中国主要东方蜜蜂种群的遗传多样性分析
梵净山地区中华蜜蜂种群遗传分析
7
保护区内 Inside
12
27°50'46"N
8
保护区内 Inside
10
27°56'27"N
9
保护区内 Inside
13
27°56'27"N
10
保护区内 Inside
15
27°57'59"N
11
保护区内 Inside
5
27°49'58"N
12 保护区外 Outside
10
28°05'11"N
13 保护区外 Outside
纬度 Latitude
1
保护区内 Inside
10
27°54'54"N
2
保护区内 Inside
9
27°55'07"N
3
保护区内 Inside
4
27°55'56"N
4
保护区内 Inside
3
27°55'23"N
5
保护区内 Inside
2
27°55'03"N
6
保护区内 Inside
24
27°49'31"N
此,本研究利用15个微卫星分子遗传标记,分析保护区内外的中华蜜蜂的遗传结构,阐明梵净山地区 (涵盖保护区内外)中华蜜蜂的遗传多样性水平、有效种群大小和遗传分化情况,明确自然保护区在蜜 蜂遗传资源保护上的作用,为本土蜜蜂种质资源的保护开展提供重要依据。
1研究区概况与研究方法
1.1研究区概况
在保护区内共采集了 107群中华
贵州省东方蜜蜂微卫星DNA遗传分化与遗传多样性分析
福建农林大学学报(自然科学版)Journal of Fujian Agriculture and Forestr^^ University (Natural Science Edition)第46卷第3期 2017年5月贵州省东方蜜蜂微卫星DNA遗传分化与遗传多样性分析于瀛龙,周姝婧,徐新建,朱翔杰,杨凯杰,陈道印,周冰峰(福建农林大学蜂学学院,福建福州350002)摘要:利用31个微卫星位点对贵州全省的东方蜜蜂进行分析.结果表明:贵州省东方蜜蜂遗传分化系数(F s T)为0〜0.03,没 有发现贵州省东方蜜蜂发生遗传分化.贵州省东方蜜蜂微卫星平均期望杂合度为0.434 5±0.055 0,平均观察杂合度为 0.419 6±0.0114,平均等位基因数为5.56±4.34,平均有效等位基因数为2.693 0±2.113 5,平均香农指数为0.873 5±0.797 1.贵州省东方蜜蜂微卫星遗传多样性高于全国东方蜜蜂的平均水平.本文研究结果对了解我国东方蜜蜂遗传结构、遗传分化 和遗传多样性水平具有重要的价值,对指导贵州省东方蜜蜂遗传资源保护与利用提供理论依据.关键词:东方蜜蜂;遗传分化;遗传多样性;微卫星DNA中图分类号:文献标识码: A 文章编号:1671-5470(2017)03-0323-06D0I:10.13323/ki.j.fafu(nat.sci.).2017.03.015Genetic diversity and genetic differentiation of Apis cerana inGuizhou Province of southwest ChinaY U Y i n g l o n g,Z H O U S h u ji n g,X U X i n j i a n,Z H U X i a n g j i e,Y A N G K a i c h i e h,C H E N D a o y i n,Z H O U B in g fe n g (College of Bee Science,Fujian Agriculture and Forestry University,Fuzhou,Fujian 350002,China)Abstract:Honeybees were analyzed using 31 microsatellite loci to assess the differentiation and diversity levels throughout Guizhou Province. Our data showed that Guizhou eastern honeybees have little divergence between honeybee sampling localities because F s t value is from 0 to 0.03. Our data showed that Guizhou eastern honeybees have a higher level of genetic diversity than honeybee else-■w here in China due to high value of expected heterozygosity (0.434 5±0.055 0),observed heterozygosity (0.419 6±0.011 4),num-ber of alleles (5.56±4.34),number of effective alleles (2.693 0±2.113 5) and Shannon index (0.873 5±0.797 1). This study is of great value to understand the genetic structure,genetic differentiation,and genetic diversity,and to provide theoretical basis for the protection and utilization of eastern honeybee in Guizhou.Key words:Apis cerana;genetic differentiation ;genetic diversity ;microsatellite DNA遗传多样性是衡量物种适应外界环境变化能力的重要指标,能够反映物种的进化潜力,同时也是遗传 资源领域开展遗传育种的重要基础[|].遗传分化是种群遗传研究的重要部分,其核心内容是种群的划分和 种群的分化规律[2].贵州地处中国西南的云贵高原东部,气候温暖湿润,属亚热带湿润季风气候区,自东向 西呈现海拔逐渐升高的丘陵地势,森林覆盖面积大,全省东方蜜蜂分布广,种群数量多,是我国重要的东方 蜜蜂主产区.研究者对贵州省东方蜜蜂的形态指标进行了分析.与重庆、广西东方蜜蜂相比,贵州省东方蜜蜂存在 特有的形态特征,说明贵州省东方蜜蜂在遗传资源上的特殊性[M].不同研究在对贵州省内东方蜜蜂的遗传分化结果上存在差异.杨冠煌[3]通过12个形态标记比较平均值,将贵州东部东方蜜蜂划分为华中生态型,贵州西部划分为云贵高原生态型;徐祖荫等[4,5]利用7个形态标记的平均值将贵州省东方蜜蜂划分为 山地生态型与云贵高原生态型,以织金一册亨、赫章一盘县为界限分别分布在东西两侧;《中国畜禽遗传 资源志•蜜蜂志》将贵州省东方蜜蜂划分为云贵高原中蜂和华中中蜂,其中华中中蜂分布于贵州省东部和东北部,云贵高原中蜂分布于贵州省西部[6];胳群等[7]利用32个形态标记进行更为客观的多元统计分收稿日期:2017-02-28 修回日期:2017-03-21基金项目:现代农业蜂产业技术体系建设专项资金(CAKS-45-K X J11).作者简介:于瀛龙(1989-),男,博士研究生.研究方向:蜜蜂种群遗传学.Em ail:yuyillglollg2012@.通讯作者周冰峰(1958-),男,教授,博士生导师.研究方向:蜜蜂生态学和蜜蜂种群遗传学.Email:biiigfeiigfz@.• 324•福建农林大学学报(自然科学版)第46卷析,未发现贵州省东方蜜蜂发生形态分化.微卫星分子标记属于共显性遗传,遵循孟德尔遗传规律,多态信息含量高,检测遗传分化较为灵敏,能 够用来解决形态标记等连续型数量标记无法解决的遗传多样性研究[8].已有研究利用3~21个微卫星标记分析了海南[9,1Q]、浙江大门岛[11]、泰国南部、北部、泰国苏梅岛东方蜜蜂的遗传分化[12],从分子水平描述了长白山[13]、黄土高原[14]、云南东方蜜蜂的遗传多样性水平[15].对于贵州省东方蜜蜂的微卫星标记分析尚无报道.本研究利用31个微卫星位点对贵州全省的东方蜜蜂进行遗传分化与遗传多样性分析,为该地东方蜜蜂遗传资源提供基础数据,为东方蜜蜂的保护与利用提供依据.1材料与方法1.1材料根据贵州省的地形、地貌、以及东方蜜蜂的分布特点,本研究共采集9个样点的东方蜜蜂样本(图1),每个样点样本量在31 ~ 65群(表1),每个样点选取当地半野生状态的蜂群,以避免外来引种、商业买卖对样本的影响.1.2方法采用E z u p柱式基因组D N A抽提试剂盒[生工生物工程(上海)股份有限公司]提取基因组.采用ExTaq Hot Start Version多重扩增试剂盒[宝生物工程(大连)有限公司]和Toptaq多重扩增试剂盒[北京全式金生物技术有限公司]对31个微卫星位点进行多重P C R扩增[16,17](表2) .ExTaq Hot Start Version多重扩增试剂盒的位点扩增程序为:95 °C预变性15 m i n、95 °C变性30 s、58 °C退火40 s、72 °C延伸40 s、循环次数30 ;72 °C延伸10 min.Toptaq扩增试剂盒的扩增程序为:94 C预变性15 m i n、94 C变性30 s、58 C退火30 s、72 C延伸40 s、循环次数30;72C延伸10 min.微卫星扩增产物送至苏州金唯智生物技术公司,利用ABI 3730x1自动测序仪(美国A B I)进行毛细管电泳,电泳内标选择GeneScan™LIZ®[500],利用GeneMapper 4.0软件分析获得毛细管电泳图谱.