第十二章核酸化学.ppt
生物制药:第十二章 核酸类药物
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临床:病毒、肿瘤、艾滋病、产生干扰素、免疫抑制剂 代表药物:三氟代胸苷、叠氮胸苷、无环鸟苷、恩替卡韦等 制备方法:由自然结构核酸类物质通过半类药物
恩替卡韦
二、核酸类药物的生产方法
(一)核酸类药物的原材料 除病毒外,所有的动植
物组织中都含有核酸类物 质,包括大分子DNA和RNA、 小分子的核苷酸、核苷、碱 基等成分,但不同的组织中 含量有所不同。
酶液
混合,调pH 保温
鱼精
绞肉机粉碎
鱼精匀浆
热变性 冷却,过滤
DNA溶液
酶解液
加热使酶失活,调pH9.0置冷过夜,过滤
DNA降解液
吸附于氯型阴离子交换树脂分步洗脱
脱氧胞苷酸 dCMP
脱氧腺苷 dAMP
脱氧胸苷酸 dTMP
脱氧鸟苷酸 dGMP
三、主要核酸类药物的生产
1、RNA的提取——等电沉淀法
酵母菌体
稀NaOH,提取
提取液
中和,分离
抽提清液
pH2.5
RNA精品
洗涤、干燥
RNA粗品
工艺过程:
(1)预处理:压榨、除水;(2)提取:0.13%NaOH,使细胞壁变 性,使核酸从细胞内释放出来;(3)中和、除菌体;(4)分离:等 电点法,调pH2.5,使RNA沉淀下来;(5)洗涤、干燥
2、DNA的提取
猪脾脏
[预处理] 冷冻,绞碎
组织浆液
[预处理]
0.1M NaCl-0.5M 柠檬酸混合液,
离心
沉淀
[抽提] 1M NaCl
上清液
0.14M NaCl
沉淀物
95%乙醇
上清液 氯仿-异戊醇 (DNA)
溶解液
10% NaCl
生物化学第十二章核酸的生物合成
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表观遗传学调控
05
CHAPTER
核酸合成的应用
通过分析基因序列,检测是否存在突变位点,对遗传性疾病进行诊断。
基因突变检测
利用核酸合成技术检测特定基因的表达水平,有助于了解疾病的发生机制和个体差异。
基因表达分析
通过对特定人群进行核酸合成检测,可以对遗传性疾病进行筛查,提前采取干预措施。
遗传病筛查
在遗传疾病诊断中的应用
DNA复制从特定的起始点开始,称为复制起始点或原点。
复制的起始
DNA复制过程中,两条母链各提供一条单链作为模板,合成两条新的子链,形成半保留复制。
半保留复制
DNA复制过程中,两条母链同时进行复制,形成双向复制。
双向复制
DNA复制到达终止点时,复制过程结束。
复制的终止
DNA的复制
当DNA复制过程中出现碱基错配时,细胞会启动错配修复机制,纠正错配的碱基。
合成生物学
通过设计并合成特定功能的核酸序列,构建人工生物系统,实现生物功能的定制化。
药物研发
利用核酸合成技术对药物靶点或相关基因进行研究和改造,开发新型药物或优化现有药物疗效。
在生物技术中的应用
THANKS
感谢您的观看。
在转录过程中,RNA聚合酶与DNA分子结合,并沿着DNA链移动,将DNA序列转录为互补的RNA序列。
转录过程中,DNA的碱基序列被忠实地转录到RNA中,但RNA中的碱基序列可能与DNA中的碱基序列不完全相同,这主要由于RNA编辑和剪接过程。
转录过程中,RNA聚合酶还负责启动子识别、转录起始、延伸和终止等过程,以确保转录的准确性和效率。
生物化学第十二章核酸的生物合成
目录
核酸的合成概述 DNA的合成 RNA的合成 核酸合成的调控 核酸合成的应用
核酸—核酸的性质(生物化学课件)
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琼脂糖凝胶电泳常用于分析DNA。由于琼脂糖制品中往往带有核糖核 酸酶杂质,所以用于分析RNA时,必须加入蛋白质变性剂,如甲醛。 电泳完毕后,将胶在荧光染料啡啶溴红的水溶液中染色。DNA与啡啶溴红 结合后,经紫外光照射,可发出红-橙色可见光。0.1μg的DNA即可用此法 检出,十分灵敏。
用Tm表示。DNA的Tm值一般在70-85℃之间。 ◇变性的过程通常是一个跃变的过程,发生在一 个很窄的温度范围内, 一般为6-8℃。
5
1.4
A260相对值
1.3
1.2
1.1
Tm
1
10 20 30 40 50 60 70 80 90 10 11
温度
00
6
