植物克隆的技术基础是-理论基础是-

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人教版高中生物选修3知识点整理及重点题型梳理植物细胞工程植物克隆技术

精品文档用心整理人教版高中生物选修三知识点梳理重点题型（常考知识点）巩固练习常考知识点植物细胞工程（植物克隆技术）【学习目标】1、简述植物组织培养和植物体细胞杂交技术。

2、体验植物组织培养技术。

3、列举植物细胞工程的实际应用。

【要点梳理】要点一：克隆——无性繁殖系【植物细胞工程（植物克隆技术）369167 克隆】1.分子水平的克隆:DNA 复制上很多碱基序列相同的DNA2.细胞水平的克隆细胞细胞分裂很多遗传物质相同的细胞3.个体水平的克隆组织、器官细胞分裂遗传背景相同的新个体要点二：植物细胞工程的基本技术1.细胞的全能性（1）遗传基础生物体细胞一般都是由受精卵经有丝分裂形成的，因而都含有生物体的一整套遗传物质，都具有发育成完整个体的潜能。

（2）不能表现的原因在生物体上不能表现出其全能性，只能通过细胞分化形成不同的组织、器官，这是因为在特定的环境、激素等的影响下基因选择性表达的结果。

2.植物细胞表现其全能性的条件（1）脱离母体。

（2）植物组织培养时，培养基中除含有一定的水分、无机盐外，还要添加一定的植物激素（如生长素、细胞分裂素），这有助于愈伤组织分化为不同组织和器官。

（3）在植物组织培养的前期对光照无需求，在后期需要光照条件，这有利于细胞生长、分化。

3．植物组织培养（1）过程：在无菌条件下，将植物体的器官或组织片段（如芽、根尖或花药）切下来，放在适当的人工培养基上进行离体培养，这些器官或组织就会进行细胞分裂，形成新的组织。

这种组织的细胞排列疏松而无规则，是一团无定形的薄壁细胞——愈伤组织。

原来已经分化，并且具有一定功能的体细胞（或性细胞），丧失了原有的结构和功能，又重新恢复了分裂功能，叫做细胞的脱分化。

将处于脱分化状态的愈伤组织，移植到合适的培养基上继续培养（在适当的光照、温度等条件下）愈伤组织就会重新进行分化，产生出植物的各种组织和器官（如根、茎、叶等），进而发育成一棵完整的植株，这个过程叫做植物细胞的再分化。

