3-磷酸甘油醛脱氢酶 ,GAPDH
3磷酸甘油醛脱氢酶负协同效应
3磷酸甘油醛脱氢酶负协同效应1. 介绍3磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）是一种广泛存在于生物体中的酶，参与细胞内糖酵解途径中的关键步骤。
磷酸甘油醛脱氢酶催化的反应是糖酵解过程中产生ATP的关键步骤之一。
然而，近年来的研究发现，GAPDH在细胞内还具有许多其他功能，其中之一就是负协同效应。
负协同效应是指某一物质在存在其他物质的情况下，其活性或功能受到抑制或降低的现象。
在GAPDH中，负协同效应主要指的是当细胞内存在某些调控因子时，GAPDH的酶活性会受到抑制或降低。
这些调控因子可以是其他酶、蛋白质、小分子化合物等。
2. 负协同效应的机制目前，关于GAPDH负协同效应的机制还存在一定的争议，但已经有一些研究取得了重要的进展。
以下是一些目前已知的GAPDH负协同效应的机制：2.1. 蛋白质相互作用GAPDH可以与许多其他蛋白质发生相互作用，这些相互作用可能导致GAPDH的酶活性受到抑制。
例如，研究发现，GAPDH可以与肿瘤抑制因子p53相互作用，并抑制其转录活性。
此外，GAPDH还可以与一些转录因子相互作用，影响其转录活性。
2.2. 磷酸化修饰磷酸化修饰是细胞内常见的一种调控机制，可以改变蛋白质的结构和功能。
研究表明，GAPDH的酶活性可以通过磷酸化修饰发生变化。
一些研究发现，当GAPDH被磷酸化时，其酶活性会受到抑制。
磷酸化修饰可以通过激酶的作用进行，也可以通过磷酸酶的作用进行逆反应。
2.3. 产物抑制在糖酵解过程中，GAPDH催化磷酸甘油醛与NAD+反应生成磷酸甘油酸和NADH。
研究发现，当NADH的浓度较高时，它可以与GAPDH结合形成复合物，从而抑制GAPDH的酶活性。
此外，其他代谢产物，如ATP、ADP等，也可以通过类似的机制抑制GAPDH的酶活性。
3. 生理意义GAPDH负协同效应在细胞内具有重要的生理意义。
首先，通过调控GAPDH的酶活性，细胞可以控制糖酵解过程的速率，以适应不同的代谢需求。
高羊茅甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因FaGAPDH的克隆与分析
域功 能分析表 明两基 因编码 的蛋 白质 都具有 典型 的 Ｒ ｓ ｎＮＡ ｏｓ — Ｄ连 接折 叠和 Ｃ ｍａ 一末 端结 构域 。ＦＧ ＤＨ１ ａ ＡＰ
和 Ｆ Ｇ Ｐ ２蛋 白与禾本科 植物 的该基 因蛋 白产 物 比较发现 氨基酸 序列 的 同源 性都在 ９ ％以上 ，说 明两基 ａ Ａ ＤＨ ０ 因具有 高度 的保 守性 。 关键 词 高羊茅 ， 一磷 酸甘 油醛脱 氢 酶基 因， 隆 ３ 克
Ｃｌ ｎ ｎ ｎ ａ ａ ｔｒｚ ｔｏ ｆ Ｇｌ ｃ ｒ ｌ ｅ ｙ ｅ—— ｈｏ ｐ ａｅ Ｄｅ ｙ ｒ ｇ － ｏ ｉ ｇ ａ ｄ Ｃｈ ｒ ｃ ｅ ｉａ ｉｎ ｏ ｙ ｅ ａ ｄ ｈ ｄ — — ｓ ｈ ｔ ｈ ｄ ｏ ｅ－ ３Ｐ ｎ ｓ ｎｅ Ｇ ａ ｅＧｅ Ｈ ｌ Ｆｅ ｃ ｅ ｉ Ｔａｌ ｓ ｕ ｎ
研 究报告
Ａ ｔｅ Ｌｅｔ ｒ
高羊茅 甘 油醛 一 一 酸脱 氢 酶基 因 Ｆ Ｇ Ｄ 的克 隆与 分析 ３磷 ａ ＡＰ Ｈ
王 小利 １ 刘 晓 霞 李 晚忱 ｚ 吴佳 海 杨 义 成 陈伟 王 舒颖 ， ２
１ 贵州省草业研 究所， 阳， ５ ０ ６ ２四川农业大学玉米研 究所， 贵 ５００； 雅安， ２ ０ １ ６ ５ ０
ｑ ｎ ｅｏ ｕｅ ｃ ｆＧＡＰＤＨ ｅ ｒ ｍ ｌｕ ｐｅ ｅ ｎ ，ｔ ｕｌ—ｅ ｇ ｈ ｃ ｇ ｎｅｆｏ Ｌｏ ｉ ｍ ｒ ｎ ｅ Ｌ． ｗｏ ｆ ｌｌ ｎ ｔ ＤＮＡｓ ｏ ｆＧＡＰＤＨ ｅ ｓｗｅ ｅ ｃ ｏ ｅ ｒ ｍ ａｌ ｇ ｎｅ ｒ ｌ ｎ ｄ ｆｏ ｔ ｌ ｆ ｓ ｕｅｂ ｅ ｃ ｙ ＲＴ－ ＰＣＲ ｏ ｃ ｍｂｉ ｄ ｗｉ ＇ ｎｅ ｔ ３ＲＡＣＥ ｎ ＲＡＣＥ． ｅｔ ｏ ｎ ｗｌ ｌ ｎ ｄ ＧＡ ＤＨ ｅ ｓｗｅ ｅｄｅ ｉ ａ ｅ ｓ ｈ ａ ｄ ５＇ Ｔｈ ｗ ｅ ｙｃｏ ｅ Ｐ ｇ ｎｅ ｒ ｓｇ ｔｄ ａ ｎ
