16种培养基配方

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几种主要培养基配方

几种主要培养基配方在微生物学和生物化学实验中，培养基是一种提供营养物质，促进微生物或细胞生长和繁殖的人工培养介质。

培养基配方的选择取决于所培养的生物的特性和需要。

以下是几种常见的主要培养基配方：1.液体培养基液体培养基是一种透明液体，主要由多种有机和无机化合物组成。

它提供了细胞所需的所有营养物质，并具有较高的溶解性。

液体培养基可以用于菌苗投放、菌种产生等实验。

常见的液体培养基配方包括：-LB培养基：由蛋白胨、酵母提取物和盐酸混合而成。

适用于大多数细菌的培养。

-TB培养基：类似于LB培养基，但含有甘油和磷酸盐缓冲液。

适用于产生大量细胞质或蛋白质的生物学实验。

-BHI培养基：由脑心肝提取物和酵母提取物组成。

适用于革兰氏阳性菌的培养。

-TSB培养基：由胨、酵母提取物和盐溶液混合而成。

适用于细菌和真菌的培养。

2.固体培养基固体培养基是将适当的凝固剂添加到液体培养基中，形成固体状态。

它用于细菌、真菌和许多其他微生物的分离和培养。

常见的固体培养基配方包括：-培养基琼脂：由琼脂和液体培养基配方混合而成。

适用于各种微生物的培养。

-布置气体：含有牛血、蔗糖和琼脂的培养基。

适用于肺炎球菌和其他嗜血菌的培养。

-罗盘琼脂：含有羊血、肉蔗糖和琼脂的培养基。

适用于嗜肺军团菌的培养。

-马铃薯葡萄糖琼脂：由马铃薯汁、葡萄糖和琼脂组成。

适用于真菌的培养。

3.选择性培养基选择性培养基是一种能够选择特定细菌生长的培养基。

它包含了一些抑制其他微生物生长的成分，以便于所需微生物的分离。

常见的选择性培养基配方包括：- MacConkey琼脂培养基：含有胆盐、素碱和结晶紫的培养基。

适用于革兰氏阴性菌的培养。

-EMB琼脂培养基：含有艾希希氏菌靛蓝和素碱的培养基。

适用于弧菌、大肠杆菌等细菌的培养。

- Pseudomonas琼脂培养基：含有铜硫酸、锌酸和金属钠的培养基。

适用于绿脓杆菌的培养。

4.部分定义培养基部分定义培养基是一种含有部分有机和无机成分的培养基。

细胞培养基及其配制方法

DMEM(A) 细胞培养基（粉末型）成分DMEM(H) 细胞培养基（粉末型）成分DMEM(L) 细胞培养基（粉末型）成分【DMEM专题】DMEM细胞培养基（二）配制方法及注意事项配制方法：（1）在一个尽可能接近总体积的容器中加入比预期培养基总体积少5％的双蒸水。

（2）在室温（20℃到30℃）的水中加入干粉培养基，轻轻搅拌，不要加热。

（3）水洗包装袋的内部，转移全部的痕量干粉到容器内。

（4）加NaHCO3到培养基中。

（5）用双蒸水稀释到想要的体积，搅拌溶解。

注意不要过分搅拌。

（6）通过缓慢搅拌加入1N NaOH 或1N HCL调节pH值，由于pH值在过滤时会上升0.1到0.3，因而调节pH值使它比最终想要的pH值低0. 2到0.3。

培养基在过滤前要保持密封。

配制培养基要注意以下问题：●认真阅读说明书。

说明书都注明干粉不包含的成分，常见的有NaHC O3、谷氨酰胺、丙酮酸钠、HEPES等。

这些成分有些是必须添加的，如NaHCO3、谷氨酰胺，有些根据实验需要决定。

●配制是要保证充分溶解，NaHCO3、谷氨酰胺等物质都要等培养基完全溶解之后才能添加。

●配制所用的水应是三蒸水，离子浓度很低。

●所用器皿应严格消毒。

●配制好的培养基应马上过滤，无菌保存于4度。

●液体培养基主要是为了科研工作的方便而设计的培养基，它是一种灭菌后保证无菌的溶液，必要时可制成无内毒素等的溶液，可节省科研人员的工作量。

DMEM各种成分都有什么作用一般的基础培养基包括四大类物质：无机盐、氨基酸、维生素、碳水化合物。

（1）无机盐：对调节细胞渗透压、某些酶的活性及溶液的酸碱度都是必须的。

（2）氨基酸：缬氨酸、亮、异亮、苏、赖、色、苯丙、蛋、组、酪、精氨酸、胱氨酸(L型)都是细胞用以合成蛋白质的必需氨基酸，不能由其他氨基酸或糖类转化合成。

除此之外，还需要谷氨酰胺(glutamine)。

谷氨酰胺具有特殊的作用，对细胞的培养特别重要，能促进各种氨基酸进入细胞膜；它所含的氮是核酸中嘌呤和嘧啶的来源，还是合成—磷酸腺苷、二磷酸腺甘和三磷酸腺苷的原料。

常用培养基配方范文

常用培养基配方范文培养基（Culture medium）是一种用于细菌、真菌、植物细胞、动物细胞和其他微生物的繁殖和生长的营养物质。

常用的培养基可分为发酵培养基、微生物培养基和细胞培养基。

下面列举了一些常用的培养基配方。

1. LB培养基（Luria-Bertani medium）成分：-牛肉提取物：10克-酵母提取物：5克-热可溶性淀粉：10克-氯化钠：10克-水：1升2. NB培养基（Nutrient broth）成分：-牛肉提取物或肉蔻精：8克-酵母提取物：4克-葡萄糖：4克-水：1升3. MacConkey培养基成分：-水解动物蛋白：17克-中和胆盐：1.5克-中性红：0.03克-水：1升4. TSB培养基（Tryptic soy broth）成分：-大豆胨：17克-酵母提取物：3克-水：1升5. BHIA培养基（Brain Heart Infusion Agar）成分：-脑心汤固体：37克-水：1升6.R2A培养基成分：-水解酵母提取物：0.5克-蛋白胨：0.5克-葡萄糖：0.5克-脱脂乳粉：0.5克-黄豆粉：0.5克-高氯酸钠：0.3克-多聚体1466：0.05克-水：1000毫升7.比尔斯氏培养基（BHI培养基）成分：-大豆胨：37克-脑心汤固体：2克-水：1升8. 培养基199（Medium 199）成分：-高锰酸钾：0.015克-硫酸：1.55克-磷酸一氢钠：0.184克-高氯酸钠：8.0克-溴酚蓝：0.4克-d-葡萄糖：5.55克-l-谷氨酸：40.525克-苏打粉：0.84克-水：1升9. DMEM培养基（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）成分：-苔藓胶原酸：1克-乳糖：1克- 谷氨酸：584mg- 水：1000ml这只是一小部分常见的培养基配方，实际上有很多种不同的培养基，它们根据不同的生物特性和培养需求来设计。

