生物化学实验考试重点

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生物化学考试重点总结

生物化学考试重点总结
1. 生物化学基本概念
- 生物大分子：蛋白质、核酸、多糖、脂质
- 酶：催化生化反应的生物催化剂
- 代谢路径：物质在生物体内相互转化的路径
2. 生物大分子的结构与功能
- 蛋白质：结构、功能、种类、合成和降解
- 核酸：DNA和RNA的结构、功能、复制和转录
- 多糖：单糖、二糖、多糖的结构、功能、合成和降解- 脂质：脂肪酸、甘油三酯、磷脂的结构、功能和代谢
3. 代谢途径与调控
- 糖代谢：糖酵解、糖异生、糖原代谢
- 脂肪代谢：脂肪酸氧化、甘油三酯合成、脂肪酸合成- 蛋白质代谢：蛋白质降解、蛋白质合成、氨基酸代谢- 核酸代谢：DNA和RNA的代谢途径及调控机制
4. 其他重点知识点
- 酶动力学：酶的活性、酶动力学参数、酶抑制剂
- 信号转导与调控：细胞信号传导、信号通路、蛋白质磷酸化- 生物膜：细胞膜结构、跨膜转运和信号传导
5. 实验技术
- 分子生物学实验技术：PCR、DNA测序、蛋白质电泳
- 生物化学分离和分析方法：色谱技术、质谱技术、光谱技术
以上是生物化学考试的重点内容总结，希望对你的备考有所帮助。

祝你考试顺利！。

生物化学及分子生物学实验考试-图文

生物化学及分子生物学实验考试-图文一、实验原理步骤：1、分子克隆总流程：分子克隆：在分子水平上提供一种纯化和扩增特定DNA片段的方法。

常含有目的基因，用体外重组方法将它们插入克隆载体，形成重组克隆载体，通过转化与转导的方式，引入适合的寄主体内得到复制与扩增，然后再从筛选的寄主细胞内分离提纯所需的克隆载体，可以得到插入DNA的许多拷贝，从而获得目的基因的扩增。

流程：（1）带有目的基因的DNA片段的获得——PCR引物设计，PCR获得。

（2）重组DNA分子的构建——与载体酶切连接。

（3）重组DNA分子的转化和重组克隆的筛选——转化，培养，筛选（4）检测——菌落PCR检测，粗提质粒检测，酶切检测，精提质粒测序。

2、质粒DNA的提取及鉴定一一碱裂解法原理：根据共价闭合环状质粒DNA和线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离质粒DNA。

在pH12.0-12.5,线性的DNA双螺旋结构解开而被变性，尽管在这样的条件下，质粒DNA的氢键断裂，但两条互补链仍紧密结合。

当加入pH4.8的KAc高盐缓冲液中和pH至中性时，共价闭合环状的质粒DNA复性迅速而准确，而线性的染色体DNA的两条互补链彼此已完全分开，复性慢，缠绕形成网状结构。

通过离心，染色体DNA与RNA、蛋白质-SDS复合物等一起絮状沉淀下来而被除去。

步骤：1、细菌培养和收集①将3ml含Kan的LB液体培养基加入到试管中，接入含质粒的大肠杆菌，37°C振荡培养过夜。

（已完成）②取2.5mL培养物倒入微量离心管（EP管）中，10000rpm离心lmin,吸去培养液。

2、细菌裂解及质粒的提取③将细胞沉淀悬浮于100ul溶液I中,充分震荡混匀。

④加200ul溶液II（新鲜配制），盖紧管盖，轻轻混匀内容物，将离心管放冰上5min。

⑤加150ul溶液III（冰上预冷），盖紧管口，轻轻颠倒数次使混匀。

冰上放置10min。

⑥12000rpm离心10min,将上清转至另一EP管（作好标记）中。

生物化学重点知识点

生物化学重点知识点生物化学是研究生物大分子的结构、组成、功能和相互作用的科学。

下面是一些生物化学的重点知识点：1.生物大分子：生物大分子包括蛋白质、核酸、多糖和脂质。

它们是生物体内最重要的分子，发挥着各种生命活动的功能。

2.氨基酸：氨基酸是蛋白质的基本组成部分。

有20种氨基酸，它们通过肽键连接形成多肽链。

氨基酸的顺序和空间结构决定了蛋白质的功能。

3.蛋白质结构：蛋白质的结构可分为四个层次：一级结构是氨基酸的顺序；二级结构是氢键的形成，如α-螺旋和β-折叠；三级结构是各个二级结构的空间排列；四级结构是多个蛋白质链的组装。

