斐林试剂配制,标定以及还原糖测定
实验四斐林试剂法法测定还原糖含量
实验四斐林试剂法测定果品蔬菜中还原糖含量一、实验目的：掌握园艺产品中糖的测定方法。
二、实验原理利用糖的还原性，与斐林试剂（氧化剂）中的二价铜离子还原为一价铜，进行氧化还原反应，而进行测定。
非还原糖必须转化为还原糖，再进行测定。
斐林试剂中酒石酸钾钠铜是一种氧化剂，反应的终点可用次甲基蓝作指示剂，在碱性、沸腾环境下还原呈无色。
根据斐林试剂完全还原所需的还原糖量，计算出样品还原糖量。
三、试剂与材料1、斐林试剂甲：加水溶解并定容至1000ml；乙：346g酒石酸钾钠+100gNaOH加水溶解并定容至1000ml；2、1%次甲基蓝，1g次甲基蓝加水溶解并定容至100ml，棕色瓶保存；3、%标准葡萄糖，2g 105℃烘干到恒重的葡萄糖加水定容到1000ml；4、碱式滴定管；5、电炉，各种玻璃器皿。
四、操作方法1、斐林试剂标定取甲液5ml加入5ml乙液中，置于250ml三角瓶中，加入水10ml，从滴定管中加入%的标准葡萄糖若干毫升（约23ml）。
（量控制在后滴定时消耗葡萄糖在－。
电炉上加热至沸，并保持微沸2分钟，加2滴1%次甲基蓝溶液，趁沸以每两秒1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液，用%标准葡萄糖滴定至蓝色消失，有红棕色沉淀，溶液清亮为终点止。
记录耗用的葡萄糖量为V0，必须在1min内完成。
（注意：还原的次甲基蓝易被空气中的氧氧化，恢复成原来的蓝色，所以滴定过程中必须保持溶液成沸腾状态，并且避免滴定时间过长。
）2、样品滴定预备试验同上法取斐林试剂，加10ml样品液，摇匀于电炉上加热至沸，保持微沸2分钟，加2滴1%次甲基蓝，用%葡萄糖滴定至蓝色消失。
记录耗用的葡萄糖量为V1。
3、样品滴定同上法吸取斐林试剂加10ml样品液(预先稀释)，补加（V0-V1）ml水，并从滴定管中预先加入（V1-1）ml %葡萄糖，摇匀至电炉上加热至沸，保持2min微沸，加入2滴1%次甲基蓝，继续用葡萄糖滴定至蓝色消失。
记录消耗的标准葡萄糖体积为V毫升。
斐林试剂鉴定还原糖
斐林试剂鉴定还原糖概述还原糖是一类具有还原性的糖类物质，它们能够将还原剂还原成相应的醇。
斐林试剂是一种常用于鉴定还原糖的试剂，通过与还原糖发生化学反应，产生深红色沉淀来进行鉴定。
本文将介绍斐林试剂的制备方法以及鉴定还原糖的步骤。
斐林试剂的制备方法材料：•斐林试剂A：0.5%苯腈甲醇溶液•斐林试剂B：40%次氯酸钠溶液•斐林试剂C：20%三氯乙酸溶液•斐林试剂D：5%硫酸溶液步骤：1.取0.5克苯腈加入100毫升甲醇中，搅拌溶解得到斐林试剂A。
2.将40克次氯酸钠溶解在100毫升水中，得到斐林试剂B。
3.取20克三氯乙酸加入到100毫升水中，得到斐林试剂C。
4.取5克硫酸加入到100毫升水中，得到斐林试剂D。
5.将制备好的斐林试剂A、斐林试剂B、斐林试剂C、斐林试剂D按照1:1:1:1的体积比例混合，得到斐林试剂。
鉴定还原糖的步骤步骤1：制备样品溶液将待测的还原糖样品加入适量的蒸馏水中，充分溶解得到样品溶液。
步骤2：加入斐林试剂取一定量的样品溶液，加入适量的斐林试剂，充分混合。
步骤3：观察反应结果观察反应体系中是否出现深红色沉淀。
如果出现深红色沉淀，则说明样品中存在还原糖。
步骤4：对照实验同时进行对照实验，不加入还原糖样品，其他步骤与待测样品相同，用以确认实验结果的准确性。
注意事项1.使用斐林试剂时需注意安全，避免接触皮肤和眼睛，避免吸入其蒸气。
2.实验器材应干净无杂质，以免干扰实验结果。
3.实验过程需严格按照步骤操作，避免误差的发生。
结论斐林试剂是一种常用的鉴定还原糖的试剂，通过与还原糖发生化学反应，产生深红色沉淀来进行鉴定。
制备斐林试剂需将斐林试剂A、斐林试剂B、斐林试剂C、斐林试剂D按照1:1:1:1的体积比例混合。
通过对样品溶液加入斐林试剂并观察是否产生深红色沉淀，可以判断样品中是否存在还原糖。
实验过程中需注意安全，并且进行对照实验以确保结果的准确性。
还原糖的检验方法和具体步骤
还原糖的检验方法和具体步骤如下：
1. 检验方法：使用班氏试剂或斐林试剂检测还原糖。
首先观察试剂的颜色变化，然后加入待测样品，将试管放入水浴加热的烧杯中。
2. 具体步骤：
（1）在试管中加入2ml待测样品溶液。
（2）向试管中加入5滴班氏试剂或斐林试剂。
（3）将试管放入水浴加热的烧杯中，观察颜色变化。
