实验十一气相色谱能测定及条件选择方法
气相色谱仪的操作条件的选择方式
气相色谱仪的操作条件的选择方式2020-05-11 20:18【操作条件的选择方式】在固定相确信后，对一项分析任务，要紧以在较短时刻内，实现试样中难分离的相邻两组分的定量分离为目标来选择分离操作条件。
一．载气及其流速的选择由范氏方程能够看出，分子扩散项与载气流速成反比，而传质阻力项与流速成正比，因此必然有一最正确流速使板高H最小，柱效能最高。
最正确流速一样通过实验来选择。
其方式是：选择好色谱柱和柱温后，固定其它实验条件，依次改变载气流速，将必然量待测组分纯物质注入色谱仪。
出峰后，别离测出在不同载气流速下，该组分的保留时刻和峰底宽。
利用上述公式，计算出不同流速下的塔板数n值，并由H=L/n求出相应的塔板高度。
以载气流速u为横坐标，板高H为纵坐标，绘制出H-u 曲线。
曲线最低点处对应的塔板高度最小，相应的载气流速为最正确载气流速。
利用最正确流速尽管柱效高，但分析速度慢，因此实际工作中，为了加速分析速度，同时又不明显增加塔板高度的情形下，建议你采纳比u最正确稍大的流速进行测定。
对一样色谱柱（内径3~4mm）经常使用流速为20~。
关于载气的选择第一要考虑利用何种检测器。
若是你利用热导检测器，选用氢或氦作载气，能提高灵敏度。
而利用氢火焰检测器那么选用氮气作载气。
然后再考虑所选的载气要有利于提高柱效能的分析速度。
例如选用摩尔质量大的载气（如N2）能够使D g减小，提高柱效能。
二、柱温的选择柱温是气相色谱的重要操作条件，柱温直接阻碍色谱柱利用寿命、柱的选择性，柱效能和分析速度。
柱温低有利于分派，有利于组分的分离；但柱温太低，被测组分可能在柱中冷凝，或传质阻力增加，使色谱峰扩张，乃至拖尾。
柱温高，虽有利于传质，但分派系数变小无益于分离。
一样通过实验选择最正确柱温。
原那么是：使物质既分离完全，又不使峰形扩张、拖尾。
柱温一样选各组分沸点平均温度或稍低些。
当被分析组分的沸点范围很宽时，用同一柱温往往造成低沸点组分分离不行，而高沸点组分峰形扁平，现在你采纳程序升温的方法就能够使高沸点及低沸点组分都能取得中意结果。
如何进行气相色谱柱分析条件的选择-
如何进行气相色谱柱分析条件的选择?(1)提出问题气相色谱操作条件的挑选，经常打算是否能够达到分别的目的，而挑选实验条件的主要依据是范氏方程和分别度与各种色谱参数的关系式。
气相色谱柱分析条件的挑选主要包括柱温、载气种类和流速等。
适当的分析条件，可以在较短的时光内完成分析工作，并达到良好的定性定量目的。
在日常工作中，如何举行色谱柱分析条件的挑选?(2)解决计划①柱温的挑选柱温是影响分析时光和分别度的重要因素。
挑选柱温的依据是样品的沸点范围，固定液的配比，允许用法温度，以及检测器的敏捷度。
柱温主要影响分配系数、容量因子以及组分在流淌相和固定相中的蔓延系数，从而影响分别度和分析时光。
挑选柱温的原则，普通是在使难分别物质对达到要求的分别度条件下，尽可能采纳低温，其优点是可以增强固定相的挑选性，降低组分在流淌相中的纵向蔓延，提高柱效，削减固定液的流失、延伸柱寿命和降低检测器的本底。
提高柱温可以使保留时光缩短，加快分析速度，使样品中组分彻低流出，但是分别效果不好。
降低柱温，样品有较大的分配系数，挑选性高，有利于分别。
但温度过低，简单引起峰形拖尾或前伸，并且分析时光长。
可按照固定液的用法温度极限和样品组分沸点调整柱温。
对于高沸点混合物，在保证分别彻低的前提下，尽量降低柱温。
可在低于分析物沸点180～200℃的柱温下举行分析；对沸点不太高(200～300℃)的样品，柱温可选100℃以下；对于气体、气态烃等低沸点混合物，普通挑选室温或50℃以下举行分析。
对于宽沸程样品，需采纳程序升温法举行分别，即柱温按预先设定的程序随时问成线性或非线性增强，从而获得最佳的分别效果。
②载气的挑选普通来说，痕量分析或毛细管色谱的载气纯化程度，要高于常规分析。
特殊是电子捕捉、热导池检测器，载气纯度挺直影响敏捷度和稳定性，一定要严格净化。
按照分析对象，对于色谱柱的类型，操作仪器的档次和详细检测器，若用法不合要求的低纯度气体，不良影响有以下几种。
仪器分析气相色谱条件选择
硅胶（强极性） 分子筛
2.2颗粒直径
• 载体粒度越小，柱效越高。 • 但粒度太小，则阻力及柱压增加。 • 通常，对填充柱而言，粒度大小为内径的1/20—1/25为宜。
2.3气液色谱固定相的选择
• 液体固定相有载体和固定液两部分组成。 • 载体是一种多孔性的惰性颗粒物质，具有较大的比表面积。
2.4固定液的要求
2.4固定液的配比
• 配比即固定液与担体的质量之比，一般在5％到25％之间。 • 低固定液配比，柱效能高，分析速度快，但允许的进样量低。 • 高沸点样品用低固定液配比（载体和固定液配比,即固定液涂渍量较少,1% 到3%）,以防保留时间过长,峰扩散严重,导致柱效降低. • 使用低固定液配比时,固定液在载体表面必须涂渍良好,以防色谱峰拖尾； 低沸点样品宜用高固定液配比（5%到25）从而增大k,以达到良好分离.
