化学发光试剂及其应用

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化学发光技术原理及应用

化学发光技术原理及应用

化学发光技术原理及应用化学发光技术,是指通过化学反应的方法来产生发光现象的一种技术。

它主要依赖于化学反应的能量释放和物质发生转化的过程中产生能量的特点,使用一定的化学试剂,通过物质的化学反应,来使化学能转化为光能,从而实现发光的效果。

化学发光技术广泛应用于生物医学、物质分析、环境监测、能源技术、材料科学等领域。

本文将分别探讨化学发光技术的基本原理,以及它在不同领域中的应用。

一、化学发光技术的基本原理化学发光技术的基本原理是通过特定的化学反应来激发发光分子的能级,使发光分子达到激发态,释放出光子实现发光的过程。

因此,化学发光技术的实现需要开发出一系列符合要求的发光试剂。

常见的发光方式有如下几种。

1. 化学发光化学发光法利用特定的化学反应,使反应物的活化能转化为光能而产生发光。

比如,乳酸氧化酶催化下乳酸和过氧化氢反应生成的基质产生化学发光,可以用于检测血液中的乳酸含量。

2. 其他类型的光化学反应还有一些类型的光化学反应也能产生发光现象,比如化学发光酶免疫分析法。

如果特定化学反应产生的物质与酶或抗体结合,这时的化学发光就能表现出高度的选择性和灵敏度。

3. 高分子发光材料发光高分子材料的制备通常是将一定量的化学反应物和发光剂混合,进一步地,将混合后的料加入到具有合适性能的基体中。

高分子发光材料因其易于加工、成本低廉、安全稳定等优点,在环境监测、生物医学等诸多领域都得到有效应用。

二、化学发光技术在生物医学领域的应用发光技术在生物医学领域的应用非常广泛。

一般来讲,生化指标对临床诊断和病理变化的判断测试和检测是具有非常重要价值的。

其中最重要的生化指标之一是蛋白质,通过检测蛋白质浓度、酶活性等参数的变化,能够早期发现人体的变化,这对于疾病预防和治疗至关重要。

化学发光技术能够针对不同类型的指标开发出相应的检测方法,如果高灵敏度、特异性,检测的速度也十分快。

三、化学发光技术在环境监测领域的应用化学发光技术在环境监测领域的应用十分广泛。

化学发光

化学发光

光激发化学发光特点
高灵敏度
逐级放大的化学反应的结果。
感光微粒富含感光化合物,在光照射后每个微粒会释放出60000个/s离 子氧,离子氧作用于发光微粒中的二甲基噻吩衍生物产生大量紫外光完
成第二级放大;紫外光激发包埋在发光微粒中的镧系元素释放光能完成
第三级放大过程。三级梯度放大过程使LiCA的检测限低至10-15摩尔。
缺点:水溶性差。适用于有机相体系。
荧光棒
常用化学发光试剂 C 吖啶酯 在碱性条件下被H2O2氧化时,发出波长为470nm光。
CL发光效率和发光强度
化学效率主要取决于发光所依赖的化学反应本身;而发光效率则 取决于发光体本身的结构和性质,也受环境的影响。
动力学 反应时间,提高灵敏度?
化学发光强度
本底。
敏化化学发光 是指某些化学反应中的由于激发态产物 本身不发光或反光十分微弱,但通过加入某种接受体 (荧光剂)可导致发光。反应式为:
A+B → C*+D, F+C* → F* → F+ hv C为能量给于体,F为能量接受体 F*+C,
化学发光强度与反应物浓度的关系
化学发光强度与化学反应速度(dp/dt)相关联,而一切 影响反应速度的因素多可以作为建立测定方法的依据。 化学发光反应一般可表示为: A+B → C*, C* → C+hv 该发光反应的化学发光强度取决于反应速度dp/dt和反应 的化学发光量子效率( ΦCL ) ICL(T)= ΦCLdp/dt
CL基本类型
按反应机理 自身化学发光、 敏化化学发光、电致化学发光 自身发光:是指被测物质为反应物直接参与化学反应, 利用自身化学反应释放的能量激发产物分子的光辐射。 可用反应式表示为: A+B → C*+D, C* → C+hv

五大化学发光标记材料原理详解及检测应用

五大化学发光标记材料原理详解及检测应用

化学发光及生物发光的原理及其应用第一部分概述化学发光 (ChemiLuminescence ,简称为 CL) 分析法是分子发光光谱分析法中的一类,它主要是依据化学检测体系中待测物浓度与体系的化学发光强度在一定条件下呈线性定量关系的原理,利用仪器对体系化学发光强度的检测,而确定待测物含量的一种痕量分析方法。