4.酶：酶是生物催化剂，能够加速化学反应的速率。

酶通过与底物形成亲和性复合物，降低活化能，使反应在生物条件下发生。

5.代谢途径：生物体的代谢途径包括糖酵解、有氧呼吸、脂肪酸合成、脂肪酸氧化和蛋白质合成等。

这些途径产生能量和所需的中间代谢产物。

6.核酸：核酸是遗传信息的携带者，包括DNA和RNA。

DNA是双链结构，RNA是单链结构。

DNA通过转录生成mRNA，再通过翻译生成蛋白质。

7.遗传密码：遗传密码是DNA碱基序列与蛋白质氨基酸序列之间的对应关系。

这种对应关系由密码子决定，每个密码子对应一种氨基酸。

8.代谢调控：生物体能够根据环境的变化来调控代谢途径。

这种调控发生在基因、酶活性和底物浓度等方面，以维持体内的稳态。

9.脂质：脂质是生物体内的重要功能分子，包括脂肪、磷脂和类固醇。

脂质在细胞膜结构和信号传导中起重要作用。

10.蛋白质折叠和疾病：蛋白质的错误折叠会导致一系列疾病，包括神经退行性疾病和癌症。

了解蛋白质折叠的机制有助于理解疾病的发生并开发新的治疗方法。

以上是生物化学的一些重点知识点。

了解这些知识可以帮助我们更好地理解生命的本质和生物体内各种生物化学过程的发生。

生物化学考试复习要点总结

⽣物化学考试复习要点总结⼀、蛋⽩质的结构与功能1.蛋⽩质的含氮量平均为16%.2.氨基酸是蛋⽩质的基本组成单位，除⽢氨酸外属L-α-氨基酸。

3.酸性氨基酸：天冬氨酸、⾕氨酸；碱性氨基酸：赖氨酸、精氨酸、组氨酸。

4.半胱氨酸巯基是GSH的主要功能基团。

5.⼀级结构的主要化学键是肽键。

6.维系蛋⽩质⼆级结构的因素是氢键7.并不是所有的蛋⽩质都有四级结构。

8.溶液pH>pI时蛋⽩质带负电，溶液pH9.蛋⽩质变性的实质是空间结构的改变，并不涉及⼀级结构的改变。

⼆、核酸的结构和功能1. RNA和DNA⽔解后的产物。

2.核苷酸是核酸的基本单位。

3.核酸⼀级结构的化学键是3′，5′-磷酸⼆酯键。

4. DNA的⼆级结构的特点。

主要化学键为氢键。

碱基互补配对原则。

A与T, c 与G.5. Tm为熔点，与碱基组成有关6. tRNA⼆级结构为三叶草型、三级结构为倒L型。

7.ATP是体内能量的直接供应者。

cAMP、cGMP为细胞间信息传递的第⼆信使。

三酶1.酶蛋⽩决定酶特异性，辅助因⼦决定反应的种类与性质。

2.酶有三种特异性：绝对特异性、相对特异性、⽴体异构特异性酶活性中⼼概念:必须基因集中存在，并构成⼀定的空间结构，直接参与酶促反应的区域叫酶的活性中⼼3.B族维⽣素与辅酶对应关系。

4. Km含义;Km值⼀般由⼀个数乘以测量单位所表⽰的特定量的⼤⼩. 对于不能由⼀个数乘以测量单位所表⽰的量，可参照约定参考标尺，或参照测量程序，或两者都参照的⽅式表⽰。

5.竞争性抑制特点。

某些与酶作⽤底物相识的物质，能与底物分⼦共同竞争酶的活性中⼼。

酶与这种物质结合后，就不能再与底物相结合，这种作⽤称酶的竞争性抑制作⽤。

抑制是可逆的，抑制作⽤的⼤⼩与抑制剂和底物之间的相对浓度有关。

四糖代谢1.糖酵解限速酶：⼰糖激酶，磷酸果糖激酶，丙酮酸激酶；净⽣成ATP：2分⼦ATP；产物：乳酸2.糖原合成的关键酶是糖原合成酶。

糖原分解的关键酶是磷酸化酶。

生化和分子实验技能考试内容(最终)

