实验九__微生物的生理生化反应(一)
【免费下载】 微生物生理生化反应实验报告
对全部高中资料试卷电气设备，在安装过程中以及安装结束后进行高中资料试卷调整试验；通电检查所有设备高中资料电试力卷保相护互装作置用调与试相技互术关，系电，力根通保据过护生管高产线中工敷资艺设料高技试中术卷资，配料不置试仅技卷可术要以是求解指，决机对吊组电顶在气层进设配行备置继进不电行规保空范护载高与中带资负料荷试下卷高问总中题体资，配料而置试且时卷可，调保需控障要试各在验类最；管大对路限设习度备题内进到来行位确调。保整在机使管组其路高在敷中正设资常过料工程试况中卷下，安与要全过加，度强并工看且作护尽下关可都于能可管地以路缩正高小常中故工资障作料高；试中对卷资于连料继接试电管卷保口破护处坏进理范行高围整中，核资或对料者定试对值卷某，弯些审扁异核度常与固高校定中对盒资图位料纸置试，.卷保编工护写况层复进防杂行腐设自跨备动接与处地装理线置，弯高尤曲中其半资要径料避标试免高卷错等调误，试高要方中求案资技，料术编试交写5、卷底重电保。要气护管设设装线备备置敷4高、调动设中电试作技资气高，术料课中并3中试、件资且包卷管中料拒含试路调试绝线验敷试卷动槽方设技作、案技术，管以术来架及避等系免多统不项启必方动要式方高，案中为；资解对料决整试高套卷中启突语动然文过停电程机气中。课高因件中此中资，管料电壁试力薄卷高、电中接气资口设料不备试严进卷等行保问调护题试装，工置合作调理并试利且技用进术管行，线过要敷关求设运电技行力术高保。中护线资装缆料置敷试做设卷到原技准则术确：指灵在导活分。。线对对盒于于处调差，试动当过保不程护同中装电高置压中高回资中路料资交试料叉卷试时技卷，术调应问试采题技用，术金作是属为指隔调发板试电进人机行员一隔，变开需压处要器理在组；事在同前发一掌生线握内槽图部内 纸故，资障强料时电、，回设需路备要须制进同造行时厂外切家部断出电习具源题高高电中中源资资，料料线试试缆卷卷敷试切设验除完报从毕告而，与采要相用进关高行技中检术资查资料和料试检，卷测并主处且要理了保。解护现装场置设。备高中资料试卷布置情况与有关高中资料试卷电气系统接线等情况，然后根据规范与规程规定，制定设备调试高中资料试卷方案。
微生物鉴定中常用的生理生化实验
4.硫化氢试验： 硫化氢试验是检测硫化氢的产生，也是用于肠道细菌检查常
用生化试验。 有些细菌能分解含硫的有机物如胱氨酸、半胱氨酸、甲硫氨
三、实验原理
1.蛋白质水解试验：
微生物 对大分子物质如淀粉不能直接利用，必须依靠产生的
胞外酶将大分子物质分解后，才能被微生物吸收利用。
胞外酶主要为水解酶，裂解大分子为较小化合物，使其能被
运输至细胞内。
如淀粉酶水解淀粉为小分子的糊精、双糖和单糖，这过程可
通过观察细菌菌落周围的物质变化来证实。
淀粉遇碘液会产生蓝色，在细菌水 解淀粉的区域，用碘液测定时不再 产生蓝色，表明细菌产生淀粉！
如果试管中淀粉水解了,无论是初步水解还是彻底水解,都会产生还原性糖 （麦芽糖和葡萄糖都是还原性糖）,还原性糖可以与斐林试剂反应,水浴加热后, 出现砖红色沉淀.
