工作，按暂停键可以暂停纸盒的转动；5、按电源键，显示屏表明消失，关闭电源总开关（二）、无尘室工作台的采用1、使用工作台时，先经过清洁液浸泡的纱布擦拭台面，然后用消毒剂擦拭消毒。
2、接通电源，提前30分钟打开紫外灯照射消毒，处理净化工作区内工作台表面积辛苦的微生物，15分钟后，停用紫外灯，打开送风机。
3、工作台面上，不要存放不必要的物品，以保持工作区内的洁净气流不受干扰。
4、操作结束后，清理工作台面，收集各废弃物，关闭风机及照明开关，用清洁剂及消毒剂擦拭消毒。
5、最后打开工作台紫外灯，反射消毒30分钟后，停用紫外灯，阻断电源。
（三）、低温台式高速离心机的采用1、把离心机放置于平面桌或平面台上，目测使之平衡，用手轻摇一下离心机，检查离心机是否放置平衡。
分子生物学实验仪器使用说明.txt
四、注意事项
1.认真做好仪器使用前准备工作。
2.仪器通电后或测量过程中出现显示不稳或乱跳现象，应切断电源进行检查，如电压、预热时间及电极系统等是否正常。
3.使用不同电极应注意排除离子的干扰，选择好盐桥，必要时应使用离子强度固定剂。
5.被称物质的重量是显示屏左下角出现“→”标志时，显示屏所显示的实际数值。
6.称量结束应及时除去称量瓶（纸），关上侧门，切断电源，并做好使用情况登记。
注意事项
1.天平应放置在牢固平稳水泥台或木台上，室内要求清洁、干燥及较恒定的温度，同时应避免光线直接照射到天平上。
2.称量时应从侧门取放物质，读数时应关闭箱门以免空气流动引起天平摆动。前门仅在检修或清除残留物质时使用。
4.按启动键，离心机将执行上述参数进行运作，到预定时间自动关机。
5.待离心机完全停止转动后打开机盖，取出离心样品，用柔软干净的布擦净转头和机腔内壁，待离心机腔内温度与室温平衡后方可盖上机盖。
注意事项：
1.机体应始终处于水平位置，外接电源系统的电压要匹配，并要求有良好的接地线。
2.开机前应检查转头安装是否牢固，机腔有无异物掉入。
4.以空白管自动调零。
5.试样槽依次移至样品位置，待数据显示稳定后按“START/STOP”键，打印机自动打印所测数据，重复上述步骤，直到所有样品检测完毕。
6.检测结束后应及时取出比色杯，并清洗干净放回原处，同时关上仪器电源开关及稳压器电源开关，做好使用情况登记。
注意事项
1.仪器初次使用或使用较长时间（一般为一年），需检查波长准确度，以确保检测结果的可靠性。
生物技术实验室仪器操作简介
如何设置一个PCR程序：
1、预变性：可用94～95℃，2～10min,一般用 5min。 2、变性：一般用94℃，30s~2min,一般45s~1min。 3、退火：温度自定，30s~2min。 4、延伸：72℃，对于(1kb=1min,每增加1kb加1min)。 5、循环数：一般25～35个循环(2,3,4步循环）。 6、最终延伸：72℃，5～15min。 7、保存：4℃，时间设为0。 8、END。
（3）关闭紫外与可见分析装置的电源。
注意事项：
1、 不要戴“脏”手套触摸电脑鼠标、键盘及其它位置； 2、 不要戴“脏”手套触摸仓门和灯箱电源开关； 3、 不要戴“脏”手套触摸外接电源开关；
4、在图像获取过程中，若通过软件打开紫外/可见光，则 必须再通过软件关闭，若通过紫外与可见分析装置上 打开紫外/可见光，则从分析装置上关闭，严禁互用， 导致紫外灯长亮。
台式高速离心机
离心机的分类 低速：每分钟几千转 高速：每分钟1 ~ 3万转 超速：每分钟3万转以上
离心机的功能：分离，纯化
低速：细胞等大分子 高速：DNA，蛋白等 超速: 病毒，蛋白，细胞器等
➢基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品 的分离制备实验中都离不开低温离心技术
➢本实验室所用离心机:台式高速离心机（ Thermo ），配有 角式转头：24×1.5ml；极限转速13000rpm ;台式低温高速
一. 实验目的
• 掌握琼脂糖凝胶电泳的原理; • 学习琼脂糖凝胶电泳的操作。
二. 实验原理
琼脂糖是一种天然聚合长链状分子，沸水中溶解 ，45℃开始形成多孔性刚性滤孔，凝胶孔径的大小决定
