胶体金试纸加速老化试验原理及方案设计
实验四___胶体金试纸条检测技术剖析
负电荷，与蛋白质分子的正电荷基团藉静电 吸引而形成牢固结合。
胶 体 金 标 记 技 术 （ Immunogold labeling
technique）是以胶体金作为示踪标记物应
用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。
二、胶体金试纸条诊断技术的原理
以硝酸纤维素膜为载体，利用了微孔膜 的毛细血管作用，滴加在膜条一端的液体慢 慢向另一端渗移，通过抗原抗体结合，并利 用胶体金呈现颜色（红色）反应，检测抗原/ 抗体。
实验四
胶体金试纸条诊断技术
一、简
介
胶体金试纸条诊断是采用胶体金免疫层 析技术研制而成，该技术是90年代初在免疫 渗滤技术的基础上建立的一种简易快速的免 疫学检测技术，最先用于人绒毛膜促性腺激 素（ HCG）的测定和乙型肝炎病毒表面抗原 （HBsAg）等检测。
胶 体 金 （ Colloidal gold） 是 氯 金 酸
最常用的是双抗夹心法检测抗原
胶体金试纸条示意图
连接垫 （胶体金垫） 样品垫 质检线 吸收垫
背衬 （底板）
检测线
硝酸纤维素膜
测
定
测定时将试纸条下端浸入液体
标本中，下端吸水材料即吸取 液体向上端移动，流经C处时使 干片上的免疫金复合物复溶， 并带动其向膜条渗移。
测
定
若标本中有待测特异抗原，即
（HAuCl4）的水溶胶，氯金酸在还原剂的作 用下，聚合成特定大小的金颗粒，并由于静 电作用成为一种稳定的胶体状态。
胶体金的质量判定标准 质量好的胶体金：溶液呈红色，胶体金颗粒为球 形，大小均一，无棱角。 质量差的胶体金：溶液呈紫色，大小不一，形状 各异。
胶体金标记的原理：胶体金在碱性条件下带
病毒性疾病பைடு நூலகம்传染性法氏囊病、禽流感、
最新实验四 胶体金试纸条检测技术
H5ＡIV细胞 毒阳性结果 阴性对照
测定
过剩的免疫金复合物继续前行， 至 参 照 区 与 固 相 抗 小 鼠 IgG 结 合（免疫金复合物中的单克隆 抗 体 为 小 鼠 IgG）， 而 显 出 红 色质控线条（R）。
测定
阴性标本则无反应线条，而仅显示质控线条。
胶体金快速诊断技术的特点
简 捷 快 速 ： 操 作 简 单 ， 一 般 只 要 5 -10min 就会出结果，而其它方法如ELISA需要1-2h， PCR 需要时间更长。
➢最常用的是双抗夹心法检测抗原
胶体金试纸条示意图
样品垫
连接垫 （胶体金垫）
质检线
吸收垫
背衬 （底板）
检测线
硝酸纤维素膜
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
测定
测定时将试纸条下端浸入液体 标本中，下端吸水材料即吸取 液体向上端移动，流经C处时使 干片上的免疫金复合物复溶， 并带动其向膜条渗移。
测定
若 标 本 中 有 待 测 特 异 抗 原 ， 即 可与免疫金复合物中的抗体结 合，此抗原抗体复合物流至测 试区即被固相抗体捕获，在膜 上显出红色反应线条（T）。
胶体金标记技术（Immunogold labeling technique）是以胶体金作为示踪标记物应 用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。
二、胶体金试纸条诊断技术的原理
以硝酸纤维素膜为载体，利用了微孔膜的 毛细血管作用，滴加在膜条一端的液体慢慢 向另一端渗移，通过抗原抗体结合，并利用 胶体金呈现颜色（红色）反应，检测抗原/抗 体。
（HAuCl4）的水溶胶，氯金酸在还原剂的 作用下，聚合成特定大小的金颗粒，并由于
静电作用成为一种稳定的胶体状态。
➢胶体金的质量判定标准
免疫胶体金试纸条的开发及应用
（2）提取
----称取1.0±0.05g均质物，加入1ml去离子水，加入 100μl提取剂1，加入100μl提取剂2，再加入4ml乙腈，涡 动2min，再加入4g无水硫酸钠，立即拧紧盖子，倒置轻 轻敲打，上下振荡1min，3000g以上，室温离心5min；
免疫胶体金试纸条的 开发及应用
目录：
1. 免疫胶体金试纸条原理及开发流程 2. 免疫胶体金试纸条的应用 3. 胶体金读数仪的发展及应用
