Ⅰ、Ⅱ型胶原蛋白对人软骨细胞生物学特性的影响
Ⅱ型胶原蛋白的结构、功能及其最新研究进展
Ⅱ型胶原蛋白的结构、功能及其最新研究进展周晓辉;常亚南;何晓亮;张晋弘【摘要】Ⅱ型胶原蛋白是动物体内透明软骨的主要成分,具有良好的生物相容性、可降解性、可促进细胞生长和再分化等生物学特性,可作为人体组织工程材料,也可应用于食品、日化、包装等领域.利用基因工程技术生产重组Ⅱ型胶原蛋白是该领域的研究热点.综述了Ⅱ型胶原蛋白的结构、功能及应用,阐述了基因工程技术生产重组Ⅱ型胶原蛋白的最新研究进展,对未来羟化胶原蛋白在大肠杆菌中的大规模生产进行了展望,以期为Ⅱ型胶原蛋白的进一步开发和同行研究提供指导和帮助.%Collagen of type Ⅱ is the major component of hyaline cartilage in animals.Based on its biocompatibility,biodegradability and many other biological properties,for example promoting celt growth and differentiation,collagen of type Ⅱ has been widely applied in various fields,such as tissue engineering material,food,cosmetic,packaging,etc..In recent years,using genetic engineering to produce recombinant collagen of type Ⅱ is popular.The structure,function and application of collagen of type Ⅱ are described,the latest research progress for producingrec ombinant collagen of type Ⅱ by genetic engineering is put forward,and the large-scale production of hydroxylated collagen in E.coli in the future is previewed,which would be helpful for the further development and study of collagen of type Ⅱ.【期刊名称】《河北科技大学学报》【年(卷),期】2017(038)002【总页数】7页(P202-208)【关键词】蛋白质工程;Ⅱ型胶原蛋白;透明软骨;组织工程;基因重组【作者】周晓辉;常亚南;何晓亮;张晋弘【作者单位】河北科技大学生物科学与工程学院,河北石家庄 050018;河北科技大学生物科学与工程学院,河北石家庄 050018;河北科技大学生物科学与工程学院,河北石家庄 050018;河北科技大学生物科学与工程学院,河北石家庄 050018【正文语种】中文【中图分类】Q816胶原蛋白(collagen)又称胶原，是由动物细胞合成的一种生物大分子蛋白质，广泛存在于动物体内，含量丰富，种类繁多，对细胞、组织乃至器官行使正常功能以及损伤修复都有重大影响[1]。
i型胶原蛋白与ii型胶原蛋白成分
i型胶原蛋白与ii型胶原蛋白成分I型胶原蛋白与II型胶原蛋白是人体中非常重要的蛋白质成分，它们在维持人体组织的健康和功能方面起着重要作用。
本文将从两种胶原蛋白的定义、结构、功能及应用方面进行详细介绍。
一、I型胶原蛋白I型胶原蛋白是一种重要的结构蛋白，广泛存在于人体的皮肤、骨骼、牙齿、肌肉、肌腱、血管、眼睛等组织中。
其分子结构由三股螺旋链组成，每条链上有许多氨基酸构成，其中螺旋链每三个氨基酸为一个甘氨酸-脯氨酸-甲基羰基氨基酸序列，三股链交替排列形成螺旋结构，螺旋结构之间形成交联，使得胶原蛋白具有极强的抗拉伸性和抗压缩性。
I型胶原蛋白的功能主要包括：1.维持人体组织结构的完整性：I型胶原蛋白在皮肤和骨骼组织中起着支撑和保护的作用，使得组织结构紧密有序。
2.促进伤口愈合：I型胶原蛋白可以促进伤口愈合，加速疤痕形成，修复受损组织。
3.增强韧性：I型胶原蛋白的强韧性使得人体组织不易断裂和受损。
4.保持皮肤弹性：I型胶原蛋白对皮肤的弹性和滋润起着重要作用。
I型胶原蛋白的应用：1.医学领域：用于人工皮肤、软骨、骨骼修复和再生。
2.美容领域：用于护肤品、美容产品、注射填充等。
二、II型胶原蛋白II型胶原蛋白主要存在于软骨组织中，是一种适应性蛋白，它们主要是一种三股螺旋链构成，具有支持和缓冲的作用，与I型胶原蛋白相比，II型胶原蛋白更多用于软骨组织和关节结构，其主要功能包括：1.构成软骨的基质：II型胶原蛋白是软骨组织的主要成分，能够形成软骨基质，支撑和保护关节结构。
2.保护关节运动：II型胶原蛋白在关节处形成保护性膜，减少摩擦和磨损，保护关节运动。
3.保持软骨弹性：II型胶原蛋白能够保持软骨的弹性，减缓软骨组织的老化和退化。
4.促进软骨修复：II型胶原蛋白有助于软骨组织的修复和再生，加速关节损伤的康复。
II型胶原蛋白的应用：1.医学领域：用于人工软骨、关节修复和再生，治疗骨关节炎等关节疾病。
2.营养保健品：用于关节保养和修复，减缓软骨老化和退化。
读书笔记
Tissue Engineering From Lab to Clinic记得买读书笔记关节软骨的润滑作用界面————防止因表面不光滑导致粘连和研磨（化学吸附的单层润滑分子：表层软骨分泌的润滑素）负荷重时不起作用，系数0.05~0.15液面————使两负重面形成较大间隙（液膜滑动：软骨基质的渗液及关节腔滑液）系数0.002负荷轻：液体流出形成液膜，液膜润滑占优势负荷重：液膜压扁，界面润滑占优势软骨细胞的分离培养成熟关节软骨：软骨细胞静止，cell分泌胞外基质和基质降解动态平衡用酶消化基质打破平衡，cell增殖启动早期使用的酶：胰蛋白酶、木瓜蛋白酶——不能充分分离细胞——大量培养受限制后期：Ⅱ型胶原蛋白酶——轻易分离软骨细胞——体外培养分离培养三阶段：机械分离，酶消化，扩增培养三步酶消化分离法：优点：较高细胞存活率97%原代细胞收获率大幅提高（骺板软骨、关节软骨、肋软骨）过程：（1）流产胎儿膝关节软骨，切取表层软骨，切成1×1×1mm碎片，PBS（PBS在医学词汇中表示磷酸盐缓冲液，用于分子克隆及细胞培养，pH=7.4，与人体血液等渗，主要成分为磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、氯化钠以及氯化钾）洗涤两次，除去PBS，加4ml质量体积分数为0.05%的透明质酸酶（PBS配制），室温下5min（2）除去透明质酸酶，再加8ml新鲜透明质酸酶室温下10min（3）除去透明质酸酶，5mlPBS漂洗2次，移入10ml离心管（4）除去PBS，质量体积分数0.20%的胰蛋白酶（PBS配制）2ml洗涤2次（5）除去胰蛋白酶，加新鲜胰蛋白酶4ml，将此离心管移入摇床水浴箱，37摄氏度，200次/min,作用30min（6）除去胰蛋白酶，PBS 5ml漂洗2次（7）质量体积分数0.20%的Ⅱ型胶原酶（DMEM/F-12培养基配制：达尔伯克必须基本培养基）4ml，摇床水浴箱，37摄氏度，100次/min,作用45min，去除上清液（8）加4ml新鲜胶原酶（9）（10）（11）（12）（13）两室消化法提高消化效率尽量少的步骤得到软骨细胞：胶原酶一步消化法细胞计数法：计数板直接计数（误差率20%）、MTT法（推荐）、流式细胞仪（贵）培养的软骨细胞生物学特性：1.