如果试管中出现砖红色沉淀或蓝色沉淀，则说明待测样品中含有还原糖。
这是因为班氏试剂或斐林试剂主要用于检测还原性糖，如葡萄糖，而葡萄糖在加热条件下会与组织中的蛋白质生成砖红色沉淀。
此外，斐林试剂还可以与醛基反应生成蓝色沉淀。
需要注意的是，检测还原糖需要待测样品中的还原糖与试剂发生反应，因此需要确保待测样品溶液是新鲜的、未被污染的。
此外，检测过程中需要控制好温度、时间等条件，以确保实验结果的准确性。
还原糖的测定实验报告
1. 了解还原糖的性质和鉴定方法。
2. 掌握使用斐林试剂检测还原糖的原理和操作步骤。
3. 学习通过比色法计算还原糖的含量。
二、实验原理还原糖是指含有游离醛基或酮基的糖类，它们能够还原斐林试剂中的Cu²⁺离子为Cu⁺离子，生成砖红色的Cu₂O沉淀。
斐林试剂由斐林A液（含CuSO₄的碱性溶液）和斐林B液（含NaOH的碱性溶液）组成，两种试剂混合后，Cu²⁺离子与还原糖反应生成Cu₂O沉淀。
三、实验材料与试剂1. 试剂：- 斐林A液：称取硫酸铜（CuSO₄·5H₂O）0.1g，溶于100mL水中，加入5mL浓NaOH溶液。
- 斐林B液：称取NaOH 2g，溶于100mL水中。
- 标准葡萄糖溶液：准确称取葡萄糖1.0000g，溶于1000mL水中，配制成1mg/mL的标准溶液。
- 样品溶液：取一定量的待测样品，用蒸馏水溶解并定容至一定体积。
2. 仪器：- 烧杯- 试管- 滴定管- 移液管- 移液器- 恒温水浴锅- 移液管1. 准备标准溶液：准确移取1mL标准葡萄糖溶液，加入9mL蒸馏水，配制成0.1mg/mL的标准溶液。
2. 配制斐林试剂：将斐林A液和斐林B液等体积混合，立即使用。
3. 取一支试管，加入2mL样品溶液。
4. 加入2mL斐林试剂，混合均匀。
5. 将试管放入恒温水浴锅中，加热至沸腾，保持沸腾状态5分钟。
6. 取出试管，观察沉淀颜色。
7. 重复步骤3-6，制作标准曲线。
8. 根据标准曲线，计算样品溶液中还原糖的含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线的制作：以标准葡萄糖溶液浓度为横坐标，沉淀颜色深浅为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 样品溶液中还原糖含量的计算：根据样品溶液的浓度和沉淀颜色深浅，在标准曲线上找到对应的还原糖含量。
六、实验讨论1. 实验过程中，斐林试剂需现配现用，以免Cu²⁺离子被还原成Cu⁺离子，影响实验结果。
2. 样品溶液的浓度应控制在一定范围内，以免沉淀颜色过深，影响准确度。
斐林试剂配制,标定以及还原糖测定
斐林试剂配制，标定以及还原糖测定糊精溶液中还原糖含量测定(DE值测定)A斐林试剂(碱性酒石酸铜溶液)的制备1)斐林试剂甲液称取69.28g的硫酸铜(CSO.5HO)溶于水中并稀释至1000ml，静置48h，用滤纸过U42滤2)斐林实际乙液分别称取酒石酸钾钠346g和氢氧化钠100g，溶于水中并稀释至1000ml，静置48h，用滤纸过滤B斐林试剂标定精确称取已在105?下干燥至恒重的分析纯葡萄糖0.8g，用蒸馏水稀释，移入250ml容量瓶并稀释至刻度，摇匀。
用移液管分别吸取斐林试剂甲，乙液各5ml和蒸馏水20ml于150ml锥形瓶中(预备数份)，于电炉上煮沸，用上述葡萄糖溶液(置于25ml滴定管中)滴定至蓝色消失时，加入1%的亚甲基蓝指示剂两滴，继续用糖液滴定至蓝色刚好消失。
此操作在1min内完成。
再重复操作第二次标定过程，取两次葡萄糖溶液消耗体积的平均值(允许误差不大于0.1ml)，按下式计算斐林试剂常数(10ml斐林试剂相当于葡萄糖的质量)。
R=WG/V式中R——10ml斐林试剂相当于葡萄糖的质量，g;W——葡萄糖溶液消耗的体积，mlG——葡萄糖的质量，gV——葡萄糖定容体积，250mlC测定步骤称取糊精溶液(液化)15g，移入250ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度。
用移液管分别吸取斐林试剂甲，乙液各5ml和蒸馏水20ml于150ml锥形瓶中。
其余步骤同斐林试剂标定法，即以样品稀释液代替葡萄糖溶液滴定斐林试剂。
计算还原糖含量按下式计算还原糖(%)=100RV/WG式中R——10ml斐林试剂相当于葡萄糖的质量，g;W——葡萄糖溶液消耗的体积，ml;G——样品质量，g;V——葡萄糖定容体积，250ml。
实验四--斐林试剂法法测定还原糖含量(1)
