霍乱弧菌实验室检测培训课件
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霍乱弧菌实验室检测ppt课件
11.12.2020
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19
11.12.2020
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• 6.增菌培养6-8小时后，需要取胨水生长物再次观察动力 ，进行6-8小时动力报告。并转种到庆大霉素平板并放入 35℃孵箱中培养。在进行6-8小时动力报告时，需要先取 消之前的审核，在原报告单上进行审核（1505970005） 。
11.12.2020
0139霍乱弧菌，并认定为真正的霍乱弧菌。
三、不典型01群霍乱弧菌：可被多价01群血清所凝集，但该群 菌不产生肠毒素，因此无致病性
11.12.2020
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6
霍乱病原学特点
• 形态与染色
– 弧状或逗点状 – 革兰染色阴性 – 有一根单鞭毛，细菌运动非常活泼，呈鱼群穿梭样或流星状
11.12.2020
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7
霍乱实验室检测
2020/12/11
检验科
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1
霍乱病原菌发现
• 1883年德国科学家Koch发现霍乱弧菌 • 1 9 0 5 年埃及埃儿托检疫站首次分离到ElTor弧菌，与霍乱
弧菌甚为相似，但经过多年的观察并不致病或仅引起轻度 腹泻，直到1937-1958年发生4次爆发后才逐渐认识到 ElTor弧菌致病性 • 1992年10月印度马德拉斯发现了新菌型O139霍乱弧菌
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疑似菌落初步鉴定：
7.庆大平板培养18-24h后挑取可疑菌落进行动力观察， 如动力阴性，可进行最终阴性报告，如下图。
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11.12.20ห้องสมุดไป่ตู้0
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• 注意：
• 1.动力试验阴性，无需进行血清制动试验。 • 2.任何一次动力阳性，都需进行血清制动试验并
《霍乱弧菌检测》课件
苍蝇等昆虫可携带霍乱弧菌， 短暂接触食物即可造成污染。
霍乱的危害与影响
腹泻与脱水
霍乱导致剧烈腹泻，严重时引 起脱水、电解质紊乱。
休克与死亡
严重病例可能出现休克甚至死 亡，尤其是儿童和老年人。
社会经济影响
霍乱的爆发和流行对当地经济 和社会秩序造成严重影响，如 交通中断、旅游业受挫等。
公共卫生挑战
霍乱的频繁爆发增加了公共卫 生负担，对防控体系提出了更
国际卫生组织（WHO）标准
01
WHO发布了《霍乱弧菌检测指南》，规定了霍乱弧菌的检测方
法、诊断标准及疫情报告要求。
世界动物卫生组织（OIE）标准
Байду номын сангаас
02
OIE制定了《霍乱弧菌检测操作手册》，适用于动物源霍乱的检
测和诊断。
国际标准化组织（ISO）标准
03
ISO发布了一系列与霍乱弧菌检测相关的标准，如ISO 16140-2
高的要求。
02
霍乱弧菌检测方法
常规检测方法
01
02
03
培养法
将样品接种于选择性培养 基上，培养后进行菌落筛 选和鉴定。
显微镜检查
直接观察样品中的弧菌形 态和运动性。
生化试验
对分离的菌株进行生化反 应检测，以确定其属性和 种别。
快速检测方法
免疫学方法
利用特异性抗体检测弧菌抗原， 如ELISA、免疫荧光等。
等，为各国制定相关标准提供了参考。
国内检测规范
国家卫生健康委员会标准
我国卫生部门制定了《霍乱弧菌检测技术规范》，规范了霍乱弧 菌的采样、运输、检测和报告等环节。
农业农村部标准
农业部门针对动物源霍乱弧菌的检测制定了相关规范，如《动物霍 乱弧菌检测技术规范》。
霍乱的危害与影响
腹泻与脱水
霍乱导致剧烈腹泻，严重时引 起脱水、电解质紊乱。
休克与死亡
严重病例可能出现休克甚至死 亡，尤其是儿童和老年人。
社会经济影响
霍乱的爆发和流行对当地经济 和社会秩序造成严重影响，如 交通中断、旅游业受挫等。
公共卫生挑战
霍乱的频繁爆发增加了公共卫 生负担，对防控体系提出了更
国际卫生组织（WHO）标准
01
WHO发布了《霍乱弧菌检测指南》，规定了霍乱弧菌的检测方
法、诊断标准及疫情报告要求。
世界动物卫生组织（OIE）标准
Байду номын сангаас
02
OIE制定了《霍乱弧菌检测操作手册》，适用于动物源霍乱的检
测和诊断。
国际标准化组织（ISO）标准
03
ISO发布了一系列与霍乱弧菌检测相关的标准，如ISO 16140-2
高的要求。
02
霍乱弧菌检测方法
常规检测方法
01
02
03
培养法
将样品接种于选择性培养 基上，培养后进行菌落筛 选和鉴定。
显微镜检查
直接观察样品中的弧菌形 态和运动性。
生化试验
对分离的菌株进行生化反 应检测，以确定其属性和 种别。
快速检测方法
免疫学方法
利用特异性抗体检测弧菌抗原， 如ELISA、免疫荧光等。
等，为各国制定相关标准提供了参考。
国内检测规范
国家卫生健康委员会标准
我国卫生部门制定了《霍乱弧菌检测技术规范》，规范了霍乱弧 菌的采样、运输、检测和报告等环节。
农业农村部标准
农业部门针对动物源霍乱弧菌的检测制定了相关规范，如《动物霍 乱弧菌检测技术规范》。
