液体菌种的制作及使用方法
杏鲍菇液体菌种生产及绿色高产栽培关键技术
杏鲍菇液体菌种生产及绿色高产栽培关键技术杏鲍菇是一种优质的食用菌，不仅味道鲜美，而且具有丰富的营养价值和药用价值。
近年来，随着人们对健康饮食的重视和生态农业的发展，杏鲍菇的种植量逐渐增加，成为了食用菌产业中的一大亮点。
为了提高杏鲍菇的产量和质量，液体菌种生产及绿色高产栽培技术变得尤为重要。
一、液体菌种生产技术1. 菌种筛选液体菌种生产的第一步是菌种筛选，通过培养基筛选出优良的菌株。
优良的菌株具有较高的生产能力和抗病能力，能够保证后期的高产和品质。
2. 液体培养基配方液体培养基的配方直接影响着菌种的生长和繁殖。
在杏鲍菇液体菌种生产中，通常选用高品质的蔗糖、酵母提取物、蛋白酶水解物等作为主要原料，通过科学配比和适当控制PH值和温度，制备出适合杏鲍菇生长繁殖的液体培养基。
3. 发酵槽和发酵条件通过发酵槽进行液体培养，同时需要控制好发酵条件，包括温度、通气量、搅拌速度等，以保证菌种高效、快速的生长和繁殖。
还需要控制好发酵时间，及时停止发酵以保证菌种的活力。
4. 菌种提取和保存在液体培养达到一定浓度后，需要进行菌种的提取和保存。
通常采用离心机或纤维滤布等方法进行提取，然后进行冻干或低温冷冻保存。
这样可以保证菌种的长期保存和再次利用。
二、绿色高产栽培关键技术1. 培养基配方和基质配置培养基配方和基质配置直接关系到杏鲍菇的产量和品质。
科学合理的配方和配置可以提供杏鲍菇生长必需的营养物质和水分，促进其生长和繁殖，达到高产的目的。
2. 控制温湿度杏鲍菇的生长和繁殖需要适宜的温湿度条件。
一般在15-25摄氏度的温度和80%-90%的相对湿度下，杏鲍菇可以获得最佳的生长效果。
3. 合理的通风和氧气供应通风和氧气供应是杏鲍菇生长的关键。
合理的通风可以保持基质的适宜湿度和供氧量，有效防止病虫害的发生，促进杏鲍菇生长。
4. 病虫害的防治杏鲍菇在生长过程中容易受到一些病虫害的危害，如炭疽病、褐腐病、虫害等。
要采取科学的防治措施，如合理的施肥、喷洒生物农药、定期清洁等，以保证杏鲍菇的健康生长。
食用菌液体菌种的制作PPT课件
c 将培养液分装到250mL的三角烧瓶中（80-100ml/瓶），再放入5-10颗玻璃珠，加塞，包扎，灭菌（121℃，30min） 3、接种：待培养液充分冷却至室温后，无菌操作从母种斜面铲取约1cm² 的菌丝体块（勿带过多的培养基），使菌丝面朝上悬浮于液面上； 4、培养：先25℃静止培养2d, 待接种菌块萌发长出新菌丝后，再 于摇床上振荡（150-180rpm）培养 3-4d，观察检测液体菌种的质量。
恒温培养箱；恒温摇床；超净工作台；灭菌锅；电炉（1台/组）； 250mL三角烧瓶（1个/人）；500mL或250mL烧杯、量筒（各1个/组）；中长玻璃棒（1根/组），六层纱布（1块/组），接种钩、接种铲（各1支/组）；小刀、棉塞、牛皮纸、橡皮筋； 食用菌母种（1支/组），马铃薯，葡萄糖，磷酸二氢钾，硫酸ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ，蛋白胨，氯化钠
食用菌液体菌种的制作
1、学习液体菌种制作的原理与方法； 2、掌握液体菌种的质量检测； 3、了解液体菌种在食用菌生产中的优点。
一 实验目的
液体菌种是指将食用菌的菌丝在一定的的培养条件下采用液体培养基使其生长增殖形成大量菌丝体或菌丝球，以作为食用菌栽培的原种或栽培种使用。液体菌种必须经显微镜检查后方可用于科研和生产。 液体菌种使用的培养基根据不同菌类营养要求的特点而设计，其主要成分为碳源、氮源、矿质元素与维生素。碳源常用蔗糖和葡萄糖；氮源主要是蛋白胨、酵母粉等；无机盐常添加硫酸镁、磷酸二氢钾等；维生素多用维生素B1。
三 实验器材
1、配方：马铃薯200g、葡萄糖20g、磷酸二氢钾0.5g、硫酸镁0.5g、蛋白胨2g、氯化钠0.1g，水1000mL，PH自然。 2、培养基制备： a 根据配方和用量称取适量去皮的马铃薯，切块（1cm³大小）后于烧杯中加入一定量的水，在电炉上加热煮沸30min（熟而不烂），用六层纱布过滤后将滤液补充至初始体积 b 按比例向滤液中加入配方中的其它各成份，搅拌（必要时可加热）使各成份充分溶解，（若溶液较浑浊可再过滤一次）再补充至初始体积，冷却（不烫手）
北虫草液体菌种制作方法
北虫草液体菌种制作方法北虫草的菌种怎样制作培育？北虫草是一种富含虫草素、氧基酸等营养物质的虫、菌结合的食用菌类，因为营养物质种类多、含量高，是人们生活中的上等滋补佳品，在市场上销售情况一直较佳，人工种植前景看好。
而今天给大家介绍一下关于北虫草液体菌种制作方法，如下：一、培养基配方配方：玉米粉1%、葡萄糖2%、蛋白胨1%、酵母粉0.5%、磷酸二氢钾0.1%、水95.35%、硫酸镁0.05%、维生素B110mg、PH值调至6.5左右。
二、制作培养方法1.制作一级摇瓶种：将这些原料溶于水后装在500毫升三角瓶中，每个三角瓶装量200毫升，放入玻璃珠3粒左右，塞紧棉塞，然后用4层纱布罩住棉塞、瓶口扎紧，放在高压灭菌锅内进行消毒，待压力表上升至0.5kg/cm2压力时，即放净冷气待指针降至0后，再关掉放气阀门，待温度表指针逐渐上升至1.1kg/cm2后就开始保温30分钟后，慢慢下降指针至0，然后开盖冷却至常温，再移入接种箱或超净工作台等待接种。
2.接种方法：先把灭菌后的北虫草液体菌种培养基移放在超净工作台上，并把北虫草母种和接种勾、酒精灯、酒精棉球等接种物品也放在超净工作台上，工作服挂在接种室消毒。
然后在接种室点燃烟雾剂（用臭氧消毒器更好），立即关闭所有门窗密闭消毒同时打开紫外线灯。
待40min后，将烟雾放净，关闭紫外线灯，接种人员就可进行接种。
接种的方法是穿好工作服，打开超净工作台风机，点燃酒精灯，左手拿着母种试管对准火焰口，右手拿着铁勾在酒精灯火焰消毒3-5秒种后立即伸进母种试管内把菌种分成5-7段，再用左手迅速将纱布瓶盖打开，右手立即把一段菌块勾入瓶内（每瓶接入5-6片0.5平方厘米大小菌种）速将瓶盖按原样盖紧。