不同的培养基可以提供细菌、真菌、细胞等微生物生长需要的各种营养物质。

基本培养基配方

基本培养基配方基本培养基配方是微生物学研究中的重要基础工具，它提供了细菌、真菌、酵母等微生物生长所需的营养物质。

基本培养基配方的合理搭配可以促进微生物的生长和繁殖，为研究者提供了更多的机会来探索微生物的特性和功能。

本文将介绍几种常用的基本培养基配方，并对其组成成分进行详细的解析。

1. 营养琼脂培养基配方营养琼脂培养基是最常用的基本培养基之一。

其配方简单，包括蛋白质源、碳源、氮源、矿物质和水。

常见的蛋白质源包括胨、酵母提取物等，碳源可以是葡萄糖、蔗糖等，氮源可以是氨基酸、硝酸盐等。

矿物质的配方根据不同微生物的需求而有所差异。

营养琼脂培养基适用于细菌、真菌和酵母的培养。

2. 硝酸盐琼脂培养基配方硝酸盐琼脂培养基是一种特殊的培养基，主要用于细菌的培养和鉴定。

硝酸盐琼脂培养基的配方包括硝酸盐、碳源、氨基酸等。

硝酸盐是硝酸盐琼脂培养基的关键成分，它可以被某些细菌利用产生酸性代谢产物，从而改变培养基的颜色，用于鉴定细菌的特性。

3. 酸性琼脂培养基配方酸性琼脂培养基主要用于酸性条件下微生物的培养和筛选。

酸性琼脂培养基的配方包括有机酸、碳源、氮源等。

有机酸可以是柠檬酸、苹果酸等，碳源可以是葡萄糖、果糖等，氮源可以是氨基酸、硝酸盐等。

酸性琼脂培养基能够为酸性条件下的微生物提供适宜的生长环境，帮助研究人员开展相关研究。

4. 高盐琼脂培养基配方高盐琼脂培养基主要用于耐盐微生物的培养和筛选。

高盐琼脂培养基的配方中含有高浓度的盐类，如氯化钠、硫酸钠等。

这些盐类能够提供适宜的渗透压和离子浓度，满足耐盐微生物的生长需求。

以上是几种常用的基本培养基配方，它们在微生物学研究中起到了至关重要的作用。

通过合理搭配不同成分，基本培养基配方为微生物的生长和繁殖提供了良好的条件。

研究者可以根据不同微生物的需求选择合适的培养基，以便更好地开展相关研究工作。

总结起来，基本培养基配方是微生物学研究中不可或缺的工具。

它的合理搭配可以促进微生物的生长和繁殖，为研究者提供了更多的机会来探索微生物的特性和功能。

培养基配方及配置

培养基配方及配置
一般来说，培养基的配方包含基础培养基、添加剂和调节剂。

基础培养基是指提供生物体基本生长必需的基本成分，包括能源物质、有机和无机原料、氮源、矿质元素和缓冲物质等。

常用的基础培养基有
LB培养基、MS培养基等。

添加剂是指用于满足特定实验需求的成分，如抗生素、抗菌剂、激素、维生素等。

添加剂的种类和浓度根据实验目的的不同而有所差异。

调节剂是指用于调节培养基pH值、渗透压、表面张力等物理化学性
质的成分，如缓冲液、pH调节剂等。

以下是一个常用的细菌培养基LB的配方及配置：
1.基础培养基成分：
- 水：900ml
-蛋白胨：10g
-酵母提取物：5g
-NaCl：5g
2.添加剂：（可根据实验需求进行必要的添加）
- 抗生素（如氨苄青霉素）：100μg/ml
- 抗菌剂（如氯霉素）：25μg/ml
3.配制方法：
-将蛋白胨、酵母提取物和NaCl加入水中，并搅拌混合均匀。

- 将培养基溶液倒入容量瓶中，加水至1000ml，并混合均匀。

-调节pH值至7.0-7.2（一般使用缓冲液进行调节）。

-用自制滤纸过滤器滤过，将溶液分装至培养皿或试管中。

-如需添加抗生素或抗菌剂，将相应的药物加入培养基中，并充分溶解。

-培养基装瓶后可以高温高压灭菌，或使用滤器过滤进行无菌处理。

以上是一个简单的LB培养基的配方和配置流程，不同实验需要可能
会有所调整和变化。

在设计培养基配方时，需要结合具体实验目的和生物
体的特性来确定合适的成分和浓度，并注意配制和保管过程中的无菌操作，以确保培养基的质量和有效性。

各种培养基配方范文

各种培养基配方范文培养基是一种用于微生物培养的基础物质，能够为微生物提供所需的营养和环境条件。

不同的微生物在其生长过程中需要不同的养分和环境条件，因此培养基的配方需要根据微生物的需求来进行调整。

下面是几种常见的培养基配方。

1.大肠杆菌液体培养基配方：-蛋白胨或复合氮源：10g-酵母浸出物：5g-葡萄糖：1g-NaCl：5g-K2HPO4：2g-MgSO4：0.2g-pH调节至7.0后加水至1000mL2.牛心提取物琼脂糖培养基配方：-牛心提取物：3g-高级琼脂糖：15g-葡萄糖：10g-NaCl：5g-pH调节至7.0后加水至1000mL3.玉米浸出物琼脂糖培养基配方：-玉米浸出物：4g-高级琼脂糖：15g-酵母浸出物：1g-NaCl：5g-pH调节至7.0后加水至1000mL4.LB琼脂糖培养基配方：-液体LB培养基：10mL-高级琼脂糖：15g-NaCl：5g-pH调节至7.0后加水至1000mL 5.血寒养基配方：-羊血：50mL-肉浸出物：3g-酵母浸出物：3g-肉汤培养基：1L-红细胞素：5g-高级琼脂糖：3g-pH调节至7.0后加水至1000mL6.厌氧培养基配方：-肉浸出物：5g-酵母浸出物：5g-NaCl：5g-蒸馏水：900mL- 加入0.1%的L-cysteine：10mL-pH调节至7.0后用氮气替换空气注意事项：-培养基中的成分应严格按照配方比例加入，并保持无菌。

-配制好的培养基需要高温高压灭菌以保证无菌。

-不同的微生物可能对一些成分非常敏感，需要根据实际情况进行微调。

-培养基的pH值应根据微生物环境要求进行调整，一般在7.0左右。

-配好的培养基应存放在4℃的冰箱中，避免阳光直射以防止成分分解。

这只是一些常见的培养基配方，不同的微生物有不同的需求，可以根据具体的情况进行配方的调整。

在实际使用中，还需要根据微生物的特性和实验目的来选择合适的培养基。

微生物实验室常见20种培养基配方大全

微生物实验室常见20种培养基配方大全1.肉汤培养基成分：牛肉膏或牛肉汤500克，葡萄糖10克，胰蛋白胨10克，NaCl5克，蒸馏水1000毫升。

用途：适用于各种需有机氮源的细菌的培养。

2.十倍腌盐水成分：NaCl300克，蒸馏水1000毫升。

用途：适用于耐盐真菌和嗜盐细菌的培养。

3.果胶培养基成分：果胶5克，葡萄糖5克，NaNO32克，K2HPO40.2克，MgSO4·7H2O0.1克，CaCO30.02克，FeSO4·7H2O0.01克，蒸馏水1000毫升。