生物植物细胞工程的知识点总结

生物植物细胞工程的知识点总结生物植物细胞工程的知识(一)克隆1.克隆clone：无性繁殖系(只由一个模板分子、母细胞或母体直接形成新一代…)2.克隆技术cloning：从众多基因或细胞群体中通过无性繁殖和选择获得目的基因或特定类型细胞的操作技术3.内容：(1)分子水平：基因克隆即目的基因的复制(受体细胞的无性繁殖)、分离(特定基因探针选择、钓取目的基因)过程(2)细胞水平：杂交瘤制备单克隆抗体(3)个体水平：不通过两性细胞的结合，从一个单一(体)细胞繁殖出生物个体——胚胎细胞克隆以胚胎/卵细胞作为供体、利用核移植，不是严格意义上的动物个体克隆4.条件：(1)理论条件：细胞全能性/有发育成完整新个体的全套遗传物质(根本原因)(2)基本条件：①具有包含物种完整基因组的细胞核的活细胞②具有能有效调控细胞核发育的细胞质物质 e.g去核卵细胞③完成胚胎发育的必要的环境条件 e.g胚胎早期培养环境/子宫5.非正面影响：丰富生物多样性，促进生物进化，维护生态平衡(二)植物克隆1.全能性表达的难易程度：(1)受精卵>生殖细胞>胚胎/全能干细胞>多能(干)细胞>专能(干)细胞>体细胞;PS生殖细胞在一定刺激下染色体可加倍;一些动物存在孤雌生殖(2)植物细胞>动物细胞;低等动物>高等动物PS不同种类植物或同种植物的不同基因型个体间全能性的表达程度大不相同2.植物组织培养(植物克隆的技术基础)(1)理论基础：植物细胞全能性，即植物体的每个生活细胞都具有遗传上的全能性，因而都具有发育成完整植株的潜能(2)过程：①离体植物细胞、组织或器官(外植体)→获得愈伤组织→诱导形成试管苗→新植株PS外植体选取形成层(分生组织)部分易于诱导形成愈伤组织A.培养条件：首先是离体培养(生物体内细胞中基因在特定时间和空间条件下选择性表达，细胞分化为不同组织、器官，故无法表现出全能性)半/固体培养基(固体为例)a.营养物质：水、无机盐、蔗糖、维生素、有机添加剂(氨基酸、琼脂凝固剂等)b.植物激素/生长调节剂(适当浓度配比诱导分化出芽/根的顶端分生组织/花)——CTK中等量IAA少量诱导脱分化，CTK、IAA比例合适诱导根芽分化c.无菌条件(外植体70%酒精消毒、器械高温蒸汽灭菌)——杂菌争夺产毒d.适宜的pH、温度和渗透压B.光照：若外植体是(带叶)茎段，不经历脱分化再分化，组培全过程均需要光照;若外植体是非光合作用部位(如胡萝卜块根)，再分化成芽后光照C.试管苗移栽前需炼苗(草炭土/蛭石，逐渐降湿)D.愈伤组织：排列疏松的高度液泡化的活的薄壁细胞团②外植体→愈伤组织→摇床液体悬浮培养分散成单细胞→胚状体→人工种子PS 单细胞植物克隆，类似受精卵的卵裂、分化、器官发生、形态建成单细胞：细胞质丰富、液泡小、细胞核大(胚性细胞特征)③酶解细胞壁→原生质体培养→新植株(2)用途：微型繁殖、制造人工种子(胚状体阶段)、单倍体育种、作物脱毒(植物分生组织细胞，分裂旺盛病毒极少Cf抗病毒)、在培养基中加入不同浓度的氯化钠溶液，可诱发和筛选抗盐植株细胞产物工厂化生产(愈伤组织阶段已可，试管培养苗、细胞培养反应器也可)(3)长期培养后的全能性下降原因：染色体畸变、核变异、非整倍体产生;细胞或组织中激素平衡被打破;细胞对外源生长物质的敏感性改变;形成缺乏成胚性的细胞系——植株在多次继代培养后，会逐渐丧失细胞全能性的表达能力3.原生质体融合/植物体细胞杂交(不同植物)获得原生质体：在甘露醇溶液环境(较高渗透压)中用纤维素酶和果胶酶混合液处理用网筛过滤原生质体到离心管内，离心后收集沉淀物，用等渗溶液洗涤;检验原生质体是否符合要求：依据渗透作用原理，采用低渗胀破法(见比较表格)4.植物细胞工程：培养植物细胞(包括原生质体)，借用基因工程技术将外源DNA导入受体细胞或通过细胞融合将不同源的遗传物质重新组合，再通过细胞培养，获得具有特定性状的植株C细胞工程：细胞培养和细胞融合(若基因型不同为细胞杂交)——基因定位：利用细胞杂交中染色体丢失与特定基因产物的对应关系生物动物细胞工程的知识动物细胞工程1. 动物细胞培养指明“动物”细胞培养(1)概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。

高中生物选修3(浙科版)知识点总结

第一章基因工程一、工具酶的发觉和基因工程的诞生1、基因工程的概念：（1）广义的遗传工程：泛指把一种生物的遗传物质（细胞核、染色体脱氧核糖核酸等）移到另一种生物的细胞中去，并使这种遗传物质所带的遗传信息在受体细胞中表达。

（2）基因工程：就是把一种生物的基因转入另一种生物体中，使其产生我们须要的基因产物，或者让它获得新的遗传性状。

基因工程的核心是构建重组DNA分子。

由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做DNA 重组技术。

（3）基因工程诞生的理论基础：DNA是遗传物质的发觉过程、DNA双螺旋结构的确立、遗传信息传递方式的认定。

2、基因工程的基本工具（1）“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）①来源：主要是从原核生物中分别纯化出来的。

②功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并能切割（使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开），因此具有专一性。

