神经解剖学课件：神经解剖学
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了HRP追踪技术，最初只是用于逆行追踪。
Fink-Hermer染色法：硝酸铀染色，现在使用最为广泛。
轴浆运输追踪法 变性神经束路追踪法
Axonal transport system:
Anterograde transport： • Slow transport system (0.1-0.4mm per day) • Fast anterograde transport (100-400mm per day) Retrograde transport： • Fast retrograde transport
追踪的基本方式
顺行标记
逆行标记 跨节标记
注射部位
注射部位
注射部位
轴浆运输追踪常用方法
1. HRP追踪法 2. 放射自显影神经束路追踪法 3. PHA-L顺行轴突追踪法 4. 生物素葡聚糖胺顺行轴突追踪法 5. 霍乱毒素B亚单位追踪法 6. 荧光素追踪法 7. 其他特殊荧光素追踪法 8. 病毒追踪法
束路追踪-----无髓神经纤维和细小的神经纤维不适用、 以及轴突终末的位置不能确定-----需要新的方法。
Glees-Bielschowsky染色法：可靠地染出变性的神经终末（AD病 人，神经纤维纠缠）；
Nauta染色法：高锰酸钾降低还原力并抑制正常纤维嗜银性， 从而显示变性纤维靠近终末部分的变性像；
缺点： 不能显示神经元全貌。
1884年，Karl Weigert发表了 Weigert染色法，用于髓鞘染色。
1890年，Vittario Marchi发表了 Marchi染色法，用于变性有髓神 经纤维的追踪。
束路追踪研究
Weigert染色：金属化合物媒染后苏木精染色，显示神 经组织特别是髓鞘，是显示髓鞘的优良方法。
LM: basophilic granules in perikaryon
EM: rough endoplasmic reticulum & free ribosomes
IHC DAB + Nissl counter Tyrosine Hydroxylase ，酪氨酸羟化酶
优点：
1. 对神经元胞体染色，是研究CNS灰质构筑的好方法； 2. 通过观察染质溶解，可以进行束路追踪；
HRP：辣根过氧化物酶（Horseradish peroxidase, HRP)，是由一
个分子的五色酶蛋白和一个分子的棕色铁卟啉辅基结合形成的 结合酶，分子量越40kDa，为同工酶的混合物，其中有A1，A2， A3，B，C，D，E七种，但仅B和C的逆行运输效果较好。
HRP追踪法的原理： Kristenson等(1971年)及LaVail等(1972年)创造
1887年，Ramon y. Cajal看到了 Golgi染色法和Weigert-Pal染色法的标本
1903年，Cajal将照相技术引入 神经组织的染色。
神经原纤维---Biblioteka Baidu显示轴突末梢与其他神经元胞 体之间的联系。
Neurofibril
Neurofilaments (NF) bundle together and form NF. When stained with silver, they are visible under the LM.
Brainbow
19世纪，神经解剖学逐渐成为一门独立的科学。 将化学染料技术引入神经组织染色：
Remank-------无髓神经纤维 Forel和Gudden---------切片机 Broca-----------大脑皮质语言区 Luys------------丘脑底核 等等科学家在此方面的贡献！
Golgi染色法 Cajal染色法 Nissl染色法 Weigert染色法和Marchi染色法 Glees-Bielschowsky染色法、Nauta染色
法和Fink-Heimer染色法
Camello Golgi 意大利人，1873年创建了硝酸银镀染神经元的
Golgi染色法。
染出的神经元较少，但可以看到完整的轮廓和突 起走向。在核团的内在组合，轴突和树突的走 向等方面，为最经典和有效的形态研究方法。
Marchi染色：可选择性的镀染变性髓鞘，广泛用于变性 有髓神经纤维束的追踪。但对无髓神经纤维及细小的有 髓神经纤维或薄髓纤维不适用。
Weigert staining
Marchi staining （osmium-based staining method)
This cross section of the lower medulla is stained with the Marchi method, which selectively stains degenerated myelinated tracts black.