当北虫草菌种接好后，移入22-24℃恒温培养室，摇床震荡发菌培养。
摇床转速140r/min，经过4-6天的发菌培养，经检查北虫草菌液的颜色开始清亮、菌球密集，瓶口闻有很浓的北虫草气味，可判断为菌种优良。
怎样生产和使用平菇液体菌种？
怎样生产和使用平菇液体菌种？我国最早于20世纪60年代（陈幸美等，1963)试用深层培养（液体培养）平菇、香菇、草菇等15种食用菌的菌丝体，并取得成功。
其后，上海师范大学杨庆尧教授等进一步将其完善、定型，并在平菇、香菇等食用菌栽培上推广利用。
下面介绍一种浅层培养平菇液体菌种的工艺。
(1)准备菌种平菇母种若干支。
（2)配制培养基配方一：蛋白陈2.0克，酵母膏2.0克，硫酸镁0．5克，磷酸二氢钾。
．5克，磷酸氢二钾1.0克，葡萄糖20克，加清水至1000毫升。
配方二：蛋白豚2.0克，硫酸镁0.5克，磷酸二氢钾0.5克，硫酸钙0.1克，维生素B，10微克，加清水至1000毫升。
配方三：玉米粉60克，维生素B：10微克。
先将玉米粉加人适量开水中搅成玉米糊，然后加清水至1000毫升，加人维生素Bi。
将配制好的任何一种培养基分装于250毫升三角瓶中，每瓶50~100毫升，加棉塞或硅橡胶塞后置于121℃、0.11兆帕的条件下灭菌20分钟，冷却后接种。
(3)接种培养按无菌操作要求，每支母种接种4~6瓶。
接种后置于恒温摇床上，在25℃、125转／分钟条件下培养4~6天，合格者即为一级种子液。
(4)质量检查摇培过程中或摇培结束后，均应进行质量检杏．若培养液变混浊、有酸臭味，表示已被细菌污染；若培养液有咐味，菌丝球异常，表示已被霉菌污染。
将污染的培养物重新灭菌后倒掉，以免污染环境。
将具有平菇香味，菌丝球颜色白、球形正常的液体菌种镜检后立即应用于下一步生产，或置4℃条件下短期贮存。
液体菌种使用方法液体菌种（一级种子液）的用途有如下三种。
①用来扩大生产二级种子液，用量为5％（体积比），培养基配方及生产方法同上。
②用来扩大生产原种或栽培种（普通棉籽壳培养基或木屑培养基），每瓶（袋）用种量为5~10毫升。
可用刻度吸管（事先灭菌备用）或5毫升进样器作为接种工具，转接液体菌种。
③用作栽培种，每袋用种量为15~30毫升。
没有恒温摇床的单位，每天用人工振荡4~6次，每次30秒左右，也可收到同样的效果。
杏鲍菇液体菌种生产及绿色高产栽培关键技术
杏鲍菇液体菌种生产及绿色高产栽培关键技术杏鲍菇是一种优质食用菇，其菇体细嫩鲜美、营养丰富，且有硫化葱蒜味道，深受消费者喜爱。
随着人们对健康、营养、绿色食品的追求，杏鲍菇的种植逐渐得到了广泛关注和推广。
液体菌种技术是一种高效、方便、重复性好且能够促进放大培养的菌株生长速度的技术。
本文旨在介绍杏鲍菇液体菌种生产及绿色高产栽培的关键技术。
一、液体菌种生产技术1、原料准备：在无菌条件下，将适量的玉米粉（或米粉、面粉）加入蒸馏水中搅拌均匀后，加入0.3%的琼脂。
煮沸使琼脂充分溶解，然后加入适量的蔗糖和牛肉膏粉，再次充分搅拌均匀。
2、液体培养基接种：将培养菌株在无菌条件下接种至液体培养基中，转移到恒温摇床进行培养，培养时间一般为5-7天。
3、菌体分离：使用高速离心将菌体和培养基分离，用0.45 μm的滤膜过滤，获得纯化后的液体菌种。
二、绿色高产栽培技术1、基质选择：在基质上进行栽培是杏鲍菇液体菌种生产的一个重要步骤。
杏鲍菇最适合生长的基质包括秸秆、木屑、锯末、玉米芯等，也可以使用优质蘑菇渣、菜籽饼等废弃物质或菌袋底废料作为基质。
2、驯化和预处理：在进行杏鲍菇栽培前，需要对基质进行驯化和预处理。
驯化是通过加热、蒸汽灭菌等方式消毒基质，预处理则是在驯化基质的基础上对基质进行水分调节、调整基质pH值等操作。
3、接种：在基质中均匀撒上杏鲍菇液体菌种，然后进行松压、覆盖保湿等操作，使其能够迅速生长。
4、环境控制：在杏鲍菇的生长过程中，需要控制环境温度、湿度、光照等参数，以提高其生长速度和产量。
一般来说，最适合杏鲍菇生长的环境温度在20-25°C之间，湿度控制在80-90%之间，光照不宜过强。
5、收获和加工：杏鲍菇一般生长周期在20-30天左右，当杏鲍菇黑色孢子盖完全展开时，即可进行收获。
杏鲍菇采摘后应及时清理残留的残渣和污垢，最好在当天进行加工和包装，以保证杏鲍菇的品质和口感。
总之，杏鲍菇液体菌种生产及绿色高产栽培是一种高效、科学化的种植模式，其关键技术包括液体菌种生产、驯化与预处理、基质选择和环境控制等。
EM菌液制作方法
一、EM菌液制作方法（细菌生长繁殖的条件）1、液体EM菌种的制作方法：按EM固体原菌种10克：红糖0.1公斤：水1 公斤（100 度白开水放凉到40 度时的无菌水）的比例混合均匀，密闭保温（人体温度35-37度）发酵，每1 -2天摇动一次，5-7天即成，其间，因产生气体容器鼓起时，要及时松动盖子放气，并立即盖紧，到气体不再产生，能闻到酸甜香味时，表明发酵成功。
保持密闭、放置阴凉干燥处，通常可保存18个月。
可以作为液体菌种使用。
请参考（细菌生长繁殖的条件）2、液体菌种扩陪成EM 原液：按液体菌种1 公斤：红糖1 公斤：水10 公斤（1 00度白开水放凉到40度时的无菌水）的比例混合均匀，密闭保温（人体温度35-37度）发酵，每1 -2天摇动一次，5-7天即成，其间，因产生气体容器鼓起时，要及时松动盖子放气，并立即盖紧，到气体不再产生，能闻到酸甜香味时，表明发酵成功。
保持密闭、放置阴凉干燥处，通常可保存18个月。
用时按照说明书稀释比例稀释。
请参考（细菌生长繁殖的条件）3、用EM 菌液制做植物防虫、杀菌液请参考（细菌生长繁殖的条件）EM菌种、红糖、30C以上白酒、清水按1: 8: 1: 100的比例备料。
将等量的EM发酵液、红糖与酒及100倍的清水混合，搅匀盖紧，发酵5-10天左右，其间，因产生气体容器鼓起时，要及时松动盖子放气，并立即盖紧，到气体不再产生，能闻到酸甜香味时，表明发酵成功。
保持密闭置阴凉干燥处通常可保存6－18 个月。
