保健食品中肉碱的测定
婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱测定的方法验证
婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱测定的方法验证作者：石永倩张天博来源：《企业科技与发展》2021年第12期【摘要】為了验证采用分光光度法测定婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱含量方法的准确性与可靠性，判断测定结果是否达到标准要求，文章采用《食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定》中的方法测定乳品中左旋肉碱的含量，并根据《合格评定化学分析方法确认和验证指南》中的相关规定对其线性、线性范围、检出限、定量限、精密度、回收率6个参数进行验证。
【关键词】左旋肉碱;脂肪代谢;方法验证;适用性【中图分类号】TS252.7 【文献标识码】A 【文章编号】1674-0688（2021）12-0025-03左旋肉碱，别名L-肉碱或维生素BT，分子式C7H15NO3，是一种白色晶体或者白色透明粉末，易溶于水、酒精和碱性溶液，200 ℃以上熔化分解。
左旋肉碱是由俄国科学家Gulewitsch和Krimberg在骨骼肌中发现的。
左旋肉碱是参与生物体新陈代谢的重要物质，具有多种生理功能。
奶粉中的左旋肉碱是促进奶粉中的脂肪分解、代谢和供能的重要营养素，同时能促进体内的脂肪转化为能量，属于一种类氨基酸类的营养物质[1]。
人体内的左旋肉碱主要来源于羊肉、牛肉、猪肉等红色肉类，奶粉中适量添加左旋肉碱对人体无害，可以促进体内脂肪代谢和利用。
婴幼儿饮食结构比较单一，主要饮食来源为各种乳制品，主要的能量来源为乳制品中的脂肪，宝宝体内缺乏左旋肉碱，导致脂肪的利用率下降，不利于宝宝体格发育，添加左旋肉碱可以提高宝宝对奶粉中脂肪的利用率[2]。
本文研究的目的在于通过对方法的线性、线性范围、检出限、定量限、精密度、回收率6个指标进行验证，证明采用这种检测方法测定婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的可行性[3]。
1 试验方法——《食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定》（GB 29989—2013）1.1 原理概述将样品中的蛋白质用高氯酸溶液沉淀，过滤后的滤液用氢氧化钾溶液皂化，使左旋肉碱游离。
功效成分及卫生指标检验规范
1 主题内容和适用范围本规范规定了保健食品和原料的卫生要求、功效成分和卫生指标的检验项目和方法。
本规范适用于保健食品的检验受理、项目的确定和方法的选择。
2 基本要求凡保健食品，必须符合"保健食品通用卫生要求"，该"要求"所列的各项目必须按规定执行。
附表1所列检测项目是对"保健食品通用卫生要求"补充规定。
保健食品中使用的添加剂必须符合＂GB2760食品添加剂使用卫生标准＂规定的品种名单。
检测机构根据产品配方检测合成色素、防腐剂、甜味剂及抗氧化剂的含量。
凡使用有机溶剂提取物为原料的产品，其使用的有机溶剂要符合GB2760附录D食品工业用加工助剂推荐名单要求。
保健食品应具有与产品配方和申报的保健功能相适应的功效成分或特征成分，申报时须检测配方中主要原料所含的功效成分或特征成分。
附表2所列原料为主的产品须检测表中规定的项目。
保健食品评审专家委员会可根据产品的具体配方、工艺等相关资料，要求申报单位检测指定的项目。
功效成分、特征成分、营养成分及卫生学指标的检测方法应根据其产品适用的方法学范围选择国家标准、卫生部部颁标准、行业标准以及国际上权威分析方法进行测定。
在没有相应的标准方法之前，其产品中所声称（具有）的功效成分或特征成分的检测方法及检测所需的标准品对照品及特殊试剂均由申报单位提供，并说明其产品中功效成分或特征成分分析方法的来源。
如属自主开发研究的分析方法，需提供方法学研究的相关资料，同时将方法学研究的资料报卫生部保健食品功效成分检测协作组（中国疾病预防控制中心营养与食品安全所）备案，必要时卫生部将组织方法学验证，其费用由申报单位承担。