• (3)标准曲线法也称为外标法：取标准被测成分按依次增加或减少阶段法，各自调制成标准液，注 入一定量后，按色谱图取标准被测成分的峰面积或峰高为纵坐标，而以标准被测成分的含量为横坐 标，制成标准曲线。然后按单体中所规定的方法制备试样液。取试样液按制标准曲线时相同的条件 作出色谱图，求出被测成分的峰面积和峰高，在相应组分的标准曲线上查出对应的浓度。
气相色谱法同时测定白酒中的8种物质
仪器：
气相色谱仪（配备FID），
DB-624UI(毛细管色谱柱）
条件：
柱温—程序升温 白酒沸点78.4℃以上，100℃以下。 试验考察了不同的初始温度(35℃、40 ℃、 50 ℃、60℃、 80 ℃、100℃)与不同分流比 组合色谱条件对被测成分分离度的影响，得 到最佳色谱条件。即柱温：初始温度为
当柱容量是主要考虑因素时（如痕量分析），选择大口径毛细管柱较为合适。
气相色谱分离操作条件的选择
气相色谱分离操作条件的选择气相色谱（GC）是一种广泛应用于化学分析的分离技术。
在进行气相色谱分离操作时，需要选择合适的操作条件以保证分离效果和分析结果的准确性。
操作条件的选择涉及到以下几个方面：1.色谱柱选择：色谱柱是GC分离的关键。
选择适合待分析物性质和样品基质的色谱柱非常重要。
常见的色谱柱有填充型和毛细管型两类，填充型色谱柱适用于绝大多数分析，毛细管型色谱柱适用于高分辨、高效率以及样品量较少的分析。
2.色谱流动相选择：色谱流动相的选择主要受样品性质、待测分子的化学活性以及待测物的反应性等因素的影响。
通常选择常见的有机溶剂（如乙腈、二甲基甲酰胺、甲醇等）作为色谱流动相。
3.蒸发器温度选择：蒸发器温度影响样品的蒸汽压和蒸发速率。
温度过低会导致待分析物不能完全蒸发，影响分离的效果；温度过高则可能导致样品的不稳定性和分解。
因此，需要根据待分析物的特性选择合适的蒸发器温度。
4.柱温选择：柱温是影响GC分离效果的关键因素之一、低温时，分离速度较慢，但分离程度较好；高温时，分离速度较快，但分离程度较差。
因此，柱温需要根据样品和待测物的性质以及分离要求进行调整。
5. 柱流速选择：柱流速影响分析的快速性以及分离效果。
流速过快会导致分离效果较差，分离峰变宽，而流速过慢则分离时间较长。
常用的柱流速一般为1-2 mL/min，根据样品性质和分析时间的要求进行选择。
6.应用适当的柱保护剂：GC分析过程中，待分析物有可能对柱产生损害，因此通常要考虑使用柱保护剂。
柱保护剂可减少来自于样品中杂质的残留和柱的损伤，提高色谱分析的稳定性和重复性。
选择合适的柱保护剂需要考虑样品性质、柱类型和待分析物化学性质等因素。
7.检测器选择：GC常用的检测器有火焰离子化检测器（FID）、热导检测器（TCD）、质谱检测器（MS）等。
根据分析要求选择合适的检测器。
8.样品前处理：样品前处理是样品在进入色谱仪之前的处理步骤，目的是去除样品中的杂质、浓缩待测物等。
气相色谱分析法分离操作条件的选择Ch课件
载气流速对色谱峰的分离效果和检测 器的灵敏度也有影响。流速过高可能 导致色谱峰过窄，降低分辨率；流速 过低则可能导致分析时间延长。
柱温的选择
01
02
03
固定相性质
不同的固定相具有不同的 热稳定性，因此柱温应根 据固定相的热稳定性来选 择。
样品性质
样品的沸点、分子结构和 性质等也会影响柱温的选 择。
分离效果
柱温对分离效果也有影响， 应根据分离要求选择合适 的柱温。
柱压的选择
固定相性质
不同的固定相具有不同的机械强度和稳定性，因此柱压应根 据固定相的性质来选择。
分离效果
柱压对分离效果也有影响，应根据分离要求选择合适的柱压。
进样量的选择
进样量过大
会导致峰宽增加，降低分 辨率和灵敏度。
进样量过小
会导致峰高增加，但峰宽 过窄，也会降低分辨率和 灵敏度。
流速的优化
01
恒流模式
在这种模式下，载气的流速保持不变，适用于组分复杂的样品分析。恒
流模式可以减少组分在柱子中的扩散，从而提高分辨率和峰形。
02 03
恒压模式
在这种模式下，载气的压力保持不变，适用于组分简单、只需要大致调 整流速的样品分析。恒压模式可以使流速更加稳定，从而减少峰形的变 化。
