室内质控标准操作规程

室内质控标准操作规程

1.目的

2.适用范围

3.职责

4.原理

5.所需设备和试剂

6.检测环境条件

7.步骤与方法

7.1人员的培训和职责

做好质控的关键在人员，通过培训，使其掌握质控的基础知识、一般方法，明确各自的职责。

7.2实验设备的维护及校准

仪器要求定期维护、校准；强检的仪器要定期送计量检定部门检定；非常检的设备可以自检，自检的方法采取比对试验，包括室间质控、生产厂家的定期校准。常用设备质量控制的质控标准、质控方法及质控频率见下表

设备的质量控制

设备质控标准质控方法质孔频率

冰箱温度范围：2～6℃在冰箱中放置一盛有水的容器，其水量与

所贮存的血液成分量相当，至恒温后测定1次/月

液体的温度

报警功能：高于6℃或低于用高于6℃或低于2℃的水浸泡警报器上的

2℃或切断电源应发出警报温差电偶，将会发出警报，切断电源时也1次/月

应发出警报

低温冰箱温度范围：低于-20℃在低温冰箱中放置一盛有40%异丙醇或酒精

的容器，其量与所贮存的血液成分量相当，1次/月

至恒温后测定液体的温度

报警功能：切断电源应发出警报切断电源时应发出警报

温度波动性：+0.5℃恒温后用计量检定合格的温度计，在同一1次/月

测试点分别测定0和15min时的温度

温度均匀性：+0.5℃恒温后用计量检定合格的温度计，在东、1次/月

南、西、北中位置均匀选取5点，测定温度

离心机离心时间：+10% 用标准计时器连续测量5次，每次测试20s 1次/季度

，取其平均值与离心机上的定时器比较

离心速度：+50转/分用标准转速仪，按说明书测定

7.3标本的控制

标本要求有唯一性标识。标本在采集、运送、交接、处理、贮存、销毁和记录等环节上都要控制，并有追溯性。

7.4试剂的质量控制

选用质量可靠、通过质量评价的试剂盒。日常工作应进行两个水平的质量控制。

7.4.1常规使用方法的每日质量控制，对每一新批次试剂要进行全面的质量控制，包括外观、标签、批号、有效期是否符合使用要求。

7.4.2对每日连续使用的试剂，工作前应做试验，保证试剂的有效性；非连续性使用的试剂，

每次使用前都要进行质量控制，并填写《常用试剂质控记录》。

（1）单克隆抗-A/B试剂和反定型试剂红细胞：通过不同批次试剂的相互对照检测来控制质量，操作步骤执行《试管法鉴定ABO和RhD血型标准操作规程》，抗体效价合格的抗体试剂其反应强度试管法应为4+，如出现任何弱反应，必须查找原因或停用该试剂。ABO和RhD定型试剂质量控制及最低标准分别见下表。

ABO和RhD定型试剂质量控制

检验项目质量要求质控频率

外观没有溶血、沉淀、颗粒或凝胶状物质每天

反应性和特异性没有免疫性溶血、红细胞缗钱状凝集。与含有相应抗原的每批使用前

红细胞反应结果明显，没有假阳性

效价室温时，未稀释的血清与含有相应抗原的红细胞反应凝集每批使用前

强度达“3+～4+”。与A1、A2、A2B细胞反应效价应符合

最低标准

亲和力抗体的亲和力是指在免疫反应中，抗体和抗原之间相作用每批使用前

的结合能力或强度。血清学中亲和力大小通常以出现凝集

的时间来评判。与A1、A2、A2B、R1r细胞反应亲和力应

符合最低标准

ABO和RhD定型试剂的最低标准

定型试剂试验细胞效价亲和力（s）抗-A A1 128 15

A2B 64 45 抗-B B 128 15

（R1r细胞是指基因型为CcDee的Rh阳性细胞）。

（2）单克隆抗-D试剂：须采用Dce/dce或Dce/dce细胞对照（阳性对照）和dCe/dce细胞（阴性对照）进行试验。具体操作执行《试管法鉴定ABO和RhD血型标准操作规程》。（3）抗球蛋白试剂微柱凝胶卡：选用IgG型抗-D致敏的红细胞做阳性对照，红细胞不规则抗体筛选阴性AB型血清做阴性对照，正常献血者O型红细胞做空白对照。具体执行《抗球蛋白试验标准操作规程》和《微柱凝胶试验标准操作规程》。多特异性抗球蛋白试剂质量控制的检验项目、质量要求及质控频率见下表。