例如：某种限制性核酸内切酶能识别的序列是GAATTC,能在G和A之间切割DNA，如下图所示。

黏性末端黏性末端③结果：能将DNA分子切割成很多不同的片段。

备注：不同DNA分子用同一种限制性核酸内切酶切割形成的黏性末端都相同；同一个DNA分子用不同限制性核酸内切酶切割，产生的黏性末端一般不相同。

（2）“分子缝合针”——DNA连接酶①作用：将具有末端碱基互补的2个DNA片段连接在一起（缝合磷酸二酯键）形成的DNA分子称为重组DNA 分子。

因此，DNA连接酶具有缝合DNA片段的作用，可以将外源基因和载体DNA连接在一起。

（3）“分子运输车”——载体——质粒①载体具备的条件：1）能在受体细胞中复制并稳定保存。

2）具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。

3）具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。

②最常用的载体——质粒：质粒在细菌中以独立于拟核之外的方式存在，是一种特殊的遗传物质，并具有自我复制实力的双链环状DNA分子。

人教版教学课件2.2.1动物细胞培养和核移植技术

4.动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于 D ） ------------------------------（ A.培养基不同； B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行； C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能； D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株。
二、克隆技术 1、概念：克隆就是无性繁殖，具体地说，是指一个共同的祖先，通过无性繁殖的方法产生出来的一群遗传特性相同的DNA分子、细胞或个体。 a.分子水平上：一般指DNA克隆。 b.细胞水平上：指一个单一的细胞分裂所形成的细胞群体。 c.细胞水平上：指基因型完全相同的两个或一个群体。
体细胞
代孕母体
归纳:
1.共分成两大阶段：核移植和胚胎移植
2.取卵母细胞作受体细胞的原因是:它是最大的细胞,易操作；含有激发细胞核全能性的物质
3.严格来说新个体有卵母细胞的细胞质所以有两个亲本的性状
减数第二次分裂中期（MⅡ卵母细胞）
去核的卵母细胞
供体细胞注入去核卵母细胞
胚胎移植
受体细胞激活，完成减数分裂、发育
5.什么叫单层细胞培养 1957年，科学家采用胰蛋白酶消化处理和应用液体培养基的方法，获得了单层细胞培养。单层培养法的出现，对细胞培养的发展起了很大的推动作用。
6.去核的方法有哪些？目前核移植技术中普遍使用的去核方法是显微操作去核法。还有人采用其他方法，如梯度离心、紫外光短时间照射、化学物质处理等。这些方法是在没有刺破透明带或卵母细胞质膜的情况下，去除细胞核或使卵细胞核DNA变性，从而达到去核目的。
动物细胞特点？ • 分化潜能变窄：随着细胞分化程度的提高而逐渐受到限制，分化潜能变窄，这是指整体细胞而言。 • 细胞核仍具有全能性：细胞核，它含有保持物种遗传性所需的全套基因，而且并没有因细胞分化而丢失基因，因此高度分化细胞的细胞核仍具有全能性

《植物细胞的全能性》PPT课件

3、表现全能性的条件有哪些？离体、提供营养物质、激素及其它适宜条件。
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22
反馈练习
1.下列属于组织培养的是：（ A ）
A.花粉培养成单倍体植株 B.芽发育成枝条 C.根尖分生区发育成成熟区 D.未受精的卵发育成植株
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2.在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，下列
第二节植物的克隆
植物克隆的技术基础是----植-物--组--织--培-养------，
理论基础是------植--物--细-胞--的--全--能-性-----------
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1
植物组织培养
脱分化
再分化
离体、消毒
的植物器官、脱分化愈伤
组织或细胞
组织
再分化
胚状体
根、芽
植物体
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11
强调几个概念：
愈伤组织：
植物组织块切口处的细胞在创
伤的刺激下发生脱分化，继续
分裂增殖，形成一种相对没有
分化的活的薄壁细胞团组成的
新生组织。
植物细胞的脱分化：由高度分化的植物器官、组织
或细胞产生愈伤组织的过程，又称去分化。
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12
获取外植体
移栽
无菌接种脱分化诱导愈伤组织
哪一项条件是不需要的（C ）
A.消毒灭菌
B.适宜的温度
C.充足的光照
D.适宜的养料和激素
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24
3.要将胡萝卜韧皮部细胞培养成完整
植株，不需要（ C ）
A.具有完整细胞核的细胞
B.离体状态
C.导入外源基因

2021年高三生物小题专练2

年高三生物小题专练21．下列关于细胞的分子组成和基本结构的阐述，错误．．的是A. C、H、O、N、P是ATP、染色质、核苷酸共有的化学元素B. 线粒体、核糖体、染色体、叶绿体等结构中都含有DNAC. 糖蛋白、载体、受体、限制性核酸内切酶都是具有识别作用的物质D. 脂质中的磷脂是构成细胞膜的重要物质，所有细胞都含有磷脂2．结核杆菌是结核病的病原体，近年来因抗药菌株增多等原因，使人类结核病的发病率和死亡率上升，下列有关结核杆菌的叙述，正确的是A．结核杆菌的基本结构包括细胞壁、细胞膜、细胞质和细胞核B．结核杆菌抗药性的产生是应用抗生素诱导基因突变的结果C．接种卡介苗后，T细胞受刺激成为记忆细胞，产生相应的抗体D．感染结核杆菌后，机体主要通过特异性免疫的作用将其消灭3．下列有关造血干细胞中物质运输的途径，可能存在的是A．吸收的葡萄糖：细胞膜——细胞溶胶——线粒体B．合成的细胞膜蛋白：高尔基体——核糖体——细胞膜C．转录的mRNA：细胞核——细胞质基质——高尔基体D．合成的DNA聚合酶：核糖体——细胞溶胶——细胞核4．在人体的内环境中，可以发生的生理过程是A．血浆蛋白和血红蛋白的合成 B．丙酮酸氧化分解，产生二氧化碳和水C．抗体与相应的抗原发生特异性的结合 D．食物中的淀粉经消化，最终形成葡萄糖5．盐碱地中生活的某种植物，其细胞的液泡膜上有一种载体蛋白，能将细胞质中的Na+逆浓度梯度运入液泡，减轻Na+对细胞质中酶的伤害。

