最新基于测序的微生物多样性分析总结
微生物实验工作总结5篇
微生物实验工作总结5篇篇1一、引言在过去的一段时间里,我参与了多项微生物实验项目,这些项目涵盖了多个领域,包括医学、农业和环境保护等。
通过这些实验,我不仅积累了丰富的实践经验,还对微生物的多样性和应用有了更深入的了解。
本文将对我参与的微生物实验项目进行总结,并阐述我的工作心得和收获。
二、实验项目概述1. 医学领域:我参与了一项关于病原微生物的研究项目,旨在探索某种新型病毒的基因组结构及其致病机制。
通过基因测序和生物信息学分析,我们成功揭示了该病毒的遗传特征,为后续的疫苗研发提供了重要依据。
2. 农业领域:我还参与了一项关于植物病害的研究项目,通过分离和鉴定植物病原菌,我们筛选出了一批具有较强致病力的菌株,并对其致病机制进行了深入研究,为农业生产中的病害防治提供了科学依据。
3. 环境保护领域:此外,我还参与了一项关于环境微生物的研究项目,通过富集和分离环境中的微生物,我们筛选出了一批能够高效降解有机污染物的菌株,并对其降解机制进行了研究,为环境保护提供了新的技术手段。
三、工作心得与收获1. 实验技能的提升:通过参与这些微生物实验项目,我不仅掌握了多种实验技能,如微生物培养、分离、鉴定和基因测序等,还熟悉了相关实验仪器的操作和维护。
这些技能的提升为我的后续工作奠定了坚实的基础。
2. 对微生物的深入理解:通过实验和研究,我对微生物的多样性和应用有了更深入的了解。
微生物在各个领域都有着广泛的应用价值,如医学、农业和环境保护等。
同时,我也意识到了微生物的潜在风险和挑战,如病原微生物的传播和污染等。
因此,在未来的工作中,我会更加注重微生物的安全管理和风险控制。
3. 团队合作与沟通能力:微生物实验项目通常需要多人协作完成,这锻炼了我的团队合作和沟通能力。
在与团队成员的交流中,我学会了倾听他人的意见和建议,并善于将自己的想法与团队目标相结合。
这种团队合作的精神不仅提高了实验效率和质量,还增强了我的团队协作能力和凝聚力。
2024年微生物总结范本
2024年微生物总结范本____年微生物总结20年代是微生物学研究的一个重要时期。
随着科技的不断进步和创新,我们对微生物的了解和研究也取得了重大突破。
本文将对____年微生物学领域的新发现和进展进行总结。
一、微生物多样性的研究在过去的几年中,对微生物多样性的研究取得了重大进展。
随着高通量测序技术的快速发展,我们能够更全面地了解微生物群落的组成和功能。
____年,人们对各种环境中的微生物群落进行了详细的研究,包括土壤、水体、动物肠道等。
这些研究揭示了微生物的多样性和功能在维持生态系统平衡和健康方面的重要性。
二、特殊微生物的发现随着对微生物多样性的研究,越来越多的特殊微生物被发现。
____年,我们发现了一种在极端环境中生存的新型细菌。
这种细菌能够在高温、高压、低氧等恶劣环境下生存,并具有独特的代谢特征和抗逆能力。
这些特殊微生物的研究不仅有助于我们了解生命的极限,还可能为人类提供新的应用和治疗途径。
三、微生物与人类健康的关系微生物与人类健康的关系一直是微生物学研究的热点领域。
____年,我们对微生物与人类健康关系的研究取得了重要进展。
首先,我们发现了更多与肠道微生物相关的疾病风险基因。
这些发现有助于我们预测和干预与肠道微生物相关的疾病,如肠炎、自身免疫性疾病等。
同时,微生物组移植作为治疗严重肠道疾病的方法也得到了进一步发展和应用。
此外,我们还发现微生物与免疫系统之间的互动机制。
通过研究微生物与免疫系统之间的相互作用,我们得以了解为什么一些人对感染易感,而另一些人对感染具有抗体。
这些研究为预防和治疗感染性疾病提供了新的思路和方法。
四、微生物技术的应用微生物技术在农业、食品工业、环境保护等领域的应用也取得了较大进展。
____年,我们发展了一种利用微生物来解决污水处理问题的新技术。
这种技术可高效地降解有机废物、去除重金属等污染物,有助于减少环境污染和改善水质。
此外,我们还研发了一种利用微生物产生生物柴油的新技术。
《2024年基于高通量测序技术的塞罕坝人工林细菌群落多样性和功能特征分析》范文
《基于高通量测序技术的塞罕坝人工林细菌群落多样性和功能特征分析》篇一一、引言塞罕坝人工林作为我国北方重要的生态屏障,其生态系统健康与稳定对于调节区域气候、保持生物多样性具有至关重要的作用。
细菌作为森林生态系统中重要的微生物群落,对于物质循环、营养供应和生态系统功能维持起着至关重要的作用。
因此,了解并分析塞罕坝人工林中的细菌群落多样性和功能特征具有重要意义。
近年来,高通量测序技术的快速发展为这一研究提供了有力的技术支撑。
本文旨在通过高通量测序技术对塞罕坝人工林中的细菌群落进行深入研究,分析其多样性和功能特征。
二、研究方法1. 样品采集本研究在塞罕坝人工林中选取了多个代表性样地,分别在林冠层、灌木层和地表层采集土壤样品。
每个样地采集5个重复样品,以保证数据的可靠性。
2. DNA提取与高通量测序对采集的土壤样品进行DNA提取,然后利用高通量测序技术对细菌的16S rRNA基因进行测序。
通过对测序数据的分析,可以了解细菌群落的组成和多样性。
三、结果与分析1. 细菌群落组成通过对高通量测序数据的分析,我们发现塞罕坝人工林中的细菌群落主要由变形菌门(Proteobacteria)、酸杆菌门(Acidobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)等组成。
其中,变形菌门和酸杆菌门是优势菌群,其相对丰度较高。
2. 细菌群落多样性基于OTU分析和Alpha多样性指数分析,我们发现塞罕坝人工林中的细菌群落具有较高的多样性。
不同样地、不同层次之间的细菌群落多样性存在一定差异,这可能与环境因素、植被类型等有关。
3. 细菌群落功能特征通过与数据库比对和分析,我们发现塞罕坝人工林中的细菌群落具有多种功能特征,包括碳、氮、磷等元素的循环、有机物的分解、植物生长促进等。
这些功能特征的发挥对于维持森林生态系统的健康和稳定具有重要意义。
四、讨论1. 细菌群落与环境因子的关系本研究发现,塞罕坝人工林中的细菌群落多样性和功能特征与环境因子密切相关。
基于DNA测序技术的微生物群落结构及生态功能分析
基于DNA测序技术的微生物群落结构及生态功能分析DNA测序技术已经成为了现代生物学研究的一大重要工具。
它可以用来了解生物体内基因组结构、表达及功能等重要信息。
其中,基于DNA测序技术的微生物群落结构及生态功能分析也得到了广泛的应用。
本文将从微生物群落的结构与多样性、微生物在生态系统中的作用及DNA测序技术在研究中的应用三个方面来展开讨论。
一、微生物群落的结构与多样性微生物群落是一个复杂的生物社会,它是具有多样性的。
这种多样性表现在菌种的数量、不同物种的比例以及其在生态系统中所处的位置等方面。
微生物群落的结构及多样性通常会受到周围的环境因素所影响。
这些环境因素包括温度、湿度、pH值、营养等条件。
微生物群落的结构和多样性有助于生态系统的平衡与稳定,还会给环境管理提供有价值的信息。
二、微生物在生态系统中的作用微生物在自然界中扮演了重要的角色。