2.为什么大肠杆菌在甲基红反应中为阳性,而产气肠杆菌为阴性? 这个试验与伏—普试验最初底物和最终产物有何异同？
大肠杆菌和产气肠杆菌都属于肠道微生物,所有肠道微生物都能够利用葡萄糖作 为其能量来源,但是它们的代谢途径不同,因而所产生的产物不相同。
实验九 微生物鉴定中常用的生理生化实验
一、实验目的
1.证明不同微生物对各种有机大分子物质的水解能力不同，从而说 明不同微生物有着不同的酶系统。 2.掌握进行微生物大分子物质水解实验的原理和方法。 3.了解IMViC与硫化氢反应的原理及其在肠道细菌鉴定中的意义和 方法。
二、实验材料
1.菌种 枯草芽孢杆菌，大肠杆菌，金黄色葡萄球菌，铜绿假单胞菌，普通 变形杆菌，产气肠杆菌。 2.培养基 固体淀粉培养基，明胶培养基试管，尿素琼脂试管，醋酸铅培养基， 葡萄糖蛋白胨水培养基，柠檬酸盐斜面培养基。 3.溶液和试剂 革兰氏染色用卢戈氏碘液，甲基红指示剂。
微生物的生理生化反应1
二、基本原理
酸的产生可利用指示剂:溴甲酚紫 pH6.8呈紫色， pH5.2呈黄色 气体产生：德汉氏小管
产酸指示剂、倒置小管
三、器材
1.菌种：大肠杆菌，普通变形杆菌斜面各一 支。 2.培养基：葡萄糖发酵培养基试管和乳糖发 酵培养基试管各3支（内装有倒置的德汉氏 小管）。 3.仪器或其他用具：试管架，接种环等。
2．思考题 （1）解释在细菌培养中吲哚检测到的化学原理， 为什么在这个实验中用吲哚的存在作为色氨酸 酶活性的指示剂，而不用丙酮酸？ （2）为什么大肠杆菌是甲基红反应阳性，而产气 杆菌为阴性？这个试验与伏－普试验最初底物 与最终产物有何异同处？为什么会出现不同？
吲哚试验（ test） 吲哚试验（indol test） 甲基红试验（ test） 甲基红试验（methyl red test） V.P.反应 Voges反应（ test） V.P.反应（Voges-Prokauer test）
一、目的要求
了解试验原理及其在肠道菌鉴定中的意义和 方法。
二、基本原理
四、操作步骤
1.用记号笔在各试管外壁上分别标明发酵培 养基名称和所接种的细菌菌名。 2.取葡萄糖发酵培养基试管3支，分别接入大 肠杆菌，普通变形杆菌，第三支不接种，作 为对照。 另取乳糖发酵培养基试管3支，同样分别接入 大肠杆菌，普通变形杆菌，第三支不接种， 作为对照。
在接种后，轻缓摇动试管，使其均匀，防止 倒置的小管进入气泡。 3.将接种过和作为对照的6支试管均置37℃培 养24～48h。 4.观察各试管颜色变化及德汉氏小管中有无 气泡。
微生物的Байду номын сангаас理生化反应
在生活细胞中存在的化学反应称之为代谢。 在生活细胞中存在的化学反应称之为代谢。 各种微生物在代谢类型上表现出很大的差异。 各种微生物在代谢类型上表现出很大的差异。 微生物生理生化反应的多样性。 微生物生理生化反应的多样性。
细菌生理生化实验
细菌生理生化试验—小木虫微生物生理生化反应是指用化学反应来测定微生物的代谢产物，生理生化反应常用来鉴别一些在形态和其它方面不易区分的微生物。
因此微生物生理生化反应是微生物分类鉴定中的重要依据之一,微生物鉴定中常用的生理生化反应如下所示：(一) 糖、醇发酵试验原理：不同微生物分解利用糖类的能力有很大差异，或能利用或不能利用，能利用者，或产气或不产气。
可用指示剂及发酵管检验。
有些细菌分解某些糖（醇、苷）产酸（符号：+）、产气（符号：○），培养基由紫（蓝）变黄（指示剂溴甲酚紫或溴百里酚蓝由紫或蓝遇酸变黄的结果），并有气泡；有些产酸，仅培养基变黄；有些不分解糖类（符号：－），培养基仍为紫（蓝）色。