神经元学说------神经元之间的联络是不连续的，而是接 触的，接触面上有颗粒状的黏合物质乃至特殊的传递物 质。
1892年，Franz Nissl创立了Nissl染色法，并 发现了Nissl体和Nissl变性等。
细胞构筑学---中枢神经的分区和分层
Campbell 、Brodmann 、Vogt等对大脑皮质的 分区，Rexed对脊髓灰质的分层
1906年和Cajal共同获得诺贝尔生理或医学奖
Hito Golgi-Cox OptimStain Kit
缺点：
不确定、不稳定、不易掌握； 难分辨轴突，只有约5%神经元被染色； 染色机制及哪些类型的神经元被染出等等尚不 清楚。
近年来
有人将单细胞内注射辣根过氧化物酶（HRP） 、 Biocytin或荧光素（如lucifer yellow）和病毒进行 逆行标记等方法称之为‘新Golgi染色法’
优点： 1. 可以清楚显示胞体和轴突 2. 可以追踪观察神经纤维的分布和投射状
况；
缺点： 无法显示树突全貌。
Cajal的著作 《人和脊椎动物的神经系统组织学》及《神经系统的变 性和再生》
Golgi倡导的‘网状学说’和Cajal代表的‘神经元学说’
网状学说-----神经元通过纤维束的联络形成整体的网， 借此对周围组织传入的信息起着‘积累’的作用
Fink-Hermer染色法：硝酸铀染色，现在使用最为广泛。
轴浆运输追踪法 变性神经束路追踪法
Axonal transport system:
Anterograde transport： • Slow transport system (0.1-0.4mm per day) • Fast anterograde transport (100-400mm per day) Retrograde transport： • Fast retrograde transport
追踪的基本方式
顺行标记
逆行标记 跨节标记
注射部位
注射部位
注射部位
轴浆运输追踪常用方法
1. HRP追踪法 2. 放射自显影神经束路追踪法 3. PHA-L顺行轴突追踪法 4. 生物素葡聚糖胺顺行轴突追踪法 5. 霍乱毒素B亚单位追踪法 6. 荧光素追踪法 7. 其他特殊荧光素追踪法 8. 病毒追踪法
束路追踪-----无髓神经纤维和细小的神经纤维不适用、 以及轴突终末的位置不能确定-----需要新的方法。
Glees-Bielschowsky染色法：可靠地染出变性的神经终末（AD病 人，神经纤维纠缠）；
Nauta染色法：高锰酸钾降低还原力并抑制正常纤维嗜银性， 从而显示变性纤维靠近终末部分的变性像；
缺点： 不能显示神经元全貌。
1884年，Karl Weigert发表了 Weigert染色法，用于髓鞘染色。
1890年，Vittario Marchi发表了 Marchi染色法，用于变性有髓神 经纤维的追踪。
束路追踪研究
Weigert染色：金属化合物媒染后苏木精染色，显示神 经组织特别是髓鞘，是显示髓鞘的优良方法。
LM: basophilic granules in perikaryon
EM: rough endoplasmic reticulum & free ribosomes
IHC DAB + Nissl counter Tyrosine Hydroxylase ，酪氨酸羟化酶
优点：
1. 对神经元胞体染色，是研究CNS灰质构筑的好方法； 2. 通过观察染质溶解，可以进行束路追踪；
HRP：辣根过氧化物酶（Horseradish peroxidase, HRP)，是由一
个分子的五色酶蛋白和一个分子的棕色铁卟啉辅基结合形成的 结合酶，分子量越40kDa，为同工酶的混合物，其中有A1，A2， A3，B，C，D，E七种，但仅B和C的逆行运输效果较好。
HRP追踪法的原理： Kristenson等(1971年)及LaVail等(1972年)创造
1887年，Ramon y. Cajal看到了 Golgi染色法和Weigert-Pal染色法的标本
1903年，Cajal将照相技术引入 神经组织的染色。
神经原纤维---Biblioteka Baidu显示轴突末梢与其他神经元胞 体之间的联系。
Neurofibril
Neurofilaments (NF) bundle together and form NF. When stained with silver, they are visible under the LM.
Brainbow
19世纪，神经解剖学逐渐成为一门独立的科学。 将化学染料技术引入神经组织染色：
Remank-------无髓神经纤维 Forel和Gudden---------切片机 Broca-----------大脑皮质语言区 Luys------------丘脑底核 等等科学家在此方面的贡献！
Golgi染色法 Cajal染色法 Nissl染色法 Weigert染色法和Marchi染色法 Glees-Bielschowsky染色法、Nauta染色
法和Fink-Heimer染色法
Camello Golgi 意大利人，1873年创建了硝酸银镀染神经元的
Golgi染色法。
染出的神经元较少，但可以看到完整的轮廓和突 起走向。在核团的内在组合，轴突和树突的走 向等方面，为最经典和有效的形态研究方法。
Marchi染色：可选择性的镀染变性髓鞘，广泛用于变性 有髓神经纤维束的追踪。但对无髓神经纤维及细小的有 髓神经纤维或薄髓纤维不适用。
Weigert staining
Marchi staining （osmium-based staining method)
This cross section of the lower medulla is stained with the Marchi method, which selectively stains degenerated myelinated tracts black.
神经元学说------神经元之间的联络是不连续的，而是接 触的，接触面上有颗粒状的黏合物质乃至特殊的传递物 质。
1892年，Franz Nissl创立了Nissl染色法，并 发现了Nissl体和Nissl变性等。
细胞构筑学---中枢神经的分区和分层
Campbell 、Brodmann 、Vogt等对大脑皮质的 分区，Rexed对脊髓灰质的分层
1906年和Cajal共同获得诺贝尔生理或医学奖
Hito Golgi-Cox OptimStain Kit
缺点：
不确定、不稳定、不易掌握； 难分辨轴突，只有约5%神经元被染色； 染色机制及哪些类型的神经元被染出等等尚不 清楚。
近年来
有人将单细胞内注射辣根过氧化物酶（HRP） 、 Biocytin或荧光素（如lucifer yellow）和病毒进行 逆行标记等方法称之为‘新Golgi染色法’
优点： 1. 可以清楚显示胞体和轴突 2. 可以追踪观察神经纤维的分布和投射状
况；
缺点： 无法显示树突全貌。
Cajal的著作 《人和脊椎动物的神经系统组织学》及《神经系统的变 性和再生》
Golgi倡导的‘网状学说’和Cajal代表的‘神经元学说’
网状学说-----神经元通过纤维束的联络形成整体的网， 借此对周围组织传入的信息起着‘积累’的作用