2024年霍乱培训课件(版)
霍乱培训课件(附件版)霍乱培训课件一、引言霍乱是一种由霍乱弧菌引起的急性肠道传染病，主要通过污染的水源和食物传播。
霍乱在全球范围内均有发生，尤其在发展中国家，因其高传染性和潜在的严重后果，成为重要的公共卫生问题。
本课件旨在提供关于霍乱的基本知识，包括病原学、流行病学、临床表现、诊断、治疗和预防等方面的信息，以提高公众和医务工作者对霍乱的认识和应对能力。
二、病原学霍乱弧菌是一种革兰氏阴性细菌，属于弧菌科。
霍乱弧菌分为多个血清群，其中O1群和O139群是引起霍乱的主要病原体。
霍乱弧菌通过粪-口途径传播，即通过摄入被患者粪便污染的水源或食物而感染。
三、流行病学霍乱是全球范围内的公共卫生问题，尤其在发展中国家。
霍乱疫情通常发生在夏秋季节，尤其在气温较高、湿度较大的地区。
霍乱的主要传播途径是污染的水源和食物，尤其在缺乏安全饮用水和卫生设施的地区。
霍乱的影响因素包括人口密度、社会经济状况、卫生设施等。
四、临床表现霍乱的临床表现主要包括急性腹泻、呕吐和脱水。
病情发展迅速，严重者可出现循环衰竭和电解质紊乱。
典型病例的腹泻呈米泔水样，伴有剧烈的腹痛和里急后重感。
脱水和电解质失衡可导致心动过速、低血压、皮肤干燥、口渴等表现。
五、诊断霍乱的诊断主要依据临床表现、实验室检查和流行病学史。
实验室检查包括粪便涂片镜检、粪便培养、血清学检测等。
粪便涂片镜检可检测到霍乱弧菌的存在，粪便培养可分离出病原体。
血清学检测可用于检测患者血清中的抗体。
六、治疗霍乱的治疗主要包括补液和电解质平衡、抗生素治疗和并发症的处理。
补液和电解质平衡是治疗霍乱的关键，可通过口服补液盐或静脉输液来实现。
抗生素治疗可缩短病程和减少腹泻量，常用的抗生素包括四环素、氨苄西林等。
并发症的处理包括抗休克、纠正电解质紊乱等。
七、预防1.提高公众卫生意识，加强个人卫生习惯，如勤洗手、不喝生水、不吃生食等。
2.改善环境卫生设施，提供安全饮用水和卫生设施，减少污染源。
3.加强食品卫生监管，确保食品安全。
霍乱弧菌实验室检验技术PPT课件
骨可以改善融合率。加拿大一项 4 年的研究结果发现
rhBMP-2的融合率（94％）高于髂骨植骨组（69％）。另
一项研究发现联合应用 “ INFUSE ” + 自体髂骨”可以提
高椎间融合率（> 95％）。65岁以上的老年患者与年轻患
者使用rhBMP-2，二者的并发症发生率并没有太大差异。
+ 椎间盘置换术
在过去的几年内，有2种新型的人工椎间盘装置获得了美国
FDA 的批准，其适应症是单节段脊髓神经根病，还有1种装置同
时适用于单节段或者双节段的病变。这3种人工椎间盘装置的临 床功能预后和安全性和其他已经批准上市的人工椎间盘类似。
+ 椎间盘置换术
已获得上市的人工椎间盘 7-9 年的随访显示其具有较好的预 后，和融合手术相比，其邻近节段退变而导致的再手术率较低。
但是，人工椎间盘也有其潜在的缺点，如边缘撞击造成的椎间盘
装置磨损，由此而形成的磨损碎屑的炎症反应等，目前报道这类
并发症的发生率较少。美国医疗保险数据库的调查发现，使用人
工椎间盘的花费要少于融合手术，可能与术后较少的再手术率和 术后较少的费用相关。
+ 2013 年脊柱生物学研究的焦点在重组人骨形态发生蛋白
+ 过去数十年间，有3种人工椎间盘获得了相关监管机构的批
准，其长期随访取得了较为满意的结果。
+ 脊髓型颈椎病
Fehling 等人报道一项对 222 例脊髓型颈椎病患者进行了术后 1 年随访的多中心观察研究，结果发现术后疼痛、功能、步态、 生活质量等可以获得较好的改善。 作者认为：前后路手术效果无显著差异；多因素分析显示， 临床功能预后较差有关的因素包括：症状持续时间长，术前较差 的基础功能，合并有精神疾病，严重步态障碍，较高的年龄等。
rhBMP-2的融合率（94％）高于髂骨植骨组（69％）。另
一项研究发现联合应用 “ INFUSE ” + 自体髂骨”可以提
高椎间融合率（> 95％）。65岁以上的老年患者与年轻患
者使用rhBMP-2，二者的并发症发生率并没有太大差异。
+ 椎间盘置换术
在过去的几年内，有2种新型的人工椎间盘装置获得了美国
FDA 的批准，其适应症是单节段脊髓神经根病，还有1种装置同
时适用于单节段或者双节段的病变。这3种人工椎间盘装置的临 床功能预后和安全性和其他已经批准上市的人工椎间盘类似。
+ 椎间盘置换术
已获得上市的人工椎间盘 7-9 年的随访显示其具有较好的预 后，和融合手术相比，其邻近节段退变而导致的再手术率较低。
但是，人工椎间盘也有其潜在的缺点，如边缘撞击造成的椎间盘
装置磨损，由此而形成的磨损碎屑的炎症反应等，目前报道这类
并发症的发生率较少。美国医疗保险数据库的调查发现，使用人
工椎间盘的花费要少于融合手术，可能与术后较少的再手术率和 术后较少的费用相关。
+ 2013 年脊柱生物学研究的焦点在重组人骨形态发生蛋白
+ 过去数十年间，有3种人工椎间盘获得了相关监管机构的批
准，其长期随访取得了较为满意的结果。
+ 脊髓型颈椎病
Fehling 等人报道一项对 222 例脊髓型颈椎病患者进行了术后 1 年随访的多中心观察研究，结果发现术后疼痛、功能、步态、 生活质量等可以获得较好的改善。 作者认为：前后路手术效果无显著差异；多因素分析显示， 临床功能预后较差有关的因素包括：症状持续时间长，术前较差 的基础功能，合并有精神疾病，严重步态障碍，较高的年龄等。
霍乱弧菌实验室检验技术PPT医学课件
2024/1/24
快速诊断初步报告
1、快诊断实验阳性者同时涂片染色和悬 滴法观察，如镜检为革兰染色阴性弧菌 或悬滴细菌呈“鱼群穿梭样”运动，氧 化酶试验阳性，可作初诊报告。为开展 疫情处理提供依据；
2024/1/24
制动试验