下列叙述错误．．的是A．Na+进入液泡的过程属于主动转运 B．Na+ 进入液泡的过程体现了液泡膜的选择透性C．该载体蛋白作用的结果不利于增强细胞吸水能力D．该载体蛋白作用的结果有助于提高植物的耐盐性6．视网膜母细胞瘤为眼部恶性肿瘤，其发病与RB基因有关。

RB基因编码的蛋白质称为RB 蛋白，分布于核内，能抑制细胞增殖。

正常人体细胞中含有一对RB基因，当两个RB基因同时突变时，会发生视网膜母细胞瘤。

植物克隆以及养育方式

一、植物克隆的基本技术 ——植物组织培养
植物克隆的技术基础是植物组织培养（cell and tissue culture）
1、植物组织培养的概念的理解
细胞（cell ）组织（tissue）
无性繁殖植物体
植物的克隆和养育方式
2、植物组织培养的理论基础—— 细胞的全能性
1、概念：植物体的每个活细胞具有遗传上的
植物的克隆和养育方式
植物组织培养的培养基
• 无机营养成分：大量元素及植物所必需的微量元素
• 有机营养成分 ① 含N物质：包括维生素和氨基酸 ② 碳源：2%—5%的蔗糖 ③ 琼脂：起支持作用
生长调节剂：（生长素，细胞分裂素） PH值：5.0－6.0
请同学们根据上述过程概括出植物组织培养技术的流程图，并与同植物的学克隆交和养流育方。式
（1）①表示离体的植物器，官它能被培养成为④的根本
原因是组织或细胞植物细胞的。全能性
通过调节营养物质和生细胞分裂素和激动素长调节剂的适当配比（2）诱导根的分化：
（5）再生新植株出现
IAA和增减其它激素
植物的克隆和养育方式
植物组织培养形成的愈伤组织进行培养，又可以分化形成根、芽等器官，这一过程称为：
A、脱分化 C、再分化
B、去分化
C
D、脱分化或去分化
下列不能作为植物组织培养的材料是： D
植物的克隆和养育方式
问题1 为什么胡萝卜体细胞能培养成一个完整的胡萝卜植株呢？
植物的克隆和养育方式
1958年美国科学家斯图尔德试管苗
胚状体
愈伤组织
离体组织
植物克隆的技术基础是----植-物--组--织--培-养------，理论基础是------植-植-物物-的-克细隆-和胞-养-育的-方-式全--能-性-----------

基因工程与克隆技术讲义答案

基因工程与克隆技术考点1 基因工程1.(2015·10月选考,节选)答案:限制性核酸切酶2.(2016·4月选考,节选)答案:(1)逆转录重组DNA分子农杆菌 B (2)摇床维持渗透压3.(2018·4月选考,节选)回答与基因工程和植物克隆有关的问题:(1)将含某抗虫基因的载体和含卡那霉素抗性基因的载体pBI121均用限制性核酸切酶EcoRⅠ酶切,在切口处形成。

选取含抗虫基因的DNA片段与切割后的pBI121用DNA连接酶连接,在两个片段相邻处形成,获得重组质粒。

(2)已知用CaCl2处理细菌,会改变其某些生理状态。

取CaCl2处理过的农杆菌与重组质粒在离心管进行混合等操作,使重组质粒进入农杆菌,完成实验。

在离心管中加入液体培养基,置于摇床慢速培养一段时间,其目的是 ,从而表达卡那霉素抗性基因,并大量增殖。

解析:(1)EcoRⅠ酶切目的基因和载体,在切口处形成粘性末端;DNA连接酶使具有相同粘性末端的两个片段形成磷酸二酯键,能获得重组质粒。

(2)目的基因进入受体细胞并在受体细胞维持稳定和表达的过程,称为转化。

经转化的农杆菌,在离心管中加入液体培养基,置于摇床慢速培养一段时间,以使CaCl2处理过的农杆菌恢复细胞的正常状态。

答案:(1)粘性末端磷酸二酯键(2)转化使CaCl2处理过的农杆菌恢复细胞的正常状态1.基因工程的工具2.基因工程的原理与操作步骤(1)基因工程的原理①基本原理:让人们感兴趣的基因(即目的基因)在宿主细胞中稳定和高效地表达。

②基本要素:多种工具酶、目的基因、载体和宿主细胞等。

(2)基因工程的基本操作步骤3.形成重组DNA分子(1)单酶切法将同一种限制性核酸切酶切割的质粒与目的基因片段混合,加入DNA连接酶,两两连接的产物(重组DNA分子)有以下3种:目的基因与目的基因的连接物;质粒与质粒的连接物;目的基因与质粒的连接物。