培养基配制：一般细菌常用休和李夫森二氏培养基：蛋白胨：2g ，K2HPO4 :0.2g ，NaCl:5g ，糖（醇、糖苷）：1% ，水洗琼脂：5～6g，蒸馏水：1000mL，PH:6.8～7.0，溴百里酚蓝：1%水溶液3mL(先用少量的95%乙醇溶解后，再加水配成1%水溶液)。
先调PH后再加指示剂。
芽孢杆菌培养基配制：(NH4)2HPO4:1g ，MgSO4:0.2g ，KCl:0.2g ，酵母膏：0.2g ，糖（醇、糖苷）：1%水洗琼脂：5～6g ，蒸馏水：1000mL ，溴甲酚紫：0.4%乙醇液2mL，PH:6.8～7.0。
先调PH后再加指示剂。
将以上培养基分装试管，培养基高度约为4～5cm ，115℃灭菌20min。
测定的糖（醇、糖苷）类可以包括：葡萄糖、蔗糖、甘露糖、乳糖（1.5%）、半乳糖（1.5%）、D-山梨醇、果糖、阿拉伯糖、麦芽糖、纤维二糖、木糖、水杨苷等。
注意：以上亦可用液体培养基。
接种和观察结果：用18～24h的幼龄菌种，用穿刺针接种于培养基中，适温培养1d，3d，5d后观察，颜色变黄为阳性，不变为阴性；有气泡产生为产气。
结果记录：产酸：+，产气：○，不产酸长气：-。
(二) 淀粉水解试验原理：某些细菌可以产生分解淀粉的酶，把淀粉水解为麦芽糖或葡萄糖。
细菌生理生化实验
细菌生理生化试验—小木虫微生物生理生化反应就是指用化学反应来测定微生物得代谢产物,生理生化反应常用来鉴别一些在形态与其它方面不易区分得微生物。
因此微生物生理生化反应就是微生物分类鉴定中得重要依据之一,微生物鉴定中常用得生理生化反应如下所示:(一)糖、醇发酵试验原理:不同微生物分解利用糖类得能力有很大差异,或能利用或不能利用,能利用者,或产气或不产气。
可用指示剂及发酵管检验、有些细菌分解某些糖(醇、苷)产酸(符号:＋)、产气(符号:○),培养基由紫(蓝)变黄(指示剂溴甲酚紫或溴百里酚蓝由紫或蓝遇酸变黄得结果),并有气泡;有些产酸,仅培养基变黄;有些不分解糖类(符号:－),培养基仍为紫(蓝)色、培养基配制:一般细菌常用休与李夫森二氏培养基:蛋白胨:2g,Ｋ2ＨPO4 :0.2ｇ,NaCl:5g,糖(醇、糖苷):1％,水洗琼脂:5～６g,蒸馏水:1０0０mL,PＨ:6、８～７.0,溴百里酚蓝:1％水溶液３mL(先用少量得9５％乙醇溶解后,再加水配成1％水溶液)。
先调PH后再加指示剂。
芽孢杆菌培养基配制:(NH４)2ＨＰO4:１g ,ＭｇＳO4:０.2g ,KCl:0。
２ｇ,酵母膏:０.２g ,糖(醇、糖苷):1％水洗琼脂:5～6g ,蒸馏水:100０mL ,溴甲酚紫:0、４％乙醇液2mL,ＰH:６、8~7。
0。
先调PH后再加指示剂。
将以上培养基分装试管,培养基高度约为４～5cｍ,115℃灭菌20min、测定得糖(醇、糖苷)类可以包括:葡萄糖、蔗糖、甘露糖、乳糖(１、5%)、半乳糖(１.５％)、D—山梨醇、果糖、阿拉伯糖、麦芽糖、纤维二糖、木糖、水杨苷等。
注意:以上亦可用液体培养基。
接种与观察结果:用18～２4h得幼龄菌种,用穿刺针接种于培养基中,适温培养1d,３d,5d后观察,颜色变黄为阳性,不变为阴性;有气泡产生为产气。
结果记录:产酸:+,产气:○,不产酸长气:- 。
(二)淀粉水解试验原理:某些细菌可以产生分解淀粉得酶,把淀粉水解为麦芽糖或葡萄糖。
微生物生理生化反应实验报告
微生物的生理生化反应一、实验目的1.掌握细菌鉴定中常用生理生化反应的测定方法。
2.了解细菌代谢类型的多样性。
3.了解细菌生长现象及代谢产物在鉴别中的意义。
4.学习接种技术。
二、实验原理在所有生活细胞中存在的全部生物化学反应称之为代谢，代谢过程主要是酶促反应过程，由于各种微生物具有不同的酶系统，所以他们能利用的底物不同，或虽利用相同的底物但产生的代谢产物却不同，因此可以利用各种生理生化反应来鉴别不同的细菌。