化学发光与其它发光分析的本质区别是体系产生发光 ( 光辐射 ) 所吸收的能量来源不同。

体系产生化学发光,必须具有一个产生可检信号的光辐射反应和一个可一次提供导致发光现象足够能量的单独反应步骤的化学反应。

化学发光体系用化学式表示为:依据供能反应的特点,可将化学发光分析法分为: 1 )普通化学发光分析法 ( 供能反应为一般化学反应 ) ; 2 )生物化学发光分析法 ( 供能反应为生物化学反应;简称 BCL) ; 3 )电致化学发光分析法 ( 供能反应为电化学反应,简称ECL) 等。

根据测定方法该法又可分为:1 )直接测定 CL 分析法;2 )偶合反应 CL 分析法 ( 通过反应的偶合,测定体系中某一组份;3) 时间分辨 CL 分析法 ( 即利用多组份对同一化学发光反应影响的时间差实现多组份测定 ) ;4 )固相、气相、掖相 CL 。

分析法;5 )酵联免疫 CL 分析法等。

化学发光的系统一般可以表示为:在整个的检测系统中其关键的部分为 PMT ,其直接影响到仪器的检测性能,其最高检测极限为 10 - 22 mol/L 。

不同型号的仪器其检测技术不一样,但基本原理都是利用待测组份与体系的化学发光强度呈线性定量关系,而化学发光强度随体系反应进行的速度增强或衰弱。

记录仪记录峰形,以峰高定量,也可以峰面积定量。

因化学发光多为闪烁式发光 (1—2s 左右 ) ,故进样与记录时差短,分析速度快。

第二部分、化学发光常用的化学试剂及其原理化学发光是某种物质分子吸收化学能而产生的光辐射。

任何一个化学发光反应都包括两个关键步骤,即化学激发和发光。

化学发光实验报告

化学发光实验报告

化学发光实验报告实验目的:通过化学反应观察与记录不同试剂在特定条件下的发光现象,探究发光实验的原理与应用。

实验仪器与试剂:1. 试管架、试管夹2. 试管刷3. 显微镜4. 石英发光腔5. 铁氰化钠(Na3Fe(CN)6)溶液6. 过氧化氢(H2O2)溶液7. 缺氧剂(氯银铵)8. 磷酸盐荧光液9. 碳酸钠(Na2CO3)溶液10. 氢氧化钠(NaOH)溶液实验步骤:1. 首先,将石英发光腔清洗干净。