暗视野/相差显微镜直接镜检，水样便滴 在玻片上，可见流星状动力的细菌；当 加入01/0139免疫血清后，运动停止即凝 集成块，根据这种特殊动力和制动试验， 可提早做出初步诊断。
注意：免疫血清使用浓度1：64，并尽可 能不加防腐剂
2024/1/24
胶体金免疫层析快诊
采用胶体金免疫层析双抗体夹心法， 检测标本中霍乱弧菌。以胶体金作 为标记物，交联抗霍乱弧菌单克隆 抗体，与样品中的霍乱弧菌结合。 形成双抗体夹心一步法，呈现出目 测可见的红色条带，显色程度与抗 原含量成正比。
霍乱实验室检测技术
2024/1/24
内容
一、霍乱概述 二、霍乱病原学 三、霍乱弧菌常规检验 四、霍乱弧菌的快速诊断 五、霍乱弧菌的噬菌体-生物分型 六、霍乱菌株的管理、保存与上送
2024/1/24
一、霍乱概述
霍乱是由01群和0139群霍乱弧菌 （V．cholerae）引起的急性肠道传染 病，发病急、传播速度快、波及范 围广、危害严重的甲类传染病。
增菌/二次增菌分离培养 所有粪便标本都 应接种碱性蛋白胨水培养基，放37℃增 菌6～8h后，从菌膜下表层取一接种环培 养物，划线接种于强选择性碱性琼脂和 TCBS琼脂平板各两个。必要时进行二次 增菌
2024/1/24
疑似菌落初步鉴定：
每个碱性琼脂、TCBS琼脂平板上各挑取 5个以上(少于5个的全部挑取)疑似菌落接 种于营养琼脂平板/营养琼脂斜面或克氏 双糖置37℃18-24h纯培养(即每份样品至 少从2个分离平板上获得约10株可疑菌落 菌株)，取斜面纯培养物进行血清鉴定、 并涂片进行革兰氏染色及氧化酶试验等。
快速诊断初步报告
1、快诊断实验阳性者同时涂片染色和悬 滴法观察，如镜检为革兰染色阴性弧菌 或悬滴细菌呈“鱼群穿梭样”运动，氧 化酶试验阳性，可作初诊报告。为开展 疫情处理提供依据；
2024/1/24
制动试验
暗视野/相差显微镜直接镜检，水样便滴 在玻片上，可见流星状动力的细菌；当 加入01/0139免疫血清后，运动停止即凝 集成块，根据这种特殊动力和制动试验， 可提早做出初步诊断。
注意：免疫血清使用浓度1：64，并尽可 能不加防腐剂
2024/1/24
胶体金免疫层析快诊
采用胶体金免疫层析双抗体夹心法， 检测标本中霍乱弧菌。以胶体金作 为标记物，交联抗霍乱弧菌单克隆 抗体，与样品中的霍乱弧菌结合。 形成双抗体夹心一步法，呈现出目 测可见的红色条带，显色程度与抗 原含量成正比。
霍乱实验室检测技术
2024/1/24
内容
一、霍乱概述 二、霍乱病原学 三、霍乱弧菌常规检验 四、霍乱弧菌的快速诊断 五、霍乱弧菌的噬菌体-生物分型 六、霍乱菌株的管理、保存与上送
2024/1/24
一、霍乱概述
霍乱是由01群和0139群霍乱弧菌 （V．cholerae）引起的急性肠道传染 病，发病急、传播速度快、波及范 围广、危害严重的甲类传染病。
增菌/二次增菌分离培养 所有粪便标本都 应接种碱性蛋白胨水培养基，放37℃增 菌6～8h后，从菌膜下表层取一接种环培 养物，划线接种于强选择性碱性琼脂和 TCBS琼脂平板各两个。必要时进行二次 增菌
2024/1/24
疑似菌落初步鉴定：
每个碱性琼脂、TCBS琼脂平板上各挑取 5个以上(少于5个的全部挑取)疑似菌落接 种于营养琼脂平板/营养琼脂斜面或克氏 双糖置37℃18-24h纯培养(即每份样品至 少从2个分离平板上获得约10株可疑菌落 菌株)，取斜面纯培养物进行血清鉴定、 并涂片进行革兰氏染色及氧化酶试验等。
2024版《霍乱培训》课件
易感人群
人群普遍易感，胃酸缺乏者尤其易感。 2024/1/24
流行特征
霍乱呈世界性分布，在卫生条件差、水源不 洁的地区易发生流行。全年均可发病，但以 夏秋季为流行高峰。
至5天，通常2～3天。
临床表现
起病急骤，剧烈腹泻、呕吐，排出大 量米泔样排泄物，严重脱水，肌肉痉 挛及周围循环衰竭。
维护全球公共卫生安全。
31
THANKS
感谢观看
2024/1/24
32
实验室检查
包括粪便常规、细菌培养、 血清学检测等。
鉴别诊断
需与其他原因引起的腹泻 相鉴别，如细菌性痢疾、 伤寒、副伤寒等。
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02
霍乱预防与控制策略
2024/1/24
8
预防措施与建议
加强个人卫生
保持手部清洁，饭前便后 洗手；不喝生水，食物要 煮熟煮透；生熟食品分开 存放和加工。
2024/1/24
改善环境卫生
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疫情监测与报告制度
疫情监测
建立灵敏、准确的疫情监测体系，及 时发现和报告霍乱病例。
报告制度
医疗机构发现霍乱病例后，应按照相关 规定及时上报，同时做好病例的调查和 处置工作。
2024/1/24
11
控制传播途径和消灭传染源
控制传播途径
加强食品卫生监管，防止食品污染；加强水源保护，确保饮用水安全；加强环境卫 生整治，减少环境污染。
分型
根据病情轻重可分为轻型、中型和重 型。
2024/1/24
轻型
仅有轻度腹泻，无脱水表现。
中型
腹泻次数较多，有脱水表现，但无周 围循环衰竭。
重型
腹泻严重，出现脱水、周围循环衰竭 及急性肾衰竭等表现。
2024版年度霍乱专题教育培训ppt课件
吸浅促、不规则或出现暂停，神志不清或昏迷，须与脱水性休克鉴别。
6
诊断标准及鉴别诊断
2024/2/3
诊断标准
根据患者的流行病学史、临床表现及实验室检查结果进行综合分析，确定诊断。在 特殊情况下，如无典型临床症状，但有明确的流行病学史和病原学证据，也可诊断 为霍乱。
鉴别诊断
霍乱应与各种细菌性食物中毒、急性菌痢、病毒性胃肠炎、大肠杆菌性肠炎等鉴别。 这些疾病虽然也有腹泻症状，但病原体不同，临床表现和流行病学特征也有明显区 别。通过病原学检查和血清学检测等方法可以进行鉴别诊断。
感谢观看