检验机构受理保健食品检测时，申报单位应提供该产品的配方、工艺及企业标准等相关资料。
2.9卫生部对保健食品的功效成分的检测机构进行认定，检测机构的名单由卫生部门公布。
保健食品的功效成分检测工作应在卫生部认定的检测机构进行。
4-保健食品功效成分检测技术与方法
保健食品成效成分检测技术与方法提纲一．保健食品的查验有关要求二．保健食品理化查验及常用的阐发方法介绍三．保健食品成效成分的检测四．保健食品成效成分检测其它有关问题一、保健食品的查验有关要求1、查验依据2、查验要求1、主要查验依据➢保健食品办理方法〔1996年卫生部46令〕➢保健食品注册办理方法➢卫生部健康相关产物查验机构认定与办理方法〔卫法监发［1999］第76号〕➢卫生部发布的与保健食品相关的文件➢保健食品通用卫生要求〔1996年〕➢保健〔功能〕食品通用尺度〔GB16740〕➢保健食品查验与评价技术尺度〔2003年版〕➢食品国标GB/T5009——2003➢企业尺度2、查验要求保健食品查验机构➢CDC系统➢药检系统查验要求1.保健食品应具有与产物配方和申报的保健功能相适应的成效成分或特征成分，申报时须检测配方中主要原料所含的成效成分或特征成分。
查验要求1.保健食品评审专家委员会可按照产物的具体配方、工艺等相关资料，要求申报单元检测指定的工程。
2.查验机构受理保健食品检测时，申报单元应提供该产物的配方、工艺及企业尺度等相关资料。
3.保健食品的成效成分检测工作应在SFDA和卫生部本来认定的检测机构进行。
查验要求1.成效成分或指标性成分、含量及其查验方法◆按照产物及原料确定，应与申报的功能有必然的关系◆成效成分或指标性成分、含量及其查验方法应别离列出◆依据以下二方面确定产物的成效成分〔或标记性成分〕并说明理由➢与申报保健功能有关的成效成分➢代表产物特性的标记性成分◆按尺度〔尺度〕规定的检测方法检测➢无尺度检测方法的，应用比较权威的检测方法，并标明方法的出处➢无相关检测方法的，申请人应提供详细的检测方法和方法学研究及验证成果。
研究及验证成果包罗查验方法、线性范围、精密度、准确度和至少5批加样回收率等内容及验证陈述查验要求成效成分、特征成分、营养成分及卫生学指标的检测方法应按照其产物适用的方法学范围选择以下进行测定：国家尺度卫生部部颁尺度行业尺度国际上权威阐发方法查验要求1.在没有相应的尺度方法时，企业应建立本身的企业尺度。
肉毒碱(AC0)检测
迪信泰检测平台
肉毒碱（AC0）检测
肉毒碱（Carnitine，AC0），又称为维生素BT、肉碱、左卡尼汀（L-carmitine, LC），是一种类维生素，存在于动植物体内，是动物组织中一种必需的辅酶，与脂肪代谢有关。
具有改善心肌缺血、改善心功能、保护肝脏等作用，在临床上应用广泛。
迪信泰检测平台采用ACQUITY UPLC/TripleQuad5500（Waters/AB Sciex）方法，可实现对肉毒碱的定性定量分析。
此外，我们还提供其他酰基肉碱(C0-C18)检测服务，以满足您的不同需求。
LC-MS测定肉毒碱样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期：2~3周。
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报告包括：
1. 实验步骤（中英文）。
2. 相关质谱参数（中英文）。
3. 质谱图片。
4. 原始数据。
5. 肉毒碱含量信息。
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保健食品卫生学理化检验规范
保健食品卫生学理化检验规范（征求意见稿）Standards for Hygienic Physical and Chemical Examination of Health Food目录第一部分总则.................................................. 错误!未定义书签。