形态学原代贴壁生长大多三角形或多角形，间杂少许圆形细胞第三代三角多角形，排列规律，有接触抑制2.软骨细胞的特征表型及鉴别Ⅱ型胶原表达而Ⅰ、Ⅲ胶原不表达——透明软骨cell鼠抗人胶原单抗免疫组化染色后：三代胞质内大量棕黄色点状颗粒，Ⅱ阳Ⅰ、Ⅲ阴3.软骨细胞的贴壁、延展时间以及细胞活力接种率三代比原代快，原代细胞刚脱离基质需要适应体外环境，用原代细胞作对比差异较大4.软骨细胞的生长时间、倍增时间三代接种后第2~7天进入增值活跃指数增长期。
i型胶原蛋白的生物学合成
i型胶原蛋白的生物学合成摘要：1.胶原蛋白简介2.i型胶原蛋白的生物学合成过程3.影响i型胶原蛋白合成的因素4.应用与前景正文：一、胶原蛋白简介胶原蛋白是一种广泛存在于动物组织中的蛋白质，占总蛋白的25-35%，主要由皮肤、骨骼、肌肉等组织合成。
根据分子结构和组织分布，胶原蛋白可分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ等类型。
其中，i型胶原蛋白是含量最丰富、分布最广泛的一种，具有重要的生物学功能。
二、i型胶原蛋白的生物学合成过程1.氨基酸供应：i型胶原蛋白的合成需要大量的氨基酸作为原料，其中脯氨酸、羟脯氨酸和赖氨酸是主要氨基酸。
2.前胶原蛋白生成：在核糖体上，氨基酸经过脱水缩合形成前胶原蛋白多肽链。
前胶原蛋白分子包含一个特有的前肽序列，称为前胶原蛋白N端前肽（NTNP）。
3.胶原蛋白成熟：前胶原蛋白经过一系列酶切反应，去除前肽序列，形成成熟的胶原蛋白。
其中，赖氨酸被氧化为羟赖氨酸，羟脯氨酸被羟化为脯氨酸。
4.胶原纤维组装：成熟的胶原蛋白分子通过交联反应，形成胶原纤维，进一步组装成胶原纤维束，构成胶原组织。
三、影响i型胶原蛋白合成的因素1.氨基酸供应：氨基酸的浓度、种类和比例对胶原蛋白合成具有重要影响。
2.酶活性：胶原蛋白合成过程中涉及多种酶的催化作用，如脯氨酸羟化酶、赖氨酸氧化酶等。
酶活性受温度、pH、激活剂等因素调节。
3.激素调控：生长激素、甲状腺激素、雌激素等激素对胶原蛋白合成具有调控作用。
4.细胞因子：细胞因子如TGF-β、IGF-Ⅰ等可促进胶原蛋白的合成。
四、应用与前景1.医学美容：i型胶原蛋白具有很高的生物活性，可促进皮肤细胞生长、修复损伤组织，因此在医学美容领域具有广泛应用。
2.组织工程：i型胶原蛋白可作为生物支架材料，促进组织修复和再生。
3.药物载体：i型胶原蛋白具有良好的生物相容性和降解性，可作为药物载体，提高药物的生物利用度和疗效。
4.食品添加剂：i型胶原蛋白可作为食品添加剂，增加食品的口感、质地和营养价值。
Ⅰ、Ⅱ型胶原蛋白对人软骨细胞生物学特性的影响
Ⅰ、Ⅱ型胶原蛋白对人软骨细胞生物学特性的影响蒋萍;蔚芃;赵明才;陈琼;王梓【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2014(000)030【摘要】BACKGROUND:Experiments have shown that the col agen substrate has the capability of stimulating cartilage generation, but the stimulating role of different types of col agen substrates remains controversial. OBJECTIVE:To investigate the effect of type I and type II col agen on the biological characteristics of human chondrocytes cultured in vitro. METHODS:Human chondrocytes at passage were cultured onto the ordinary culture plates (ordinary plate), type I col agen-coated culture plates (type I plate), and type II col agen-coated culture plates (type II plate). cellgrowth curves were determined by MTT method after cells were cultured for 10 days. By ELISA, PCR, and 1,9-dimethyl methyleneblue technology, type I and type II col agen and glycosaminoglycan contents were quantitatively detected in cartilage cells 28 days after culture. RESULTS AND CONCLUSION:The number of cartilage cells was the highest in type II plate, which was twice of that in type I plate and five times of that in ordinary plate. Cartilage cells in type II plate secreted the least amount of type I col agen, which showed significant differences compared with the ordinary plate (P<0.01) and had no statistical y significant difference with type I plate (P>0.01). Cartilage cells in type II plate secreted the mostamount of type II col agen and glycosaminoglycan, showing significant differences compared with the other two plates (P<0.01). The cartilage cells cultured in col agen plates are better than that cultured in ordinary culture plate, type II col agen culture plate is better than type I col agen culture plate in maintaining cellshape, extending the dedifferentiation pattern, and promoting celldifferentiation.%背景：实验证明胶原蛋白底物具有刺激成软骨的作用，但关于不同类型胶原蛋白刺激成软骨作用的能力仍存在争议。
