实验五 菌种组织分离法

实验五菌种组织分离法

目前食用菌主要栽培种类如平菇、香菇、草菇等生产上多采用组织分法制备菌种。

一、目的：

了解和掌握食用菌组织分离法的方法步骤，制备出栽培用菌种。

二、实验器材：

1、平菇或香菇等子实体。

2、接种箱、解剖剪、解剖刀、镊子、试管斜面、75%酒精、酒精棉球、无菌水、培养皿、紫外线灯、或硫磺。

三、实验方法：

1、菌种的选择：在出菇场要选择肉厚肥大、鲜嫩，出菇早、菇形整齐、菌柄短且无病害的做种。

2、将种菇表面用清水冲洗干净，放在接种箱（或无菌室内）进行表面消毒。用镊子将种菇放在培养皿内，用另一反镊子夹75%酒精棉球（或0.1%升汞棉球）对种菇进行表面消毒，然后移入另一培养皿内再用无菌水反复洗涤三次，洗净残留的消毒剂。

3、用解剖刀或鲜剖剪蘸酒精进行火焰消毒，冷却后把自己消毒的种菇纵切开，然后用菌盖笔菌柄交界处，切取长宽的0.3-0.5厘米的菌肉组织块，用接种针移到斜面培养基上，置24℃恒温箱中培养。

4、每天检查试管斜面菌落生长情况，如从分离的菌肉组织块上长出正常的白色菌丝，即分离成功，及时将生长出来的菌丝转移新的试管斜面。若在组织块附近或其他地方出现其他颜色杂菌生长应予以淘汰。

四、作业：

叙述组织分离的方法步骤，体会和注意事项，观察记载斜面菌落生长速度和成功率。