2024/2/3
33
霍乱专题教育培训ppt课件
2024/2/3
1
目录
2024/2/3
• 霍乱概述 • 霍乱疫情防控策略 • 实验室检查与诊断技术 • 临床治疗与护理要点 • 公共卫生宣传教育工作 • 总结回顾与展望未来
2
01
霍乱概述
2024/2/3
3
定义与发病机制
定义
霍乱是由霍乱弧菌引起的急性肠道传 染病，以发病急、传播快、波及面广、 危害严重为特征。
配备生物安全柜等防护设备。
2024/2/3
个人防护措施
实验人员应穿戴防护服、手套、 口罩等个人防护用品，并严格遵 守实验室操作规程。
废弃物处理要求
实验废弃物应进行分类处理，严 格消毒灭菌，避免交叉污染和环 境污染。
实验室管理要求
建立健全实验室安全管理制度和 应急预案，加强实验人员培训和 考核，确保实验室安全稳定运行。
31
提高自身防范意识
增强个人卫生习惯
勤洗手、保持环境清洁、养成良好的个人卫 生习惯。
注意饮食卫生
避免食用不洁食品，特别是海鲜类食品要煮 熟煮透。
2024版霍乱培训PPT课件
增强个人防护意识
加强个人卫生习惯的培养，提倡饭 前便后洗手、不喝生水、不吃不洁 食品等健康行为。
11
加强宣传教育
开展健康教育活动
通过多种形式开展霍乱防治知识宣传 教育活动，提高公众对霍乱的认识和 自我防护能力。
加强媒体宣传
利用电视、广播、报纸、网络等媒体平 台，广泛宣传霍乱防治知识和政策措施， 营造良好的社会氛围。
2024/1/26
识别疑似病例
根据症状、体征和流行病学史，快速识别疑似霍乱病例。
报告疫情
立即向当地疾病预防控制机构报告，启动应急响应机制。
实施隔离
将疑似病例和密切接触者进行隔离，减少疫情传播风险。
19
患者转运和隔离观察要求
患者转运
使用专用车辆将患者转运至定点医疗机构，确保转运过程中患者安 全。
隔离观察
易感人群
人群普遍易感，但儿童、 老年人、孕妇及免疫力低 下者更易感染。
5
临床表现与分型
临床表现
潜伏期数小时至5天，多数为1～2天。典型病例可分为泻吐期、脱水期和恢复期。泻吐 期主要表现为无痛性剧烈腹泻和喷射状呕吐，米泔水样便，量多，无里急后重；脱水期 由于剧烈泻吐导致大量水分和电解质丢失，出现脱水、肌肉痉挛、循环衰竭和急性肾衰
竭等严重并发症；恢复期患者症状逐渐缓解，但仍有部分患者因并发症而死亡。
分型
根据临床表现可分为轻型、中型和重型三种类型。轻型患者症状较轻，中型患者症状明 显，重型患者则出现严重脱水、休克等并发症。
2024/1/26
6
诊断标准及鉴别诊断
2024/1/26
诊断标准
根据流行病学史、临床表现和实验室检查结果进行诊断。具体 标准包括：有流行病学史；出现无痛性剧烈腹泻和喷射状呕吐 等典型症状；粪便或呕吐物中检出霍乱弧菌；血清抗体检测阳 性等。
加强个人卫生习惯的培养，提倡饭 前便后洗手、不喝生水、不吃不洁 食品等健康行为。
11
加强宣传教育
开展健康教育活动
通过多种形式开展霍乱防治知识宣传 教育活动，提高公众对霍乱的认识和 自我防护能力。
加强媒体宣传
利用电视、广播、报纸、网络等媒体平 台，广泛宣传霍乱防治知识和政策措施， 营造良好的社会氛围。
2024/1/26
识别疑似病例
根据症状、体征和流行病学史，快速识别疑似霍乱病例。
报告疫情
立即向当地疾病预防控制机构报告，启动应急响应机制。
实施隔离
将疑似病例和密切接触者进行隔离，减少疫情传播风险。
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患者转运和隔离观察要求
患者转运
使用专用车辆将患者转运至定点医疗机构，确保转运过程中患者安 全。
隔离观察
易感人群
人群普遍易感，但儿童、 老年人、孕妇及免疫力低 下者更易感染。
5
临床表现与分型
临床表现
潜伏期数小时至5天，多数为1～2天。典型病例可分为泻吐期、脱水期和恢复期。泻吐 期主要表现为无痛性剧烈腹泻和喷射状呕吐，米泔水样便，量多，无里急后重；脱水期 由于剧烈泻吐导致大量水分和电解质丢失，出现脱水、肌肉痉挛、循环衰竭和急性肾衰
竭等严重并发症；恢复期患者症状逐渐缓解，但仍有部分患者因并发症而死亡。
分型
根据临床表现可分为轻型、中型和重型三种类型。轻型患者症状较轻，中型患者症状明 显，重型患者则出现严重脱水、休克等并发症。
2024/1/26
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诊断标准及鉴别诊断
2024/1/26
诊断标准
根据流行病学史、临床表现和实验室检查结果进行诊断。具体 标准包括：有流行病学史；出现无痛性剧烈腹泻和喷射状呕吐 等典型症状；粪便或呕吐物中检出霍乱弧菌；血清抗体检测阳 性等。
霍乱培训资料PPT课件
病死率高
霍乱的危害与影响
02
霍乱的症状与诊断
腹泻
呕吐
脱水
肌肉痉挛
霍乱的症状Biblioteka 010203
04
突然出现的水样便，每日数次至数十次，量多，带大量泡沫和米泔水样沉淀物。
通常在腹泻后出现，多为喷射状，呕吐物也为米泔水样。
由于腹泻和呕吐导致的电解质丢失和缺水，表现为口渴、尿少、皮肤干燥、眼窝凹陷等。
由于电解质丢失引起的肌肉痉挛和抽搐。
如何正确洗手
总结词
食物和水是霍乱等肠道传染病的主要传播途径之一，因此正确处理食物和水是预防霍乱的关键。
详细描述
食物应妥善保存，避免污染。食物应存放在清洁、干燥的地方，并避免与可能污染的食物接触。食物应彻底煮熟，尤其是海鲜、肉类和蛋类等易携带病原体的食物。此外，水果和蔬菜也应清洗干净后再食用。
如何正确处理食物和水
详细描述
在无法用水洗手的情况下，可以使用含有至少60%酒精的手部消毒液进行清洁。但需要注意的是，酒精不能代替洗手，最好还是尽快找到水源进行清洗。
详细描述