◇影响Tm大小的因素: ▽ DNA的均一性。均一性越高, DNA熔解温度范围
越窄 。
▽ 不同来源的DNA的Tm值是不同的,DNA分子中的 (G+C)含量与Tm值有关,GC%越高,则Tm值越大。这是由 于 在 DNA 分 子 中 , G≡C 碱 基 对 特 别 稳 定 的 原 因 。 G-C%=(Tm - 69.3)* 2.44,
Tm = 69.3 + 0.41*GC%
▽ 介质的离子强度越低, DNA的Tm越低, 熔解温度 的范围越窄. 故DNA制品应保存在较高浓度溶液中.常 常在1mol/L NaCl溶液。
◇热变性的DNA在缓慢冷却时可发生复性, 速冷却时则难以完全复性。
◇ DNA片段越大,复性越慢,
◇ DNA浓度越大,复性越快。
但迅Βιβλιοθήκη 10◆ 复性的条件:◇ 盐溶液浓度:
基础生物化学 第十二章(1-3节)-核酸的合成与分解
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+ H2 O
尿囊素
尿囊酸酶
+ H2 O
尿囊酸 4NH3
2CO2
尿酶
+2H2O
尿素
乙醛酸
二、嘧啶核苷酸的代谢1
1,尿嘧啶与胸腺嘧啶在哺乳动物体内分解时,先
还原成对应的二氢衍生物。
2,破开环状结构分别产生β-丙氨酸及β-氨基异
丁酸。
3,最后成为CO2和NH3
胞嘧啶具有氨基,所以要先在胞嘧啶脱氨酶的作
通过用同位素标记的化合物实验来 确定,即用标有同位素的各种营养物喂 鸽子,然后将其排出的尿酸进行分析。
(一)嘌呤环的元素来源2(图示)
天冬氨酸
N1
6C
CO2
甲酰FH4
C2
5C
N7
甘氨酸
C8 甲酰FH4 N3
谷氨酰胺
4C
N9
谷氨酰胺
(二)合成过程(总)
从头合成嘌呤的途径已于50年代被
Greenberg等基本搞清,此途径是在核糖- 5-磷酸的第一碳原子上逐步增加原子生 成次黄苷酸(肌苷酸) ,然后再由次黄 苷酸转变为腺苷酸和鸟苷酸。 反应分为两个阶段: 1,次黄苷酸的合成(11步反应) 2,腺苷、鸟苷的生成 (南大P480,图12-2)
途径称为补救途径。通过补救途径可以重新 利用核酸分解产生的嘌呤和嘧啶或它们的衍 生物。
从胸腺嘧啶或胸苷转变成胸苷酸的补救途径,
除真菌外,对所有细胞都是一样的,故常利 用放射性同位素标记胸腺嘧啶或胸苷参入DNA 的实验作为检查DNA合成的手段。
三、核苷酸合成的补救途径2
核苷 核糖-1-磷酸
激酶
核糖-5-磷酸
1.鸟嘌呤的分解
动物组织中广泛含有鸟嘌呤酶,可以催化 鸟嘌呤水解脱氨产生黄嘌呤,然后黄嘌呤在黄 嘌呤氧化酶的作用下氧化成尿酸。
核酸化学PPT课件
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DNA与RNA结构特点
DNA结构特点
DNA是一种长链生物聚合物,组成单 位为四种脱氧核苷酸,由碱基、脱氧 核糖和磷酸构成。
RNA结构特点
RNA由核糖核苷酸经磷酸二酯键缩合而 成长链状分子。一个核糖核苷酸分子由 一分子磷酸、一分子核糖和一分子含氮 碱基构成。
碱基互补配对原则
碱基互补配对原则是指在DNA分子结构中,由于碱基之间的氢键具有固定的数目和DNA两条链之间的距离保持不变,使得碱基配 对必须遵循一定的规律,这就是A(腺嘌呤)一定与T(胸腺嘧啶)配对,G(鸟嘌呤)一定与C(胞嘧啶)配对,反之亦然。
多肽。
基因编辑技术
如CRISPR-Cas9等,可对基因组 进行定点编辑,实现基因敲除、
敲入、突变等操作。
05
核酸药物设计与应用
抗病毒药物设 利用病毒基因序列中的特异性区域,设计与之互 补的核酸药物,通过阻断病毒基因复制或表达, 达到抗病毒效果。
靶向病毒关键蛋白的药物设计 针对病毒生命周期中的关键蛋白,设计能够与之 结合的核酸药物,从而阻止病毒的组装、释放等 过程。
RNA转录过程及调控
RNA转录的基本过程 转录起始、链延长、链终止与释放
RNA转录的酶学 RNA聚合酶、转录因子等
RNA转录的特点
模板链的选择性、转录的不对称性、 转录后加工等
RNA转录的调控
转录起始的调控、转录延伸的调控、 转录终止的调控
核酸酶作用及降解产物
核酸酶的种类与特性
01
核酸内切酶、核酸外切酶等
核酸的降解过程
02
核酸酶的切割作用、降解产物的生成与性质
核酸降解产物的应用
03
用于核酸序列分析、核酸检测等
03
核酸性质与功能