3、使用前研钵预冷
4、研钵内不能有水
5、研磨操作应快速
6、研磨后样品粉末迅速放置到容器
电泳技术
SDS-PAGE电泳
1、凝胶板的洗涤（次序、干净面的保证）
2、凝胶板的安装
3、电泳槽的安装（板的上下）
4、如何正确用琼脂封底？
5、胶配置的注意事项（冰箱保存、顺序、凝固温度）
6、灌胶
7、电泳液添加的位置
8、样品的制备（2×溶液的使用、பைடு நூலகம்何沸水浴）
6、称量完毕后，应把砝码放回砝码盒中，把游码移回零处，使天平恢复原来的状态。
容量瓶使用
容量瓶使用
1、使用前要检验是否漏水。程序是：加水→倒立，观察→瓶塞旋转180°→倒立，观察。
2、容量瓶不能用于溶解溶质，更不能用玻璃棒搅拌。因此溶质要先在烧杯内溶解，然后再转移到容量瓶中。
3、不能将热的溶液转移到容量瓶中，更不能给容量瓶加热。如果溶质在溶解时是放热的，则须待溶液冷却后再移液。
2、距离薄板下沿2cm
3、少量多次点(1-5)，每点一次用吹风机冷风吹干
4、几个不同的样要在同一直线上
展层
1、展层剂的选择
2、层析缸的使用
3、展层剂的界面要低于点样线
Rf测定
1、Rf值为原点到层析点中心的距离（r）与原点到溶剂前沿的距离（R）的比值
溶液配制
缓冲液的配制
1、配方
2、容量瓶的使用
3、配制方法
转化技术
热激处理
1、热激处理的时间
2、热激处理的温度
特别要控制热激时间（42℃，90 s）
超净台的使用
1、使用前应开启风机
2、用75%的酒精擦拭台面。注意有机玻璃面不能用酒精擦
3、紫外灯照射30分钟，然后关闭紫外灯。

生物化学检验考试重点知识总结

生物化学检验考试重点知识总结临床生物化学与检验单选（15个，1分）多选（5个，2分）判断改错（6个，5分）简答（4个，8分）论述（1个，13分）多选只选确定的，判断不知道时尽量选对，简答和论述（第三、八、九章）要答到一半左右,第一章临床生物化学的概念：临床生物化学与检验实在人体正常的生物化学代谢基础上，研究疾病状态下生物化学病理性变化的基础理论和相关代谢物的质与量的改变，从而为疾病的临床实验诊断，治疗检测、药物疗效和预后判断、疾病预防等方面提供信息和决策依据的一门学科。

第二章1，运输载体类（血浆脂蛋白：包括乳糜微粒、极低密度脂蛋白、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白等）的血浆蛋白质有运输和营养等功能，清蛋白（Alb）运输游离脂肪酸、某些激素、胆红素、多种药物等，蛋白酶抑制物（包括α1-抗胰蛋白酶、α1-抗糜蛋白酶、α2-巨球蛋白等六种以上）能抑制蛋白酶作用。

2.急性时相反应：当人体因感染、自身免疫性等组织损伤（如创伤、手术、心肌梗死、肿瘤等）侵害，使其血浆中浓度显著升高，而血浆清蛋白、清蛋白、转铁蛋白浓度则出现相应下降，此炎症反应过程，称之为急性时相反应(APR),该过程出现的蛋白质统称为急性时相反应蛋白（APP）。

各APP 升高的速度和幅度有所不同，C-反应蛋白首先升高，在12小时内-α1酸性糖蛋白也升高，尔后α1-抗胰蛋白酶、触珠蛋白、C4和纤维蛋白原升高，最后是C3和铜蓝蛋白升高，通常在2至5天内这些APP达到最高值。

正常血清蛋白电泳（SPE）3.前清蛋白（PA）：在SPE中显示清蛋白在前方故而得名，生理功能：PA为运载蛋白和组织修补材料，临床意义：①属负性APP；②作为营养不良的指标；③作为肝功能不全的指标。

（n解）4. 触珠蛋白（Hp）又称为结合珠蛋白，在SPE中位于α2区带，为α2β2四聚体，生理功能：主要能与红细胞中释放出的游离血红蛋白结合，为机体有效的保留铁。

临床意义：1.溶血性疾病；2.当烧伤和肾病综合征使清蛋白大量丢失时，大分子触珠蛋白常明显增加；3、雌激素使触珠蛋白减少，多数急慢性肝病包括急性病毒性肝炎和伴黄疸的肝硬化患者，由于雌激素分解代谢减少，血浆触珠蛋白可降低。

生物化学考试重点总结

生物化学考试重点总结生物化学第一章绪论生物化学：生物化学是在分子水平研究并阐述生物体的物质组成、结构与功能、代谢变化与调节、生命遗传物质化学传递规律的科学。

第二章糖类化学及第九章糖代谢△1糖：糖是具有多羟基醛和多羟基酮及其衍生物或多聚物的总称。

根据其大小可分为单糖、低聚糖、和多糖。

2单糖的主要化学性质：①与碱性弱氧化剂反应（与银氨溶液反应）与本尼迪克特试剂（硫酸铜、碳酸钠和柠檬酸钠）单糖+Cu(OH)2→Cu2O↓+复杂氧化物②与非碱性弱氧化剂反应（溴水）③酶促反应④与较强氧化剂反应（HNO3）作用生成糖二酸⑤彻底氧化⑥还原反应⑦成酯反应⑧成苷反应（形成糖苷键）苷类化合物分包括糖部分和非糖部分，非糖部分称为苷元。