其中,只有目的基因与质粒的连接物才是真正需要的。

高中生物：第二章克隆技术 (1)

第二章、克隆技术一、克隆:即复制，产生完全相同的物质、细胞、个体等。

分子水平上的克隆:例如:细胞水平上的克隆:例如: 、线粒体、叶绿体的自我复制。

个体水平上的复制:无性繁殖(扦插、嫁接等)、植物、动物等。

细胞、个体克隆的基本条件:①含的活细胞(即细胞全能性)，②能调控细胞核发育的(如);③完成发育的必要环境条件(如诱导核-质重组细胞生长、分化的实验条件和怀胎母体的子宫环境)。

二、植物克隆植物克隆的技术基础是(一)组织培养(结合选修1和必修的相关知识):将植物细胞、组织培育成的过程。

原理:过程:主要和两个阶段[如右图图解][图解分析]①植物体细胞的全能性的实现前提是:在的状态下才能实现。

离体的植物的器官、组织或细胞可以是根、茎、叶等，或转基因的体细胞，或花粉(若为花粉时，这时的组织培养又称为技术，得到，这时的生殖方式是——有性生殖) ，同时对这些野外植株的组织细胞要进行。

②脱分化:已分化的组织、细胞恢复到的状态称为脱分化，脱分化是在的基础上实现的。

③愈伤组织:在制激下发生脱分化形成一种未分化的，具有的高度的薄壁细胞团组成的新生组织，该细胞内(有、没有)叶绿体，细胞的代谢类型是。

④培养基的成分:含和的琼脂培养基，物理性质:【选修1】基础培养基: (物理性质: ）培养基: MS培养基+NAA (生长素类似物) +BA (细胞分裂素类似物) +琼脂+蔗糖培养基: MS培养基+NAA (生长素类似物) +琼脂+蔗糖⑤培养的条件:无菌操作【选修1:70%乙醇浸泡10min, 在5%次氣酸钠浸泡5min,再用另一5%次氯酸钠浸泡5min,最后在超净台中用清洗习】【选修1】还需要温度，每天光照不少于的条件。