于琼脂糖的浓度。 DNA分子在碱性环境中带负电荷，在外加电场作 用下向正极泳动。DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时， 有电荷效应与分子筛效应。DNA分子量及构型不同， 其泳动率就不同，从而分出不同的区带。琼脂糖凝胶电 泳法分离DNA，主要是利用分子筛效应。
分子生物学实验室安全及常用仪器介绍说明-
内容介绍
1. 分子生物学实验安全常识
2. 1.1 分子生物学实验室的基本要求 3. 1.2 实验室电、气、水、火 4. 1.3 化学试剂的安全使用 5. 1.4 微生物的危害及处理 6. 1.5 放射性物质的安全使用 7. 1.6 紫外线辐射的危害及防护 8. 1.7 废弃物的处理
2. 分子生物学功能实验室使用注意事项
干粉灭火器灭火 ； • 导线或电器着火时，应先断电，再用干粉灭火器灭火。
切不可用泡沫灭火器，此灭火器导电。 • 衣服着火时，应尽快地脱掉衣服，并用水灭火。或就地滚动，
切忌外跑。 防火：火灾不能预期、不能杜绝、只能预防
• 消除火灾隐患（电、火、气、试剂） • 备逃生四件宝（灭火器、绳、手电筒、防毒面具）
➢触电：断电或绝缘脱离 急救
➢电灯：进入实验室，有需要时打开电源开关、排气扇；离开实验室时若无
人请关闭电灯及排气扇。
节
➢空调：进入实验室，有需要时可打开空调，温度不得低于27℃；每天下班
约
时实验室负责人将关闭空调。若在非上班时间内打开空调，离开时请关闭！
分子生物学实验安全常识
❖1.2 实验室电、气、水、火
分子生物学实验安全常识
❖1.3 化学试剂的安全使用
DMSO（二甲亚砜）
是一种既溶于水又溶于有机溶剂的非质子极性溶剂，常用作细 胞的冻存液和配制AS。皮肤沾上之后用大量的水洗及1%~5%稀氨水 洗涤。
十二烷基硫酸钠(SDS)
有毒，易损害眼睛。质粒提取时作裂解液破坏细胞膜和 Southern杂交时的洗膜液中的去垢剂。戴合适的手套和安全护目镜， 不要吸入其粉末。
火
分子生物学实验安全常识
❖1.3 化学试剂的安全使用
总原则： 药品状态定口径，瓶塞取决酸碱性； 受热见光易分解，存放低温棕色瓶； 特殊试剂特殊放，互不反应要记清。
分子生物学实验仪器设备分析
• 第一节 微量移液器
• 第二节 ＰＣＲ 仪
• 第三节 凝胶成像仪
• 第四节 恒温水浴锅
• 第五节 分子杂交仪
第一节 微量移液器
• 分子生物学是在分子水平上研究生命现象的科学， 通过研究生物大 分子（ 核酸、 蛋白质） 的结构、 功能和生物合成等来揭示各种生 命现象的本质。 本章将介绍分子生物学实验过程中基本仪器设备的 使用方法及注意事项等， 为相关实验操作奠定基础。
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第一节 微量移液器
• 四、 微量移液器的使用方法
• １． 容量设定 • 容量设定可通过容量调节轮的旋转来完成。 正确的容量设定有两个
步骤： 一是粗调， 即通过排放按钮将容量值迅速调整至接近需要的 预想值； 二是细调， 当容量值接近需要的预想值以后， 应将移液器 横置， 水平放至在观察者的眼前， 通过调节轮慢慢地将容量值调至 预想值， 从而避免视觉误差所造成的影响。 • 在容量设定时， 还有一个需要特别注意之处， 即从大值调整到小值 时， 调整到预想值即可； 但从小值调整到大值时， 需要超 １ ／ ３ 圈后再返回。 这是因为计数器里面有一定的空隙， 需要弥补。
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第一节 微量移液器
• 六、 微量移液器常见的错误操作
• （１） 吸液时， 移液器倾斜， 导致移液不准确。 • （２） 装配吸头时， 用力过猛， 导致吸头难以脱卸。 • （３） 平放带有残余液体吸头的移液器。 • （４） 用大量程的移液器移取小体积样品。 • （５） 直接按到第二挡吸液。 • （６） 使用丙酮或强腐蚀性的液体清洗移液器。
• 微量移液器的组成最早出现于 １９５６ 年， 由德国生理化学研究所 的科学家Ｓｃｈｎｉｔｇｅｒ 发明。 １９５８ 年， 德国 Ｅｐｐｅ ｎｄｏｒｆ 公司开始生产按钮式微量移液器， 成为世界上第一家生 产微量移液器的公司。 微量移液器的吸液范围一般为 ０ ５ ～ １ ０ ００ μＬ， 可用于微量移液， 是目前进行科学研究、 临床检测与诊 断必需的基本设备。