Ⅰ型神经纤维瘤病软骨细胞生物学特性的研究
Ｎ １脊 柱 侧 凸 患 者 软 骨 细 胞 神 经 纤 维 瘤 蛋 白表 达 降 低 的 同 时 ， 细 胞 增 Ｆ 其
Ｂｉ ｌ ｇ ｃ ｌＦｅ ｔ ｒ ｓ Ｏ Ｏ ｒ ｃ ｔ ｓＩ ｏｌ ｔ ｄ ｆ ｏ Ｐａ ｉ ｎ ｓ ｗｉｈ Ｔｙ Ｉ Ｎ ｅ ｏ ｉ ｏｍ ａ ｏｓｓ ｏ ｏ ｉ ａ ａ ｕ ｅ ｆ Ｃｈ ｎｄ Ｏ ｙ ｅ ｓ ａ ｅ ｒ ｍ ｔｅ ｔ ｔ ｐｅ ｕｒ ｆｂｒ ｔ ｉ
ｃ ｔ ｓ ｆｐａ ｉ ｎｔ ｉｈ ｔ ｅ Ｉｎｅ ｏｆｂｒ ａ ｏ ｉ Ｎ Ｆ１） ａ ｓ ｏｌｏ ｉ．Ｍ ｅ ｈｏ ７ ｃ ｓ ｓ ｏｆｃ ｎｇｅ ｉａ ｃ ｉ ｓｓ ｎ ６ ｙ ｅ ｏ ｔｅ ｓ ｗ ｔ ｙｐ ｕｒ ｉ ｏｍ ｔ ｓｓ（ ｎｄ ｃ ｉ ｓｓ ｔ ｄｓ ａ ｅ ｏ ｎ ｔ Ｉｓ ｏｌｏ ｉ ａ ｄ
Ｉ 神 经 纤 维 瘤 病 软 骨 细 胞 生 物 学 特 性 的 研 究 型
陈 晖 邱 勇 ， ， 王斌。俞扬 朱泽 章 朱锋 钱 邦平 马薇 薇。 ， ， ， ， ，
（． １ 南京 明 基 医院 骨 科 ， 苏 南京 ２ ０ １ ；． 江 １ ０ １ ２ 南京 大 学 医 学 院 附属 鼓 楼 医 院脊 柱 外 科 ， 苏 南 京 ２ ０ ０ ） 江 １０ ８ 摘要： 目的 检 测 神 经 纤 维瘤 蛋 白在 Ｉ 神 经 纤 维 瘤 病 （ｙ ｅ１ｎｕｏｉｒｍａｏ ｉ， １ 脊 柱 侧 凸 患 者 软 骨 细胞 型 ｔｐ ｅ ｒｆ ｏ ｔｓ ＮＦ ） ｂ ｓ
Ｇｕ Ｌ ｕ Ｈｏ ｐｔ ｌＡｆｉａ ｅ ｏ Ｍ ｅ ｉａ ｃ ｏ ｌｏ ｎｉｇ Ｕｎｖ ｒｉｙ Ｎａ ｊ ｇ２ ０ ０ ， ｉａ ｏ ｓ ｉａ ｆ ｉｔｄｔ ｄｃｌＳ ｈ ｏ ｆＮａ ｊ ｉｅｓｔ ， ｎｉ １ ０ ８ Ｃｈｎ ） ｌ ｎ ｎ Ａｂ ｔａ ｔ Ｏｂ ｅ ｔｖ Ｔｏ ｄ ｔｃ ｈ ｅ ｒ ｆ ｒ ｍｉ ｘ ｒ ｓｉｎ ａ ｄｏ ｓ ｒｅ ｔｅ ｂｏｏ ｉａ ｆａ ｕ ｅ ｆｔ ｅｃ ｏ ｄ ｏ ｓｒ ｃ ： ｊｃｉｅ ｅｅ ｔｔ ｅｎ ｕ ｏｉ ｏ ｎ ｅ ｐ ｅ ｓｏ ｎ ｂ ｅｖ ｈ ｉｌｇｃ ｌ ｅ ｔｒ ｓｏ ｈ ｈ ｎ ｒ — ｂ
转化人关节软骨细胞的Ⅱ型胶原表型诱导
论著 文章编号:100025404(2002)0520524203转化人关节软骨细胞的Ⅱ型胶原表型诱导何清义,李起鸿,许建中,杨 柳 (第三军医大学附属西南医院骨科,重庆400038) 提 要:目的 用离心管聚集体培养(Aggregate culture)诱导转化人关节细胞的Ⅱ型胶原。
方法 将体外长期培养的第30、40、50代转化软骨细胞消化后进行离心管培养,比较细胞在单层培养、离心管聚集体培养,以及在普通培养基,BAI诱导培养基下[2型骨形态发生蛋白(BMP22)+抗坏血酸盐(Ascorbate)+胰岛素(insulin)],Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型胶原的表达和胞外基质产生情况。
结果 在单层培养条件下,转化软骨细胞只表达Ⅰ型胶原,而在BAI诱导培养基及离心管聚集体培养下转化软骨细胞表达丰富的Ⅱ型胶原和大量胞外基质。
结论 离心管聚集体培养是诱导转化软骨细胞Ⅱ型胶原的有效方式。
关键词:转化软骨细胞;表型;诱导 中图法分类号:R322.72;R341.26;R394 文献标识码:APhenotype induction of typeⅡcollagen in transformed human articular chondrocytes HE Qing2yi,LI Qi2hong,X U Jian2zhong,Y ANG Liu(Department of Orthopedics,S outhwest H ospital,Third M ilitary M edical University,Chongqing400038, China) Abstract:Objective T o induce typeⅡcollagen phenotype of trans formed human articular chondrocytes with aggregate culture of centrifuge tube.Methods The30th,40th,50th passaged trans formed chondrocytes maintained for long term in vitro were digested and cultured respectively in tw o2dimensional culture and centrifuge tubes.Under the circumstances of tw o2dimensional culture,aggregate culture,ordinary medium and BAI induced medium(bone m orphogenetic protein2+ascorbate+insulin),the expressions of typeⅠ,Ⅱ,Ⅲcollagens and the production of extra2 cellular matrix were com pared in above2mentioned cells.Re sults In tw o2dimensional culture and ordinary medium,only typeⅠcollagen was se2 creted in trans formed chondrocytes.Aggregate culture and BAI inducted medium induced rich typeⅡcollagen and extra2cellular matrix in trans2 formed chondrocytes.Conclusion Centrifuge tube aggregate culture method can induce the secretion of typeⅡcollagen of trans formed chondro2 cytes. K ey w ords:trans formed chondrocytes;phenotype;induction 关节软骨的营养仅来自于关节滑液,无血液、淋巴循环,亦无神经支配,损伤后其自身修复能力较差,关节软骨的缺损的修复一直是临床上尚未解决的难题,因为成熟的关节软骨修复能力相当有限,直径大于4 mm者一般不能自行修复。