它们可以分解有机废弃物、分解植物和动物的尸体、制造矿物质,发酵、造酒、制药等方面发挥着不可或缺的作用。
在土壤、水域或其他生态系统中,微生物通过生态功能运作,为生态服务、食物和经济增长做出了重要贡献。
例如,土壤中的微生物可以吸收氮、磷等化学物质,把它们转化成植物可以利用的形式。
在水域中的微生物可以降解和吸收污染物,净化水质。
这些功能的实现需要多种微生物协同作用,关于其生态功能的解释和预测,就需要微生物群落结构及多样性的分析。
三、DNA测序技术在微生物群落结构及生态功能分析中的应用DNA测序技术为研究微生物群落结构和多样性提供了有效的手段。
利用这种技术,研究者可以对微生物群落进行分析和分类,以了解它们的多样性、组成、贡献及功能等方面。
在能力和技术发展方面的改进使得批量DNA测序成为可负担的选择,并且有助于了解微生物群落的演变和分布模式、以及微生物中的共生关系。
同时,随着DNA测序技术的不断发展,生态系统多样性的研究已经开始向微生物层面拓展。
微生物群落的结构和生态功能不仅在研究中得到公认,而且在环境保护和生态管理方面也发挥重要作用。
基于高通量测序技术的微生物多样性分析研究
基于高通量测序技术的微生物多样性分析研究近年来,生物技术领域发展非常迅猛。
其中一项重要技术便是高通量测序技术,也称为下一代测序技术(NGS)。
这种技术的出现使得生物测序速度、效率和准确性都得到了显著提高。
在微生物多样性研究方面,高通量测序技术被广泛应用,成为了研究微生物种类及其丰度的重要工具。
1. 高通量测序技术的基本原理高通量测序技术是一种基于电子光学技术的测序方法,它可以在非常短的时间内同时测序多个DNA或RNA分子,且每个分子都可以得到序列信息。
高通量测序技术可以将DNA或RNA分子通过特定的方法复制成大量的片段,将这些片段序列化,最终得到各个片段的序列信息。
这种方法简化了测序的过程,大大提高了测序的速度和准确性。
2. 高通量测序技术在微生物多样性研究中的应用微生物多样性研究需要对生物体内存在的微生物进行分离、鉴定和计数。
传统的方法是通过培养微生物,识别和计数不同的菌株。
但是,这种方法只能鉴别少数已知的微生物种类,不能满足当前生物研究中需要鉴别大量微生物种类的要求。
高通量测序技术解决了这个问题。
它可以将样本中的微生物DNA片段序列化,得到每个片段的序列信息,并通过对比已经知道的微生物DNA数据库,确定每个片段属于哪个微生物种类。
这样,我们就能够确定样本中存在哪些微生物,每种微生物的数量及其丰度。
同时,高通量测序技术还可以比较出不同样本中微生物的差异,帮助我们了解样本中的微生物群落结构和数量变化。
3. 高通量测序技术在微生物多样性研究中的局限性尽管高通量测序技术已经成为微生物多样性研究的重要工具,但是它仍然存在一些局限性。
首先,技术本身的成本较高,无法为大规模微生物鉴定提供经济有效的解决方案。
其次,由于各种因素的影响,如PCR扩增、测序平台和序列处理方法等,高通量测序技术在微生物种类分析方面存在一定的误差和偏差。
最后,高通量测序技术只能鉴别已知的微生物种类,无法发现新的微生物种类。
4. 发展高精度微生物多样性分析技术的意义基于高通量测序技术的微生物多样性分析方法已经成为了微生物研究的主流方法。
基于第三代测序技术的微生物群落多样性分析
基于第三代测序技术的微生物群落多样性分析第一节:引言随着科技的不断发展,生物学领域也得到了极大的发展,某些生物的研究也得到了极大的深化,比如微生物。
在这场科技革命的浪潮中,测序技术成为促进生物学突破的重要工具。
基因组学研究最初开展时,Sanger测序技术曾是研究人员使用的主要技术。
然而,由于Sanger技术的不足,对于复杂样本的分析,第三代测序技术应运而生。
本文将主要介绍基于第三代测序技术的微生物群落多样性分析。
第二节:微生物群落多样性分析微生物的多样性丰富且分布广泛,具有重要的生态和生物技术意义。
微生物群落多样性分析旨在研究不同微生物种类在不同环境下的存在情况以及相互关系。
该技术通常包括测定微生物样本中微生物数量的相对丰度、物种丰度和群落特征等多个方面。
微生物群落的多样性分析包括了基于Sanger测序和第三代测序技术的两个时期。
第三代测序技术由于其出色的测序产量和速度在微生物群落多样性分析方面的应用被广泛研究和应用。
第三节:微生物群落多样性分析技术比较基于第三代测序技术的微生物群落多样性分析方法包括宏基因组学分析和全基因组测序。
而与之不同的第二代测序技术主要使用16S rRNA基因序列或ITS序列进行分析。
具体地说,第二代测序技术需要将宏基因组或全基因组PCR扩增后的产物进行测序,研究宏基因组或全基因组各部分对应的序列,最后根据相对序列数量得出各物种丰度和群落特征。
而基于第三代测序技术的微生物群落多样性分析方法可以直接对宏基因组或全基因组进行测序,从而更为准确地确定各物种的丰度和群落特征。
第四节:微生物群落多样性分析技术优缺点分析与传统的第二代测序技术相比,基于第三代测序技术的微生物群落多样性分析方法具有更多的优点,例如快速的测序速度、更高的覆盖度和更高的准确性。
此外,通过第三代测序技术,还可以对微生物群落在个体和种群水平的差异进行深入研究。
尽管这种技术已经突破了一些技术上的局限,但第三代测序的成本以及分析与解释数据的复杂性仍需要进一步降低,以便更好地推广和应用。
基于高通量测序技术的水生环境微生物多样性研究
基于高通量测序技术的水生环境微生物多样性研究随着科学技术的不断进步,高通量测序技术在生物学领域的应用越来越广泛。
其中,应用于水生环境微生物多样性研究的高通量测序技术尤为重要。
本文将重点讨论基于高通量测序技术的水生环境微生物多样性研究的相关内容。
1. 研究背景水生环境是地球上最重要的生态系统之一,其中微生物是水生生态系统中最为丰富多样的生物群体。
水生环境微生物的多样性研究对于理解生态系统的结构和功能、生物地理学、气候变化等具有重要意义。
2. 高通量测序技术的原理高通量测序技术是一种快速、高效的DNA测序技术,其原理主要包括DNA样本的提取、文库构建、测序、数据分析等步骤。
目前较常用的高通量测序技术有 Illumina HiSeq X Ten、Ion Torrent PGM等。
这些技术拥有高通量、高准确性和较低的成本,逐渐取代了传统的Sanger测序方法。
3. 特点和优势基于高通量测序技术的水生环境微生物多样性研究具有以下特点和优势:(1) 高通量:高通量测序技术可以同时对大量的DNA样本进行测序,可以得到更为全面和准确的微生物多样性信息。
(2) 高准确性:高通量测序技术的测序错误率相对较低,能够提供更为精确的数据支持。
(3) 更广泛的应用:高通量测序技术不仅可以研究细菌和真菌等微生物的多样性,还可以分析病毒、原生动物等微生物组成。
(4) 数据信息量大:高通量测序技术可以产生大量的DNA序列数据,进一步促进微生物多样性的研究。
4. 应用案例(1) 水体环境微生物多样性研究:通过高通量测序技术,可以对水体中微生物的种类和数量进行更全面、准确的研究。