EM 防虫液能增强植物新陈代谢，强化叶片保护膜的角质层，防止病原菌进入，它的酯成分在草食害虫体内不分解，产生生理障碍致死，对线虫等多种害虫有显著效果，但应及早使用，虫害大面积发生时使用效果甚微。
使用时的标准稀释倍数为1000-500，雾状喷施，叶片的正反两面都喷到。
二、【生产水产养殖水肥配方】请参考（细菌生长繁殖的条件）1 、有机肥：（发酵动物粪便40%，桔杆或草粉10%，泥碳土20%、活性小肽0.3%）2、生物肥：（固N菌、解P菌、解K菌）10%3、活菌制剂：（EM 原液）1%4、复合氨基酸1%，复合维生素1%，多糖0.5%，核酸0.5%，腐植酸1%，蛋白酶0.5%，淀粉酶0.5（共5%）5、微量元素10%（N=0.5%、P=4%、K=4%、Ca、Na、Mg、Cu、Fe、Zn、Mn 、B、Si）三、【生产高效种植微生物肥料配方】请参考（细菌生长繁殖的条件）1、生物肥：（固N菌、解P菌、解K菌）4%2、活菌制剂：EM菌原液1%3、动物粪便：80%4、微量元素1.5% N=3.5% P=5% K=5%（合计15%）四、【生产种植叶面微生物肥料配方】请参考（细菌生长繁殖的条件）1、生物肥：（固N菌、解P菌、解K菌）12%2、活菌制剂：（EM 原液）80%3、复合氨基酸1%，复合多维生素1%，多糖0.4%，核酸0.1%，腐植酸1%，蛋白酶0.2%，淀粉酶0.3%（合计4%）4、微量元素1.5% N=0.5% P=1% K=1%（合计4%）五、【生产微生物饲料—全价料配方】请参考（细菌生长繁殖的条件）玉米50.0小麦麸8.00大豆粕8.00棉籽粕3.00菜籽粕2.00微生物发酵秸秆粉28.0复合酶0.15复合微量元素0.15复合维生素0.02皮毛营养调控剂0.02无氟磷酸氢钙0.16食盐0.20复合赖氨酸0.10石粉0.20六、【生产微生物饲料—添加剂配方】请参考（细菌生长繁殖的条件）微生物发酵载体80.0复合氨基酸03.0复合酶制剂03.0复合微量元素02.0复合维生素02.0皮毛营养调控剂02.0无氟磷酸氢钙03.0食盐03.0。
液体菌种培训教材(四)液体菌种的制作过程及方法
液体菌种培训教材(节选四)2010年4月10日三、液体菌种的制作过程及方法（一）试管种的生产：液体菌种对试管的纯度要求很高。
所以要自己会做试管种。
试管种的制作其实很简单，在我们要用种的前三个月，到市场上去看哪个菇符合要求，就买回来（也可以用自己保存的试管种均可）。
在接种箱内进行常规气雾（最好是高锰酸钾和甲醛）消毒，30分钟后，开始分离。
分离时先将用具消毒，然后用手把菇体分开，用镊子夹一小块菇肉（不同的菇取种位置不同），放到试管里。
塞上棉塞就行了。
这样的成功率一般在80%以上。
在菌丝生长阶段，要经常观察菌丝的生长情况。
对菌丝生长不整齐的，有污染的，全部淘汰。
只留下没什么问题的，长满试管后，再取特定部位进行转管（见实操）。
菌丝长到**cm时，从菌丝生长的尖端提取一小块，一般地认为，取****大小就可以了，不过从试验上看，提得**效果越好。
平菇一般提二次就可以了，提到五次，基本上与脱毒菌种效果差不多。
别的品种要多些，最多不超过五次，都可以达到提纯的目的。
（二）三角瓶专用母种生产：专用母种分固体和液体两种。
从生产技术上看，液体专用母种要难一些，是用电磁搅拌器或摇瓶机进行生产。
整个过程要4-7天时间，生产的液体种稍经加工就可以直接使用。
液体菌种专用母种的配方就是用PDA加富配方去掉琼脂。
用三角瓶盛装，在高压锅里121℃保持30分钟就行了。
待三角瓶的温度降到30℃以下时，在超净工作台或接种箱内进行接种。
马上就可以进行搅拌或摇瓶了。
固体种生产时间要长些，保存的时间也长，而且方便运输。
固体专用母种一般污染要严重一些，有的人污染率要达到20-30左右。
固体专用母种我们现在一般不用，污染率太高，而且不好发现，最糟糕的是容易堵枪。
配方是把木屑过20-40目的筛，用去掉琼脂的PDA配方拌料，在121℃高压下灭菌2小时，待温度下降到30度以下时，在超净工作台或接种箱内进行常规接种。
一般20多天可以长好。
具有运输和贮存方便等特点。
木耳液体菌种制作规程
液体菌种制作规程工艺流程：斜面菌种→初级摇瓶种→二级摇瓶种→发酵罐深层发酵种→接种一、摇瓶种的制作1斜面菌种准备：马铃薯200克（去皮切块煮沸过滤取滤液），蔗糖20克，麸皮30克（煮汁过滤取滤液）二氢钾2克，硫酸镁1克，琼脂20克，VB1 10毫克，水1000毫升。
25度培养7天备用。
2、初级摇瓶制作①配方土豆200克葡萄糖20克酵母膏2克蛋白胨3克磷酸二氢钾2克硫酸镁1克V B110毫克水1000毫升。
（配方2：玉米粉4%，蔗糖3%，麸皮2%，酵母膏0.5%，2氢钾0.25%，硫酸镁0.1%，VB1 0.01%，豆油0.05%）。
②制作：土豆去皮切成薄块，煮沸后保持20分钟，四层纱布过滤后取滤液，补足1000毫升水，称取其他成份，与土豆液充分搅匀然后装入三角瓶。
初级摇瓶采用500ml三角瓶，装入200ml,放入玻璃球5粒（0.5cm 直径）用二层纱布包裹制作棉塞，塞紧棉塞后再用二层纱布外层加报纸做罩，扎紧瓶胫，防止摇动时棉塞活动。
③灭菌：把三角瓶放入立式高压锅，加足水紧好盖，开启放气阀，接通电源，有蒸汽冒出时关闭放气阀，待压力表达到0.05MPa时,断掉电源,打开放气阀,放冷空气至压力表回0，再关闭放气阀，接通电源，当压力表显示0.11 MPa，温度达到121℃后开时计时，保持45min。
断电使其自然降至0.02 MPa时放气归0，趁热微开盖，使剩余蒸汽烘干棉塞，然后出锅降温至25℃即可接种。
④接种：首先，封闭接种室，用开启紫外线灯30分钟，再用臭氧灭菌器灭菌60分钟或用烟雾剂每立方5克熏蒸30分钟，进行接种环境灭菌。
把灭菌后的三角瓶放入超净台（或接种箱）,把斜面母种、工具、酒精灯、75%的酒精棉球瓶同时放入，母种用灭过菌的报纸遮盖，打开紫外线灯和无菌风开关，保持15min后，关闭紫外线灯进行接种。