用途：适用于果胶酶产生菌的培养。

4.大肠杆菌选择性培养基成分：土豆提取物4克，蛋白胨2克，乳糖10克，NaCl10克，胆盐0.75克，碱性蓝2克，琼脂15克，蒸馏水1000毫升。

用途：适用于分离大肠杆菌的选择性培养。

5.卡波培养基成分：石蜡300克，肉浸膏100克，大豆酪蛋白胨20克，NaCl5克，琼脂15克，蒸馏水1000毫升。

用途：适用于致病真菌的培养。

6. Nutrient Broth培养基成分：肉膏1克，酵母提取物2克，葡萄糖2克，NaCl5克，琼脂15克，蒸馏水1000毫升。

用途：适用于细菌和真菌的常规培养。

7. Luria-Bertani（LB）培养基成分：酵母提取物5克，酪蛋白胨10克，NaCl10克，琼脂15克，蒸馏水1000毫升。

用途：适用于E. coli等细菌的培养。

8. Sabouraud葡萄糖琼脂培养基成分：葡萄糖40克，醇20克，琼脂15克，蒸馏水1000毫升。

用途：适用于真菌的培养。

9. MacConkey琼脂培养基成分：鱼精膏20克，胆盐胆红素15克，玛琪琼脂25克，NaCl5克，蒸馏水1000毫升。

用途：适用于肠道杆菌的培养、分离。

10.马加提琼脂培养基成分：马加提琼脂50克，蒸馏水1000毫升。

用途：适用于细菌、酵母和霉菌的常规培养。

11.酵母醇葡萄糖琼脂培养基成分：葡萄糖20克，醇30克，琼脂20克，蒸馏水1000毫升。

植物组织培养基及其配制

植物组织培养基及其配制培养基好比土壤，是组织培养中离体材料赖以生存和发展的基地。

因此，在组织培养基的各个环节中，应着重掌握培养基，了解它的组成和配制方法。

一、组成培养基的五类成分目前，大多数培养基的成分是由无机营养物、碳源、维生素、生长调节物质和有机附加物等五类物质组成的。

1.无机营养物无机营养物主要由大量元素和微量元素两部分组成，大量元素中，氮源通常有硝态氮或铵态氮，但在培养基中用硝态氮的较多，也有将硝态氮和铵态氮混合使用的。

磷和硫则常用磷酸盐和硫酸盐来提供。

钾是培养基中主要的阳离子，在近代的培养基中，其数量有逐渐提高的趋势。

而钙、钠、镁的需要则较少。

培养基所需的钠和氯化物，由钙盐、磷酸盐或微量营养物提供。

微量元素包括碘、锰、锌、钼、铜、钴和铁。

培养基中的铁离子，大多以螯合铁的形式存在，即FeSO4与Na2—EDTA(螯合剂)的混合。

2.碳源培养的植物组织或细胞，它们的光合作用较弱。

因此，需要在培养基中附加一些碳水化合物以供需要。

培养基中的碳水化合物通常是蔗糖。

蔗糖除作为培养基内的碳源和能源外，对维持培养基的渗透压也起重要作用。

3.维生素在培养基中加入维生素，常有利于外植体的发育。

培养基中的维生素属于B族维生素，其中效果最佳的有维生素B1、维生素B6、生物素、泛酸钙和肌醇等。

4.有机附加物包括人工合成或天然的有机附加物。

最常用的有酪朊水解物、酵母提取物、椰子汁及各种氨基酸等。

另外，琼脂也是最常用的有机附加物，它主要是作为培养基的支持物，使培养基呈固体状态，以利于各种外植体的培养。

5.生长调节物质常用的生长调节物质大致包括以下三类：(1)植物生长素类。

如吲哚乙酸(IAA)、萘乙酸(NAA)、2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D)。

(2)细胞分裂素。

如玉米素(Zt)、6-苄基嘌呤(6-BA或BAP)和激动素(Kt)。

(3)赤霉素。

组织培养中使用的赤霉素只有一种，即赤霉酸(GA3)。

二、常用培养基配方及其特点1.常用培养基配方组织培养是否成功，在很大程度上取决于对培养基的选择。

大肠杆菌一般培养方法

大肠杆菌一般培养方法大肠杆菌是一种常见的肠道细菌，也是实验室常用的模型菌株之一、它具有许多重要的应用价值，如基因工程、发酵制药和生物学研究等。

因此，了解大肠杆菌的常规培养方法是非常重要的。

大肠杆菌的培养基本上可以分为两个类型：液体培养基和固体培养基。

下面我将为您详细介绍。

1.液体培养基液体培养基是一种将细菌培养在含有养分的液体中的方法。

使用液体培养基可以快速扩大大肠杆菌数量，并且可以用于后续实验，如基因克隆和蛋白表达等。

下面是一种常见的液体培养基配方：- 色氨酸酸盐 (tryptone): 10g/L- 酵母粉 (yeast extract): 5g/L-氯化钠(NaCl):10g/L- 葡萄糖 (glucose): 5g/L-洗涤剂提供的磷酸缓冲溶液(PBS)：500mL，pH值自动调整到7.0将这些成分溶解在适量的去离子水中，并将溶液进行无菌过滤。

然后将无菌培养基分装到培养瓶中，每个瓶子的体积约为250-500mL，用铝箔进行覆盖。

接种数量的大肠杆菌通常为菌液的10-20倍。

将培养瓶放在摇床上以200rpm的速度培养，温度为37°C。

培养时间一般为12-16小时。

2.固体培养基固体培养基是将细菌培养在含有固体化剂（如琼脂）的培养基上的方法。

使用固体培养基可以使大肠杆菌形成菌落，便于分离和挑选单个菌落。

下面是一种常见的固体培养基配方：- 琼脂 (agar): 15g/L- 色氨酸酸盐 (tryptone): 10g/L- 酵母粉 (yeast extract): 5g/L-氯化钠(NaCl):10g/L- 葡萄糖 (glucose): 5g/L-洗涤剂提供的磷酸缓冲溶液(PBS)：500mL，pH值自动调整到7.0将这些成分溶解在适量的去离子水中，并将溶液进行无菌过滤。

然后将无菌培养基分装到试管或平盘中，每个试管或平盘的体积约为10-15mL或20-25mL，用无菌塞子或膜进行封口。

16种培养基配方

7.2，可用于培养细菌，121℃灭菌20min。
9．查（察）氏培养基
成分：
NaNO3 2g，K2HPO4 1g，MgSO
4. 7H2O
0.5g，KCL
0.5g，FeSO
4.7H2O
0.01g，蔗糖30g，琼脂15~20g，蒸馏水1000mL，pH值自然。
制法：
加热溶解，分装后121℃灭菌20min。
0.025g，水1000mL，pH
7.2~
7.6
制法：
按量将各成分（酚红除外）混合，加热使完全溶解，调pH至
7.4±
0.2。加1%的酚红溶液
2.5mL，混匀。121℃高压灭菌15min
13．高氏一号（淀粉琼脂）培养基（主用于放线菌、霉菌培养）
可溶性淀粉20g，KNO3 1g，NaCL
0.5g，K2HPO4
7．豆芽汁液体培养基
成分：
豆芽汁10mL，磷酸氢二铵1g，KCL
0.2g，MgSO
4.7H2O
0.2g，xx20g。
制法：
将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调pH至
6.2~
6.4，分装于三角瓶中，
0.04%的溴甲酚紫酒精溶液（黄色
5.2~
6.8紫色）作为指示剂，115℃灭菌20min。
豆芽汁制备：
7.2~
7.4，121℃灭菌20min。若加入15~20g琼脂即成固体培养基。
15．xx培养基（醋酸钠xx培养基）
葡萄糖
1.0g，KCL
1.8g，酵母汁
2.5g，醋酸钠
8.2g，琼脂15g，蒸馏水1000mL，pH自然，
0.7kg/cm2灭菌30min。
16．高盐察氏培养基(用于霉菌和酵母菌计数、分离用)