研究发现,不同季节和环境因素对水体微生物组成有着显著影响,从而有助于了解水体生态系统的演变和变化趋势。
(2) 水田土壤微生物多样性研究:通过高通量测序技术,可以揭示水田土壤中微生物的多样性及其对水稻生长、产量等的影响。
研究结果显示,水田土壤微生物的多样性与水稻生长状况和土壤肥力密切相关,为提高农作物产量和生态环境保护提供科学依据。
基于高通量测序技术的微生物群落多样性和组成分析
基于高通量测序技术的微生物群落多样性和组成分析高通量测序技术,也被称为Next-generation Sequencing,简称NGS,是一种基于多重并行测序的技术。
当今,NGS技术已经成为微生物群落多样性和组成分析的核心方法。
为了更好地理解NGS技术在微生物群落中的应用,本文将从微生物群落的定义入手,逐步介绍NGS技术并探讨其在微生物群落中的应用。
一、微生物群落的定义微生物群落是指生态系统中的一组微生物集合,包括细菌、真菌、病毒、古菌等,并与环境中其他生物和非生物因素相互作用。
微生物群落丰富多样,与宿主生物的代谢和生理过程直接相关。
微生物群落可被分为多个层级(如种、属、科等),每个层级包括多种微生物的成员,同时也存在竞争、合作和利用等多种关系。
二、NGS技术的介绍NGS技术是第三代测序技术的代表。
相对于第二代测序技术(Sanger测序技术)的单基因测序,NGS技术是一种基于并行测序的高通量测序技术,因其测序速度快、效率高,迅速被广泛应用于生命科学、医学、农业和环境等领域。
NGS技术的工作原理是:将DNA或RNA片段打断,加上指定引物扩增,并在大规模并行的反应中进行测序。
目前,NGS技术主要可以分为Illumina测序和Ion Torrent测序两种。
三、NGS技术在微生物群落中的应用NGS技术在生态学中的应用越来越广泛,其中在微生物群落多样性和组成分析方面得到了广泛的应用。
NGS技术在微生物群落分析中的优缺点如下:(1)优点高通量测序技术可以快速而准确地获取微生物群落的基因信息和代表性序列,尤其是对于那些难以被检测或难以被培养的微生物。
同时,NGS技术的高度并行性和灵活性可以在一个样本中同时检测多个微生物群落,有效提高了宏观微生物遗传学研究的效率和范围。
此外,NGS技术还可以识别微生物群落中的代谢和功能,这为微生物的分离和纯化提供了良好的材料基础。
(2)缺点与其他技术相比,NGS技术的成本更高,这也是目前阻碍其广泛应用的一个瓶颈。
基于高通量测序技术的微生物多样性及其应用
基于高通量测序技术的微生物多样性及其应用随着生物技术的发展,高通量测序技术(High-throughput sequencing technology,HTS)也逐渐成为了微生物多样性研究的主要手段之一。
利用HTS技术,我们可以快速、准确地获得不同生态系统中的微生物群落的基因组信息,并对微生物多样性进行深入研究。
本文将从HTS技术的基本原理出发,介绍其在微生物多样性研究中的应用及其在实际应用中的一些可能面临的问题。
一、 HTS技术的基本原理HTS技术是一种高效的DNA测序技术,通过将DNA片段斩断并随机连接到芯片上的DNA适配器中,使得大量DNA片段可以被高通量地并行测序。
这种技术可以用于测序单个DNA分子,实现单分子测序。
其中,目前最常用的技术包括Illumina、Roche/454、Ion Torrent和PacBio等。
而在微生物多样性分析中,较常用的是Illumina和Roche/454两种技术。
二、微生物多样性研究中的应用微生物群落是指生态系统中多种微生物种类和数量的总体,与生态系统健康、生态功能维持等密切相关。
而HTS技术具有灵敏度高、分辨率高、样本量大等特点,可以更好的检查分析生态系统微生物群落多样性,因此被广泛运用于微生物多样性研究。
1、微生物群落结构的分析遗传学分析可以通过对16S rRNA基因序列的测定来鉴定和区分细菌和古菌的存在和丰度。
这种分子操作方法可以提供群落中菌群的实际分类定序,而这种信息可用于鉴定与区分不同菌群,评估群落的复杂性及其动态变化,估算物种丰度等信息,以便分析和比较群落生态和功能的差异。
2、微生物与健康/疾病相关性的研究许多微生物均参与生物体的正常生理代谢和免疫系统的功能,与宿主的健康和疾病相关。
HTS技术可以用于检测和分析微生物群落的生态结构,如肠道菌群,它也已经被广泛应用于评估不同环境的微生物存在多样性及其对宿主健康的影响。
许多研究显示,肠道菌群的失衡和某些疾病的发生相关,比如自身免疫性疾病、溃疡性结肠炎和肥胖等。
基于测序的微生物多样性分析总结
基于测序的微生物多样性分析总结基于二代高通量测序的环境微生物多样性分析一般认为土壤、海洋、肠道等生态系统中的微生物数量繁多、种类多样。
传统的培养方法只限于对环境样品中极少部分(0.1%-1%)可培养的微生物类群的研究,而变性梯度凝胶电泳(DGGE)、克隆文库等常规的分子生物学方法也因操作复杂、成本高、痕量菌发现困难等因素无法达到深入分析环境微生物多样性的目的。
高通量测序技术的出现,极大的促进了对环境中不可培养微生物以及痕量菌的研究,为环境微生物多样性的研究开启了新的研究热潮。
微生物群落中物种的多样性依然是目前研究的重点。
对群落结构的研究,将有助于了解种群结构的稳定性,进而了解种群内物种间的相互依赖、相互制约的内在联系,为将来构建功能性种群服务。
鉴于微生物群落是一个多物种的集合体,其中高达95%以上的微生物物种无法分离也不能独立培养,拼装出每个独立个体的基因组现在也无法实现,细菌16S 或真菌ITS测序分析依然是现阶段微生物群落多样性和多态性分析的基石。
一、高通量测序背景介绍高通量测序技术,可以一次对几十万到几百万条DNA分子进行序列测定,使得对PCR扩增产物直接进行序列测定成为可能。
极大的促进了对环境中不可培养微生物以及痕量菌的研究,为环境微生物多样性的研究开启了新的研究热潮。
目前高通量测序的主要平台代表有Illumina公司的Solexa基因组分析仪(Illumina Genome Analyzer)、罗氏公司(Roche)的454测序仪(Roch GS FLX sequencer)和ABI的SOLiD测序仪(ABI SOLiD sequencer)。
微生物多样性分析中,以Illumina 及454测序平台应用最为广泛。
二、工作流程1 PCR引物的设计2 PCR扩增条件摸索3琼脂糖凝胶电泳检测结果4 全部样品进行PCR5 PCR产物的凝胶回收及检测6 PCR产物精确定量(Qubit 2.0 )将纯化后的PCR产物采用微量荧光核酸定量仪进行精确定量(精确到0.1ng/ul)7. 将定量后混匀的DNA样本再次进行磁珠法纯化后,进行高通量测序三、可分析项目1)有效序列数据统计在测序实验中,通常采用多个样品平行测序的方法,即多个样品混合测序。
2024年微生物总结资料范本(2篇)
2024年微生物总结资料范本2024年,微生物领域迎来了许多重要的突破和进展。
在这篇文章中,我将为您总结一些2024年微生物的关键资料。
一、新发现的微生物物种2024年,科学家们鉴定和发现了许多新的微生物物种。