操作人员应着干净的隔离衣，带好卫生帽、口罩，手洗净，用75%酒精擦拭手、母种试管、工具，点燃酒精灯，灼烧工具及试管口20秒，在严格无菌操作程序下，把斜面菌种切割成0.5厘米小块（不带培养基），移入三角瓶中，使其浮在液面，一般接入5-6块，塞好棉塞，接完后重新封好棉塞罩，放到25℃恒温环境净置培养72小时。
草菇液体菌种栽培技术
草菇液体菌种栽培技术一、引言草菇是一种常见的食用菌，其口感鲜美，营养丰富，深受人们喜爱。
液体菌种栽培技术是一种新型的草菇栽培方法，具有生产效率高、周期短、成本低等优点。
本文将详细介绍草菇液体菌种栽培技术。
二、液体菌种制备1. 菌种选择选择高效率的草菇品系作为液体菌种的母本。
常用的品系有松茸型、平顶型和鸡腿型等。
2. 菌丝接种将选好的母本放入无菌环境中进行接种。
可以采取划线法或直接注射法进行接种。
3. 菌丝培养将接种好的母本放入含有适量碳源、氮源和矿物质盐等营养物质的基础培养液中进行培养。
常用的基础培养液有PD（Potato Dextrose）和PDA（Potato Dextrose Agar）等。
4. 液体发酵将培养好的草菇菌丝转移到含有适量碳源、氮源和矿物质盐等营养物质的液体培养基中进行发酵。
常用的液体培养基有PDB（Potato Dextrose Broth）和Czapek-Dox Broth等。
三、液体菌种栽培技术1. 菌种接种将培养好的草菇液体菌种接种到含有适量碳源、氮源和矿物质盐等营养物质的草菇栽培基质中。
常用的草菇栽培基质有稻草、秸秆、木屑等。
2. 保湿在接种后，要及时进行保湿处理，使基质保持适宜的湿度。
可以采用喷水或覆盖湿毛巾等方法进行保湿。
3. 通风换气草菇需要充足的氧气才能生长繁殖，因此要及时进行通风换气。
可以采用开窗通风或安装通风设备等方法。
4. 控制温度草菇生长适宜温度为18℃-25℃，因此要控制好环境温度。
可以采用加热或降温设备等方法进行控制。
5. 控制光照草菇不需要光照，因此要避免阳光直射或强光照射。
可以选择适宜的栽培场所进行栽培。
四、液体菌种栽培技术的优点和应用1. 优点液体菌种栽培技术具有生产效率高、周期短、成本低等优点。
2. 应用液体菌种栽培技术广泛应用于草菇生产中，可以大幅度提高草菇的产量和质量。
五、总结草菇液体菌种栽培技术是一种新型的草菇栽培方法，具有生产效率高、周期短、成本低等优点。
杏鲍菇液体菌种生产及绿色高产栽培关键技术
杏鲍菇液体菌种生产及绿色高产栽培关键技术杏鲍菇是一种美味营养的食用菌，在市场上备受欢迎。
液体菌种生产和绿色高产栽培是杏鲍菇种植业的重要环节，对提高产量、质量和效益具有重要意义。
本文将介绍杏鲍菇液体菌种生产及绿色高产栽培的关键技术。
1. 液体培养基的制备：液体培养基是液体菌种生产的基础，通常选用麦芽汁、玉米糖浆等为基础，加入氮源、磷酸盐、微量元素等成分，pH值控制在6.0-6.5之间。
2. 菌种接种：将杏鲍菇的子实体细胞分离出来，接种到含有营养物质的液体培养基中，在30℃下静置培养。
3. 摇床培养：将培养基置于摇床上，以120rpm的速度摇动，加大菌丝生长速度。
通常在20天左右，液体中就会出现白色菌丝。
4. 分离纯化：将杂质去除，分离出纯净的杏鲍菇液体菌种。
5. 储存：以冰箱冷冻或冰点冷冻的方式将菌种储存起来，保证菌株的保存和多次使用。
1. 基质选择：选择新鲜的秸秆、稻草等农作物秸余作为基质，将其蒸煮灭菌，作为杏鲍菇栽培的基质。
2. 棚室建设：搭建温度、湿度、通风等条件合适的棚室，有利于杏鲍菇的快速生长和高效产量。
3. 原生菌种接种：选择优质的液体菌种，采用原生菌种接种法，均匀混合培养原料。
4. 控制温湿度：采用低温（15℃-20℃）高湿（85%-90%）的环境条件，使杏鲍菇菌丝生长。
5. 底面覆盖物：在基质表面覆盖透明塑料膜，保持适宜的湿度，增强透气性。
6. 喷雾浇水：喷雾浇水可保持适宜的湿度，也有利于芽菇的生长。
7. 日光照射：杏鲍菇需要一定的日光照射，有利于其发育和成长。
8. 控制菌体生长速度：控制杏鲍菇的生长速度，保证杏鲍菇的形态和口感。
总之，杏鲍菇液体菌种生产和绿色高产栽培是杏鲍菇种植业的重要环节，可以提高产量和效益，具有广阔的市场前景。
秀珍菇液体菌种制备技术
秀珍菇液体菌种制备技术一、工艺流程母种→原种（液体摇瓶）→生产种（罐体发酵）→料棒接种二、母种的制备1、母种培养基配方马铃薯（去皮）20％，葡萄糖2％，琼脂2％，水1000毫升，pH值5.5～6。
2、母种的制备及注意事项按配方准确称取原料，加热煮沸最后定容，分装试管，装入量约为试管长度的1／4～1／5，塞好棉塞。
使用高压灭菌锅灭菌，在温度121℃、压力0.11Mpa下灭菌半小时，注意一定要放净高压灭菌锅内的冷空气。
灭菌后，待培养基温度下降至60℃时，将成把的试管摆成斜面。
注意，不要让培养基粘湿棉塞。
要严格按照无菌操作规程进行接种，然后置于恒温箱中25℃左右恒温培养10～15天。
三、原种的制备1、原种培养基配方马铃薯（去皮）２０％、麦麸３％、葡萄糖２％、蛋白胨３‰、磷酸二氢钾２‰、硫酸镁１‰。
2、原种的制备及注意事项马铃薯去皮切片后与麦麸一起煮沸20分钟，过滤定容，加入其它原料，全部溶解后装入三角瓶。
三角瓶在使用前除清洗之外，还要进行空灭，灭菌方法与常规灭菌试管培养基相同。
每个瓶中放入5～10粒玻璃球（直径0.5cm），用棉塞塞紧瓶口，再用牛皮纸包裹后扎紧。
使用高压灭菌锅灭菌，在温度121℃、压力0.11Mpa下灭菌45分钟。
冷却后进行无菌接种，然后置于25℃恒温培养箱中静置培养72小时。
摇床培养时，温度25℃，转速140转/分钟，培养时间72～96小时。
四、生产种的制备1、生产种培养基配方马铃薯（去皮）２０％、麦麸２％、蛋白胨３‰、葡萄糖２％、磷酸二氢钾１‰、硫酸镁0.5‰、石膏0.5‰、琼脂２～３ｇ、酵母膏0.5‰、消泡剂１‰。
2、生产种的制备（1）清洗罐体发酵罐在每次使用后都必须进行彻底的清洗，去除罐内残存的菌球、菌块料液等杂物，保证罐内洁净。
（2）配制原料按照生产种培养基配方准确称取各种原料。
马铃薯去皮切片后与麦麸一起煮沸20分钟，过滤定容，再加入其它原料及消泡剂。