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分 子实 生验
物 16 学
操作步骤：
1、图像采集
1）将电泳样品放入分析装置中
2）打开电脑，运行Smart View 软件，单击“Import”键进入
图像获取项目栏，选择“获取视频图像”键，进行图像采集
3）选 择紫外或可见光源，在图像采集窗口中调节好图像大
小、亮度及焦距
4）单击“采集图像”键，根据图像质量选择好优化摄影时间
3）放入样品，盖上盖子;
4）在所建用户名下按“run”键，找到设定的程序，
按“start”键启动程序;
5）运行结束后按“stop”键停止运行，取出样品，关 2010
分 子实
闭电源。
生验 物
13 学
如何设置一个PCR程序：
1、预变性：可用94～95℃，2～10min,一般用 5min。
2、变性：一般用94℃，30s~2min,一般45s~1min。
物 3学
微量移液器是连续可调的、计量和转移液体的专用仪器， 其装有直接读数容量计。
微量移液器有多种规格，在移液器量程范围内能连续调 节读数。
0.5～10μl
10～100μl
常见规格 20～200μl
100～1000μl
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分 子实 生验
物 4学
量液的操作步骤：
第一停点 第二停点
A 保持微量移液器垂直，将按钮压至第一停点；
B 微量移液器头尖端浸入溶液，缓慢释放按钮；
C 保持微量移液器垂直，将微量移液器头与容器壁接触，慢
慢压下按钮至第一停点； D 压至第二停点把溶液完全释放出； E 释放按钮回原状。
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分 子实 生验
物 5学
量液操作注意问题：
1． 未装吸嘴的微量移液器绝对不可用来吸取任何液体。 2． 一定要在允许量程范围内设定容量，千万不要将读 数的调节超出其适用的刻度范围，否则会造成损坏。 3． 不要横放或倒拿带有残余液体吸嘴的移液器。 4． 不要用大量程的移液器移取小体积样品。
3、退火：温度自定，30s~2min。
4、延伸：72℃，对于(1kb=1min,每增加1kb加1min)。
5、循环数：一般25～35个循环(2,3,4步循环）。
6、最终延伸：72℃，5～15min。
7、保存：4℃，时间设为0。
8、END。
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分 子实 生验
物 14 学
FR-980生物电泳图像分析系统
3、关闭操作系统
（1）关闭紫外/可见光。
（2）退出软件界面。
（3）关闭紫外与可见分析装置的电源。
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分 子实 生验
物 19 学
注意事项：
1、 不要戴“脏”手套触摸电脑鼠标、键盘及其它位置； 2、 不要戴“脏”手套触摸仓门和灯箱电源开关； 3、 不要戴“脏”手套触摸外接电源开关； 4、在图像获取过程中，若通过软件打开紫外/可见光，则
（一般情况下在12秒左右），即开始采集。
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分 子实 生验
物 17 学
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分 子实 生验
物 18 学
2、图像保存
单击“System 键”选择“另保存图像为”键，实验日期，实验摘要等
信息，按“保存”键完成图像文件登记，同时出现“另保存图
像为”窗口，输入图像名，保存图像至桌面。
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分 子实 生验
物 15 学
系统简介：