这些微生物物种的发现不仅扩大了我们对微生物世界的认识,还为生物技术和医学领域提供了新的研究对象和潜在应用。
1.1 多种多样的细菌2024年,科学家们鉴定和描述了大量的新细菌物种。
例如,研究人员从深海中分离出了一种名为深海厌氧氨氧化菌的细菌。
这种细菌能够在缺氧的环境中将氨氧化成亚硝酸盐,从而在深海生态系统中发挥着重要的生物地球化学功能。
1.2 神秘的古菌在2024年,科学家们还发现了一些新的古菌物种。
古菌是一类与细菌和真核生物有着不同特征的微生物,其在极端环境中生存能力强大。
例如,一种新的古菌物种被发现在冰川中生存,这表明古菌在寒冷环境中的适应能力可能具有重要的生物技术应用潜力。
1.3 多样性的真菌此外,在2024年,也有许多新的真菌物种被鉴定和描述。
真菌是一类重要的微生物,既可以作为致病菌造成疾病,也可以作为产生有用化合物和酶的工具。
例如,科学家们发现一种新的真菌物种,能够分解难降解的有机废物,这为环境污染的治理提供了新的思路。
二、微生物与环境2024年,微生物研究的一个重要方向是微生物与环境之间的相互作用。
微生物存在于各种环境中,包括土壤、水体和空气中,以及各种生物体内。
了解微生物在不同环境中的功能和相互作用对于生态学和环境保护具有重要意义。
2.1 土壤微生物多样性土壤是一个复杂的生态系统,其中微生物起着关键作用。
2024年的研究表明,土壤中存在着丰富的微生物多样性,这些微生物种类繁多且功能多样。
例如,某些土壤微生物能够通过固定氮气来提供植物所需的氮素,这对于农业生产和可持续发展具有重要意义。
2.2 水体微生物群落此外,2024年的研究还表明,水体中的微生物群落对水环境的质量和稳定性起着重要作用。
微生物多样性(扩增子或16S rDNA测序)分析报告解析-α多样性分析
微生物多样性(扩增子/16S rDNA测序)分析报告内容解析——α多样性分析主要内容α多样性指数分析内容及意义1α多样性分析在论文中的描述201α多样性指数分析内容及意义a)群落生态学中研究微生物多样性,通过单样品的多样性分析(α[Alpha]多样性)可以反映微生物群落的丰度和多样性,包括一系列统计学分析指数估计环境群落的物种丰度和多样性。
b)α多样性指分析主要包括:①菌群丰度(Community richness)指数计算:Chao、Ace指数;②菌群多样性(Community diversity)指数计算:Shannon、Simpson指数。
——获得指数计算汇总表格。
c)α多样性可视化分析图(来源:指数分析汇总表):稀释性曲线(Rarefraction Curve);Shannon-Wiener曲线;Rank-Abundance曲线;Specaccum曲线02α多样性分析在论文中的描述a)稀释性曲线和Shannon-Wiener曲线结合使用:例如1:Shannon and Rarefaction analysis showed that,although new phylotypes can be obtained by additional sequencing,most of the gut microbial diversity in each sample was captured with the current sequencing depth.After rarefying the sequencing depth among all the samples using bootstrap (XX,XXX reads per sample),Shannon diversity index and rarefaction OTU estimates were calculated. There was no significant difference in the richness(as indicated by rarefaction OTU estimates)and diversity between Group A and Group B in this study.如有显著差异:while Group B significantly reduced both the richness and diversity of the microbiota(P<0.05OR Show in fig.)a)稀释性曲线和Shannon-Wiener曲线结合使用:例如2:The richness of oral bacterial communities in three oral habitats of periodontitis patients and the control cohort were estimated by rarefaction and Chao1,and diversity was estimated by Shannon diversity index and Simpson diversity.The shape of the rarefaction curves indicated new phylotypes would be expected with additional sequencing.However,the Shannon diversity index curves of all samples reached plateaus with the current sequencing,suggesting that most diversity had already been captured.b)Rank-abundance曲线:例如1:Rank-abundance curves reflect the fact that a few dominant phylotypes comprise the major proportion of the A communities whereas a more even community is seen in XXX.例如2:Bacterial communities were also similar in their structure, exhibiting comparable trends for both rank frequency and abundance across the soils sampledc)物种累积曲线:例如:According to the sample number and species OTUs,we calculated the species accumulation curve of all participants.In this study,the curve had reached a plateau,and the species had no more obvious increase as the sample number increased,which indicated that the sample volume in our study was relatively large enough to reflect the species richness.d)α多样性指数比较:例如:We compared theα-diversity of microbiota between XX and XX samples using the chao1,ACE,observed species,Shannon and Simpson index, and found that all five indexes showed significant difference(P=XXX,XXX, XXX,XXX,and XXX,respectively).The XXX samples had a significantly higherα-diversity.温馨提示:➢文章写作时,使用α多样性指数种类和方式,需根据文章表述需求进行选择,因此,α多样性指数的差异分析需根据提供的α多样指数汇总表自行完成。