（3）灭菌将盛有培养基质的发酵罐推进灭菌仓，通入蒸汽进行灭菌，控制温度在121℃左右、压力为0.11Mpa，灭菌1个小时。
水桶自制液体菌种的方法
水桶自制液体菌种的方法
制作液体菌种有几种方法，以下是其中一种常用的方法：
材料：
1. 容器：可以使用玻璃瓶、腐蚀性物质不会反应的塑料瓶等。
2. 培养基：可以购买已配好的培养基，也可以自制。
3. 菌种：可以使用已购买的菌种，也可以使用自己提取的菌种。
步骤：
1. 准备好容器，清洗消毒后晾干。
2. 配制培养基，如果自己配制，可选择适当的基质（如蔗糖、琼脂等）和必需的营养物质（如氮源、磷源等），按照比例加入适量的水中，搅拌均匀。
3. 把配制好的培养基倒入容器中，留下一定的空间给菌种生长。
4. 添加菌种：如果有已购买的菌种，按照说明书上的指导添加适量的菌种到培养基中；如果使用自己提取的菌种，可以从分离出的单一菌落中取一小块放入培养基中。
5. 盖紧容器盖，避免外界的污染。
6. 将培养基置于适宜的温度和光照条件下，有利于菌种生长（不同的菌种有不同的适宜生长条件）。
7. 定期观察培养基中的菌落生长情况，如果生长良好，可以继续培养；如果发现污染或者其他异常，需要进行相应的处理（如重新进行培养）。
8. 根据需要，可以用培养基菌种进行插播或者扩大规模培养。
需要注意的是，制作液体菌种需要一定的实验室技术和sterile(无菌)操作。
不熟悉实验室操作的人士最好在专业人士的指导下进行。
实验3 液体菌种制作
1、成本低； 2、菌丝体生长快速； 3、生产周期短； 4、工厂化生产、无季节性。
五、液体菌种制作的用途
1、生产液体菌种； 2、制备药物或提取生化制品； 3、制作食品或畜禽饲料。
六、液体菌种制作的主要设备
1、摇床 往复式摇床：振荡方式为来回震荡 旋转式摇床：振荡方式为旋转 2、发酵罐
实验三 液体菌种的制作
一、实验目的
1、液体培养基的制备方法 2、液体菌种接种方法
二、实验材料与设备
1、菌种 侧耳 2、马铃薯 200克 ；葡萄糖 20克 ； 自来水 1000毫升 ；自然PH 。 3、广口三角瓶 、振荡培养箱
三、液体菌种制作的原理
食用菌液体菌种制作是采用液体培养基通入 无菌空气并加以搅拌，增加培养基中溶氧 含量，提供食用菌菌体呼吸代谢所需要的 氧气，并控制适宜的外界条件，获得大量 的菌丝体或代谢产物。
七、液体菌种接种方法：
1、用75%的酒精棉球对手指和广口三角瓶外壁 消毒。 2、点燃酒精灯。 3、打开三角瓶封口膜，用移液管取5~10mL的 液体菌种迅速移接到三角瓶中，迅速封口。 4、贴标签 写明菌种编号，接种日期，姓名，随后置于振 荡培养箱中于25℃避光振荡培养，7~10d可以 长满瓶。 5、结果记录
152.4液体菌种制作
谢谢观看！
酸二氢钾0.5 g/L，硫酸镁0.25 g/L。
二、液体菌种制种工艺
4.液体培养基的制作方法 （1）投料和定容
二、液体菌种制种工艺
4.液体培养基的制作方法 （2）液体培养基灭菌
主管接空气过滤器出气阀
二、液体菌种制种工艺
5.摇瓶菌种生产
二、液体菌种制种工艺
6.接种
火焰圈灼烧接种口
菌种接入罐体
二、液体菌种制种工艺
概述
液体菌种具有成本低、制作时间短、萌发快、生长快、纯度高、菌龄短、 出菇齐、产量高等优点，在生产应用中有其明显的优势。
一、生产环境和生产设施设备
1.液体菌种生产场所
液体菌种生产车间
液体菌种接种车间
液体菌种培养器剖面图
一、生产环境和生产设施设备
2.液体菌种生产设施：配料间、发菌间、冷却间、接种间、培养室、检测室。
7.培养 罐体压力表压力在0.02 MPa～0.03 MPa，温度控制在20±1 ℃、通
气量为1:0.8条件下进行液体菌种培养。
二、液体菌种制种工艺
8.放罐接种 将待接种的固体种袋（瓶）或栽培袋放置在输送带上，输入至无菌接
种区。在接种区用接种器将液体菌种注（喷）入。
固体种袋（瓶）放置在输送带上
无菌接种区
接种间Biblioteka 培养室二、液体菌种制种工艺
1.液体菌种制种工艺
二、液体菌种制种工艺
2.液体菌种培养器进行维护和检查 3.液体菌种培养基配方 ➢ 黄豆粉 10 g/L、蔗糖3.0 g/L、KH2P04 1 g/L、MgS04 0.5 g/L。 ➢ 玉米粉6 g/L、黄豆粉4.5 g/L。 ➢ 玉米粉1.0 g/L，黄豆粉1.5 g/L，葡萄糖7.5 g/L，酵母膏1.5 g/L，磷
2-6液体菌种制作简介
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液体发酵的主要作用
工业上液体发酵有着重要作用，是 食品工业、医药工业及国名经济的重 要组成部分；
1、生产液体菌种； 2、制备药物或提取生化制品； 3、制作食品或畜禽饲料等。
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摇床
种子罐和发酵罐
空气净化设备
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模块三
2-6
液体菌种简介
液体菌种特点 液体菌种制作工艺
一、液体菌种特点
概念 步骤 液体菌种 制备工艺 流程
无菌 空气 斜面 菌种
增加培养基 溶氧量
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状态 培养基呈液体状态 实质 培养基不添加琼脂等凝固剂
摇瓶 种子罐 培养 培养
1、培养条件易于控制，管理方便；
2、营养成分分布均匀，与菌丝 接触面大，菌丝生长整齐；
主要内容
1.液体菌种主要特点及作用
2.液体菌种制作工艺流程
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思考、讨论题
1、液体发酵有何意义？ 2、制作液体菌种有何作用？工艺 流程与固体菌种有何不同？
课外学习资源
1.黄毅.食用菌栽培. 北京：高等教育出社1998 2.中国食用菌菌种网