多特异性抗球蛋白试剂质量控制

检验项目质量要求质控频率

外观没有沉淀、颗粒或凝胶状物质每天反应性和特异性无溶血活性；在交叉配血试验中，未致敏的红细胞与相容的血清充分每周反应，洗涤后加入抗球蛋白试剂不发生凝集

以不超过10ng/ml的抗-D试剂致敏D阳性红细胞，采用抗球蛋白法每周

能够检测出来

与以补体结合同种抗体致敏的红细胞的凝集强度较无致敏时高；或与每批使用前

以C3b和C3d致敏的红细胞发生凝集

（4）筛选红细胞和谱细胞：如果连续使用，用已知的弱抗血清检测（可先稀释已知特异性的单克隆抗体试剂），1周内观察抗原强度的降低情况，如果非连续使用，用已知的弱抗血清检测，同时对试验样品平行检测。Leb、P1和c抗原在贮存期间抗原性减弱仍可使用。具体执行《红细胞不规则抗体筛选及鉴定标准操作规程》。筛选红细胞及谱细胞质量控制见下表。

筛选红细胞及谱细胞质量控制

检验项目质量要求质控频率

外观上清液没有溶血或浑浊每天

反应性和特异性与针对已知红细胞抗原的抗血清反应清晰保质期内第1次使用及最后1次

使用时

（5）凝聚胺试剂：选用IgG型抗-D致敏的红细胞做阳性对照或试剂盒提供的阳性对照品与O型和RhD阳性献血者红细胞做阳性对照。具体执行《凝聚胺试验标准操作规整》。其中以低离子盐溶液质量控制为例，质量要求见下表。

低离子盐溶液质量控制

检验项目质量要求质控频率

外观肉眼观察没有混浊或颗粒每天

pH 6.7（范围6.5～7.0）缓冲盐：每批使用前；

非缓冲盐：每天导电性 3.7ms/cm(23℃)范围（3.44～3.75）每批使用前

7.5实验操作步骤的质量控制

有阴阳对照品设置的试剂或试剂盒，每次试验操作时必须同时进行阴阳对照试验及自身对照，试验操作步骤严格执行标准操作规程。

7.6室内质控试验结果记录到《输血科（血库）室内质控记录》。

7.7室内质量考核

质量管理人员定期将已知结果的血标本分成若干份，发给不知道血标本检测结果的技术人员进行检测，评定各自结果的可靠程度。

7.7.1定期在工作人员中分配相同的血标本，同步进行检测，比较他们检测的凝集程度（如用已知定型试剂测定相对应的红细胞抗原，定型试剂以选择出现“2+”凝集度为好）。

7.7.2定期或不定期重复熟练技师做过的试验，评价操作的可靠性。必要时，也可以把这些标本模拟为受检标本，插入常规标本之间进行检查。

7.7.3检测项目可参照室间质控的内容，也可根据科室情况自行安排。如：①ABO正反定型不一致血标本（如含抗-A1的A2型血标本）的检验；②免疫抗体（抗-D）致敏红细胞的DAT；③含有冷凝集素的血标本的血型鉴定与交叉配血试验。

7.8室内质控数据的管理

每月末应对当月所有的质控数据进行汇总和统计处理，并做本月室内质控评价。

7.9失控处理

遇到失控，应按失控原因分析步骤进行分析，并采取相应措施予以纠正，可采用如下步骤去寻找原因：