⑥将愈伤组织分散成单个的方法是:在上法。

分散成的单个细胞称为，该细胞的特点:细胞质，液泡而细胞核。

该细胞发育成完整植株要依次经历细胞团、、心形胚和时期。

⑦湿度锻炼: 【选修1】将苗移至中，保持以上湿度，2-3天后打开玻璃罩逐渐降低湿度，直到将罩全部打开处于自然湿度为止。

克隆技术在现代农业中的应用

克隆技术在现代农业中的应用随着科技的不断发展，克隆技术被成功地应用于现代农业。

克隆技术的理论基础是体细胞核移植技术，它允许选取优异的动、植物个体并在无性繁殖过程中生产基因相同的后代。

这种技术已经在畜牧、养殖和植物种植中得到广泛应用，成为促进农业发展的重要手段之一。

1.克隆技术在畜牧养殖中的应用克隆技术在畜牧养殖中的应用主要是针对优质畜种，在不影响其基因优势的前提下，通过克隆技术获得更多后代，从而提高繁殖效率。

常见的应用方式是将高质量的动物捐赠其细胞过程中，获得一系列基因相同的后代。

比较著名的就是2003年诞生的“圆梦”，它是一只被克隆繁殖出来的嫩牛。

其捐赠者是来自新西兰的黑白围裙卓越剧团，是一冠品种。

通过克隆技术，从Misa的体细胞中提取细胞核、移植到牛卵母细胞中，然后移植到代孕母牛体内，此次嫩牛圆梦成功，使世界范围内的细胞核移植研究开启了新的篇章。

此外，克隆技术也可以通过复制人工授精的优异种牛，从而实现优质畜种的大规模繁殖。

这不仅通过减少人工授粉的时间和成本增加了生产效率，也可以通过缩减繁殖周期让农场的收益得到更好的利用。

2.克隆技术在植物种植和改良中的应用植物种植和改良是另一个广泛应用克隆技术的领域。

基于克隆技术的植物育种工作已经展现出良好的增产潜力，可帮助农场主获得更多的物质生产。

通过从优质植物中获取细胞，并通过体细胞核移植技术获得相同基因的后代，这种技术可以帮助种植者获得更多的优质植物，而不必担心杂种化的问题。

另外，克隆技术还可以用于草地改良。

随着越来越多的草坪出现，草地的改良已经成为小农场和大农场共同面临的问题。

通过克隆技术，可以从原始草地中选择出最优异的草种，并将其在别处复制繁殖，从而帮助草地更好地繁殖和保护，提高牛羊的饲料质量。

3.未来克隆技术在农业中的前景虽然克隆技术在现代农业中有着广泛的应用，但随着科技的不断进步，其前景将更为广泛。

通过基因修饰和基因编辑技术，可以使基因不再局限于克隆繁殖，而拥有更多的应用范围。

基因工程生物知识点

第一章基因工程基因工程是狭义的遗传工程，遗传工程的核心是构建重组DNA分子。

基因工程也称为“重组DNA技术”。

第一节工具酶的发现和基因工程的诞生基因工程的理论基础：DNA是遗传物质，DNA的双螺旋结构，以及遗传信息的传递方式。

基因工程的技术保障：限制性核酸内切酶，DNA连接酶和质粒载体发现与应用。

一、限制性核酸内切酶：能够识别和切割DNA分子内一小段特殊核苷酸序列的酶。

（平末端和黏性末端）限制性核酸内切酶可作为切割DNA分子的手术刀，它的发现和应用，使DNA重组成为可能。

二、DNA连接酶：将具有末端碱基互补的2个DNA片段连接在一起，形成的DNA分子称为重组DNA分子。

DNA连接酶具有缝合DNA片段的作用。

三、质粒：能够自主复制的双链环状DNA分子，它们在细菌中以独立于大型DNA分子之外的方式存在，是一种特殊的遗传物质。

最常用的是大肠杆菌的质粒，其含有抗生素抗性基因。

标志基因工程诞生的试验：通过重组，使大肠杆菌同时具有四环素和卡那霉素的抗性。

四、基因工程的载体载体是运载外源DNA进入宿主细胞的车子，即运载工具。

除质粒外，基因工程载体还有入噬菌体、植物病毒和动物病毒。

入噬菌体：将外源基因载入大肠杆菌等宿主细胞。

植物病毒：将外源基因带入植物细胞。

动物病毒：将外源基因带入动物细胞。

第二节基因工程的原理和技术基因工程的基本原理是让人们感趣的基因（目的基因）在宿主细胞中稳定和高效表达。

基因工程的基本要素：工具酶、目的基因、载体和宿主细胞。

基因工程的基本操作步骤：A目的基因的获得；B重组DNA的形成；C重组DNA导入受体细胞（宿主细胞）；D筛选含有目的基因的受体细胞；E目的基因的表达。

一、获得目的基因目的基因序列已知：化学合成方法合成目的基因，PCR扩增目的基因。

目的基因序列未知：构建基因文库。

二、形成重组DNA分子用相同的限制性核酸内切酶分别切割目的基因和载体，两者形成相同的黏性末端，然后用DNA连接酶将目的基因和载体连接在一起，形成重组DNA分子。

生物专题细胞工程之动物细胞工程题库详解

生物专题细胞工程之动物细胞工程题库详解一、单项选择题（共80小题；共160分）1. 动物细胞融合的原理是A. 动物细胞没有识别能力B. 动物细胞易被病毒感染C. 细胞膜具有流动性D. 动物细胞膜易被击穿2. 能使动物细胞融合的特有的诱导因子是A. 离心B. 灭活的病毒C. 电刺激D. 振动3. 科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是A. 经过免疫的淋巴细胞B. 不经过免疫的淋巴细胞C. 经过免疫的淋巴细胞D. 不经过免疫的淋巴细胞4. 动物细胞工程常用的技术手段中，最基础的是A. 动物细胞培养B. 动物细胞融合C. 生产单克隆抗体D. 胚胎移植、核移植5. 进行动物细胞培养时，选用的材料是A. 衰老退化的动物细胞B. 成熟动物个体的体细胞C. 动物的受精卵D. 动物胚胎或幼年个体的细胞6. 动物细胞融合与植物原生质体融合的理论基础是A. 细胞膜的流动性B. 细胞膜的选择透过性C. 细胞质的流动性D. 细胞质中酶的活性7. 用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织细胞A. 容易产生各种变异B. 具有更强的全能性C. 取材十分方便D. 分裂增殖的能力强8. 为了让用于培养的动物组织细胞分散开以便配制成一定浓度的细胞悬液，选取来的动物组织应选用下列哪种物质处理A. 胃蛋白酶B. 胰蛋白酶C. 盐酸D. 胰脂肪酶9. 动物细胞工程常用的技术手段中，最基础的是A. 动物细胞培养B. 动物细胞融合C. 单克隆杭体D. 胚胎、核移植10. 动物细胞培养的细胞来自于A. 任何个体的细胞B. 只能取自动物胚胎细胞C. 只能取自幼龄动物的组织细胞D. 胚胎或幼龄动物的器官和组织细胞11. 细胞株的特点是A. 遗传物质没有改变，可以无限传代B. 遗传物质发生改变，不可无限传代C. 遗传物质没有改变，不可无限传代D. 遗传物质发生改变，且有癌变特点，可以无限传代12. 动物细胞工程技术的基础是A. 动物细胞融合B. 单克隆抗体C. 胚胎移植D. 动物细胞培养13. “国际频道”曾报道，广东出入境检疫部门连续两次从美国进口冻猪肾和加拿大进口冻猪肉中检测出兽药残留物—莱克多巴胺。