程序流速模式
较高温度
在较高温度下分离样品时，通常选择高于室温的柱温。这种条件下分离的样品主要是热稳 定性好、沸点较高、分子量较大的物质，如多炔烃、高分子化合物等。
柱压的优化
低压
低压条件下分离样品时，通常选择较低的柱压。这种条件下分离的样品主要是 分子量小、沸点低的物质，如烯烃、单炔烃等。
高压
高压条件下分离样品时，通常选择较高的柱压。这种条件下分离的样品主要是 分子量大、沸点高、热稳定性好的物质，如多炔烃、高分子化合物等。
试述气相色谱法色谱条件的选择
试述气相色谱法色谱条件的选择
气相色谱法的色谱条件选择主要包括以下几个方面：
1. 色谱柱选择：色谱柱是气相色谱法的关键部分，合适的色谱柱应具有良好的分离性和高效性。
选择色谱柱时需要考虑样品的性质、分离目标和分析条件等因素，常用的色谱柱包括非极性柱、极性柱和选择性柱等。
2. 柱温选择：柱温是气相色谱法中一个重要的操作条件，它会影响样品在色谱柱上的保留时间
和分离度。
一般通过改变柱温来调节分离效果，通常柱温的选择要考虑到样品稳定性、分离度
和分离速度等因素。
3. 柱衬底选择：柱衬底可以提高色谱柱的稳定性和降低分析物对柱的吸附性，常用的柱衬底材
料有聚硅氧烷和聚脂木素等。
4. 柱流速选择：柱流速是指气相色谱法中气相流速的选择，它会影响分离度和分析时间。
一般
来说，柱流速越高，分析时间越短，但可能会影响分离度。
柱流速的选择要综合考虑分离度、
分析时间和样品浓度等因素。
5. 检测器选择：气相色谱法常用的检测器包括火焰离子化检测器（FID）、热导率检测器（TCD）、质谱检测器（MS）等。
选择合适的检测器要考虑到样品的性质、检测灵敏度和选
择性等因素。
综上所述，气相色谱法的色谱条件选择需要综合考虑样品的性质、分离目标、分析条件和实验要求等因素，通过合理选择色谱柱、柱温、柱衬底、柱流速和检测器等条件，来达到最佳的分
离和分析效果。
气相色谱法色谱条件的选择
气相色谱法色谱条件的选择
气相色谱法（Gas Chromatography, GC）是常用的一种分离和
定性分析方法，其色谱条件的选择对于分析结果的准确性和稳定性至关重要。
以下是一些建议的气相色谱法色谱条件的选择：
1. 色谱柱选择：根据分析物的性质选择合适的色谱柱，如非极性柱、极性柱、离子柱等。
需要注意柱长、内径和填充物粒径的选择，这些参数可以根据分离目标和分析物的性质进行优化。
2. 载气选择：常用的载气包括氮气、氢气和乙烷等。
选择载气时要考虑分析物的挥发性、稳定性以及色谱柱的耐受性等因素。
此外，压力和流速也是需要考虑的参数，可以根据柱长和类型进行调整。
3. 柱温选择：柱温对于色谱分离的效果和分析时间有很大影响。
一般情况下，柱温可以根据分析物的挥发性和热稳定性进行优化，一般在室温至300℃之间选择。
4. 检测器选择：常用的检测器有火焰离子化检测器（Flame Ionization Detector, FID）、热导率检测器（Thermal Conductivity Detector, TCD）、质谱检测器（Mass Spectrometry, MS）等。
选择检测器时要考虑分析物的性质以
及灵敏度、选择性等因素。
5. 标准品选择：根据分析物的特性和分析要求选择合适的标准品，可以是单一化合物的标准品、混合标准品或是内标法等。
综上所述，选择适合的色谱条件是确保气相色谱法分析准确性和稳定性的重要环节，需要综合考虑分析物特性和要求、色谱柱、载气、柱温、检测器和标准品等各方面因素进行优化。
简述气相色谱分离操作条件的选择
气相色谱分离操作条件的选择包括以下几个方面：
1.柱温选择：柱温是气相色谱分离操作中最关键的因素之一，它直接影响到分离效果和分离速度。
一般来说，选择较高的柱温可以提高分离速度，但也会降低分离效果。
因此，需要根据样品的性质和分析目的来选择适当的柱温。
2.载气流速选择：载气流速也是影响气相色谱分离效果的重要因素之一。
一般来说，选择较高的载气流速可以提高分离速度，但也会降低分离效果。
因此，需要根据样品的性质和分析目的来选择适当的载气流速。
3.进样方式选择：进样方式包括顶空进样和液相进样两种方式。