实验四斐林试剂法测定果品蔬菜中还原糖含量一、实验目的：掌握园艺产品中糖的测定方法。
二、实验原理利用糖的还原性，与斐林试剂（氧化剂）中的二价铜离子还原为一价铜，进行氧化还原反应，而进行测定。
非还原糖必须转化为还原糖，再进行测定。
斐林试剂中酒石酸钾钠铜是一种氧化剂，反应的终点可用次甲基蓝作指示剂，在碱性、沸腾环境下还原呈无色。
根据斐林试剂完全还原所需的还原糖量，计算出样品还原糖量。
三、试剂与材料1、斐林试剂甲：69.3g CuSO4.5H2O加水溶解并定容至1000ml；乙：346g酒石酸钾钠+100gNaOH加水溶解并定容至1000ml；2、1%次甲基蓝，1g次甲基蓝加水溶解并定容至100ml，棕色瓶保存；3、0.2%标准葡萄糖，2g 105℃烘干到恒重的葡萄糖加水定容到1000ml；4、碱式滴定管；5、电炉，各种玻璃器皿。
四、操作方法1、斐林试剂标定取甲液5ml加入5ml乙液中，置于250ml三角瓶中，加入水10ml，从滴定管中加入0.2%的标准葡萄糖若干毫升（约23ml）。
（量控制在后滴定时消耗葡萄糖在0.5－1.0ml)。
电炉上加热至沸，并保持微沸2分钟，加2滴1%次甲基蓝溶液，趁沸以每两秒1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液，用0.2%标准葡萄糖滴定至蓝色消失，有红棕色沉淀，溶液清亮为终点止。
记录耗用的葡萄糖量为V0，必须在1min内完成。
（注意：还原的次甲基蓝易被空气中的氧氧化，恢复成原来的蓝色，所以滴定过程中必须保持溶液成沸腾状态，并且避免滴定时间过长。
）2、样品滴定预备试验同上法取斐林试剂，加10ml样品液，摇匀于电炉上加热至沸，保持微沸2分钟，加2滴1%次甲基蓝，用0.2%葡萄糖滴定至蓝色消失。
记录耗用的葡萄糖量为V1。
3、样品滴定同上法吸取斐林试剂加10ml样品液(预先稀释)，补加（V0-V1）ml水，并从滴定管中预先加入（V1-1）ml 0.2%葡萄糖，摇匀至电炉上加热至沸，保持2min微沸，加入2滴1%次甲基蓝，继续用葡萄糖滴定至蓝色消失。
还原糖测定
还原糖含量的测定（斐林试剂法）一、实验目的：学习用斐林试剂测还原糖的方法，二、实验原理：斐林试剂由甲、乙液组成，甲液为硫酸铜溶液，乙液为氢氧化钠与酒石酸钾钠溶液。
平时甲、乙溶液分开贮存，测定时才等体积混合，混合后，硫酸铜与氢氧化钠反应，生成氢氧化铜沉淀：2Na0H十CuS04——→Cu（OH）2↓十Na2SO4氢氧化铜因能与酒石酸钾钠反应形成络合物而使沉淀溶解。
酒石酸钾钠铜络合物中的二价铜是一个氧化剂，在氧化醛糖和酮糖（合称总还原糖）的同时，自身被还原成一价的红色氧化亚铜沉淀：反应终点用次甲基蓝来指示。
三、实验器材与试剂：电炉，滴定管等(1)斐林溶液甲液：称取30g结晶硫酸铜(CuS04·5H20)，0.1g次甲基蓝，定容于1000mL水中，如有不溶物须过滤。
乙液：称取100g酒石酸钾钠，108g NaOH，定容1000mL水中，若有沉淀过滤即可。
(2)0.1％标准葡萄糖液：精确称取于105℃烘至恒重的分析纯葡萄糖 1.000g，用水溶解后，定容至1000mL。
四、实验步骤1. 空白滴定准确吸取斐林甲、乙液各5mL，放入250mL锥形瓶中，加水约15mL，并从滴定管加入约20mL 0.1％标准葡萄糖溶液，严格控制不要摇晃三角瓶，将锥形瓶置电炉上加热煮沸，并准确沸腾30s，在沸腾状态下，以每两秒1滴的速度滴入0.1％标准葡萄糖溶液，至溶液刚由蓝色退去，生成砖红色沉淀为止。
后滴定操作应在1分钟内完成，整个煮沸时间应控制在3分钟之内。
记下总耗糖量V0。
2. 预滴定稀释：将样品除气后，进行适当稀释，以期用15~50mL（最好20~30mL）稀释液使滴定完成。
一般将发酵液稀释100倍（吸取1mL发酵液定容到100mL容量瓶）。
准确吸取斐林甲、乙液各5mL，放入250mL锥形瓶中，加水约15mL，吸取稀释样液1mL，放入锥形瓶中，并从滴定管加入约18mL 0.1％标准葡萄糖溶液，其他与空白滴定基本相同，最后在1分钟内滴定完成。
菲林试剂
斐林试剂法测定还原糖的含量
一、实验原理
还原糖可以将二价铜离子还原成为一价铜。
反应终点可以由次甲基蓝指示，根据一定量的菲林试剂完全还原所需的还原糖量，可以计算加入样品中还原糖的含量。
二、实验器材
①菲林试剂
甲液：称取15.0g硫酸铜（CuSO4·5H2O）,0.05克四甲基蓝，用水溶解并稀释到1000ml.