1.糖发酵试验：糖发酵试验是常用的鉴别微生物的生化反应,绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源和能源,但是它们在分解糖类物质的能力上有很大的差异.有些细菌能分解某种糖产生有机酸(如乳酸,醋酸,丙酸等)和气体(如氢气,甲烷,二氧化碳等);有些细菌只产酸不产气.例如大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸并产气。
产酸后再加入溴甲酚紫指示剂后会使溶液呈黄色，且杜氏小管中会收集到一部分气体。
若细菌不能使糖产酸产气，则最后溶液为指示剂的紫色，且杜氏小管中无气体。
2.甲基红试验（MR）：某些细菌在糖代谢过程中分解葡萄糖生成丙酮酸，后者进而被分解产生甲酸，乙酸和乳酸等多种有机酸，培养基就会变酸，使加入培养基中的甲基红指示剂由橙黄色转变为红色，即甲基红反应。
大肠杆菌为阳性，产气肠杆菌为阴性。
3.伏-普试验（VP）：某些细菌在糖代谢过程中分解葡萄糖生成非酸性或中性末端产物，某些细菌产生丙酮酸，再将丙酮酸缩合脱羧成乙酰甲基甲醇，在碱性条件下被氧化成二乙酰，二乙酰与胍基作用，生成红色化合物，为阳性。
4.靛基质（吲哚）试验：是用来检测吲哚的产生，在蛋白胨培养基中，若细菌能产生色氨酸酶，则可将蛋白胨中的色氨酸分解为丙酮酸和吲哚，吲哚与对二甲基苯甲醛反应生成玫瑰色的玫瑰吲哚。
但并非所有的微生物都具有分解色氨酸产生吲哚的能力，所以吲哚实验可以作为一个生物化学检测的指标。
大肠杆菌吲哚反应阳性，产气肠杆菌为阴性。
5.硫化氢实验：某些细菌分解含硫的氨基酸，产生硫化氢，硫酸铵亚铁等铁盐可与硫化氢反应生成不溶性硫化亚铁之黑色沉淀，为硫化氢实验阳性。
微生物的生理生化反应
微生物的生理生化反应摘要：了解细菌生理生化反应原理，掌握细菌鉴定中常见的生理生化反应方法;掌握淀粉水解试验、糖发酵、MR、VP的原理和方法；各种细菌所具有的酶系统不尽相同，对营养基质的分解能力也不一样，因而代谢产物存在差别。
以此用生理生化试验的方法检测细菌对各种基质的代谢作用及其代谢产物，从而鉴别细菌的种属，称之为细菌的生理生化反应。
关键词：淀粉水解试验、糖发酵试验、甲基红试验、伏普实验引言：不同种类的微生物有着不同的代谢类型，例如对一些物质的分解能力及分解代谢的产物的不同反映出他们不同的生理特征，这些特征可以用来对不同种类微生物进行鉴定和分类。
因此可以对微生物的不同生化反应进行试验，以此证明微生物生理特征的多样性，证明微生物分类鉴别的依据。
生理生化试验相比其他鉴别方法而言相对简便、快捷、经济实用，在一般的实验室中都可以进行，因此在微生物种类的初步鉴别中被广泛使用1.材料与方法1.1试验时间 2011年11月14日山东农业大学 9#楼522实验室进行1.2实验材料菌种：大肠杆菌、普通变形菌、枯草芽孢杆菌溶液或试剂：卢戈氏碘液、溴甲酚紫、甲基红、伏普、NaOH溶液、NaCI溶液、5%α-萘酚溶液培养基：固体淀粉培养基、蛋白胨水溶液培养基、糖发酵培养基试管、乳糖发酵培养基试管仪器：无菌平板、无菌试管、接种环、棉塞、试管架、酒精灯、火柴、PH试纸。
移液器、枪头、报纸、橡皮筋、记号笔、称量纸、玻璃棒、电子天平、电磁炉等1.3试验方法1.3.1淀粉水解试验（1）将固体培养基熔化后冷却至50℃左右，无菌操作成平板；（2）用记号笔在平板底部划成3部分；（3）将大肠杆菌、普通变形菌、枯草芽孢杆菌分别在不同的部分划线接种，在平板的反面分别在3部分写上菌名；（4）将平板倒置在37℃恒温箱中培养24h；（5）观察各种细菌的生长状况，打开平板盖子，滴入少量卢戈式碘液于平板中，轻轻旋转平板，使碘液均匀铺满整个平板。