2. 将铁氰化钠溶液注入石英发光腔,并将其放置于试管架上。

3. 在试管刷上挤取一滴磷酸盐荧光液,涂抹于石英发光腔的底部。

4. 使用试管夹将石英发光腔固定在显微镜上,调节适当的放大倍数。

5. 慢慢向石英发光腔中滴加过氧化氢溶液,并观察其发光现象。

6. 记录发光时的颜色、强度和持续时间等参数,并进行多次实验重复确认。

实验结果与讨论:在本实验中,我们观察到了发光现象并记录了相关参数。

下面对实验结果进行讨论。

在实验过程中,我们使用铁氰化钠溶液作为发光试剂,过氧化氢溶液作为缺氧剂,磷酸盐荧光液用于增强发光效果。

首先,在缺氧的条件下,铁氰化钠与过氧化氢发生氧化还原反应,产生了富有活性的氧和过氧化氢根离子(HO2-)。

随后,这些活性物质引发了磷酸盐荧光液的发光反应,导致整个石英发光腔发出明亮的荧光。

通过多次实验的观察和记录,我们发现加入不同浓度的铁氰化钠溶液和过氧化氢溶液,以及不同比例的磷酸盐荧光液,都会对发光的颜色、强度和持续时间产生影响。

较高浓度的试剂溶液和比例适当的磷酸盐荧光液会使发光更加明亮和持久。

根据实验结果,我们进一步讨论了发光实验的原理和应用。

发光现象是由于化学反应释放出能量,达到了激发物质的能力阈值,使其原子或分子跃迁到激发态并返回基态时释放出光子。

化学发光技术在生物医学、环境监测、材料科学、荧光染料等领域有广泛的应用,如生物标记、细胞成像、环境污染监测等。

结论:通过本实验,我们成功观察和记录了化学发光现象,并深入探讨了其原理和应用。

化学发光分析法的应用研究与新进展全解

化学发光分析法的应用研究与新进展全解

化学发光分析法的应用研究与新进展摘要:化学发光分析法是根据化学反应的发光强度或发光总量确定相应组分含量的一种分析方法。

同荧光法相比,化学发光法不需要外来的光源,减少了拉曼散射和瑞利散射,降低了噪音信号的干扰,提高了检测的信噪比,扩大了线性范围。

并具通过特定的化学发光可以定性定量的测定微量物质,有操作方便,易于实现自动化,分析快等特点。

同时在实践的过程中化学发光分析法与其他方法相比较其灵敏度也较高,此外线性范围宽和仪器简单也是化学发光分析法的特点之一。

正是基于这些特点,化学发光分析法在环境化学、临床医学、生物科学等领域得到十分广泛的应用和研究。

本文从化学发光分析法的原理、优缺点和应用研究的新进展等方面进行了综述。

关键词:化学发光分析法,化学发光体系,鲁米诺,光泽精引言化学发光是化学反应体系中的某些分子或原子中的电子,如反应物、中间体或反应产物吸收了化学反应释放出的化学能后,由基态(较低能级)跃迁到激发态(较高能级),然后再返回到基态,并释放光子所产生的光辐射[2]。

化学发光又称为冷光,它是在没有任何光、热或电场等激发的情况下由化学反应而产生的光辐射。

由于不需要外源性激发光源,避免了背景光和杂散光的干扰,降低了噪声,大大提高了信噪比。

具有灵敏度高,线性范围宽,设备简单,操作方便,易于实现自动化,分析快等特点。

在生物工程学,药物学,分子生物学,临床和环境化学等各个领域正显示出它蓬勃的生机。

本文主要介绍化学发光分析法的原理、优缺点,常用的化学发光试剂及其体系,和在环境化学、临床医学、生物科学等领域的应用研究和化学发光分析法的近两年的应用新进展。

1 化学发光1.1化学发光的原理发光是指分子或原子中的电子吸收能量后,由基态(较低能级)跃迁到激发态(较高能级),然后再返回到基态,并释放光子的过程。

根据形成激发态分子的能量来源不同可分为:光照发光、生物发光、化学发光等。

光照发光(photoluminescence)是指发光剂(荧光素)经短波长的入射光照射后,电子吸收能量跃迁到激发态,在其回复至基态时,发射出较长波长的可见光(荧光)。