表1贵州省东方蜜蜂样本信息Table1Information of sample locations from Guizhou样点代码样本量/群讳度N经度E海拔/m贵州锦屏GZJP6326°38.086'109°16.450,383贵州铜仁GZTR6127056.319,108°36.932,980贵州正安GZZA4228°42.054'107°28.128,593贵州桴焉GZFY3128°36.384,107°15.856,1268贵州赤水GZCS6028°21.934^106°00.537,842贵州贵阳GZGY5726°50.443,106°59.366,1 304贵州大方GZDF5627°01.175,105°39.976,1 385贵州盘县GZPX4325°32.403,104°32.245,1653贵州兴仁GZXR6525°26.341,105°12.512,1 3541.3统计方法利用Mstools软件计算期望杂合度(H e)、观察杂合度(H o)、等位基因数(N a),利用Popgene 1.31软件计算有效等位基因数(N e)与香农指数(/)总计5个微卫星遗传多样性参数[18].利用GenAlEx 6.5软件进行主坐标分析(P C o A),检测遗传分化情况[19];Genepop on W e b在线软件分析样点间的F ST值;通过F ST与基因流N m之间的公式F S T= 1/( 1+4N m),计算基因流N m[20];利用Structure 2.3.4 软件检测遗传分化情况[21],Markov chain Monte Carlo iterations设置为 100000,burn-in设置为 10000, 利用clumpp 1.1.2和distruct 1.1对结果进行输出.为验证贵州省内部样本是否存在遗传分化,在各个分析第3期 于瀛龙等:贵州省东方蜜蜂微卫星DNA遗传分化与遗传多样性分析 .325 •中加入明显存在地理隔离的辽宁宽甸、海南那大样点[9,22]作为外群分析.表2微卫星位点信息”Table2Microsatellite loci used in this study微卫星位点染色体位置上游、下游引物序列扩增试剂盒扩张片段/b p Ac-2/5,-CGTCACTACCCCTCGTCCTCG-3,ExTaq118〜1605,-GAAGACAGAGTGAAAACGGCA-3,ExTaq152〜178 Ac-5/5,-TGGCCGAAGAACGGTGTTACG-3,5,-GAAAGAAAGAGTCGGTGGTGT-3,ExTaq128〜152 Ac-26/5,-AACCTTCTTCGCCACCTCCAA-3,5,-GTCTGAACGAAAGAAAGAGCA-3,ExTaq177〜221A P085125,-GATCAAACACACAAACGAAAGC-3,5,-ACCGGAAGCCTAATCAAGG-3,ToPtaq83~100 K1458145,-ACCTCGATCCGTTCACACC-3,5,-AGCTACGGGTGCTTTGTTCTC-3,AT16595,-GCGACCACGTT^r AACAGGAC-3,ToPtaq241〜2685,-ACCAGTGAATTTGTTCATCGC-3,LN117135,-TATCATACGCGCTTGATCCC-3,ToPtaq119〜1395,-ATCCGGAGGGCCTGTGAC-3,ExTaq91~112 AP20845,-GGCTTGTAAATTCGTGGAGG-3,5,-CGAAACGGAAACTAGGCCT-3,SV039155,-TTCCGCGGAAGATCTTCG-3,ExTaq106〜1615,-AAGAGACGCGCGAACGTC-3,ExTaq64 ~90 B1314125,-GTATACAGAAACGCGACCAGG-3,5,-GGATCAT^rTCTCCATCGAGG-3,K071575,-ACAGAAGCTCGAACACGATACC-3,ExTaq278〜3075,-AGTGGTCGATAACGCCGAG-3,ExTaq157〜165 SV22035,-TTTCTCGCGTAGAATGTAGAATAGG-3,5,-AAGGAT^r TGCCTGCTACATGAC-3,AP24315,-AATGTCCGCGAGCATCTG-3,ToPtaq232〜2915,-TGT^r TACGAGAATTCGACGGG-3rAP06635,-TTGCAT^rCGGTCTCCAGC-3,ToPtaq81〜1025,-ACT^rGCCGCGGTATCTGA-3,SV06685,-TTGCGCTAATGACTCGCG-3,ToPtaq178〜1875,-CGT^rTCCAAATGTGGTAAGTGGT-3,ToPtaq226〜249 AP14875,-GGAGCGAGGTGAACGACAC-3,5,-GCCGGTAATTTCCAACCG-3,AP04295,-CGGATTAGGTTAGGTCGCG-3,ToPtaq137〜1505,-GGCATACGTCCAACCCTGT-3rToPtaq177〜194 AT109115,-CGCGTTGCCAGACGTG-3,5,-CGCAACCATCAAGAT^r CATC-3,ExTaq142〜163 B121615,-TATCGTGATGGCGGATGC-3,5,-TCCAATGATTATTTGGGCTCTC-3,SV26135,-ATCGTGTCCGACCAGTTCC-3,ExTaq105〜1155,-GCTAAATAGCTTGAT^r GCTCTCCT-3,ExTaq184〜202 AT18535,-CGCAGTGGAAATCATGGACG-3,5,-CGGATAACCAGGGTTATGTAACG-3,ExTaq100〜160 AC01195,-CTTACGCCAATCTCTCCACG-3,5,-CGGTTAATTTCGTTTCTCGC-3,ToPtaq142〜160 AT10345,-CCTCCAATCGGCTAAACTCG-3,5,-GCAGTCAGCGATCTCCAAGG-3,ToPtaq110〜142 AP189105,-TCCCACCT^r CACCCTATCG-3,5,-GCT^rCTTTCCTTCTCGAGTCTC-3,ToPtaq195〜213 B122535,-GGTGCTTCACGCTTCTCGTAC-3,5,-CGT^rTCGGTGCGTATGT^r〇-3,•326•福建农林大学学报(自然科学版)第46卷续表2微卫星位点染色体位置上游、下游引物序列扩增试剂盒扩张片段/b pUN 270l 45 ^ -GGAAAGCACAAACGATCGTG -3 ^ 5 ^ -CTCGAGCGTGCTTTGATGTAG -3 ^Toptaq l l 6~l 27UN 244T l 65 ^ -AAACTATTGCACTCGACATCGAA -3 ^ 5、TCTCAGCATGCTTTGATAATGCT -3'Toptaq l 82~2l lAP 3l 345 ^ -TAGCGCCCTAACGTCCAAC -3 ^ 5^-CCCTTCTACCACCGACGC -3^Toptaq 327 ~ 373Ac-l /5 ^ -GCTACACTACCGCGACCTGCA -3 ^ 5^-TACGCTCCGTTAGTCCCGCTG -3^Toptaq l 88~2l 6Ac -35/5 ^ -TTCCAGCAGGAAGTGACGGTG -3 ^ 5 ^ -CGGGAAACTCGTCATTTTCGA -3 ^Toptaq l l 6~l 56AT 00465^-TTCCACGGATGCACGGAC -3 ^5 ^ -TCCTTGCCCGCACAATCG -3 ^Toptaql 39~l 72U /表示没有报道染色体的位置.2结果与分析2.1贵州省东方蜜蜂遗传分化通过Structure 分析、主坐标分析和遗传分化系数、基因流的分析等4种方法,没有发现贵州省东方蜜 蜂发生遗传分化,全省9个样点的东方蜜蜂属于同一种群.(l)Structure 分析:Structure 分析中,贵州样点与两个外群明显分化为3个不同的种群.贵州、辽宁、海南的样点分别显示为3种不同的颜色,其中贵州9个样点均为紫红色,辽宁样点为蓝色,海南样点为绿色(图2).并且不同色块颜色完整,说明分别为独立的3个种群.LNKD HNND GZJP GZTR GZZA GZFY GZCS GZPX GZDF GZXRGZGYLN KD 为辽宁宽甸样点、HNND 为海南那大样点、贵州9个样点均为紫红色.图2贵州各样点Structure 结果图Fig .2 Structure analyses of sample locations from Guizhou(2) 主坐标分析:主坐标分析中,贵州样点在散点图中分布集中,为同一种群.两个外群分别在 主坐标l 和主坐标2上,与外群明显分离(图3).(3)遗传分化系和基因流分析:贵州样点间的 遗传分化系数小,基因流数值较大.贵州省9个样 点间的遗传分化系数为〇~ 〇.〇3,与两个外群的F S T 值均大于0.08.贵州省内部的基因流N m 范围在8.43 ~ 57.89 之间,与外群的基因流数值均小于2.97(表3).2.2贵州省东方蜜蜂遗传多样性州■,敲▲♦LNKD HNNDGZ主坐标1LN KD 为辽宁宽甸样点,HNND 为海南那大样点,G Z 为贵州各样点. 图3贵州各样点主坐标分析图(P C o A )Fig . 