一、主题内容和适用范围 ...................................... 错误!未定义书签。
二、基本要求................................................. 错误!未定义书签。
第二部分二十五种功效成分和标志性成分检验方法.................. 错误!未定义书签。
一、保健食品中红景天苷的测定.................................. 错误!未定义书签。
二、保健食品中大蒜素的测定 ................................... 错误!未定义书签。
三、保健食品中芦荟苷的测定 ................................... 错误!未定义书签。
四、保健食品中肉碱的测定 ..................................... 错误!未定义书签。
五、保健食品中α-亚麻酸、γ-亚麻酸的测定...................... 错误!未定义书签。
六、保健食品中人参皂苷的测定.................................. 错误!未定义书签。
七、保健食品中原花青素的测定.................................. 错误!未定义书签。
八、保健食品中核苷酸的测定 ................................... 错误!未定义书签。
九、保健食品中洛伐他汀的含量测定.............................. 错误!未定义书签。
国家局关于征求保健食品中大蒜素的测定等15个保健食品功效成分或标志性成分检测方法意见的函
附件：一、保健食品中大蒜素的测定1 范围本方法适用于以大蒜及其制品为原料的保健食品中大蒜素（三硫二丙烯，C6H10S3）的含量测定。
本方法最低检出浓度为0.0430mg/mL；取100mg试样，提取定容5.0mL时，试样中大蒜素最低检出质量浓度为0.20g/100g。
本方法最佳线性范围： 0.320mg/mL～3.00 mg/mL。
2 原理：根据大蒜素为挥发性油成分，经有机溶剂提取，用气相色谱仪分析，采用外标法定量。
3 试剂除特殊说明，所用试剂均为分析纯。
3.1 无水乙醇3.2 正己烷3.3标准溶液：称取0.1000g标准品，置于10mL容量瓶中，用正己烷定容至刻度，该溶液中含大蒜素浓度为10.0mg/mL。
此溶液可在冰箱中保存七天。
取该溶液1.0mL，置于10mL容量瓶中，用正己烷定容至刻度，此溶液含大蒜素浓度为1.0mg/mL。
4 仪器4.1气相色谱仪：附氢火焰（FID）检测器4.2数据处理机或积分仪4.3分析天平：万分之一4.4超声清洗机4.5离心机：3000r/min5分析方法5.1试样提取5.1.1固体试样：称取试样适量（相当于含大蒜素5mg，精确至0.001g），加无水乙醇适量，密塞，超声70min，取出冷却，加正己烷定容（调节大蒜素含量约为1mg/mL），振摇，静置分层后，取上层溶液进样。
5.1.2液体试样吸取试样适量（相当于含大蒜素5mg，精确至0.001g），置于分液漏斗中，加5mL 正己烷振摇提取1min ，静置（或离心）分层后，取上层溶液进样。
5.2 气相色谱参考条件5.2.1 色谱柱：HP-5(30m×0.25mm)5.2.2 柱箱温度：100℃（3min ）min)10(℃200℃150℃/min 20℃/min 10−−−→−−−−→−5.2.3 进样口温度：220℃ 5.2.4 检测器温度：250℃ 5.2.5 载气：氮气（1mL/min ）5.2.6 氢气：40mL/min ；空气：400mL/min 5.2.7 进样量：1μL5.3 定性分析：在参考操作条件下，以对照品与试样比较保留时间定性。
肉碱含量测定实验报告
一、实验目的1. 了解肉碱的化学性质和检测方法。
2. 掌握高效液相色谱法（HPLC）在肉碱含量测定中的应用。
3. 通过实验，学会样品前处理、色谱条件优化、数据处理等实验技能。
二、实验原理肉碱（L-carnitine）是一种含氮有机化合物，具有促进脂肪代谢、增强免疫力等生理功能。