1.3.2糖发酵试验（1）用记号笔在各试管外壁上分别标明发酵培养基的名称和所接种的细菌菌名；（2）取葡萄糖发酵培养基4支，分别接入大肠杆菌、普通变形菌，枯草芽孢杆菌,第4支不接种，作为对照。
实验八微生物的生理生化反应-实验九微生物的生理生化实验
严格把控质量关，让生产更加有保障 。2020 年10月 下午5时 0分20. 10.1917 :00October 19, 2020
作业标准记得牢，驾轻就熟除烦恼。2 020年1 0月19 日星期 一5时0 分51秒1 7:00:51 19 October 2020
好的事情马上就会到来，一切都是最 好的安 排。下 午5时0 分51秒 下午5时 0分17:00:5120月。1 7:00:51 17:00:5 117:00 10/19/2 020 5:00:51 PM
安全象只弓，不拉它就松，要想保安 全，常 把弓弦 绷。20. 10.1917 :00:511 7:00Oc t-2019- Oct-20
加强交通建设管理，确保工程建设质 量。17:00:5117 :00:511 7:00M onday , October 19, 2020
IMViC反应： 吲哚实验 甲基红实验 V.P.实验 柠檬酸盐实验 H2S实验
实验名称
培养基
大分 子水 解实
验
油脂水解 淀粉水解 明胶液化
油脂培养基 淀粉培养基 明胶培养基
糖发 葡萄糖发 葡萄糖发酵培养
酵实 酵
基
验 乳糖发酵 乳糖发酵培养基
吲哚实验 蛋白胨水培养基
甲基红实 葡萄糖蛋白胨水
一马当先，全员举绩，梅开二度，业 绩保底 。20.10. 1920.1 0.1917:0017:00 :5117:0 0:51Oc t-20
牢记安全之责，善谋安全之策，力务 安全之 实。202 0年10 月19日 星期一5 时0分5 1秒Mo nday , October 19, 2020
相信相信得力量。20.10.192020年10月 19日星 期一5 时0分51 秒20.1 0.19
细菌生理生化实验
将以上培养基分装试管,培养基高度约为4~5cm ,1１5℃灭菌20miｎ。
试剂:甲基红:0、1g,９5%乙醇:３00mL,蒸馏水:200mL。
试验方法：
挑取新得待试纯培养物少许,接种于通用培养基,培养于3６±１°C或30°C(以３0°C较好）３～5天,从第二天起,每日取培养液1ｍl,加甲基红指示剂１～2滴,阳性呈鲜红色，弱阳性呈淡红色，阴性为黄色。迄至发现阳性或至第5天仍为阳性、即可判定结果。
测定得糖(醇、糖苷)类可以包括:葡萄糖、蔗糖、甘露糖、乳糖(1、5％)、半乳糖(1、5%)、D-山梨醇、果糖、阿拉伯糖、麦芽糖、纤维二糖、木糖、水杨苷等。
注意：以上亦可用液体培养基。
接种与观察结果:
用1８～24h得幼龄菌种，用穿刺针接种于培养基中，适温培养1d,3ｄ,5d后观察,颜色变黄为阳性,不变为阴性;有气泡产生为产气。
挑取18~2４h待试菌培养物,以较大量穿刺接种于明胶高层约２/3深度。于2０～２2℃培养7~14天。明胶高层亦可培养于3６±1℃。每天观察结果,若因培养温度高而使明胶本身液化时应不加摇动、静置冰箱中待其凝固后、再观察其就是否被细菌液化,如确被液化，即为试验阳性。否则为阴性。
（七)尿酶(Urease)试验
结果记录:阳性:+,阴性：-。
（五）菌膜形成试验
有些菌在液体培养基中能形成菌膜，利用这一特征可进行不同细菌得区别。
培养基配制方法:蛋白胨:5g;氯化钠:5g；牛肉膏:１０g;蒸馏水：1000mL;pH :7、2。121℃灭菌15~3０ｍin。