顶空进样适用于挥发性较强的样品，而液相进样适用于挥发性较弱的样品。
需要根据样品的性质和分析目的来选择适当的进样方式。
4.柱子选择：柱子的选择也是影响气相色谱分离效果的重要因素之一。
不同类型的柱子具有不同的分离效果和分离速度，需要根据样品的性质和分析目的来选择适当的柱子。
5.检测器选择：检测器的选择也是影响气相色谱分离效果的重要因素之一。
不同类型的检测器具有不同的灵敏度和响应速度，需要根据样品的性质和分析目的来选择适当的检测器。
总之，选择适当的气相色谱分离操作条件需要综合考虑样品的性质、分析目的、仪器设备等多个因素，并通过试验和优化来确定最佳的操作条件。
气相色谱分析最佳实验条件的选择(精)
气相色谱分析最佳实验条件的选择1、实验目的掌握气相色谱仪基本结构、工作原理和操作, 了解气相色谱仪 ECD 检测器灵敏度的含义,掌握精密度及准确度测定方法。
2、实验原理(1电子捕获检测器(electron capture detector,ECD:结构:检测室内有正负电极与β-射线源,目前所使用的最佳的放射源是 63Ni , 在衰变中没有γ辐射,产生的β射线能量低,半衰期长,可用到 400℃。
原理:检测室内的放射源放出β-射线粒子(初级电子,与通过检测室的载气碰撞产生次级电子和正离子, 在电场作用下, 分别向与自己极性相反的电极运动, 形成检测室本底电流, 当具有负电性的组分 (即能捕获电子的组分进入检测室后, 捕获了检测室内的电子,变成带负电荷的离子,由于电子被组分捕获,使得检测室本底电流减少,产生倒的色谱峰信号。
ECD 主要用于分析卤素化合物、部分金属螯合物和甾族化合物。
工作条件:载气一般选用高纯氮气,气体中微量氧和微量水会污染检测室,必须用净化管除去。
灵敏度指分析方法对单位浓度或单位量的待测物质的变化所引起的响应量变化的程度。
常用标准曲线的斜率来度量灵敏度,灵敏度因实验条件而变。
标准曲线的直线部分以下式表示:A =kc+a式中:A ——仪器的响应量; c ——待测物质的浓度;a ——校准曲线的截距; k ——方法的灵敏度, k 值大,说明方法灵敏度高。
(2精密度即平行测定的结果互相靠近的程度,用偏差表示。
标准偏差用 S 表示: 样本相对标准又称变异系数, 是样本标准偏差在样本均值中所占的百分数, 记为 Cv 。
(3准确度表示测定值与真值之间的符合程度。
可以用加标回收的方法进行∑=−−=ni i x n s 12(11%100×=s C v评价。
3、仪器与试剂(1试剂正己烷 (分析纯 ,丙酮 (分析纯 ,单体六六六组分(分析纯。
(2仪器岛津 Shimadzu GC-2010,配备电子捕获检测器、自动进样器和 GC solution工作站; J &W 公司 DB-5 毛细管柱,柱长 30 m;内径250μm ;液膜厚度0.25μm 。
实验十一气相色谱分析脂肪酸
PART B 生物分离工程实验实验十一气相色谱分析脂肪酸一、实验目的通过分析甘油三酯中的脂肪酸的构成，学会运用衍生的方法和萃取的方法，掌握气相色谱的操作程序。
二、实验原理食用油脂的主要成分是甘油三酯。
甘油三酯是由一分子的丙三醇和三个分子的脂肪酸经酯化形成的。
甘油三酯在酸性条件下分解生成丙三醇和游离脂肪酸，游离脂肪酸与甲醇反应生成脂肪酸甲酯（甲酯化），通过有机溶剂的萃取将脂肪酸甲酯提取。
将提取的脂肪酸甲酯注入到气相色谱柱中进行分离，定性及定量。
三、实验材料与试剂1. 甲醇（色谱纯）2. 正己烷分析纯3. 浓盐酸4. 无水硫酸钠5. 10mL带塞子的玻璃试管1支四、实验仪器1. 气相色谱仪2. 恒温水浴锅3. 分析天平 0.001g4. 混匀器五、实验步骤1. 准确称取0.010±0.001g 油脂放入到玻璃试管中，加入2mL的4%HCL甲醇溶液，盖上塞子。
在60度下反应60min直至看不到油滴为止。
2. 冷却后，向玻璃试管中加入1mL蒸馏水和1mL正己烷溶液萃取脂肪酸甲酯。
3. 将萃取液移入到干净的试管中加入适量的无水硫酸钠进行脱水。
4. 提取1μL注入到气相色谱中进行检测。