3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)活性检测试剂盒说明书 微量法
3-磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）活性检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC2215规格：100T/96S产品内容：提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：粉剂×1瓶，-20℃保存。
试剂二：液体20mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体12uL×1支，4℃保存。
临用前加入0.4mL蒸馏水充分混匀，或根据比例现配现用；用不完的试剂4℃保存一周。
产品说明：GAPDH（EC1.2.1.12）催化3-磷酸甘油醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸，是糖酵解途径的关键酶，与糖异生途径、体内血糖浓度的维持和糖尿病的发生密切相关，在机体糖、脂、蛋白代谢紊乱疾病中发挥重要作用。
3-磷酸甘油酸激酶催化三磷酸甘油酸和ATP生成1,3二磷酸甘油酸。
GAPDH逆向催化1,3二磷酸甘油酸和NADH生成3磷酸甘油醛、无机磷和NAD+，340nm处测定NADH的减少量可反映GAPDH活性的高低。
试验中所需的仪器和试剂：紫外分光光度计/酶标仪、低温离心机、水浴锅、微量石英比色皿/96孔UV板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、粗酶液提取：组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆，然后，8000g，4℃，离心20min，取上清，置冰上待测。
细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
血清（浆）：直接检测。
二、测定步骤：1、分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长至340nm，分光光度计蒸馏水调零。
甘油醛3-磷酸脱氢酶
甘油醛3-磷酸脱氢酶甘油醛3-磷酸脱氢酶（GAPDH）是一种重要的蛋白质，它在生物体内起着重要的作用。
GAPDH存在于几乎所有生物种类，包括细菌、动物和植物。
它是一个由四个亚基组成的四聚体，每个亚基含有一个催化中心。
GAPDH可以在细胞内的糖酵解途径、Gluconeogenesis 途径和细胞凋亡中发挥重要的作用。
GAPDH在糖酵解途径中的作用是将葡萄糖转化为丙酮酸。
在这个过程中，GAPDH将葡萄糖分子氧化为葡萄糖6-磷酸酸，然后，葡萄糖6-磷酸酸进一步分解为丙酮酸和磷酸二羧酸，GAPDH就是催化葡萄糖6磷酸酸和磷酸二羧酸互相转化的关键酶。
这个过程同时释放了能量，产生ATP和NADH。
GAPDH还参与了细胞凋亡中的过程。
细胞凋亡是细胞程序性死亡的重要形式。
在细胞凋亡过程中，GAPDH通过与Siah1相互作用，促进了肿瘤坏死因子-α介导的细胞凋亡。
GAPDH与Siah1相互作用后，可以增强Cdk5激活的受体神经元1（NR1）的降解，从而加强细胞凋亡。
在Gluconeogenesis途径中，GAPDH的作用相当于磷酸甘油脱氢酶（G3PDH），它可以将丙酮酸还原为葡萄糖6磷酸酸，从而增加葡萄糖的储存量。
除此之外，GAPDH在细胞内通过与其他蛋白质的相互作用参与了很多其他的生物过程，例如运输、蛋白质合成等。
虽然GAPDH的作用十分重要，但是它也参与了一些其他非正常的生物过程中。
例如，当细胞受到压力时，会增加GAPDH的表达，这种过度表达会导致细胞的凋亡。
此外，GAPDH 还可以在疾病的发生发展中发挥作用。
例如，GAPDH的过度表达在癌细胞中广泛存在。
GAPDH还可以通过和其他蛋白质的相互作用参与神经性疾病的发生和发展。
综上所述，甘油醛3-磷酸脱氢酶（GAPDH）是一种常见的酶，参与了多种生物过程，包括糖酵解途径、Gluconeogenesis途径和细胞凋亡。