微生物群落多样性测序与功能分析
微生物群落多样性测序与功能分析引言:微生物是指以细菌、真菌、原生动物和病毒为代表的微小生物体。
在全球范围内,微生物群落在地球生态系统中占据着举足轻重的地位。
对微生物群落多样性的研究可以深入了解微生物的种类、数量和相互作用,从而推动生物多样性保护、生态系统功能维持以及人类健康等方面的研究。
而微生物群落功能分析则能揭示微生物对环境的适应机制,以及其在生态系统中所扮演的重要角色。
一、微生物群落多样性测序技术微生物群落多样性测序技术是一种基于高通量测序平台的方法,通过从环境样品中提取微生物的DNA或RNA,并进行首段PCR扩增,得到从多个微生物样品中得到DNA或RNA片段文库。
随后,这些文库被测序,最终得到大量的序列数据。
常见的测序技术包括16SrRNA测序和宏基因组测序。
1.16SrRNA测序:16S rRNA是微生物细菌的共有基因,可以用来鉴定和分类微生物种群。
通过16S rRNA测序,可以获得微生物群落的结构信息,包括物种丰度和多样性。
这种测序技术通常使用Illumina MiSeq平台进行。
2.宏基因组测序:宏基因组测序是对整个微生物遗传物质进行测序,包括细菌、真菌、病毒等微生物。
宏基因组测序可以获取微生物群落的整体功能信息,如代谢途径、抗药性等。
这种测序技术常用的平台包括Illumina HiSeq和PacBio Sequel。
二、微生物群落功能分析1.通路预测:通路预测是基于宏基因组测序数据,通过比对已知代谢通路和功能基因数据库,推断微生物群落中微生物的代谢特点。
通路预测可以帮助我们了解微生物群落的能量代谢、有机物降解以及营养循环等功能。
2.基因注释:基因注释是根据微生物基因组测序的序列数据,通过比对到已知功能基因数据库,给出其功能注释。
基因注释可以帮助我们了解微生物群落中各个微生物的功能特点,如荧光蛋白基因、氮循环基因等。
三、微生物群落多样性与功能分析的应用1.生物多样性保护:2.生态系统功能维持:3.人类健康研究:微生物群落多样性与功能分析也对人类健康研究具有重要意义。
2024年微生物学重点总结(2篇)
2024年微生物学重点总结2024年是微生物学领域发展的重要年份,许多新的研究成果和突破性的发现在这一年中取得。
本文将重点总结2024年微生物学的几个关键领域,包括微生物多样性、微生物与人类健康、微生物与环境保护等。
一、微生物多样性微生物在地球上具有极为广泛的分布,其多样性对生态系统的稳定性和功能发挥着重要作用。
2024年的研究发现,微生物多样性受到人类活动的不断干扰和破坏,但也有一些积极的探索与保护行动。
1. 新微生物物种的发现:通过高通量测序技术和元基因组学的应用,2024年发现了大量的新微生物物种。
这些新物种的发现为我们深入了解微生物世界的多样性和功能提供了重要的资料。
2. 生态位和功能韧性:微生物在生态系统中具有不同的生态位和功能,这些特性对于生态系统的稳定性和恢复力至关重要。
2024年的研究发现,微生物群落具有较高的功能韧性,即使在环境变化和干扰下,仍能保持基本的生态功能。
3. 微生物共同体的动态演变:微生物共同体是由不同种类的微生物组成的复杂群体,其组成和结构随时间和环境的变化而发生动态演变。
2024年的研究揭示了微生物共同体与环境因子之间的相互作用关系,对于理解生态系统的稳定性和功能具有重要意义。
二、微生物与人类健康微生物与人类的关系密切,微生物在人体内起着重要的调节作用。
2024年的研究进展主要集中在以下几个方面:1. 人类微生物组计划:人类微生物组计划是一个全球性的研究项目,旨在深入了解人体内微生物群落的组成和功能。
2024年的研究结果为人类微生物组计划提供了丰富的数据和样本,进一步拓展了我们对人体微生物的认识。
2. 微生物与疾病:微生物在疾病的发生和发展中起着重要的作用。
2024年的研究发现,微生物与许多疾病,如肠道疾病、免疫性疾病、神经系统疾病等之间存在密切的关联。
这些研究结果为疾病的预防和治疗提供了新的思路和方法。
3. 微生物治疗:微生物治疗是一种通过调节人体内微生物群落来治疗疾病的新型治疗方法。
基于高通量测序的海州湾沉积物中微生物多样性分析
海州湾是位于江苏省连云港市沿岸的开放型浅海海湾,其底质类型丰富、入海河流众多、生物饵料丰富,是我国重要的渔场之一[1-2]。
然而,近年来由于资源保护不当、过度捕捞、环境污染等因素的影响,海州湾资源急剧衰退,影响了海州湾海洋生态系统的可持续健康发展[3]。
海洋微生物是海洋生态系统的重要组成部分,参与海洋生物地球化学循环过程,在海洋生态系统的功能中具有重要作用[4-5]。
相关研究表明,微生物群落特征的变化会影响海洋碳、氮和磷等营养物的化学循环及微生物的降解功能[6-8]。
沉积物在海洋生态系统中通常具有较高的微生物丰度和多样性,其中的微生物是调节各种生物元素转化和生物修复的生物地球化学过程的主要执行者[9-10]。
因此,对沉积物中微生物多样性的研究有助于了解海洋微生物群落的分布特征,维持海洋生态资源的可持续发展。
目前,对海州湾的研究主要集中在鱼类多样性、浮游动植物多样性和海洋环境研究等方面[1-3,11-16],对海州湾沉积物中微生物多样性的研究较少。
鉴于此,本研究以海州湾不同点位的沉积物样品为研究对象,利用Illumina MiSeq 高通量测序技术,对海州湾水域沉积物的微生物多样性进行了分析,以期为海州湾海域生态系统的健康发展提供科学依据。
1材料与方法1.1样品采集参照黄备等[17]的方法进行沉积物样品采集。
沉积物样品采集于江苏省连云港市海州湾,采样点布设如收稿日期:2023-08-03基金项目:国家虾蟹产业技术体系专项资金项目(CARS-48);江苏省农业公共服务补助专项(2022)。
作者简介:顾颖(1997—),硕士,主要从事水产养殖与水生生物病害防控研究。
E-mail:*****************。
*为通信作者,E-mail:*******************。
