临床实验室管理 第3章方法学选择与评价

检测限
limit of detection
生物参考区间
biological reference interval
可报告范围
reportable range
第一节 实验方法的评价与选择
一、实验方法的分级 二、参考物的分级 三、方法选择的原则 四、方法选择与评价基本步骤 五、定量实验的方法学评价 六、定性实验的方法学评价
• 实用性：备样本用量少、分析速度快、同时 进行多项目和多样本的分析；方法操作简便、 试剂种类少、易于实现自动化，安全可靠 ， 价格低廉 。
• 可靠性：较高的精密度和准确度，较宽的检 测范围。
三、方法选择的原则
可靠性： • 精密度：变异系数（CV%）一般应小于5% • 准确度是指测定值与“真值”的符合程度，一般
初 步 评 价
法
原 理 资 料 仪 器 试 剂
试
剂
成 分
生wenku.baidu.com
保 全物
存 稳
安
样 本 要 求
定
性
准 精 特 异 灵 敏
标 准 化 操 作 规 程
设 备 设 施
服 务 技 术 支 持
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五、定量实验的方法学评价
• 定量实验检测系统可以给出具体数值的 实验结果
• 定量实验的方法学评价包括: 线性范围、准确度、精密度、灵敏度、 特异度和参考区间等性能指标
基质的纯溶液。可由实验室自己配制或为 商品，其物质的量由参考方法定值或用一 级参考物比较而确定。 • 用途：主要用于 常规方法的标化
为控制物定值。
二、参考物分级
3.校准物 • 特点：冻干品或溶液，可以用一级或
二级参考物以参考方法定值。 • 用途：用于对常规方法和仪器的校准。
二、参考物分级
4.控制物(control material) 即质控品 • 特点：与检测过程相适应，成分及基质与检
第三章 方法学选择与评价
本章学习目标
• 实验方法和参考物质如何分级？ • 如何对新方法进行选择和评价？ • 误差如何分类和表示？ • 什么是测量不确定度？ • 如何评价检验方法的准确度和精密度？ • 如何评价检验方法的检测限和可报告范围？
第三章 方法学选择与评价
第一节 实验方法的评价与选择 第二节 量值溯源、误差及不确定度 第三节 方法学的评价
六、定性实验的方法学评价
• 定性实验结果：出阳性或阴性 是或非
• 定性检测性能评价：重复性研究 方法学比较
（一）评价前的准备
·实验室工作人员的培训 ·熟悉待评价的试剂或系统 ·掌握样本和试剂的处理和存储过程 ·按厂商的要求进行，注意基质效应 ·定性实验需进行阴性和阳性质控物测定
（二）定性实验重复性研究
二、参考物分级
1.一级参考物(primary reference material)
• 特点： 含量确定，稳定均一，数值由决定性方法 或由高度准确的若干方法确定
• 用途：可用于校正决定性方法，评价及校正参考 方法以及为“二级参考物”定值，一级参考物均 有证书
二、参考物分级
2.二级参考物 • 特点：纯溶液（水或有机溶剂）或某特殊
• 确立方法的临界值： 同样一份样本，在多次重复实验中各有50%的
几率获得阳性或阴性结果时该分析物的浓度； • 在临界值基础上准备出±20%的浓度的样本； • 样本分别测定20次，记录阴性及阳性结果数；
对于被测物浓度在临界
2.参考方法(reference method)
• 定义：是准确度与精密度已经充分证实， 干扰因素少，系统误差与重复测定的随 机误差相比可以忽略不计，有适当的灵 敏度、特异度及较宽的分析范围。
• 用途：主要用于鉴定常规方法或商品试 剂盒的质量评价。
3.常规方法(routine method)
• 定义：指性能指标符合临床需要，有足 够的精密度、准确度、特异性和适当的 分析范围，经济实用的临床常规检验方 法。
实验方法的分级
实验方法
准确度和精密 度的不同
决定性方法 参考方法 常规方法
A级 B级 C级
1.决定性方法(definitive method)
• 定义：是准确度最高、系统误差最小、经 过研究证明尚未发现其不准确度或不精密 度的方法，其测定结果与“真值”最为接 近。
• 用途：主要用于评价参考方法和对一级参 考物定值，而不直接用于鉴定常规方法。
偏差系数（CB）应小于5% • 特异性是指只与待测物质起化学反应，不与其他
结构类似的化合物发生反应 • 检测能力用检测限度或“检出限”衡量 • 检出限通常是指能与适当的“空白”读数相区别
的，检测系统可以检出的待测物的最小量
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四、方法选择与评价的基本步骤
提 出 要 求
收 料集
资
确 定 候 选 方
决定性 方法
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二、参考物分级
• 参考物也称标准品或标准物质 • 国际标准化委员会定义：它的一种或几种物理
或化学成分已经充分确定，可用于校准仪器、 评价测定方法或给其他物质定值的物质 • “参考物证书”的参考物称为有证参考物（ certified reference material, CRM） • 其定值由建立了溯源性的测量程序确定 • 每个参考物都附有其置信水平的不确定度: 标准值±总不确定度
测的样本相同或相似，且均匀、稳定。 • 用途：控制物用于常规质量控制，采用控制
物和样品同步进行测量，将测试结果与控制 物保证值相比较，以评价其准确度和检查实 验室内是否存在系统误差。
决定性方法
一级参考物
参考方法
二级参考物
校准物
控制物
常规方法
P42：各级实验方法和参考物的相互关系
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三、方法选择的原则
第一节 实验方法的评价与选择
方法学评价(evaluation of methodology) 是通过实验途径测定分析方法的技术性能,
并评价其是否可接受，其目的在于明确该方 法是否具有足够的方法性能来说明检测系统 的可靠性及可以满足临床需求。
方法学评价具体内容
方法学评价
准确度 accuracy
精密度 precision
• 用途：这类方法经有关学术组织认可后 可作为推荐方法。
第三章 方法学选择与评价
临床检验方法学分类
分析物
决定性方法
Ca
ID-MS（同位素稀释）
电量滴定
Cl
中子活化法
K
ID-MS 中子活化法
重量分析法
Na
中子活化法
参考方法 原子吸收分光光度法
电流滴定法 火焰光度法
火焰光度法 11
不同方法的关系
常规方法 参考方法