天然药化复习资料

天然药物化学是运用现代科学理论与方法研究天然药物中化学成分的一门学科。

其研究内容包括各类天然药物的化学成分（主要是生理活性成分或药效成分）的结构特点、物理化学性质、提取分离方法以及主要类型化学成分的结构鉴定等。

一.中草药有效成分的提取
从药材中提取天然活性成分的方法有溶剂法、水蒸气蒸馏法及升华法等。

(一) 常用提取方法
（二）溶剂提取法
●溶剂提取法的原理：溶剂提取法是根据“相似相容”原理进行的，通过选择适当溶剂将中药中的化学成分从药材中提取出来的一种方法。

（考试时请这样回答哦！）
＊常用溶剂极性有弱到强排列：石油醚＜环己烷＜苯＜乙醚＜氯仿＜醋酸乙酯＜正丁醇＜丙酮＜乙醇＜甲醇＜水（丙酮，乙醇，甲醇能够和水任意比例混合。

）
＊常用溶剂的性质：亲脂性有机溶剂、亲水性有机溶剂、水
＊一般情况下，分子较小，结构中极性基团较多的物质亲水性较强。

而分子较大，结构上极性基团少的物质则亲脂性较强。

●天然药物中各类成分的极性
·多糖、氨基酸等成分极性较大，易溶于水及含水醇中；
·鞣质是多羟基衍生物，列为亲水性化合物；
·苷类的分子中结合有糖分子，羟基数目多，能表现强亲水性；
·生物碱盐，能够离子化，加大了极性，就变成了亲水性化合物；
·萜类、甾体等脂环类及芳香类化合物因为极性较小，易溶于氯仿、乙醚等亲脂性溶剂中；
·油脂、挥发油、蜡、脂溶性色素都是强亲脂性成分，易溶于石油醚等强亲脂性溶剂中
总之，天然化合物在溶剂中的溶解遵循“相似相溶”规律。

即极性化合物易溶于极性溶剂，非极性化合物易溶于非极性溶剂，分子量太大的化合物往往不溶于任何溶剂。

溶剂提取法的关键是选择适宜的溶剂(选择溶剂依据:根据溶剂的极性和被提取成分及其共存杂质的性质，决定选择何种溶剂)(各溶剂法分类见《天然药物化学辅导教材》P5)
（三）水蒸气蒸馏法
只适用于具有挥发性、能随水蒸气蒸馏而不被破坏，与水不发生反应，且难溶或不溶于水的成分的提取。

天然药物中的挥发油、某些小分子生物碱如麻黄碱、烟碱、槟榔碱以及某些小分子的酚性物质如牡丹酚等的提取可采用水蒸气蒸馏法。

（四）升华法
某些固体物质如水杨酸、苯甲酸、樟脑等受热在低于其熔点的温度下，不经过熔化就可直接转化为蒸气，蒸气遇冷后又凝结成固体称为升华。

天然药物中有一些成分具有升华性质，能利用升华法直接中药材中提取出来。

但天然药物成分一般可升华的很少。

果蔬脱水新技术实质上升华脱水法。

（五）超临界二氧化碳流体萃取法（了解部分，见《天然药物化学辅导教材》P6）
三、中草药有效成分的分离与精制
(一) 根据物质溶解度不同进行分离
1. 原理: 相似相溶
2. 方法: 结晶法、试剂沉淀法、酸碱沉淀法、铅盐沉淀法、盐析法
(二) 根据物质分配系数的不同进行分离
K = CU / CL（CU：上相，CL：下相），K值与萃取次数成反比，即K值越大，萃取次数越少，反之越多。

⑴分配系数（K值）与萃取次数的关系
原理: 利用物质在两种互不相溶的溶剂中的分配系数的不同达到分离。

分配系数K值:一种溶质在两相溶剂中的分配比。

K值在一定的温度和压力下为一常数。

⑵分离因子（β值）与分离难易的关系
分离因子β：两种溶质在同一溶剂系统中分配系数的比值。

b = KA / KB (KA>KB)
b值越大，越易分离； b =1时，无法分离。

⑶酸碱度（pH值）对分配比的影响
溶剂系统PH的变化影响酸性、碱性、及两性有机化合物的存在状态（游离型或离解型），从而影响在溶剂系统中的分配比。

（游离型------极性小的溶剂；离解型-------极性大的溶剂）
◆PH<3，酸性物质多呈游离型（HA）、碱性物质则呈离解型（BH+）；
◆ PH>12，酸性物质呈离解型（A－）、碱性物质以游离型（B）存在。