一、免疫胶体金试纸条原理及开发流程
• 简单/现场/快速
特点
1.打开包装取出试纸条
2.滴加样品
3.结果判读（3-10min）
1、试纸条结构图
样品垫
胶体金垫
控制线（C线）
二、免疫胶体金试纸条的应用
应用领域 • 人医方面
如早孕检测，急性心肌梗塞的诊断……
• 非法添加物检测
如尿液中“瘦肉精”检测……
• 抗生素残留检测：
如牛奶中β-内酰胺类药物检测……
• 毒素类检测
如饲料中黄曲霉毒素检测……
• 毒品检测
如吗啡、病毒等检测
1. 以尿液中检测莱克多巴胺残留为例
1) 尿液的收集
----取1ml上清液至10ml新聚苯乙烯离心管中，加入100μl 孔雀石绿氧化剂（现加现配）。涡动5s，于50~60℃水浴 氮气或空气流下吹干； ----加入0.5ml样品稀释液涡动溶解2min，取70l用于分析。
2) 检测步骤
（1）从原包装中取出试剂桶，打开后取出所需数目的微孔试剂和 试纸条，并做好标记。 （2）用微量移液器吸取70l待检水产样本溶液于微孔中，缓慢抽 吸且充分与微孔中试剂混匀。 （3）室温孵育5min后，将标记好的试纸条插入微孔中——印有 “MAX”线端朝下，使之充分浸入溶液中。 （4）室温孵育5-10min后，取出试纸条并根据示意图判定结果， 其他时间判定无效。
胶体金测验法原理及应用
胶体金测验法原理及应用胶体金测验法是一种分析技术，可以用于检测生物分子的存在。
该方法广泛应用于医学、生物化学、生物工程和生命科学等领域。
本文将介绍胶体金测验法的原理和应用。
胶体金测验法的原理：胶体金测验法是一种抗原-抗体反应，涉及到金纳米颗粒和抗体之间的相互作用。
抗体与特定的生物分子结合，因此可以用于检测免疫反应。
抗体也可以修改金纳米颗粒表面的性质，使其在特定的光照条件下发射色散光，从而产生颜色变化。
这种颜色变化可以通过视觉观察或仪器检测进行测量。
在胶态金试验中，金纳米颗粒被修饰成粉红色，这是因为它们的表面上带有羧基（羧酸结构）末端的甘油胺。
当与抗原结合时，它们的表面羧基减少，导致纳米颗粒聚集，并因散射金颜色变化而显现出来。
当抗体与抗原结合时，粉红色会变成暗紫色。
这是因为大量的金纳米颗粒被聚集在一起，形成聚集体，并散发出更强烈的光散射。
此时，光谱会在600nm左右出现新的峰值，并在520nm处消失。
这种光谱变化可以通过分光光度计或相关仪器进行测量。
胶态金试验中的羧酸和聚集体是测定抗原和抗体浓度的关键因素。
抗原和抗体在它们的适当浓度下，可以聚集成小聚集体，并形成蓝色溶液。
增加抗原的浓度，会导致聚集体的增加，使光谱中出现新的特征峰。
这种响应可以在适当的条件下使用光学技术进行定量分析。
胶态金试验的应用：由于胶态金试验具有高灵敏度、高选择性和易于操作等特点，因此被广泛应用于以下领域：1.生物学和医学胶态金试验可用于检测特定抗原或特定抗体的存在和水平变化，例如癌症生物标志物、丙型肝炎病毒和艾滋病病毒等。
它还可以用于诊断动物疾病、检测食品中的病原体、制药和生物分子的筛选等领域。
2.环境科学胶态金试验可以用于监测水和土壤中的有毒金属和污染物，例如重金属、有机化合物和细菌等。
它的高灵敏度和快速性使其成为检测水和土壤质量的良好工具。
3.纳米技术胶态金试验也可用于纳米颗粒的制备和表征，因为它可以测量纳米颗粒的聚集状态和光学特性。
验证方案(加速老化实验)
山东华普医疗科技有限公司加速老化试验版本/修改状态：生效日期：文件编号：发放号：控制状态：拟制：审核：批准：加速老化实验计划一、使用范围本公司生产的一次性使用无菌注射器，一次性使用无菌自毁式注射器，一次性使用无菌胰岛素注射器及其外包装。