实验九微生物的生理生化反应教案资料
四、实验内容
1.将大肠杆菌、产气杆菌、变形杆菌在对应培养基内接种
试验 菌名
大肠杆菌
IMViC 吲哚试 验
√
甲基 红
(M.R) 试验
√
伏普 （ VP ）试 验
√
柠檬酸 盐试验
√
产气杆菌 √
√
√
√糖发酵 Biblioteka 验√√√√
H2S 试验
√
变形杆菌
培养基 接种方式
蛋白胨 水 培养基
液体
葡萄糖蛋白胨水 培养基
液体 液体
• 糖发酵实验
细菌在分解糖或醇(如葡萄糖、乳糖、蔗糖、甘 露醇、甘油)的能力有很大的差异。有些细菌发 酵某种糖后产生各种有机酸(如乳酸、醋酸、甲 酸、琥珀酸)及各种气体(如氢、甲烷、二氧化 碳)。有的细菌只产酸不产气。酸的产生可利用 指示剂来指示。在配制培养基时可预先加入溴甲 酚紫(pH 5(黄)－pH7(紫))。当细菌发酵糖产酸 时，可使培养基由紫色变为黄色。气体的产生可 由糖发酵管中倒置的杜氏小管中有无气泡来证明。
MOTILITY TEST 1. Pseudomonas aeruginosa（铜绿假单胞菌）：Motile 2. Staphylococcus aureus：Non-motile 3. Bacillus subtilis：Motile
三、实验器材
• 1. 菌种：大肠杆菌、产气杆菌、 变形杆菌
• 2. 培养基：见表格
氏小管中有气泡。 ⑥H2S试验：直接观察，阳性有黑色沉淀。
结果观察
实验名称
培养基
菌种
现象
糖发 葡萄糖发 酵实 酵
验 乳糖发酵
吲哚实验
IMVi 甲基红实 C反 验 应 V.P实验
微生物鉴定的生理生化反应汇总
微生物鉴定的生理生化反应汇总第一篇：微生物鉴定的生理生化反应汇总微生物鉴定的生理生化反应各种细菌具有各自独特的酶系统，因而对底物的分解能力不同，其代谢产物也不同。
用生物化学方法测定这些代谢产物，可用来区别和鉴定细菌的种类。
利用生物化学方法来鉴别不同细菌，称为细菌的生物化学试验或称生化反应。
生物化学试验的方法很多，主要有以下几类。
一、碳水化合物的代谢试验 1．糖（醇、苷）类发酵试验（1）原理：不同种类细菌含有发酵不同糖（醇、苷）类的酶，因而对各种糖（醇、苷）类的代谢能力也有所不同，即使能分解某种糖（醇、苷）类，其代谢产物可因菌种而异。
检查细菌对培养基中所含糖（醇、苷）降解后产酸或产酸产气的能力，可用以鉴定细菌种类。
(2)方法：在基础培养基中（如酚红肉汤基础培养基pH7.4）加入0.5~1.0％（w/v）的特定糖（醇、苷）类。
所使用的糖（醇、苷）类有很多种，根据不同需要可选择单糖、多糖或低聚糖、多元醇和环醇等，见表6-4-1。
将待鉴定的纯培养细菌接种入试验培养基中，置35℃孵育箱内孵育数小时到两周（视方法及菌种而定）后，观察结果。
若用微量发酵管，或要求培养时间较长时，应注意保持其周围的湿度，以免培养基干燥。
(3)结果：能分解糖（醇、苷）产酸的细菌，培养基中的指示剂呈酸性反应（如酚红变为黄色），产气的细菌可在小倒管（Durham小管）中产生气泡，固体培养基则产生裂隙。
不分解糖则无变化。
(4)应用：糖（醇、苷）类发酵试验，是鉴定细菌的生化反应试验中最主要的试验，不同细菌可发酵不同的糖（醇、苷）类，如沙门菌可发酵葡萄糖，但不能发酵乳糖，大肠埃希菌则可发酵葡萄糖和乳糖。
即便是两种细菌均可发酵同一种糖类，其发酵结果也不尽相同，如志贺菌和大肠埃希菌均可发酵葡萄糖，但前者仅产酸，而后者则产酸、产气，故可利用此试验鉴别细菌。