70种常用培养基配方大全

常用培养基配方目录01糖发酵管02ONPG培养基03西蒙氏柠檬酸盐培养基04缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR和VP试验用) 05克氏柠檬酸盐培养基06丙二酸钠培养基07葡葡糖铵培养基08Hugh-Leifson培养基(O/F试验用)09马尿酸钠培养基10营养明胶11苯丙氨酸培养基12氨基酸脱羧酶试验培养基13蛋白胨水(靛基质试验用)14硫酸亚铁琼脂(硫化氢试验用)15尿素琼脂16氰化钾(KCN)培养基17氧化酶试验18硝酸盐培养基19细胞色素氧化酶试验20过氧化氢酶试验21过氧化物酶试验22磷酸盐缓冲液23明胶磷酸盐缓冲液24乳酸-苯酚溶液25肉浸液肉汤26肉浸液琼脂27牛肉(或牛心)消化汤28血消化汤29豆粉琼脂30血琼脂31营养琼脂32营养肉汤33乳糖胆盐发酵管34乳糖发酵管35EC肉汤36缓冲蛋白胨水(BP)37氯化镁孔雀绿增菌液(MM)38四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB)39四硫磺酸钠煌绿增菌液(换用方法)40亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)41GN增菌液42肠道菌增菌肉汤43亚硫酸铋琼脂(BS)44DHL琼脂45HE琼脂46SS琼脂47WS琼脂48麦康凯琼脂49伊红美蓝琼脂(EMB)50三糖铁琼脂(TSI)51三糖铁琼脂(换用方法)52克氏双糖铁琼脂(KI)53克氏双糖铁琼脂(换用方法)54葡萄糖半固体发酵管555%乳糖发酵管56CAYE培养基57Honda氏产毒肉汤58Elek氏培养基(毒素测定用)59氯化镁孔雀绿羧苄青霉素培养基60胰蛋白胨水61Rustigian氏尿素培养液62氯化钠结晶紫增菌液63氯化钠蔗糖琼脂64嗜盐菌选择性琼脂65 3.5%氯化钠三糖铁琼脂66氯化钠血琼脂67 3.5%氯化钠生化试验培养基68改良磷酸盐缓冲液(小肠结肠炎耶尔森氏菌专用)69CIN-1培养基70嗜盐性试验培养基01糖发酵管成分:牛肉膏5g蛋白胨10g氯化钠3g磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O)2g0.2%滇麝香草酚蓝溶液12mL蒸馏水1000m LpH7.4制法:1葡萄糖发酵管按上述成分配好后,按0.5%加入葡萄糖,分装于有一个倒置小管的小试管内,121℃高压灭菌15min.2其他各种糖发酵管可按上述成分配好后,分装每瓶100mL,121℃高压灭菌15min.另将各种糖类分别配好10%溶液,同时高压灭菌.将5mL糖溶液加入于100m L培养基内,以无菌操作分装小试管.注:蔗糖不纯,加热后会自行水解者,应采用过滤法除菌.试验方法:从琼脂斜面上挑取小量培养物接种,于36℃±1℃培养,一般观察2～3d.迟缓反应需观察14～30d.02ONP G培养基成分:邻硝基酚β-D-半乳糖昔(ONPG)60mg(O-Nitroph en yl-β-D-ga lactop yran o side)0.01m ol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5)10m L1%蛋白胨水(PH7.5)30m L制法:将ONP G溶于缓冲液内,加入蛋白胨水,以过滤法除菌,分装于10mm×75mm试管,每管0.5mL,用橡皮塞塞紧.试验方法:自琼脂斜面上挑取培养物1满环接种,于36±1℃培养1～3h和24h观察结果.如果β-半乳糖苷酶产生,则于1～3h变黄色,如无此酶则24h不变色.03西蒙氏柠檬酸盐培养基成分:氯化钠5g硫酸镁(MgS O4·7H2O)0.2g磷酸二氢铵1g磷酸氢二钾1g柠檬酸钠5g琼脂20g蒸馏水1000m L0.2%溴麝香草酚蓝溶液40mLpH6.8制法:先将盐类溶解于水内,校正pH,再加琼脂,加热溶化.然后加入指示剂,混合均匀后分装试管,121℃高压灭菌15min.放成斜面.试验方法:挑取少量琼脂培养物接种,于36±1℃培养4d,每天观察结果.阳性者斜面上有菌落生长,培养基从绿色转为蓝色.04缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR和VP试验用)成分:磷酸氢二钾5g多胨7g葡萄糖5g蒸馏水1000m LpH7.0制法:溶化后校正pH,分装试管,每管1mL,121℃高压灭菌15min.甲基红(MR)试验:自琼脂斜面挑取少量培养物接种本培养基中,于36±1℃培养2～5d,哈夫尼亚菌则应在22～25℃培养.滴加甲基红试剂一滴,立即观察结果.鲜红色为阳性,黄色为阴性.甲基红试剂配法:10mg甲基红溶于30mL95%乙醇中,然后加入20mL蒸馏水.V-P试验:用琼脂培养物接种本培养基中,于36±1℃培养2～4d.哈夫尼亚菌则应在22～25℃培养.加入6%α-萘酚-乙醇溶液0.5mL和40%氢氧化钾溶液0.2mL,充分振摇试管,观察结果.阳性反应立刻或于数分钟内出现红色,如为阴性,应放在36±1℃下培养4h再进行观察.05克氏柠檬酸盐培养基成分:柠檬酸钠3g葡萄糖0.2g酵母浸膏0.5g单盐酸半胱氨酸0.1g磷酸二氢钾1g氯化钠5g0.2%酚红溶液6mL琼脂15g蒸馏水1000m L制法:加热溶解,分装试管,121℃高压灭菌15min.放成斜面.试验方法:用琼脂培养物接种整个斜面,在36±1℃培养7d,每天观察结果.阳性者培养基变为红色.06丙二酸钠培养基成分:酵母浸膏1g硫酸铵2g磷酸氢二钾0.6g磷酸二氢钾0.4g氯化钠2g丙二酸钠3g0.2%溴麝香草酚蓝溶液12mL蒸馏水1000m LpH6.8制法:先将酵母浸膏和盐类溶解于水,校正pH后再加入指示剂,分装试管,121℃高压灭菌15min.试验方法:用新鲜的琼脂培养物接种,于36±1℃培养48h,观察结果.阳性者由绿色变为蓝色.07葡葡糖铵培养基成分:氯化钠5g硫酸镁(MgS O4·7H2O)0.2g磷酸二氢铵1g磷酸氢二钾1g葡萄糖2g琼脂20g蒸馏水1000m L0.2%溴麝香草酚蓝溶液40mLpH6.8制法:先将盐类和糖溶解于水内,校正pH,再加琼脂,加热溶化,然后加入指示剂,混合均匀后分装试管,121℃高压灭菌15min,放成斜面.试验方法:用接种针轻轻触及培养物的表面,在盐水管内做成极稀的悬液,肉眼观察不见混浊,以每一接种环内含菌数在20～100之间为宜.将接种环灭菌后挑取菌液接种,同时再以同法接种普通斜面一支作为对照.于36±1℃培养24h.阳性者葡萄糖铵斜面上有正常大小的菌落生长;阴性者不生长,但在对照培养基上生长良好.如在葡萄糖铵斜面生长极微小的菌落可视为阴性结果.注:容器使用前应用清洁液浸泡.再用清水,蒸馏水冲洗干净,并用新棉花做成棉塞,干热灭菌后使用.如果操作时不注意,有杂质污染时,易造成假阳性的结果.08Hugh-Leifson培养基(O/F试验用)成分:蛋白胨2g氯化钠5g磷酸氢二钾0.3g琼脂4g葡萄糖10g0.2%溴麝香草酚蓝溶液12mL蒸馏水1000m LpH7.2制法:将蛋白胨和盐类加水溶解后,校正pH至7.2.加入葡萄糖,琼脂煮沸,溶化琼脂,然后加入指示剂.混匀后,分装试管,121℃高压灭菌15min,直立凝固备用.试验方法:从斜面上挑取小量培养物作穿刺接种,同时接种两支培养基,其中一支于接种后滴加溶化的1%琼脂液于表面,高度约1cm,于36±1℃培养.09马尿酸钠培养基成分:马尿酸钠1g肉浸液100mL制法:将马尿酸钠溶解于肉浸液内,分装于小试管内,并于管壁画一横线.以标志管内液面高度,121℃高压灭菌20min.试剂:三氯化铁(FeCl3·6H2O)12g,溶于2%盐酸溶液100m L中即成.试验方法:用纯培养物接种,于42℃培养48h,观察培养液是否到达试管壁上记号处,如不足时,用蒸馏水补足至原量.经离心沉淀,吸取上清液0.8mL,加入三氯化铁试剂0.2mL,立即混合均匀,经10～15min,观察结果.结果:出现恒久之沉淀物为阳性.10营养明胶成分:蛋白胨5g牛肉膏3g明胶120g蒸馏水1000m LpH6.8～7.0制法:加热溶解,校正至pH7.4～7.6,分装小管,121℃高压灭菌10min,取出后迅速冷却,使其凝固.复查最终pH应为6.8～7.0.试验方法:用琼脂培养物穿刺接种,放在22～25℃培养,每天观察结果,记录液化时间.或放在36士1℃培养,每天取出,放冰箱内30min后再观察结果.11苯丙氨酸培养基成分:酵母浸膏3gDL-苯丙氨酸(或L-苯丙氨酸1g)2g磷酸氢二钠1g氯化钠5g琼脂12g蒸馏水1000m L制法:加热溶解后分装试管,121℃高压灭菌15min,使成斜面.试验方法:自琼脂斜面上挑取大量培养物,移种于苯丙氨酸琼脂,在36±1℃培养4h或18～24h.滴加10%三氯化铁溶液2～3滴,自斜面培养物上流下,苯丙氨酸脱氨酶阳性者呈深绿色.12氨基酸脱羧酶试验培养基成分:蛋白胨5g酵母浸膏3g葡萄糖1g蒸馏水1000m L1.6%滇甲酚紫-乙醇溶液1mLL-氨基酸或DL-氨基酸0.5或1g/100mLpH6.8制法:除氨基酸以外的成分加热溶解后,分装每瓶100m L,分别加入各种氨基酸:赖氨酸,精氨酸和鸟氨酸.L-氨基酸按0.5%加入,DL-氨基酸按1%加入.再行校正pH至6.8.对照培养基不加氨基酸.分装于灭菌的小试管内,每管0.5mL,上面滴加一层液体石蜡,115℃高压灭菌10min.试验方法:从琼脂斜面上挑取培养物接种,于36±1℃培养18～24h,观察结果.氨基酸脱羧酶阳性者由于产碱,培养基应呈紫色.阴性者无碱性产物,但因葡萄糖产酸而使培养基变为黄色.