色谱条件：载气为N2，流速36 mL/min，进样温度250℃，柱温170℃（保持10min）；以4℃/min升温至225℃（保持15min）六、计算根据各种脂肪酸标样的保留时间和未知样比较，来确定脂肪酸的组分，同时根据峰面积以使用归一法计算各种脂肪酸的含量。
脂肪酸组分含量（质量分数）= Ai/∑Ai × 100%七、思考题1. 什么样的物质不能使用气相色谱测定？2.气相色谱中使用的载气选择依据是什么？。
气相色谱操作条件选择
气相色谱操作条件选择选择
一、实验目的
1．在一定的色谱条件下，考察柱温的变化对色谱分离的影响；
2．掌握气相色谱柱效计算方法；
3．掌握气相色谱定性分析的一般方法。
二、实验原理
不同的温度下，不同组分（苯、甲苯和二甲苯）在流动相（气相）和固定相（液相）中的分配系数不同，其气相色谱保留值不同。
三、仪器和试剂
试剂：苯、甲苯和二甲苯。
色谱条件：福立GC-9790气相色谱仪；
毛细管柱：SE-54（5 ％苯基＋1％乙烯基＋94％聚二甲基硅氧烷）
0.50μm×0.25mm×15m；
氢火焰离子化检测器（FID）；
载气压力：0.06Mpa；
气化室温度150℃，柱温50℃，检测器温度250℃。
四、实验内容
调整柱温，分别为50 ，60 ，70℃，80℃，90℃；
用注射器吸取试样（苯、甲苯和二甲苯），进样；
记录完整的色谱图，观察色谱图中各色谱峰的分离情况。
五、结果处理
记录每一条件下的色谱图文件号，按要求处理每一张谱图。
针对每张谱图，记录5个色谱峰的保留时间、半峰宽以及二甲苯的分离度。
六、报告撰写
按要求完成报告。
1。
气相色谱分离条件的选择
气相色谱分离条件的选择分别条件的挑选是为了提高组分间的挑选性，提高柱效，使分别峰的个数尽量多，分析时光尽可能短，从而充分满足分别要求。
一液及其含量的挑选1．固定液挑选的普通逻辑普通可按“相像相溶”的原则来挑选固定液。
下列挑选固定液的普通逻辑，具有参考价值。
分别非极性化合物，普通选用非极性固定液，此时非极性固定液与试样间的作用力为色散力，被分别组分按沸点从低到高挨次流出；中等极性化合物，普通选用中等极性固定液，此时，固定液与试样间的作用力主要为诱导力和色散力，在这种状况下，组分基本按沸点从低到高先后流出，若沸点相近的极性和非极性化合物，普通非极性组分就先流出；强极性化合物，普通选用强极性固定液，固定液与组分之间主要是静电力（定向力）作用力，普通按极性从小到大的挨次流出；能形成氢键的化合物，普通选用极性或氢键型固定液，按试样组分与固定液分子形成氢键的能力从小到大地先后流出，不能形成氢键的组分最先流出；具有酸性或碱性的极性物质，可选用强极性固定液并加酸性或碱性添加剂；分别复杂的组分，可采纳两种或两种以上的混合固定液。
2．按照固定液挑选性常数挑选固定液固定液挑选性常数（Rohrschneider或McReynolds）能较好地反映固定液对不同类型化合物的分别挑选性。
固定液挑选性常数表可用于指导按组分和固定液之间的作用力来挑选合适的固定液。
假如在常数表中，挑选性类似的固定液有几种，就应挑选其中热稳定性好的固定液。
3．固定液含量以固定液与载体的质量比表示固定液的含量，它打算固定液的液膜厚度df，影响传质速率。
同时固定液含量的挑选与分别组分的极性、沸点以及固定液的性质有关。
低沸点试样多采纳高液载比（或液担比）的柱子，普通为20％一30%；高沸点试样则多采纳低液载比柱，普通为1%-10%。
二及其粒度的挑选若试样相对分子质量大、沸点高、极性大、用法的固定液量少，大都选用白色载体；试样的相对分子质量小、沸点低、非极性、固定液的用量多，则应选用红色载体；对于那些具有强极性、热和化学不稳定的化合物。
气相色谱操作条件的选择
气相色谱操作条件的选择胡焰1145044049 卫生检验在气相色谱分析中,我们要快速有效的分离一个复杂的样品,除了要选择一根最佳色谱柱以外,要对操作条件进行仔细的选择. 实际工作中,我们主要是要选择载气流速,进样技术,气化室温度,柱温,桥电流等几个方面,来有效的提高柱效率,使得分析出的色谱峰峰形正常,分离度高,从而提高分析结果的准确性.一、色谱柱的选择1、材料的选择色谱柱是决定色谱分离的核心，如果所选色谱柱对最难分享物质对的相对选择因子R=1，无论如何选择色谱条件，都不能得到分享。