与此同时，GAPDH也参与了一些异常生物过程，包括癌症、神经性疾病等。
3-磷酸甘油醛脱氢酶(Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)试剂盒说明书
货号：MS2205 规格：100管/96样3-磷酸甘油醛脱氢酶(Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH)试剂盒说明书微量法正式测定前务必取 2-3个预期差异较大的样本做预测定测定意义GAPDH催化3-磷酸甘油醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸，是糖酵解途径的关键酶，与糖异生途径、体内血糖浓度的维持和糖尿病的发生密切相关，在机体糖、脂、蛋白代谢紊乱疾病中发挥重要作用。
测定原理3-磷酸甘油酸激酶催化三磷酸甘油酸和ATP生成1,3 二磷酸甘油酸。
GAPDH逆向催化 1,3二磷酸甘油酸和NADH生成3磷酸甘油醛、无机磷和NAD，340nm处测定NADH的减少量可反映GADPH 活性的高低。
需自备的仪器和用品分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制提取液：100mL×1 瓶，4℃保存；试剂一：粉剂×1 瓶，-20℃保存；试剂二：液体 20mL×1 瓶，4℃保存；试剂三：液体×1 支，4℃保存；样本的前处理1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。
8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
测定步骤1、分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。
2、样本测定（1）工作液的配制：将试剂二全部倒入试剂一瓶中，充分溶解，37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)预热10分钟；现配现用。
人甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)ELISA 试剂盒 使用说明书
人甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)ELISA试剂盒使用说明书产品编号：D711286包装规格：48 TESTS / 96 TESTS声明：使用前仔细阅读本说明书。
只能用于研究用途，不得用于医学诊断。
用途用于人血清、血浆或其他相关生物液体中甘油醛-3-磷酸脱氢酶的测定。
工作原理本试剂盒采用的是双抗夹心酶联免疫吸附检测技术（ELISA）。
测定样品中人甘油醛-3-磷酸脱氢酶水平。
向预先包被了抗人甘油醛-3-磷酸脱氢酶抗体的酶标孔中，加入标准品和样本，温育后，加入生物素标记的抗甘油醛-3-磷酸脱氢酶抗体。
再与HRP标记的链霉亲和素结合，形成免疫复合物，再经过温育和洗涤，去除未结合的酶，然后加入显色底物TMB，产生蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
最后，在450 nm处测定反应孔样品吸光度（OD）值，样本中的人甘油醛-3-磷酸脱氢酶浓度与OD值成正比，通过绘制标准曲线计算出样本中人甘油醛-3-磷酸脱氢酶的浓度。
1 / 262 / 26原理图：试剂盒组成说明书1份1份封板膜5片5片预包被酶标板8孔X 6条8孔X 12条-20°C 标准品1瓶2瓶-20°C 标准品/样本稀释液SD120 mL X 1瓶20 mL X 1瓶2-8°C 浓缩生物素标记甘油醛-3-磷酸脱氢酶抗体（100X ）60 μl120 μl-20°C生物素标记抗体稀释液SD214 mL X 1瓶14 mL X 1瓶2-8°C浓缩HRP 标记链霉亲和素（100X ）60 μl120 μl-20°C （避光）HRP标记链霉亲和素稀释液SD314 mL X 1瓶14 mL X 1瓶2-8°C显色剂10 mL X 1瓶10 mL X 1瓶2-8°C （避光）终止液10 mL X 1瓶10 mL X 1瓶2-8°C浓缩洗涤液（25×）30 mL X 1瓶30 mL X 1瓶2-8°C需要而未提供的试剂和器材1.37°C恒温箱2.酶标仪（450 nm波长滤光片）3.精密移液器及一次性吸头4.去离子水或蒸馏水5.一次性试管6.洗板机或洗瓶，吸水纸注意事项1.试剂盒应在有效期内使用，请不要使用过期的试剂。