核酸的化学
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一、DNA的二级结构---DNA的双螺旋模 型
DNA的二级结构-双螺旋结构 DNA双螺旋结构的研究背景和历史意义 DNA双螺旋结构模型要点
DNA的二级结构 ——双螺旋结构
(一)双螺旋结构模型的实验依据
1、对DNA分子结晶的X衍射数据:由Franklin和Wilkins提供,来源 不同的DNA的二级结构非常相似。前者早逝,后者与Watson、Creck 分享了诺贝尔奖。
第二节
核酸的一级结构
5′端
核酸的一级结构
C
定义
核酸中核苷酸的排列
顺序。
A
由于核苷酸间的差异
主要是碱基不同,所以也
称为碱基序列。
G
3′端
核苷酸的连接方式
核苷酸之间以磷酸二酯键连接 形成多核苷酸链,即核酸。 DNA和RNA中的核苷酸残基 都是通过磷酸基团这个“桥” 而共价连接的。即核酸的主链 是由相间出现的磷酸核糖残基 通过共价键连接起来的,各种 碱基可以看成是联系在主链上 的侧链基团。 见P71图3-13
NN HOCH2 O
HH
H2N N N HOCH2 O
HH
H
H
H
H
OH OH
OH OH
腺嘌呤核苷
鸟嘌呤核苷
HO N HOCH2 O
HH
HO N HOCH2 O
HH
H
H
H
H
OH OH
OH OH
胞嘧啶核苷
尿嘧啶核苷
Adenosine Guanosine Cytidine Uridine
假尿苷(ψ) 见P66
1944年,O.T.Avery等人发表了"脱氧核糖型的 核酸是III型肺炎球菌转化要素的基本单位"即 DNA是细菌的转化因子,第一次证明了DNA是 遗传物质。
东北师范大学生物化学第十二章 核酸的生物合成1
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限制性 内切酶
3′—C—A—A—T—T
G—5′
粘性末端(该末端能与具有互补碱基的目的基 因的DNA片段连结 )
限制性内切酶:
识别DNA特定核苷酸序列 回文序列 限制性内切酶和核酸修饰酶共同作用, 保护自身的DNA 重要的生物化学工具酶
(八) 基因重组与DNA“克隆”
(九) 聚合酶链式反应(PCR)技术 与DNA扩增
不对称转录(以DNA的一条链位模板)
2 依赖DNA的RNA聚合酶
(1)以DNA为模板
(2)以四种核糖核苷三磷酸为底物 (3)链的生长方向是5′→3′(聚合酶) (4)不需要引物,也无校正功能
(5)产物第一个核苷酸带有3个磷酸基。
(1)大肠杆菌RNA聚合酶
全酶
α2 β β/ σ ω
核心酶(催化磷酸二酯键的形成) 识别起始位点
SSB防止双链 DNA形成
DNA旋转酶 (拓扑异构酶)
冈崎片段的RNA引物
冈崎片段需要引物,RNA引物的合成 “引发”:
引物合成酶:RNA聚合酶,催化合成约10个核苷酸
引物体
(催化合成 引物) 几种蛋白质
引物RNA在复制过程中暂时存在,最后通过PolⅠ的 5′→3′外切酶活力水解。
(3)DNA链的延长
5′→3′ 3′→5′ 5′→3′ 核酸外切酶 核酸外切酶 聚合酶
Klenow fragment
该酶由一条多肽链组成,分子量为109KD。
1. DNA聚合酶Ⅰ
5′→3′聚合酶活性
催化DNA链的延长
3′→5′外切酶活性
校对功能
5′→3′外切酶活性
切除RNA引物 DNA损伤修复
DNA聚合酶Ⅰ 分子量 每个细胞中的分子数
(1)大肠杆菌RNA聚合酶
第十二章 核酸代谢
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点
IMP 3. 在IMP基础上完成
AMP和GMP的合成
3. 以UMP为基础, 完 成CTP, dTMP的合成
5'-P-R PRPP
IMP
CO2+Gln H2N-CO-P
OMP
总结
AMP dAMP dGMP GMPUMP dUMP CMP dCMP dTMP
ADP dADP dGDP GDP UDP dUDP CDP dCDP dTDP
腺苷+Pi
腺苷+ATP
腺苷激酶
腺苷酸+ADP
生理意义
●节省: 减少从头合成时能量和原料的消耗 ● 作为某些器官(脑,骨髓和脾)合成核苷酸的途径
二、嘧啶核苷酸的合成代谢
(一)、从头合成途径
先合成嘧啶环,然后再与磷酸核糖连接生
成嘧啶核苷酸.