3双糖有麦芽糖、蔗糖、和乳糖，其中蔗糖无还原性。

麦芽糖是由两分子的α—D—葡萄糖通过α—1，4糖苷键结合二而成的；具有还原性△4，蔗糖由α-1,2-β-糖苷键连接而成，无还原性5乳糖具有还原性6多糖按其组分可分为同多糖和杂多糖，同多糖由一种单糖缩合而成包括淀粉、糖原和纤维素等；淀粉是直链淀粉和支链淀粉的混合物，水解终产物都是D-葡萄糖，直链淀粉由α-1,4糖苷键连接成键支链淀粉由α-1,4糖苷键和α-1,6糖苷键组成；（直链淀粉遇碘变蓝色）；糖原（糖原遇碘呈红褐色）△7糖蛋白：糖蛋白可分为N-连接糖蛋白和O-连接糖蛋白两类8习题：①蔗糖是由一分子的D-葡萄糖一分子的D果糖之间通过α-1，2-β-糖苷键相连② 多糖的构象大致可分为螺旋、带状、皱折和无卷曲四种类型，决定其构象的主要因素是糖链的一级结构。

③直链淀粉的构象是螺旋，纤维素的构象是带状④常用来测定测定还原糖的试剂为斐林试剂和班乃德试剂⑤直链淀粉遇碘呈蓝色，支链淀粉遇碘呈紫色，糖原遇碘呈红褐色9糖的无氧分解代谢（糖酵解）：葡萄糖或糖原在不消耗氧的条件下被分解成乳糖的过程。

（糖酵解的全部反应在胞液中进行）（熟悉）10糖酵解的全过程：①葡萄糖化成6-磷酸葡萄糖（由己糖激酶催化）消耗1个ATP并需要Mg2+参加己糖激酶是糖酵解中第一个限速酶反应不可逆②6-磷酸葡萄糖转变为6-磷酸果糖（由磷酸己糖异构酶催化）反应可逆③6-磷酸果糖转变为1,6-二磷酸果糖（由6-磷酸果糖激酶-1催化）消耗一个ATP 需Mg2+参加反应不可逆 6-磷酸果糖激酶-1是糖酵解过程中第二个限速酶④1，6-二磷酸果糖裂解成2分子磷酸丙糖（由缩醛酶催化）最后是生成了3-磷酸甘油醛⑤3-磷酸甘油醛氧化为1，3-二磷酸甘油醛（由3-磷酸甘油醛脱氢酶催化）反应产生2个H由辅酶NAD+接受生成NADH + H+ 反应可逆⑥1，3-二磷酸甘油酸转变为3-磷酸甘油酸（由磷酸甘油酸激酶催化）产生2个ATP 反应可逆⑦3-磷酸甘油酸转变为2-磷酸甘油酸（由3-磷酸甘油酸变位酶催化）反应可逆⑧2-磷酸甘油酸转变成为磷酸烯醇式丙酮酸（由烯醇化酶催化）反应不可逆⑨磷酸烯醇式丙酮酸转变为丙酮酸（由丙酮酸激酶（PK）催化）产生两个ATP 丙酮酸激酶是第三个限速酶⑩丙酮酸转化为乳酸（乳酸脱氢酶催化）反应所需要的氢原子由NADH + H+提供然后NADH+ H+重新转变成NAD+保证了糖酵解的继续进行。

生化实验考试知识点

生物化学实验复习资料（蓝林）生物化学是研究生命的化学。

是研究组成生物体物质的结构及其功能、代谢及其中的能量代谢、信号物质的信号传导、生命遗传物质的遗传及变异和表达调控、以及疾病发生和治疗相关的生物化学问题等的科学。

玻璃仪器的洗涤一般玻璃仪器用肥皂或去污粉以毛刷洗涤即足以满足要求，洗后应将肥皂或去污粉仔细冲掉，将水倾去后，器壁不挂水珠，视为合格。

铬酸洗液仅用于毛刷不能洗净的仪器，切勿滥用普通玻璃仪器之洗涤。

使用铬酸洗液时，仪器应干燥；过多的水份将使洗液迅速失效。

用过之铬酸洗液须加以保存以反复使用，直至变为绿色后方可舍弃；其舍弃法与浓硫酸液相同。

用洗液浸洗过的玻璃仪器，应先用自来水冲洗，然后再用蒸馏水或去离子水清洗，清洗时，宜采用“少量多次”原则以节约蒸馏水，同时清洗的效率也高。

温度、pH及酶的激活剂、抑制剂对酶的影响实验原理大多数酶的化学本质是蛋白质、凡能引起蛋白质变质的因素，都可以使酶丧失活性、温度、pH、抑制剂、激活剂、对酶活性有显著的影响。

淀粉各种糊精麦芽糖葡萄糖加加加碘碘碘变蓝蓝、紫、褐、红不变色氨基酸、蛋白质的性质鉴定实验原理氨基酸与蛋白质分子组成中的某些特殊结构与某些试剂作用可以表现出特殊的颜色反应，利用此性质，可检验出氨基酸及蛋白质。