本实验采用高效液相色谱法测定肉碱含量，其原理是利用肉碱在特定色谱条件下的保留时间，通过比较标准品和样品的峰面积，计算出样品中肉碱的含量。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：高效液相色谱仪、超声波清洗器、电子天平、样品处理装置等。
2. 试剂：肉碱标准品、甲醇、乙腈、水等。
四、实验步骤1. 样品前处理（1）准确称取一定量的样品，加入适量的甲醇溶液，超声提取30分钟。
（2）将提取液离心，取上清液过0.45μm滤膜，备用。
2. 色谱条件（1）流动相：甲醇-水（80:20，V/V）。
（2）流速：1.0 mL/min。
（3）柱温：30℃。
（4）检测波长：215 nm。
3. 标准曲线绘制（1）准确称取肉碱标准品，用甲醇溶液配制成浓度为1.0 mg/mL的标准溶液。
（2）分别取0.1 mL、0.2 mL、0.3 mL、0.4 mL、0.5 mL标准溶液，依次加入流动相稀释至1.0 mL，制备成不同浓度的标准溶液。
（3）按照色谱条件进行色谱分析，记录峰面积，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。
4. 样品测定（1）取0.1 mL样品溶液，加入流动相稀释至1.0 mL。
（2）按照色谱条件进行色谱分析，记录峰面积。
（3）根据标准曲线，计算样品中肉碱的含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线线性范围：经实验验证，本实验的标准曲线线性范围为0.1～0.5mg/mL，相关系数R²=0.999。
2. 重复性实验：对同一批样品进行6次测定，相对标准偏差为1.2%，说明实验具有良好的重复性。
3. 准确度实验：对已知含量的样品进行测定，测定值与理论值之间的相对误差为1.5%，说明实验具有较高的准确度。
药品保健食品检测项目
药品保健食品检Байду номын сангаас项目
理化指 水分、灰分、红外鉴别、比旋度、密度、净含量、崩解时限 标 总皂甙、总黄酮、苦参碱、氧化苦参碱、肌醇、人参皂甙、红景天甙、 芦荟甙、芍药苷、洛伐他丁、L-肉碱、原花青素、大豆异黄酮、硫酸软 中药、 骨素、粗多糖、10 羟基-α-癸烯酸、大蒜素、葛根素、番茄红素、京尼 保健食 平甙（栀子苷）、吡啶甲酸铬、虫草素、水飞蓟素、三萜类、褪黑素、 品功效 蜂胶液中高粱姜素、白杨素、荷叶碱、腺苷、粗多糖、超氧化物歧化酶 成分 (SOD)、灵芝多糖、灵芝三萜、咖啡因、乌头碱、绿原酸、丹参酮ⅡA、 天麻素、大黄素和大黄酚、维生素类、矿物质等 农药残 滴滴涕、五氯硝基苯等有机氯类；对硫磷、甲胺磷等有机磷类农药 留检测 重金属 铅、镉、砷、汞、铜等 检测 微生物 菌落总数、大肠菌群、霉菌和酵母菌、致病菌等 检测 各种辅 β-环糊精、交联聚维酮等 料 西药成 环磷酰胺、头孢曲松、头孢哌酮、头孢噻肟聚合物 分
L—总肉碱测定编制说明
婴幼儿配方食品和乳粉L-肉碱的测定编制说明1、引言L-肉碱又称肉毒瘤碱或维生素BT,化学式为C7H15O3N,分子量为162.2，化学名L-β-羟基—γ-三甲胺丁酸盐，英文名为L-β-hydroxy-γ-butyrobetaine。
类似胆碱和甜菜碱的结构。
L-型具有生命活性，作为婴幼儿配方乳粉的成分之一，已在婴幼儿配方食品和乳粉中广泛使用。
目前，L-肉碱的检测方法有很多种，有生物法、化学法、酶法、荧光法、HPLC法NMR法和放射酶法。
其中以酶法、荧光法和HPLC法较为常用。
存在于产品中L-肉碱主要有两种形态：游离态与结合态，它们具有同等的生理作用。
所以测定L-肉碱的含量必须包括这两种形态。
通过试验认为酶比色法测定婴幼儿配方奶粉中的L-肉碱，具有方法灵敏度高，特异性强等特点。
测定结果能反映出样品中L-肉碱的真实状况，所以，在制定本标准时，采用酶比色法。
目前GB10765-1997、GB10766-1997、GB10767-1997、GB10769-1997等婴幼儿配方奶粉的国家标准中尚未规定L-肉碱的的含量。