二、过程要求1、微生物屏障2、无毒性3、物理特性的符合性4、化学特性的符合性5、生物特性的符合性三、预计完成时间：老化实验前全能性实验：2008年5月20日前包装验证实验：2008年5月22日前阻菌实验：2008年5月24日前老化实验时间：2008年5月26日前加速第一年验证无菌实验：2008年6月18日前全能性实验：2008年6月25日前包装验证实验：2008年6月25日前阻菌实验：2008年6月27日前加速第二年验证无菌实验：2008年7月1日前全能性实验：2008年7月8日前包装验证实验：2008年7月8日前阻菌实验：2008年7月10日前加速第三年验证无菌实验：2008年7月15日前全能性实验：2008年7月22日前包装验证实验：2008年7月22日前阻菌实验：2008年7月24日前加速第四年验证无菌实验：2008年7月29日前全能性实验：2008年8月6日前包装验证实验：2008年8月6日前阻菌实验：2008年8月8日前加速第五年验证无菌实验：2008年8月13日前全能性实验：2008年8月20日前包装验证实验：2008年8月20日前阻菌实验：2008年8月22日前目的：在有效期三年内和三年有效期外，通过对我公司产品检验实验，来验证我们的产品规定为三年的有效期是有科学依据的，可靠有效的。
加速老化试验(一)老化试验1.目的：通过老化试验以后对产品的外观、无菌、热原试验等全性能试验来证明本公司生产的产品规定为三年的有效期是有科学依据，可靠有效的。
2.范围：本公司生产的一次性使用无菌注射器带针，一次性使用无菌安全自毁式注射器，一次性使用无菌胰岛素注射器3.测试依据：按ISO11137-95和ISO11607-2003方法4.样品来源：成品留样产品（二）试验准备1.本次试验所需样品465只，从中随机抽取20只用于试验前的产品的全能性检验，抽取20 只做包装材料渗漏性试验，抽取10只做真空泄露性试验，抽取20只做爆破和蠕动性试验抽取10只做阻菌性试验（琼脂接触攻击性试验）。
胶体金试纸条原理
胶体金试纸条原理
胶体金试纸条是一种常用的快速检测方法，它的原理是基于胶体金颗粒的表面等离子体共振（SPR）现象。
胶体金试纸条通常由两部分组成：胶体金颗粒和检测区域。
胶体金颗粒具有特殊的物理性质，当受到特定物质的作用时，其表面等离子体共振会发生变化。
这种变化会导致颗粒的形状、颜色或聚集状态发生改变。
在使用胶体金试纸条进行检测时，样品溶液会被加到试纸条的检测区域上。
如果样品中含有需要检测的物质，这些物质会与胶体金颗粒产生特定的相互作用。
这种作用可以是物质与金颗粒表面的化学反应，也可以是物质与金颗粒之间的物理吸附。
当作用发生时，胶体金颗粒的表面等离子体共振发生改变，导致颗粒的形状、颜色或聚集状态发生变化。
这种变化可以通过肉眼观察或色谱仪等设备进行检测。
根据试纸条上颗粒的变化程度，可以判断样品中目标物质的浓度或存在与否。
需要注意的是，不同的胶体金试纸条适用于不同的检测目标物质。
因此，在选择试纸条时，需要根据具体的检测要求选择合适的试纸条。
此外，在进行胶体金试纸条检测时，正确的操作步骤和仪器校准也是保证检测准确性的重要因素。
胶体金试纸条检测技术42017
吸收垫
背衬 （底板）
检测线 硝酸纤维素膜
测定
测定时将试纸条下端浸 入液体标本中，下端吸 水材料即吸取液体向上 端移动，流经C处时使 干片上的免疫金复合物 复溶，并带动其向膜条 渗移。
测定
若标本中有待测特异抗 原，即可与免疫金复合 物中的抗体结合，此抗 原抗体复合物流至测试 区即被固相抗体捕获， 在膜上显出红色反应线 条（T）。
➢胶体金的质量判 ✓定质标量准好的胶体金：溶液呈红色，胶
体金颗粒为球形，大小均一，无棱 角。
✓质量差的胶体金：溶液呈紫色，大 小不一，形状各异。
胶体金标记的原理：胶体金在碱 性条件下带负电荷，与蛋白质分 子的正电荷基团藉静电吸引而形 成牢固结合。
胶 体 金 标 记 技 术 （ Immunogold labeling technique）是以胶体金作为示 踪标记物应用于抗原抗体反应的
二、胶体金试纸条诊断技术 的原理
以硝酸纤维素膜为载体，利用了微 孔膜的毛细血管作用，滴加在膜条一 端的液体慢慢向另一端渗移，通过抗 原抗体结合，并利用胶体金呈现颜色 （红色）反应，检测抗原/抗体。有 三种反应模式：夹心法，间接法，竞 争抑制法。
胶体金试纸条示意 图
样品垫
连接垫
（胶体金垫） 质检线
阴性对 照
H5ＡIV 细胞毒 阳性结 果 阴性对 照
快乐工作，快乐生活！ 感谢您的聆听！ ！
欢迎批评指导！！
2019
ppt资料
18
➢基础金核 ➢双离子 内层负离子（AuC12－） zeta电位 z排 体et斥 间a电， 的位以 溶可液维以中持外使胶层胶体离金体子的金层稳颗定粒H状+之分态间散。相在互胶