顾颖,伏光辉,王亚东,等.基于高通量测序的海州湾沉积物中微生物多样性分析[J ].南方农业,2024,18(3):1-5,26.基于高通量测序的海州湾沉积物中微生物多样性分析顾颖1,伏光辉1,王亚东2,叶仁智1,卢璐1,孙苗苗1*(1.连云港市海洋与渔业发展促进中心,江苏连云港222000;2.江苏海洋大学,江苏连云港222000)摘要为探究海州湾浅海域沉积物中微生物群落结构的组成及差异性,选取6个点位的沉积物样品,采用高通量测序技术对沉积物微生物群落结构的组成进行分析。
微生物群落多样性测序与功能分析(总结版)
微生物群落多样性测序与功能分析(总结版)微生物群落测序是指对微生物群体进行高通量测序,通过分析测序序列的构成分析特定环境中微生物群体的构成情况或基因的组成以及功能。
借助不同环境下微生物群落的构成差异分析我们可以分析微生物与环境因素或宿主之间的关系,寻找标志性菌群或特定功能的基因。
对微生物群落进行测序包括两类,一类是通过16s rDNA,18s rDNA,ITS区域进行扩增测序分析微生物的群体构成和多样性;还有一类是宏基因组测序,是不经过分离培养微生物,而对所有微生物DNA进行测序,从而分析微生物群落构成,基因构成,挖掘有应用价值的基因资源。
以16s rDNA扩增进行测序分析主要用于微生物群落多样性和构成的分析,目前的生物信息学分析也可以基于16s rDNA的测序对微生物群落的基因构成和代谢途径进行预测分析,大大拓展了我们对于环境微生物的微生态认知。
目前我们根据16s的测序数据可以将微生物群落分类到种(species)(一般只能对部分菌进行种的鉴定),甚至对亚种级别进行分析,几个概念:16S rDNA(或16S rRNA):16S rRNA 基因是编码原核生物核糖体小亚基的基因,长度约为1542bp,其分子大小适中,突变率小,是细菌系统分类学研究中最常用和最有用的标志。
16S rRNA基因序列包括9个可变区和10个保守区,保守区序列反映了物种间的亲缘关系,而可变区序列则能体现物种间的差异。
16S rRNA基因测序以细菌16S rRNA基因测序为主,核心是研究样品中的物种分类、物种丰度以及系统进化。
OTU:operational taxonomic units (OTUs)在微生物的免培养分析中经常用到,通过提取样品的总基因组DNA,利用16S rRNA或ITS的通用引物进行PCR 扩增,通过测序以后就可以分析样品中的微生物多样性,那怎么区分这些不同的序列呢,这个时候就需要引入operational taxonomic units,一般情况下,如果序列之间,比如不同的16S rRNA序列的相似性高于97%就可以把它定义为一个OTU,每个OTU对应于一个不同的16S rRNA序列,也就是每个OTU对应于一个不同的细菌(微生物)种。
高通量测序环境微生物群落多样性分析
高通量测序环境微生物群落多样性分析Coca-cola standardization office【ZZ5AB-ZZSYT-ZZ2C-ZZ682T-ZZT18】(5)高通量测序:环境微生物群落多样性分析微生物群落多样性的基本概念环境中微生物的群落结构及多样性和微生物的功能及代谢机理是微生物生态学的研究热点。
长期以来,由于受到技术限制,对微生物群落结构和多样性的认识还不全面,对微生物功能及代谢机理方面了解的也很少。
但随着高通量测序、基因芯片等新技术的不断更新,微生物分子生态学的研究方法和研究途径也在不断变化。
第二代高通量测序技术(尤其是Roche454高通量测序技术)的成熟和普及,使我们能够对环境微生物进行深度测序,灵敏地探测出环境微生物群落结构随外界环境的改变而发生的极其微弱的变化,对于我们研究微生物与环境的关系、环境治理和微生物资源的利用以及人类医疗健康有着重要的理论和现实意义。
在国内,微生物多样性的研究涉及农业、土壤、林业、海洋、矿井、人体医学等诸多领域。
以在医疗领域的应用为例,通过比较正常和疾病状态下或疾病不同进程中人体微生物群落的结构和功能变化,可以对正常人群与某些疾病患者体内的微生物群体多样性进行比较分析,研究获得人体微生物群落变化同疾病之间的关系;通过深度测序还可以快速地发现和检测常见病原及新发传染病病原微生物。
研究方法进展环境微生物多样性的研究方法很多,从国内外目前采用的方法来看大致上包括以下四类:传统的微生物平板纯培养方法、微平板分析方法、磷脂脂肪酸法以及分子生物学方法等等。
近几年,随着分子生物学的发展,尤其是高通量测序技术的研发及应用,为微生物分子生态学的研究策略注入了新的力量。
目前用于研究微生物多样性的分子生物学技术主要包括:DGGE/TGGE/TTGE、T-RFLP、SSCP、FISH、印记杂交、定量PCR、基因芯片等。
DGGE等分子指纹图谱技术,在其实验结果中往往只含有数十条条带,只能反映出样品中少数优势菌的信息;另一方面,由于分辨率的误差,部分电泳条带中可能包含不只一种16SrDNA序列,因此要获悉电泳图谱中具体的菌种信息,还需对每一条带构建克隆文库,并筛选克隆进行测序,此实验操作相对繁琐;此外,采用这种方法无法对样品中的微生物做到绝对定量。
基于新一代测序技术的微生物多样性分析
基于新一代测序技术的微生物多样性分析随着新一代测序技术的发展,微生物多样性分析已成为当今热门的研究领域之一。
这种技术能够快速、精准地分析出各种微生物的类型、数量、分布及其功能,从而窥探微生物在环境、人类健康等方面的作用。
本文将以基于新一代测序技术的微生物多样性分析为主题,探讨该技术应用的原理、发展以及前景。
一、新一代测序技术应用于微生物多样性分析的原理传统的微生物多样性分析方法主要是通过培养和分离微生物,然后进行形态学和生理学特征分析,从而确定微生物的种类和数量。
这种方法非常耗时、效率低、无法检测无法培养的微生物等不足之处。
而新一代测序技术不需要对微生物进行培养,而是直接对微生物DNA序列进行高通量测序,获取大量序列数据。
然后通过计算机软件处理这些序列数据,进行比对、聚类、分类和功能预测等操作,最终获得微生物的多样性信息。
具体来说,新一代测序技术主要包括Illumina、454、IonTorrent和PacBio等技术平台。
其中最常用的是Illumina技术平台,它采用二代测序技术,能够快速、准确地测序大量DNA序列。
在微生物多样性分析中,通过构建不同类型的文库(如16S rRNA、18S rRNA和ITS等),将微生物DNA片段进行扩增,然后将文库测序。
再通过不同的软件分析,如Qiime、Mothur、RDP和MG-RAST等,可以得到微生物的分类信息、群落结构、功能潜力等数据。
二、新一代测序技术应用于微生物多样性分析的发展自从新一代测序技术问世以来,微生物多样性分析得到了极大的提升。
与传统方法相比,新一代测序技术具有更高的灵敏度、精准度和可重复性,可以检测到更广泛的微生物种类,同时也能更好地描述微生物的群落结构和生态功能。
这种技术的出现已经彻底改变了微生物学的研究方法和技术手段。
在微生物多样性分析中,新一代测序技术已经被广泛应用。
它能够有效地应用于环境微生物多样性研究、人体微生物群落分析、动植物肠道微生物菌群分析、食品安全微生物检测等领域。
基于RNA测序的微生物多样性研究