科美光激发化学发光试剂说明书光激化学发光法

科美光激发化学发光试剂说明书光激化学发光法

科美光激发化学发光试剂说明书光激化学发光法光激化学发光法(Luminescence)是一种测量化学反应释放的能量或激发的光的方法。

科美光激发化学发光试剂通常用于生物检测、化学分析、环境监测等领域。

以下是关于科美光激发化学发光试剂的一般说明:1. 原理:光激化学发光法基于化学反应释放的能量或激发的光。

这些能量或光可以通过特定的检测器进行测量,以确定反应是否发生或反应的程度。

2. 试剂组成:科美光激发化学发光试剂通常包含反应所需的化学物质、激发剂和可能的缓冲液。

这些试剂被设计成在特定的光激发下产生化学发光。

3. 使用方法:根据具体的应用和实验设计,使用科美光激发化学发光试剂的方法可能会有所不同。

一般而言,用户需要按照试剂说明书进行操作,将试剂与待测样品混合,然后通过测量产生的光来确定待测样品的浓度或活性。

4. 注意事项:使用科美光激发化学发光试剂时,需要注意避免直接接触试剂,以免可能对皮肤或眼睛造成刺激。

此外,应确保试剂储存于避光、干燥的地方,并按照说明书规定的温度和条件进行保存。

5. 优点与局限性:光激化学发光法的优点包括高灵敏度、高特异性以及相对较低的成本。

然而,这种方法可能受到背景噪声和其他潜在干扰的影响,因此在使用前应进行充分的验证和优化。

6. 应用范围:科美光激发化学发光试剂广泛应用于各种领域,如生物学、医学、环境科学等。

它们可用于检测生物标记物、药物、污染物以及其他目标物质。

由于不同版本的试剂说明书可能会有所不同,建议在具体使用前仔细阅读科美光激发化学发光试剂的说明书,并遵循制造商提供的操作建议和注意事项。

如有任何疑问,建议咨询相关领域的专家或与制造商联系以获取更多指导。

化学发光底物溶液的作用

化学发光底物溶液的作用

化学发光底物溶液的作用1.引言1.1 概述概述化学发光底物溶液是一种广泛应用于生物医学研究领域的试剂,其主要作用是通过与特定酶的催化反应产生化学发光现象。

这种底物溶液具有特殊的化学结构和性质,能够在酶的作用下发生特定的化学反应,从而产生强烈的发光信号。

这一发光现象成为了现代生物技术和生物医学实验的重要工具,因其高灵敏度、高特异性和简便操作的特点,广泛应用于生物分析和分子成像领域。

化学发光底物溶液作为一种独特的试剂,在生物医学研究中发挥着重要的作用。

其作用机制主要涉及酶的催化作用和化学发光反应。

酶是一类具有催化功能的生物大分子,能够促进化学反应的进行并降低反应活化能。

化学发光底物溶液通过与特定的酶相互作用,发生特定的底物-酶反应,从而产生化学发光。

这种化学发光信号可以被高灵敏度的光学设备捕获和记录,实现对生物样品中特定分子的检测。

化学发光底物溶液具有许多优点和应用前景。

首先,其发光过程不受样品自身的光干扰,故能够实现高灵敏度的检测。

其次,化学发光底物溶液具有很高的特异性,只能与特定酶发生催化反应,从而实现对特定分子的检测。

此外,化学发光底物溶液操作简便,不需要复杂的设备和昂贵的荧光探针。

因此,它被广泛应用于生物学研究、临床诊断和生物制药等领域。

综上所述,化学发光底物溶液作为一种重要的试剂,在生物医学研究中扮演着重要角色。

通过其独特的化学结构和作用机制,化学发光底物溶液能够实现对生物样品中特定分子的高灵敏度、高特异性的检测。

随着生物技术和生物医学研究的不断发展,化学发光底物溶液在生物分析和分子成像领域的应用前景将更加广阔和令人期待。

1.2 文章结构文章结构部分的内容应该包括对整篇文章的组织和框架进行介绍,以便读者可以清晰地了解文章的结构和内容安排。

可以通过以下方式来编写文章结构部分的内容:文章结构:本文将围绕化学发光底物溶液的作用展开,并按照以下几个部分进行讨论:引言部分将首先对本文的主题进行概述,简要介绍化学发光底物溶液的定义和特点,并提出文章的目的。

化学发光试剂的原理与应用

化学发光试剂的原理与应用

化学发光试剂的原理与应用1. 原理化学发光是指在化学反应过程中产生的光,在许多领域具有广泛的应用,如生物医学、环境监测和食品安全等。

化学发光试剂是实现化学发光的关键材料。

化学发光试剂的原理主要基于化学反应能够释放能量,并将能量转化为光的形式。

常见的化学发光原理包括化学发光酶法、化学发光氧化还原反应法和化学发光荧光染料法。

1.1 化学发光酶法化学发光酶法是利用酶与底物之间的反应,产生化学反应,导致发光的原理。

其中著名的酶有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶等。

这些酶能够在特定条件下催化底物发生反应,生成高能态的产物,再通过放光的过程,发出特定波长的光。

1.2 化学发光氧化还原反应法化学发光氧化还原反应法是利用氧化还原反应释放能量,并将能量转化为光的原理。

一般情况下,化学发光试剂中包含有一种氧化剂和一种还原剂。

当这两种试剂混合并与底物反应时,产生的中间产物进一步分解,释放出能量,从而产生化学发光的效应。

1.3 化学发光荧光染料法化学发光荧光染料法是通过激发荧光分子,使其转化为高能态,然后再通过受激发射的过程,发出特定波长的光。

化学发光荧光染料法广泛应用于生物医学领域中。

通过选择合适的荧光染料,可以实现对细胞、分子和基因等的研究。

2. 应用化学发光试剂在许多领域都有着广泛的应用,以下列举了几个常见的应用领域:2.1 医学诊断化学发光试剂在医学诊断中起到了关键的作用。

通过对患者样本中某种生物标志物与化学发光试剂的反应,可以实现对疾病的早期检测和诊断。

例如,在血液中检测心肌酶的水平,可以帮助判断是否患有心肌梗塞。

2.2 生物学研究化学发光试剂在生物学研究中有着广泛的应用。

它可以用于检测细胞活性、细胞增殖和细胞凋亡等。

通过标记化学发光试剂,可以实现对细胞内特定分子的定位和追踪,从而研究细胞的功能和代谢过程。

2.3 环境监测化学发光试剂在环境监测中扮演着重要的角色。

它可以用于检测空气、水和土壤中的污染物,如重金属、农药和有机物等。

化学发光免疫试剂盒赋值

化学发光免疫试剂盒赋值

化学发光免疫试剂盒赋值
(原创实用版)
目录
1.化学发光免疫试剂盒的概念和原理
2.化学发光免疫试剂盒的应用领域
3.化学发光免疫试剂盒的优点
4.化学发光免疫试剂盒的赋值方法
5.化学发光免疫试剂盒的未来发展趋势
正文
化学发光免疫试剂盒是一种应用化学发光技术进行免疫检测的试剂盒。