影响选择因子的两个因素是固定相和柱温。
因此首先要有一根高效的、对被分析对象有效的色谱柱。
一根高效的、质量好的色谱柱应有选择性好、内壁惰性、温度使用范围广，这要取决于色谱柱的内表面和内表面上的固定相层，固定相在柱内壁是否形成均匀薄膜。
应根据分析对象，选择合适的柱材料、固定相、去活方法等。
对于永久性气体分析，一般选择填固体吸附剂的气固色谱柱，如分子筛用于永久性气体的分析，Parapak Q用于二氧化碳和不凝气的分析。
对于复杂的样品，一般选择毛细气液色谱柱，根据相似相容原理确定所选色谱柱的类型。
2、柱长的选择色谱柱长选择时，应考虑分离度、分析时间和色谱柱的成本，分离度与柱长的平方根成正比，而分析时间直接与柱长成正比，即如果通过增加色谱柱长，提高分离度，分离度增大1倍，柱长必须增加3倍。
一般填充柱的柱长在0.5-5m，对于毛细管色谱柱，一般柱长在10-30m间，可满足大多数分析的需求，对于复杂的混合物可采用50m、60m或100m的色谱柱。
在我们的实际工作，通常用15m的毛细管柱分析快速筛分简单混合物或高分子量的化合物；（发泡剂、6#油、苯），30m是普遍使用的柱长（天然气油），对汽油组分的分析，选用50m的色谱柱。
3、柱径的选择柱径的选择受多种因素制约人。
内径增大，意味着有更多的固定相，即使液膜厚度不增加，也有较大的样品容量，随着内径的减小，单位时间内的柱效率迅速增加，分离度增大，但样品的容量以内径的平方（r2）的关系减小；柱压降以1/ r4关系增加，对仪器的综合性能有较高的要求。
气相色谱操作条件的选择
5μL，10μL等。 进样量应控制在柱容量允许范围及检测器线性检测
范围之内。进样要求动作快、时间短。 气体试样应采气体进样阀进样。
2.气化温度的选择
色谱仪进样口下端有一气化器，液体试样进样后
，在此瞬间气化；
气化温度一般较柱温高30~70°C 防止气化温度太高造成试样分解。
越小，柱效越高，分析速度也越快。
配比较低时，固定相的负载量低，允许的进样 量较小。分析工作中通常倾向于使用较低的配比。 分析型色谱 制备型色谱
3.柱长和柱内径的选择
增加柱长对提高分离度有利（分离度R正比于柱 长L2），但组分的保留时间tR ↑ ，且柱阻力↑，不便 操作。 柱长的选用原则是在能满足分离目的的前提下 ，尽可能选用较短的柱，有利于缩短分析时间。 填充色谱柱的柱长通常为1~3米。 可根据要求的分离度通过计算确定合适的柱长 或实验确定。 柱内径一般为3~4厘米。
程序升温
二、 载气种类和流速的选择
1. 载气种类的选择
载气种类的选择应考虑三个方面：载气对柱效的影响、 检测器要求及载气性质。 载气摩尔质量大，可抑制试样的纵向扩散，提高柱效。 载气流速较大时，传质阻力项起主要作用，采用较小摩尔质 量的载气（如H2，He），可减小传质阻力，提高柱效。 热导检测器需要使用热导系数较大的氢气有利于提高检 测灵敏度。在氢焰检测器中，氮气仍是首选目标。 在载气选择时，还应综合考虑载气的安全性、经济性及 来源是否广泛等因素。
4.柱温的确定
首先应使柱温控制在固定液的最高使用温度（超过该温 度固定液易流失）和最低使用温度（低于此温度固定液以固 体形式存在）范围之内。 柱温升高，分离度下降，色谱峰变窄变高。柱温↑，被测 组分的挥发度↑，即被测组分在气相中的浓度↑，K↓，tR↓，低 沸点组份峰易产生重叠。 柱温↓，分离度↑，分析时间↑。对于难分离物质对，降低 柱温虽然可在一定程度内使分离得到改善，但是不可能使之 完全分离，这是由于两组分的相对保留值增大的同时，两组 分的峰宽也在增加，当后者的增加速度大于前者时，两峰的 交叠更为严重。 柱温一般选择在接近或略低于组分平均沸点时的温度。 组分复杂，沸程宽的试样，采用程序升温。
气相色谱方法的建立条件选择和方法评价
Stir Bar Sorptive Extraction (SBSE) 磁棒吸附萃取
Pat Sandra*Anal. Chem. 2001, 73, 1509-1514
5
SBSE principle