基于RNA测序的微生物多样性研究随着科技的不断进步,人们对微生物多样性的研究也得到了很大的提高和拓展。
其中,RNA测序技术已经成为了当今微生物多样性研究中一种不可或缺的重要工具。
那么,什么是RNA测序技术呢?它是如何应用在微生物多样性研究中的呢?一、RNA测序技术RNA测序技术又叫做转录组测序,它是一种使用高通量测序技术对RNA进行定量的技术。
通过对RNA进行转录成cDNA,并且用高通量测序仪进行测序,在这个过程中可以获取RNA序列的信息,从而了解这些RNA分子的表达模式、相同和差异等。
RNA测序技术被广泛应用于基因表达谱的测定和对生物过程中基因的表达量进行定量。
二、RNA测序技术在微生物多样性研究中的应用RNA测序技术可以应用在微生物的多样性研究中,可以通过分析RNA序列信息,比较分析生物体不同基因在不同表达量下的各种变化,从而获取有关微生物多样性的重要信息。
1、微生物的分类鉴定微生物多样性研究是一个很大的领域,常见的分类工具的运用不仅针对基于优先顺序的纯培养方法,同时也需要基于多样性的生物学特性和RNA序列信息。
通过使用RNA分析仪,我们可以对微生物进行分类鉴定,进而了解其种类和数量。
RNA测序技术还可以通过对微生物RNA转录组的序列信息进行全球分析,在更深层次上帮助我们理解不同微生物的物种多样性和生态特性。
2、微生物的群落结构研究RNA测序可以帮助研究人员分析微生物群落的结构和功能。
通过收集微生物样本的RNA,可以获取微生物的转录组信息,并把数据与群落结构进行匹配。
通过生物信息学分析,可以了解微生物群落表达的特征和功能,从而更好地了解微生物群落的结构,并发现微生物的功能和影响因素。
3、微生物的生态适应性研究对于不同的微生物来说,它们的生存环境会受到各种因素的影响,例如温度、PH值等。
通过RNA测序技术,我们可以研究不同微生物在适应不同环境的过程中的表达模式,从而深入了解微生物的生态适应性,为人们提供更好地生态保护和环境治理提供更丰富、更全面的基础数据。
多样生物调研报告总结
多样生物调研报告总结多样生物调研报告总结本次调研主要以多样生物为研究对象,对其种类、分布、习性、保护等进行了详细的调查和分析。
通过此次调研,我们深入了解了多样生物的重要性与保护意义,拓宽了我们对生物多样性的认知,也为今后的环保工作提供了重要的参考依据。
报告中指出,多样生物指的是多种生物通过相互联系、互相依存的方式维持着一个复杂的生物系统。
它们之间存在着相互赖以生存的关系,相互依存,对生态系统的平衡和稳定起着重要的作用。
多样生物主要分为动物和植物两大类,每一类都具有广泛的种类和丰富的数量。
就物种多样性而言,地球上的物种数量极为庞大,其中脊椎动物种类最为丰富,约有6万多种。
每一种物种都有着自己独特的习性和适应能力,它们的存在与繁衍对整个生态系统都有着至关重要的作用。
此外,我们的调研还对多样生物的分布情况进行了调查。
据统计,不同地域的多样生物种类存在差异。
一些热带地区拥有着世界上最为丰富的物种资源,而北极圈附近的地区物种数量相对较少。
这些分布差异既与地球的气候和地理条件密切相关,也与人类的活动有着一定的关系。
同时,本次调研还关注了多样生物的习性和特点。
我们发现不同物种的习性差异巨大,有些动物适应于陆地生活,有些则适应于水生环境,还有一些物种可以在两种环境中自如切换。
不同物种为了适应特定的环境,演化出了各自独特的生存方式和行为习惯,这也是多样生物的一大特点。
在生物保护方面,我们也提出了许多有针对性的建议。
首先,我们应该加强对多样生物的保护意识,减少破坏和破坏物种栖息地的行为。
其次,政府应制定更为严格的法律法规,保护野生动植物的生存环境以及它们本身的生存权益。
此外,社会各界应积极参与到多样生物的保护中,共同营造一个良好的生态环境。
总之,此次调研报告详细介绍了多样生物的重要性和保护意义,展示了物种多样性、分布和习性的丰富性。
通过本次调研,我们深刻认识到多样生物对于地球生态系统的稳定和繁荣的重要作用,对生物多样性的保护提出了一些建设性的建议,希望能够引起人们的重视,共同保护我们的地球家园。
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基于二代高通量测序的环境微生物多样性分析一般认为土壤、海洋、肠道等生态系统中的微生物数量繁多、种类多样。
传统的培养方法只限于对环境样品中极少部分(0.1%-1%)可培养的微生物类群的研究,而变性梯度凝胶电泳(DGGE)、克隆文库等常规的分子生物学方法也因操作复杂、成本高、痕量菌发现困难等因素无法达到深入分析环境微生物多样性的目的。
高通量测序技术的出现,极大的促进了对环境中不可培养微生物以及痕量菌的研究,为环境微生物多样性的研究开启了新的研究热潮。
微生物群落中物种的多样性依然是目前研究的重点。
对群落结构的研究,将有助于了解种群结构的稳定性,进而了解种群内物种间的相互依赖、相互制约的内在联系,为将来构建功能性种群服务。
鉴于微生物群落是一个多物种的集合体,其中高达95%以上的微生物物种无法分离也不能独立培养,拼装出每个独立个体的基因组现在也无法实现,细菌16S 或真菌ITS测序分析依然是现阶段微生物群落多样性和多态性分析的基石。
一、高通量测序背景介绍高通量测序技术,可以一次对几十万到几百万条DNA分子进行序列测定,使得对PCR扩增产物直接进行序列测定成为可能。
极大的促进了对环境中不可培养微生物以及痕量菌的研究,为环境微生物多样性的研究开启了新的研究热潮。
目前高通量测序的主要平台代表有Illumina公司的Solexa基因组分析仪(Illumina Genome Analyzer)、罗氏公司(Roche)的454测序仪(Roch GS FLX sequencer)和ABI的SOLiD测序仪(ABI SOLiD sequencer)。
微生物多样性分析中,以Illumina 及454测序平台应用最为广泛。
二、工作流程1 PCR引物的设计2 PCR扩增条件摸索3琼脂糖凝胶电泳检测结果4 全部样品进行PCR5 PCR产物的凝胶回收及检测6 PCR产物精确定量(Qubit 2.0 )将纯化后的PCR产物采用微量荧光核酸定量仪进行精确定量(精确到0.1ng/ul)7. 将定量后混匀的DNA样本再次进行磁珠法纯化后,进行高通量测序三、可分析项目1) 有效序列数据统计在测序实验中,通常采用多个样品平行测序的方法,即多个样品混合测序。
为了能区分样品,各样品中的序列均引入了一段标示其样本来源信息的barcode标签序列。
若所测序列中不含有barcode 标签序列,则无法确定其样本来源,进而导致后续生物信息错误或意义不明。
因此,仅当原始序列中含有完整的barcode 标签序列时,该条序列才被认可为有效序列。
2)优化序列数据统计通常情况下,有效序列可以直接用于后续生物信息学分析。
在实验过程中,测序产物可能含有非特异性扩增片段,利用特异性引物信息可以将其去除;序列中可能含有模糊碱基(ambiguous)、单碱基高重复区(homologous )以,长度过短的序列(序列长度小于200bp),及PCR过程中产生的一些嵌合体,将这些序列纳入分析范围会降低分析质量,因此修剪、去除(trim)此部分序列,可得到供精准分析的优化序列。