根据目前此类产品的状况，婴幼儿配方乳粉的配方中，有80%企业都将L-肉碱作为重要指标进行强化，并制定为企业标准。
一般强化后样品中的L-肉碱含量在5~50mg/100g范围内。
为了适应新形势的发展，我中心与上海英特营养乳品有限公司共同起草了L-肉碱的检验标准。
1、任务来源任务来源：国家标准化制修订委员会任务编号：200794444—T—4692、制定标准的必要性和意义L-肉碱有两种光学异构体，即左旋肉碱（L-型）和右旋肉碱（D型）。
L-型具有生命活性，而（D型）则是其竞争性抑制剂。
而通常所指都是L-肉碱。
L-肉碱作为一种功能性营养物质，广泛的存在于自然界中。
大多数动物具有合成L-肉碱的能力。
L-肉碱主要存在于动物的肝、肾、脑中。
L-肉碱的主要功能是参与动物体内的脂肪代谢。
它作为载体将长链脂肪酸从腺粒体膜外输送到膜内，促进脂肪酸的β-氧化，从而促进脂肪的代谢。
保健品中左旋肉碱的反相高效液相色谱法测定
保健品中左旋肉碱的反相高效液相色谱法测定祝伟霞;杨冀州;刘亚风;魏蔚;张书胜【期刊名称】《分析测试学报》【年(卷),期】2008(27)10【摘要】采用手性衍生化法测定了不同剂型保健品中左旋肉碱的含量并拆分了左/右肉碱对映体.样品以乙醇为提取溶剂,手性试剂L-丙氨酸-β-萘胺与样品中肉碱反应,反应衍生物以磷酸二氢钾缓冲液、乙腈、四氢呋喃的混合溶液作流动相在XBridgeTM C18色谱柱(150 mm×4.6 mm i.d.,5 μm)中分离,244 nm波长下检测,在该分离条件下左旋肉碱与右旋肉碱的色谱分离度Rs≥1.7,在2.0 ～500mg/kg范围内,左旋肉碱浓度与峰面积呈良好的线性关系(Y=75.297X+1.152),相关系数为0.999 7,样品加标回收率为81% ～101%,相对标准偏差(RSD)为3.8% ～9.1%.该方法可满足实际保健品中左旋肉碱含量与纯度的测定要求.【总页数】4页(P1124-1127)【作者】祝伟霞;杨冀州;刘亚风;魏蔚;张书胜【作者单位】河南出入境检验检疫局,河南,郑州,450003;郑州大学,化学系,河南,郑州,450001;河南出入境检验检疫局,河南,郑州,450003;河南出入境检验检疫局,河南,郑州,450003;河南出入境检验检疫局,河南,郑州,450003;郑州大学,化学系,河南,郑州,450001【正文语种】中文【中图分类】O657.7【相关文献】1.反相高效液相色谱法测定饲料及饲料添加剂中L-肉碱含量 [J], 林淼;赵志辉;雷萍2.高效液相亲水作用色谱-串联质谱法同时测定婴幼儿配方乳粉中胆碱和左旋肉碱的含量 [J], 唐吉旺;袁列江;肖泳;王淑霞3.特殊医学用途婴儿配方乳粉中左旋肉碱含量测定方法优化 [J], 马晓博;吴磊;张斌;张兰天;盖丽娜4.婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱测定的方法验证 [J], 石永倩;张天博5.离子对反相高效液相色谱法测定保健食品中肉碱 [J], 赵榕;孙开奇;罗仁才因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
保健食品理化及卫生指标检验与评价技术指导原则(2020年版)
保健食品理化及卫生指标检验与评价技术指导原则（2020年版）目录第一部分总则 (3)一、主题内容和适用范围 (4)二、基本要求 (5)第二部分功效成分/标志性成分检验方法 (7)一、保健食品中红景天苷和酪醇的测定 (8)二、保健食品中大蒜素的测定 (12)三、保健食品中芦荟苷的测定 (15)四、保健食品中左旋肉碱的测定 (18)五、保健食品中α-亚麻酸、γ-亚麻酸的测定 (22)六、保健食品中人参皂苷的测定 (26)七、保健食品中前花青素的测定 (31)八、保健食品中核苷酸的测定 (33)九、保健食品中洛伐他汀的测定 (39)十、保健食品中槲皮素、山柰素、异鼠李素的测定 (43)十一、保健食品中茶氨酸的测定 (47)十二、保健食品中五味子醇甲、五味子甲素和乙素的测定 (51)十三、保健食品中腺苷的测定 (55)十四、保健食品中总皂苷的测定 (59)十五、保健食品中总黄酮的测定 (64)十六、保健食品中壳聚糖脱乙酰度的测定 (69)十七、保健食品中总蒽醌的测定 (71)十八、保健食品中10-羟基-2-癸烯酸的测定 (73)十九、保健食品中绞股蓝皂苷XL IX的测定 (77)二十、保健食品中总三萜的测定 (81)二十一、保健食品中虫草素的测定 (83)二十二、保健食品中D-甘露醇的测定 (86)二十三、保健食品中功效成分/标志性成分食品安全国家标准检测方法 (89)第三部分溶剂残留的测定 (90)第四部分违禁成分的测定 (95)第一部分总则一、主题内容和适用范围1.