胶体金颗粒对蛋白质有
很强的吸附功能，而不被坏其 生物活性，可以与蛋白质等 （葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋 白）等非共价结合，形成胶体 金标记物。
胶体金试纸加速老化实验
胶体金试纸加速老化实验
为了解决保质期的问题，需要将试纸放置于高温环境下烘烤的加速老化试验。
大多数文献资料里面只有"37度2个月=常温下2年"，"45度一个月=常温下2年" 的一个概念描述，没有明确的技术资料，那么这个实验的原理是什么？实验应该如何设计？结果应该如何分析？
37度或45度老化试验的原理来源于阿伦尼乌斯公式（Arrhenius equation），由瑞典的阿伦尼乌斯所创立，表示化学反应速率常数( k )对温度( T )的依赖关系的经验公式。
Ea为表观活化能（约等于19.5 Kcal/mol），R为摩尔气体常量。
变化趋势为T增大，一般k也增大。
可以计算出对应的温度与老化天数关系。
提取常用的数值，25度下保存一年，相当于37度老化91天，相当于45度老化37天。
因此在实验设计中有两个因素需要考虑，1、时间；2、温度。
另外有条件的话可以在做25度之前先模拟货物运输过程中的温度，然后再进入25度常温存储。
即要先将试纸分别放入两个条件，这样更接近真实情况。
1、放入55度烘烤2天，模拟运输过程过热；
2、3次冷冻到复融的循环，模拟冷冻运输的状态。
测试结果分析的主要方法就是灵敏度曲线的绘制。
灵敏度曲线的变化规律应该是在刚开始加烘时灵敏度上升，主要原因是外界高温为免疫反应提供了更多活化能，导致反应更容易进行。
随着加烘时间的增长，抗原抗体开始老化，灵敏度回归到正常水平，然后一直维持该正常水平到老化期将结束时。
在接近保质期极限时，灵敏度曲线呈快速下降趋势，最终归到零点。
制作胶体金试纸的硝酸纤维素膜选择及应用技巧
制作胶体金试纸的硝酸纤维素膜选择及应用技巧请注明来自丁香园发布日期: 2007-01-28 16:16 : 丁香园- 免疫学技术讨论版关键词: 胶体金硝酸纤维素膜NC膜选择技巧前言硝酸纤维素膜又称为NC膜，在胶体金试纸中用做C/T线的承载体，同时也是免疫反应的发生处。
所以NC膜成为该试验中最重要的耗材，而由于其属于非标准器件，基本上每个项目开始阶段都会遇到如何选择合适的NC膜的问题。
同时也存在是否要对NC膜进行，期处理及如何处理的讨论。
一. NC膜的生产原理这个虽然看上去属于生产厂商的事情，但是GMP有个观点是强调对过程的控制才会有好的结果。
那么只有了解NC膜的大致生产过程和基本原理才能更好的掌握这种材料的特性，最终制作出满意的试纸.你了解吗？我找了很久，终于找到一些比较直观的图片，大家可以到伊能公司的官方看到.ealonmembrane./。
生产NC膜的过程和普通的造纸过程是非常类似的，我们可以借鉴对造纸的认识来理解。
首先，匀浆配比购买回的原料硝酸纤维素粒子是一种非常普遍的有机化学物，溶解形成混浆，在该浆体内，会加入一定比例的试剂来调整最后形成的膜的性质，一般是一个试剂配方，主要包含表面活性剂/高分子聚合物/盐离子/成型剂等溶解在一个缓冲体系内。
不同的厂家加入的溶液配方不一样，直接导致了在产品的差异。
其次，滚筒铺膜配好的匀浆通过滚筒，形成了一X薄膜，平摊在十分光滑的平面载体上。
这个和造纸的过程是非常相似的。
最后，成型在匀浆内的成型剂开始挥发，膜逐步干燥成型。
同时在这个过程中由于温度比较高，有些厂家在这个过程采取了在密闭腔体内成型，同时补充配方溶液的形式，来避免一些有效成分的蒸发。
切割出产品通过以上步骤生产出来的膜是呈一个宽度极大的产品，宽度的大小直接和滚筒的大小相关，滚筒越大生产越方便，但设备的成本也越高.宽膜要经过切割才能成为我们购买到的25mm或18mm（或20mm）宽，而长度上，成品卷膜和宽膜的长度是相同的.理论上可以让厂家切成你需要的任意宽度，但这样会造成原料的浪费和人力成本的增加，后来厂商在和试纸生产厂家的协调过程中，综合用料成本和生产便利性基本确定了上面说的宽度，以次为标准.关于不同宽度的用途差异，稍后详述。