在数据去除(trim)时,把maxambig=0,axhomop=8,maxlength=200,及其嵌合体序列去掉,并对数据进行统计,得到优化序列的百分率。
3) OTU生成根据序列的相似性,将序列归为多个OTU(操作分类单元),以便后续分析。
OTU (Operational Taxonomic Units)是在系统发生学研究或群体遗传学研究中,为了便于进行分析,人为给某一个分类单元(品系,种,属,分组等)设置的同一标志。
在生物信息分析中,一般来说,测序得到的每一条序列来自一个菌。
要了解一个样品测序结果中的菌种、菌属等数目信息,就需要对序列进行归类操作(cluster)。
通过归类操作,将序列按照彼此的相似性分归为许多小组,一个小组就是一个OTU。
根据客户指定的相似度(96%、97%或者98%),对所有序列进行OTU 划分并进行生物信息统计分析。
OTU 分析主要步骤(1) 提取非重复序列,碱基完全一致序列为重复序列;(2) 与silva 库中的aligned(16S/18S, SSU)核糖体序列比对;(3) Chimeric 序列检测与去除(4) 距离计算与OTU 聚类。
4) 多样性分析(Alpha-diversity)计算菌群丰度(Community richness)的指数有:(1)Chao:是用chao1 算法估计群落中含OTU 数目的指数,chao1 在生态学中常用来估计物种总数,由Chao (1984) 最早提出。
(2)Ace:用来估计群落中含有OTU 数目的指数,由Chao 提出,是生态学中估计物种总数的常用指数之一,与Chao I 的算法不同。
计算菌群多样性(Community diversity)的指数有:(1)Simpson:用来估算样品中微生物的多样性指数之一,由Edward Hugh Simpson (1949) 提出,在生态学中常用来定量的描述一个区域的生物多样性。
Simpson 指数值越大,说明群落多样性越低。
(2)Shannon:用来估算样品中微生物的多样性指数之一。
它与Simpson多样性指数均为常用的反映alpha多样性的指数。
Shannon值越大,说明群落多样性越高。
测序深度指数有:Coverage:是指各样品文库的覆盖率,其数值越高,则样本中序列没有被测出的概率越低。
该指数实际反映了本次测序结果是否代表样本的真实情况。
使用软件:mothur及BioLinker自编程序。
5) 稀释性曲线(Rarefaction curve)稀释性曲线:一般是从样本中随机抽取一定数量的个体,统计出这些个体所代表物种数目,并以个体数与物种数来构建曲线。
它可以用来比较测序数量不同的样本物种的丰富度,也可以用来说明样本的取样大小是否合理。
分析采用对优化序列进行随机抽样的方法,以抽到的序列数与它们所能代表OTU的数目构建稀释性曲线。
稀释性曲线图中,当曲线趋向平坦时,说明取样的数量合理,更多的取样只会产生少量新的OTU,反之则表明继续取样还可能产生较多新的OTU。
因此,通过作稀释性曲线,可以得出样品的取样深度情况。
稀释性曲线分析结果默认是在97%相似性水平下划分OUT并制作各样品的稀疏曲线。
6) 分类学分析(Taxonomy)在之前的分析步骤中,已经将序列按照其自身的碱基组成的相似性,分归到各OTU 中。
在进行分类学分析时,首先,将每一条优质序列都与SILV A(最新版)数据库进行比对,找出其最相近且可信度达80%以上的种属信息。
之后,将每一个OTU 中的所有序列进行类比,找出同一OTU 中的不同序列的最近祖先的种属信息。
最后,将得到的结果记录在表格文件中。
这样做,可以在保留最可能多的信息量的情况下,确保得出信息的准确性。
7) 样本间比较各样品群落结构分析柱状图或者饼状图在某一分类地位上根据各样品中的微生物组成绘制饼图或者柱状图。
8) 全样品相似度分析树状图比较多个样品中OTU组成的差异及各OTU中含有序列的丰度,计算这些样品的相似性,并绘制相似性图谱。
9) 样品OTU分布比较-VENN图统计多个样品中所共有的OTU 数目可以反映环境样品的相似性及重叠情况。
10) Heatmap热图分析Heatmap 可以用颜色变化来反映二维矩阵或表格中的数据信息,它可以直观地将数据值的大小以定义的颜色深浅表示出来。
常根据需要将数据进行聚类,将聚类后的数据表示在heatmap的相似性和差异性。
如在属水平上对样品和OTU 类型(样品所含菌属)进行聚类(依据是不同样品中各OTU 所含序列数越相近,即所含菌属数量越相近,样品间相似性越高),对聚类后各样品中不同OTU(不同菌属)所含序列的丰度作heatmap 图,能够反映出在菌属水平上各样品菌落结构的相似性和差异性。
将指定种属水平上的分类信息分别按照样品和分类进行聚类后作出Heatmap 图,能够反映出所有样品在各分类水平上表现的相似性或者差异性。
11) 组间显著性差异分析(metastats分析)分析多个样品时,如果这些样品分属于两个组,则可以进行Metastats分析。
该分析通过对比两组条件下的多个样品,找出两组中具有显著差异的微生物类型。
结果如下表所示:12) PCA分析(Principal Component Analysis)PCA 分析,即主成分分析,是一种对数据进行简化分析的技术,这种方法可以有效的找出数据中最“主要”的元素和结构,去除噪音和冗余,将原有的复杂数据降维,揭示隐藏在复杂数据背后的简单结构。
它的优点是简单,而且无参数限制,可以方便的应用于各个场合。
我们可以用PCA 来分析不同样品OTU组成的差异,通过方差分解,将多组数据的差异反映在二维坐标图上,坐标轴取能够最大反映方差值的两个特征值。
如样品组成越相似,反映在PCA图中的距离越近。
不同环境间的样品可能表现出分散分布。
PCA 分析可以用来反映不同样品中微生物群落组成的相似性以及影响微生物多样性的主要因素,一般情况下是用来对假设进行验证。
如PCA 可以用来做以下分析:确定环境中的样品是否具有显著不同的微生物群落。
将环境间的差异以图的形式表现出来等。
13) RDA分析利用冗余分析(RDA)可以反映在OTU的水平或者某生物学分类水平上各样品中菌群与环境因子之间关系。
14) UniFrac分析选取一个组的多个样品或者不同组的样品,进行Weighted unifrac PCoA分析或者unweighted unifrac PCoA分析,可以在OTU的水平上反映各样品间或者不同组间微生物群落结构的差异。
15) 进化树分析挑选各样品丰度≥0.1%的OUT的代表序列,构建系统发育树。
16) 微生物种类分级进化树分析以样本所得genus菌种信息为源数据,对其进行微生物的分级进化树分析,图中不同的颜色对应不同的样本,饼图的面积代表序列数目的多少,最后一个级别的饼图代表每个genus水平的序列数目,前一个级别饼图的大小为后面相应物种信息序列数目的汇总,所以级别越高,饼图的面积就会越大。