液体菌种制作过程
液体菌种的的制作过程一、母种纯化1、配方：1000ml为例（1）小麦（麦夫或豆芽）50克，土豆200克，葡萄糖20克，蛋白胨2克，琼脂18-20克，KH2 PO4 1.5克，MgSO4 0.75克，PH自然（6左右）（2）蔗糖24g，蛋白胨2g，酵母膏1g，2、制作小麦煮开花，土豆煮酥而不烂；琼脂剪碎，放入溶解，加入其他配料，总体积称到标准量，装入试管，进行常规灭菌（121℃，40分钟）。
3、接种将所用母种及新制的试管放入接种箱，灭菌20分钟后将手用75%的医用酒精擦洗（消毒），伸入接种箱等待5-10分钟再开始接种（接种前所有接种工具都要在酒精灯火焰上匀烧灭菌），在酒精灯火上方切取0.3cm²一小块菌丝，放入新培养基上，塞好试管口；放在该菌最适合的温度下培养。
4、培养在培养过程中，每天都要仔细逆光观察，发现有任何疑常现象都要淘汰不要。
二、摇瓶种子制作1、配方：1000ml为例a.可以用母种纯化配方（不加琼脂）b.土豆200克，黄豆8克（需打凝浆）或脱脂豆奶8克，葡萄糖30克，蛋白胨2克，KH2PO41.5克，MgSO4 0.75克。
c.玉米小麦各50克，蔗糖20克，葡萄糖10克，蛋白胨2克，酵母膏2克，KH2PO41克，MgSO4 0. 5克。
d．蔗糖24g，蛋白胨2g，酵母膏1g，KH2PO42g,MgSO4 1g, 豆浆50ml.2、制作将以上配方任选一种用类似母种的方法制成液体培养基，装入摇瓶，塞好瓶口，包上放潮纸，放入灭菌锅，封好锅口，打开放气阀，当有大量蒸气排出时关闭放气阀，温度升至121℃后，计时40分钟，让其自然冷却，压力归零时，打开灭菌锅盖，将一边掀起3-5cm，利用余热将棉塞烘干。
3、接种将摇瓶及纯化好的母种一起放入接种箱，灭菌后，去掉防潮纸，扭松棉塞，在酒精灯火焰上方，挑取0.3cm²的菌丝皮左手拿起棉塞,右手迅速将菌丝接入,然后立刻盖上棉塞,用同样的方法一个摇瓶接入15-20块,让其均匀地分布在液体表面。
液体菌种的制作技术及其应用
液体菌种的制作技术及其应用韩羽翔裴华海南医学院理学院海南医学院热带医学与检验学院在食用菌生产中，成败的关键是菌种；生产中投资成本最大也是菌种。
菌种的纯度、活力、培育时间和抵抗杂菌的能力决定了生产的成败。
要实现高质量、工厂化、标准化、全年候生产，与国际市场接轨，提高栽培效益，就必须解决目前菌种生产的落后方式。
食用菌液体菌种能替代传统菌种进行生产,而且能提高食用菌的产量和质量, 易于实现工业化、标准化生产[4]。
本文就食用菌液体菌种培养技术做一综述。
1.液体菌种相对传统的固体菌种的优势所在液体菌种相对传统的固体菌种有诸多优势：菌种培养时间短,以平菇为例，1级～3级菌种的培养时间分别为7天、23天和25天，总计需要60天左右，液体菌种仅需10天左右，即使将设备排空后的清洗、检修等包括在内，也不会超过15天;污染易被检出，液体菌种培养期间设备完全处于密封状态，一旦发生污染，其气味，色泽都会发生变化，生产期间易被检出，所以相对固体菌种而言发生污染和隐性污染的概率更低，产出的菌种纯度更高；由于液体菌种培养时间短，菌龄高度一致，播种后菌种萌发一致，不存在“老幼不齐”的现象；液体菌种接于固体料上定植快,液体菌种具有流动性、易分散、菌丝片断多、菌丝活力强等特点，接入固体培养基中后, 分布于整个培养基表面。
因此，菌丝萌发快, 吃料也快,萌发点多, 分散度也较大, 菌丝在培养料中呈立体生长模式。
研究表明,在适宜的温度下, 500ml 的原种瓶装干料150g, 接入液体菌种后5～18天菌丝可长满瓶, 比接固体菌种可提前天5 ～7 天。
另外，在高温制种季节, 用液体菌种接入瓶装料其污染率可控制在1%以下, 接入袋装料其污染率可控制在4%以下；有研究表明使用食用菌液体菌种跟传统的固体菌种相比，用液体菌种栽培的产量及生物转化率是常规栽培的4倍多, 差异极为显著。
综上各个优点液体菌种更适合于大规模生产使用食用菌液体菌种也易于实现食用菌的工业化和标准化生产, 从而从根本上改变过去手工作坊式的生产和从试管→瓶子→小袋→大袋的落后的生产方式,实现一条新型的食用菌菌种生产工艺。
液体菌种生产流程
EM等菌种培养技术流程
一、液体菌种培养
1、一、二级种培养基配方：白糖 1.5L
糖蜜0.5L
磷酸二氢钾50g
轻质碳酸钙50g
味精下脚料1kg
甲壳素100g
水55L
2、菌种分别是：EM菌、枯草杆菌、硝化菌等。
3、制作方法：将55L水煮沸，加入培养基各组分，再次煮沸后，分装至25L 的塑料桶（每桶约19L），待冷却后分别接种1L，分别扩繁培养，一般3-7天即可用。
注：1）接种比例1：20。
2）枯草杆菌（是耐热菌）需趁热接入菌种培养。
3）用发酵罐培养菌种效果更佳。
二、菌种扩繁成1吨
1、培养基配方：白糖20kg
碳酸钙2kg
过磷酸钙2kg
味精下脚料10kg
糖蜜4-5L
甲壳素1L
在98L大不锈钢桶加入55L水煮沸，加入培养基物料组分，煮沸后趁热倒入2吨大桶中；连续煮2锅；放置30min，以达杀菌目的。
另外准备若干个大桶，装满水，用臭氧处理器消毒，静止放置1h后待用；向2吨大桶中倒入臭氧处理的无菌水，至半桶时，接种（8种菌之一,其中枯草杆菌最好用热水），接种比例1：80（约1.5%）。
乳酸菌和光合菌可以不用打气，其它6种菌接种2天后要补充新鲜空气，培养5天后可用。
液体菌种的制作及使用方法
液体菌种的制作及使用方法随着食用菌生产的发展,食用菌制种方法在传统固体制作的基础上在不断的改进和提高,其中液体菌种的制作便是其中之一。
液体发酵技术是现代生物技术之一，起源于美国。
它是指在生化反应器中，模仿自然界将食药用菌在生育过程中所必需的糖类、有机和无机含有氮素的化合物、无机盐等一些微量元素以及其它营养物质溶解在水中作为培养基，灭菌后接入菌种，通入无菌空气并加以搅拌，提供食用菌菌体呼吸代谢所需要的氧气，并控制适宜的外界条件，进行菌丝大量培养繁殖的过程。
工业化大规模的发酵培养即为发酵生产，亦称深层培养或沉没培养。