回收率
β=Vs/VPDMS
In situ (原位) derivatization–headspace–GC-MS 烷基磺酸酯类化合物衍生反应
O-Si(CH3)3
3
2
1 O-Si(CH3)3
+
O-Si(CH3)3
5HCl
2
Underivatized hormones Sample: Sex hormones, 100µg/mL each, underivatized
Derivatized hormones Sample: 100µg/mL each hormone in methanol or ethanol; compounds derivatized using 2% methoxylamine HCl (CH3ONH2) in pyridine
O CH2 O C R
O CH O C R
O CH2 O C R
+ CH3OH
O
R C O CH3 Volatile in Gas Chromatography
CH3ONa
O
3 R C O CH3 Volatile in Gas Chromatography
3
单糖醇乙酰酯衍生
取出1mL酸水解液样品(1mL标准糖溶液，以下步骤与样品 的测定相同)，置于离心管中，加入400µL 12mol/L氨水，混 匀，此时溶液应为碱性。加入100µL NaBH4溶液。旋涡混匀， 45℃水浴，lh。加100µL冰乙酸，混匀，pH值应小于8。取 500µL混合液到具盖离心管中，加500µL1-甲基咪唑和5mL乙酸 酐。混匀，放置至温度降至35℃ (约l0min)。加1mL无水乙 醇，混匀，冷水浴大约5min，下面的步骤均在冰上操作（加 完试剂后迅速加盖，防止生成的酯挥发）。加5mL水，混匀放 置5min。迅速加5mL 7.5mol/L氢氧化钾溶液，混匀。然后再 加入5mL 7.5mol/L氢氧化钾溶液，放置至少10min至液体分层。 离心，将上层无色的糖醇乙酸酯层转入上机用小瓶中，注意 勿吸下层水相。
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CHO+ + H2O ──→H3O+ + CO d. 化学电离产生的正离子和电子在外加恒定直流电场的作用下分别向两 极定向运动而产生微电流（约10-6～10-14A）；
A区：预热区 B层：点燃火焰 C层：热裂解区：
温度最高 D层：反应区
e. 在一定范围内，微电流的大小与进入离子室的被测组分质量成正比， 所以氢焰检测器是质量型检测器；
气体为流动相的色谱称为气
相色谱（GC）
a
6
随着流动相
不断加入，洗脱
作用连续进行，
直至A和B组分先
后流出柱子而进
入检测器，从而
使各组分浓度转
变成电信号后记 液体为流动相的色谱称液
录在记录仪上。 相色a 谱（LC）
7
关于程序升温
基本原理：
在一个分析周期里，柱温连续的随时 间由低温到高温线性的或非线性的变化 过程。分为线性升温或单阶线性升温 、 非线性升温或多阶线性升温。
渐应用于无色物质的分离，“色谱”
二字虽已失去原来的含义，但仍被
人们沿用至今。
a
3
石油醚
色素
碳酸钙颗粒
色谱
组分
a
4
在色谱法中，将填入玻璃管或不锈钢管内静止
不动的一相（固体或液体）称为固定相 ；自上而
下运动的一相（一般是气体或液体）称为流动相 ；
装有固定相的管子（玻璃管或不锈钢管）称为色谱 柱 。当流动相中样品混合物经过固定相时，就会
S=△R/ △Q
计算公式
浓度型：ST=AFC/W（mv·ml/mg）或（mv·ml/ml） Dg=2N/Sg（mg / ml）或Dv= 2N/Sv （ml/ml） 质量型： Sm= A/W（mv·s/g）Dt =2N/Sm（g/s）
a
16
物质量与响应值关系
R
△R
△Q
Q
a
17
噪声和漂移
a
18
实验步骤
与固定相发生作用，由于各组分在性质和结构上的 差异，与固定相相互作用的类型、强弱也有差异， 因此在同一推动力的作用下，不同组分在固定相滞 留时间长短不同，从而按先后不同的次序从固定相 中流出。
a
5
现代色谱