胶原蛋白生物学性质
胶原蛋白生物学性质生物学性质1、低免疫原性胶原作为医用生物材料，最重要的特点在于其低免疫原性。
胶原有三种类型的抗原分子，第一类是胶原肽链非螺旋的端肽，第二类是胶原的三股螺旋的构象，第三类是a一链螺旋区的氨基酸顺序。
其中第二类抗原因子仅存在于天然胶原分子中，第三类只出现在变性胶原中，而第一类抗原因子在天然和变性胶原中均存在。
2、生物相容性生物相容性是指胶原与宿主细胞及组织之间良好的相互作用。
无论是在被吸收前作为新组织的骨架，还是被吸收同化进入宿主成为宿主的一部分，都与细胞周围的基质有着良好的相互作用，表现出相互影响的协调性，并成为细胞与组织正常生理功能整体的一部分。
3、可生物降解性胶原能被特定的蛋白酶降解，即生物降解性。
因胶原具有紧密牢固的螺旋结构，所以绝大多数蛋白酶只能切断其侧链，只有特定的蛋白酶在特定的条件下才能降解胶原蛋白，胶原肽键才会断裂。
胶原的肽键一旦断裂，其螺旋结构随即被破坏。
断裂的胶原多肽就被蛋白酶彻底水解。
分类与存在文章来源于：1、按结构分类：胶原蛋白是蛋白质。
目前发现16种以上的胶原蛋白分子。
I型分布于皮肤、肌腱等组织，Ⅱ型由软骨细胞产生；基底膜胶原通常是指Ⅳ型，分布于基底膜；细胞周胶原通常中指V 型在结缔组织中大量存在。
2 按分子量肽：是介于氨基酸和蛋白质的一类物质。
根据构成肽链的氨基酸个数成为“几”肽，如两个氨基酸构成的肽叫二肽（如肌肽），三个氨基酸构成的肽叫三肽（如谷胱甘肽），以此类推，四肽、五肽、六肽…等。
小肽OCO：二肽、三肽、四肽叫小肽，分子量一般在180～480D。
寡肽：氨基酸构成个数小于10个的肽，分子量一般在1000D以下。
多肽：分子量大于1000D，小于10000D的肽。
蛋白质：分子量大于10000D的肽。
文章来源于：。
Ⅱ型胶原酶消化时间对兔软骨细胞生物学特性的影响
Ⅱ型胶原酶消化时间对兔软骨细胞生物学特性的影响袁德超;陈竹;邓尚;冯刚【摘要】Objective To investigate the best digestion time for rabbit rib cartilage cells separation by collagenase Ⅱ diges‐tion method .Methods Rabbit cartilage tissue was taken from 3‐month‐old New Zealand white rabbits ,and then digested in 0 .2%collagenase Ⅱ solution for 4 ,8 ,12 ,16 and 20 h under vibration at 37 ℃ ,respectively .The corresponding experiments were named as group A ,B ,C ,D ,and E .The obtained primary cells were cultured and passaged after counting .The cellmorphology ,proliferation rate ,secretion of extracellular matrix of passage 2 cells were compared to chose the best digestion time .Results The primary chon‐drocytes obtained in group C ,D and E were more than the other two group A and B .The chondrocytes cytoactive in group C and D were better than the other three group A ,B and E .The passage 2 chondrocytes in group C ,D had better secretion of extracellular matrix capability than the other three groups .Conclusion The best collagenase Ⅱ digestion time is 12 to 16 h ,at this digestion time period ,more primary chondrocytes with high cytoactive and strong proliferation capability canbe obtained ,and the phenotype of their passage 2 cells is quite good .%目的：探索Ⅱ型胶原酶消化法分离兔肋软骨细胞的最佳消化时间。
胶原蛋白研究报告
胶原蛋白研究报告
胶原蛋白是一种结构性蛋白质，在人体中广泛存在于皮肤、骨骼、肌肉、血管和腱等组织中。
它不仅给予组织弹性和稳定性，同时也起到支持和保护细胞的功能。
近年来，随着对健康和美容意识的不断增强，胶原蛋白的研究也引起了广泛的关注。
胶原蛋白的种类繁多，其中最常见的是Ⅰ型胶原蛋白。
Ⅰ型胶原蛋白主要存在于皮肤、骨骼和肌肉等组织中，具有保持皮肤弹性和抵抗皮肤老化的作用。
近年来的研究还发现，Ⅰ型胶原蛋白在骨骼和肌肉的形成和修复中起到了重要的作用。
另外，Ⅱ型胶原蛋白则主要存在于软骨组织中，可维持关节的弹性和稳定。
胶原蛋白的合成和降解相互平衡是维持胶原蛋白水平的关键。
人体合成胶原蛋白需要多种营养物质的参与，如维生素C、氨基酸和蛋白质等。
营养不良和年龄增长都会导致胶原蛋白的合成下降和降解增加，从而引发各种皮肤问题和关节疾病。
近年来的研究发现，补充外源性胶原蛋白可以增加体内胶原蛋白的合成和延缓降解过程。
许多实验和临床研究证实了胶原蛋白的补充对皮肤健康和关节保健的积极影响。
例如，一项研究发现，口服胶原蛋白能够显著改善皮肤弹性和水润度，减少皱纹的形成。
另外，还有研究表明，胶原蛋白的补充对关节疼痛和关节功能恢复也有益处。
益气化瘀方影响椎间盘软骨细胞Ⅰ、Ⅱ型胶原的作用分析