3 Principal coordinate analyses of sample locations from Guizhou贵州各个样点的遗传多样性水平较一致,平均期望杂合度为0.434 5±0.055 0,平均观察杂合度为0.419 6±0.0ll 4,平均等位基因数为5.56±4.34,平均有效等位基因数为2.693 0±2.ll 3 5,平均香农指数为0.873 5±0.797 1 (表4).遗传多样性最低的样点为贵州正安,其在期望杂合度、观察杂合度、有效等位基因数、香农指数上均表现最低.3讨论(l )本研究通过微卫星中性分子遗传标记没有发现贵州省东方蜜蜂发生种群遗传分化.主要原因可能是蜜蜂分布连续,基因交流没有阻碍.贵州各样点间遗传分化系数为0~0.03,按照Wright 标准[23]属于无 遗传分化的水平.基因流为8.43 ~57.89,参照西方蜜蜂和东方蜜蜂上的研究,基因交流频繁[24].贵州省东方第3期于瀛龙等:贵州省东方蜜蜂微卫星DNA遗传分化与遗传多样性分析• 327•蜜蜂在全省范围的69个市县均有分布[25],蜂群总数量约为14万群[26],东方蜜蜂在贵州省境内能够连续 并且以大种群的形式分布,境内没有明显的隔离屏障,样点之间不存在基因流的阻碍,所以没有发现种群 遗传分化.表3贵州各样点间遗传分化系数^^和基因流N m”Table3F S T and Nm between sample locations from Guizhou样点LNKD UNND GZJP GZTR GZZA GZFY GZCS GZPX GZDF GZXR GZGY LNKD0.820.981.070.990.841.000.920.970.981.03 UNND0.232.462.352.322.472.622.952.212.972.24 GZJP0.200.0934.0020.7612.4442.8537.0619.7554.1040.73 GZTR0.190.100.0119.598.4322.4823.3320.7626.3534.96 GZZA0.200.100.010.019.3721.8715.7816.9918.4115.67 GZFY0.230.090.020.030.0315.888.7812.3812.0013.95 GZCS0.200.090.010.010.010.0230.2422.9028.1633.08 GZPX0.210.080.010.010.020.030.0121.3057.8929.16 GZDF0.210.100.010.010.010.020.010.0122.4844.39 GZXR0.200.080.000.010.010.020.010.000.0142.85 GZGY0.190.100.010.010.020.020.010.010.010.01U左下角为遗传分化系数F ST,右上角为基因流W m.表4贵州省各样点遗传多样性参数Table4 Genetic diversity parameters of sample locations from Guizhou样点期望杂合度lie观察杂合度l o等位基因数Na有效等位基因数Ne香农指数IGZJP0.4399±0.055 10.4335±0.010 36.08±4.982.7133±2.085 40.893 1±0.807 3GZTR0.4314±0.055 80.4268±0.010 6 5.89±4.462.7088±2.347 90.8470±0.814 5GZZA0.4249±0.054 30.4095±0.012 35.05±3.912.475 1± 1.75320.8266±0.759 5GZFY0.4439±0.056 90.4284±0.014 6 5.03±3.692.6956± 1.92430.8694±0.797 9GZCS0.4410±0.054 40.4161±0.010 5 5.70±4.302.7963±2.198 10.9127±0.796 9GZPX0.4310±0.056 20.4174±0.012 6 5.44±4.422.7799±2.361 50.8825±0.818 9GZDF0.4256±0.053 90.4123±0.010 85.53±4.112.6004± 1.93150.8593±0.780 4GZXR0.4338±0.054 00.4189±0.010 0 5.63±4.622.7623±2.279 10.8948±0.807 2GZGY0.4386±0.054 20.413 1±0.010 65.68±4.572.7054±2.140 70.8762±0.791 5(2) 根据现有的文献分析,贵州省东方蜜蜂遗传多样性高于全国平均水平.主要原因可能是东方蜜在云贵高原东部分布时间长,环境资源丰富,东方蜜蜂种群数量大.与全国其它地区相同微卫星位点的遗传多样性相比,贵州省东方蜜蜂的遗传多样性水平处于较高水平,仅略低于华东地区.与海南[9]同类研究 中相同的7个微卫星比较,贵州省样本的期望杂合度为0.648 3,高于海南的0.614 6,与云南[|5]、华东[27]同类研究中相同的4个微卫星比较,贵州省样本期望杂合度为0.813 9,高于云南的0.785 6,略低于华东的 0.8570,与长白山[|3]同类研究中相同的1个微卫星比较,贵州省样本期望杂合度为0.8280,高于长白山的 0.142 7.另外,通过与我们在全国31个微卫星数据比较(未发表),贵州省东方蜜蜂的遗传多样性水平在期望杂合度、观察杂合度和等位基因数上高于全国的平均水平,显示了丰富的遗传多样性水平.分布贵州省各个地区的样点基因交流顺畅,基因流N m为8.43〜57.89,并且贵州省东方蜜蜂蜂群数量较大,占全国东方蜜蜂群数10%左右,整个贵州省的东方蜜蜂属于同一个大种群.(3) 贵州省正安县东方蜜蜂活框饲养技术推广早,人工育王较普遍.人工育王常因母群选择的片面少量蜂群中移虫,使蜜蜂遗传多样性丧失.微卫星数据中贵州正安在S V039、B I314、A C011位点上多样性低于其余8个样点,在这3个位点上,以1~2种等位基因为主,所占比例为0.93、0.68和0.69,极可能是不 当的育王活动造成了这3个位点的等位基因受到了人为选择.致谢:本研究样本的获得过程中得到了贵州省农业厅、贵州省养蜂学会徐祖荫和樊芸的协助.本科生夏凤 枝参与本研究样本采集工作,硕士生郭慧萍、郝璐楠、本科生王恒、夏凤枝参与部分实验工作.• 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江苏环太湖地区中华蜜蜂遗传资源调查报告
30APICULTURE OF CHINA江苏环太湖地区中华蜜蜂遗传资源调查报告徐浩1 柯亚露2 王伟2 黄峰2 王康1 陈恒1 刘一冰1 蔺哲广1 吉挺1│文1扬州大学动物科学与技术学院,225009;2苏州市吴中区农业农村局,215100中华蜜蜂(Apis cerana cerana )简称中蜂,作为东方蜜蜂(Apis cerana )的指名亚种,广泛分布于除新疆以外的全国各地,特别是南方的丘陵和山区[1]。
中蜂是我国特有的主要作物授粉昆虫,其与意大利蜜蜂相比,嗅觉敏锐、抗螨能力强、对零星分散及低温高空蜜粉源的采集能力强,并且具有抗寒、耐热等较强的抗逆境能力[2, 3]。
蜜蜂遗传资源作为养蜂的分子基础,中蜂资源评价与保护研究对维持我国生态系统平衡起着关键作用[4],对保持生物多样性具有重要的意义。
环太湖地区是我国植被最为丰富的地区之一,农业经济作物种类多,但种植相对分散,充分发掘和保护现有中华蜜蜂种质资源对促进当地植物多样性、提高农作物产量与质量具有重要作用。
一、环太湖地理位置与自然环境概况环太湖地区流域位于中国东南沿海、长三角中部地区,介于东经119°8'~121°23',北纬30°15'~32°4'之间,包括江苏省苏州市、无锡市、常州市及浙江省嘉兴市、湖州市共5个地市级单元。
环太湖5市将太湖环抱于中央,辖区面积约27569km 2,占整个长三角地区的25.29%[5]。
环太湖地区地势平坦、水网密布,间有丘陵,丘陵海拔都不高,山峦起伏小,一般高100~200m,对调节环太湖地区的气候、水土保持起到了重要作用。
这里属亚热带湿润性季风海洋性气候,四季分明,气候温和,雨量充沛,年降水量在1000mm以上,集中在4~9月,入夏时的黄梅雨降雨量达200mm左右[6]。
湿润温和的气候适合各类植物生长,同时也为授粉昆虫提供了良好的栖息地,野生中蜂资源也相对丰富。
皖南中华蜜蜂种群数量动态及群体多样性研究的开题报告
皖南中华蜜蜂种群数量动态及群体多样性研究的开题报告一、研究背景和意义中华蜜蜂(Apis cerana cerana)是中国华南地区常见的野生蜜蜂,也是我国传统的蜜蜂品种。
与其他品种蜜蜂相比,中华蜜蜂有着优良的适应性和生存能力,在花粉采集、蜜源利用、抵御疾病和天敌方面都具有较好的表现。
中华蜜蜂也是当地的重要经济昆虫,它的蜜、蜡、良蜂等都是农产品的重要组成部分,对促进当地农民的收益和经济发展有重要的作用。
然而,近年来,由于人类活动的不断干扰和威胁,中华蜜蜂的物种数量和种群密度都面临较大的压力。
比如,随着城市的扩张和农田的开垦,中华蜜蜂的生境得到了破坏和改变,无法提供其正常的生存和繁殖条件。
此外,人工养蜂和生态问题也对中华蜜蜂的数量和种群多样性产生了一定的影响。
因此,对于中华蜜蜂种群数量动态及群体多样性的研究,除了有助于了解其种群变化趋势、危机和恢复状况,更能为其保护和生态修复提供理论和实践的指导。
二、研究内容和方法1.研究内容:(1)中华蜜蜂种群数量动态:主要分析分析皖南地区中华蜜蜂的数量、分布、季节变化和空间分布规律。
(2)中华蜜蜂群体多样性:主要通过分析皖南地区中华蜜蜂的群体组成、遗传多样性和生态多样性,了解其遗传背景、繁殖状况和生态特征。