胶体金试纸条原理
胶体金试纸条原理胶体金试纸条（Colloidal Gold Test Strip）是一种简单、快速、准确的免疫学检测方法，广泛应用于生物医学研究、医学诊断、环境监测、食品安全等领域。
本文主要介绍胶体金试纸条的原理、制备及应用。
一、原理胶体金试纸条原理是基于金纳米颗粒与抗原或抗体的特异性结合作用。
金纳米颗粒在特定条件下呈现紫红色，具有很强的表面等离子体共振吸收波长。
当金纳米颗粒与特异抗原或抗体结合时，其颜色由紫红色变为红色或蓝色，颜色的变化与特异性结合反应形成的复合物的形态、数量有关，可以通过肉眼直接观察到。
二、制备制备胶体金试纸条需要先制备金纳米颗粒溶液，然后将其涂在滤纸或其他纸张上，并固定相应的抗原或抗体作为检测指针。
具体步骤如下：1. 制备金纳米颗粒溶液制备金纳米颗粒溶液的方法有多种，其中较为简单的方法是还原法。
将1 mL的氯金酸钠（10 mM）加入50 mL的去离子水中，搅拌均匀。
将10 mL的氢氟酸（1 mM）加入到氯金酸钠溶液中，并在室温下搅拌1分钟。
加入150 µL的氢氨水（10 mM），搅拌后黄色溶液转变为红紫色，表示金纳米颗粒合成成功。
2. 准备检测纸条将金纳米颗粒溶液用滴管或其他方法均匀地涂在滤纸或其他纸张上，并干燥20分钟。
随后，用荧光素偶联抗体或其他特异性指示剂涂抹到纸条上作为检测指针。
三、应用胶体金试纸条可以用于检测各种生物分子，例如细菌、病毒、抗体、癌细胞、DNA、RNA等，以及药物和毒性物质。
其应用领域包括：1. 生物医学研究胶体金试纸条可以用于研究基因检测、蛋白质检测、药物筛选等领域。
2. 医学诊断胶体金试纸条可以用于一些快速筛查、诊断疾病的场合，比如检测患者的生物样本中是否有某种病原菌，或者病人是否感染某种病毒等。
3. 环境监测胶体金试纸条可以用于监测环境中的各种有害物质，如重金属、农药、酸雨等。
4. 食品安全胶体金试纸条可以检测食品中添加的国家规定禁止使用的物质，如兽药、农药等。
产品加速老化试验的原理
产品加速老化试验的原理引言：产品加速老化试验是一种常用的测试方法，用于模拟产品在长期使用过程中的老化情况。
通过加速老化试验，可以评估产品的可靠性、耐久性和寿命，为产品设计和改进提供重要参考。
本文将介绍产品加速老化试验的原理及其应用。
一、加速老化试验的目的加速老化试验的目的是通过模拟产品在实际使用中所受到的各种环境因素和应力，以加快产品老化的速度，从而在较短时间内获取产品在长期使用过程中的可靠性和寿命数据。
通过加速老化试验，可以发现产品的潜在问题和缺陷，并进行改进和优化，以提高产品的质量和可靠性。
二、加速老化试验的原理加速老化试验的原理基于两个基本假设：时间-温度等效原理和应力-寿命关系原理。
1. 时间-温度等效原理时间-温度等效原理是指在一定的温度条件下，物质的老化速度与温度成正比。
根据这个原理，可以通过提高试验温度来加快产品的老化速度，从而在较短时间内获取产品在长期使用过程中的老化情况。
2. 应力-寿命关系原理应力-寿命关系原理是指在一定的应力条件下，产品的寿命与应力成反比。
通过施加一定的应力（如机械应力、热应力等）来加速产品的老化过程，从而评估产品在实际使用中的可靠性和寿命。
三、加速老化试验的步骤加速老化试验通常包括以下几个步骤：1. 确定试验条件：根据产品的使用环境和要求，确定试验的温度、湿度、应力等条件。
2. 设计试验方案：根据产品的特点和要求，设计合理的试验方案，包括试验时间、试验样品数量等。
3. 准备试验样品：选择代表性的产品样品，并进行必要的预处理，如清洁、标记等。
4. 进行试验：按照试验方案，将试验样品放置在试验设备中，施加相应的温度、湿度和应力等条件，进行试验。
5. 监测和记录：在试验过程中，及时监测和记录样品的老化情况，包括外观变化、性能变化等。
6. 数据分析和评估：根据试验结果，进行数据分析和评估，评估产品的可靠性和寿命。
7. 结果总结和报告：根据试验结果，总结试验结果并撰写试验报告，提出改进和优化建议。
胶体金试纸的原理和应用
胶体金试纸的原理和应用1. 胶体金试纸的原理胶体金试纸是一种基于胶体金技术的快速检测方法。