【纸色谱法 PC】（以滤纸纤维为惰性载体的平面色谱）
支持剂：纤维素（滤纸）固定相：纤维素上吸附的水(20-25%)
展开剂：与水不相混溶的有机溶剂或水饱和的有机溶剂
Rf值： A、物质极性大， Rf值小； B、物质极性小， Rf值大。

应用：适合于分离亲水性较强的物质。

【液-液分配柱色谱法】（固定相主要为化学键合）
柱色谱：将吸附固定液的载体装入色谱管中进行分离和检测混合物成分的色谱法。

按是否加压分：常压柱色谱、加压柱色谱按相极性分：正相色谱、反相色谱
载体：硅胶（含水17%以上）、硅藻土及纤维素等
●正相色谱：固定相＞流动相（极性）
固定相：水、缓冲溶液流动相：氯仿、乙酸乙酯、丁醇等弱极性有机溶剂
洗脱顺序：极性小的化合物先出柱，极性大的化合物后出柱
应用：适用于水溶性或极性较大的化合物，如生物碱、苷、糖类、有机酸等。

●反相色谱：固定相＜流动相（极性）
固定相：石蜡油，化学键合相（如十八烷基硅胶键合相）
流动相：水、甲醇、乙腈等强极性有机溶剂
洗脱顺序：极性大化合物，先出柱；极性小化合物，后出柱。

应用：适合于脂溶性成分，如高级脂肪酸、油脂、游离甾体等。

（三） ..根据物质吸附性差别进行分离
【吸附色谱法】利用同一吸附剂对混合物中各成分吸附能力的不同而达到分离的色谱方法。

吸附类型：1.物理吸附（溶液分子与吸附剂表面分子的分子间作用力）：硅胶、氧化铝及活性炭为吸附剂的吸附。

相似者易吸附
2.化学吸附：如黄酮等酚酸性物质被碱性氧化铝吸附，生物碱被酸性硅胶吸附等。

3.半化学吸附：如聚酰胺与黄酮类、蒽醌类等化合物之间的氢键吸附。

介于物理吸附与化学吸附之间。

【固-液吸附柱色谱】
将待分离混合物样品加在装有吸附剂的柱子中，再加适当的溶剂(洗脱剂)冲洗，由于吸附剂对各组分吸附能力不同，各组分在柱中向下移动的速度不同，吸附力最弱的组分随溶剂首先流出，通过分段定量收集洗脱液而使各组分得到分离。

固-液吸附三要素：吸附剂、溶质、溶剂
●吸附剂的种类及特点 1.极性吸附剂（氧化铝、硅胶）特点：
a.对极性强的物质吸附能力强。

b.溶剂极性减弱，则吸附剂对溶质的吸附能力增强；反之，则减弱。

c.溶质即使被硅胶、氧化铝吸附，一旦加入极性较强的溶剂时，又可被置换洗脱下来。

为避免化学吸附，酸性物质宜用硅胶、碱性物质宜用氧化铝作为吸附剂进行分离。

通常在分离酸性（或碱性）物质时，洗脱溶剂中常加入适量的醋酸（或氨、吡啶、二乙胺），以防止拖尾，改善分离效果。

●非极性吸附剂（活性炭）特点：
活性炭因为是非极性吸附剂，对非极性物质具有较强的亲和能力。

在水中对溶质表现出强的吸附能力，溶剂极性降低，则活性炭对溶质的吸附能力也随之降低。

故从活性炭上洗脱被吸附物质时，洗脱溶剂的洗脱能力将随溶剂极性的降低而增强。

当用活性炭作吸附剂进行层析时，下列洗脱剂的洗脱能力由小列大为：水、l0％、20％、30％、50%、75％、95％的乙醇。

【聚酰胺吸附色谱法】
通过分子中的酰胺羰基与酚类、黄酮类化合物的酚羟基，或酰胺键上的游离胺基与醌类、脂肪酸上的羰基形成氢键缔合而产生吸附。

●吸附强弱规律（含水溶剂中）a.形成氢键的基团数目越多，则吸附能力越强。

形成氢键的能力与溶剂有关，一般在水中形成氢键的能力最强，在有机溶剂中较弱，在碱性溶液中最
弱。

c.分子中芳香化程度越高，则吸附性能越强。

b.易形成分子内氢键的化合物，其吸附性能减弱。

在聚酰胺柱色谱分离时，通常用水装柱，样品也尽可能作成水溶液上柱以利聚酰胺对溶质的充分吸附，形成较窄的原始谱带。

随后用不同浓度的含水醇洗脱，并不断提高醇的浓度，逐步增强从柱上洗脱物质的能力。

甲酰胺、二甲基甲酰胺及尿素水溶液因分子中均有酰胺基，作为第三者可以同时与聚酰胺及酚类等化合物形成氢键缔合，故有很强的洗脱能力。

此外，水溶液中加入碱或酸均可破坏聚酰胺与溶质之间的氢键缔合，也有较强的洗脱能力。

●各种溶剂在聚酰胺柱上的洗脱能力由弱至强排序为：
水→甲醇→丙酮→氢氧化钠水溶液→甲酰胺→二甲基甲酰胺→尿素水溶液
●应用 a.特别适合于酚类、醌类、黄酮类化合物的制备和分离。