2.研究方法:(1)野外调查法:通过采用实地调查方法,以样地法、定位法、统计法等为基础,测定中华蜜蜂的群体数量、种群密度、分布状态和季节变化状况等。
(2)组织样品分析法:采集中华蜜蜂的蜜、蜡、良蜂等组织样品,通过分子生物学技术检验其遗传多样性,探索中华蜜蜂的遗传背景和血缘关系。
(3)生态信息采集法:通过对中华蜜蜂的栖息环境、生境和食物等生态信息的收集和分析,了解中华蜜蜂的生态特征和群体多样性。
三、研究预期结果和意义分析本研究将通过对皖南地区中华蜜蜂数量、多样性、变化趋势和生态特征等进行系统、深入的研究,预期可以获得以下成果:(1)获取中华蜜蜂的种群数量、密度和分布状况。
211142717_基于线粒体DNA_tRNAleu-COII_序列分析阿坝中蜂遗传多样性
基于线粒体DNA tRNAleu-COII序列分析阿坝中蜂遗传多样性王遂林1, 2 赖康2 任明显3 舒长斌2 水碧波1 黄枳腱2 李为常4 黄伦5 王斌2 杨明显6(1 马尔康市农业畜牧局,马尔康 624000;2 四川省畜牧总站,成都 610041;3 青川县农业农村局,青川 628100;4 四川省农业科学院蚕业研究所,南充 637000;5 甘孜州蜂业管理站,康定 626000;6 四川农业大学动物科技学院,成都 611130)摘要:为了解阿坝中蜂遗传多样性,对21个样点的347群阿坝中蜂样本进行线粒体DNA tRNA leu-COII序列扩增、测序,获得347条长度为335bp多序列片段包括36bp的非编码序列和299bp的COII基因编码序列,两个序列A+T碱基含量分别是99.8%、84.6%,分析出14个碱基变异位点,占总测定位点4.18%;划分出18个单倍型(Hap_1~Hap_18),单倍型Hap_1在所有样点均有分布且数量最多,有231个样本,达到总样本的66.6%。
总体单倍型多样度为0.536,核苷酸多样度为0.00200,平均核苷酸差异数0.666,汶川县威州镇万村样本单倍体多样度最低,黑水县芦花镇昌德村样本单倍体多样度最高;单倍型系统发育树构建显示18个单倍型聚为2个大类群,不存在单独聚类一起单倍型;说明阿坝中蜂种群内部存在不同程度分化,研究结果可为阿坝中蜂遗传多样性研究、保护与利用提供一定的理论基础。
关键词:阿坝中蜂;线粒体DNA;tRNA leu-COII;遗传多样性Genetic diversity analysis of Apis cerana abanisis based on mitochondrialDNA tRNA leu-COII sequenceWang Suilin1, 2, Lai Kang2, Ren Mingxian3, Shu Changbin2, Shui Bibo1, Huang Zhijian2, Li Weichang4, Huang Lun5,Wang Bin2, Y ang Mingxian6(1 Maerkang City Bureau of Agriculture and Animal Husbandry, Maerkang 624000, China; 2 Animal Husbandry Station of Sichuan, Chengdu 610041, China; 3 Qingchuan County Agriculture and Rural Bureau, Qingchuan 628100, China; 4 Sericultural Reserarch Institute, Nanchong 637000, China; 5 Beekeeping Management Station of Ganzi State, Kangding 626000, China; 6 College of Animal Science and Technology, Sichuan Agricultural University, Chengdu 611130, China) Abstract: In order to understand the genetic diversity of Apis cerana abanisis, The mtDNA tRNA leu-COII sequence of 347 groups of Apis cerana abanisis in Aba Prefecture from 21 sample sites was amplified and sequenced, and 347 multi-sequence fragments with a length of 335bp were obtained, including 36bp non-coding sequence and 299bp COII gene coding sequence.The content of A+T bases in the two sequences was 99.8% and 84.6% respectively, and 14 base variation sites were analyzed, accounting for 4.18% of the total location points. 18 haplotypes (Hap_1~Hap_18) were analyzed. The Hap_1 distributed in all sample points and has the largest number. There are 231 samples, accounting for 66.6% of the total samples. The overall haplotype diversity is 0.536, the nucleotide diversity is 0.00200, and the average nucleotide difference is 0.666. The haplotype diversity of the sample from Wancun Village, Weizhou Town, Wenchuan County is the lowest, and the haplotype diversity of the sample from Changde Village, Luhua Town, Heishui County is the highest. The construction of haplotype phylogenetic tree基金项目:四川省“十四五”农作物及畜禽育种攻关项目(2021YFYZ004);财政部和农业农村部:国家现代农业产业技术体系项目(CARS-44-SYZ16);四川特色经作创新团队项目(SCCXTD-2021-12)作者简介:王遂林(1987-),男,硕士,畜牧师,主要从事蜂业技术研究和推广工作,E-mail:****************通讯作者:杨明显(1981-),博士,副教授,主要从事蜜蜂生物学研究,E-mail:*****************.cn理县等地21个样点的347群阿坝中蜂,用99.5%无水酒精浸泡,-80℃超低温保存。
云南六个东方蜜蜂群体主要形态指标比较分析
云南六个东方蜜蜂群体主要形态指标比较分析刘建;吉挺;殷玲;刘敏;余林生【摘要】[目的]本实验选取云南6个东方蜜蜂群体工蜂进行形态指标比较分析,以研究其形态指标的差异显著性及相关性.[方法]分别对所选样本的吻长、右前翅长与宽、翅面积、肘脉指数、第3与4背板总长等指标进行测定,并对所得数据进行统计分析.[结果]6个东方蜜蜂群体之间在形态指标上存在显著或极显著差异(P<0.05或P<0.01),云南东方蜜蜂形态指标存在丰富的遗传多样性.[结论]通过对形态指标相关性分析表明6个东方蜜蜂种群的翅长、翅宽、翅面积与第3、4背板总长均有极显著相关(P<0.01).【期刊名称】《中国蜂业》【年(卷),期】2010(061)001【总页数】3页(P8-10)【关键词】东方蜜蜂;形态指标;遗传多样性【作者】刘建;吉挺;殷玲;刘敏;余林生【作者单位】安徽农业大学动物科学与技术学院,合肥,230036;扬州大学动物科学与技术学院,扬州,225009;扬州大学动物科学与技术学院,扬州,225009;扬州大学动物科学与技术学院,扬州,225009;安徽农业大学动物科学与技术学院,合肥,230036【正文语种】中文【中图分类】S891.2云南气候条件独特,自然地理环境复杂多样。
其独特的气候和地理环境,为动植物提供了良好的、多形态的环境基础,致使云南几乎集中了从热带、亚热带至温带甚至寒带的所有动植物品种。
生态资源的多样性也为我国的原产蜂种——东方蜜蜂提供了丰富的栖息环境,形成独特适应性的个性特点[1]。
因此研究云南的东方蜜蜂形态多样性具有重要意义。
本实验分别选取迪庆、昆明、西双版纳等6个地点的东方蜜蜂形态作为研究对象,这6个采集地分别位于云南各个不同的气候区域——具有显著热带气候特点的西双版纳,暖温带气候的昆明,高原季风气候的迪庆,海拔较高的无量山等,以探索不同气候,不同海拔的中华蜜蜂形态特征,为研究环境对东方蜜蜂的形态特征影响及东方蜜蜂的环境适应性提供基础。
海南中华蜜蜂线粒体DNA的遗传多样性
海南 中华蜜蜂线粒体 D A的遗传 多样性 N
周姝 婧 徐 新建 朱翔 杰 高 景林 周 冰峰 , , , ,
(. 1福建农林大学蜂 学学院, 福建 福州 300 ;. 50 22 中国热带农业
科 学院环 境与 植物保 护研 究所 , 南 儋 州 5 13 ) 海 777