在接触食物、患者、动物或其排泄物后，以及在处理完垃圾、上完厕所后，都应该立即用肥皂和清水彻底清洗手部至少20秒。确保清洗到手指尖，并特别注意清洁指甲缝和手腕部分。
谢谢观看
霍乱是由霍乱弧菌引起的急性腹泻性疾病，具有发病急、传播快、波及范围广的特点。
患者和带菌者是霍乱的主要传染源，通过污染的水源或食物经口摄入，经污染鱼、虾等水产品引起传播。
霍乱在热带和亚热带地区流行，但可因旅游、贸易、移民等传入非流行地区。
霍乱的流行病学特征
霍乱的防控策略
建立健全腹泻病监测系统，提高早期发现和快速处理能力。
霍乱的预防措施
霍乱的实验室检测培训课件
霍乱的实验室检测
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霍乱弧菌的分离与鉴定
2、样本的送检
采得的标本应立即接种于培养基，不能立即接种 的，应放入PH值8.8-9.0碱性蛋白胨水或文腊二 氏保存液或插入Carry-Blair半固体保存培养基 中送检。
标本与保存液的比例约为1:5。
病人标本含有大量病菌，标本装入试管或小瓶时， 注意勿污染容器口外壁，必须妥善包装，运送中 注意安全。
霍乱实验室诊断的相关实验技术
1、霍乱弧菌基因PCR检测
霍乱毒素是霍乱弧菌主要的致病因子，在霍乱诊断 上霍乱毒素基因（ctxAB）的PCR检测具有重要 的诊断价值。
特异性和灵敏度均较高， 需符合PCR试验条件的实验室， 需要严格的核酸提取操作， 直接检测是否为产毒株。
霍乱的实验室检测
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霍乱实验室诊断的相关实验技术
霍乱的实验室检测
15
霍乱弧菌的分离与鉴定
4、菌株鉴定
4.4 菌株复核
经初筛阳性或可疑阳性的菌株，应尽快送当地疾病 预防控制中心进行复核鉴定。
复核结果符合O1群或O139群霍乱弧菌的菌株， 按菌株管理的要求进行保存与上送；如复核结果出 现疑问，应尽快将菌株上送省级或省级以上CDC进 行确认分析。
霍乱的实验室检测
O139群霍乱弧菌的形态及运动与O1群霍乱弧菌 近似，但是O139群霍乱弧菌菌体周围有一层比较 薄的荚膜。
霍乱的实验室检测
Байду номын сангаас11
霍乱弧菌的分离与鉴定
4、菌株鉴定
霍乱弧菌纯培养的镜下形态（革兰染色）
霍乱的实验室检测
12
霍乱弧菌的分离与鉴定
4、菌株鉴定
4.2 玻片凝集试验
取纯培养物与O1群霍乱弧菌诊断用单克隆抗 体或O1群多价诊断血清及O139群霍乱弧菌诊断 用单克隆抗体或诊断血清做玻片凝集试验。
霍乱弧菌的分离与鉴定、霍乱诊断的相关实验技术、鉴别诊断.pptx
4.3菌株复核
菌株的复核鉴定应以纯培养物为基础，至少应包括以下项目：革兰染色、黏丝试验、氧化酶试验、血清分型、 动力试验、CT毒素基因检测（按附录B）,也可选择生化鉴定条或全自动微生物生化鉴定系统。凝集反应不典型或者 怀疑为彦岛型的菌株应增做试管凝集试验。菌株血清群的鉴定也可用聚合酹链式反应（PCR）方法扩增01群和0139 血清群脂多糖特异性基因力来确定（按附录B）。
C.2.1肠产毒性大肠埃希菌（ETEC）性肠炎
潜伏期4h〜24h,有发热、恶心呕吐及腹部绞痛，腹泻呈黄水或清水样便，无脓血便,严重腹泻者亦可产生重度脱 水，婴幼患儿常因此而危及生命。
C.2.2肠致病性大肠埃希菌（EPEC）性肠炎
主要症状为腹泻，大便为黄色和黄绿色蛋花样稀水便，量较多，常有特殊腥臭味，重症者可有脱水等全身症状 。
A.2标本的送检
采得的标本应立即接种于培养基，不能立即接种的，应放入pH8.4〜9.2的碱性蛋白陈水或文腊二氏保存液或插 入Cary-Blail•半固体保存培养基中，放置于冷藏箱内保存、送检。粪便或呕吐物等标本与运送培养基或增菌液的比例 约为1:10,肛拭子应插入5m1.运送培养基或增菌液中。
A.3分离培养
诺如病毒感染在各年龄人群普遍易感，可引起暴发流行，是成人病毒性腹泻的首位病原体。临床症状主要以腹 泻和呕吐为主，水样便或稀便多见，可伴有腹痛、恶心、纳差、乏力、低至中度发热等。粪便标本诺如病毒检测阳 性。
C.6急性细菌性痢疾
由志贺菌引起，潜伏期Id〜2d,起病急，以发热、腹痛、腹泻、里急后重、脓血便为主要特征，有全身感染中毒 症状。重症患者可伴有头痛、全身肌肉酸痛甚至惊厥，可出现脱水和电解质紊乱相关症状。不典型的急性细菌性痢 疾以婴儿多见，多无全身中毒症状、不发热或低热，腹痛较轻，粪便呈水样或稀糊样，含少量黏液，左下腹可有压 痛，应注意鉴别。急性中毒性细菌性痢疾可出现高热，在儿童患者早期即可出现烦躁、谐妄、惊厥等，发病初期肠 道症状不明显。成人患者主要表现为黏液脓血便频繁，呈里急后重。从粪便或肛拭标本等检出志贺菌可确诊。
菌株的复核鉴定应以纯培养物为基础，至少应包括以下项目：革兰染色、黏丝试验、氧化酶试验、血清分型、 动力试验、CT毒素基因检测（按附录B）,也可选择生化鉴定条或全自动微生物生化鉴定系统。凝集反应不典型或者 怀疑为彦岛型的菌株应增做试管凝集试验。菌株血清群的鉴定也可用聚合酹链式反应（PCR）方法扩增01群和0139 血清群脂多糖特异性基因力来确定（按附录B）。
C.2.1肠产毒性大肠埃希菌（ETEC）性肠炎
潜伏期4h〜24h,有发热、恶心呕吐及腹部绞痛，腹泻呈黄水或清水样便，无脓血便,严重腹泻者亦可产生重度脱 水，婴幼患儿常因此而危及生命。
C.2.2肠致病性大肠埃希菌（EPEC）性肠炎
主要症状为腹泻，大便为黄色和黄绿色蛋花样稀水便，量较多，常有特殊腥臭味，重症者可有脱水等全身症状 。
A.2标本的送检
采得的标本应立即接种于培养基，不能立即接种的，应放入pH8.4〜9.2的碱性蛋白陈水或文腊二氏保存液或插 入Cary-Blail•半固体保存培养基中，放置于冷藏箱内保存、送检。粪便或呕吐物等标本与运送培养基或增菌液的比例 约为1:10,肛拭子应插入5m1.运送培养基或增菌液中。