对照管应为黄色.13蛋白胨水(靛基质试验用)成分:蛋白胨(或胰蛋白胨)20g氯化钠5g蒸馏水1000m LpH7.4制法:按上述成分配制,分装小试管,121℃高压灭菌15min.靛基质试剂:柯凡克试剂:将5g对二甲氨基苯甲醛溶解于75mL 戊醇中.然后缓慢加入浓盐酸25mL.欧-波试剂:将1g对二甲氨基苯甲醛溶解于95mL 95%乙醇内.然后缓慢加入浓盐酸20mL.试验方法:挑取小量培养物接种,在36±1℃培养1～2d,必要时可培养4～5d.加入柯凡克试剂约0.5mL,轻摇试管,阳性者于试剂层呈深红色;或加入欧-波试剂约0.5mL,沿管壁流下,覆盖于培养液表面,阳性者于液面接触处呈玫瑰红色.注:蛋白胨中应含有丰富的色氨酸.每批蛋白胨买来后,应先用已知菌种鉴定后方可使用.14硫酸亚铁琼脂(硫化氢试验用)成分:牛肉膏3g酵母浸膏3g蛋白胨10g硫酸亚铁0.2g硫代硫酸钠0.3g 氯化钠5g琼脂12g蒸馏水1000m LpH7.4制法:加热溶解,校正pH,分装试管,115℃高压灭菌15min,取出直立候其凝固.试验方法:挑取琼脂培养物,沿管壁穿刺,于36±1℃培养1～2d,观察结果.产硫化氢者使培养基变为黑色.注:肠杆菌科细菌测定硫化氢的产生,应采用三糖铁琼脂或本培养基.15尿素琼脂成分:蛋白胨1g氯化钠5g葡萄糖1g磷酸二氢钾2g0.4%酚红溶液3mL琼脂20g蒸馏水1000m L20%尿素溶液100m LpH7.2±0.1制法:将除尿素和琼脂以外的成分配好,并校正pH,加入琼脂,加热溶化并分装烧瓶.121℃高压灭菌15min.冷至50～55℃,加入经除菌过滤的尿素溶液.尿素的最终浓度为2%,最终pH应为7.2±0.1.分装于灭菌试管内,放成斜面备用.试验方法:挑取琼脂培养物接种,在36±1℃培养24h,观察结果.尿素酶阳性者由于产碱而使培养基变为红色.16氰化钾(KC N)培养基成分:蛋白胨10g氯化钠5g磷酸二氢钾0.225g磷酸氢二钠5.64g蒸馏水1000m L0.5%氰化钾溶液20mLpH7.6制法:将除氰化钾以外的成分配好后分装烧瓶,121℃高压灭菌15min.放在冰箱内使其充分冷却.每100mL培养基加入0.5%氰化钾溶液2.0mL(最后浓度为1:10000),分装于12mm×100m m灭菌试管,每管约4mL,立刻用灭菌橡皮塞塞紧,放在4℃冰箱内,至少可保存两个月.同时,将不加氰化钾的培养基作为对照培养基,分装试管备用.17氧化酶试验试剂:1%盐酸二甲基对苯二胺溶液:少量新鲜配制,干冰箱内避光保存.1%α-萘酚-乙醇溶液.试验方法:取白色洁净滤纸沾取菌落.加盐酸二甲基对苯二胺溶液一滴,阳性者呈现粉红色,并逐渐加深;再加α-萘酚溶液一滴,阳性者于半分钟内呈现鲜蓝色.阴性于两分钟内不变色.以毛细吸管吸取试剂,直接滴加于菌落上,其显色反应与以上相同.18硝酸盐培养基成分:硝酸钾0.2g蛋白5g蒸馏水1000m LpH7.4制法:溶解,校正pH,分装试管,每管约5mL,121℃高压灭菌15min.硝酸盐还原试剂:甲液:将对氨基苯磺酸0.8g溶解于2.5mo l/L乙酸溶液100m L中.乙液:将甲萘胺0.5g溶解于2.5mo l/L乙酸溶液100m L 中.试验方法:接种后在36±1℃培养1～4d,加入甲液和乙液各一滴,观察结果.硝酸盐还原为亚硝酸盐时于立刻或数分钟内显红色.注:本试验阴性的原因有三:细菌不能还原硝酸盐;亚硝酸盐继续分解,生成氨和氮;培养基不适于细菌的生长.如欲检查培养基中硝酸盐是否未被分解,可再加入锌粉少许,可使硝酸盐还原为亚硝酸盐而呈现红色.19细胞色素氧化酶试验试剂:1%盐酸二甲基对苯二胺溶液.1%α-萘酚-乙醇溶液.试验方法:取37℃(或低于37℃)培养20h的斜面培养物一支,将两种试剂各2～3滴,从斜面上端滴下,并将斜面略加倾斜,使试剂混合液流经斜面上的培养物.如系平板培养物,则可用试剂混合液滴在菌落上.结果:于2min内呈现蓝色者为阳性.阳性培养物大多数于半分钟内出现强阳性反应,2min以后出现微弱或可疑反应均作为阴性结果.20过氧化氢酶试验试剂:3%过氧化氢溶液:临用时配制.试验方法:挑取固体培养基上菌落一接种环,置于洁净试管内,滴加3%过氧化氢溶液2mL,观察结果.结果:于半分钟内发生气泡者为阳性,不发生气泡者为阴性.21过氧化物酶试验试剂:2%儿茶酚溶液.3%过氧化氢溶液.试验方法:挑取固体培养基上菌落一接种环,置于洁净试管内,滴加2%儿茶酚溶液1mL及3%过氧化氢溶液1mL.静置于室温(20℃)中30～60min,观察结果.结果:阳性反应,细菌变为黑褐色;阴性反应,细菌不变色.注:过氧化物酶的作用可受氰化钾的抑制.22磷酸盐缓冲液储存液:磷酸二氢钾34g1mol/L氢氧化钠溶液175mL蒸馏水825mLpH7.2制法:先将磷酸盐溶解于500mL蒸馏水中,用1mol/L 氢氧化钠溶液校正pH后,再用蒸馏水稀释至1000m L.稀释液:取储存液1.25mL,用蒸馏水稀释至1000m L.分装每瓶100mL或每管10mL,121℃高压灭菌15min.23明胶磷酸盐缓冲液成分:明胶2g磷酸氢二钠4g蒸馏水1000m LpH6.2制法:加热溶解,校正pH,121℃高压灭菌15min.24乳酸-苯酚溶液成分:苯酚10g乳酸(比重1.21)10g甘油20g蒸馏水10mL制法:将苯酚在水中加热溶解,然后加入乳酸及甘油.用途:检验真菌形态时用.25肉浸液肉汤成分:绞碎牛肉500g氯化钠5g蛋白胨10g磷酸氢二钾2g蒸馏水1000m L制法:将绞碎之去筋膜无油脂牛肉500g加蒸馏水1000mL,混合后放冰箱过夜,除去液面之浮油,隔水煮沸半小时,使肉渣完全凝结成块,用绒布过滤,并挤压收集全部滤液,加水补足原量.加入蛋白胨,氯化钠和磷酸盐,溶解后校正pH7.4～7.6煮沸并过滤,分装烧瓶,121℃高压灭菌30min.26肉浸液琼脂成分:肉浸液肉汤(PH7.4)1000m L琼脂17～20g制法:加热溶化琼脂,分装烧瓶或试管,121℃高压灭菌30min.根据需要,倾注平板或放成斜面.27牛肉(或牛心)消化汤成分:绞碎牛肉(或牛心)1000g15%氢氧化钠溶液27mL胰蛋白酶40mL三氯甲烷1mL氯化钠10g蒸馏水2000m L制法:1称取碎牛肉,加蒸馏水,隔水加热到80℃,维持15min.2加氢氧化钠溶液,对pH试纸呈弱碱性,冷至40℃. 3加胰蛋白酶,氯仿,在36±1℃放置4～5h,每小时摇动一二次.44h后,吸取上层液5mL于试管中,加5%硫酸铜溶液0.1mL,4%氢氧化钠溶液5mL,混合之.若呈红色,则不须再消化,可由温箱取出.5加入15%乙酸溶液45mL,对pH试纸呈酸性.6煮沸15min,使胰蛋白酶破坏,冷后,放冰箱内一夜. 7次日吸取上层清液,加氯化钠10g,并加水补足原量,煮沸.8校正pH7.4～7.6(加15%氢氧化钠溶液约10mL),加热,用滤纸过滤,分装烧瓶,121℃高压灭菌20min.注:①此培养基可作为琼脂培养基的基础,不需加蛋白胨.②胰蛋白酶之配制:称取去脂绞碎的猪胰500g,加入乙醇500mL,蒸馏水1500m L,混合之,装人玻塞瓶内.每日摇匀三次.3d后,用绒布过滤挤出其汁,加盐酸至0.05%,放冰箱内保存备用.28血消化汤成分:绞碎猪胃100g绞碎猪血块100g蒸馏水1000m L浓盐酸10mL制法:1洗涤猪胃,除去油脂,保留胃粘膜,用绞肉机绞碎. 2用绞肉机将猪血块绞碎.3将蒸馏水加热至55℃,加入猪胃,猪血块和盐酸,置55℃水浴中24h,时常加以摇动.4从水浴内取出,加入1mo L/L碳酸钠溶液5mL,煮沸10min,置于冰箱内一夜.5吸取上层清液,加磷酸氢二钾1g,加热至75℃,加入1mol/L碳酸钠溶液45mL,煮沸,校正pH7.2～7.4.6用滤纸过滤,分装烧瓶,121℃高压灭菌20min.29豆粉琼脂成分:牛心消化汤(PH7.4～7.6)1000m L琼脂20g黄豆粉浸液50mL制法:将琼脂加在牛心消化汤内,加热溶解,过滤.加入豌豆粉浸液,分装每瓶100m L,121℃高压灭菌15min.豌豆粉浸液制法:取豌豆粉5g,氯化钠10g,加入蒸馏水100m L.置100℃水浴内加热1h,放于冰箱中过夜.吸取上清液即为豌豆浸液.30血琼脂成分:pH7.4～7.6豆粉琼脂100mL脱纤维羊血(或兔血)5～10mL制法:加热溶化琼脂,冷至50℃,以灭菌手续加入脱纤维羊血,摇匀,倾注平板.亦可分装灭菌试管,置成斜面.亦可用其他营养丰富的基础培养基配制血琼脂.31营养琼脂成分:蛋白胨10g牛肉膏3g氯化钠5g琼脂15～20g蒸馏水1000m L制法:将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内,加入15%氢氧化钠溶液约2mL,校正pH至7.2～7.4.加入琼脂,加热煮沸,使琼脂溶化.分装烧瓶,121℃高压灭菌15min.注:此培养基可供一般细菌培养之用,可倾注平板或制成斜面.如用于菌落计数,琼脂量为1.5%;如作成平板或斜面,则应为2%.32营养肉汤成分:蛋白陈10g牛肉膏3g氯化钠5g蒸馏水1000m LpH7.4制法:按上述成分混合,溶解后校正pH,分装烧瓶,每瓶225mL,121℃高压灭菌15min.33乳糖胆盐发酵管成分:蛋白胨20g猪胆盐(或牛,羊胆盐)5g乳糖10g0.04%滇甲酚紫水溶液25mL蒸馏水1000m LpH7.4制法:将蛋白胨,胆盐及乳糖溶于水中,校正pH,加入指示剂,分装每管10mL,并放入一个小倒管,115℃高压灭菌15min.注:双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外,其他成分加倍.34乳糖发酵管成分:蛋白胨20g乳糖10g0.04%溴甲酚紫水溶液25mL蒸馏水1000m LpH7.4制法:将蛋白胨及乳糖溶于水中,校正pH,加入指示剂,按检验要求分装30mL,10m L或3mL,并放入一个小倒管,115℃高压灭菌15min.