Z O h qn U X nj n , H i g i , A ig1 Z O igf g H U S u ig ,X i-a Z U X a - e G O J .n , H U Bn . n i n j n i e
( . o ee f e cec , ui g cl r n oet nvrt, uhu F j 5 0 2 C ia 2 E v om n d 1 C l g eS i e F j A r u uea dF rsyU ie i F zo , ui 3 00 , hn ; . ni n e t l oB n n a i t r sy n a r n a Pat rt t nIstt, h eeA ae yo rpcl gi t a Sine , azo ,H i n5 13 , h a l o co t e C i s cd m f oia A r u u l ecs D nhu a a 77 7 C i ) n P e i ni u n T c r l c n n
摘要 : 采用线粒体 D AtN  ̄ C I片段的序列分析方法 , N A .Ol R 对海南 l 个样点 的 75 中华蜜蜂 (p e n rn) 6 1群 A caacaa 进行遗 r e 传多样性研究 , 明确 了海南 中华蜜蜂线粒体 D A tN l-OI N A* C I片段序列的遗传多样性及单倍型的分布特点. R 结果共发现 4 8 种单倍型 , 其中新发现 4 种单倍 型. 3 共检测到 3 个变异位点 , 8 包括 1 个单一多态位 点 、 个 简约信息 位点、 个插 入位点 2 2 3 1 和 3个缺失位点. 海南 中华蜜蜂单倍 型 多样度 为 0 72±00 7 平均 核苷 酸差 异数 为 12 8 核苷 酸多 样度 为 00 34± .4 .1 , .4 , .05 00 0 3 这表 明海南 中华蜜蜂线粒体 D A tN I. OI . 1, 0 N A ̄ C I 片段具有 丰富遗传 多样性 . R 海南中华蜜蜂普遍在 17位点发生 G 1 —
青海东方蜜蜂贵德种群的遗传分化地位
青海东方蜜蜂贵德种群的遗传分化地位赵芳;陈振华;李文靖;张同作;皮立;林恭华【摘要】对青海东方蜜蜂贵德种群(QHGD)进行全基因组测序,并结合现有其他地区东方蜜蜂的分子序列信息,分析QHGD种群的遗传分化地位.测序、组装和比对后得到Cytb、tRNAIle~ND2、16S rRNA、EF1-α、COI~COII序列对应的比对文件.单倍型分析显示,QHGD种群的Cytb、EF1-α、COI~COII序列与国内其他种群有重叠,但tR-NAIle~ND2、16S rRNA序列则形成特有的单倍型.基于tRNAIle~ND2、16S rRNA、EF1-α合并序列的Network分析显示,QHGD种群与四川九寨(SCJZ)、四川马尔康(SCMEK)等地方种群成辐射状与一个median vector节点(mv1)连接.本研究的结果表明,青海贵德种群是较为独特的一个进化分支单元,需要在未来的保护和开发利用过程中予以关注.【期刊名称】《中国蜂业》【年(卷),期】2016(067)005【总页数】4页(P19-22)【关键词】东方蜜蜂;贵德种群;遗传分化;基因组【作者】赵芳;陈振华;李文靖;张同作;皮立;林恭华【作者单位】中国科学院西北高原生物研究所,西宁810001;青海中科蜜蜂研究院,西宁810001;青海中科蜜蜂研究院,西宁810001;青海青藏华峰中蜂蜂业有限公司,贵德811700;中国科学院西北高原生物研究所,西宁810001;青海中科蜜蜂研究院,西宁810001;中国科学院西北高原生物研究所,西宁810001;中国科学院西北高原生物研究所,西宁810001;中国科学院西北高原生物研究所,西宁810001;青海中科蜜蜂研究院,西宁810001【正文语种】中文青海东方蜜蜂是优良的中华蜜蜂地方品种之一,主要分布于青海省东部农业区。
青海东方蜜蜂在分类上属于东方蜜蜂阿坝亚种(Apis cerana abansis)[1],在形态和行为等方面都表现出明显的高海拔、低气温的适应特征[2,3],对青藏高原地区养蜂业发展和生态平衡维持具有重要作用。
江西东方蜜蜂微卫星DNA的遗传多样性分析
54卷收稿日期:2022-12-16基金项目:国家自然科学青年基金项目(31902218);国家蜂产业技术体系建设专项(CARS-45-KXJ11);福建省大学生创新创业训练计划项目(X202210359177)通讯作者:周冰峰(1958-),https:///0000-0001-6743-0986,教授,博士生导师,主要从事蜜蜂种群遗传学研究工作,E-mail :******************江西东方蜜蜂微卫星DNA 的遗传多样性分析朱诗谣1,周姝婧1,2,朱翔杰1,2,徐新建1,2,苏显冰1,张芷宁1,姜荃耀1,周冰峰1,2*(1福建农林大学动物科学学院(蜂学学院),福建福州350002;2福建农林大学蜜蜂研究所,福建福州350002)摘要:【目的】明确江西省生境条件下东方蜜蜂遗传多样性水平及遗传分化规律,为促进江西省东方蜜蜂遗传资源的保护与利用,以及我国东方蜜蜂遗传资源的保护和合理布局提供理论依据。
【方法】选用37个微卫星标记对江西省10个代表性样点共704群东方蜜蜂进行遗传特征、遗传多样性和遗传分化分析,利用Excel Microsatellite Toolkit 3.1计算观察杂合度(Ho )、期望杂合度(He )、等位基因数(Na )和多态信息含量(PIC ),采用PopGene 1.31计算有效等位基因数(Ne )和香农指数(I ),通过GenAlEx 6.5和R 4.0.3分别进行主坐标分析(PCoA )和主成分判别分析(DAPC ),运用Genepop on Web 分析样点间的遗传分化指数(F st ),通过F st =1/(1+4Nm )计算基因流(Nm ),并以POPTREE2构建UPGMA 聚类分析树。
【结果】以37个微卫星标记从江西省10个样点704群东方蜜蜂中共检测出374个等位基因,其中PIC 高于平均值的有21个微卫星标记(AP243、BI278、AP249、AT185、BI225、AC139、Ap313、AT004、AC045、K0715、AC011、AP189、BI314、Ap085、AT101、244T 、Ac-1、Ac-2、Ac-5、Ac-26和Ac-35)。
蜜蜂饲养蜜蜂蜜蜂遗传多样性考核试卷
A.形态学比较
B.遗传距离分析
C.基因流评估
D.群体遗传结构分析
10.以下哪些是蜜蜂遗传多样性保护的挑战?()
A.疾病传播
B.环境污染
C.种群衰退
D.饲养技术落后
11.以下哪些因素可能导致蜜蜂遗传多样性的增加?()
A.基因突变
B.杂交
C.选择性繁殖
D.遗传漂变
1.蜜蜂遗传多样性是指蜜蜂种群内个体间基因型和表型的差异。它在蜜蜂饲养中关系到蜜蜂的生存能力、繁殖效率和疾病抵抗力,对生态保护则有助于维持生物多样性和生态系统的稳定。
2.影响因素包括近亲繁殖导致的遗传漂变、基因流减少、栖息地破坏和气候变化等。这些因素可能导致蜜蜂种群遗传多样性降低,影响其适应性和生产力。
B.卡尼鄂拉蜂
C.中华蜜蜂
D.布鲁诺蜂
2.蜜蜂的遗传多样性对于以下哪方面具有重要意义?()
A.提高蜂蜜产量
B.增强蜜蜂繁殖能力
C.降低疾病抵抗力
D.减少蜜蜂寿命
3.下列哪个因素可能导致蜜蜂遗传多样性降低?()
A.近亲繁殖
B.蜜蜂杂交
C.基因突变
D.环境变化
4.蜜蜂的染色体数量是多少?()
A. 16对
1.蜜蜂的遗传多样性对于维持蜂群的______和______至关重要。
()()
2.人工选育蜜蜂时,应避免______繁殖,以保护遗传多样性。
()
3.蜜蜂的遗传多样性研究通常采用______和______等技术。
()()
4.增加蜜蜂遗传多样性的有效方法是______不同品种的蜜蜂进行______。
()()
D.蜂蜜品质提高
13.以下哪个选项与蜜蜂遗传多样性无关?()
高一生物《生物的进化》练习题含答案
高一生物《生物的进化》练习题含答案一、选择题1.达尔文的生物进化论主要由共同由来学说和自然选择学说组成。
下列各项证据都支持共同由来学说,其中属于当今生物体上留下的分子水平印迹的是()A.用²³BU作“地质时钟”测定出某远古鱼类化石大概的形成时间B.与鱼胚胎的发育早期相似,人的胚胎在发育早期出现鳃裂和尾C.根据细胞色素c的氨基酸序列差异判断不同物种间的亲缘关系D.比对捕获的各种古人类DNA 的基因组碱基序列【答案】C【解析】用²³BU作“地质时钟”测定出某远古鱼类化石大概的形成时间,不属于当今生物体上留下的分子水平印迹,A错误;与鱼胚胎的发育早期相似,人的胚胎在发育早期出现鳃裂和尾,属于胚胎学证据,B错误;细胞色素c是细胞中普遍含有的一种蛋白质,它的氨基酸序列每2000万年才发生1%的改变,说明该基因突变率低,故可根据物种细胞色素c的氨基酸序列差异大小,判断不同物种亲缘关系的远近,属于当今生物体上留下的分子水平印迹,C正确;古人类的DNA 基因组碱基序列属于分子水平的证据,但不属于当今生物体上留下的印迹,D错误。
2.下列关于实验操作及分析的叙述正确的是()A.在性状分离比的模拟实验中,2个桶内彩球数必须相等B.煮熟了的豆浆不能与双缩脲试剂发生紫色反应C.用淀粉酶对淀粉和蔗糖进行水解探究酶的专一性的实验中,不能用碘液检测D.探究抗生素对细菌的选择作用实验中,对抗生素敏感性最强的细菌位于抑菌圈边缘【答案】C【解析】雄性个体产生的雄配子数目要远远多于雌性个体产生的雌配子数目,所以两个桶内的小球总数可以不等,但每个桶内的两种彩球数必须相等,A错误;豆浆中富含蛋白质,煮熟变性蛋白质肽键没有破坏,因此也可以与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应,B错误;碘液可与淀粉反应呈蓝色,蔗糖无论是否被水解,都不能与碘液反应,故探究淀粉酶对淀粉和蔗糖的专一性时不能选碘液检测实验结果,C正确;“探究抗生素对细菌的选择作用”实验中,抑菌圈边缘挑取的菌落可能是耐药菌,对抗生素敏感性最强的细菌离抑菌圈远,D错误。
