选修1《生物技术实践》知识清单(2020第三版)(学生版)(B4)

CO2，此后再将瓶

；以后每次划线前灼烧：杀死上次

；划线结束灼烧：

，从而能在培养基表面形成单个的菌落。

将聚集的菌体分散开，以便获得单菌落。

使微生物和无菌水混合均匀。

；为保证菌液均匀分布，应在涂布时转动培养皿。

。②若要分离并统计活菌数，应选用稀释涂布平板法。

有“微生物的天然培养基”之称。土壤取样时应选取取富含有机质、pH接近中性且潮湿的、

用一定稀释范围的样品液进行涂布培养，

104、105和106倍稀释液，测定放

化学结合法和物理吸附法固定

而体积小的酶易从包埋材料中漏出。

图A：包埋法B：化学结合法C：物理吸附法

）固定化细胞技术的优缺点

，大分子物质不易进入细胞，反应时需要为固定化细胞提供营养物质。

不溶于水的多孔性载体中。常用的载体

只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快，。因此可将各种相对分子质量不同的蛋白质分子分离。（原理见右上图）

流动慢→先收集大分子→后收集小分子。

聚丙烯酰胺凝胶电泳。

琼脂糖凝胶电泳：由于琼脂糖本身不带电荷，所以，各种分子在电场中的迁移速率取决于各种分子所带电荷性聚丙烯酰胺凝胶电泳：蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于

等因素。为了消除净电荷对迁移

能与各种蛋白质形成

的量大大超过了蛋白质

分子原有的电荷量，因而掩盖了不同种蛋白质间的电荷差别，使

聚丙烯酰胺凝胶电泳中，

阳极移动。

－聚丙烯酰胺凝胶电泳。

。由几条肽链组成的蛋白质复合体在

单条肽链的分子量。

的影响，维持pH基本不变。

溶解于水中配制而成，通过调节缓冲剂的使用比例就

纯度鉴定。

条肽链组成，包括两条α－肽链和两条β－肽链。其

或一分子二氧化碳。血红蛋白因含有血红素而呈现红色。

血红蛋白呈现红色这一特点对进行血红蛋白质分离的意义：血红蛋白是有色蛋白，因此在凝胶色谱分离时可通过观察颜色来判断什么时候应该收集洗脱液，这使血红蛋白的分离过程非常直观，大大简化了实验操作。

血浆蛋白)，将下层暗红色的红细胞液体倒入烧杯→加

注：蒸馏瓶中的液

体量不能太多，为蒸馏瓶的1/3～2/3

中，透析12h 。 模拟生物体内的生理环境，保持体—聚丙烯酰胺凝胶电泳。

植物原料的特点来决定。

油水混合物，冷却后，混合物又会。适用于提取玫瑰油、薄荷有效成分水解等问题。 的有效成分的提取，如胡萝卜素的提取。 将携带有玫瑰精油的水蒸气冷凝为液态油水混合物，以便于收集。 5%的Na 2SO 4。 过滤除去大的固橘皮油还含少量的沉淀，用吸管吸出上层澄清橘皮油，其余部分通过滤纸过于层析液中，点样应快速细致标准样品处于同一水平的