液体菌种的制作及使用方法液体菌种由于具有生产规模化、控制自动化、生长无菌化、发菌高速化的生产应用优势,为食用菌产业化的发展提供了良好的种源条件,是食用菌产业化发展的必然方向,已被业内人士所看好。
液体菌种是用液体培养基培养而成的菌种。
近年来，国内外正积极研究液体菌种的培养与利用。
与固体菌种相比，它具有菌种生产周期短、菌龄整齐一致、接种方便、接于固体菌料发酵快、适宜于工厂化生产等优点，因而受到了广大栽培者的欢迎。
目前我国已能进行深层发酵的食用菌有：香菇、平菇、凤尾菇、美味侧耳、鲍鱼菇、金针菇、黑木耳、猴头、草菇、蜜环菌、茯苓、滑菇和冬虫夏草等。
一、液体菌种的培养方法常见的有采用摇床来生产的摇瓶培养法和采用发酵罐来生产的深层培养法。
若少量生产，可以用摇瓶培养法。
深层培养需要一整套工业发酵设备，如锅炉、空气压缩机、空气净化系统、发酵罐等，故投资大，只适用于工厂化的大规模生产。
而摇瓶培养投资少，设备技术简单，适合一般菌种厂生产使用。
本节主要介绍摇瓶培养的技术方法。
1、食用菌液体发酵的培养基根据培养基中组成的不同，可分为天然培养基和合成培养基。
天然培养基的组成均为天然有机物。
合成培养基则是采用—些已知化学成分的营养物质作培养基。
在生产上，还根据工艺将培养基分为孢子培养基、种子培养基及发酵培养基。
但无论如何划分，每一种培养基的组成中都离不开碳、氮、无机盐、微量元素、维生素和生长素等。
食用菌液体菌种的制作步骤
食用菌液体菌种的制作步骤
一、液体培养基配方：葡萄糖20克蛋白胨10克硫酸镁
0.5克硫酸二氢钾1克水1000ml
二、液体培养基的制作步骤：
1、称量、溶解
按配方称量药品，将药品置于烧杯中加水，玻璃棒搅匀。
2、分装
分装三角瓶时避免培养液黏住瓶壁口，用漏斗进行分装，三角瓶装料系数60％。
3、加棉塞
棉塞大小，松紧度要适中，一般塞入3-4厘米。
4、装锅灭菌
塞好棉塞的三角瓶用双层报纸包扎好，装入灭菌锅，盖上报纸，排气后，待温度升至121℃开始计时，温度控制在121—123℃，维持50min。
5、烘棉塞
当压力降至0.05MPa时带压进入无菌室，当压力即将降至零时开始放气，打开锅盖拿出报纸，将锅盖嵌一小缝，以此来烘干棉塞，维持40—50min。
6、冷却
取出三角瓶放在超净工作台或接种箱中，冷却后进行接种。
液体菌种生产与固体培养不同，是以液体做培养基，通过多级发酵培养得到菌液，发酵菌液中含有大量的菌丝体，
可直接做液体菌种。
目前，液体菌种发酵生产的工艺流程有：一是摇瓶培养工艺，即斜面母种→一级摇瓶种子→二级摇瓶种子→三级摇瓶种子；二是深层发酵罐培养工艺，即斜面母种→种子罐→发酵罐→液体菌种。
少量可用摇瓶震荡培养，大量的用发酵罐通气培养。
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液体菌种的制作及使用方法液体菌种的制作及使用方法随着食用菌生产的发展,食用菌制种方法在传统固体制作的基础上在不断的改进和提高,其中液体菌种的制作便是其中之一。
液体发酵技术是现代生物技术之一，起源于美国。
它是指在生化反应器中，模仿自然界将食药用菌在生育过程中所必需的糖类、有机和无机含有氮素的化合物、无机盐等一些微量元素以及其它营养物质溶解在水中作为培养基，灭菌后接入菌种，通入无菌空气并加以搅拌，提供食用菌菌体呼吸代谢所需要的氧气，并控制适宜的外界条件，进行菌丝大量培养繁殖的过程。
工业化大规模的发酵培养即为发酵生产，亦称深层培养或沉没培养。
液体菌种由于具有生产规模化、控制自动化、生长无菌化、发菌高速化的生产应用优势,为食用菌产业化的发展提供了良好的种源条件,是食用菌产业化发展的必然方向,已被业内人士所看好。
液体菌种是用液体培养基培养而成的菌种。
近年来，国内外正积极研究液体菌种的培养与利用。
与固体菌种相比，它具有菌种生产周期短、菌龄整齐一致、接种方便、接于固体菌料发酵快、适宜于工厂化生产等优点，因而受到了广大栽培者的欢迎。
目前我国已能进行深层发酵的食用菌有：香菇、平菇、凤尾菇、美味侧耳、鲍鱼菇、金针菇、黑木耳、猴头、草菇、蜜环菌、茯苓、滑菇和冬虫夏草等。
一、液体菌种的培养方法常见的有采用摇床来生产的摇瓶培养法和采用发酵罐来生产的深层培养法。
若少量生产，可以用摇瓶培养法。
深层培养需要一整套工业发酵设备，如锅炉、空气压缩机、空气净化系统、发酵罐等，故投资大，只适用于工厂化的大规模生产。
而摇瓶培养投资少，设备技术简单，适合一般菌种厂生产使用。
本节主要介绍摇瓶培养的技术方法。
1、食用菌液体发酵的培养基根据培养基中组成的不同，可分为天然培养基和合成培养基。
天然培养基的组成均为天然有机物。
合成培养基则是采用—些已知化学成分的营养物质作培养基。
在生产上，还根据工艺将培养基分为孢子培养基、种子培养基及发酵培养基。
但无论如何划分，每一种培养基的组成中都离不开碳、氮、无机盐、微量元素、维生素和生长素等。
1.1、碳、氮比(C/N)碳、氮比指碳源及氮源在培养基中的含量比。
构成菌丝细胞的碳、氮比通常是：8~12:1。
由于菌丝生长过程中，一般需50%的碳源作为能量供给菌丝呼吸，另50%的碳源组成菌体细胞。
因此培养基中理想碳、氮比的理论值为16~24:1。
在液体培养中以菌丝增殖为目的的培养，通常碳、氮比以20:1为宜。
虽然食用真菌的液体培养一般要求较高的碳与氮比，即C:N＝20:1左右生长较好，但许多菌种也能在较宽的碳、氮比范围内生长。
不同的菌种所要求合适的碳、氮比，可通过实验求得。
1.2、无机盐与微量元素许多无机盐及微量元素对菌种的生理过程的影响与其浓度有关。
不同的菌种，对无机盐及微量元素要求的最适浓度也不同。
1.2.1．磷磷是细胞中核酸、核蛋白等重要物质的组成部分，又是许多辅酶(或辅基)高能磷酸键的组成部分。
磷是食用菌液体发酵不可缺少的物质，常加入磷酸二氢钾以提供磷，加入量大约为0.1%~0.15%。
1.2.2．镁镁在细胞中起着稳定核蛋白、细胞膜和核酸的作用，而且是—些重要酶的活化剂，是食用真菌液体培养中不可缺少的营养成分。