东方蜜蜂研究
东方蜜蜂研究作者:王纬华等来源:《湖南农业科学》2014年第24期摘要:杨冠煌等(1986)发表蜜蜂阿坝亚种Apis cerana abansis,其亚种学名并没有拉丁化,应为Apis cerana abaensis,因多种原因未得到认可,但形态测定和分子数据分析认可中国阿坝地理种群Aba cerana。
笔者介绍蜜蜂种下分类时,测评了38个形态学指标的测量方法、阿坝地理种群研究历史和背景、青藏高原分化出阿坝地理种群的环境条件,以及该种群个体形态特征、生物学和分布;中国是世界东方蜜蜂多样性热点地区之一,提出了中国东方蜜蜂(工蜂)中华亚种Apis cerana cerana、印度亚种Apis cerana indica、海南地理种群Hainan cerana及阿坝地理种群Aba cerana的形态鉴定表,肯定中国东方蜜蜂的多样性;从中国蜂业生产实际出发,首次较好地解决了东方蜜蜂种和种下阶元(亚种和地理种群)的关系,提出保护东方蜜蜂阿坝地理种群的措施。
关键词:东方蜜蜂;阿坝种群;形态特征;多样性;中国;四川;甘肃;青海中图分类号:S891.7 文献标识码:A 文章编号:1006-060X(2014)24-0009-04Abstract: The morphometric and molecular analyses by Peng et al.(1989), Tang et al.(2005, 2006, 2008) and Jiang et al.(2007 ) revealed that many breeds of Aba race (Aba cerana) exist in China. Especially new four haplotypes (mitocliodrial genotypes) were found on the fringe of high cold meadow in Qinghai-Tibet Plateau, in steppe region of Gansu and in Aba area of Sichuan. This paper reviews 38 morphometeric characters measured by Ruttner et al.(1978),research history and background of Aba cerana, Qinghai-Tibet Plateau natural environment for Aba geographic race differentiation, and individual morphology characters, biology and distribution diversity of Aba cerana; presents the morphology appraisal table of Apis cerana cerana, Apis ceran indica, Hainan cerana and Aba cerana (Worker) for the diversity of China eastern bees; and puts forword measures for the protection and utilization of Aba cerana based on the practice of Chinese bee industry production.Key words:eastern bee; Aba cerana; morphology character; diversity; Sichuan;Gansu; Qinghai; China自1793年以来,东方蜜蜂研究已在上世纪下半叶进入种下阶元(亚种)或种群及生物多样性研究阶段。
武夷山自然保护区中华蜜蜂微卫星DNA遗传分析
武夷山自然保护区中华蜜蜂微卫星DNA遗传分析朱翔杰;徐新建;周妹婧;吴显达;周冰峰【摘要】The genetic diversity and genetic differentiation of honeybees (Apis cerana cerana) from 6 samplings in Wuyi Mountain nature reserve were studied with five microsatellite markers. The results were as follows: total 23 alleles were detected, mean polymorphic information content (PIC) was from 0.402 9 to 0.497 8 and mean heterozygosity (He) was from 0. 452 5 to 0. 561 3. Through Fisher's exact text, there were significantly difference genetic structures among honeybees from the six sampling points (P<0. 01) and the genetic differentiation was occurred. Genetic differentiation coefficients (Fst) were from 0. 020 0 to 0. 143 5. Especially there was significant honeybee population genetic differentiation between honeybees from Masu and others, and between the peak and the westfoot of mountain, forming independence populations. The gene flow interrupted by surrounding high mountains.%采用5个微卫星DNA分子标记,测定武夷山自然保护区6个样点的中华蜜蜂的遗传多样性及遗传分化.结果共检测到23个等位基因,平均多态信息含量(PIC)在0.402 9~0.497 8,处于中等多态水平;平均杂合度(He)在0.452 5~0.561 3,处于中等水平.经Fisher精确检验,武夷山自然保护区6个样点,5个微卫星位点的遗传结构存在显著差异(P<0.01).各样点中华蜜蜂均存在一定遗传分化,FST在0.020 0~0.143 5,特别是麻粟中华蜜蜂与其他所有样点、最高峰黄岗山与西坡山脚西坑的中华蜜蜂存在明显的遗传分化,各自形成独立种群,说明较高海拔山峰能够阻碍中华蜜蜂基因流.【期刊名称】《福建农业学报》【年(卷),期】2011(026)006【总页数】6页(P935-940)【关键词】中华蜜蜂;微卫星标记;遗传多样性;遗传分化【作者】朱翔杰;徐新建;周妹婧;吴显达;周冰峰【作者单位】福建农林大学蜂学学院,福建福州 350002;福建农林大学蜂学学院,福建福州 350002;福建农林大学蜂学学院,福建福州 350002;福建农林大学蜂学学院,福建福州 350002;福建农林大学蜂学学院,福建福州 350002【正文语种】中文【中图分类】S891中华蜜蜂Apis cerana cerana是我国土生土长的蜂种资源,是东方蜜蜂的一个亚种。
福建中华蜜蜂微卫星标记的遗传多样性分析
67 0 只中华蜜蜂 。 结果表明, 永定中华蜜蜂遗传多样性最低, 其次为武夷 中华蜜蜂, 平均杂合度分别为 037 和 O 55 其 . 1 . 3. 7 4
他各样点中华蜜蜂遗传多样性水平均为中度多态 , 平均杂合度在 O54 一 . 4 之间. . 0 O5 0 0 5 福建中华蜜蜂遗传分化结果表明, 武夷与政和中华蜜蜂, 将乐、 武平与光泽中华蜜蜂, 尤溪与福州中华蜜蜂在该 5 个微卫星位点上未发生明显分化。 分化系数 小于 0O ; .l龙岩、 永定、 漳州和宁德 4 个样点中华蜜蜂各具显著独特的遗传结构, 与其他样点分化明显. 关键词 : 中华蜜蜂; 微卫星标记 ; 遗传多样性 ; 遗传分化
Z U Xa gj ,Z O igf g WU X a ・a X nj n I i —u H in -e H U Bn - n , i d , U Xi-a ,X A X a c i i e n i o
( o eeo e i c , ui gi tr n oet n esy F zo , ui 5 0 2 C ia C lg f eS e e Fj nA r u u adF rs yU i r t, uhu F j 3 00 , h ) l B c n a c e l r v i n a n Abtat T egnt vrt dgnt ie ni i f 0 oebe 却 c, cr 珏)f m 1 a lsi Fj nw r s c: h e ecd esya ee cd r tt no 6 7hny es( r ii in i f e ao e 蝴 e讲 r 1s e ui ee o mp n a
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中华蜜蜂遗传资源保护的方案与路径