银杏GAPDH基因序列的初步克隆
银杏GAPDH基因序列的初步克隆潘伟明;刘文;杨妙贤;刘胜洪;梁红【摘要】3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)是生物体内精酵解作用中的一个关键酶,由于其在细胞中表达量相对恒定而在植物研究中常被作为内源参照基因.在提取高质量银杏叶片总RNA的基础上,运用RT-PCR法对银杏GAPDH基因的部分序列进行了克隆.研究结果表明,使用SP提取法提取的银杏叶片组织总RNA质量高,28S RNA和18S RNA条带明亮清晰;用Oligo(dT)18为反转录引物,合成第一链,再利用GA PDH基因特异扩增引物进行PCR扩增,获得了银杏GA PDH基因的特异性cDNA片段,其长度大约为500 bp.GA PDH基因的成功克隆为半定量RT-PCR以及Real-time RT-PCR等技术在银杏分子生物学研究中的应用提供了内标参照物.【期刊名称】《广东农业科学》【年(卷),期】2010(037)008【总页数】3页(P196-198)【关键词】银杏;GAPDH基因;RT-PCR【作者】潘伟明;刘文;杨妙贤;刘胜洪;梁红【作者单位】仲恺农业工程学院科技处,广东,广州,510225;仲恺农业工程学院生命科学学院,广东,广州,510225;仲恺农业工程学院生命科学学院,广东,广州,510225;仲恺农业工程学院生命科学学院,广东,广州,510225;仲恺农业工程学院生命科学学院,广东,广州,510225【正文语种】中文【中图分类】S664.3;Q7813-磷酸甘油醛脱氢酶（Glyceral-dehyde-3-phosphate dehyrogenase，GAPDH）是生物体内糖酵解作用中的一个重要的酶，该酶在NAD+和无机磷酸(Pi)的参与下，催化甘油醛－3-磷酸氧化和磷酸化，生成1，3－二磷酸甘油酸，从而促使糖酵解过程第一个ATP的产生[1]。
由于其参与了细胞的基本代谢过程,GAPDH基因被认为是一个持家基因(house-keeping genes)[2]。
3磷酸甘油醛脱氢酶糖无氧氧化
3磷酸甘油醛脱氢酶糖无氧氧化（最新版）目录1.3-磷酸甘油醛脱氢酶简介2.糖无氧氧化过程3.3-磷酸甘油醛脱氢酶在糖无氧氧化中的作用4.3-磷酸甘油醛脱氢酶的应用5.结论正文3-磷酸甘油醛脱氢酶（Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，简称 GAPDH）是一种参与糖酵解途径的酶，主要作用是在细胞溶酶体内进行氧化还原反应。
糖无氧氧化是一种在无氧条件下将葡萄糖分解为乳酸或酒精和二氧化碳的过程，这一过程在生物体内有着重要的生理意义。
本文将从 3-磷酸甘油醛脱氢酶的角度，探讨糖无氧氧化的过程及其应用。
在糖无氧氧化过程中，葡萄糖首先被磷酸化为葡萄糖 -6-磷酸（G6P），然后转化为果糖 -6-磷酸（F6P），接着果糖 -1,6-双磷酸（F1,6BP）产生，这个过程需要消耗一个 ATP 分子。
随后，F1,6BP 裂解为两个三磷酸甘油醛（3-phosphoglyceraldehyde，3-PGAL），此时 3-磷酸甘油醛脱氢酶发挥作用，将一个 3-PGAL 转化为磷酸二羟基丙酮酸（DHAP），同时产生一个 ATP 分子。
然后，DHAP 通过一系列反应转化为丙酮酸，最后生成乳酸或酒精和二氧化碳。
3-磷酸甘油醛脱氢酶在糖无氧氧化过程中起到了关键作用，它将一个不稳定的化合物 3-PGAL 转化为稳定的 DHAP，同时产生一个 ATP 分子，为细胞提供了能量。
此外，3-磷酸甘油醛脱氢酶还有其他功能，例如参与氧化应激反应、调控细胞生长等。
3-磷酸甘油醛脱氢酶在生物体内有着广泛的应用。
首先，由于其在糖无氧氧化过程中的关键作用，3-磷酸甘油醛脱氢酶可以作为研究糖酵解途径的重要靶点。