其原理是利用胶体金颗粒在特定条件下的溶胀和聚集现象，通过观察颜色变化，来快速检测目标物质的存在与否。
1.1 胶体金的制备胶体金是由纳米级的金颗粒组成的溶液，制备过程如下： - 步骤1：首先将金盐溶解在水溶液中； - 步骤2：加入还原剂，如柠檬酸或硼氢化钠，使金离子还原成金原子； - 步骤3：调整溶液的pH值和离子浓度，控制金颗粒的形状和大小。
1.2 胶体金的表面性质胶体金颗粒具有特殊的表面性质，有以下特点： - 颗粒表面带有特定的电荷，可以吸附带有相反电荷的物质； - 表面的等离子共振吸收峰会因颗粒的大小、形状和环境的折射率而发生变化。
1.3 胶体金的聚集现象当胶体金颗粒受到某些特定物质的影响时，会发生溶胀和聚集现象，导致颜色的变化。
常见的聚集引发剂有： - 目标物质的抗原或抗体； - 有机分子，如DNA片段； - 金纳米颗粒的聚集剂。
2. 胶体金试纸的应用胶体金试纸在医学、环境监测、食品安全等领域有广泛的应用。
2.1 医学领域胶体金试纸在医学领域的应用主要体现在快速诊断和检测方面，包括： - 急性传染病的快速筛查，如流感、登革热； - 肿瘤标志物的检测，如乳腺癌、前列腺癌；- 生物标志物的快速检测，如血糖、尿酸。
2.2 环境监测胶体金试纸在环境监测中的应用主要包括： - 水质污染检测，如重金属离子、有机物污染物； - 大气污染检测，如VOCs（挥发性有机化合物）； - 土壤中有害物质的检测，如农药残留。
2.3 食品安全胶体金试纸在食品安全领域的应用主要涉及以下方面：- 农药残留的快速检测；- 食品中的有害菌的快速检测； - 食品中的添加剂的检测。
3. 胶体金试纸的优势和局限性胶体金试纸作为一种快速、便携、易于操作的检测方法，在许多领域具有广泛的应用前景。
然而，它也存在一些局限性： - 有些试剂的稳定性较差，可能会导致结果的误判； - 试纸的灵敏度相对较低，对于低浓度目标物质的检测可能不够准确；- 试纸的选择性有限，可能对多种物质具有交叉反应。
实验六胶体金免疫层析技术
简 介
胶体金（Colloidal gold）是氯金酸（HAuCl4）的水溶胶，利用HAuCl4在还原剂（柠檬酸钠）的作用下，聚合成特定大小的金颗粒，形成带负电的疏水胶溶液，由于静电作用成为一种稳定的胶体状态，故称胶体金。
胶体金的质量判定标准
简 介
质量好的胶体金：溶液呈红色，胶体金颗粒为球形，大小均一，无棱角。 质量差的胶体金：溶液呈紫色，大小不一，形状各异。
胶体金试纸条诊断技术
实验目的
掌握胶体金试纸条诊断技术的原理、使用方法及结果的判定
胶体金试纸条诊断是采用胶体金免疫层析技术研制而成，该技术是90年代初在免疫渗滤技术的基础上建立的一种简易快速的免疫学检测技术，最先用于人绒毛膜促性腺激素（HCG）的测定和乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）等检测。
过剩的免疫金复合物继续前行，至参照区与固相抗小鼠IgG结合（免疫金复合物中的单克隆抗体为小鼠IgG），而显出红色质控线条（R）。 测 定
阴性标本则无反应线条，而仅显示质控线条。 测 定
简捷快速：操作简单，一般只要5-10min 就会出结果，而其它方法如ELISA需要1-2h，PCR 需要时间更长。
结果易于判定：阴、阳性呈色很明显，肉眼很容易判断。
特异性好：因为该技术大多用单克隆抗体标记，这决定了它具有很好的特异性。
胶体金快速诊断技术的特点
病毒性疾病：传染性法氏囊病、禽流感、新城疫、犬细小病毒、猪瘟等。 寄生虫疾病：血吸虫病、旋毛虫病、囊虫病、恙虫病。 细菌性疾病：霍乱弧菌、类鼻疽。
胶体金快速诊断技术的应用
01
胶体金标记的原理：胶体金在碱性条件下带负电荷，与蛋白质分子的正电荷基团藉静电吸引而形成牢固结合。
02
胶体金标记技术（Immunogold labeling technique）是以胶体金作为示踪标记物应用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。
胶体金试纸法的原理应用
胶体金试纸法的原理应用1. 原理胶体金试纸法是一种常用的分析技术，其基本原理是利用胶体金颗粒在特定条件下与待检测物质发生反应产生可见的颜色变化。