本指导原则规定了保健食品及其原料、辅料理化及卫生指标检验与评价的基本要求、功效成分/标志性成分检验方法、溶剂残留和违禁成分的测定要求。
2.本指导原则适用于保健食品的注册和备案检验。
二、基本要求1. 保健食品应符合《食品安全国家标准保健食品》（GB 16740）的各项要求和检验方法规定。
对于不同配方、不同形态、不同工艺的产品，申请人应同时制定符合要求的理化、功效成分/标志性成分、微生物等指标对产品质量进行有效控制。
一种通过核磁共振氢谱定量测定左旋肉碱类保健品中有效成分的方法
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202011249090.X(22)申请日 2020.11.10(71)申请人 淮阴师范学院地址 223300 江苏省淮安市长江西路111号(72)发明人 胡正松 卢明祝 阙玉和 (74)专利代理机构 南京经纬专利商标代理有限公司 32200代理人 钱超(51)Int.Cl.G01N 24/08(2006.01)(54)发明名称一种通过核磁共振氢谱定量测定左旋肉碱类保健品中有效成分的方法(57)摘要本发明公开了一种通过核磁共振氢谱定量测定左旋肉碱类保健品中有效成份的方法：采用氘代水(D 2O)作内标，吡嗪作内标完成。
选取左旋肉碱δ3.22(9H，s)及吡嗪δ8.57(4H，s)两处峰作定量分析。
测试参数：温度298.15 K，zg30脉冲，谱宽(SW)设为13，脉冲激发中心频率(O1P)为5.5，弛豫时间D1为30S，采样次数NS为32，空采次数DS为0，其他参数默认。
该方法具有良好的精密度和准确度，较低的检测限及定量限，左旋肉碱有效成份含量与定量峰面积之间具有良好的线性关系。
通过该方法测得四种左旋肉碱类保健品种有效成份含量均达到了官方标称值。
该方法准确，方便，高效，测试成本较低，可作为定量分析左旋肉碱类保健品中有效成份的方法。
权利要求书2页 说明书8页 附图4页CN 112345575 A 2021.02.09C N 112345575A1.一种通过核磁共振氢谱定量测定左旋肉碱类保健品中有效成份的方法，其特征在于，步骤为：第一步，氘代试剂的选择：称取20mg左旋肉碱类化合物，选择D2O作为氘代溶剂，选用topspin2.1软件自带Proton标准参数分别测定1H NMR谱，活泼氢均被氘代；第二步，定量峰及内标物的选择：采用Topspin 2.1软件默认参数直接测定左旋肉碱的1H NMR谱，用D2O残余溶剂峰标定化学位移，左旋肉碱定量峰为δ3.22(9H，s)，选择吡嗪为内标，其定量峰为δ8.57(4H，s)；第三步，测试参数优化：选择zg30脉冲采样，设定采样时间(aq)为4.15s，弛豫时间D1为30S，采样次数NS为32，空采次数DS为0，谱宽SW为13.00，中心频率o1p为6.1，其他参数默认；第四步，样品测试及数据处理：采用第三步优化后的测试参数测定样品的1H NMR谱；以吡嗪δ8.57(4H，s)处单峰为基准，准确积分δ3.19(9H，s)处峰面积，为减少误差，选取定量峰或内标峰的峰型轮廓线与水平基线交叉处之间作为积分区域，且内标峰与定量峰均积分5次，取其平均值作为实际积分面积。
左旋肉碱在食品检测中的研究新进展
左旋肉碱是一种白色晶状体或白色透明细粉，稳定性、溶水性和吸水性较好。
左旋肉碱存在于大多数哺乳动物组织中，属于类维生素的营养素，与动物体内的脂肪酸代谢密切相关，是一种具有调节线粒体内酰基比率、促进脂肪酸β－氧化、抗疲劳排毒和促进支链氨基酸正常代谢等多种生理功能的氨基酸物质[1]。