其次，3-磷酸甘油醛脱氢酶的活性可以作为评估细胞状态的指标，例如在缺氧、氧化应激等条件下，3-磷酸甘油醛脱氢酶的活性会发生变化。
最后，3-磷酸甘油醛脱氢酶还可以应用于生物医学领域，例如在肿瘤诊断、评估治疗效果等方面有着潜在的应用价值。
基因表达的半定量PCR检测
基因表达的半定量PCR检测实验目的：以cDNA为模板，利用PCR技术制备目的基因甘油醛-3-磷酸脱氢酶（Glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase，GAPDH）的大量拷贝，以便进行目的基因的克隆；此实验还包括PCR引物设计，PCR产物的琼脂糖电泳检测等内容。
实验原理：真核细胞含有三类基本RNA：核糖体RNA（rRNA）、信使RNA（mRNA）、转移RNA（tRNA）。
其中mRNA传递合成蛋白质的全部遗传信息，是蛋白质生物合成的中间环节，具有特殊意义。
Trizol试剂可从细胞中快速提取细胞总RNA，将其中的mRNA逆转录成cDNA，以一对特异性引物对目的cDNA进行聚合酶链式反应扩增。
由于每个循环中合成的引物延伸产物可作为下一循环中的模板，因而每次循环中靶DNA的拷贝数呈几何级数增长，因此，30次PCR循环将产生约1亿倍（230）的扩增片段。
PCR技术又称聚合酶链反应（Polymerase Chain Reaction）技术，是一种在体外（试管）扩增核酸的技术。
该技术模拟体内天然DNA的复制过程。
其基本原理是在模板、引物、4种dNTP和耐热DNA聚合酶（Taq DNA polymerase）存在的条件下，特异扩增位于两段已知序列之间的DNA区段的酶促合成反应。
每一循环包括高温变性、低温退火、中温延伸三步反应。
每一循环的产物作为下一个循环的模板，如此循环30次，介于两个引物之间的新生DNA片段理论上达到230拷贝（约为109个分子）。
PCR技术的特异性取决于引物与模板结合的特异性（图3-1）。
PCR反应的基本步骤包括高温变性（denaturation）；低温退火（annealing）；中温延伸（extension）三步反应（图3-2）。
①变性（denaturation）（95℃）；②退火(annealing)；③延伸(elogation)（72℃）图3-1 PCR扩增DNA原理示意图图3-2PCR实验中各种组分的剂量：（1）dNTP常用浓度为20~200μM，不能低于10~15μM。
GAPDH
GAPDH一概述GAPDH或G3PDH是甘油醛-3-磷酸脱氢酶（ glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase ）的英文缩写。
该酶是糖酵解反应中的一个酶，由4个30－40kDa的亚基组成，分子量146kDa。
该酶基因为看家（house keeping）基因，几乎在所有组织中都高水平表达，在同种细胞或者组织中的蛋白质表达量一般是恒定的，且不受含有的部分识别位点、佛波脂等的诱导物质的影响而保持恒定，故被广泛用作抽提total RNA，poly(A)+ RNA，Western blot等实验操作的标准化的内参。
GAPDH结构图常用的内参有，ACTB（β-actin、β-肌动蛋白）、GAPDH或18S等。
目的是在于避免RNA定量误差、加样误差以及各PCR反应体系中扩增效率不均一、各孔间的温差等所造成的误差、这些都是看家基因，在各个组织中的表达量相对稳定，其中18S同整个基因谱有关（负责装配），它在总RNA中占的比例最高。
转染了GAPDH siRNA.jpg转染了GAPDH siRNA的Hela细胞转染了GAPDH相关siRNA的HeLa细胞在转染后48小时后不断增殖。
红：被标记的siRNA；蓝：被染色的细胞核；绿色：GAPDH蛋白；（这些siRNA 锐博生物均可提供）阴性对照（scrambled siRNA）的导入（左）对GAPDH蛋白的表达没有影响，不过若转入一个以GAPDH（右）为靶标的siRNA，则会导致GAPDH蛋白表达水平的急剧下降。
二GAPDF作为内参GAPDH（甘油醛-3-磷酸脱氢酶）是参与糖酵解的一种关键酶，由4个30-40kDa的亚基组成，分子量146kDa，检测条带大约在36kDa。