乙液：称取50.0g酒石酸钾钠，75g的氢氧化钠，4.0g的亚铁氰化钾，用水溶解并稀释到1000ml。
② 0.10%标准葡萄糖溶液：精密称取1.000g经95~105℃烘干的无水葡萄糖，用少量水溶解，移入1000ml容量瓶中，加入5ml盐酸，用水稀释到刻度，摇匀。
③滴定管、电炉、锥形瓶等。
三、实验步骤
1．样品溶液的配备
称取样品—mg，稀释后在100ml容量瓶定容。
2.菲林试剂的标定
准确吸取菲林甲乙液各5.00ml，置入150ml的锥形瓶，加水10ml，从滴定管中预先加入约10ml 0.1%的标准葡萄糖液，（用量控制在后滴定消耗0.10%标准葡萄糖1ml以内），摇匀，电炉上加热使其在2min内沸腾。
沸腾状态下以每2s/滴的速度滴入标准葡萄糖溶液，至蓝色刚好消失为终点，记录前后总共消耗的标准葡萄糖溶液的总体积Vo。
同法平行操作三份，取接近的两次体积的平均值。
3.预备实验
准确吸取菲林甲乙液各5.00ml，置入150ml的锥形瓶，加水10ml，加玻璃珠3粒。
电炉上加热使其在2min内沸腾，准备沸腾30s，趁沸以先快后慢的速度从滴定管中滴加样品液(需始终保持溶液的沸腾状态)待溶液蓝色变浅时，以每2s/滴的速度滴入样品，至蓝色刚好消失为终点，记录消耗溶液的体积V1。
《还原糖的测定方法国标》
《还原糖的测定方法_国标》还原糖的测定方法_国标一、范围本标准规定了用斐林试剂比色法测定试样中还原糖的含量。
本标准适用于所有食物样品中还原糖的测定。
二、原理还原糖与斐林试剂在加热条件下生成砖红色沉淀，通过与标准曲线对比，可以得出样品中还原糖的含量。
三、试剂和材料斐林试剂：甲液（称取14.3g硫酸铜（CuSO4·5H2O）和0.05g次甲基蓝（C13H16N3OClS）溶于水中，定容至100ml）、乙液（称取173g酒石酸钾钠（C4H4O6NaK·4H2O）和50g氢氧化钠溶于水中，定容至500ml）。
使用时将甲液、乙液等体积混合。
四、仪器和设备1.实验室用粉碎机2.水浴锅3.消煮炉或普通炉灶（能调节温度）4.容量瓶（100ml）5.移液管（10ml）6.比色管（10ml）7.试管（25ml）8.三角瓶（250ml）9.定时钟五、样品制备1.固体样品：取样品适量，用粉碎机粉碎，然后称取约0.2g样品置于试管中。
2.液体样品：直接取适量样品置于试管中。
3.在每个试管中加入4ml斐林试剂，充分混匀后静置10min。
4.将试管中的溶液倒入三角瓶中，加入约80ml水稀释，加热至沸后保持1min。
5.用移液管向每个试管中加入1ml样液，摇匀后置于试管架上。
6.在温度达到要求时将试管放入水浴中加热，同时开启计时器。
当时间达到要求时立即取出试管，用自来水冷却至室温。
7.将冷却后的溶液用移液管倒入比色管中，再加入约1ml的样液摇匀。
8.将比色管置于比色槽中，与标准曲线进行比色，得出样品的含量。
9.将整个测定过程中每个环节的时间、温度等条件记录下来，以便后续分析。
六、结果分析通过与标准曲线对比，可以得出样品中还原糖的含量。
计算公式为：含量=测定管吸光度÷校准管吸光度×标准品浓度。
其中吸光度需要在一定波长下测定。
同时需要注意实验过程中操作条件的控制，以保证结果的准确性。
如果操作条件不稳定或样品复杂性较高，需要进行适当调整或采取其他适合的方法进行测定。
实验报告还原糖测定(3篇)
第1篇一、实验目的1. 学习还原糖的检测原理和方法。
2. 掌握斐林试剂的使用方法。
3. 通过实验了解还原糖在食品、生物样品中的应用。
二、实验原理还原糖是指在水溶液中能将斐林试剂还原成砖红色沉淀的糖类物质。
斐林试剂是一种含有CuSO4和NaOH的混合溶液，在加热条件下，Cu2+被还原成Cu2O，形成砖红色沉淀。
还原糖与斐林试剂反应，生成砖红色沉淀的多少与还原糖的浓度成正比。
三、实验材料1. 试剂：斐林试剂、NaOH溶液、CuSO4溶液、葡萄糖标准溶液、蒸馏水。
2. 仪器：试管、试管架、酒精灯、恒温水浴锅、移液器、滴定管。
四、实验步骤1. 准备斐林试剂：将CuSO4溶液和NaOH溶液按1:9的比例混合，现配现用。
2. 配制葡萄糖标准溶液：准确称取1.0g葡萄糖，用蒸馏水溶解并定容至100ml，配制成10mg/ml的葡萄糖标准溶液。