肝糖原的提取与鉴定实验原理糖原是一高分子化合物。

微溶于水，无还原性。

肝糖原是糖在体内的重要储存形式之一，是体内糖的重要来源之一，原理2 肝糖原理的糖在体内的重要储存形式之一，是体内糖的重要来源之一，糖原是一高分子化合物。

微溶于水，无还原性、与碘作用生成红色。

本实验通过对动物肝脏研磨，在三氯醋酸作用下一使其中的蛋白质被沉淀，二使糖原水解酶失活，从而过滤得到糖原。

实验步骤称肝脏约1g+10%三氯醋酸1ml 研磨+5%三氯醋酸2ml 研磨至肉糜状过滤（滤液收集在带刻度的离心管中）加入等体积95%乙醇混匀、静置10min 离心弃去上清夜、留沉淀加蒸馏水1ml 搅拌溶解而得糖原溶液待用。

生物化学考试重点笔记(完整版)

第一章蛋白质的结构与功能第一节蛋白质的分子组成一、组成蛋白质的元素1、主要有C、H、O、N和S，有些蛋白质含有少量磷或金属元素铁、铜、锌、锰、钴、钼，个别蛋白质还含有碘。

2、蛋白质元素组成的特点：各种蛋白质的含氮量很接近，平均为16％。

3、由于体内的含氮物质以蛋白质为主，因此，只要测定生物样品中的含氮量，就可以根据以下公式推算出蛋白质的大致含量：100克样品中蛋白质的含量( g % )= 每克样品含氮克数× 6.25×100二、氨基酸——组成蛋白质的基本单位（一）氨基酸的分类1.非极性氨基酸（9）：甘氨酸（Gly）丙氨酸（ Ala）缬氨酸（Val）亮氨酸（Leu）异亮氨酸（Ile）苯丙氨酸（Phe）脯氨酸（Pro）色氨酸（Try）蛋氨酸（Met）2、不带电荷极性氨基酸（6）：丝氨酸（Ser）酪氨酸(Try) 半胱氨酸 (Cys) 天冬酰胺 (Asn) 谷氨酰胺(Gln ) 苏氨酸(Thr )3、带负电荷氨基酸（酸性氨基酸）（2）: 天冬氨酸(Asp ) 谷氨酸(Glu)4、带正电荷氨基酸（碱性氨基酸）（3）:赖氨酸(Lys) 精氨酸(Arg)组氨酸( His)（二）氨基酸的理化性质1. 两性解离及等电点等电点 :在某一pH的溶液中，氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相等，成为兼性离子，呈电中性。

此时溶液的pH值称为该氨基酸的等电点。

2. 紫外吸收(1)色氨酸、酪氨酸的最大吸收峰在 280 nm 附近。

（2）大多数蛋白质含有这两种氨基酸残基，所以测定蛋白质溶液280nm的光吸收值是分析溶液中蛋白质含量的快速简便的方法。

3. 茚三酮反应氨基酸与茚三酮水合物共热，可生成蓝紫色化合物，其最大吸收峰在570nm处。

由于此吸收峰值与氨基酸的含量存在正比关系，因此可作为氨基酸定量分析方法三、肽（一）肽1、肽键是由一个氨基酸的α-羧基与另一个氨基酸的α-氨基脱水缩合而形成的化学键。

2、肽是由氨基酸通过肽键缩合而形成的化合物。

生物化学考试重点概要

生物化学考试重点概要
一、概述
生物化学是研究生物体内的化学成分及其相互关系的学科，涉及生物大分子、代谢途径、酶的功能等领域。

本文档将重点概括生物化学考试中的重要内容。

二、生物大分子
1. 蛋白质：结构、功能、合成与降解
2. 核酸：DNA和RNA的结构、功能和复制过程
3. 碳水化合物：单糖、多糖的组成和功能
4. 脂类：脂肪酸、甘油与脂质的分类和代谢
三、代谢途径
1. 高级碳水化合物代谢：糖原合成与分解、糖酵解、柠檬酸循环
2. 氨基酸代谢：氨基酸合成与降解、尿素循环
3. 脂类代谢：脂肪酸合成与降解
4. 核酸代谢：核苷酸合成与降解
四、酶的功能
1. 酶的分类与特性：氧化还原酶、转移酶、水解酶等
2. 酶促反应：酶的动力学参数、酶反应速率与底物浓度的关系
3. 酶的调控机制：酶的诱导与抑制、酶活性调节因子
五、其他重要知识点
1. 酶联免疫吸附测定(ELISA)原理与应用
2. PCR技术的原理与应用
3. 蛋白质电泳的原理与应用
六、复建议
1. 重点记忆各个代谢途径的关键酶与反应物
2. 针对酶的功能和调控机制进行重点理解与实例分析
3. 多做题和模拟考试，加强对知识点的掌握和应用能力
以上是生物化学考试重点概要的完整版。

