限制性核酸内切酶与核酸内切酶、外切酶
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限制性核酸内切酶百科名片
其3′→5′外切酶活性使双链DNA分子产生出单链区,经过这种修饰的DNA 再配合使用Klenow酶,同时加进带放射性同位素的核苷酸,便可以制备特异性的放射性探针。
核酸内切酶
核酸内切酶(endonuclease)在核酸水解酶中,为可水解分子链内部磷酸二酯键生成寡核苷酸的酶,与核酸外切酶相对应。从对底物的特异性来看,可分为DNaseⅠ、DNaseⅡ等仅分解DNA的酶;脾脏RNase、RNaseT1等仅分解RNA的酶。如链孢霉(Neurospora)的核酸酶就是既分解DNA又分解RNA的酶。一般来说,大都不具碱基特异性,但也有诸如脾脏RNase、RNaseT1等或限制性内切酶那种能够识别并切断特定的碱基或碱基序列的酶。[1]
寡核苷酸,是一类只有20个以下碱基对的短链核苷酸的总称(包括脱氧核糖核
酸DNA或核糖核酸RNA内的核苷酸),寡核苷酸可以很容易地和它们的互补对链接,所以常用来作为探针确定DNA或RNA的结构,经常用于基因芯片、电泳、荧光原位杂交等过程中。
RNA聚合酶
科技名词定义
中文名称:RNA聚合酶
英文名称:RNA polymerase
定义1:以一条DNA链或RNA链为模板催化由核苷-5′-三磷酸合成RNA的酶。
所属学科:生物化学与分子生物学(一级学科);酶(二级学科)
定义2:以一条DNA链或RNA链为模板催化由核苷-5′-三磷酸合成RNA的酶。
所属学科:细胞生物学(一级学科);细胞遗传(二级学科)
定义3:以DNA或RNA为模板合成RNA的酶。
所属学科:遗传学(一级学科);分子遗传学(二级学科)
本内容由全国科学技术名词审定委员会审定公布
RNA聚合酶(RNA polymerase):以一条DNA链或RNA为模板催化由核苷-5′-三磷酸合成RNA的酶。是催化以DNA为模板(template)、三磷酸核糖核苷为底物、通过磷酸二酯键而聚合的合成RNA的酶。因为在细胞内与基因DNA的遗传信息转录为RNA有关,所以也称转录酶。
逆转录酶
科技名词定义
中文名称:逆转录酶
英文名称:reverse transcriptase
其他名称:依赖于RNA的DNA聚合酶(RNA-dependent DNA polymerase,RNA指导的DNA聚合酶
(RNA-directed DNA polymerase)
定义:编号:EC 2.7.7.49。以RNA为模板催化脱氧核苷-5′-三磷酸合成DNA的酶。在逆转录病毒及其他某些病毒中发现有此类酶。
所属学科:生物化学与分子生物学(一级学科);酶(二级学科)
本内容由全国科学技术名词审定委员会审定公布
reverse transcriptase
又称RNA 指导的DNA 聚合酶,是以RNA 为模板合成DNA的酶。这种酶是1970 年美国科学家特明(H. M. Temin) 和巴尔的摩 (D. Baltimore) 分别于动物致癌 RNA 病毒中发现,他们并因此获得1975 年度诺贝尔生理学或医学奖。当RNA 致癌病毒,如鸟类劳氏肉瘤病毒(Rous sarcoma virus) 进入宿主细胞后,其逆转录酶先催化合成与病毒 RNA 互补的 DNA 单链,
继而复制出双螺旋 DNA,并经另一种病毒酶的作用整合到宿主的染色体
DNA 中,此整合的 DNA 可能潜伏(不表达)数代,待遇适合的条件时被激活,利用宿主的酶系统转录成相应的RNA,其中一部分作为病毒的遗传物质,另一部分则作为 mRNA 翻译成病毒特有的蛋白质。最后,RNA 和蛋白
质被组装成新的病毒粒子。在一定的条件下,整合的 DNA 也可使细胞转化成癌细胞。
含有逆转录酶的病毒叫做反转录病毒,逆转录酶催化的反应叫反转录(reverse transcription)。在这个过程中,遗传信息流动的方向是从RNA 到DNA,正好与转录过程相反,故称反转录。病毒逆转录酶含Zn2+,以脱氧核苷三磷酸为底物,从5’- 到3’- 合成 DNA,反应需要引物。这个
酶在许多方面与 DNA 聚合酶相似。目前已发现不少动物反转录病毒,近年来也发现了几种人类反转录病毒。艾滋病毒也是一种反转录病毒。有的逆
转录酶已提纯,可作为合成某些特定RNA 的互补DNA 的工具酶,也可用
于DNA 的序列分析和克隆重组 DNA。
反转录又称逆转录