3. 样品处理：准确称取待测样品0.1g，用蒸馏水溶解并定容至10ml，配制成0.01mg/ml的样品溶液。
4. 实验步骤：a. 取一支试管，加入1ml斐林试剂；b. 取另一支试管，加入1ml样品溶液；c. 将两支试管同时放入恒温水浴锅中，加热至沸腾，保持沸腾状态2分钟；d. 观察颜色变化，记录结果。
5. 结果处理：a. 将实验结果与葡萄糖标准溶液进行对照；b. 计算样品中还原糖的浓度。
五、实验结果与分析1. 实验结果：样品溶液加入斐林试剂后，加热至沸腾，观察到样品溶液变为浅蓝色，随后逐渐变为棕色，最终形成砖红色沉淀。
2. 结果分析：根据实验结果，样品溶液中加入斐林试剂后，发生了还原反应，生成了砖红色沉淀。
这说明样品中含有还原糖，且其浓度与斐林试剂反应生成的沉淀量成正比。
六、实验讨论1. 实验过程中，样品溶液加热至沸腾时，需保持沸腾状态2分钟，以确保还原糖与斐林试剂充分反应。
2. 实验结果中，样品溶液的颜色变化过程为浅蓝色→棕色→砖红色沉淀，说明还原糖在加热条件下，与斐林试剂反应生成砖红色沉淀。
斐林法测还原糖实验报告
一、实验目的1. 熟悉斐林试剂的配制方法。
2. 掌握斐林试剂检测还原糖的原理及操作步骤。
3. 学会使用斐林试剂测定食品中还原糖的含量。
二、实验原理还原糖是指具有还原性的糖类，如葡萄糖、果糖、乳糖等。
斐林试剂是一种用于检测还原糖的氧化剂，其原理是还原糖可以将斐林试剂中的二价铜离子还原为一价铜，生成砖红色的氧化亚铜沉淀。
根据氧化亚铜沉淀的颜色深浅，可以判断还原糖的含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：葡萄糖标准溶液、梨汁、斐林试剂、氢氧化钠、硫酸铜、酒石酸钾钠、蒸馏水等。
2. 实验仪器：电子天平、移液管、滴定管、试管、烧杯、水浴锅、酒精灯、比色皿等。
四、实验步骤1. 斐林试剂的配制（1）称取34.6g酒石酸钾钠，100g氢氧化钠，溶于500ml蒸馏水中，定容至1000ml，得到斐林试剂乙液。
（2）称取0.05g硫酸铜，溶于500ml蒸馏水中，加0.5ml硫酸，得到斐林试剂甲液。
2. 还原糖的测定（1）取10ml梨汁于试管中，加入5ml斐林试剂甲液和5ml斐林试剂乙液，混匀。
（2）将试管放入水浴锅中加热，观察颜色变化。
（3）记录溶液颜色变化过程，根据颜色变化判断还原糖的含量。
五、实验结果与分析1. 实验结果根据实验观察，梨汁溶液在加热过程中，由蓝色变为棕色，最后出现砖红色沉淀。
2. 结果分析梨汁中含有还原糖，如葡萄糖、果糖等。
在斐林试剂的作用下，还原糖将二价铜离子还原为一价铜，生成砖红色的氧化亚铜沉淀。
根据颜色变化，可以判断梨汁中还原糖的含量。
六、实验结论通过斐林法测定梨汁中的还原糖含量，结果表明梨汁中含有还原糖。
斐林法是一种简单、灵敏的检测还原糖的方法，适用于食品、药品等领域中还原糖含量的测定。
七、实验讨论1. 斐林试剂的配制过程中，注意准确称取试剂，避免误差。
2. 实验过程中，加热温度和时间要控制得当，以免影响实验结果。
3. 斐林试剂检测还原糖时，可根据溶液颜色变化，对比标准曲线，准确判断还原糖的含量。
斐林试剂鉴定还原糖步骤
斐林试剂鉴定还原糖步骤斐林试剂是一种常用于鉴定还原糖的试剂，它可以通过与还原糖反应产生蓝色沉淀来进行检测。
下面是斐林试剂鉴定还原糖的步骤：步骤一：制备斐林试剂将1.0克柠檬酸和0.5克重铬酸钠溶解于100毫升蒸馏水中，并加热至70°C左右溶解。
接下来，向溶液中加入2.5克铵铁硫酸，并继续加热溶解。
待溶液冷却后，用蒸馏水将溶液定容至200毫升，得到斐林试剂。
步骤二：样品制备称取约0.1克待测样品，并加入5毫升蒸馏水中，充分搅拌溶解后，以蒸馏水定容至10毫升，得到待测样品溶液。
步骤三：反应取两个试管，分别加入1毫升斐林试剂和1毫升蒸馏水作为对照组，将两者标记。
然后，将待测样品溶液分别加入两个试管中，充分搅拌混合。
步骤四：观察观察试管中的颜色变化。
如果试管中出现蓝色沉淀，则表示待测样品中有还原糖的存在。
对照组中未出现蓝色沉淀，用以验证待测样品中的结果。