谷氨酰胺
C
N
C
天冬氨酸
CO2 C
C
N
(一) 从头合成途径的反应过程
CDP 核糖核苷酸还原酶
dNDP dADP dGDP dUDP dCDP
TDP
dTDP
dNDP+ATP dADP+ATP dGDP+ATP dUDP+ATP
dCDP+ATP
激酶 激酶 激酶 激酶 激酶
dNTP+ADP dATP +ADP dGTP+ADP dUTP+ADP
dCTP+ADP
dUDP O
(1) 嘌呤碱与PRPP直接合成嘌呤核苷酸
次黄嘌呤
次黄嘌呤核苷酸
90%
次黄嘌呤-鸟嘌呤
嘌呤碱 PRPP磷酸(H核G糖P转R移T酶) PPi
生物化学合工大第十二章核酸的酶促降解和核苷酸代谢ppt课件
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核糖核苷酸的生物合成
1、嘌呤核苷酸的生物合成
(1) 从头合成途径 (2) 补救途径(自学)
2、嘧啶核苷酸的生物合成
(1) 从头合成途径 (2) 补救合成途径(自学)
嘌呤环上各原子的来源
来自CO2 来自天冬氨酸
来自甘氨酸
来自“甲酸盐”
来自“甲酸盐”
来自谷氨酰胺的酰胺氮
5-磷酸核糖焦磷酸
甘氨酸
5-磷酸 核糖胺
HCHLeabharlann CH2N5N,5-NC1H0-OC-HF2H-F4 H4
一碳基团的 S-腺苷蛋氨酸 来源与转变
参与 甲基化反应
N5-CH2-FH4
丝氨酸 FH4
NAD+
NDAH+H+ N5 , N10 -CH2-FH4还原酶
N5 N10 - CH2-FH4
为胸腺嘧啶合 成提供甲基
NAD+ NDAH+H+
N5 , N10 -CH2-FH4脱氢酶
1、核酸酶的分类
(1)根据对底物的 专一性分为
核糖核酸酶(RNase) 脱氧核糖核酸酶(DNase)
非特异性核酸酶
核酸内切酶 (2)根据切割位点分为 核酸外切酶
2、核酸酶的作用特点
外切核酸酶对核酸的水解位点
BBBBBBBB
5´ p
p
p
p
p
p
p
p
OH 3´
牛脾磷酸二酯酶
( 5´端外切5得3)
蛇毒磷酸二酯酶
组氨酸 苷氨酸
FH4
N5, N10 = CH-FH4
参与嘌呤合成
HCOOH FH4
H2O 环水化酶
H+
N10 -CHO-FH4
核酸通论结构
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第十二章、核酸通论
(一)DNA是主要的遗传物质
❖ 1928年格雷费斯首次报告了其著名的 细菌转化实验。即已经被灭活的有毒 的光滑型肺炎球菌(S型)能在动物 体内使无毒的粗糙荚膜型肺炎球菌 (R型)变成有毒的S型。
核酸通论结构
第十二章、核酸通论
核酸通论结构
第十二章、核酸通论
DNA是遗传物质的证明——转化实验
核酸通论结构
第十二章、核酸通论
❖ RNA分子的种类较多,分子大小变 化较大,功能多样化。
❖ 主要的RNA种类有rRNA、mRNA、 tRNA、HnRNA、SnRNA、 SnoRNA、ScRNA等。
核酸通论结构
第十二章、核酸通论
RNA的分类
核蛋白体 RNA
信使RNA
转运RNA 不均一核
RNA 小核RNA
核酸通论结构
第十二章、核酸通论
DNA双螺旋结构的研究背景:
1950~1953,Chargaff研究小组对DNA的化学 组成进行了研究,发现:
① DNA碱基组成有物种差异,且物种亲缘关系越 远,差异越大;
② 相同物种,不同组织器官中DNA碱基组成相同, 而且不因年龄、环境及营养而改变;
③ DNA分子中四种碱基的摩尔百分比具有一定的 规律性,即A=T、G=C、A+G=T+C。这一规律被 称为Chargaff原则。核酸通论结构
第十二章、核酸通论
❖ 测序技术的突破导致提前完成测序任务,生