GAPDH基因几乎在所有组织中都高水平表达，广泛用作Western blot蛋白质标准化的内参。
因为GAPDH 作为看家基因在同种细胞或者组织中的蛋白质表达量一般是恒定的，因此在使用GAPDH内参抗体时，将每个样品测得的目的蛋白含量与本样品的GAPDH含量相除，得到每个样品目的蛋白的相对含量，然后才进行样品与样品之间的比较。
双歧途径的关键酶
双歧途径的关键酶
双歧途径是指双歧杆菌利用葡萄糖进行发酵的代谢途径，其中涉
及到多个酶的参与。
以下是双歧途径中的一些关键酶：
1. 6-磷酸果糖激酶（6-PFK）：这是双歧途径中的第一个酶，它将果糖-6-磷酸转化为 6-磷酸果糖-1,6-二磷酸。
2. 磷酸丙糖异构酶（TPI）：这是双歧途径中的第二个酶，它将 6-磷酸果糖-1,6-二磷酸转化为 3-磷酸甘油醛。
3. 3-磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）：这是双歧途径中的第三个酶，它将 3-磷酸甘油醛转化为 1,3-二磷酸甘油酸。
4. 磷酸甘油酸激酶（PGK）：这是双歧途径中的第四个酶，它将1,3-二磷酸甘油酸转化为 3-磷酸甘油酸。
5. 烯醇化酶（ENO）：这是双歧途径中的第五个酶，它将 2-磷酸
甘油酸转化为磷酸烯醇式丙酮酸。
6. 丙酮酸激酶（PK）：这是双歧途径中的最后一个酶，它将磷酸
烯醇式丙酮酸转化为丙酮酸。
这些酶在双歧途径中协同作用，将葡萄糖转化为丙酮酸和少量的乳酸、乙酸和乙醇等产物。
双歧途径的产物对于双歧杆菌的生长和代谢非常重要，同时也具有一定的保健作用。
糖酵解途径中3-磷酸甘油醛脱氢酶催化
糖酵解途径中3-磷酸甘油醛脱氢酶催化
糖酵解是一个非常重要的生化途径，它能够将葡萄糖等糖类分子转化为能量和有机物质。
该途径中的3-磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）是一个重要的催化酶，它能够催化3-磷酸甘油醛与NAD+之间的氧化还原反应，从而生成1,3-二磷酸甘油和NADH。
GAPDH是一个由四个亚基组成的四聚体，每个亚基都含有一个催化位点。
该酶的催化作用可以分为三个步骤：底物结合、催化反应和产物释放。
在底物结合步骤中，3-磷酸甘油醛首先与GAPDH的活性位点结合，形成一个中间复合物。
该步骤是一个不可逆过程，越高的底物浓度会增加复合物的形成速率。
在催化反应步骤中，3-磷酸甘油醛与亚基中的催化位点发生氧化还原反应，将3-磷酸甘油醛氧化为1,3-二磷酸甘油。
该反应需要一个还原剂，而NAD+正好是这个还原剂。
GAPDH将NAD+还原为NADH，同时将3-磷酸甘油醛氧化为1,3-二磷酸甘油。
这个步骤是一个可逆过程，但是反应向前的趋势非常强。
在产物释放步骤中，1,3-二磷酸甘油脱离催化位点，转化为GAPDH上的另一个位点。
同时，NADH也释放出来，但是它还会停留在GAPDH附近的NADH位点上。
3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)活性检测试剂盒说明书 紫外分光光度法
3-磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC2210规格：25T/24S50T/48S产品内容：提取液：30mL×1瓶，4℃保存；试剂一：粉剂×1瓶，-20℃保存；试剂二：液体25mL×1瓶，4℃保存；试剂三：液体15µL×1支，4℃保存；临用前加入0.5mL蒸馏水充分混匀，或根据比例现配现用；用不完的试剂4℃保存一周。
产品说明：GAPDH（EC1.2.1.12）催化3-磷酸甘油醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸，是糖酵解途径的关键酶，与糖异生途径、体内血糖浓度的维持和糖尿病的发生密切相关，在机体糖、脂、蛋白代谢紊乱疾病中发挥重要作用。
3-磷酸甘油酸激酶催化三磷酸甘油酸和ATP生成1,3二磷酸甘油酸。
GAPDH逆向催化1,3二磷酸甘油酸和NADH生成3-磷酸甘油醛、无机磷和NAD+，340nm处测定NADH的减少量可反映GAPDH活性的高低。