注:①双料乳糖发酵管除蒸馏水外,其他成分加倍.②30mL和10mL乳糖发酵管专供酱油及酱类检验用,3m L乳糖发酵管供大肠菌群证实试验用.35EC肉汤成分:胰蛋白胨20g3号胆盐(或混合胆盐)1.5g 乳糖5g磷酸氢二钾4g磷酸二氢钾1.5g氯化钠5g蒸馏水1000m L制法:将上述成分混合,溶解后,分装有发酵倒管的试管中,121℃高压灭菌15min,最终pH为6.9±0.2.36缓冲蛋白胨水(BP)成分:蛋白胨10g氯化钠5g磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O)9g磷酸二氢钾1.5g蒸馏水1000m LpH7.2制法:按上述成分配好后以大烧瓶装,121℃高压灭菌15min.临用时无菌分装每瓶225mL.注:本培养基供沙门氏菌前增菌用.37氯化镁孔雀绿增菌液(MM)甲液：胰蛋白胨5g氯化钠8g磷酸二氢钾1.6g蒸馏水1000m L乙液：氯化镁(化学纯)40g蒸馏水100mL丙液：0.4%孔雀绿水溶液.制法:分别按上述成分配好后,121℃高压灭菌15min备用.临用时取甲液90mL,乙液9mL,丙液0.9mL,以无菌操作混合即可.注:本培养基亦称Rap pa p o rt10(R10)增菌液.38四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB)基础培养基:多胨或眎胨5g胆盐1g碳酸钙10g硫代硫酸钠30g蒸馏水1000m L碘溶液:碘6g碘化钾5g蒸馏水20mL制法:将基础培养基的各成分加入蒸馏水中,加热溶解,分装每瓶100mL.分装时应随时振摇,使其中的碳酸钙混匀.121℃高压灭菌15min备用.临用时每100m L基础培养基中加入碘溶液2mL,0.1%煌绿溶液1mL.39四硫磺酸钠煌绿增菌液(换用方法)基础液：蛋白胨10g牛肉膏5g氯化钠3g碳酸钙45g蒸馏水1000m L将各成分加入于蒸馏水中,加热至约70℃溶解,校正pH至7.0±0.1,121℃高压灭菌20min.硫代硫酸钠溶液：硫代硫酸钠(Na2S2O3·5H2O)50g蒸馏水加至100mL碘溶液：碘片20g碘化钾25g蒸馏水加至100mL将碘化钾充分溶解于是少量的蒸馏水中,加入碘片,振摇玻瓶至碘片全部溶解,再加入蒸馏水至规定量.贮于棕色玻瓶内,紧塞瓶盖备用.煌绿水溶液：煌绿0.5g蒸馏水100mL存放暗处,不少于1d,使其自然灭菌.牛胆盐溶液：干燥的牛胆盐10g蒸馏水100mL煮沸溶解,121℃高压灭菌20min.制备:基础液900mL硫代硫酸钠溶液100mL碘液20mL煌绿溶液2mL牛胆盐溶液50mL临用前,按上列顺序,以无菌操作依次加入于基础液中,每加入一种成分,均应摇匀后再加入另一种成分.分装于灭菌瓶中,每瓶100mL.40亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)成分:蛋白胨5g乳糖4g亚硒酸氢钠4g磷酸氢二钠5.5g磷酸二氢钾4.58L-胱氨酸0.01g 蒸馏水1000m L1%L-胱氨酸-氢氧化钠溶液的配法:称取L-胱氨酸0.1g(或DL-胱氨酸0.2g),加1mol/L氢氧化钠1.5mL,使溶解,再加入蒸馏水8.5mL即成.制法:将除亚硒酸氢钠和L-胱氨酸以外的各成分溶解于900m L蒸馏水中,加热煮沸,俟冷备用.另将亚硒酸氢钠溶解于100m L蒸馏水中,加热煮沸,候冷,以无菌操作与上液混合.再加入1%L-胱氨酸-氢氧化钠溶液1mL.分装于灭菌瓶中,每瓶100mL,pH应为7.0±0.1.41GN增菌液成分:胰蛋白胨20g葡萄糖1g甘露醇2g柠檬酸钠5g去氧胆酸钠0.5g磷酸氢二钾4g磷酸二氢钾1.5g氯化钠5g蒸馏水1000m LpH7.0制法:按上述成分配好,加热使溶解,校正pH.分装每瓶225m L,115℃高压灭菌15min.42肠道菌增菌肉汤成分:蛋白胨110g葡萄糖5g牛胆盐20g磷酸氢二钠8g磷酸二氢钾2g煌绿0.015g蒸馏水1000m LpH7.2制法:按上述成分配好,加热使溶解,校正pH.分装每瓶30mL,115℃高压灭菌15min.43亚硫酸铋琼脂(BS)成分:蛋白胨10g牛肉膏5g葡萄糖5g硫酸亚铁0.3g磷酸氢二钠4g煌绿0.025g柠檬酸铋铵2g亚硫酸钠6g琼脂18～20g蒸馏水1000m LpH7.5制法:1将前面5种成分溶解于300mL蒸馏水中.2将柠檬酸铋铵和亚硫酸钠另用50mL蒸馏水溶解. 3将琼脂于600mL蒸馏水中煮沸溶解,冷至80℃4将以上三液合并,补充蒸馏水至1000m L,校正pH,加0.5%煌绿水溶液5mL,摇匀.冷至50～55℃,倾注平皿.注:此培养基不需高压灭菌.制备过程不宜过分加热.以免降低其选择性.应在临用前一天制备,贮存于室温暗处.超过48h不宜使用.44DHL琼脂成分:蛋白胨20g牛肉膏3g乳糖10g蔗糖10g去氧胆酸钠1g硫代硫酸钠2.3g柠檬酸钠1g柠檬酸铁铵1g中性红0.03g琼脂18～20g蒸馏水1000m LpH7.3制法:将除中性红和琼脂以外的成分溶解于400mL 蒸馏水中,校正pH.再将琼脂于600m L蒸馏水中煮沸溶解,两液合并,并加入0.5%中性红水溶液6mL,待冷至50～55℃,倾注平板.45HE琼脂成分:脙胨12g牛肉膏3g乳糖12g蔗糖12g水杨素2g胆盐20g氯化钠5g琼脂18～20g蒸馏水1000m L0.4%溴麝香草酚蓝溶液16mLAnd rad e指示剂20mL甲液20mL乙液20mLpH7.5制法:将前面七种成分溶解于400mL蒸馏水内作为基础液;将琼脂加入于600m L蒸馏水内,加热溶解.加入甲液和乙液于基础液内,校正pH.再加入指示剂,并与琼脂液合并,待冷至50～55℃,倾注平板.注:①此培养基不可高压灭菌.②甲液的配制硫代硫酸钠34g柠檬酸铁铵4g蒸馏水100mL②乙液的配制去氧胆酸钠10g蒸馏水100mL②Andrad e指示剂酸性复红0.5g1mol/L氢氧化钠溶液16mL蒸馏水100mL将复红溶解于蒸馏水中,加入氢氧化钠溶液.数小时后如复红褪色不全,再加氢氧化钠溶液1～2mL.46SS琼脂基础培养基:牛肉膏5g眎胨5g三号胆盐3.5g琼脂17g蒸馏水1000m L再将两液混合,121℃高压灭菌15min,保存备用.完全培养基:基础培养基100m L乳糖10g柠檬酸钠8.5g硫代硫酸钠8.5g10%柠檬酸铁溶液10mL1%中性红溶液2.5mL0.1%煌绿溶液0.33m L加热溶化基础培养基,按比例加入上述染料以外之各成分,充分混合均匀,校正至pH7.0,加入中性红和煌绿溶液,倾注平板.注:①制好的培养基宜当日使用,或保存于冰箱内于48h内使用.②煌绿溶液配好后应在10d以内使用.③可以购用SS琼脂的干燥培养基.47WS琼脂成分:脙胨12g牛肉膏3g氯化钠5g乳糖12g蔗糖12g十二烷基硫酸钠2g琼脂15gAnd rad e指示剂20mL0.4%溴麝香草酚蓝溶液16mL甲液20mL蒸馏水1000m LpH7.0制法:除指示剂和甲液外,将其他成分加热溶解,不需消毒,校正pH后加入指示剂和甲液,倾注平板应呈草绿色.注:①供沙门氏菌分离用.②Andrad e指示剂和甲液的配制均见HE琼脂.48麦康凯琼脂成分:蛋白胨17g眎胨3g猪胆盐(或牛,羊胆盐)5g氯化钠5g琼脂17g蒸馏水1000m L乳糖10g0.01%结晶紫水溶液10mL0.5%中性红水溶液5mL制法:1将蛋白胨,眎,胆盐和氯化钠溶解于400mL蒸馏水中,校正pH7.2.将琼脂加入600m L加热溶解.将两液合并,分装于烧瓶内,121℃高压灭菌15min备用.2临用时加热溶化琼脂,趁热加入乳糖,冷至50～55℃时,加入结晶紫和中性红水溶液,摇匀后倾注平板.注:结晶紫及中性红水溶液配好后须经高压灭菌.49伊红美蓝琼脂(EMB)成分:蛋白胨10g乳糖10g磷酸氢二钾2g琼脂17g2%伊红Y溶液20mL0.65%美蓝溶液10mL蒸馏水1000m LpH7.1制法:将蛋白胨,磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中,校正pH,分装于烧瓶内,121℃高压灭菌15min备用.临用时加入乳糖并加热溶化琼脂,冷至50～55℃,加入伊红和美蓝溶液,摇匀,倾注平板.50三糖铁琼脂(TS I)成分:蛋白胨20g牛肉膏5g乳糖10g蔗糖10g葡萄糖1g氯化钠5g硫酸亚铁铵〔Fe(NH4)2(SO4)2·6H2O〕0.2g硫代硫酸钠0.2g琼脂12g酚红0.025g蒸馏水1000m LpH7.4制法:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH.加入琼脂,加热煮沸,以溶化琼脂.加入0.2%酚红水溶液12.5m L,摇匀.分装试管,装量宜多些,以便得到较高的底层.121℃高压灭菌15min.放置高层斜面备用.51三糖铁琼脂(换用方法)成分:蛋白胨15g眎胨5g牛肉膏3g酵母膏3g乳糖10g蔗糖10g葡萄糖1g氯化钠5g硫酸亚铁0.2g硫代硫酸钠0.3g琼脂12g酚红0.025g蒸馏水1000m LpH7.4制法:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH.加入琼脂,加热煮沸,以溶化琼脂.加入0.2%酚红水溶液12.5m L,摇匀.分装试管,装量宜多些,以便得到较高的底层.121℃高压灭菌15min,放置高层斜面备用.52克氏双糖铁琼脂(KI)上层培养基成分血消化汤(pH7.6)500mL琼脂6.5g硫代硫酸钠0.1g硫酸亚铁铵0.1g乳糖5g0.2%酚红溶液5mL下层培养基成分血消化汤(pH7.6)500mL。