它的原理是利用抗原和抗体的特异性结合反应,通过化学发光物质的信号放大,检测出样品中特定抗原或抗体的存在。

这种试剂盒广泛应用于临床检验、疾病诊断、药物筛选等领域。

化学发光免疫试剂盒具有多种优点。

首先,它具有高灵敏度和高特异性,能够准确检测出样品中的目标物质。

其次,化学发光免疫试剂盒的操作简单,结果快速,适合大规模的临床检测。

最后,化学发光免疫试剂盒的稳定性好,能够在较长时间内保持检测结果的准确性。

化学发光免疫试剂盒的赋值方法主要包括两种:一种是基于标准曲线的赋值方法,另一种是基于参考物质的赋值方法。

基于标准曲线的赋值方法是通过制备一系列不同浓度的标准品,绘制标准曲线,然后根据样品的检测结果,推算出样品中目标物质的浓度。

基于参考物质的赋值方法是通过与已知浓度的参考物质进行比较,直接得出样品中目标物质的浓度。

随着科学技术的发展,化学发光免疫试剂盒在未来将会有更广泛的应用和更高的精度。

例如,它可以用于疾病的早期诊断,帮助医生制定更有效的治疗方案;也可以用于药物的筛选和评价,提高药物研发的效率和成
功率。

化学发光试剂鲁米诺

化学发光试剂鲁米诺

化学发光试剂鲁米诺简介:鲁米诺(Luminol),又名发光氨。

一种在犯罪现场检测肉眼无法观察到的血液,可以显现出极微量的血迹形态(潜血反应)。

化学名称为5-氨基-苯二甲酰肼。

常温下是一种蓝色晶体或者苍黄色粉末,是一种比较稳定的人工合成的有机化合物。

化学式为C8H7N3O2。

同时,鲁米诺是一种强酸,对眼睛、皮肤、呼吸道有一定刺激作用。

由于血红蛋白含有铁,而铁能催化过氧化氢的分解,让过氧化氢变成水和单氧,单氧再氧化鲁米诺让它发光。

所以鲁米诺广泛应用于刑事侦查、生物工程、化学示踪等领域。

法医学上,鲁米诺反应可以鉴别经过擦洗,时间很久以前的血痕。

生物学上则使用鲁米诺来检测细胞中的铜、铁及氰化物的存在。

NHNHONH 2鲁米诺【英文名】3-Aminophthalhydrazide【中文名】鲁米诺/3-氨基苯二甲酰肼/发光氨【CAS#】521-31-3【分子量】177.16【分子式】C8H7N3O2【外观】浅黄色粉末【形状】浅蓝粉末【含量】≥98%(HPLC)【熔点】>300°C(lit.)【沸点】309.07°C(rough estimate)【存储条件】室温,避光防潮【类别】有毒物品【毒性分级】中毒【储运特性】库房通风低温干燥【灭火剂】干粉、泡沫、砂土、二氧化碳,雾状水【化学性质】易溶于碱液,能溶于稀酸,几乎不溶于水,难溶于醇。