命科学进入”后基因组时代“(post-genome
era),出现“功能基因组学”(functional
genomics)、“蛋白质组学”(proteomics)、
“结构基因组学”(structural genomics)、
人卫第8版第十二章生物化学与分子生物学查锡良药立波主编第十二章物质代谢的整合与调节幻灯片PPT

目录
(三)肝是维持机体胆固醇平衡的主要器官
➢ 肝是合成胆固醇最活跃的器官,是血浆胆固醇的 主要来源;
➢ 胆汁酸的生成是肝降解胆固醇的最重要途径; ➢ 肝也是体内胆固醇的主要排泄器官;
目录
(四)肝是血浆磷脂的主要来源
体内大多数组织都能合成磷脂,但肝合成最 活跃。肝可利用糖及某些氨基酸合成磷脂,是血 液中磷脂的主要来源。
一、细胞水平的代谢调节主要调节 关键酶活性
• 细胞水平的代谢调节主要是酶水平的调节。 • 细胞内酶呈隔离分布。 • 代谢途径的速度、方向由其中的关键酶(key
enzyme)的活性决定。 • 代谢调节主要是通过对关键酶活性的调节而
实现的。
目录
(一)各种代谢酶在细胞内区隔分布是物质代谢
及其调节的亚细胞结构基础
一、各种能量物质的代谢相互联系 相互制约
三大营养素可在体内氧化供能。
三大营养素各 自代谢途径 糖
共同中 间产物
脂肪
乙酰CoA
共同代谢 途径
2H
TAC
蛋白质
CO2
ATP
从能量供应的角度看,三大营养素可以 互相代替,并互相制约。
一般情况下,机体优先利用燃料的次序 是糖原(50-70%)、脂肪(10-40%)和蛋 白质。供能以糖及脂为主,并尽量节约蛋白 质的消耗。
目录
三、肝的蛋白质合成及分解代谢均 非常活跃
(一)肝合成多数血浆蛋白质 ➢肝细胞的一个重要功能是合成与分泌血浆蛋白质( 清蛋白、凝血因子、载脂蛋白); ➢肝还是清除血浆蛋白质(清蛋白除外)的重要器官 。
目录
(二)肝内氨基酸代谢十分活跃
催化氨基酸转氨基、脱氨基、转甲基、脱羧基等反 应的酶类十分丰富 分解氨基酸、合成非必需氨基酸 利用一些氨基酸合成各种含氮化合物,如嘌呤类衍 生物、嘧啶类衍生物、肌酸、乙醇胺、胆碱等。
核酸化学-PPT课件
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第二节 核酸的化学组成
核酸是由几十个甚至几千万个核苷酸聚合而成的 具有一定空间结构的生物大分子。
基本元素:C、H、O、N、P ; 其中P 的含量比较稳定,占9%-10%,通过测
定P 的含量来推算核酸的含量(定磷法)。
核酸→核苷酸
磷酸 核苷
碱基 戊糖
一、戊糖
组成核酸的戊糖有两种。DNA所含的 糖为β-D-2-脱氧核糖;RNA所含的糖则 为β-D-核糖。
碱基平面之间的距离
(轴距)为0.34 nm,
每10个核苷酸形成一
小 沟
个螺旋,其螺距(即
螺旋旋转一圈)的高
度)为3.4 nm。
大 沟
DNA双螺旋结构模型要点(5)
两条链借碱基之间 的氢键和碱基堆积 力(即碱基之间的 范德华力)牢固的 连接起来,维持 DNA双螺旋的三 维结构。
两条链是碱基互补 关系。
第 四 章
核 酸 化 学
本章内容
第一节 概述 第二节 核酸的化学组成 第三节 核酸的分子结构 第四节 核酸的性质 第五节 核酸的研究方法
第一节 概 述
核酸(nucleic acid—NA)是一类重要 的生物大分子,担负着生命信息的储 存与传递。
核酸是现代生物化学、分子生物学的 重要研究领域,是基因工程操作的核 心分子。
(D o r h U )
H CH 3 N
N
N
NN
dR
N 6 -M e th y l-d A
NH 2
N
CH 3
ON
dR
5 -M e th yl-d C
(2)
Ade HO CH 2 O