而战败 , 从而被西蜂逼退至宜居场地之外 , 亦或被西蜂 打垮 , 蜂 群不 复存 在 ; 二则 西 蜂 的雄蜂 会 干扰 中蜂 蜂 王 的自 然交尾 , 导致 中蜂蜂王交尾失 败 , 蜂群繁衍受 阻。 除了种间竞争之外 , 外部环境 的改变 , 也是中蜂数量减 少的原 因之一 , 例如毁林造 田、 滥施农药 、 环境污染等 因素。 因此, 若不给予中华蜜蜂一定的保护 , 其数量会继
的引入 、 种 间竞争以及饲养管理等 问题导致 中蜂数量骤减、 种性退化。因此 , 中蜂保护 已成为我国养蜂业的重要任 务。 目前, 中蜂的保种机构有 国家级保护区、 国家级保种场、 国家级遗传资源基 因库 , 省级保护 区、 省级保种场 ; 保种
方式主要有原产地保种( 保护区和保种场) 和基 因库保种( 蜜蜂活体、 精液 、 胚胎、 全基因组等 ) 。保种场的保种技 术 主要 涉及 闭锁繁 育技术和人工授精技术, 基 因库保种的核心技术是雄蜂精液的低温冷藏技 术。 此外, 保种场核心群 的来源、 规模、 隔离半径、 保种档案的建立及保管等都有规 范的要求。 本文就 中蜂的保种方案、 保种技术及其相 关问 题进行 了阐述 , 以为各地 中蜂保种工作提供参考。 关键 词 : 中华 蜜蜂 ; 保种 方案 ; 保 种技 术 中华蜜蜂( A p i s c e r a n , a c e y a n a ) 简称中蜂 , 是中国境 内东方蜜蜂 的总称 , 它有 7 0 0 0多万年 的进化史 , 在中 国已驯养了 3 0 0 0多年【 ” , 是 中国独有 的蜜源。2 0 0 6 年被列人农业部 国家级畜禽遗传 资源保护 品种 ( 农业部第 6 6 2 号公 告) 。1 8 9 6 年, 意大利蜜蜂( A p i s m e Z l i f e l ' a L . ) 等西方蜜 蜂的优 良品种引入我国,由于其较强的生产能力和繁 殖性能 , 西方引入蜂种在我 国迅速发展 , 使得原来分布 广泛、数量 巨多的本土当家蜂种——中华蜜蜂 的数量 骤减 、 种性退化。 西蜂和中蜂对我 国自然生态系统的意 义虽然多有重叠 ,但 中蜂依然具有西蜂无法替代 的生 态意义 , 如中蜂具有耐低温 、 嗅觉灵敏善采零星蜜源的 特点 , 是低气温开花的物种 ( 如柃属、 香薷属 ) 和零 星开 花植物( 如低灌木和草本植物 ) 传粉的主要媒介[ 2 1 。 中蜂 比西蜂还具有 出勤早 、 回巢晚的优点 , 因此 , 中蜂对本 地植物授粉的广度 和深度都超过西蜂 。中蜂数量减少 和种性 的退化 , 会使很多植物因授粉不足而数量逐渐
中华蜜蜂保种(资源)分子生物学评价方法
中华蜜蜂保种(资源)分子生物学评价方法陈道印;苏晓玲;赵东绪;华启云【摘要】中华蜜蜂是我国独特的东方蜜蜂遗传资源,具有非常重要的利用与保护价值.随着技术的发展,基于分子生物学的保种手段也逐渐展开.本文详细阐述了蜜蜂保种的重要性,介绍了适用于蜜蜂资源评价的常用遗传标记以及适用于遗传资源保护的评价指标,为中蜂资源保护与利用工作提供理论与实践指导.【期刊名称】《中国蜂业》【年(卷),期】2019(070)006【总页数】4页(P71-74)【关键词】中华蜜蜂;保种;分子生物学;遗传标记;评价指标【作者】陈道印;苏晓玲;赵东绪;华启云【作者单位】金华市农业科学研究院;金华市农业科学研究院;金华市农业科学研究院;金华市农业科学研究院【正文语种】中文1 蜜蜂保种重要性蜜蜂对于自然界以及人类社会来说,是一种具有巨大价值的社会性昆虫。
蜜蜂是自然界重要的授粉昆虫,具有巨大的生态价值,在世界上已知的16万种虫媒植物中,蜂媒植物占85%[1]。
对于人类社会来说,蜜蜂授粉已经在农业生产中发挥出显著的社会效益和经济价值,联合国粮农组织(FAO)的调查结果表明,蜜蜂对世界各个地区的农业生产都有显著的促进作用[2]。
而蜜蜂生产的蜂蜜、蜂花粉等蜂产品,除了能够提高人民的生活质量外,还能为蜂农带来可观的经济效益。
目前世界上人类饲养最多并且分布最广的是东方蜜蜂(Apis cerana)和西方蜜蜂(Apis mellifera),它们是蜜蜂属中的两个不同的蜂种,在人为干预以及自然选择的作用下又形成了许多不同的种质资源。
但目前在世界范围内,某一些品种因其优良的经济性状被盲目地引种,造成原有地方品种种群数量大大减少,这严重威胁了蜜蜂整体的种质资源状况。
分布于我国境内的中华蜜蜂(Apis cerana cerana)是适应于我国独特森林生态系统的本土蜂种[3]。
中华蜜蜂在长期的自然选择过程中形成了具有极强适应性的形态特征与生物学特性,在西方蜜蜂引入之前我国中华蜜蜂基本保留着多个地方品种[4]。
蜜蜂的物种多样性与保护策略
蜜蜂的物种多样性与保护策略蜜蜂,作为重要的传粉工具之一,对于生态系统的平衡和农业的发展具有不可忽视的作用。
然而,近年来,蜜蜂的种群数量急剧减少,其物种多样性面临巨大威胁。
本文将探讨蜜蜂的物种多样性现状以及相应的保护策略。
一、蜜蜂的物种多样性现状蜜蜂是指包括野生蜜蜂和养蜂蜜蜂在内的一类昆虫。
全球范围内,蜜蜂物种的数量众多,常见的有独居蜜蜂、社会蜜蜂、寄生蜜蜂等。
它们分布在各个地理区域,不同物种的蜜蜂具有不同的形态特征和行为习性。
然而,目前蜜蜂的物种多样性受到严重威胁。
人类活动导致了蜜蜂的栖息地丧失与破碎化,这使得许多蜜蜂物种的数量锐减。
同时,农药的大量使用以及环境污染也对蜜蜂产生了极大的负面影响。
这些因素的综合作用导致了蜜蜂的物种多样性急剧下降。
二、保护蜜蜂物种多样性的策略为了保护蜜蜂的物种多样性,需要采取一系列的策略和措施。
1. 保护栖息地:恢复和保护蜜蜂的栖息地是保护物种多样性的基础。
通过增加蜜蜂的栖息地面积,提供充足的食物来源和生活空间,可以促进蜜蜂的繁殖和种群增长。
同时,减少人类活动对蜜蜂栖息地的破坏,保护野生蜜蜂的生存环境。
2. 控制农药使用:农药是蜜蜂的主要威胁之一。
因此,需要制定和实施科学合理的农药使用政策,控制农药的使用量和使用方式,减少对蜜蜂的伤害。
同时,推广有机农业和生物防治,减少对环境和蜜蜂的污染。
3. 引入保护措施:为了保护蜜蜂的物种多样性,需要引入一系列的保护措施。
比如,建立蜜蜂保护区,划定禁止破坏和捕捉蜜蜂的区域;制定相关法律和政策,加大对非法采蜜和走私活动的打击力度;加强对养蜂业的监管,确保蜜蜂的合理养殖和使用。
4. 科学研究与教育宣传:加强对蜜蜂生态和物种多样性的科学研究,深入了解蜜蜂的生态需求和保护需求。
同时,通过教育宣传活动,提高公众对蜜蜂保护的意识,增强大众参与蜜蜂保护的积极性。
三、结语蜜蜂的物种多样性面临着严峻的挑战,保护蜜蜂的物种多样性是维护生态平衡和农业发展的重要任务。
海南岛与中国大陆南部地区东方蜜蜂形态特征比较研究
海南岛与中国大陆南部地区东方蜜蜂形态特征比较研究陈伟文;赵文正;王钰冲;董诗浩;刘晰文;和绍禹;谭垦【期刊名称】《云南农业大学学报》【年(卷),期】2013(028)006【摘要】从中国大陆南部的广东省和广西壮族自治区以及海南岛采集了共30群东方蜜蜂,广东广西各采集9群,海南岛采集12群,每群采集15只工蜂.对每只工蜂进行形态特征分析测定,共分析测定了38个指标.将测定得到的形态特征数据进行因素分析、主成分分析和聚类分析,并将广东广西与海南岛的形态数据进行比较和分析.结果表明,海南的东方蜜蜂在体型上比广东和广西的东方蜜蜂要小,体色要比广东广西的浅.另外,这3个省份的东方蜜蜂分成了2个地理种群,海南的为1个地理种群,广东和广西的为另1个地理种群.【总页数】4页(P810-813)【作者】陈伟文;赵文正;王钰冲;董诗浩;刘晰文;和绍禹;谭垦【作者单位】云南农业大学东方蜜蜂研究所,云南昆明650201;云南农业大学东方蜜蜂研究所,云南昆明650201;云南农业大学东方蜜蜂研究所,云南昆明650201;云南农业大学东方蜜蜂研究所,云南昆明650201;云南农业大学东方蜜蜂研究所,云南昆明650201;云南农业大学东方蜜蜂研究所,云南昆明650201;云南农业大学东方蜜蜂研究所,云南昆明650201【正文语种】中文【中图分类】S891.8【相关文献】1.云南省中西部地区东方蜜蜂形态特征研究 [J], 李华;胡宗文;汪正威;庄迪;杨爽;谭垦;和绍禹2.四川平武地区东方蜜蜂形态特征研究 [J], 庄迪;杨爽;杨娟;杨旭梅;周林;罗显美;谭垦3.广东、广西与云南东方蜜蜂形态特征比较研究 [J], 陈伟文;王钰冲;董诗浩;刘晰文;谭垦4.山东东方蜜蜂形态特征及分类研究 [J], 王桂芝;张秀琳;吕丽萍;丁桂玲;石巍5.金华地区东方蜜蜂的形态特征 [J], 苏晓玲;陈道印;曹联飞;华启云;赵东绪;罗谷辉因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
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中国主要东方蜜蜂种群的遗传多样性分析任勤1,曹联飞2,赵红霞3,,王瑞生1,程尚1,罗文华1,曹兰1,姬聪慧*1(1.重庆市畜牧科学院,重庆 402460;2.浙江省农业科学院,浙江杭州 310021;3. 广东省生物资源应用研究所,广东广州 510260)摘要:对中国具代表性的东方蜜蜂遗传资源中7个种群的线粒体DNA tRNA leu~ CO Ⅱ基因进行扩增和测序,并进行遗传多样性比较及亲缘关系分析。
结果表明,共发现43个单倍型,其中10个单倍型在GenBank数据库对比确认属于新发现单倍型;7个群体中,阿坝中蜂、滇南中蜂和海南中蜂遗传多样性水平较高,长白山中蜂遗传多样性水平较低,其他群体遗传多样性居中;不同种群间遗传距离变化较大,其中海南中蜂与滇南中蜂、阿坝中蜂间的遗传距离最大,长白山中蜂与云贵中蜂、北方中蜂、华南中蜂间的遗传距离最小;聚类分析显示7个种群可聚为4个类群。
