几种经典毒性试验的应用

几种经典毒性试验的应用

1.寇氏法和改良寇氏法

论文题目：《沙冬青种子总黄酮对小鼠急性毒性作用研究》

论文作者：陈慧，宁明刚，刘宇，梁剑平，何玉琴，贾宁

摘要：研究沙冬青种子总黄酮对小鼠的急性毒性作用，并测定沙冬青种子总黄酮单次给药的半数致死剂量（LD

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）或最大耐受剂量（MTD）。将70只体质量为（20±2）g的SPF级KM小鼠随机分成7组，雌雄各半，每组每只小鼠分别灌胃0.4ml的无菌生理盐水（对照组）及相同体积、不同浓度沙冬青种子总黄酮溶液，灌胃后7d内仔细观察小鼠的反应，观察并记录小鼠中毒症状和死亡数，利

用改良寇氏法测定该总黄酮的LD

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。试验结束后记录各组小鼠的体质量变化，进行病理剖检，同时每组随机取2只小鼠（雌雄各1只），分别采取心脏、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏等进行病理组织学检查。结果表明：沙冬青种子总黄酮对小

鼠的LD

50为2004.47mg/kg，LD

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的 95%可信限为1693.78~2372.47mg/kg。死亡小

鼠急性毒性主要表现为安静少动，即而出现走路不稳、腹卧昏睡、呼吸急促、连

续性抽搐而死亡。说明小鼠在沙冬青种子总黄酮中毒后，心脏、肝脏、脾脏和肾脏等主要器官都受到一定程度的损害，但对小鼠的持续影响较小；沙冬青种子总黄酮毒性较低，符合低毒化合物标准（500~5000mg/kg为低毒化合物）。

实验结论：沙冬青总黄酮的毒性总体上很低，临床用药安全性高。但并不代表沙冬青总黄酮没有毒性，剂量过高或不合理用药同样会产生不利影响。为全面掌握沙冬青总黄酮的毒性资料，以更好地为药效学试验的剂量设计及临床拟定安全剂量提供参考，有必要进一步深入进行沙冬青总黄酮的亚急性毒性研究和长期毒性及器官毒性研究。

论文出处：甘肃农业大学学报2013年6月第48卷第3期

2.概率单位——对数图解法

论文题目：《利用概率单位法估算EC

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的研究》

论文作者：赵劲松，于书霞

摘要：以两组典型毒性数据为例，综合比较了5种常见概率单位模型计算程

序在EC

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估算上的差异，并在此基础上比较了3种不同置信区间的估算方法，在

对照组受抑制率为零时，5种方法的参数估算结果一致；当对照组受抑制率不为零时，将对照组数据纳入整个计算过程的方法可以给出可靠的参数估算结果。3种不同置信区间估算方法的比较表明：在毒性数据分布对称性良好的情况下，基于Delta函数与Fieller定理的方法给出的结果相近，但后者可以在更广泛的情况下给出置信区间；相比而言，基于bootstrap重抽样的非参数方法获得的置信区间较窄，表现出更好的灵敏度。

实验结论：3种不同置信区间估算方法的比较表明：在毒性数据分布对称性良好的情况下，基于Delta函数与Fieller定理的方法给出的结果相近，但后者可以在更广泛的情况下给出置信区间；相比而言，基于bootstrap重抽样的非参数方法获得的置信区间较窄，表现出更好的灵敏度。

论文出处：生态毒理学报2010年第5卷第3期

3.霍恩氏法

论文题目：《泽泻葛根等6种中药提取物的急性毒性效应观察》

论文作者：陈小青，虞维娜，马中春，龙再浩

摘要：目的：探讨泽泻葛根等6种中药提取物的急性经口毒性。方法：根据霍恩氏法共分21.50g/kgBW、10.0 g/kgBW、4.64 g/kgBW和2.15 g/kgBW４个剂量组和1个空白对照组采用经口染毒途径进行试验。结果：在给予泽泻葛根等6种中药提取物染毒后动物陆续出现了不同程度的腹泻症状且以最高剂量组最为严重除清半夏提取物外各中药提取物均有数量不等的动物死亡且以雌性动物死亡为主。姜半夏高剂量组的14d增重与低剂量组和对照组比较有显著性差异

均大于21.50 g/kgBW p<0.05。结论：泽泻葛根等6种中药提取物的半数致死量LD

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属于无毒级。

实验结论：实验观察发现染毒后部分小鼠表现为精神状态不佳活动减少，大部分中药提取物高剂量组动物均出现程度不等的腹泻症状其中泽泻提取物的高剂量组中有少数动物出现了兴奋和不安症状，但除此之外连续观察14d所有幸存小鼠毛色光洁未出现其它的不良情况。结果提示这些中药提取物可能对消化系统有影响根据保健食品检验与评价技术规范中所规定的急性毒性分级情况来看本研究中这些中药提取物的雄性和雌性小鼠经口LD

值均大于21.50 g/kgBW属无

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毒级别。但是本研究发现除清半夏提取物未见有动物死亡外其余５种中药提取物

均有部分动物死亡且以雌性动物死亡为主提示这些中药提取物可能有一定的毒性并且可能对雌性动物更为敏感但其机制还有待于进一步探讨。

论文出处：浙江中医杂志2011年11月第46卷第11期

替代经典实验的方法：

急性经扣毒性——固定剂量法

固定剂量法观察指标是“明显毒性”，而不是以动物死亡作为观察终点，结值。2001年底重新修订发布，正实验每次用5只动物，而原果不是具体的LD

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来的方法时10只。

染毒剂量针对GHS和EC现行的化学品急性毒性分级标准设计，采用具有毒性分级意义的固定试验计量：5mg/kg、50mg/kg、300mg/kg或2000mg/kg。结果判定分为高毒，有毒，有害，和毒性未分类。

试验分为预实验和正式试验两个阶段。预实验可以从上述固定的剂量的任何一个开始，一般从最可能的剂量开始。正式试验根据预实验结果，一般只需一个剂量，5只动物，包括预实验在该剂量水平做过的动物，试验按剂量循序进行。