步骤五：结果判定根据观察结果，若对照组中未出现蓝色沉淀，而待测样品中出现了蓝色沉淀，则可以判定该样品中含有还原糖。
斐林试剂的原理是基于还原糖与铁离子的氧化还原反应。
斐林试剂中的铁离子能够与还原糖产生氧化反应，将还原糖氧化成酸，同时自身还原成亚铁离子。
亚铁离子在酸性条件下与一些酸稳定的铁离子形成蓝色沉淀，从而实现对还原糖的鉴定。
需要注意的是，斐林试剂只能鉴定还原糖，不能检测非还原糖。
非还原糖是指不能在酸性条件下发生氧化反应的糖类，如蔗糖等。
因此，在进行还原糖的鉴定时，需要使用斐林试剂。
如果待测样品含有非还原糖，对照组中也可能会出现蓝色沉淀，此时需要进行其他试剂的鉴定，或者使用其他分析方法进行进一步验证。
总结：斐林试剂鉴定还原糖的步骤主要包括制备斐林试剂、样品制备、反应、观察和结果判定等。
通过观察待测样品溶液与对照组的颜色变化来判断样品中是否含有还原糖。
值得注意的是，斐林试剂只能鉴定还原糖，不能检测非还原糖。
还原糖测定
还原糖检测方法及步骤仪器：样品，研钵，剪刀，容量瓶，电阻炉，碱式滴点管，锥形瓶，烧杯，漏斗，棉花，玻璃珠，移液管，洗耳球药品：斐林试剂甲、乙液，盐酸，氢氧化钠，甲基红1.样品预处理：把样品放入研钵中压碎或用剪刀剪碎（注：手部接触的部分要丢弃）2.称取10-15ɡ左右样品于烧杯中，加水溶解，然后移至250ml容量瓶中定容，吸取10ml样品，加30ml水和5ml盐酸于250ml容量瓶中，放入68-70℃水浴锅加热10分钟。
3.中和：加2-3滴甲基红指示剂，用3mol/L氢氧化钠滴至红色褪去，定容，摇匀后开始滴定4.滴定：吸取5ml斐林试剂甲液和5ml斐林试剂乙液，再加10ml水和3颗玻璃珠于电炉上加热滴定。
4.1预测：趁沸由快到慢进行滴定，滴至颜色变淡，以每2秒一滴的速度滴至颜色刚好褪去为终点，读数。
4.2正测：加入比预测少1ml的样液至甲乙液中，加热沸腾1分钟后，以每2秒一滴的速度滴至颜色刚好褪去为终点，读数。
正测需做两次以上平行样，读取平均数。
4.3还原糖计算公式：2500*斐林试剂溶度/样液体积*质量溶液的配置与标定一斐林试剂甲乙液的配置与标定1.甲液的配置：分别用烧杯称取15ɡ硫酸铜和0.05ɡ亚甲基蓝，各自加水溶解后倒入1L容量瓶中，烧杯要用水润洗干净，定容后倒入试剂瓶中。
2.乙液的配置：分别用烧杯称取50ɡ酒石酸钾钠，75ɡ氢氧化钠及4ɡ亚铁氰化钾，各自加水溶解后倒入1L容量瓶中，烧杯要用水润洗干净，定容后倒入试剂瓶中。
3.标定3.1葡萄糖溶液的配置：先用称量瓶称取1ɡ左右葡萄糖干燥至恒重，再用烧杯称取0.2ɡ葡萄糖加水溶解后移至250ml容量瓶中，定容3.2甲乙液的标定：吸取5ml甲液5ml乙液于锥形瓶中,再加10ml水和3粒玻璃珠，置于电炉上加热，趁沸用葡萄糖溶液以每2秒一滴的速度滴至颜色刚好褪去为终点。
做三次以上平行样，读取平均数。
3.3计算公式：葡萄糖溶液体积*质量/25030%Na0H的配置：75g，250ml水0.1%甲基红：称0.1g的甲基红，溶于乙醇，用乙醇稀释至100ml。
还原糖测定(菲林法)
还原糖的测定(菲林试剂法)
一.基本原理
还原糖可以将菲林试剂中的二价铜离子还原为一价铜离子，反应终点可以由次甲基兰指示（蓝色消失形成砖红色），根据一定量的菲林试剂完全还原所需的还原糖量，可计算加入样品中的还原糖的含量。
二.试剂和仪器
1.试剂
菲林试剂甲液：称取69.3g硫酸铜晶体，用蒸馏水溶解，定容至1000ml
菲林试剂乙液：称取346g酒石酸钾钠，100g氢氧化钠，用蒸馏水溶解定容至1000ml
次甲基蓝溶液：1g次甲基蓝溶于100ml水
2.仪器
水浴锅
三.操作步骤
体积的确定
1 倾倒出一半样品于烧杯，于水浴锅加热至不产生气泡
2 菲林试剂的标定
取菲林试剂甲乙液各5ml，于250ml锥形瓶，加水10ml，并从滴定管中加入0.4％标准葡萄糖若干毫升，电炉上加热至沸，并保持微沸2min，加2滴次甲基蓝溶液，继续用标准葡萄糖滴定。
至要求操作在1min内完成，记录耗用的标准葡萄糖的体积V0。
3定糖预备实验
菲林试剂甲乙液各5ml于250ml锥形瓶，准确加入20ml样液，摇匀加热至沸。
加2滴次甲基蓝溶液，用标准葡萄糖滴定至蓝色消失，耗标准葡萄糖体积