植物的克隆

以诱导芽的分化. （
）
6.植物细胞工程技术就是在原生质体培养的基础上的原生质
体融合技术。
（
）
1、细胞分化是生物界普遍存在的一种生命现象，下列不正确的是
A．分化发生在生物体的整个生命进程中
B．分化是基因在特定的时间和空间条件下选择性表达的结果
C．未离体的体细胞不会表现出全能性 D．分化过程中遗传物质发生了改变
① 含N物质：包括维生素和氨基酸 ② 碳源：2%—5%的蔗糖 ③ 琼脂：起支持作用 • 激素：生长素，细胞分裂素和赤霉素 • PH值： 5.0－6.0 ②切取小组织块（消毒的根茎叶芽）
——外植体 ③接种，获得愈伤组织（创伤组织）
④诱导愈伤组织，再生出新植株
条件：
• 含有全部营养成分的培养基、 • 无菌环境、 • 适合的PH、 • 一定的温度、 • 空气、 • 适时光照等。
2、体现：（1）受精卵的全能性最高
受精卵＞生殖细胞＞体细胞（2）植物细胞的全能性﹥动物细胞（3）不同植物或同一植物的不同基因型
的个体，细胞的全能性表达程度不同。
4、全能性的表达条件：
离体状态、营养物质、激素、其它外界条件
5. 培养物胚胎发生和器官形成能力下降原因？
6. 植物克隆成功的条件：
愈伤组织或创伤组织：
是一种由相对没有分化的活的薄壁细胞团组成的的新生细胞（细胞排列疏松、无规则）。
想一想：产生的愈伤组织细胞与叶细胞相比
（1）染色体的数目是否相同？
相同
（2）染色体上所含的遗传物质是否相同？相同
（3）细胞的形态结构是否相同？不同
愈伤组织胚性细胞胚状体
应用1：
培养过程中，在培养基上需加入蔗糖，培养时需要照光，那么，培养的植物到底是自养型还是异养型？光的作用是什么？对于上述疑问，某研究性学习小组进行了下列实验：一组在培养基中加30%的蔗糖，另一组不加蔗糖，接种后，每组再分成两个小组，分别在光下和暗中培养。1个月后，观察植物体生长、分化情况，结果为下表：

高中生物选修3(浙科版)知识点总结

高中生物选修3(浙科版)知识点总结第一章基因工程一、工具酶的发现和基因工程的诞生1.基因工程的概念基因工程是将一种生物的基因转移至另一种生物体中，使其产生需要的基因产物或获得新的遗传性状。

基因工程的核心是构建重组DNA分子。

2.基因工程的基本工具限制性核酸内切酶（限制酶）是“分子手术刀”，能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并切割使其断开，具有专一性。

DNA连接酶是“分子缝合针”，将具有末端碱基互补的DNA片段连接在一起形成重组DNA分子。

载体是“分子运输车”，具有自我复制能力的双链环状DNA分子，能在受体细胞中复制并稳定保存，供外源DNA片段插入和重组DNA鉴定和选择。

二、基因工程的原理和技术基因工程的基本原理是让目的基因在宿主细胞中稳定和高效地表达。

为了实现基因工程，需要准备多种工具酶、目的基因、载体和宿主细胞等基本要素，并按照一定的程序进行操作：目的基因的获得、重组DNA的形成、重组DNA导入受体细胞（宿主细胞），筛选含有目的基因的受体细胞、基因表达。

目的基因的获得有两种方法：一种是目的基因的序列已知，可以用化学方法合成目的基因，或者用聚合酶链式反应（PCR）扩增目的基因；另一种是目的基因的序列未知，需要建立一个包括目的基因在内的基因文库，从中寻找目的基因。

形成重组DNA分子的方法是使用相同的限制性核酸内切酶分别切割目的基因和载体DNA，然后用DNA连接酶将它们连接在一起，形成重组DNA分子。

将重组DNA分子导入受体细胞的方法是使用适当的方法将形成的重组DNA分子转移到合适的受体细胞中，常用的受体细胞有大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌和动植物细胞等。

筛选含有目的基因的受体细胞需要使用选择性培养基进行筛选，因为并不是所有细胞都能接纳重组DNA分子。

最后，目的基因在宿主细胞中表达，能产生人们需要的功能物质。

基因工程的核心是构建重组DNA分子，而DNA的遗传信息传递方式的认定、限制性核酸内切酶、DNA连接酶和质粒载体的发现与应用为基因工程提供了技术上的保障。

植物组织培养和植物克隆

植物组织培养和植物克隆实验11植物组织培养1.植物组织培养的原理是植物细胞的全能性。

2．植物组织培养的各个步骤应严格执行无菌操作技术，所以在生产时为了防止污染，植物组织一般要先进行消毒，先用70%的酒精浸泡，再用5%的次氯酸钠浸泡，最后用无菌水清洗。