系统可以通过紫外/可见光分析装置及透光扫描仪直接 获得核酸、蛋白质凝胶电泳图像。系统配置有 SmartView生物电泳图像分析软件，可以进行密度扫 描、密度定量、分子量计算等电泳分析。此外，该系统 含有多种图像滤波器，可降低图像的噪音，从而获得较 清晰的图像。
➢基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品
的分离制备实验中都离不开低温离心技术
➢本实验室所用离心机:台式高速离心机（ Thermo ），配有
角式转头：24×1.5ml；极限转速13000rpm ;台式低温高速
离心机（sigma),极限转速20000rpm。
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分 子实 生验
物 8学
台式高速离心机使用步骤
1、把离心机放置于平面桌或平面台上，检查离心机是否 放置平稳。 2、将离心管对称放入转子内，且要事先平衡。 3、锁紧门盖。 4、插上电源插座，按下电源开关。 5、设置转子号、转速、时间： （常用，最高转速为13000r/min，时间最长为20min）； 注意：对应的转子不可超速使用，否则对试管或转子有损坏。 6、当转子停转后，打开门盖取出离心管，关断电源开关。
5、离心机彻底停止后，才可开盖，取样。
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分 子实 生验
物 10 学
PCR仪
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分 子实 生验
物 11 学
PCR仪，也称DNA热循环仪、基因扩增仪，能使 一对寡核苷酸引物结合到正负DNA链上的靶序列两 侧，从而酶促合成拷贝数为百万倍的靶序列DNA片 段，它的每一循环包括DNA变性、复性、延伸三个 反应。
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分 子实 生验
物 9学
注意事项：
1、离心机在运转时，不得移动离心机，不要打开门盖。
2、安放离心机的台面应坚实平整，四只橡胶机脚都应与 台面接触和均匀受力，以免产生振动。
3、离心管加液要平衡，若加液差异过大运转时会产生大 的振动，此时应停机检查，使加液符合要求，离心试管必 须对称放入。
4、若运转时有离心试管破裂，会引起较大振动应立即停 机处理。
5. 移液器使用完后，将刻度调到最大刻度，收藏。
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分 子实 生验
物 6学
台式高速离心机
离心机的分类 低速：每分钟几千转 高速：每分钟1 ~ 3万转 超速：每分钟3万转以上
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分 子实 生验
物 7学
离心机的功能：分离，纯化
低速：细胞等大分子 高速：DNA，蛋白等 超速: 病毒，蛋白，细胞器等
PCR仪主要应用于基础研究和应用研究等许多领域，
如基因分析、序列分析、进化分析、临床诊断、法医
学等。
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物 12 学
操作程序:
1）开机：打开电源，显示主界面；
2）创建程序：使用”create”输入新程序（包括PCR 循
环数，预变性、变性、复性、延伸的时间和温
度），保存程序（包括用户名和方法名）;
实验一
分子生物学实验室常用 仪器设备简介及操作
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物 1学
实验室主要仪器，设备的简介及使用方法
➢ 微量移液器 ➢ 高速台式离心机 ➢ PCR仪 ➢ 凝胶成像系统 ➢ 电泳仪 ➢ 恒温气浴摇床 ➢ 超净工作台 ➢ 灭菌锅
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物 2学
微量移液器
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