V1毫升
4样品中还原糖的测定
准确量菲林试剂甲乙液各5ml于250ml锥形瓶，准确加入20ml样液，摇匀，
补加V0—V1毫升蒸馏水，并从滴定管中预加V1毫升样液。
摇匀加热至沸，保持微沸2min，加入2滴次甲基兰溶液，继续用样液滴定至蓝色消失。
记录消耗样液的总体积。
食品中还原糖的测定实验报告
食品中还原糖的测定实验报告一、实验目的本实验旨在掌握食品中还原糖含量的测定方法，了解还原糖在食品中的重要性，并通过实际操作提高实验技能和数据处理能力。
二、实验原理还原糖是指具有还原性的糖类，在碱性条件下，能将斐林试剂中的Cu²⁺还原为 Cu₂O 沉淀。
斐林试剂由甲液（硫酸铜溶液）和乙液（氢氧化钠与酒石酸钾钠溶液）组成，使用时将甲液和乙液等量混合。
反应式如下：2Cu(OH)₂＋RCHO → RCOOH ＋ Cu₂O↓ ＋ 2H₂O生成的氧化亚铜沉淀呈砖红色，通过比色法或重量法可以测定还原糖的含量。
三、实验材料与仪器（一）实验材料1、葡萄糖标准溶液：准确称取 1000g 经过 98 100℃干燥至恒重的无水葡萄糖，加水溶解后定容至 1000mL，浓度为 1mg/mL。
2、待测食品样品：苹果汁、橙汁、蜂蜜等。
（二）实验仪器1、电子天平：精度为 0001g。
2、容量瓶：100mL、500mL。
3、移液管：1mL、5mL、10mL。
4、锥形瓶：250mL。
5、电炉。
6、石棉网。
7、酸式滴定管：50mL。
8、比色皿。
9、分光光度计。
四、实验步骤（一）样品处理1、液体样品（如苹果汁、橙汁）：准确吸取 1000mL 样品于100mL 容量瓶中，加 5mL 乙酸锌溶液和 5mL 亚铁氰化钾溶液，定容至刻度，摇匀，静置 30 分钟，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，收集滤液备用。
2、粘稠液体样品（如蜂蜜）：称取 500 1000g 样品于 100mL 容量瓶中，加水约 50mL 溶解，慢慢加入 5mL 乙酸锌溶液和 5mL 亚铁氰化钾溶液，定容至刻度，摇匀，静置 30 分钟，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，收集滤液备用。
（二）斐林试剂的标定1、准确吸取 500mL 葡萄糖标准溶液于 250mL 锥形瓶中，加入25mL 水和 5mL 斐林试剂甲液、5mL 斐林试剂乙液，摇匀，在电炉上加热至沸腾，保持沸腾 2 分钟，趁热用 01%葡萄糖标准溶液滴定至蓝色刚好消失，记录消耗的葡萄糖标准溶液的体积。
斐林试剂鉴定还原糖颜色
斐林试剂鉴定还原糖颜色
原理：斐林试剂是二价铜离子的酒石酸钾钠配合物，可以被脂肪醛或还原性糖还原为氧化亚铜。
斐林试剂为深蓝色溶液，与可溶性的还原性糖(葡萄糖、果糖和麦芽糖)在加热的条件下，能够生成砖红色的氧化亚铜沉淀。
1、斐林试剂配制方法:0.1 g/mi naoh(甲液)和0.05 g/mi cuso4(乙液)。
甲液配制方法是将 g氢氧化钠和 g酒石酸钾钠溶于 mi，蒸馏水中(贮于带橡皮塞的瓶中)。
乙液配制方法是将34.5 g结晶硫酸铜溶于 ml水中，加0.5 mi硫酸。
混合均匀。
2、斐林试剂的采用方法:通常将斐林试剂甲液和乙液等体积混合(或在2 ml甲液中几滴4~5滴乙液)，再将混合后的斐林试剂放入待测液，水浴加冷或轻易冷却。
如待测液中存有还原成糖，则呈现出砖红色结晶;如待测液中不存有还原成糖，则仍然呈圆形蓝色。
3、斐林试剂(fehling's solution)是德国化学家赫尔曼·冯·斐林(hermann von fehling，年--年)在年发明的。
常用于鉴定可溶性的还原性糖的存在。
斐林试剂与单糖中的还原性糖(葡萄糖、果糖等)反应生成砖红色沉淀。
4、斐林试剂须要现睿现用，崭新布局的cu(oh)2溶液呈圆形悬浊液，与还原成糖反应最充份，砖红色的cu2o分解成也最多，光滑细腻的原产在溶液中。
置放后的cu(oh)2溶液，一方面可以出现结晶，影响与还原成糖的接触面，另一方面cu(oh)2自身出现水解反应，分解成cuo黑色结晶，都会影响实验效果。
检测还原糖的实验流程