常用培养基配方范文

常用培养基配方范文培养基配方是微生物学研究的基础，它们提供了养分和条件，促进微生物的生长和繁殖。

常用培养基配方有多种，以下是几个常用的配方范文。

一、莱文斯坦－鲍德尔培养基（Luria-Bertani agar）配方：成分：1.蛋白胨：10克2.酵母提取物：5克3.食盐：10克4.琼脂：15克5.蒸馏水：1000毫升6.高氯酸钠（0.1M）：2毫升（pH7.2）制备方法：1.将蛋白胨、酵母提取物和食盐加入蒸馏水中，加热至溶解。

2.加入琼脂并搅拌均匀，再加入高氯酸钠调节pH值。

3.煮沸1~2分钟，然后分装入培养皿中。

注意事项：1.注意消毒操作，以防止污染。

2.琼脂的煮沸时间通常为15~20分钟。

二、营养琼脂培养基（Nutrient agar）配方：成分：1.蛋白胨：5克2.细胞色素：1克3.维生素B1：0.1克4.卵黄：10克5.食盐：5克6.琼脂：15克7.蒸馏水：1000毫升制备方法：1.将蛋白胨、细胞色素、维生素B1、卵黄和食盐加入蒸馏水中并加热溶解。

2.加入琼脂并搅拌均匀。

3.煮沸1~2分钟，然后分装入培养皿中。

注意事项：1.注意消毒操作，以防止污染。

2.煮沸时间可根据需要适当延长，但不要超过20分钟。

三、马尿素琼脂培养基（MacConkey agar）配方：成分：1.蛋白胨：17克2.硼砂：1.5克3.细胞色素：2.5克4.氯化钠：5克5.水合甲基红：0.03克6.钴绿：0.015克7.红绿二色砂：0.15克8.琼脂：13.5克9.蒸馏水：1000毫升制备方法：1.将蛋白胨、硼砂、细胞色素、氯化钠、水合甲基红、钴绿和红绿二色砂加入蒸馏水中并加热溶解。