当前，世界上已有22个国家和地区允许在婴儿奶粉中添加左旋肉碱。
我国也规定可在婴幼儿奶粉中添加适量的左旋肉碱，以满足婴幼儿的生长需要。
因此，研究食品中左旋肉碱的检测新进展非常必要。
1左旋肉碱在食品检测中的研究新进展目前，国内外有关左旋肉碱的检测方法主要有：离子色谱法、分光光度法、液相色谱法以及液相色谱－串联质谱法等。
每种方法都有各自的优缺点，例如，分光光度法需酶解过夜，检出限较高、反应效率比较低；离子色谱法特异性比较差；液相色谱－串联质谱法虽然准确性比较高，但是仪器比较昂贵，成本太高。
随着研究的不断进步，左旋肉碱在食品检测中的研究方法也在不断发展，赵淑娟建立了乳粉中左旋肉碱含量的液相色谱串联质谱测定法。
样品20%甲酸水-乙腈提取，正交试验优化皂化条件，为15%氢氧化钾溶液，按5︰1在60℃，皂化20min 。
左旋肉碱的检出限为97.5μg/kg ，定量限为0.33mg/kg 。
低、中和高3个水平的加标回收率平均在97.5%~102.5%，RSD 值为2.4%~3.2%。
方法快速简便，灵敏度高，重复性好，已应用于乳粉中左旋肉碱的测定[2]。
李秀英等利用微波消解技术对乳粉样品进行水解，释放结合态的胆碱和左旋肉碱，优化乳粉中胆碱和左旋肉碱的微波水解快速提取方法以及超高效液相色谱－串联质谱检测的条件参数。
本方法分析速度快、灵敏度高、重复性好，与现有技术对比，该方法通过微波技术辅助水解，缩短了样品处理的时间，适用于乳粉中的胆碱和左旋肉碱的检测[3]。
宋周虎等建立一种离子对高效液相色谱方法，简便、快速检测减肥类保健食品中左旋肉碱含量。
方法：采用ODS 柱进行分离，以40mmol /L 磷酸二氢钾缓冲溶液－乙腈（95∶5）为流动相，流速：0.8mL /min ，检测波长：220nm 定量管进样20μL 。
保健食品功效成分检验要求与常用方法
保健食品功效成分检验要求与常用方法保健食品功效成分检验要求与常用方法魏锋中国药品生物制品检定所中药室（北京 100050）提纲一、保健食品及其标准概况二、保健食品的检验要求三、保健食品理化检验及常用的分析方法介绍四、保健食品功效成分和分析检测五、保健食品分析方法建立和分析方法学验证六、保健食品功效成分检测其它有关问题一、保健食品及其标准概况1、保健食品的特点2、保健食品的标准现状3、健食品的标准内容4、保健食品和药品标准的区别5、保健食品及其质量标准存在的问题和对策1、保健食品的特点《保健食品注册管理办法》明确指出保健食品是指是指声称具有特定保健功能或以补充维生素、矿物质为目的的食品。
即适宜于特定人群食用，具有调节机体功能，不以治疗疾病为目的，并且对人体不产生任何急性、亚急性或慢性危害的食品。
保健食品首先必须是食品，它必须无毒无害。
两个基本特征：一是安全性，对人体不产生任何急性、亚急性或慢性危害；二是功能性，对特定人群具有一定的调节作用，但与药品有严格的区分，不能治疗疾病，不能取代药物对病人的治疗作用。
保健食品与普通食品药品的区别药品食品、药品食品形态允许不允许不允许副作用特定人群特定人群各类人群适宜人群不可以可以可以长期服用有限量有限量不限量食用量药品属性有传统食品和药品属性传统食品属性治疗疾病，有治疗作用营养、感官、保健、无治疗作用营养、感官、无保健作用作用药品保健食品普通食品项目2、保健食品的标准现状标准化是保健食品行业的迫切需要，要鼓励保健产业创新、提升保健产品质量就要从源头抓起，从规范保健品原料做起，而大部分保健产品原料，特别是天然产物标准匮乏目前保健食品原料的标准体系不健全，许多大类的原料品种既无国家标准，也无行业标准，仅有企业标准，使行业规范和监管存在局限。
原材料品质缺乏参照，到底有多少功能成分，活性是否稳定一致，缺少判定的标准依据。
保健食品的标准现状多元管辖。
目前，保健食品的注册与评价管理类似药品，归口在食药监局，生产与卫生监督管理、市场监督等靠近普通食品，归口在卫生部和质量技术监督部门。
健食品功效或标志性成分黄萍201211112发邹
成效或标志性成分检验方法—国家标准
食品卫生检验方法 理化局部〔三〕2021年版 1、GB/T 5009.170-2003 保健食品中褪黑