HH
H OH
H OCH 3
2 '- O - 甲 基 腺 苷 ((AAmm) )
生物化学ppt核酸
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克隆技术
克隆技术是指通过无性繁殖的方 式复制生物体的技术,包括动物
克隆和植物克隆等。
克隆技术在畜牧业、农业和医学 等领域有着广泛的应用,如克隆 动物、转基因植物和组织工程等。
克隆技术的关键在于细胞核移植 和胚胎发育,目前已经成功实现 了哺乳动物的克隆,但技术难度 和伦理问题仍需进一步探讨。
基因治疗与基因诊断
04
核酸的功能
DNA的功能
遗传信息的储存
DNA是遗传信息的载体,通过碱基配对原则,将遗传信息从亲代 传递给子代。
基因表达的调控
DNA中的基因通过转录和翻译过程,控制蛋白质的合成,进而调 控生物体的各种功能。
细胞分裂与增殖的指导
DNA中的遗传信息指导细胞分裂、增殖和分化,维持生物体的正 常生长和发育。
RNA在蛋白质合成过程中起到模板和 催化作用,通过与核糖体的结合指导 氨基酸的合成。
DNA和RNA的比较
DNA和RNA都是核酸, 是生物体的遗传物质, 但它们的结构和功能有
所不同。
01
RNA主要存在于细胞质 中,负责传递遗传信息 并参与蛋白质的合成。
03
DNA中的碱基是A、T、 G、C,而RNA中的碱 基是A、U、G、C。
自然选择与进化
自然选择是指自然界对生物的 选择作用,适者生存,不适者
被淘汰。
自然选择是生物进化的主要动 力,通过自然选择的作用,使 适应环境的生物得以生存和繁
衍,并逐渐形成新的物种。
自然选择具有定向性,即有利 于生存和繁衍的变异会被保留 下来,不利于生存和繁衍的变 异则被淘汰。
自然选择的结果是生物多样性 的形成和生物的不断进化。
03
核酸的研究具有广泛的应用价值
通过对核酸的研究,可以深入了解生物体的生长、发育和代谢等过程,
2024人教版化学《核酸》PPT完美课件新教材1
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人教版化学《核酸》PPT完美课件新教材1contents •核酸概述与分类•核酸组成单位-核苷酸•DNA结构与功能解析•RNA结构与功能解析•核酸提取、纯化和鉴定方法•核酸在生物技术中应用前景目录核酸概述与分类核酸定义及功能核酸定义核酸功能核酸种类与结构特点核酸种类结构特点生物体内核酸分布及作用分布DNA主要分布在细胞核中,少量存在于线粒体和叶绿体中;RNA主要分布在细胞质中,包括mRNA、tRNA和rRNA等多种类型。
作用DNA作为遗传信息的载体,负责储存和传递遗传信息;RNA则参与蛋白质合成过程,包括转录和翻译等步骤。
此外,RNA还在基因表达调控、细胞信号传导等方面发挥重要作用。
02核酸组成单位-核苷酸磷酸基团五碳糖碱基030201核苷酸基本结构核苷酸种类与命名规则核苷酸种类命名规则核苷酸的命名通常由碱基名称、五碳糖类型和磷酸基团数目三部分组成,如腺嘌呤脱氧核糖核苷酸。
核苷酸间连接方式磷酸二酯键碱基配对DNA结构与功能解析DNA双螺旋结构特点双链反向平行碱基互补配对主链与碱基对之间的空间关系螺距与旋转角度遗传信息的编码遗传信息的稳定性遗传信息的多样性遗传信息的可变性DNA遗传信息储存原理复制和修复的意义DNA 复制和修复机制对于生物体的遗传信息传递、生物进化以及维持生命活动的正常进行具有重要意义。
DNA 复制以亲代DNA 为模板,在DNA 聚合酶的催化下,按照碱基互补配对原则合成子代DNA 的过程。
复制过程具有半保留性和半连续性。
DNA 修复生物体在进化过程中形成了一套完善的DNA 修复机制,包括直接修复、切除修复、重组修复和跨损伤修复等,以维持基因组的稳定性和完整性。