A.3分离培养
诺如病毒感染在各年龄人群普遍易感，可引起暴发流行，是成人病毒性腹泻的首位病原体。临床症状主要以腹 泻和呕吐为主，水样便或稀便多见，可伴有腹痛、恶心、纳差、乏力、低至中度发热等。粪便标本诺如病毒检测阳 性。
C.6急性细菌性痢疾
由志贺菌引起，潜伏期Id〜2d,起病急，以发热、腹痛、腹泻、里急后重、脓血便为主要特征，有全身感染中毒 症状。重症患者可伴有头痛、全身肌肉酸痛甚至惊厥，可出现脱水和电解质紊乱相关症状。不典型的急性细菌性痢 疾以婴儿多见，多无全身中毒症状、不发热或低热，腹痛较轻，粪便呈水样或稀糊样，含少量黏液，左下腹可有压 痛，应注意鉴别。急性中毒性细菌性痢疾可出现高热，在儿童患者早期即可出现烦躁、谐妄、惊厥等，发病初期肠 道症状不明显。成人患者主要表现为黏液脓血便频繁，呈里急后重。从粪便或肛拭标本等检出志贺菌可确诊。
霍乱病情介绍演示培训课件
复。
中型霍乱
症状较为明显，腹泻次数增多，伴 有呕吐和中等程度的脱水，需要及 时补液治疗。
重型霍乱
症状严重，腹泻和呕吐频繁，脱水 严重，可能出现休克、肾衰竭等严 重并发症，危及生命。
03
治疗原则及措施
抗菌药物治疗策略
1 2 3
早期、足量、联合使用抗菌药物
在确诊霍乱后，应立即开始使用敏感的抗菌药物 ，如四环素、多西环素等，以迅速控制病情。
国际合作与援助
报告强调了国际合作在应对霍乱疫情中的重要性，介绍了 各国在疫苗研发、技术援助、资金支持等方面的合作情况 。
当前存在问题和挑战分析
疫苗研发与接种问题
当前霍乱疫苗的研发和接种仍存在诸多问题，如疫苗保护期限短、 接种覆盖率不足等，这些问题限制了疫苗在防控霍乱中的作用。
水源污染与治理难题
霍乱病毒主要通过污染的水源传播，而水源污染治理是一个长期且 艰巨的任务，需要投入大量的人力、物力和财力。
根据病情调整补液方案
密切观察病情变化
在补液治疗过程中，应密切观察患者 的病情变化，及时调整补液速度和补 液量，确保治疗效果。
根据患者的脱水程度、电解质失衡情 况和心功能等因素，制定合理的补液 方案，避免补液不足或过量。
并发症预防与处理
预防并发症的发生
积极治疗原发病，加强护理和营养支持，提高患者的免疫力，以 降低并发症的发生率。
根据病情调整用药方案
根据患者的年龄、病情严重程度和病原菌的耐药 性等因素，制定合理的用药方案，确保治疗效果 。
密切观察疗效和副作用
在使用抗菌药物治疗过程中，应密切观察患者的 病情变化及药物副作用，及时调整治疗方案。
液体复苏与电解质平衡调整
及时补充液体和电解质
中型霍乱
症状较为明显，腹泻次数增多，伴 有呕吐和中等程度的脱水，需要及 时补液治疗。
重型霍乱
症状严重，腹泻和呕吐频繁，脱水 严重，可能出现休克、肾衰竭等严 重并发症，危及生命。
03
治疗原则及措施
抗菌药物治疗策略
1 2 3
早期、足量、联合使用抗菌药物
在确诊霍乱后，应立即开始使用敏感的抗菌药物 ，如四环素、多西环素等，以迅速控制病情。
国际合作与援助
报告强调了国际合作在应对霍乱疫情中的重要性，介绍了 各国在疫苗研发、技术援助、资金支持等方面的合作情况 。
当前存在问题和挑战分析
疫苗研发与接种问题
当前霍乱疫苗的研发和接种仍存在诸多问题，如疫苗保护期限短、 接种覆盖率不足等，这些问题限制了疫苗在防控霍乱中的作用。
水源污染与治理难题
霍乱病毒主要通过污染的水源传播，而水源污染治理是一个长期且 艰巨的任务，需要投入大量的人力、物力和财力。
根据病情调整补液方案
密切观察病情变化
在补液治疗过程中，应密切观察患者 的病情变化，及时调整补液速度和补 液量，确保治疗效果。
根据患者的脱水程度、电解质失衡情 况和心功能等因素，制定合理的补液 方案，避免补液不足或过量。
并发症预防与处理
预防并发症的发生
积极治疗原发病，加强护理和营养支持，提高患者的免疫力，以 降低并发症的发生率。
根据病情调整用药方案
根据患者的年龄、病情严重程度和病原菌的耐药 性等因素，制定合理的用药方案，确保治疗效果 。
密切观察疗效和副作用
在使用抗菌药物治疗过程中，应密切观察患者的 病情变化及药物副作用，及时调整治疗方案。
液体复苏与电解质平衡调整
及时补充液体和电解质
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▪ 分离培养（两管两板法）：
接种后的碱性蛋白胨水37℃培养过夜，取菌膜下表层培养物接种选择性培养 基（庆大／四号／ＴＣＢＳ平板）．同时吸0.1～0.2 ml表层培养物转种于 3/11/210201ml碱性胨水管中作二次霍增乱菌弧菌，实3验7室℃检培测 养6～8h再划线接种于选择性8培养基 （庆大／四号／ＴＣＢＳ平板）。
▪ 分离培养要点（十倍浓缩碱胨水增菌培养法）：
取450ml水样，用1M 氢氧化钠调整至pH 8.4-9.2。然后加10倍浓缩碱性 胨水50ml。再加入1%亚碲酸钾0.25～0.5 ml和1000单位/ ml青霉素1 ml。 37℃培养过夜，取菌膜下表层培养物接种选择性培养基（庆大／四号／ ＴＣＢＳ平板）分离培养，同时吸0.1～0.2 ml表层培养物转种于碱性胨 水管中作二次增菌，37℃培养6～8h再划线接种于选择性培养基（庆大／ 四号／ＴＣＢＳ平板）。
▪ 分离培养要点（两管三板法）：
➢挑取粪便，直接接种于碱性蛋白胨水（第一管）中，同时划线分离选择 性平板（庆大／四号／ＴＣＢＳ平板，第一板）。
➢第一管碱性蛋白胨水在３７ ℃增菌６－８小时，沾取菌膜下表层液体， 划线分离选择性平板（庆大／四号／ＴＣＢＳ平板，第二板），同时吸取 0.1～0.2 ml表层培养物，接种碱性蛋白胨水（第二管）。
▪ 目的:提高检出率,减少漏检以及误判的发 生
▪ 手段: 检测人员是否有足够的责任心? 检测试剂准备是否齐全且符合要求? 是否严格按照检测流程进行操作?