b.对生物碱、萜类、甾体、糖类、氨基酸等其它极性与非极性化合物的分离也有着广泛应用。

c.用于提取物的脱鞣质处理
【大孔吸附树脂的吸附】
由于吸附性和分子筛原理，有机化合物吸附力的不同及分子量的不同，在大孔吸附脂上经一定的溶剂洗脱而分开。

①吸附性-----范德华引力或产生氢键的结果。

②分子筛------本身多孔性结构所决定。

大孔吸附树脂：分为极性和非极性
●影响因素：
a.一般非极性化合物在水中易被非极性树脂吸附，极性化合物易被极性树脂吸附。

糖是极性的水溶性化合物，与D型非极性树脂吸附作用很弱，据此经常用大孔吸附树脂将中药的化学成分和糖分离。

b.物质在溶剂中的溶解度大，树脂对此物质的吸附力就小，反之就大。

c.分子量小、极性小的化合物与非极性大孔吸附树脂吸附作用强；反之，与极性大孔吸附树脂吸附作用强。

d.能与大孔吸附树脂形成氢键的化合物易吸附。

●洗脱液的选择：最常用的水、乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯
对非极性大孔树脂：洗脱液极性越小，洗脱能力越强；
对极性大孔树脂：洗脱液极性越大，洗脱能力越强。

●应用广泛应用于天然化合物如苷与糖类的分离、生物碱精制。

主要用于水溶性大分子化合物的分离和精制：如多糖、蛋白质、多肽类化合物分离。

(四) 根据物质分子大小差别进行分离
【凝胶色谱法】：将含有大小不同分子的混合物样品液，通过多孔性凝胶（固定相），用洗脱剂将分子量由大到小的化合物先后洗脱的一种分离方法。

(五) 根据物质解离程度不同进行分离
天然有机化合物中，具有酸性、碱性及两性基团的分子，在水中多呈离解状态，据此可用离子交换法或电泳技术进行分离。

以下仅简单介绍离子交换法。

●.原理：是以离子交换树脂作为固定相，用水或含水溶剂为流动相。

当流动相流过交换柱时，溶液中的中性分子及不与离子交换树脂交换基团发生交换的化合物将通过柱子从柱底流出，而具有可交换的离子则与树脂上的交换基团进行离子交换并被吸附到柱上，随后改变条件，并用适当溶剂从柱上洗脱下来，即可实现物质分离。

●结构及性质：离子交换树脂外观均为球形颗粒，不溶于水，但可在水中膨胀。

●吸附规律：阳离子交换树脂——分离碱性成分；阴离子交换树脂——分离酸性成分
●.应用：主要用于能产生离子型的成分如氨基酸、肽类、生物碱、有机酸、酚类等。

四、结构研究法结构测定常用的波谱分析
【紫外-可见吸收光谱uv】凡具有不饱和键的化合物，特别是存在共扼不饱和键的化合物，在紫外-可见光谱（200－700 nm）中有特征吸收峰，所以紫外光谱适用于鉴定不饱和键的有无，或用以推测这些不饱和键是否共扼。

【红外光谱 IR】红外光谱能充分反映官能团与波长的关系，所以对确定未知物的结构非常有用。

常见官能团伸缩振动区：①O-H、N-H （3750－3000 cm-1）②C-H （3300－2700 cm-1 ）
③C≡C（2400－2100 cm-1 ）④C=O （1900－1650 cm-1 ）⑤C=C （1690－1600 cm-1 ）【质谱 MS】就是化合物分子经电子流冲击或用其他手段打掉一个电子后，形成正电离子，在电场和磁场的作用下，按质量大小排列而成的图谱。