复制与修复的关系DNA 复制过程中可能出现错误配对或损伤,此时需要启动DNA 修复机制进行纠正。
同时,DNA 修复机制也可以保证复制过程的顺利进行。
DNA 复制和修复机制RNA结构与功能解析RNA单链结构特点作为信使RNA(mRNA),携带遗传信息并指导蛋白质合成作为转运RNA(tRNA),携带氨基酸进入核糖体并识别mRNA上的遗传密码作为核糖体RNA(rRNA),与核糖体蛋白共同组成核糖体,提供蛋白质合成的场所RNA在蛋白质合成中作用不同类型RNA功能介绍mRNA(信使RNA)tRNA(转运RNA)rRNA(核糖体RNA)其他非编码RNA核酸提取、纯化和鉴定方法核酸提取方法比较酚氯仿抽提法离心柱法磁珠法纯化策略及操作注意事项去除蛋白质使用蛋白酶K消化或有机溶剂去除蛋白质杂质。
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31 proteins
50S
23S RNA
5S RNA
21 proteins
30S
16S RNA
49 proteins
60S
核糖核酸(RNA) tRNA: 转运氨基酸工具 mRNA: 蛋白质合成的模版
第一节 核酸的分子组成
一、基本组成单位
核酸→→核苷酸→→
碱基(B) 戊糖(R) 磷酸(P)
核酸的基本组成单位
二、核苷酸的组成
H3P O4
磷酸
OH HO P OH
O
P
戊糖
H
碱基
嘌呤
(purine)
腺嘌呤 (adenine, A) 鸟嘌呤 (guanine, G)
dAMP, dA
OH H 脱氧鸟苷酸
dGMP, dG
OH H 脱氧胞苷酸
dCMP, dC
OH H 脱氧胸苷酸
dTMP, dT
(一、二、)三磷酸核苷
γ β α
OH OH OH
碱基
HO P O P O P OCH2 O
OOO
HH
H
H
N H2
N
N
OO
O
N
N
O P ~ O P~ O P OCH2
含有稀有碱基, 3/末端为CCA-OH结构(连接氨基酸)
tRNA的二级结构
四臂四环
•氨基酸臂:-CCA-OH,接受氨基酸 •反密码环:识别密码子
tRNA的三级结构
连接氨基酸
2、mRNA的结构
占总RNA5%,种类多 密码子:5‘→3’方向每相邻三个碱基组成的三联
体,代表一个氨基酸。 作用:蛋白质合成的直接模板
2、DNA的二级结构 1953年,Watson和Crick提出双螺旋结构模型
Chargaff 规则
不同物种的DNA碱基组成不同 同一生物体的不同组织的DNA的碱基组成相同 [A]=[T],[G]=[C],[A]+[G]=[T]+[C]
DNA双螺旋结构
DNA双螺旋结构特点
反向平行,右手螺旋 碱基在螺旋内侧,磷酸核糖的骨架在外侧 直径2nm,螺距3.4nm,10碱基对/圈 A=T,G≡C 稳定双螺旋:氢键(横向)
OH OH 尿苷酸
AMP, A
GMP, G
CMP, C
UMP, U
DNA中的脱氧核苷酸
NH2
N
N
O
HN
N
NH2 N
O HN
CH3
NN
H2N N N
ON
ON
H2O3P-OCH2 O
H2O3P-OCH2 O
H2O3P-OCH2 O
H2O3P-OCH2 O
HH
HH
HH
HH
H
H
H
H
H
H
H
H
OH H 脱氧腺苷酸
一、 DNA的分子结构
1.DNA的一级结构 由dAMP、dGMP、dCMP、dTMP四种脱氧
核苷酸通过3’,5’-磷酸二酯键按一定顺序排列 而成的高分子化合物。
即:DNA分子中脱氧核苷酸的排列顺序
DNA分子中能够表达生成蛋白质或RNA的核苷 酸序列——基因
一个细胞内全部DNA所包含的基因——基因组
戊糖与碱基的编号
5'CH2OO H OH
4' H H 1'