益气化瘀方影响椎间盘软骨细胞Ⅰ、Ⅱ型胶原的作用分析漆平芳【期刊名称】《中国医学工程》【年(卷),期】2012(020)011【摘要】目的分析益气化瘀方及其拆方于椎间盘的软骨细胞,其凋亡状态下的Ⅰ型与Ⅱ型胶原所具有的调控表达作用.方法通过对椎间盘(大鼠)软骨细胞进行培养(酶消化法),再运用Fas抗体对其进行诱导凋亡,以益气化瘀方(还包括其拆方:化瘀方和益气方)相应的药理血清来进行干预,再以SP法(免疫组化)对大鼠椎间盘的软骨细胞于不同状态之下对这两型胶原的表达情况做相关检测与分析.结果凋亡模型组显示胶原表达(Ⅰ型)较正常的对照组明显,显示Ⅱ型胶原仅呈轻度表达,两组差异呈显著性(P＜0.01);所用益气化瘀方(还包括其拆方:化瘀方和益气方),同凋亡模型组相较,不仅均能够明显的上调其胶原的表达(Ⅱ型),而且能够下调其胶原的表达(Ⅰ型),再将3种中药组与诱导凋亡组相较,差异呈显著性(P＜0.01).结论予以益气化瘀方(还包括其拆方:化瘀方和益气方)能够调控发生在凋亡状态下大鼠椎间盘自身软骨细胞胶原的表达(Ⅰ型与Ⅱ型).【总页数】1页(P62)【作者】漆平芳【作者单位】宜春市人民医院中心药房,江西宜春336000【正文语种】中文【中图分类】R681.5+3【相关文献】1.益气化瘀方对椎间盘软骨细胞凋亡相关因子的作用 [J], 孙鹏;王拥军;施杞;周泉;刘梅;周重建;钱雪华2.胶原-纤维蛋白混合凝胶对关节软骨细胞合成Ⅱ型胶原的影响 [J], 池光范;侯宜;侯立中;颜炜群;杨同书3.益气化瘀方及拆方对椎间盘软骨细胞Ⅰ、Ⅱ型胶原的影响 [J], 孙鹏;王拥军;施杞;周泉;刘梅;周重建4.益气化瘀方对体外培养的大鼠颈椎间盘软骨细胞超微结构的影响 [J], 许理忠;侯宝兴;王拥军;施杞5.中药益气化瘀方对体外培养的大鼠颈椎间盘软骨细胞生物学功能的影响 [J], 许理忠;王拥军;周重建;刘梅;侯宝兴;施杞因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
骨关节炎软骨中Ⅰ型和Ⅱ型胶原的分布
·实验研究·骨关节炎软骨中Ⅰ型和Ⅱ型胶原的分布姚 力 周乙雄 赵丹惠3 黄靖香33 薛 延3 摘 要 目的:研究骨关节炎软骨中Ⅰ型和Ⅱ型胶原的分布。
方法:从正常关节软骨和骨关节炎软骨上取样本做切片。
所有样本行HE 、蕃红0染色及Ⅰ型和Ⅱ型胶原免疫组化。
结果:骨关节炎软骨中Ⅱ型胶原免疫组化染色不均匀。
Ⅰ型胶原染色,在表层和中层的部分区域有不规则着色。
纤维样组织中,Ⅰ型胶原免疫组化呈阳性,Ⅱ型胶原免疫组化不着色。
结论:骨关节软骨基质中Ⅱ型胶原和蛋白聚糖的破坏增强与软骨细胞对其合成增强同时存在,软骨修复的过程中,部分软骨细胞发生去分化,而表达Ⅰ型胶原。
关键词 Ⅰ型胶原; Ⅱ型胶原; 骨关节炎; 免疫组化中图分类号 R68 文献标识码 A 文章编号 1005-8478(2002)02-0167-03Immunohistochemical Distribution of Type Ⅰand ⅡCollagen in Osteoarthritis ∥Y AO Li ,ZH OU Yi 2xiong ,ZH AO Dan 2hui ,et al.Beijing JiShuiTan hospital ,Beijing 100035Abstract Objective :T o investigate the distribution of collagen type Ⅰand Ⅱin osteoarthritis cartilage.Mathods :Samples from tw o normal articular cartilage and seven osteoarthritis articular cartilage were collected.All the articular cartilages were stained with Safranin O and HE method.Extracellular deposition of collagen type Ⅰand Ⅱwas analyzed immunohistochemically with m onoclonal antibodies.Results :Immunohistochemistry revealed irregular and s ometimes diminished inter 2territorial staining as well as enhanced peri 2cellular deposits of collagen type Ⅱ.In s ome area pericellular loss of staining was als o found.In superficial zone and middle zone ,there were s ome irregular staining by collagen type Ⅰm onoclonal antibody ,but no staining was found in normal cartilage.In fibro 2like area at the surface ,the staining was markdely positive by collagen type Ⅰ,but no staining was shown by collagen type Ⅱ.C onclusion :Both syn 2thesis and destroy of collagen type Ⅱexist in osteoarthritis cartilage.In process of cartilage repair ,the chondrocyte phenotype was m odu 2lated ,and collagen type Ⅰwas expressed in cartilage.K ey w ords C ollagen type Ⅰ; C ollagen type Ⅱ; Osteoarthritis ; Immunohistochemistry作者单位:北京积水潭医院骨科,100035 3北京创伤骨科研究所 33解放军总医院骨研所作者简介:姚力(19702),男,北京人,主治医师,医学硕士。
Ⅱ型胶原海绵的材料特性及对软骨缺损的影响
Ⅱ型胶原海绵的材料特性及对软骨缺损的影响作者：廖鹰扬，陈鸿辉，杨小红，梁佩红，戴丽冰，谭见容【摘要】 [目的]研究Ⅱ型胶原海绵的材料特性与其在修复软骨缺损中的作用。
[方法]对比Ⅱ型胶原海绵与Ⅱ型胶原膜的力学、孔径方面等材料特性的差异，并建立兔膝关节软骨缺损模型，A组接受Ⅱ型胶原海绵移植，B组接受Ⅱ型胶原膜移植，而C组为空白对照组，术后不予治疗，分别于2、6和12周取材，通过组织学染色观察软骨缺损处修复的效果。
[结果]Ⅱ型胶原海绵与Ⅱ型胶原膜在材料特性上有显著差异，胶原自发荧光分层扫描通过图像分析得出A组平均孔径为(93.26±38.41) μm，弹性模量(0.098±0.0 017) MP/m2，均较B组更为理想。
组织学显示A组6周时生成大量新生软骨，12周时新生软骨形态与成熟度已经接近正常，较B、C两组更为优越。
[结论]Ⅱ型胶原海绵有理想的孔径和合理的生物力学结构性质，有利于软骨缺损的修复，是一种具有良好材料特性的组织工程基质。