用质谱测定有机分子的分子量。

【核磁共振谱（NMR）】1H–NMR和13C-NMR能提供分子中有关氢及碳原子的类型、数目、互相连接方式、周围化学环境以及构型、构象等结构信息。

●氢谱（H—NMR）
1H –NMR通过测定化学位移（δ）、质子数以及裂分情况（重峰数及偶合常数J）可以得出分子中1H 的类型、数目及相邻原子或原子团的信息。

①化学位移：在有机化合物中虽同为氢核，如果它们所处的化学环境不同，则它们共振时所吸收的能量就稍有不同，在波谱上就显示出共振峰位置的移动。

这种因化学环境变化引起的共振谱线的位移称为化学位移，用符号δ表示。

②质子数：根据氢谱的上峰的积分面积并结合已知的分子式求得每个信号所相当的氢的个数，现在1H–NMR 可以直接给出每个信号代表的质子的个数，并可以直接获得分子中总的质子数。

③信号的裂分及偶合常数（J）：磁不等同的两个或两组1H核在一定距离内会因相互自旋偶合干扰而使信号发生裂分，而出现s（singlet,单峰）、d（doublet,双峰）、t（triplet,三重峰）、q（quartet，四重峰）、m（multiplet，多重峰）等。

峰裂分数：n+1规律
④裂分间的距离称为偶合常数（J）,单位Hz。

其大小取决于间隔键的距离。

间隔的键数越少，则J的绝对值越大；反之，越小。

按间隔键的多少可分为偕偶（J2）、邻偶（J3）及远程偶合（J远）。

※一般相互偶合的两个或两组1H核信号其偶合常数相等（Jab=Jba）。

生物碱
生物碱定义：为天然产的含氮有机化合物，含负氧化态氮原子，大多具有复杂的氮杂环结构。

除外：低分子胺类如甲胺、乙胺；氨基酸、氨基糖、肽类、蛋白质、核酸、核苷酸、卟啉类、维生素B。

生物碱的分类
A）来源于氨基酸
（1）鸟氨酸：吡咯类、吡咯里西啶、托品烷
（2）赖氨酸：哌啶类、吲哚里西啶、喹诺里西啶
（3）邻苯氨酸：喹啉类、丫啶酮类
（4）苯丙氨酸/酪氨酸：苯丙胺类、四氢异喹啉类、苄基四氢异喹啉类、
（5）色氨酸：吲哚、卡波林、半萜吲哚、单帖吲哚
B）来源于异戊烯
（6）萜类：单萜、倍半萜、二萜、三萜
（7）甾烷：孕甾烷、环孕甾烷、胆甾烷
生物碱理化性质
A）物理性质
一、性状 1.形态：多为结晶固体，少为粉末。

少数常温下为液体
2.颜色：多为无色或白色，少数含有较长共轭体系而有色（如小檗碱为黄色、血根碱为红色）
3.味觉：多具苦味，个别有甜味（如甜菜碱）
4.挥发性：少数小分子、游离状态生物碱具有挥发性和升华性（如咖啡碱具有升华性，麻黄碱能随水蒸气蒸馏）
二、旋光性：多为左旋光性。

左旋体比右旋体活性强。

条件(PH值、溶剂)改变有的产生变旋现象。

如：菸碱
中性溶液——左旋光性酸性溶液——右旋光性
三、溶解性
（一）脂溶性生物碱：大多数游离的脂肪胺、芳香胺、酰胺类，仲胺和叔胺生物碱的游离碱具亲脂性；（二）水溶性生物碱
（1）含有季铵、胍基或氮氧化物（氧化苦参碱）的生物碱
（2）生物碱盐（硝酸士的宁）
（三）两性生物碱：具酚羟基、羧基等酸性基团的生物碱具酸碱两性；（含酚羟基的叔胺碱可溶于苛性碱溶液；含羧基的生物碱类似于水溶性碱；含内酯结构生物碱可溶于热的苛性碱溶液）
B）化学性质
碱性（强弱主要取决于分子结构中氮原子的电子云密度，若电子云密度升高，则碱性增强，反之碱性下降。

）1．N杂化方式
2．诱导效应氮原子连接供电子基如烷烃时，碱性增强;
氮原子附近有吸电子基时（:双键），则碱性下降。

如：苯异丙胺>麻黄碱>去甲麻黄碱。

氮杂缩醛(酮)生物碱的氮原子不处在桥头，强碱性；氮原子处在桥头，碱性相对较弱。

3．诱导-场效应: 对第二个氮原子产生两种降低其碱性的作用。

4．共轭效应（形成p-π共轭，碱性较弱。

苯胺型、酰胺型）
5．空间效应（氮原子周围的取代基分子较大，氮原子难于接受质子，碱性降低）
6．氢键效应（形成稳定的分子内氢键，可使碱性增强。

）
生物碱结构中的碱性基团与碱性强弱之间的关系为：
胍基＞季铵碱＞脂肪胺和脂杂环＞芳胺和吡啶环＞多氮同环芳杂环＞酰胺基和吡咯环。

四、生物碱沉淀反应
（1）通常在酸性水溶液中生物碱成盐状态下进行；（若在碱性条件下则试剂本身将产生沉淀）
（2）在稀醇或脂溶性溶液中时，含水量>50%；（当醇含量>50%时可使沉淀溶解）
（3）沉淀试剂不易加入多量。