表6-4-1 常用于细菌糖发酵试验的糖、醇类单糖四碳糖：赤藓糖 , 五碳糖：核糖核酮糖木糖阿拉伯糖, 六碳糖：葡萄糖果糖半乳糖甘露糖双糖蔗糖（葡萄糖＋果糖）乳糖（葡萄糖＋半乳糖）麦芽糖（两分子葡萄糖）三糖棉子糖（葡萄糖＋果糖＋半乳糖）多糖菊糖（多分子果糖）淀粉醇类侧金盏花醇卫茅醇甘露醇山梨醇非糖类肌醇2．葡萄糖代谢类型鉴别试验(1)原理：细菌在分解葡萄糖的过程中，必须有分子氧参加的，称为氧化型；能进行无氧降解的为发酵型；不分解葡萄糖的细菌为产碱型。
细菌的生理生化反应
（七）淀粉水解试验
原理 有些细菌可产生淀粉酶水解培养中的淀粉为糊精，或进一步水解为麦芽糖，淀粉水解后遇碘不再变蓝。 材料 菌种：大肠杆菌、枯草杆菌 培养基：淀粉培养基（固体） 步骤 1 培养皿标记 取装有淀粉培养基（固体）的培养皿一只，在培养皿两侧分别标记大肠杆菌、枯草杆菌。 2 接种培养 以无菌操作分别用接种环挑取少量菌苔到培养皿相应部位做十字接种，置37℃恒温箱中培养24～48h。
结果观察
取出以上试管，在培养液中加入乙醚1～2ml，经充分振荡使吲哚萃取至乙醚中，静置片刻后乙醚层浮于培养液的上面，此时沿管壁缓慢加入5～10滴吲哚试剂（加入吲哚试剂后切勿摇动试管，以防破坏乙醚层影响结果观察）。 如有吲哚存在，乙醚层呈现玫瑰红色，此为吲哚试验阳性反应，否则为阴性反应，阳性用“＋”、阴性用“－”表示。
糖发酵培养基（葡萄糖）--水培养液
1
糖发酵培养基（乳糖）--水培养液
2
葡萄糖蛋白胨水培养基--水培养液
3
蛋白胨水培养基---水培养液
4
柠檬酸盐培养（固体斜面）
5
H2S试验培养基（固体）
6
淀粉培养基
7
每组每种培养基装3只试管.作好标记(培养基名称,组别,接种微生物,日期).
8
淀粉培养基用三角瓶装好,灭菌后倒平板.
结果观察
（六）硫化氢试验
原理 有些细菌能分解含硫的有机物，如胱氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸等产生硫化氢，硫化氢一遇培养基中的铅盐或铁盐等，就形成黑色的硫化铅或硫化铁沉淀物。 材料 菌种：大肠杆菌、变形杆菌 培养基： H2S试验培养基（固体） 步骤 1 试管标记:取装有H2S试验固体培养基的试管2支，分别标记大肠杆菌、变形杆菌 。 2 接种培养:以无菌操作分别用接种针挑取少量菌苔到以上相应试管做穿刺接种，置37℃恒温箱中培养24～48h。
10微生物的生理生化反应
14
大分子分解基本原理
▪ 微生物对大分子的淀粉、蛋白质和脂肪不能直接利用，必须 靠产生的胞外酶将大分子物质分解才能被微生物吸收利用。
▪ 胞外酶主要为水解酶，通过加水裂解大的物质为较小的化合 物，使其能被运输至细胞内。这些作用过程可通过观察细菌 菌落周围的物质变化来证实：淀粉遇碘液会产生蓝色，但细 菌水解淀粉的区域就不产生蓝色，表明细菌产生淀粉酶。
10 g 5g 5g 3g 1000 ml
3
明胶水解试验
明胶培养基：
• 牛肉膏蛋白胨液orLB液 100 ml（70℃）
• 明胶
12～18g
• pH
7.2～7.4
• 在70 ℃水浴锅中将上述成分溶化，不断搅拌。
• 121 ℃灭菌30 min
4
明胶培养基
▪ LB液体培养基
配制量：8 ml×3×组数×120%
不（ 变 产不 形 气产 杆 ）酸 菌
大 肠
产（ 气产
杆 ）酸
菌
23
实验结果
葡萄糖发酵试验
乳糖发酵试验
对 变 大 不能倒置试剂 对 变 大
照形 肠
照形 肠
杆杆
杆杆
菌菌
菌菌
24
IMVIC的意义：
▪ I: 吲哚试验（indol test） ▪ M: 甲基红试验(methyl red test)（M.R.试验） ▪ V: V.P试验(Voges-Prokauer test)（伏－普） ▪ C: 柠檬酸试验(citrate test)（枸橼酸盐利用试验） ▪ i无实际意义，是为了好读加上去的