中性或淡酸性溶液暴露在紫外光中时显强烈的亮蓝色荧光。

【用途】化学发光试剂,常用于化学发光免疫分析,如金属阳离子和血液检测。

作化学分析试剂、指示剂。

化学发光分析检测试剂(如测定金属阳离子或血)。

用于化学发光分析,如:金属阳离子、血液及糖皮质激素。

发光测试:化学发光试剂及指示剂,常用于化学发光分析,如金属阳离子、血液免疫等等。

【发光率检测】最适荧光波长为425nm(在60mMK2S2O8,100mK2CO3,PH11.5溶液中检测化学发光率)。

理论即使犯罪现场的血迹已经被擦过或清除过,法医依旧可以使用鲁米诺找到它们的位置。

化学发光技术在食品安全检测中的应用研究

化学发光技术在食品安全检测中的应用研究

化学发光技术在食品安全检测中的应用研究随着人们对食品安全问题的日益关注,食品安全检测成为保障公众健康的重要任务。

化学发光技术作为一种高灵敏度、高选择性的分析技术,被广泛应用于食品安全检测领域。

本文将探讨化学发光技术在食品安全检测中的应用及其研究进展。

首先,我们来了解一下化学发光技术的原理。

化学发光是指通过化学反应发生的光谱辐射现象。

它是由于反应物或介质激发态分子返回基态而发出的光辐射。

化学发光技术通过观察并测量产生的发光信号,可以从分子水平上检测食品中的有害物质或者微量物质。

在食品安全检测中,化学发光技术可用于检测多种有害物质,如农药残留、食品中的微生物、食品添加剂以及重金属等。

首先,我们来看农药残留检测。

农药残留是造成食品安全问题的重要原因之一。

传统的农药残留检测方法常常需要复杂的样品处理和昂贵的仪器设备,并且耗时较长。

而采用化学发光技术可以实现对农药残留的快速检测,其灵敏度高、操作简单、准确性好。

通过将食品样品与特定的发光试剂反应,可以产生特定的发光信号,进而实现农药残留的快速检测。

其次,化学发光技术在食品中的微生物检测中具有广泛的应用。

微生物污染是导致食品中细菌、真菌和病毒等微生物异常超过食品安全标准的主要原因之一。

传统的微生物检测方法通常需要培养和生物学测试,耗时且易受外界环境的影响。

与传统方法相比,化学发光技术能够在短时间内获得快速、准确的微生物检测结果,而且不需要复杂的样品准备过程。

这使得化学发光技术成为一种极具潜力的微生物检测方法。

通过将微生物样品与发光试剂反应,可产生不同强度的发光信号,根据不同的信号强度可以判断样品中微生物的数量以及是否符合安全标准。

此外,在食品添加剂和重金属检测等方面,化学发光技术也展现出巨大的潜力。

食品添加剂是为了改善食品品质、保持食品保质期、增加色彩或风味而被添加到食品中的物质。

然而,过量或者不合格的食品添加剂会对人体健康造成潜在威胁。

传统的食品添加剂检测方法需要复杂的样品处理过程,并且常常需要昂贵的仪器设备。

化学发光法原理及应用

化学发光法原理及应用

化学发光
2、酶促化学发光免疫分析
酶促化学发光免疫分析(chemiluminescentenzymeimmunoassay,CLELA)是以酶标 记抗原或抗体进行免疫反应,免疫反应复合物上的酶再作用于发光底物,在信号试剂作 用下发光,用发光信号测定仪进行发光测定,酶的浓度决定了化学发光的强度。辣根过 氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(ALP)为化学发光酶免疫分析常用的标记酶,发光底物以 鲁米诺、AMPPD(1,2-二氧环乙烷衍生物,一种碱性磷酸酶底物)为代表。
发光反应室
光检测器
信号放大器
显示与记录
目录
CONTENTS
1
化学发光原理
2 化学发光在免疫分析上的应用
3
化学发光-分子印迹技术
4
优缺点分析
化学发光
化学发光免疫分析
1977年,Halman等将化学发光与抗原抗体免疫反应相结合,创建了化学发光免疫分析 方法(chemiluminescent immunoassay,CLIA),相较于传统免疫技术(放射免疫技术、 酶免疫技术、荧光免疫技术等),CLIA具有自动化程度高、特异性好、精确度高、检测 范围广等优势。
化学发光 化学发光免疫分析的分类
根据标记物的不同 ➢ 直接化学发光免疫分析
CLIA可分为三大类: ➢ 酶促化学发光免疫分析
➢ 电化学发光免疫分析
化学发光
1、直接化学发光免疫分析
化学发光剂直接标记抗体或抗原的免疫测定方法称为化学发光免疫分析。
直接化学发光剂在发光免疫分析过程中不需要酶的催化作用,直接参与发 光反应,他们在化学结构上有产生发光的特有基团,可直接标记抗原或抗 体,目前常见的直接化学发光标记物主要有吖啶酯类化学发光剂。

化学发光及生物发光的原理及其应用

化学发光及生物发光的原理及其应用

化学发光及生物发光的原理及其应用点击次数:291 发表于:2008-08-24 01:39转载请注明来自丁香园来源:丁香园一、发光物质的类型(一)无机化合物化学发光分析1、金属离子分析痕量金属离子对化学发光反应具有很好的催化作用,因而化学发光测定金属离子得到广泛的应用( 见表1) 。