法的分离过 程与其含量 测定过程是 在线的，即 连续进行。 当一个二组 分（A和B） 的混合样品 在t1时间从柱 头加入。
1.恒温、程序升温对混合样品的分离比较 （1）柱温50℃:首先按上述色谱条件接通载气，
打开仪器电源开关，设置检测器、汽化室温度，
再设置柱温度50℃。待各温度达到设定值后，通 入氢气、空气，并为FID点火。同时接通计算机 电源，启动色谱工作站。待基线稳定后，取1μl混
合样品进样，出峰完毕，停止数据采集，从工作
f. 组分在氢焰中的电离效率很低，大约五十万分之一的碳原子被电离；
g. 离子电流信号输出到记录仪，得到峰面积与组分质量成正比的色谱流 出曲线。
a
15
关于灵敏度和检测限
灵敏度和检测线是衡量检测器敏感程度的指标 (参下张图)。单位量物质通过检测器时所产生信 号的大小为检测器对该物质的灵敏度。检测器分 为浓度型（如TCD）和质量型(如FID)两类 。
(2)样品进入色谱柱后,可得到良好分离 (3)n与半峰宽及半高峰宽的关系式
理论塔板数: n= 5.54(tR / W1/2)2 、理论塔板高度: H = L / n
{有效板数：
n有效=
5.54(tR
/
W1/2)2
、
a
有效板高
：
H有效
=
L
/
n有效}
11
tR和W1/2的测量
➢峰高 h ➢峰面积 A ➢峰拐点 E、F ➢峰宽 wb ➢半峰宽 w1/2
a
12
关于分离度
分离度R是一个综合性指标。
分离度是既能反映柱效率又能反映选择性的 指标，分离度又叫分辨率，它定义为相邻两组 分色谱峰保留值之差与两组分色谱峰底宽总和 之半的比值，即
R = 2 (tR2 - tR1) / W1 +W2
R值越大，表明相邻两组分分离越好。一般说， 当R<1时，两峰有部分重叠；当R=1时，分离 程 度 可 达 98% ； 当 R=1.5 时 ， 分 离 程 度 可 达 99.7%。通常用R=1.5作为相邻两组分已完全分 离的标志。
方法特点：
适用分析程序升温
柱 温
时a间
9
多阶程序升温
柱 温
时间a
10
关于塔板理论
假定: (1)在每小段,气相平均组成与液相平均组成可以很快达 到平衡,每小段高度称为理论塔板高度 (2)载气进入色谱柱是脉动似的,每次进气为一个板体积 (3)试样开始均加在第0号板上 (4)分配系数在各塔板上是常数(线性色谱) 内容: (1) 理论塔板数n>50(n=L/H)时,可得到基本对称的峰型 曲线
a
13
计算分离度时两峰之差和峰宽测量
a
14
氢焰检测器的原理
a. 当含有机物 CnHm的载气由喷嘴喷出进入火焰时，在C层发生裂解反 应产生自由基 ：CnHm ──→ · CH
b. 产生的自由基在D层火焰中与外面扩散进来的激发态原子氧或分子氧 发生如下反应：· CH + O ──→CHO+ + e
c. 生成的正离子CHO+ 与火焰中大量水分子碰撞而发生分子离子反应：
实验十一 气相色谱性能 测定及条件选择方法
a
1
色谱法的起源
a
2
色谱法早在1903年由俄国植物学 家茨维特分离植物色素时采用。
他在研究植物叶的色素成分时，
将植物叶子的萃取物倒入填有碳酸钙
的直立玻璃管内，然后加入石油醚使
其自由流下，结果色素中各组分互相
分离形成各种不同颜色的谱带。这种
方法因此得名为色谱法。以后此法逐
站（报2）告柱中温记8录0℃七：种将物柱质温tR设。置为80℃，待基线稳 定后，取1μ混合样品进样，停止数据采集后，记
录七种物质tR。
a
19
（3）程序升温：柱温在45℃恒温0.5min后，以 10℃/min速率升至80℃，再恒温2min后，结束一 个分析周期。设置方法为，先设柱温为45℃，再 依次操作：“PRG”键、“▽”键、输入“0.5”、 “ENTER”键；“▽” 键、输入“10”、 “ENTER” 键；“▽” 键、输入“80”、 “ENTER” 键；“▽” 键、输入“2”、“ENTER” 键。进1μl混合样品后，在开始采集数据同时，按 动色谱仪“START”键。停止采集后，记录七种 物（质4）tR将。程序升温的色谱图放大后，以（mm）为 单位，分别测量和记录乙酸乙酯、苯两个峰的峰
间距（tR2-tR1）和峰宽（W1、W2）。
a
20