一般通过加入硫酸镁以提供镁，浓度通常是0.05%~0.075%。
1.2.3．钾、钙、钠钾不参与细胞结构物质的构成，但控制原生质的胶态和细脑膜的透性。
钙离子与细胞透性有关。
钠离子能维持细胞渗透压，钠离子可以部分代替钾离子的作用。
三种物质需求量甚微，若采用天然培养基，可不必另加。
1.2.4．硫、铁硫是菌体细胞蛋白质的组成部分(胱氨酸、半胱氨酸及蛋氨酸中皆含硫)，铁是细胞色素、细胞色素氧化酶和过氧化氢酶的组成部分，亦是菌体有氧代谢中不可缺少的元素。
1.2.5．锌、锰、钴、铜锌、锰、钴等离子是某些酶的辅基或激活剂。
铜是多元酚氧化酶的活性基。
在配制培养基时应注意，镁和磷的添加不宜过多，否则会带来危害。
菌体对锌、锰、钴、铜等微量元素的需求量甚少，一般天然有机原料中均有，不必另加。
碳酸钙本身不溶于水，但可以调节培养其中的酸碱度。
磷酸盐与碳酸钙不宜混合灭菌，否则会形成不溶于水的磷酸盐，使可溶性的磷酸盐浓度大大降低。
1.3、维生素维生素在细胞中作为辅酶的成分，具有催化功能。
大多数食用真菌的培养都与B族维生素有关，维生素B1是目前已知对绝大多数食用真菌生长有利的维生素。
其适宜浓度在50~1000μg/L之间。
2、摇瓶振荡培养技术培养液配制好后，装入500mL容量的三角烧瓶中，每瓶装量为10 0mL，并加入0～15粒小玻璃珠，加棉塞后再包扎牛皮纸封口，在1.5k g/cm2压力下灭菌30分钟，取出冷却到30℃以下时，接入一块约2平方厘米的斜面菌种，于23℃～25℃下静置培养48小时，再置往复式摇床上振荡培养，振荡频率为80～100次/分，振幅6cm～10cm。
如果用旋转式摇床，振荡频率为200～220转／分。
摇床室温控制在24℃～2 5℃，培养时间因菌类不同而异，一般是在7天左右。
培养结束的标准是：培养液清澈透明，液中悬浮着大量小菌丝球，并伴有各种菇类特有的香味。
二、液体菌种的检验方法对液体菌种进行检验可采用感官检查和取样测验相结合的方法。
2.1. 感官检查可采用“看、旋、嗅”的步骤进行检查。
看：将样品静置桌上观察。
一看菌液颜色和透明度，正常发酵醪液呈黄色或黄褐色，清澈透明，菌丝颜色因菌种而异，老化后颜色变深；染杂菌的醪液则混浊不透明。
二看菌丝形态和大小，正常的菌丝大小一致，呈球状、片状、絮状或棒状，菌丝粗壮，线条分明；而染杂菌后，菌丝纤细，轮廓不清。
三看上清液与沉淀的比例，菌丝体占比例越大越好，较好的液体菌种，在瓶中所占比例可达80%左右。
四看pH值指标是否变色，在培养液中加入甲基红或复合指标剂，经3～5天颜色改变，说明培养液pH值到达4.0左右，为发酵点；如果在24小时内即变色，说明因杂菌快速生长而使培养液酸度剧变。
五看有无酵母线，如果在培养液与空气交界处的瓶壁上有灰色条状附着物，说明为酵母菌污染所致，此称为酵母线。
旋：手提样品瓶轻轻旋转一下，观其菌丝体的特点。
醪液的粘稠度高，说明菌种性能好；稀薄者表明菌球少，不宜使用。
菌丝的悬浮力好，放置5分钟不沉淀，表明菌种生长力强；反之，如果菌丝极易沉淀，说明菌丝已老化或死亡。
再次观其菌丝状态，大小不一，毛刺明显，表明是供氧不足；如果菌球缩小且光滑，或菌丝纤细并有自溶现象，说明污染了杂菌。
嗅：在旋转样品后，打开瓶盖嗅气味。
培养好的优质液体菌种，均具有芳香气味；而染杂菌的培养液则散发出酸、甜、霉、臭等各种异味。
2.2. 取样测验可取液体菌种进行称重检查和粘度检查；生长力测定和出菇试验；化学检查，包括测pH值、糖含量和氧含量等；显微检查，包括细胞分裂状态观察、普通染色和特殊染色等。
三、液体菌种的使用方法液体菌种可作原种使用，也可作栽培使用。
3.1. 作原种取一支100ml。
兽用注射器，去掉针尖，换一根内径1mm～2mm，长100mm～120mm的不锈钢钢管，制成一个菌种接种器。
使用前，洗净接种器并用纱布包好，经高压蒸汽灭菌，冷却后抽取液体菌种即可进行接种。
经灭菌待接入菌种的原种瓶，先要在无菌条件下去掉棉塞，并改换无菌薄膜包扎瓶口。
接种时，将针管插入瓶口上的薄膜，每瓶接种量为10mL～１5ml，要注意使液体菌种均匀分布在培养基表面，拔出针管后要立即用胶布贴封针孔，竖放在培养室的床架上进行培养。
3.2. 作栽培种或直接进行栽培液体菌种在作栽培使用时，瓶栽的每瓶接种量为10mL～15mL；熟料袋栽的每袋接种量为，小袋10mL～15mL，大袋的20mL～30mL；开放式床栽的，每平方米接种量为500mL～100 0mL，不需要接种针筒，可直接均匀洒在培养料面，或进行穴播。
在无菌的条件下把菌种投放到培养基里。
安装通气管后用输氧机给培养基输入氧气。
把培养基放置在摇床机上进行振荡培养。
食用菌液体菌种具有生产周期短、菌龄整齐一致、接种方便、发酵快、适宜于工厂化生产等优点。
食用菌液体菌种的生产方式一般可分为电磁搅拌法、摇瓶机法、简易深层发酵（吹氧）法、发酵罐法。
据省农科院食用菌站工作人员介绍，摇瓶机法不仅接种简单，管理方便，而且生产量根据机器的设定而不同，投资2000~3000元即可。
配制液体培养基先把马铃薯煮到熟而不烂时提取上清液，然后配制3%葡萄糖、1%玉米粉、0.05%硫酸镁、0.1%磷酸二氢钾，最后将马铃薯上清液和上述溶液及水混合即可。
液体培养基适用于多种食用菌菌种的培养。
摇瓶振荡培养液体培养基配制好后，装入容量为500毫升的三角烧瓶中，每瓶装入100毫升，并加入1～15粒小玻璃珠，瓶口用棉塞、牛皮纸密封，在1.5千克/平方厘米压强下灭菌30分钟。
然后投入一块约2平方厘米的斜面菌种，于23℃～25℃下静置培养24小时。
待菌丝萌发时再放置在往复式摇床上振荡培养，振荡频率为每分钟8 0～100次，振幅为6～10厘米。
摇床室的温度控制在24℃～25℃，培养时间因菌类不同而异，一般是5天左右。
将振荡好的培养基倒入大容器里，经过扩容后，在无菌条件下安装通气管，用输氧机通入适量氧气后培养48小时。
培养结束的标准：培养液清澈透明，其中悬浮着大量小菌丝球，并伴有各种菇类特有的香味。
培养好的液体菌种应放入培养箱中保存。