希望本文档能帮助你全面复生物化学知识，取得优异的考试成绩。

生物化学实验技术复习要点整理

⽣物化学实验技术复习要点整理前⾔1.本课程主要讲述了哪些实验技术，其中被称为⽣化实验室中三⼤实验技术的是？答：层析技术、电泳技术、离⼼技术、分光光度技术、免疫化学技术。

其中层析技术、电泳技术、离⼼技术是⽣物学的三⼤实验技术。

第⼀章⽣物化学基本操作与要求1.洗涤液的种类配置与应⽤答：（1）铬酸洗液（称取5g重铬酸钾粉末置于250mL烧杯中，加⽔5mL，尽量使其溶解，慢慢加⼊浓硫酸100mL，边加边搅拌。

冷却后贮存备⽤，若颜⾊变绿，表⽰洗液已失效。

）⽤于洗涤玻璃器⽫。

（2）浓盐酸，洗去⽔垢或某些⽆机盐沉淀。

（3）30%硝酸，洗涤CO2测定仪器及微量滴管（4）45%尿素，洗涤蛋⽩制剂、⾎样（5）有机溶剂，洗涤油脂、脂溶性染料（6）去污粉，⼀般污染物2.化学试剂的分级答：3.什么是准确度、精密度？答：准确度表⽰实验分析测量值与真实值相接近的程度。

误差。

精密度是指在相同条件下多次测量结果互相吻合的程度，表现了测定结果的再现性。

偏差。

4.如何提⾼实验的准确度、精密度？答：准确度：减少系统误差1.仪器校正2.空⽩试验3.对照实验；精密度：减少偶然误差1.平均取样2.多次取样。

第⼆章层析技术1.层析技术及其原理答：层析技术是⼀种基于被分离物质的物理、化学、⽣物学特性的不同，使它们在某种机制中移动速度不同⽽进⾏分离和分析的⽅法。

2.名词：固定相、流动相、分配系数答：固定相：固定相是层析的⼀个基质。

它可以是固体物质（如吸附剂、凝胶、离⼦交换剂等）也可以是液体物质（如固定在硅胶或纤维素上的溶液），这些基质能与待分离的化合物进⾏可逆的吸附、溶解、交换等作⽤。

流动相：在层析过程中，推动固定相上待分离的物质朝着⼀个⽅向移动的液体、⽓体等。

分配系数：是指在⼀定的条件下，某种组分在固定相和流动相中含量的⽐值，Kd=固定相中的总量/流动相中的总量。

3.层析法的分类答：按流动相的形式分：⽓相⾊谱法1.⽓固⾊谱法2.⽓液⾊谱法，液相⾊谱法1.液固⾊谱法2.液液⾊谱法；按固定相的形式分：1.柱层析法2.纸层析法3.薄层层析法。

生物化学考试知识点

一、蛋白质化学 5 学时（1）结构特点：氨基酸(amino acid)是蛋白质分子的基本组成单位。

构成天然蛋白质分子的氨基酸约有20 种，除脯氨酸为α-亚氨基酸、甘氨酸不含手性碳原子外，其余氨基酸均为L- α-氨基酸。

（2）分类：根据氨基酸的R 基团的极性大小可将氨基酸分类。

(3) 性质肽键(peptide bond)是指由一分子氨基酸的α-羧基与另一分子氨基酸的α-氨基经脱水而形成的共价键(-CO-NH-)。

氨基酸分子在参与形成肽键之后，由于脱水而结构不完整，称为氨基酸残基。

每条多肽链都有两端：即自由氨基端(N 端)与自由羧基端(C 端)，肽链的方向是N 端→C端。

蛋白质的分子结构可人为分为一级、二级、三级和四级结构等层次。

一级结构为线状结构，二、三、四级结构为空间结构。

( 1) ．一级结构：指多肽链中氨基酸的排列顺序，其维系键是肽键。

(2) ．二级结构：指多肽链主链骨架盘绕折叠而形成的构象，借氢键维系。

主要有以下几种类型：α-螺旋：其结构特征为：①主链骨架围绕中心轴盘绕形成右手螺旋；②螺旋每上升一圈是3.6 个氨基酸残基，螺距为0.54nm；③相邻螺旋圈之间形成许多氢键；④侧链基团位于螺旋的外侧。