3/11/2021
霍乱弧菌实验室检测
1
霍乱概述
▪ 什么是霍乱?
霍乱是由01群和0139群霍乱弧菌（V．cholerae）
引起的急性肠道传染病，发病急、传播速度快、波 及范围广、危害严重的甲类传染病。
霍乱弧菌
O1群 非O1群
古典生物型 埃尔托生物型
小川型 Ogawa (AB) 稻叶型 Inaba (AC) 彦岛型 Hikojim (ABC)
霍乱病原菌
O139群（Bengal）
O2-O200群
腹泻病原菌
3/11/2021
霍乱弧菌实验室检测
2
▪ 病原体
O1群，O139群霍乱弧菌
▪ 发病特征：
剧烈腹泻、呕吐、严重脱水时致酸中毒、循环衰竭而致死亡 不治疗或医疗很差的条件下病死率可达到20－50％（重症病人达70－ 100％）
3/11/2021
霍乱弧菌实验室检测
9
平板分离及可疑菌落挑取
▪ 平板分离
➢选择性分离平板应采用9cm分离平板（不建议采用7cm平板），一个平
ห้องสมุดไป่ตู้
板分离一个样品（严禁一个平板分离2份或以上样品！！ ）。
➢样品平板分离时应进行分区划线分离，平板分离的单个菌落数量应该达到
50个以上。
▪ 可疑菌落挑取
➢经典的鉴定步骤要求每个平板应挑取5个以上可疑菌落,转种于克氏双糖斜 面或者普通琼脂斜面待分纯培养后,再进行O1、O139群血清玻片凝集试验， 鉴于对霍乱疫情应急处理的考虑,现大多数监测实验室一般采用将血清玻片 凝集试验前置的做法,作为快速筛查的手段,直接对平板上生长的单个可疑菌 落进行玻片凝集试验,出现明显凝集时可做初步报告,对平板上出现可疑凝集 的菌株必须马上转种于克氏双糖斜面或者普通琼脂斜面,待纯培养物生长良 好后再次进行玻片凝集试验加以确证。
平板分离及可疑菌落挑取
菌落鉴定
常用快速检测方法
➢胶体金检测条 ➢荧光PCR检测
检测工作中应关注的事项
3/11/2021
霍乱弧菌实验室检测
4
样品的采集和运输
采集：
➢病例：粪便、肛拭子、呕吐物 未使用抗生素之前 “健康”人：粪便、肛拭子 其他传播环节的标本：食物、水、环境类样品…… ➢监测：水样，水产品等
3/11/2021
霍乱弧菌实验室检测
7
水产品分离流程及技术要点
▪ 水产品的采集与保存运送
➢通常选取活的或者新鲜的水生动物为采集对象，有时也应考虑冰冻的水生 动物，有条件的采样点可将水生动物整体采回实验室再进行相关处置 ➢涂抹采集： 使用无菌棉签涂抹5只以上水水生动物表面、腮部及泄殖腔，直接接种到 20ml碱性蛋白胨水作为增菌液处理。
运输：
一般要求在3小时内室温（20-25 ℃ ）条件下送达实验室检测 ➢ C-B运输培养基（pH8.4）; （或文腊二氏保存液） ➢ 碱性蛋白胨水（pH8.4-9.2） ：不是最佳的，尤其6小时内还不能进
行培养时，尽量采用 C-B运输培养基。
3/11/2021
霍乱弧菌实验室检测
5
粪便分离流程及技术要点
➢整体或局部采集：
在实验室应以无菌操作将其解剖，取鳃部和肠内容物25克剪碎后，置灭菌均 质杯或均质袋中，加入225mL倍体积的碱性蛋白胨水增菌；但小贝壳类动物， 则用锤子将外壳击碎，整体放入100ml三角瓶中，加入5-10倍的碱性蛋白胨 水增菌；甲壳类动物除含肉质部分外，其余部分(包括鳃、肠、足、表层外 壳等)整体放入100ml三角瓶中，加入5-10倍的碱性蛋白胨水增菌。
▪ 粪便的采集与保存运送
以采集病人自然排除的新鲜粪便为主，水样便采取1～3mL，成形便采取 指甲大小的粪量，亦可用直肠棉拭或采便管由肛门插入直肠内3～5cm处 采取，采集后的样品应尽快挑取接种于碱性蛋白胨水（ＰＨ8.６-9.2）， 同时划线分离选择性培养基（庆大／四号／ＴＣＢＳ平板），如不能在６ 小时内送达实验室检测的样品，应插入Cary-Blair二氏半固体保存培养基 （或文腊二氏保存液）中送检。标本与保存液比例约为1∶5。
➢第二管碱性蛋白胨水增菌１８小时后划线分离选择性平板（庆大／四号 ／ＴＣＢＳ平板，第三板）。
3/11/2021
霍乱弧菌实验室检测
6
水体分离流程及技术要点
▪ 水体的采集与保存运送
水体的采集一般用无菌的500ml水样瓶采集相对静止的表层水(深度为 30cm以内)500ml，密封加盖后于室温（20-25 ℃ ）3小时内送达实验室 检测。
▪ 培养特性：
营养要求不高，兼性厌氧，37℃生长，怕酸嗜碱， pH:7.4-9.6快速生 长
▪ 检验依据：
WS 289-2008 《霍乱诊断标准》
霍乱防治手册（1999年第五版）
3/11/2021
霍乱弧菌实验室检测
3
霍乱的实验室检测
样品的采集和运输 不同样品的病原分离流程及技术要点
➢粪便 ➢水体 ➢水产品，食品等
接种后的碱性蛋白胨水37℃培养过夜，取菌膜下表层培养物接种选择性培养 基（庆大／四号／ＴＣＢＳ平板）．同时吸0.1～0.2 ml表层培养物转种于 3/11/210201ml碱性胨水管中作二次霍增乱菌弧菌，实3验7室℃检培测 养6～8h再划线接种于选择性8培养基 （庆大／四号／ＴＣＢＳ平板）。
▪ 分离培养要点（十倍浓缩碱胨水增菌培养法）：
取450ml水样，用1M 氢氧化钠调整至pH 8.4-9.2。然后加10倍浓缩碱性 胨水50ml。再加入1%亚碲酸钾0.25～0.5 ml和1000单位/ ml青霉素1 ml。 37℃培养过夜，取菌膜下表层培养物接种选择性培养基（庆大／四号／ ＴＣＢＳ平板）分离培养，同时吸0.1～0.2 ml表层培养物转种于碱性胨 水管中作二次增菌，37℃培养6～8h再划线接种于选择性培养基（庆大／ 四号／ＴＣＢＳ平板）。
▪ 分离培养要点（两管三板法）：
➢挑取粪便，直接接种于碱性蛋白胨水（第一管）中，同时划线分离选择 性平板（庆大／四号／ＴＣＢＳ平板，第一板）。
➢第一管碱性蛋白胨水在３７ ℃增菌６－８小时，沾取菌膜下表层液体， 划线分离选择性平板（庆大／四号／ＴＣＢＳ平板，第二板），同时吸取 0.1～0.2 ml表层培养物，接种碱性蛋白胨水（第二管）。
▪ 目的:提高检出率,减少漏检以及误判的发 生
▪ 手段: 检测人员是否有足够的责任心? 检测试剂准备是否齐全且符合要求? 是否严格按照检测流程进行操作?