但是,由于不同金属离子催化氧化发光试剂时,发光光谱相同,致使金属离子催化化学发光反应的选择性较差。

为提高分析的选择性,可采用以下方法: (1)利用待测金属离子与干扰离子配合物稳定性不同进行选择性分析,如加入掩蔽剂EDTA 或水杨酸掩蔽干扰离子; (2) 优化实验条件以减少其它离子的干扰; (3) 稀释样品溶液; (4) 加入敏化剂。

但是,当样品中待测物相对于干扰物浓度很小时,上述方法也无济于事,只得进行前处理,常用的分离方法有色谱、溶剂萃取等。

色谱分离的高选择性与化学发光检测的高灵敏度相结合,是一种很有前途的联用技术。

关键是流动相的选择,流动相选择得好,不仅可以提高选择性,还可以进行多个离子的同时测定。

如用离子交换分离法同时测定Cr (à) 和Cr (? ) 。

溶剂萃取也是提高化学发光测定金属离子选择性的一个有效方法。

这种方法的主要问题是费时,因为进行化学发光检测前必须将无机物从有机溶剂中反萃取出来,或是将有机溶剂蒸发除去。

较好的方法是自动在线溶剂萃取选择性检测待测物。

2、其它无机化合物的分析化学发光反应中,过氧化氢是最常用的一种氧化剂,因此有关H 2 O 2 化学发光分析的报道较多( 见表2) ,涉及到鲁米诺、过氧草酸酯及光泽精等化学发光反应。

根据鲁米诺化学发光反应制成的H2O 2 光纤传感器与流动注射法联用,可检测10nmo l /L ~1 mmo /L 的H 2 O 2 ,用模拟酶代替辣根过氧化物酶催化鲁米诺发光,检测限可达5 . 5×10 -9 mo l /L 。

根据ClO - 对鲁米诺的氧化作用,可用于测定ClO - ,其它物质如Cl 2 的干扰,可用流动注射法消除。

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例如,在上述化学发光反应中,如果物质B保持恒定,而物质A变化 且为一级或假一及反应,则
I CL I CL (t )dt CL [dA(t ) / dt ]dt CLC A
此式表明化学发光强度与A的浓度成正比。
化学发光强度
时间

化学发光分析测定的物质对象可分为三类:第一类物质是化 学发光反应中的的反应物;第二类物质是化学发光反应中的催 化剂,增敏剂或抑制剂;第三类是偶合反应中反应物,催化剂, 增敏剂等。这三类物质还可以通过标记方式来测定人们感兴区 的其他物质。这就夸大了化学发光分析的应用范围。


过氧草酸盐(peroxalate)(酯)包括一大类物质,他们自身并不发 光,其化学发光均为敏化华学范广,化学发光反应是芳香草酸值得过氧 化氢氧化作用,芳香草酸盐和H2O2芳香草酸盐和H2O2反应形成高能量 的中间物。 与鲁米诺相比,过氧草酸盐化学反应的发光效率更高,可达到27%,且 在较宽的酸度范围内(PH4~10)都能发光。 过草酸发光体西可用于测定的物质有:(1)待测物质本身是荧光剂, 可作为能量接受体和发光体;(2)待测物质曹禺某一反应可产生H2O2等氧 化剂而间接被测定;(3)待测物质可被淹声称荧光物质。可见,过氧草 酸盐类化学发光法英的分析应用还赖于新荧光衍生剂的开发。

化学发光的特点



1。灵敏度高,如用荧光素酶和磷酸三腺苷(ATP) 的发光反应,可测定2*10-17mol/L的ATP,即可检 测一个细胞中的ATP含量。 2.分析方法简单快捷,不需要复杂的仪器,不需 要光源和色散装置,业没有光学分析方法中常见的 散射光和杂散光等引起的背景值。 化学发光分析法的测量仪器比较简单,主要包括样 品室、光检测器、放大器和信号输出装置。化学发 光反应在样品室中进行,反应发出的光直接照射在 检测器上,目前常用
化学发光试剂及其应用
化学发光试剂概述 化学发光分析的基本原理 化学发光试剂的主要类型 化学发光试剂的应用