【关键词】组织工程; Ⅱ型胶原; 生物力学; 孔径; 软骨缺损Abstract: [Objective]To study the material characteristics of collagen typeⅡand its efficacy in repairing cartilage defect. [Methods]Differences in material characteristics such as mechanism,pore-diameter between the two kinds of materials were compared.The cartilage defect model of rabbit knee joint were constructed.In group A,cartilage defectswas repaired by spongy-collagen type Ⅱ.In group B,by membrane-collagen type Ⅱwhile group C received no treatment.In 2,6,12 weeks postoperatively,the specimens were sacrificed and repair effects were observed with histological staining method.[Results]Significant differences had been found between the two kinds of material. In group A ,the mean diameter was (93.26±38.41)μm and the mean modulus of elasticity was(0.098±0.0017) MP/m2,which were better than those in group B. In group A,6 weeks postoperatively, a great deal of neogenetic cartilage was observed and in 12 weeks postoperatively, the shape and maturity of neogenetic cartilage were observed close to normal level in group A, which had advantages over those in group B、C.[Conclusion]Spongy-collegan type Ⅱhas fairly rational biomechanics performances and proved to have significant efficacy in cartilage defect. To conclude ,it is a kind of tissue-engineering matrix with good material characteristics.Key words：tissue-engineering; collagen type Ⅱ; biomechanics; pore diameter; cartilage defect近年来,大量的文献[1、2]资料显示,胶原产品越来越广泛地被应用于组织工程与相关临床研究。
生物技术在半月板损伤治疗和中医康复中的应用研究
生物技术在半月板损伤治疗和中医康复中的应用研究作者：林淑芳谢逸天陈鑫朔来源：《甘肃科技纵横》2020年第07期摘要：半月板是位于膝关节内的一种纤维软骨组织。
半月板损伤是临床中常见的运动损伤。
由于半月板自我恢复能力较差，以及传统的半月板摘除，修复和移植治疗所涉及一系列不良反应，不利于术后机体功能以及患者运动能力的恢复。
如今科学家们重点研究通过特异生物因子促进膝关节周围组织细胞再生、以及选取先进生物材料及治疗方式的应用，并配合合理康复疗程，尤其是中医康复治疗，希望在最大程度上恢复患者受损半月板结构功能，最终恢复其运动能力。
关键词：半月板、特异生物因子、生物材料、中医治疗中图分类号：R274.9文献标志码：A半月板是位于膝关节内的一种纤维软骨组织，在人类的运动行为中发挥了不可替代的作用。
半月板受损是临床中常见的一种运动损伤，但因为半月板自我恢复能力较差，故治疗结果一般不尽如人意。
在一份年限为2010～2015年，针对美国军队内的半月板损伤治疗统计，81%是半月板切除，20.3%为半月板修复，0.7%为同种异体半月板移植。
在科技高速发展以及治疗康复理念提升的今天，临床治疗方法除了单纯摘除破损半月板之外，还有针对受损半月板的修复，甚至有通过移植体的治疗等方式。
但这又涉及膝关节软骨退行性病变（osteoarthritis，OA），以及免疫排斥等不良反应等问题，会引起骨性关节炎等疾病，严重影响生活质量。
并且，随着年龄的增长，膝关节周围纤维软骨变硬，挤压血管，不利于血液物质交换，所以半月板受损风险增大且不利于恢复，这就考验了科研人员的思路。
随着遗传学研究的深入，科学家们在自体细胞再生、生物技术和材料邻域有了新的突破。
如今科学家们将研究投向半月板移植结合膝关节周围自体细胞组织再生的方向，配合移植体的材料，还有先进治疗方式的挑选，以及康复过程的作用，以减少对机体组织的伤害，从而提高治疗后恢复质量。
1特异生物因子的利用现在科学家们希望在观察清楚膝关节内部微观结构的基础上，借助特异生物因子，促进受损膝关节组织细胞增殖分化，减小半月板损伤程度。
软骨损伤后_型胶原蛋白的表达
中国组织工程研究 第18卷 第51期 2014–12–10出版Chinese Journal of Tissue Engineering Research December 10, 2014 Vol.18, No.51ISSN 2095-4344 CN 21-1581/R CODEN: ZLKHAH8305www.CRTER.org张猛，男，1987年生，江苏省宿迁市人，汉族，苏州大学在读硕士，主要从事骨科生物力学研究。
通讯作者：罗宗平，博士，教授，苏州大学附属第一医院，江苏省苏州市 215006doi:10.3969/j.issn.2095-4344. 2014.51.020 []中图分类号:R318 文献标识码:A 文章编号:2095-4344 (2014)51-08305-05 稿件接受：2014-11-02Zhang Meng, Studying for master’s degree, First Affiliated Hospital of Soochow University, Suzhou 215006, Jiangsu Province, ChinaCorresponding author: Luo Zong-ping, M.D., Professor, First Affiliated Hospital of Soochow University, Suzhou 215006, Jiangsu Province, ChinaAccepted: 2014-11-02软骨损伤后Ⅰ、Ⅱ型胶原蛋白的表达张 猛1，周嘉俊2，罗宗平1(1苏州大学附属第一医院，江苏省苏州市 215006；2苏州大学机电学院，江苏省苏州市 215006)文章亮点：1 作为骨性关节炎经典的动物模型前交叉韧带切断(ACLT)动物模型被广泛应用于实验研究，然而，这种动物模型骨性关节炎进程较快，在前交叉韧带切断后2周软骨即发生改变，无法观察软骨分泌Ⅰ型胶原蛋白的变化模式。