（如：过量的碘化汞钾可使产生的沉淀溶解）
五、生物碱检识（显色反应、纸色谱、色谱检识、HPLC）
薄层色谱：极性吸附剂（硅胶和氧化铝）一般用来分离和检识弱极性和中等极性的生物碱，活性炭等非极性吸附剂常用于分离极性较强的生物碱。

六、生物碱提取分离
A）总生物碱的提取(初步分离:将生物碱粗分为弱碱性生物碱、中强碱性和强碱性生物碱、水溶性生物碱三部分，再根据结构中是否有酸性基团（主要指酚羟基），分为酚性和非酚性两类。

)
1. 水蒸气蒸馏法:：如麻黄碱及液体生物碱。

2. 升华法：如咖啡碱。

3. 溶剂法：用于大多数生物碱。

主要用于总生物碱提取
（1）. 水或酸水提取法（利用生物碱盐易溶于水）
（2）. 醇提取法（游离生物碱及其盐一般能溶于乙醇和甲醇。

）
（3）. 有机溶剂提取法（利用游离生物碱易溶于低极性有机溶剂进行提取。

）
①提取前需用碱碱化预处理。

②只提取亲脂性生物碱，亲水性生物碱不被提出。

③杂质少，易于进一步纯化。

④毒性大，易燃易爆。

4.利用生物碱特殊功能基不同进行分离
（1）、有无酚羟基——利用酚羟基可溶于NaOH溶液，用NaOH溶液处理与无酚羟基者分离。

（2）、有无内酯（内酰胺）结构——利用内酯、内酰胺在苛性碱溶液中加热可开环生成溶于水的羧酸盐，与无内酯、内酰胺结构的生物碱分离。

（3）、制备功能基衍生物——利用仲胺可与亚硝酸生成亚硝基衍生物，或与氯乙酰或氯甲酸乙酯生成相应的酯等，与叔胺分离。

生物碱的净化（1）. 离子交换树脂法（2）. 有机溶剂萃取法（3）. 沉淀法
B）生物碱单体的分离
1)利用生物碱碱性的差异进行分离(注意较高的pH的碱性溶液中易于消旋化)
2)利用色谱法进行分离得到生物碱单体纯品
3)沉淀法：将碱水液用酸调pH弱酸性，加生物碱的沉淀试剂，使水溶性生物碱与试剂生成不溶于水的复合物或盐而析出，滤取沉淀，净化、分解即得水溶性生物碱。

(如用磷钨酸、硅钨酸作沉淀剂时，所得的生物碱复合物沉淀用氢氧化钡或氢氧化钙分解。

如用重金属盐作沉淀剂，则所得的生物碱沉淀物可通硫化氢气体分解。

)
补充部分内容：洋金花
洋金花是中药麻醉药的主药，其具有止咳平喘、解痉止痛作用，主要有效成分是生物碱。

检识
这类生物碱均能和生物碱的沉淀试剂反应，生成沉淀。

鉴别这些生物碱的化学反应有以下几种：
①氯化汞反应：可区别莨菪碱和东莨菪碱。

莨菪碱能和氯化汞的乙醇溶液反应，生成黄色沉淀，加热后沉淀转为红色；而在同样条件下，东莨菪碱只能生成白色沉淀。

这是由于莨菪碱碱性强，加热时使氯化汞转变为砖红色的氧化汞，而东莨菪碱碱性弱，只能与氯化汞生成白色的分子复盐。

② Vitali反应：除樟柳碱外，洋金花中的具有莨菪酸结构的生物碱用发烟硝酸处理进行硝化反应，而后再和苛性碱的醇溶液反应，发生双键重排生成具有醌式结构的衍生物，呈现深紫色，最后消失。

③过碘酸乙酰丙酮反应：用于鉴别樟柳碱。

樟柳碱分子中的羟基莨菪酸具有邻二羟基结构，可被过碘酸氧化生成甲醛，再在乙酸中与乙酰丙酮反应，缩合生成黄色的二乙酰基二甲基二氢吡啶。