试验中所需的仪器和试剂：紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅、1mL石英比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、粗酶液提取：组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆，然后8000g，4℃，离心20min，取上清，置冰上待测。
细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
血清（浆）：直接检测。
二、测定步骤：1、分光光度计预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。
3-磷酸甘油醛脱氢酶
3-磷酸甘油醛脱氢酶3-磷酸甘油醛脱氢酶（Glycerol-3-phosphate Dehydrogenase，或GPDH）是一种醛脱氢酶，它负责将3-磷酸甘油（Glycerol-3-phosphate，或G3P）分解成甘油二酸（Dihydroxyacetone phosphate，或DHAP）和质子（H+）。
该酶加氢反应中，G3P通过增加两个氢原子而转化为DHAP，同时生成氢阴离子。
同时，反应也向前发展，以相应的速率。
GPDH属于拟烷酸类的酶，这类酶在体内发挥重要作用。
它能够从血液流经的每一毫米里产生1.4毫伏特的电势，这是保证肌肉正常运动和完成其他机械任务所必需的。
GPDH是血液中最有效的酶之一，也是合成氧化物，乳酸，乙酰基转移酶，2-羟基乙酰辅酶A -- 甘油3-磷酸反应的一部分 -- 等的中间体。
GPDH可以在人体的大多数组织中发现，尤其集中在肝脏、心脏、肾脏和肌肉组织中。
该酶的水平受抗炎因素的影响，可能因肝脏疾病、心脏病和Lipopolysaccharide诱导性炎症而降低。
GPDH也可以用于诊断Lipopolysaccharide引起的炎症，可以将血液样本中的GPDH浓度用于监测其水平变化。
GPDH还可以作为调节血糖水平的中间体。
GPDH有助于血液中的葡萄糖水平，可以通过提高血液中 DHAP 和减少 G3P 的水平来调节含量。
此外，与G3P和DHAP的磷酸基可以通过GPDH分解成二磷酸，从而调节体内的磷酸盐水平。
总之，3-磷酸甘油醛脱氢酶是一种重要的调节醛解反应的醛脱氢酶。
它能够调节血液中的葡萄糖含量，以及体内的磷酸含量。
此外，它还可以用于诊断Lipopolysaccharide诱导性炎症，以及控制肌肉运动。
甘油醛-3-磷酸脱氢酶与辅酶nad的结合
甘油醛-3-磷酸脱氢酶与辅酶nad的结合
甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）是一种重要的酶，参与糖酵解途径中的第六步反应，将甘油醛-3-磷酸（G3P）氧化成1,3-二磷酸甘油（1,3-BPG）。
而辅酶NAD+则是GAPDH反应中的一个重要辅助因子，它能够接受GAPDH反应中产生的氢离子和电子，形成还原的辅酶NADH，同时也促进了GAPDH反应的进行。
GAPDH与辅酶NAD+的结合是一个关键的过程。
研究表明，GAPDH与NAD+的结合是通过GAPDH上的NAD+结合位点实现的。
在这个结合位点中，GAPDH 上的一些氨基酸残基与NAD+上的一些化学基团之间会发生氢键、离子键、范德华力等相互作用，从而实现GAPDH与NAD+的结合。
具体来说，GAPDH上的NAD+结合位点主要由四个氨基酸残基组成，它们分别是Cys149、His176、Cys177和Ser178。
这些氨基酸残基能够与NAD+上的各种化学基团发生相互作用，从而实现GAPDH与NAD+的结合。
例如，Cys149和Cys177能够与NAD+上的各种氧原子形成氢键和离子键，而His176和Ser178则能够与NAD+上的各种氮原子形成氢键和范德华力。
总之，GAPDH与辅酶NAD+的结合是通过GAPDH上的NAD+结合位点实现的。
这个结合过程是一个复杂的化学反应，涉及到多种相互作用，但是它是GAPDH反应中必不可少的一步，能够促进GAPDH反应的进行，从而维持生命
活动的正常进行。
3磷酸甘油醛脱氢酶负协同效应