人髓核软骨样细胞的生物学特性观察
ｗｉ ｉｉｐ ｔｉ ｃｌ ｓｓ （ｇ ｄ — ３ ｅｒ ） ｅｌ ｅｅ ｉｏａｅ ｒｍ ＮＰ ｉ ｓ ｅ ｙ ．５ ｐｏ ａｅ ｎ ｔ ｄｏ ａｈｃ ｏｉ ｉ ａ ｅ １ １ ｙ ａｓ ． ｃ ｌ ｗ ｒ ｓｌｔｄ ｆｏ ｈ ｓ ｏ １ ＮＰ ｓ ｔ ｕ ｂ ０２ ％ ｒｎ ｓ ａ ｄ ｓ ０２ ｔｐ Ｈ ｏｌｇ ｎ ｓ ｉｄ ｐ ｎ ｅ ｔ ａ ｄ ｕｔｒｄ ｎ ．％ ｙ ｅ ｃｌ ｅ ａｅ ｎ ｅ ｅ ｄ ｎｌ ｎ ｃ ｌ ｅ ｉ Ｆ１ ｏ ｔｉｉｇ ０ Ｆ ＳＡｆ ｒ ａｓ ｇｎ ｆｒ — ａ ｙ ｕ ２ ｃ ｎａｎｎ １ ％ Ｂ ． ｔ ｐ ｓａｉｇ ｏ １ ７ ｅ
８０ ７
中国脊柱脊髓杂志 ２ ０ ０ ８年第 １ ８卷第 １ １期 Ｃ ｉ ｓ ｏ ｒａ ｐｎ ｎ ｐｎ ｏｄ ２ ０ ． ｏ １ Ｎｏ １ ｈｎ ｅＪｕｎ ｌｆＳ ｉ ａｄＳ ｉａ Ｃ ｒ ，０ ８ Ｖ ｚ ８． ． １ ｅ ｏ ｅ ｌ
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人髓核软 骨样 细胞 的生物 学特性观察
张 荣峰 ， 阮狄 克 ， 张 超 ， 洪奎 辛
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外源性Ⅰ型胶原对人胚骨膜成骨细胞生物学特性的影响
外源性Ⅰ型胶原对人胚骨膜成骨细胞生物学特性的影响杨志明;余希杰;黄富国;解慧琪【期刊名称】《华西医科大学学报》【年(卷),期】2001(32)1【摘要】目的研究型胶原对人胚骨膜来源成骨细胞生物学特性的影响 ,为型胶原在组织工程人工骨中的应用提供依据。
方法在不同浓度型胶原涂层上培养成骨细胞 ,用细胞计数法研究成骨细胞粘附情况 ,3 H- Td R掺入实验观察成骨细胞增殖能力 ,通过检测成骨细胞胶原、骨钙素和碱性磷酸酶的合成情况 ,以不涂层型胶原为对照组 ,比较骨膜来源成骨细胞成骨能力的改变。
结果型胶原对成骨细胞发挥以下作用 :1增加粘附细胞数量 ,且在2 5 μg/ m l浓度达最大效应 ;2减弱成骨细胞增殖能力 ,且以12 .5 μg/ ml以上浓度作用显著 ( P<0 .0 5 ) ;3轻度减弱成骨细胞型胶原合成能力 ,以2 5 μg/ ml以上浓度作用显著 ( P<0 .0 5 ) ;4增加骨钙素合成 ,以6 .2 5 μg/ m l以上浓度作用显著( P<0 .0 5 ) ,2 5 μg/ m l浓度达最大效应 ;5增加成骨细胞碱性磷酸酶活性 ,以12 .5 μg/ml以上浓度作用显著 ( P<0 .0 5 )。
结论型胶原能促进成骨细胞的粘附与分化 ;支架材料上复合型胶原涂层可增强成骨细胞的成骨能力 ; 型胶原最佳复合浓度为2 5 μg/【总页数】4页(P1-4)【关键词】成骨细胞;细胞外基质;Ⅰ型胶原;组织工程;生物学特性;人工骨【作者】杨志明;余希杰;黄富国;解慧琪【作者单位】华西医科大学附属第一医院骨科【正文语种】中文【中图分类】R68;R318.08【相关文献】1.人胚成骨细胞体外培养的生物学特性研究 [J], 汪平;王小竞;范继红;杨聚才2.人胚胎骨骨膜来源成骨细胞的分离培养与生物学特性 [J], 张林朴;王冠华;陈辉树;姚晖3.人胚骨髓基质干细胞向成骨细胞诱导分化及生物学特性检测 [J], 张林朴4.Ⅰ型胶原-整合素α_2β_1系统对成骨细胞生物学特性的调控 [J], 杨志明;余希杰;屈艺;解慧琪5.外源性野生型p53基因对人骨肉瘤细胞株生物学特性的影响 [J], 朱全胜;丘钜世;梁惠珍因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
i型胶原蛋白与ii型胶原蛋白 成分
i型胶原蛋白与ii型胶原蛋白成分下载温馨提示：该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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单层培养人软骨细胞Ⅰ型和Ⅱ型胶原表达的变化
单层培养人软骨细胞Ⅰ型和Ⅱ型胶原表达的变化
冯万文
【期刊名称】《国外医学：骨科学分册》
【年(卷),期】2004(25)5
【摘要】对单层培养的人关节软骨细胞(HAC)Ⅰ型和Ⅱ型胶原表达的变化进行对比。
样本取自股骨颈骨折行关节置换术的8例病人(平均年龄78.2岁)的髋关节软骨,分离HAC并单层培养46天,从髋关节囊分离成纤维细胞进行培养作为对照。
软骨切片染色分析硫酸氨基葡聚糖。
单层培养的HAC分别用抗人Ⅰ型和Ⅱ型胶原抗体及与生物素偶合的马抗鼠二抗孵育进行免疫细胞化学分析。
【总页数】1页(P320-320)
【关键词】软骨细胞;Ⅰ型;Ⅱ型;胶原表达;髋关节软骨
【作者】冯万文
【作者单位】
【正文语种】中文
【中图分类】R681.3
【相关文献】
1.Ⅱ型胶原酶消化分离法和组织块直接培养法体外培养人软骨细胞的效果 [J], 蒋红;杨明辉;蔡燕;贾艾敏;邱亚;赵明才
2.Ⅰ型、Ⅲ型胶原基因mRNA在Ⅱ型糖尿病大鼠房室结的表达及变化 [J], 林乐迎;欧阳娟;张红旗;王庆志
3.046.单层培养人软骨细胞Ⅰ型和Ⅱ型胶原表达的变化 [J],
4.骨桥蛋白干预体外培养人膝骨关节炎软骨细胞蛋白多糖和Ⅱ型胶原的表达 [J], 朱鹤远;雷光华;高曙光;张方杰;曾超;张凯
5.骨桥蛋白干预体外培养人膝骨关节炎软骨细胞蛋白多糖和Ⅱ型胶原的表达 [J], 朱鹤远;雷光华;高曙光;张方杰;曾超;张凯;
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Ⅰ、Ⅱ型胶原蛋白对人软骨细胞生物学特性的影响
蒋萍，蔚芃，赵明才，陈琼，王梓
川北医学院附属医院骨科，四川省南充市637000
Effect of type I or type II collagen on biological characteristics of human chondrocytes
Jiang Ping, Wei Peng, Zhao Ming-cai, Chen Qiong, Wang Zi