影响α-螺旋形成的因素主要是：①存在侧链基团较大的氨基酸残基；② 连续存在带相同电荷的氨基酸残基；③存在脯氨酸残基。

β-折叠：其结构特征为：①若干条肽链或肽段平行或反平行排列成片；②所有肽键的 C=O 和N—H 形成链间氢键；③侧链基团分别交替位于片层的上、下方。

β-转角：多肽链180°回折部分，通常由四个氨基酸残基构成，借 1、4 残基之间形成氢键维系。

无规卷曲：主链骨架无规律盘绕的部分。

超二级结构(3)．三级结构：指多肽链所有原子的空间排布。

其维系键主要是非共价键（次级键）：氢键、疏水键、范德华力、离子键等，也可涉及二硫键。

结构域。

(4)．四级结构：指亚基之间的立体排布、接触部位的布局等，其维系键为非共价键。

生物化学知识点(考试必备)

第一章蛋白质一名词解释1蛋白质：由多种α—氨基酸按一定序列通过肽键（酰胺键）缩合而成的具有一定功能的生物大分子，体内的大部分生命活动，是在蛋白质的参与下完成的。

2简单蛋白质（又称单纯蛋白质）：只含由α-氨基酸组成的肽链，不含其它辅助成分。

按溶解度的差别分为7类：清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白、谷蛋白、精蛋白、组蛋白、硬蛋白。

3结合蛋白质（缀合蛋白质）：由简单蛋白与其它非蛋白辅助成分（辅基）结合而成。

按照辅基的不同，分为5类：核蛋白、糖蛋白、脂蛋白、色蛋白、磷蛋白。

4氨基酸的等电点：当溶液浓度为某一pH值时，氨基酸分子中所含的-NH3+和-COO-数目正好相等，净电荷为0，这一pH值即为氨基酸的等电点，简称p I。

在等电点时，氨基酸既不向正极也不向负极移动，即氨基酸处于两性离子状态。

5蛋白质的一级结构：指蛋白质分子中氨基酸的连接方式和排列顺序（氨基酸序列）以及二硫键的位置，又称蛋白质的化学结构或初级结构。

是蛋白质最基本结构。

6构型（Configuration）：是指一个分子中某不对称碳原子上相连的各原子或取代基团的空间排列。

任何一个不对称碳原子相连的四个不同原子或基团，只可能有两种不同的空间排布，即两种构型：D-构型和L-构型。

构型的改变涉及共价键的断裂和重组。

7构象（Conformation）：是指相同构型的化合物中，与碳原子相连的原子或取代基团在单键旋转时形成的相对空间排布。

构象的改变不需要共价键的断裂和重新形成，只需单键旋转方向或角度改变而即可。

8蛋白质的二级结构：是指多肽链主链本身通过氢键沿一定方向盘绕、折叠而形成的构象。

天然蛋白质一般都含有α-螺旋、β-折叠片、β-转角和自由卷曲等二级结构。

9结构域：指多肽链在二级结构或超二级结构的基础上形成三级结构的局部折叠区，它是相对独立的紧密球状实体，称为结构域。

10蛋白质的三级结构：指在二级结构基础上，肽链的不同区段的侧链基团相互作用在空间进一步盘绕、折叠形成的包括主链和侧链构象在内的特征三维结构。

动物生物化学实验重点

动物生物化学实验一、动物生物化学实验特点1．实验材料新鲜2．被测成分在动物组织、细胞中含量很少3．体外操作应尽量模拟生理环境条件4．在绝大多数条件下，生物分子是溶解在溶液中，很难直接看到所研究的内容二、注意事项1.工作服；严禁吸烟、饮水、进食；废液缸、冲稀、废物桶2.铬酸洗液；10%-20%尿素；硝酸3.恰当的吸管，减少误差三、离心机1．利用离心力把溶液中比重不同的固液分离。

分为常速、高速和超速离心机。

2．液体要加到三分之二左右、严格配平、不要超过最大转速、防止过热。

四、酶活性的观察1酶：活细胞产生，对特异底物有高效催化能力的生物催化剂，化学本质多数蛋白质。

影响酶活性：PH、温度、激活剂和抑制剂激活剂、抑制剂：能（升高）降低酶的活性，但又不使酶失活的物质《对酶有选择性》（区别于酶的失活）2淀粉在唾液淀粉酶的催化下会水解，水解程度随时间的延长而增加。

利用碘液指示水解程度：淀粉（蓝色）——糊精（深褐色、深红色）——麦芽糖、葡萄糖（棕黄色，碘液本身的颜色）337摄氏度、PH6.8（磷酸缓冲液中PH6.6）、激活剂0.5%NaCl、抑制剂1%CuSO44注意：温度对酶的影响中沸水浴后要冷却；酶反应的特异性检验中加斑氏试剂后沸水浴先砖红色沉淀；酶的活性通常是以测定酶作用的底物或产物在酶作用前后的变化来进行观察。