化学发光试剂概述


发光被定义为处在激发态的分子或原子回到基态时所发射 的光。按照获得激发态能源的不同有各种类型的发光。在化学 发光(chemluminescence, CL)中,由化学反应产生能的原 子或分子由激发态回到基态时所产生的这一光辐射现象叫化学 发光。根据化学发光的强度测定物质含量的分析方法叫化学发 光分析。 1887年 Redziszewski首次报道了络吩碱(lophine,2,4,5三苯基咪痤)在碱性条件下与氧气反应发出黄金设色的光—— —人为的化学发光……
1.自身化学发光反应
化学发光反应,按反应机理可分成自身化学发光, 敏化化学发光,偶合反应化学发光,电致化学发 光反…… 是指被测物质为反应物直接参与化学反应, 利用自身化学反应释放的能量激发产物分子的光 辐射。可用反应式表示为: A+B → C*+D, C* → C+hv 这类化学发光反应最多和最普遍,多数有机物 分子在液相中的化学反应属于这一类型
LUM-F流动注射化学发光仪器
1.化学发光的基本条件

一个化学反应要产生化学发光现象, 必须满足以下条件:
第一是:该反应必须提供足够的激发能(对于蓝光发射需
300kj.mol-1,红光需150kj.mol-1),导致电子从基态跃迁至 激发态。 第二是:化学反应的能量至少能被一种物质所说接受并使之 生成激发态。 第三是:处于激发态的分子或原子必须具有一定的化学发光 量子效率时期能释放出光子,或能转移它的能量给另一个分 子使之处于激发态并使 发出光子
3.化学发光强度与反应物浓度的关系 化学发光反应所以能用于分析测定,是因为化学发光强度(ICL)与化学反应速度(dp/dt)相关 联,而一切影响反应速度的因素有多可以作为建立测定方法的依据。 化学发光反应一般可表示为: A+B → C*, C* → C+hv 该发光反应的化学发光强度取决于翻译的速度dp/dt和反应的化学发光量子效率( ΦCL ) ICL(T)= ΦCLdp/d 式中ΦCL可表示为:ΦCL=Φr+Φf,其中Φr为生成激发态产物的量子效率,Φf 为激发态产物分子的 发光量子效率,对于一定的化学发光反应, 为一定值;其反应速度可按质量作用定律表示出与反应体 系中物质浓度的关系。因此,通过测定化学发光强度就可以测定反应体系种某种物质的浓度,原则上 讲,对任何发光反应,只要反应是一级或假一及反应,都可以通过上式进行化学发光定量分析。化学 发光分析测定的物质对象可分为三类:第一类物质是化学发光反应中的的反应物;第二类物质是化学 发光反应中的催化剂,增敏剂或抑制剂;第三类是偶合反应中反应物,催化剂,增敏剂等。这三类物 质还可以通过标记方式来测定人们感兴区的其他物质。这就夸大了化学发光分析的应用范围。

2.敏化化学发光反应
是指某些化学反应中的由于激发态产物本身不 发光或反光十分微弱,但通过加入某种能谅接 受体(荧光剂)可导致发光。反应式为: A+B → C*+D, F+C* → F*+C, F* → F+hv C为能量给于体,F为能量接受体。
如 一氧化氮与臭氧的气相化学发光反应有较 高的化学发光效率,其反应机理为


鲁米诺(luminol)
O
异鲁米诺(isoluminol)
O
NH NH
NH NH H2N
NH2
O
O

鲁米诺的发光机理见下图,
O
NH NH NH2
O
NH NH NH2
OH
-N2 *
O O NH2
O
OOH
O
O
OH
O O NH2

+光
O

鲁米诺于H2O2的反应是一个自身化学发光反应。
2.过氧草酸类

化学发光试剂


1.鲁米诺(luminol),异鲁米(isoluminol)和 他们的衍生物
鲁米诺(3—氨基—邻苯甲酰肼,1),异鲁米诺(2) 及其衍生物(如氨基丁基乙基邻苯甲酰肼,ABENH,3) 在发光分析中被使用。 在二甲基亚砜中,鲁米诺的量子产率不超过5%, 在水溶液中是1%~1.5%。鲁米诺在碱性条件下能被许 多氧化剂(例如H2O2,O2,ClO-等)氧化而发出蓝色的 广,发光反应的量子产率介于0.01~0.05之间是一个研 究最早,最多,应用最广泛的发光试剂。


1.无机物的分析 2. 有机物及药物的分析 3.生物体内活性氧的化学发光研究 4.化学发光在核酸杂交分析中的应用



参考文献
[1] 分子探针与检测技术
[2] 化学发光剂处理论与应用 [3] 仪器分析 [4] 仪器分析原理 科学出版社 化学工业出版社 郑州大学出版社 科学出版社


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