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实验四 斐林试剂法法测定还原糖含量(1)
实验四斐林试剂法测定果品蔬菜中还原糖含量一、实验目的：掌握园艺产品中糖的测定方法。
二、实验原理利用糖的还原性，与斐林试剂（氧化剂）中的二价铜离子还原为一价铜,进行氧化还原反应,而进行测定。
非还原糖必须转化为还原糖，再进行测定。
斐林试剂中酒石酸钾钠铜是一种氧化剂，反应的终点可用次甲基蓝作指示剂,在碱性、沸腾环境下还原呈无色。
根据斐林试剂完全还原所需的还原糖量，计算出样品还原糖量。
三、试剂与材料1、斐林试剂甲:69.3g CuSO4。
5H2O加水溶解并定容至1000ml;乙：346g酒石酸钾钠+100gNaOH加水溶解并定容至1000ml；2、1％次甲基蓝，1g次甲基蓝加水溶解并定容至100ml，棕色瓶保存；3、0.2%标准葡萄糖,2g 105℃烘干到恒重的葡萄糖加水定容到1000ml；4、碱式滴定管;5、电炉，各种玻璃器皿。
四、操作方法1、斐林试剂标定取甲液5ml加入5ml乙液中，置于250ml三角瓶中,加入水10ml，从滴定管中加入0.2％的标准葡萄糖若干毫升（约23ml）.（量控制在后滴定时消耗葡萄糖在0。
5－1.0ml）。
电炉上加热至沸,并保持微沸2分钟,加2滴1%次甲基蓝溶液，趁沸以每两秒1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液，用0。
2%标准葡萄糖滴定至蓝色消失,有红棕色沉淀，溶液清亮为终点止。
记录耗用的葡萄糖量为V0，必须在1min内完成。
（注意：还原的次甲基蓝易被空气中的氧氧化,恢复成原来的蓝色,所以滴定过程中必须保持溶液成沸腾状态，并且避免滴定时间过长。
）2、样品滴定预备试验同上法取斐林试剂，加10ml样品液,摇匀于电炉上加热至沸，保持微沸2分钟，加2滴1%次甲基蓝,用0。
2％葡萄糖滴定至蓝色消失。
记录耗用的葡萄糖量为V1。
3、样品滴定同上法吸取斐林试剂加10ml样品液(预先稀释)，补加（V0—V1)ml水，并从滴定管中预先加入（V1—1）ml 0。
2%葡萄糖，摇匀至电炉上加热至沸，保持2min微沸，加入2滴1%次甲基蓝，继续用葡萄糖滴定至蓝色消失。
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斐林试剂配制，标定以及还原糖测定糊精溶液中还原糖含量测定(DE值测定)
A斐林试剂(碱性酒石酸铜溶液)的制备
1)斐林试剂甲液
称取69.28g的硫酸铜(CSO.5HO)溶于水中并稀释至1000ml，静置48h，用滤纸过U42
滤
2)斐林实际乙液
分别称取酒石酸钾钠346g和氢氧化钠100g，溶于水中并稀释至1000ml，静置48h，用滤纸过滤
B斐林试剂标定
精确称取已在105?下干燥至恒重的分析纯葡萄糖0.8g，用蒸馏水稀释，移入250ml容量瓶并稀释至刻度，摇匀。
用移液管分别吸取斐林试剂甲，乙液各5ml和蒸馏水20ml于150ml锥形瓶中(预备数份)，于电炉上煮沸，用上述葡萄糖溶液(置于25ml滴定管中)滴定至蓝色消失时，加入1%的亚甲基蓝指示剂两滴，继续用糖液滴定至蓝色刚好消失。
此操作在1min内完成。
再重复操作第二次标定过程，取两次葡萄糖溶液消耗体积的平均值(允许误差不大于0.1ml)，按下式计算斐林试剂常数(10ml斐林试剂相当于葡萄糖的质量)。
R=WG/V
式中R——10ml斐林试剂相当于葡萄糖的质量，g;
W——葡萄糖溶液消耗的体积，ml
G——葡萄糖的质量，g
V——葡萄糖定容体积，250ml
C测定步骤
称取糊精溶液(液化)15g，移入250ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度。
用移液管分别吸取斐林试剂甲，乙液各5ml和蒸馏水20ml于150ml锥形瓶中。
其余步骤同斐林试剂标定法，即以样品稀释液代替葡萄糖溶液滴定斐林试剂。
计算
还原糖含量按下式计算
还原糖(%)=100RV/WG
式中R——10ml斐林试剂相当于葡萄糖的质量，g;
W——葡萄糖溶液消耗的体积，ml;
G——样品质量，g;
V——葡萄糖定容体积，250ml。