五、琥珀酸脱氢酶的作用及其竞争性抑制的观察1琥珀酸脱氢酶是三羧酸循环中的一个重要的酶，位于线粒体中，可使琥珀酸脱氢而生成延胡索酸。

在缺氧的条件下，适当的受氢体也可接受脱氢酶从底物上脱下的氢。

当甲烯蓝（蓝色）作为受氢体甲烯蓝被脱下的氢还原成甲稀白（无色物质）。

【甲稀白易氧化用液体石蜡液封】2酶的竞争性抑制作用：丙二酸化学结构与琥珀酸相似，可与琥珀酸竞争性的结合琥珀酸脱氢酶的活性中心，若已与丙二酸结合，则不能再催化琥珀酸脱氢，此现象称为酶的竞争性抑制作用。

解除酶的竞争性抑制作用：加大底物浓度的方法3研磨应充分；滴加试剂时，最后滴加心脏制备液。

生物化学考试重点总结-20页精选文档

生化总结(精华篇)1。

蛋白质的pI：在某一pH溶液中，蛋白质解离为正离子和解离为负离子的过程和趋势相等，处于兼性离子状态，该溶液的pH值称蛋白质的pI。

2。

模体：在蛋白质分子中，二个或二个以上具有二级结构的肽段，在空间上相互接近，形成一个特殊的空间现象，具有特殊的生物学功能。

3。

蛋白质的变性：在某些理化因素的作用下，蛋白质特定的空间构象被破坏，从而导致其理化性质的改变和生物学活性丧失的现象。

4。

试述蛋白质的二级结构及其结构特点。

(1)蛋白质的二级结构指蛋白质多肽链主链骨架原子的相对空间位置，并不涉及氨基酸残基侧链的构象。

主要包括，α-螺旋、β-折叠、β-转角、无规则卷曲四种类型，以氢键维持二级结构的稳定性。

(2)α-螺旋结构特点：a、单链、右手螺旋；b、氨基酸残基侧链位于螺旋的外侧；c、每一个螺旋由3.6个氨基酸残基组成，螺距0.54nm；d、每个残基的-NH和前面相隔三个残基的-CO之间形成氢键；e、氢键方向与螺距长轴平行，链内氢键是α-螺旋的主要因素。

(3)β-折叠结构特点：a、肽键平面充分伸展，折叠成锯齿状；b、氨基酸侧链交替位于锯齿状结构的上下方；c、维系依靠肽键间的氢键，氢键方向与肽链长轴垂直；d、肽键的N末端在同一侧---顺向平行，反之为反向平行。

(4)β-转角结构特点：a、肽链出现180°转回折的“U”结构；b、通常由四个氨基酸残基构成，第二个氨基酸残基常为脯氨酸，由第1个氨基酸的C=O与第4个氨基酸残基的N-H形成氢键维持其稳定性。

(5)无规则卷曲：肽链中没有确定的结构。

5。

蛋白质的理化性质有：两性解离；蛋白质的胶体性质；蛋白质的变性；蛋白质的紫外吸收性质；蛋白质的显色反应。

6。

核小体(nucleosome)：是真核生物染色质的基本组成单位，有DNA和5种组蛋白共同组成。

H2A、H2B、H3和H4共同构成了核小体的核心组蛋白，长度约150bp的DNA双链在组蛋白八聚体上盘绕1.75圈形成核小体的核心颗粒，核心颗粒之间通过组蛋白H1和DNA连接形成的串珠状结构称核小体。

2024年生物化生实验操作考试

选择题
在生物化学实验中，用于分离和提纯蛋白质常用的技术是？
A. 蒸馏
B. 过滤
C. 离心
D. 凝胶色谱法（正确答案）
下列哪项是生物化学实验中测定酶活性的常用方法？
A. 滴定法
B. 分光光度法（正确答案）
C. 称重法
D. 电解法
在进行微生物培养时，用于接种的常用工具是？
A. 滴管
B. 接种环（正确答案）
C. 镊子
D. 吸管
生物化学实验中，下列哪项操作是为了防止实验污染？
A. 使用无菌水
B. 实验前后洗手（正确答案）
C. 使用高温烘箱
D. 使用有色试剂
在进行DNA提取实验时，常用的破坏细胞膜的方法是？
A. 冻融法
B. 研磨法（正确答案）
C. 离心法
D. 透析法
生物化学实验中，用于检测溶液中葡萄糖含量的常用试剂是？
A. 酚酞试剂
B. 班氏试剂（正确答案）
C. 托伦试剂
D. 斐林试剂
在进行电泳实验时，为了控制电泳的方向和速度，需要调整的是？
A. 电压（正确答案）
B. 电流
C. 电阻
D. 电容
生物化学实验中，下列哪项是用于测定样品中蛋白质含量的一种经典方法？
A. 凯氏定氮法（正确答案）
B. 紫外分光光度法
C. 高效液相色谱法
D. 气相色谱法
在进行PCR（聚合酶链式反应）实验时，下列哪项是反应体系中必不可少的成分？
A. 引物（正确答案）
B. 模板DNA的互补链
C. 限制性内切酶
D. DNA连接酶。