胶体金是纳米级的金颗粒，具有较高的比表面积和活性。
在试纸中，胶体金颗粒呈现红棕色的溶液，并与特定的生物分子或化学物质发生相互作用。
当试纸与待检测物质接触时，若待检测物质存在，会发生特定的反应，导致胶体金颗粒的聚集或散射现象发生改变。
这种改变会引起可见的颜色变化，例如由红棕色变为红色或蓝色。
通过观察颜色变化的程度和时间，可以确定待检测物质的存在与浓度。
2. 应用胶体金试纸法的原理应用广泛，以下列举了一些常见的应用领域：2.1 医学诊断胶体金试纸法在医学诊断中得到广泛应用。
例如，在一些快速诊断试剂盒中，可以使用胶体金试纸法来检测特定的生物分子指标，如病原体的抗原或抗体，以帮助医生快速诊断疾病。
这种检测方法简单、迅速，可在短时间内提供初步诊断结果。
2.2 食品安全检测胶体金试纸法在食品安全检测中也有重要应用。
通过胶体金试纸法可以检测食品中的有害物质，如重金属离子、农药残留等。
这种检测方法灵敏度高、操作简便，适用于大规模的食品安全监测。
2.3 环境监测胶体金试纸法在环境监测中发挥着重要作用。
例如，可以使用胶体金试纸法来检测水中的特定污染物，如重金属离子、有机物污染物等。
这种检测方法可快速获得水质的初步评估结果，有助于保护和改善环境质量。
2.4 生物学研究胶体金试纸法在生物学研究中也得到广泛应用。
例如，可以使用胶体金试纸法来检测细胞中特定的生物分子，如蛋白质、核酸等。
这种检测方法可以帮助研究人员了解细胞内分子的表达和分布情况，从而深入探究生物学的相关问题。
3. 优点和局限性胶体金试纸法具有一些优点和局限性，具体如下：3.1 优点•简单易行：胶体金试纸法不需要复杂的仪器设备和样品处理步骤，操作简单易行，适用于非专业人员使用。
•快速结果：胶体金试纸法可以在很短的时间内提供初步的检测结果，有助于快速做出判断。
胶体金试纸加速老化试验原理及方案设计设计设计
胶体金试纸加速老化试验原理及方案设计点击次数：305 作者：Tombacon 发表于：2008-08-20 13:49 转载请注明来自丁香园来源：丁香园你制作的胶体金试纸保质期有多长， 1年， 2年? 难道我要将试纸放置两年以后才知道质量是否过关?为了解决保质期的问题，我们设计了将试纸放置于高温环境下烘烤的加速老化试验。
然而这个实验到目前为止都没有明确的技术资料，大多数文献资料里面只有 "37度2个月=常温下2年"， "45度一个月=常温下2年" 的一个概念描述，那么这个实验的原理是什么，是否真的如以上所说。
实验应该如何设计。
一系列的问题接踵而至。
一、原理37度或45度老化试验的原理是什么? --------阿伦尼乌斯公式；Arrhenius equation由瑞典的阿伦尼乌斯所创立，表示化学反应速率常数( k )对温度( T )的依赖关系的经验公式。
公式的演算和背景分析，请大家自己GOOGLE.公式如下:d(In k)/dT=Ea/RT2 (这个2, 是T的平方，论坛里不知道怎么搞上去)Ea为表观活化能，R为摩尔气体常量。
变化趋势为T增大，一般k也增大。
Ea 约等于19.5 Kcal/mol.于是计算出对应的温度与老化天数关系。
全部数值以一年稳定性情况对比。
温度/天85.2/1.280.2/1.874.9/2.770.1/4.065.0/6.060.1/9.355.1/14.650.1/23.045.0/37.540.1/64.437.0/91.030.1/193.025.1/343.722.1/494.820.1/616.715.1/1145.312.0/1688.4提取我们经常用的数值温度/天25.1/343.737.0/91.0也就是说25度下保存一年，相当于37度老化91天，相当于45度老化37天。
二、实验设计懂得了以上原理，那么实验设计就有了依据。
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胶体金试纸加速老化试验原理及方案设计
点击次数：305 作者：Tombacon 发表于：2008-08-20 13:49转载请注明来自丁香园
来源：丁香园
你制作的胶体金试纸保质期有多长， 1年， 2年? 难道我要将试纸放置两年以后才知道质量是否过关?