2.加入琼脂并搅拌均匀。

3.煮沸1~2分钟，然后分装入培养皿中。

注意事项：1.注意消毒操作，以防止污染。

2.此培养基适用于选择肠道革兰氏阴性杆菌。

以上是常用的几个培养基配方范文，供参考使用。

在制备培养基时，需要注意消毒操作，以防止污染。

另外，不同微生物对培养基的要求也有所不同，可以根据实际需要进行配方的修改和优化。

各种培养基的配方

各种培养基的配方在微生物学中，培养基是为微生物提供营养和生长所必需的营养物质的混合物，可以根据微生物的特性和需求来设计不同成分的培养基。

不同种类的微生物需要不同的培养基来生长和繁殖，为了获得最佳的生长效果，需根据微生物的特性制备相应的培养基。

下面介绍几种常用的培养基及其配方。

1. 加尔沙基培养基（Luria-Bertani，LB培养基）LB培养基是一种常用的细菌培养基，适用于大多数细菌的培养。

其成分包括牛肉浸出物、酵母提取物和氯化钠，PH为7.0。

配方：- 水：1000ml-氯化钠：10g-酵母提取物：5g-牛肉浸出物：10gLB培养基的主要特点是富含氨基酸和碳源，适合于细菌的快速生长。

2. PDA培养基（Potato Dextrose Agar）PDA培养基是一种适合真菌和霉菌生长的培养基，成分简单易得。

它主要包括马铃薯提取物、葡萄糖和琼脂。

PDA培养基是一种半固体培养基，适合于真菌的产孢。

配方：-马铃薯提取物：200g-葡萄糖：20g-琼脂：20g-静置180s后，灭菌PDA培养基适合于真菌和霉菌的生长，常用于菌落计数和生长的研究中。

3.营养琼脂培养基营养琼脂培养基是一种通用的培养基，适用于多种微生物的培养。

它主要包括蛋白水解物、酵母提取物、氯化钠和琼脂。

配方：-蛋白水解物：5g-酵母提取物：1g-氯化钠：5g-琼脂：15g- 水：1000ml-蒸馏后灭菌营养琼脂培养基适合于大多数微生物的生长，是最常用的培养基之一4. 马尼特尔-梅尔特培养基（Mannitol-Salt Agar，MSA）MSA培养基是一种选择性培养基，主要用于金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）的分离和鉴定。

它的成分包括马尼托尔、氯化钠、酵母提取物和琼脂。

配方：-马尼托尔：5g-氯化钠：75g-酵母提取物：1g-琼脂：15g- 水：1000ml-蒸馏后灭菌MSA培养基在金黄色葡萄球菌的生长过程中，可以通过红色菌落的形成来进行识别。

常用25种培养基详细配方

常用25种培养基详细配方以下是常用的25种培养基的详细配方：1. LB培养基（Luria-Bertani medium）-天然培养基：10g蛋白胨，5g酵母粉，10gNaCl，添加适量蒸馏水，pH值调至7.0。

- 固体培养基：添加15g agar。

2. TSA培养基（Tryptic Soy Agar）-17g蛋白胨，3g酵母提取物，5gNaCl，添加适量蒸馏水，pH值调至7.3-7.5- 固体培养基：添加15g agar。

3. NB培养基（Nutrient Broth）-8g蛋白胨，2g胰蛋白胨，5gNaCl，添加适量蒸馏水，pH值调至7.4 - 固体培养基：不添加agar。

4. R2A培养基（Reasoner's 2A medium）- 0.5g peptone，0.5g casein hydrolysate，0.5g yeast extract，0.5g glucose，0.5g soluble starch，0.3g dipotassium phosphate，0.05g magnesium sulfate，0.3g sodium pyruvate，10μg m anganese sulfate，添加适量蒸馏水，pH值调至7.2-7.4- 固体培养基：添加15g agar。

5. BHIS培养基（Brain Heart Infusion with 20% Sucrose）- 37.5g BHIS培养基，10g sucrose，添加适量蒸馏水，pH值调至7.5- 固体培养基：添加15g agar。

6. PDA培养基（Potato Dextrose Agar）-200g马铃薯，20g葡萄糖，添加适量蒸馏水，pH值调至5.6- 固体培养基：添加20g agar。

7. MRS培养基（de Man Rogosa Sharpe medium）- 10g peptone，10g beef extract，4g yeast extract，20g glucose，5g sodium acetate，2g dipotassium phosphate，0.02g magnesium sulfate，添加适量蒸馏水，pH值调至6.2-6.6- 固体培养基：添加20g agar。

各种培养基配方范文

各种培养基配方范文1.MS培养基Murashige和Skoog于1962年开发了一种被广泛应用于植物细胞培养的培养基，即MS培养基。

它包含微量元素、氨基酸、糖类、维生素和植物激素等成分，能够支持植物的生长和分化。

以下是MS培养基的配方：-盐类：MS盐基础配方中包含氯化钙、硫酸镁、硫酸钾、磷酸二氢钠、硝酸铵和氯化钾等盐类。

-糖类：通常使用蔗糖作为碳源，添加到培养基中以提供植物生长所需的能量。

-植物激素：水杨酸、吲哚醋酸和细胞分裂素等植物激素可用于调控植物的生长和分化。

-维生素：MS培养基中还需要添加维生素，以满足植物对维生素的需求。

2.B5培养基B5培养基是Gamborg等人于1968年开发的一种植物培养基，适用于多种植物细胞培养。

与MS培养基相比，B5培养基中糖类的浓度更高，有利于植物细胞的生长和分化。

以下是B5培养基的配方：-盐类：B5培养基的盐基础配方与MS培养基相似，包含硝酸铵、硝酸钠、氯化钾等盐类。

-糖类：相较于MS培养基，B5培养基中糖类浓度更高，通常使用25~30g/L的蔗糖。

-维生素：B5培养基中也需要添加维生素，以满足植物对维生素的需求。

-激素：植物生长激素如IAA、BA等也会加入到B5培养基中，调控植物生长和发育。

3.N6培养基N6培养基是Chu等人于1985年开发的一种改良型植物培养基，适用于多种植物细胞的培养。

N6培养基中的氨基酸比B5培养基更多，能够更好地支持植物细胞的生长和分化。

以下是N6培养基的配方：-盐类：N6培养基的盐基础配方包括硫酸镁、硝酸钾、氯化钾等盐类。

-糖类：N6培养基中糖类的浓度通常为20~30g/L，通常使用蔗糖作为碳源。

-维生素：N6培养基中也需要添加维生素，以满足植物对维生素的需求。

-激素：N6培养基中的植物激素种类较多，有利于调控植物的生长和发育。

以上是几种常见的植物培养基配方，不同植物对养分的需求各不相同，因此制备培养基时应根据具体的研究目的和植物的生长习性选择合适的培养基配方。

实验室36种微生物培养基配制方法

实验室36种微生物培养基配制方法1.牛肉膏蛋白胨培养基（用于细菌培养）牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，水1000mL，pH7.4～7.6。

2.高氏1号培养基(用于放线菌培养)可溶性淀粉20g，KNO₃ 1g，NaCl 0.5g，K2HPO4•3H2O 0.5g，MgSO4•7H2O0.5g，FeSO4•7H2O0.01g•水1000mL•pH7.4～7.6。

配制时注意：可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中。

3.马丁氏（Martin）培养基（用于从土壤中分离真菌）K2HPO 41g，MgSO4•7H2O 0.5g，蛋白胨 5g，葡萄糖 10g，1/3000孟加拉红水溶液100mL，水900mL，自然pH，121℃湿热灭菌30min。

待培养基融化后冷却55～60℃时加入链霉素(链霉素含量为30μg/mL)。

4.马铃薯培养基(PDA)(用于霉菌或酵母菌培养)马铃薯(去皮) 200g，蔗糖(或葡萄糖)20g，水1000mL，配制方法如下：将马铃署去皮，切成约2cm²的小块，放入1500mL的烧杯中煮沸30min，注意用玻棒搅拌以防糊底，然后用双层纱布过滤，取其滤液加糖，再补足至1000mL，自然pH，霉菌用蔗糖，酵母菌用葡萄糖。

5.察氏培养基(蔗糖硝酸钠培养基)(用于霉菌培养)蔗糖 30g，NaNO3 2g，K2HPO4 1g，MgSO4•7H2O 0.5g，KCl 0.5g，FeSO4•7H2O 0.1g，水1000mL，pH7.0～7.2。

6.Hayflik培养基(用于支原体培养)牛心消化液(或浸出液) 1000mL，蛋白胨 10g，NaCl 5g，琼脂15g，pH7.8～8.0，分装每瓶 70mL，121℃湿热灭菌15min，待冷却至80℃左右，每70mL中加入马血清20mL，25%鲜酵母浸出液10mL，15醋酸铊水溶液2.5mL，青霉素G钾盐水溶液(20万单位以上) 0.5mL，以上混合后倾注平板。