Department of Orthopedics, Affiliated Hospital of North Sichuan Medical College, Nanchong 637000, Sichuan Province, China
摘要
背景：实验证明胶原蛋白底物具有刺激成软骨的作用，但关于不同类型胶原蛋白刺激成软骨作用的能力仍存在争议。
目的：观察Ⅰ、Ⅱ型胶原蛋白对体外培养人软骨细胞生物学特性的影响。
方法：将P3代人软骨细胞分别加入普通培养板、Ⅰ型胶原蛋白包被培养板、Ⅱ型胶原蛋白包被培养板继续培养。
培养10 d内，MTT法绘制细胞生长曲线；培养28 d后，采用ELISA法、聚合酶链反应、二甲基亚甲基蓝比色等方法检测3种培养板中软骨细胞分泌Ⅰ胶原蛋白、Ⅱ型胶原蛋白及糖胺多糖的量。
结果与结论：Ⅱ型胶原蛋白包被培养板中软骨细胞数量最多，增殖速度为Ⅰ型胶原蛋白包被培养板的2倍、普通培养板的5倍。
Ⅱ型胶原蛋白包被培养板中软骨细胞分泌Ⅰ型胶原蛋白最少，与普通培养板板检测结果差异有显著性意义(P < 0.01)，与Ⅰ型胶原蛋白包被培养板检测结果差异无显著性意义；Ⅱ型胶原蛋白包被培养板中软骨细胞分泌Ⅱ型胶原蛋白、糖胺多糖最多，与其他两种培养板检测结果差异有显著性意义（P< 0.01）。
表明胶原蛋白包被培养板培养软骨细胞优于普通培养板，其中Ⅱ型胶原蛋白包被培养板在培养软骨细胞时更能维持细胞形态，延长去分化现象出现的时间，更利于细胞再分化。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程
全文链接：
关键词：生物材料；软骨生物材料；Ⅰ型胶原蛋白培养板；Ⅱ型胶原蛋白培养板；人软骨细胞；体外培养；
Abstract：
BACKGROUND: Experiments have shown that the collagen substrate has the capability of stimulating cartilage generation, but the stimulating role of different types of collagen substrates remains controversial.
OBJECTIVE: To investigate the effect of type I and type II collagen on the biological characteristics of human chondrocytes cultured in vitro.
METHODS: Human chondrocytes at passage were cultured onto the ordinary culture plates (ordinary plate), type I collagen-coated culture plates (type I plate), and type II collagen-coated culture plates (type II plate). Cell growth curves were
determined by MTT method after cells were cultured for 10 days. By ELISA, PCR, and 1,9-dimethyl methyleneblue technology, type I and type II collagen and glycosaminoglycan contents were quantitatively detected in cartilage cells 28 days after culture.
RESULTS AND CONCLUSION: The number of cartilage cells was the highest in type II plate, which was twice of that in type I plate and five times of that in ordinary plate. Cartilage cells in type II plate secreted the least amount of type I collagen, which showed significant differences compared with the ordinary plate (P < 0.01) and had no statistically significant difference with type I plate (P > 0.01). Cartilage cells in type II plate secreted the most amount of type II collagen and glycosaminoglycan, showing significant differences compared with the other two plates (P < 0.01). The cartilage cells cultured in collagen plates are better than that cultured in ordinary culture plate, type II collagen culture plate is better than type I collagen culture plate in maintaining cell shape, extending the dedifferentiation pattern, and promoting cell differentiation.
中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程
全文链接：
Key words：collagen type I; collagen type II; chondrocytes;
中图分类号:R318
基金资助: 四川省卫生厅项目
通讯作者:蔚芃，主任医师，川北医学院附属医院骨科，四川省南充市637000
作者简介: 蒋萍，女，1983年生，四川省南充市人，汉族，2012年川北医学院毕业，硕士，医师，主要从事骨与关节损伤修复研究。
引用本文:
蒋萍,蔚芃,赵明才等. Ⅰ、Ⅱ型胶原蛋白对人软骨细胞生物学特性的影响[J]. 中国组织工程研究, 2014, 18(30): 4845-4850.
Jiang Ping,Wei Peng,Zhao Ming-cai et al. Effect of type I or type II collagen on biological characteristics of human chondrocytes[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2014, 18(30): 4845-4850.。