1. 什么是3磷酸甘油醛脱氢酶负协同效应？3磷酸甘油醛脱氢酶负协同效应是指在脂肪酸合成途径中，参与脂肪酸生物合成的关键酶3磷酸甘油醛脱氢酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，简称GAPDH）在特定条件下表现出的负面合作效应。
负协同效应意味着当多个GAPDH分子同时参与反应时，其反应速率低于预期的总和速率。
2. GAPDH在脂肪酸生物合成中的作用GAPDH是脂肪酸生物合成途径中的一个重要酶。
它负责将糖代谢产物3磷酸甘油醛（G3P）氧化为3磷酸甘油酸（G3P）。
G3P是脂肪酸合成途径中的一个重要中间产物，可以进一步被其他酶催化为甘油三酯（三酰甘油），从而参与脂肪酸的合成过程。
3. GAPDH负协同效应的机制GAPDH负协同效应的具体机制还不完全清楚，但有几种可能的解释。
首先，GAPDH参与反应的底物G3P浓度可能是影响负协同效应的关键因素。
当G3P浓度较低时，GAPDH分子之间的竞争会增加，导致反应速率降低。
这是因为G3P是GAPDH的底物，较低的G3P浓度会减少在反应中的可用底物数量，从而限制了GAPDH分子的活性。
其次，GAPDH的调节也可能参与负协同效应的调节。
研究表明，GAPDH的底物G3P和辅因子NAD+的结合会增加该酶的催化活性，进而加速反应速率。
然而，当G3P浓度过高时，GAPDH可能会被抑制，导致反应速率下降，从而出现负协同效应。
最后，GAPDH的空间结构也可能对负协同效应产生影响。
GAPDH具有四聚体结构，其中每个单体都含有一个活性位点。
当多个GAPDH分子同时参与反应时，它们之间的相互作用可能导致其中一个或多个活性位点被阻塞，从而降低催化速率。
4. GAPDH负协同效应的生理意义GAPDH负协同效应的生理意义尚不清楚，但有几种可能的解释。
首先，负协同效应可能有助于调节脂肪酸合成速率。
脂肪酸是生物体的重要能量来源，但过量的脂肪酸合成可能导致脂肪堆积和相关代谢疾病。
GAPDH多功能
3磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）是糖酵解过程中的一个关键酶。
GADPH在同种细胞或组织中表达一般是恒定的，所以把它作为分析其他蛋白质结构和功能的标准或其他基因表达的内参照，很少引起人们的关注。
越来越多的研究发现，GAPDH不仅参与能量代谢，还有其他生理功能，特别与糖尿病关系密切。
笔者主要围绕GAPDH的基础研究及其与糖尿病的关系作一综述。
1GAPDH的结构与功能GAPDH几乎在所有组织都高水平表达，但在各组织中或不同亚细胞定位的蛋白高级结构略有差别[12]。
GAPDH一般是由4个相同亚基组成的四聚体，每个亚基均含有催化结构域和辅酶结合域。
GAPDH与辅酶烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（ NAD+）组成全酶才具有催化活性，活性中心半胱氨酸（Cys149）中的巯基对氧化还原剂极为敏感，可被过氧化物（H2O2）、超氧自由基等氧化失活；一些内源性小分子如α微管素亦可抑制其活性，而抗氧化剂、蛋白质二硫键还原酶均可使其恢复活性[34]。
GAPDH是经典的糖酵解酶，但还具有以下生理功能[511]：（1）膜融合：抑制GAPDH活性后能明显抑制有丝分裂后期的核膜组装，而再加入有活性的GAPDH后，核膜组装修复。
（2）囊泡运输：参与囊泡转运，且与其糖酵解功能无关。
（3）蛋白磷酸转移酶的分子伴侣：为转移抑制基因nm23H1的特异分子伴侣。
（4）DNA修复：GAPDH 的37KDa亚基与胎盘提取的尿嘧啶DNA糖基化酶（UDG）具有同样的DNA修复活性。
（5）其他功能：具有转录调节活性，调节RNA的核输出；介导微管的相互作用；转铁蛋白的活性等。
GAPDH同时也参与机体的某些病理生理过程[1214]：（1）介导神经元细胞凋亡：在去除神经生长因子和血清环境下孵育神经元分化细胞PC12，发现核内GAPDH蓄积，随后细胞凋亡；而阻止GAPDH在核内的蓄积后，PC12存活时间延长，染色质凝聚减少。
研究发现，GAPDH分子间二硫键的生成及随后的蛋白质寡聚化是阿尔海默病人（AD）及AD 转基因小鼠重要的病理生理基础。