H
H
3' 2'
OH OH
6
7
1N 5 N
8
2
3
N
4
9
N H
4
3N
5
216
N H
三、核苷酸的结构 1、核苷 = 碱基 + 戊糖
N H2
N
N
N
N9
H O C H2
O
1
HO
OH
N H2 N
O
N1
H O C H2 O
1
2、核苷酸 = 核苷 + 磷酸
O
CH3
+
N
N
N
N
5
OOO
CH2
O
P O
O
P O
O
P O
5O
CH2 O
B
O
mRNA的5帽子结
O O CH3 O P O CH2
OB
3、核蛋白体RNA(rRNA)的结构
占总RNA80% 与蛋白质结合形成核蛋白体,是蛋白质生物合成
场所 核蛋白体有大、小两个亚基组成
原核
70S 大亚基 小亚基
真核 80S 大亚基
原核生物
5’ …………AUG……………………………… 3’ 富含嘌呤碱序列——SD序列 (与核糖体结合部位)
真核生物
5/端为m7GpppNm的帽子结构 3/端为poly A(200个)尾巴
5 ´帽子结构
密码子
3 ´多聚A尾
5´ m7Gppp
AUG
3´ GUG ……………… UAA AAA ……An
OO
O
O
HO
OH
AMP
环化核苷酸
O HO P O
N H2
N
N
5
C
H
N
2
N
O
O
3 O H
第二节 核酸的分子结构
核酸分子中核苷酸之间的连接方式: 3, 5 -磷酸二酯键
RNA
DNA
核酸结构的简写:
G C A TT
5´ P P
PP
P OH 3´
5 ´ p G pC pA pT pT-OH 3´ 5´ G C A T T 3 ´
第13章 核酸化学
8403
核酸
DNA(脱氧核糖核酸)
deoxyribonucleic acid
mRNA(信使RNA)
messenger
RNA(核糖核酸) tRNA(转运RNA)
ribonucleic acid
transfer
rRNA(核糖体RNA)
ribosomal
脱氧核糖核酸(DNA):遗传信息的载体 rRNA : 蛋白质合成场所
碱基 | 磷酸 — 戊糖
核苷 糖苷键
磷酸酯键 核苷酸
RNA中的核苷酸
NH2
N
N
O
HN
N
NH2 N
O HN
NN
H2N N N
ON
ON
H2O3P-OCH2 O
H2O3P-OCH2 O
H2O3P-OCH2 O
H2O3P-OCH2 O
HH
HH
HH
HH
H
H
H
H
H
H
H
H
OH OH 腺苷酸
OH OH 鸟苷酸
OH OH 胞苷酸
RNA和DNA组成
主要碱基
戊糖
RNA A G C U DNA A G C T
D-核糖 D-2-脱氧核糖
ห้องสมุดไป่ตู้
磷酸 部位 磷酸 胞质
磷酸 胞核
核酸中的稀有碱基
NH2
O
N
CH3 HN
R
ON H
ON H
5-甲基胞嘧啶 假尿嘧啶
CH3 NH
N
N
O
HN
N
N
N H
N6-甲基腺嘌呤
N
N H
次黄嘌呤
RNA特别是tRNA中含种类较多的稀有碱基
真核生物: DNA分子多 层次压缩包 装
二、RNA的分子结构
单链结构 RNA可以通过链内互补构成局部双螺旋 如果互补双链内部存在非互补碱基,就会
形成鼓泡、膨胀环或发卡结构
1、tRNA的结构
• 种类:60多种 • 含量:占总RNA的10%~15% • 作用:选择性转运氨基酸的工具 • 一级结构特点:
胞嘧啶 (cytosine, C)
嘧啶 胸腺嘧啶(thymine,T) (pyrimidine) 尿嘧啶 (uracil,U)
嘌呤
腺嘌呤(A)
鸟嘌呤(G)
(6-氨基嘌呤) (2-氨基-6-氧嘌呤)
嘧啶
胞嘧啶(C) 尿嘧啶(U) 胸腺嘧啶(T)
(2-氧 ,4-氨基嘧啶) (2,4-二氧嘧啶) (5-甲基尿嘧啶)