为了解决保质期的问题，我们设计了将试纸放置于高温环境下烘烤的加速老化试验。
然而这个实验到目前为止都没有明确的技术资料，大多数文献资料里面只有 "37度2个月=常温下2年"， "45度一个月=常温下2年" 的一个概念描述，那么这个实验的原理是什么，是否真的如以上所说。
实验应该如何设计。
一系列的问题接踵而至。
一、原理
37度或45度老化试验的原理是什么? --------阿伦尼乌斯公式；Arrhenius equation
由瑞典的阿伦尼乌斯所创立，表示化学反应速率常数( k )对温度( T )的依赖关系的经验公式。
公式的演算和背景分析，请大家自己GOOGLE.
公式如下:
d(In k)/dT=Ea/RT2 (这个2, 是T的平方，论坛里不知道怎么搞上去)
Ea为表观活化能，R为摩尔气体常量。
变化趋势为T增大，一般k也增大。
Ea 约等于19.5 Kcal/mol.
于是计算出对应的温度与老化天数关系。
全部数值以一年稳定性情况对比。
温度/天
85.2/1.2
80.2/1.8
74.9/2.7
70.1/4.0
65.0/6.0
60.1/9.3
55.1/14.6
50.1/23.0
45.0/37.5
40.1/64.4
37.0/91.0
30.1/193.0
25.1/343.7
22.1/494.8
20.1/616.7
15.1/1145.3
12.0/1688.4
提取我们经常用的数值温度/天
25.1/343.7
37.0/91.0
也就是说25度下保存一年，相当于37度老化91天，相当于45度老化37天。
二、实验设计
懂得了以上原理，那么实验设计就有了依据。
在该实验中有两个因素需要考虑， 1. 时间； 2. 温度。
那么如何将两个因素进行组合? (以下皆以效期两年为计算标准)
根据原理公式可知
1、 37度需要测试时间间隔为第7天，第14天，第28天，第56天，第77天，第6个月，第6个月
2、 45度需要测试的时间间隔为第7天，第14天，第21天，第28天，第35天，第42天，第56天，第77天，第3个月
3、常温的对照组为25度，第7天，第28天，第56天，以后每隔3个月做一次。
但是在这里要注意，在做25度之前要先模拟货物运输过程中的温度，然后再进入25度常温存储。
即要先将试纸分别放入两个条件，这样更接近真实情况。
1、放入55度烘烤2天。
模拟运输过程过热
2、 3次冷冻到复融的循环。
模拟冷冻运输的状态。
这样我们获得了四组平行条件，做老化时间与灵敏度变化关系的测试。
为了能与真实情况做出对比，同时更接近真实的老化情况，我们在做加速老化实验的同时，需要进行真实老化实验。
设计如下:
1、 2-8度情况下，需要测试的时间间隔为第6个月，第12个月，第15个月，第18个月，第2 1个月，第24个月，第27个月。
2、 30度左右。
需要测试的时间间隔与上同。
三、结果分析
测试结果分析的主要方法就是灵敏度曲线的绘制。
关于如何进行灵敏度判断，在此不再赘述，请参看我的另一篇文章:
胶体金免疫层析诊断试纸(lateral-flow)试验结果分析方法
/admin/article.do?action=Preview&id=8759
灵敏度曲线的变化规律应该是在刚开始加烘时灵敏度上升，主要原因是外界高温为免疫反应提供了更多活化能，导致反应更容易进行。
(原理可查生物物理化学书籍中对反应能的阐述)。
随着加烘时间的增长，抗原抗体开始老化，灵敏度回归到正常水平。
然后一直维持该正常水平到老化期将结束时。
在接近保质期极限时，灵敏度曲线呈快速下降趋势，最终归到零点。