关键词:东方蜜蜂;遗传多样性;线粒体DNA中图分类号:文献标志码:AAnalysis of genetic diversity of Apis cerana populations inChinaREN Qin1, CAO Lianfei2,ZHAO Hongxia3,WANG Ruisheng1,CHENG Shang1,LUO Wenhua1,CAO Lan1, JI Conghui*1(1.Chong Qing Academy of Animal Science,Chongqing 402460,China;2.Zhejiang Academy of Agricultural Sciences,Zhejiang 310021,China; 3.Guangdong Institute of Applied Biological Resources, Guangdong 510260, China)Abstract:The mitochondrial DNA tRNA leu~CO II genes in 7 populations of Apis cerana Fabricius in China were amplified and sequenced, and their genetic diversity and phylogenetic relationships were analyzed. The results showed that a total of 43 haplotypes were identified, of which 10 haplotypes were identified new haplotypes in the GenBank database, Among 7 populations, Aba bee, Hainan bee and Yunnan bee have higher level of genetic diversity, Changbai Mountain bee has lower level of genetic diversity, other populationswere intermediate; The genetic distances between different populations varied greatly, of which Hainan bee andhave maximum genetic distance with Yunnan bee and Aba bee, The genetic distances between Changbai mountain bee and Yunnan bee, Middle China bee, Northern bee and Southern bee were small.; Cluster analysis showed that the 7 populations could be clustered into 4 taxa.Key words:Apis cerana Fabricius; genetic diversity; mitochondrial DNA收稿日期:基金项目:国家蜂产业技术体系基金项目(CARS-45SYZ15);重庆市畜牧科学院基金项目(16421).作者简介:任勤(1979-), 男, 宁夏固原人,助理研究员, 硕士研究生,主要从事蜜蜂方面的研究。
通信作者:姬聪慧(1980-),女,河南平顶山人,助理研究员,硕士研究生。
中国东方蜜蜂资源丰富,分布于除新疆和内蒙古北部以外的广大地区[1]。
中国的东方蜜蜂资源可分为5个亚种,分别为中华亚种、西藏亚种、印度亚种、阿坝亚种和海南亚种[2-3]。
由于地理隔离等因素影响,中国东方蜜蜂在形态及遗传上存在差异,形成了不同的生态型和丰富的遗传资源,有北方中蜂、华南中蜂、华中中蜂、云贵高原中蜂、长白山中蜂、海南中蜂、滇南中蜂、阿坝中蜂和西藏中蜂[4]。
近年来,国内多位学者采用mtDNA、微卫星等分子标记对中国华东地区、江苏省、四川省、海南岛、贵州省、重庆市等地东方蜜蜂进行了遗传多样性分析,发现不同地区的中蜂存在较明显的分化[5-12]。
因此,分析更大范围的东方蜜蜂样本,对于了解其遗传分化水平具有重要意义[14]。
本研究使用线粒体DNA tRNA leu~ CO Ⅱ基因,对中国具有代表性的遗传资源北方中蜂、华南中蜂、海南中蜂等7个种群进行遗传多样性对比及群体间亲缘关系分析,为中国东方蜜蜂资源的遗传分化提供信息,从而促进中国东方蜜蜂资源的保护与利用。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 样品采集在中国主要东方蜜蜂分布区的12个采样地点采集东方蜜蜂样本300个(见表1),尽可能采集当地较原始饲养蜂群。
每群采集工蜂100只左右,用无水乙醇浸泡,置于冰箱中冷冻保存备用。
表1 蜜蜂样本分布情况及数量Table 1 Distribution and quantity of honeybee samples采样地点sampling position地理型topomorph样本数sample number宁夏固原Guyuan,Ningxia北方中蜂Beifang20陕西延安Yanan,Shanxi北方中蜂Beifang20山西太原Taiyuan,Shanxi北方中蜂Beifang20广东从化Conghua,Guangdong华南中蜂Huanan20广西南宁Nanning,Guangxi华南中蜂Huanan20福建福州Fuzhou,Fujian华南中蜂Huanan20云南西双版纳Xishuangbanna,Yunnan滇南中蜂Diannan301.1.2 主要仪器全称、型号及生产厂紫外可见分光光度计(KU-T6/KU-T6PC,南京肯凡电子科技有限公司)、常规PCR仪(Eppendorf Mastercycler nexus,艾本德中国有限公司)、迷你型水平电泳系统(GCMGU-102T,上海苑胜仪器设备有限公司)、台式高速冷冻离心机(TG16-WS,长沙湘锐离心机有限公司)、全自动免染凝胶成像分析系统(GelDoc EZ,济南舜腾生物技术有限公司)、基因测序仪(NextSeq 550AR,安诺优达基因科技)。
1.1.3 主要试剂细胞/组织基因组DNA提取试剂盒和蛋白酶K(北京百泰克生物技术有限公司)、dNTP、10×Buffer、TaqDNA聚合酶和Marker(大连宝生物公司)、DNA凝胶回收试剂盒(爱思进生物技术有限公司)、引物(E2 5’- GGCAG AATAAGTGCATTG-3’,H2 5’- CAATATCATTGATGACC-3’)(上海生工生物工程有限公司合成)。
1.2 方法1.2.1 基因组DNA的提取每个蜜蜂样本取1只工蜂进行试验。
取出被无水乙醇浸泡过的蜜蜂个体,在灭菌水中清洗3次,取蜜蜂胸部置于1.5 mL的离心管中, 用小剪刀剪碎, 按照细胞/组织基因组DNA提取试剂盒(离心柱型)说明书提取基因组DNA。
基因组DNA用TE溶解后于-20℃保存,备用。
1.2.2 PCR扩增与测序1.2.2.1反应体系(50 μL) 模板DNA 2 μL,10×Buffer (含Mg2+) 5 μL,2.5 mmol·L-1的dNTPs 4 μL,10 pmol· L-1的引物各2 μL,5 U Taq酶0.5 μL,灭菌双蒸水34.5 μL。
1.2.2.2反应条件 95 ℃预变性4 min;94 ℃变性1 min, 50 ℃退火1 min, 72 ℃延伸1 min, 共35个循环;72 ℃再延伸10 min。
PCR 产物纯化后使用测序仪(型号为ABI PRISM 3730 ×l)进行测序。
1.2.3 序列分析利用SeqMan程序对测定获得的序列进行校对,用MegAlign软件比对所有序列。
通过DnaSP 5.0 软件输出单倍型序列,同时计算各样点的单倍型多样度(Hd)、平均核苷酸差异数(K)、核苷酸多样度(Pi)。
用MEGA3.1 软件构建系统进化树。
2 结果与分析2.1PCR扩增及测序结果所有样本均成功进行了扩增和测序,扩增的片段大小约为450 bp, 与目的片段大小一致,测序获得序列长度约为400 bp,扩增结果如图1。
1为空白对照,2-21为部分样品的扩增结果,M为250bp Plus DNA Marker1: blank control; 2-21: Amplification result of some samples; M: 250bp Plus DNA Marker图1 PCR产物电泳结果Fig. 1 Electrophoresis results of PCR products2.2 序列特征分析所有序列比对后, 获得一致序列为415 bp, 包括tRNA leu基因部分序列(1~18 bp)、非编码区完全序列(19~108 bp) 和COⅡ部分序列( 109~415 bp)。
所有序列中A+ T含量均在80%以上,所有序列分析表明,多态性位点有31个,其中单变异位点22个,简约信息位点9个,测序结果如图2。
图2 测序结果Fig. 2 sequencing result2.3 单倍型分析共检测到单倍型43个。
H2单倍型是主要单倍型,占总样本数的46.52%。
其余单倍型比例均小于10%,其中有16个单倍型的比例大于1%。
43个单倍型中,10个单倍型在GenBank 数据库中比对确认属于新发现的单倍型,提交的序列号为MG197799-197808。