各种器皿和培养基等通常用高压蒸汽灭菌法灭菌。

3.与用于培养微生物的LB培养基相比，植物组织培养的MS培养基中应添加生长素和细胞分裂素类似物。

4.在菊花组织培养过程中，首先将灭菌后的菊花茎段接种在含有适当比例生长调节剂的MS培养基上，并给予一定的温度和光照，使其脱分化形成愈伤组织，然后转移到含有更多丝裂原类似物苄基腺嘌呤（BA，溶于HCl）的培养基中，诱导它们生长丛生苗。

分裂后，将其转移到含有更多生长素类似物的培养基中——NAA（NAA，用NaOH 溶解）使其生根。

5．通过植物组织培养产生的幼苗需要移栽至草炭土或蛭石中，给予适宜的光照、温度和80%以上的湿度等条件，锻炼一段时间，最后再定植到土壤中。

植物克隆（1）植物克隆的理论基础是植物细胞的全能性，技术基础是植物组织培养。

（2）在植物组织培养过程中，将分离的植物组织或细胞培养在含有适当比例生长调节剂的培养基上，首先脱分化形成愈伤组织。

然后，通过调节生长素和细胞分裂素的比例，诱导芽和根，最终发育成完整植株。

或者将其放在摇床上，通过液体悬浮培养获得许多分散的单细胞。

这些单细胞属于胚胎细胞，具有细胞质丰富、液泡小、细胞核大的特点。

它们经历了细胞团、球形胚、心形胚和胚状体等阶段，最终发育成许多完整的植株。

（3）通过基因工程(转基因)方法成功导入了目的基因的植物细胞需要通过植物组织培养才能获得具有特定性状的新植株。

（4）由于植物细胞壁的存在，植物组织培养比较困难。

如果在0.5~0.6mol/l甘露醇溶液中用纤维素酶和果胶酶的混合物处理植物细胞（以保持高渗压），则去除细胞壁以获得球形原生质体，然后将其培养成完整植株，这将提高植物组织培养的成功率。

高中生物选修三《基因工程》知识点归纳

高中生物选修三《基因工程》知识点归纳1. 遗传工程：狭义：基因工程广义：把一种生物的遗传物质移到另一种生物的细胞中。

2. 基因工程的核心是构建重组DNA分子。

3. 基因工程诞生的理论基础：DNA是生物遗传物质的发现，DNA双螺旋结构的确立以及遗传信息传递方式的认定。

4. 实施基因工程的条件：工具酶(限制性内切酶、连接酶、聚合酶) 目的基因：基因载体：要求：①能自我复制。

②含限制性内切酶位点。

③含筛选标记(一般为抗性基因)。

④能启动外源目的基因的转录、翻译。

⑤在细菌中，质粒有较高的拷贝数与稳定性。

受体细胞:微生物、动植物细胞(用氯化钙处理大肠杆菌可增加其细胞壁通透性，方便重组质粒进入。

)5. 基因工程的工具：①限制性核算内切酶可作为切割DNA分子的手术刀，使DNA重组成为可能②DNA连接酶具有缝合DNA的作用，可以将外源基因和载体DNA连接在一起。

③载体：最常见的载体为大肠杆菌质粒，质粒常含抗生素抗性基因。

(质粒是能自主复制的双链环状DNA，在细菌中独立于染色体存在的特殊遗传物质)。

除常用细菌和酵母的质粒外，改造和修饰后的噬菌体和病毒DNA均可作为基因载体。

向双子叶植物导入基因时，常用土壤农杆菌的Ti质粒。

6. 基因工程的基本操作步骤：目的基因的获得、重组DNA的形成、重组DNA 导入受体细胞、筛选含有目的基因的受体细胞、目的基因的表达。

7. 获得目的基因的方法：若化学序列已知，则可用化学方法合成目的基因或用PCR扩增目的基因。

若序列未知，则应建立包含目的基因的基因文库后，从中寻找。

8. 转基因植物解决了传统育种中远缘亲本难以杂交的缺陷，并可以定向的改变植物的性状。

9. 基因工程在医药工业和医学领域的应用主要包括基因工程药物和基因治疗。

10. 基因工程药物有胰岛素，干扰素(病毒入侵细胞后产生的糖蛋白，有抗病毒，抗细胞分裂和免疫调节等多种生物学功能，是治疗病毒性肝炎和肿瘤的药物)，乙型肝炎疫苗等。

11. 基因治疗是向目标细胞中引入正常功能的基因，以纠正或补偿基因的缺陷，达到治疗的目的。

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