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1
霍乱概述
▪ 什么是霍乱?
霍乱是由01群和0139群霍乱弧菌（V．cholerae）
引起的急性肠道传染病，发病急、传播速度快、波 及范围广、危害严重的甲类传染病。
霍乱弧菌
O1群 非O1群
古典生物型 埃尔托生物型
小川型 Ogawa (AB) 稻叶型 Inaba (AC) 彦岛型 Hikojim (ABC)
霍乱病原菌
O139群（Bengal）
O2-O200群
腹泻病原菌
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▪ 病原体
O1群，O139群霍乱弧菌
▪ 发病特征：
剧烈腹泻、呕吐、严重脱水时致酸中毒、循环衰竭而致死亡 不治疗或医疗很差的条件下病死率可达到20－50％（重症病人达70－ 100％）
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9
平板分离及可疑菌落挑取
▪ 平板分离
➢选择性分离平板应采用9cm分离平板（不建议采用7cm平板），一个平
ห้องสมุดไป่ตู้
板分离一个样品（严禁一个平板分离2份或以上样品！！ ）。
➢样品平板分离时应进行分区划线分离，平板分离的单个菌落数量应该达到
50个以上。
▪ 可疑菌落挑取
➢经典的鉴定步骤要求每个平板应挑取5个以上可疑菌落,转种于克氏双糖斜 面或者普通琼脂斜面待分纯培养后,再进行O1、O139群血清玻片凝集试验， 鉴于对霍乱疫情应急处理的考虑,现大多数监测实验室一般采用将血清玻片 凝集试验前置的做法,作为快速筛查的手段,直接对平板上生长的单个可疑菌 落进行玻片凝集试验,出现明显凝集时可做初步报告,对平板上出现可疑凝集 的菌株必须马上转种于克氏双糖斜面或者普通琼脂斜面,待纯培养物生长良 好后再次进行玻片凝集试验加以确证。
平板分离及可疑菌落挑取
菌落鉴定
常用快速检测方法
➢胶体金检测条 ➢荧光PCR检测
检测工作中应关注的事项
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4
样品的采集和运输
采集：
➢病例：粪便、肛拭子、呕吐物 未使用抗生素之前 “健康”人：粪便、肛拭子 其他传播环节的标本：食物、水、环境类样品…… ➢监测：水样，水产品等
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7
水产品分离流程及技术要点
▪ 水产品的采集与保存运送
➢通常选取活的或者新鲜的水生动物为采集对象，有时也应考虑冰冻的水生 动物，有条件的采样点可将水生动物整体采回实验室再进行相关处置 ➢涂抹采集： 使用无菌棉签涂抹5只以上水水生动物表面、腮部及泄殖腔，直接接种到 20ml碱性蛋白胨水作为增菌液处理。
运输：
一般要求在3小时内室温（20-25 ℃ ）条件下送达实验室检测 ➢ C-B运输培养基（pH8.4）; （或文腊二氏保存液） ➢ 碱性蛋白胨水（pH8.4-9.2） ：不是最佳的，尤其6小时内还不能进
行培养时，尽量采用 C-B运输培养基。
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5
粪便分离流程及技术要点
➢整体或局部采集：
在实验室应以无菌操作将其解剖，取鳃部和肠内容物25克剪碎后，置灭菌均 质杯或均质袋中，加入225mL倍体积的碱性蛋白胨水增菌；但小贝壳类动物， 则用锤子将外壳击碎，整体放入100ml三角瓶中，加入5-10倍的碱性蛋白胨 水增菌；甲壳类动物除含肉质部分外，其余部分(包括鳃、肠、足、表层外 壳等)整体放入100ml三角瓶中，加入5-10倍的碱性蛋白胨水增菌。
▪ 粪便的采集与保存运送
以采集病人自然排除的新鲜粪便为主，水样便采取1～3mL，成形便采取 指甲大小的粪量，亦可用直肠棉拭或采便管由肛门插入直肠内3～5cm处 采取，采集后的样品应尽快挑取接种于碱性蛋白胨水（ＰＨ8.６-9.2）， 同时划线分离选择性培养基（庆大／四号／ＴＣＢＳ平板），如不能在６ 小时内送达实验室检测的样品，应插入Cary-Blair二氏半固体保存培养基 （或文腊二氏保存液）中送检。标本与保存液比例约为1∶5。
➢第二管碱性蛋白胨水增菌１８小时后划线分离选择性平板（庆大／四号 ／ＴＣＢＳ平板，第三板）。
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水体分离流程及技术要点
▪ 水体的采集与保存运送
水体的采集一般用无菌的500ml水样瓶采集相对静止的表层水(深度为 30cm以内)500ml，密封加盖后于室温（20-25 ℃ ）3小时内送达实验室 检测。
▪ 培养特性：
营养要求不高，兼性厌氧，37℃生长，怕酸嗜碱， pH:7.4-9.6快速生 长
▪ 检验依据：
WS 289-2008 《霍乱诊断标准》
霍乱防治手册（1999年第五版）
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霍乱的实验室检测
样品的采集和运输 不同样品的病原分离流程及技术要点
➢粪便 ➢水体 ➢水产品，食品等