素含 量的测定
2、GB/T 5009.171-2003 保健食品中超氧 化物 歧化酶 (SOD)活性的测定
3、GB/T 5009.193-2003 保健食品中脱氢 表雄
14、保健食品中洛伐他丁的〔含量〕测定
15、保健食品中中药成效成分的鉴别试验方法
16、保健食品中银杏叶总黄酮〔槲皮素、山柰素、
异鼠李素〕的高效液相色谱测定
?保健食品检验与评价技术标准?〔2003年版〕 成效或标志性成分检验方法
17、保健食品中异麦芽低聚糖、低聚果糖、大豆低
聚糖的测定
18、保健食品中金雀异黄素的测定
10种双歧杆菌两歧双歧杆菌婴儿双歧杆菌长双歧杆菌短双歧杆菌青春双歧杆菌乳杆菌德氏乳杆菌保加利亚种嗜酸乳杆菌干酪乳杆菌干酪亚种罗伊氏乳杆菌嗜热链球菌保健食品检验与评价技术规范2003年版保健食品功效成分及卫生指标检验规范第二部分gbt5009gb5413部分方法及其它国家标准理化gbt478934双歧35乳酸菌2003微生物企业标准附录a保健食品检验与评价技术规范2003年版功效或标志性成分检验方法6保健食品中盐酸硫胺素盐酸吡哆醇烟酸烟酰胺和咖啡因的测定8保健食品中肉碱的测定保健食品检验与评价技术规范2003年版功效或标志性成分检验方法10保健食品中免疫球蛋白igg的测定16保健食品中银杏叶总黄酮槲皮素山柰素异鼠李素的高效液相色谱测定保健食品检验与评价技术规范2003年版功效或标志性成分检验方法17保健食品中异麦芽低聚糖低聚果糖大豆低聚糖的测定20五味子类保健食品中五味子醇甲五味子甲素和乙素的高效液相色谱测定23保健食品中总皂甙的测定保健食品检验与评价技术规范2003年版功效或标志性成分检验方法26蚓激酶活性的测定方法食品卫生检验方法理化部分三2012年版1gbt50091702003保健食品中褪黑素含量的测定2gbt50091712003保健食品中超氧化物歧化酶sod活性的测定3gbt50091932003保健食品中脱氢表雄甾酮dhea测定4gbt50091942003保健食品中免疫球蛋白igg的测定5gbt50091952003保健食品中吡啶甲酸铬含量的测定6gbt50091962003保健食品中肌醇的测7gbt50091972003保健食品中盐酸硫胺素盐酸吡哆醇烟酸烟酰胺和咖啡因的测定8gbt50092172008保健食品中维生素b12的测定gbt222442008保健食品中前花青素的测定gbt222452008保健食品中异嗪皮啶的测定gbt222462008保健食品中泛酸钙的测定gbt222472008保健食品中淫羊藿苷的测定gbt222482008保健食品中甘草酸的测定gbt222492008保健食品中番茄红素的测定gbt222502008保健食品中绿原酸的测定gbt222512008保健食品中葛根素的测定gbt222522008保健食品中辅酶q10的测定10gbt237882009保健食品中大豆异黄酮的测定方法高效液相色谱法11gb284042012食品安全国家标准保健食品中亚麻酸二十碳五烯酸二十二碳五
功效成分检测方法
粗多糖测定方法第一法本方法参照《保健食品功效成分检测方法》（王光亚、白鸿主编）中“粗多糖的苯酚-硫酸分光光度测定法”的方法测定。
1.主要仪器（1）离心机：4000r/min（2）离心管：50ml（3）分光光度计（4）水浴锅（5）漩涡混合器2.试剂实验用水为双蒸水，所用试剂为分析纯级。
（1）无水乙醇（2）80%（V/V）乙醇溶液（3）葡萄糖标准溶液：准确称取干燥恒重的分析葡萄糖0.5000g加水溶解，并定容至50ml，此溶液1ml含10mg葡萄糖，用前稀释100倍为使用液（0.1mg/ml）。
（4）5%苯酚溶液（W/V）：称取精制苯酚5.0g,加水溶解并稀释至100ml，混匀。
溶液置于冰箱中可保存一个月。
（5）浓硫酸（比重1.84）。
（6）0.2mol/L磷酸盐缓冲液（pH6.5）：31.5ml（0.2mol/L）磷酸氢二钠与68.5ml（0.2mol/L）磷酸二氢钠混合。
3.测定步骤（1）样品提取：称取混合均匀的固体样品1.0~2.0g，置于100ml容量瓶中，加水80ml左右，于沸水浴中加热1小时，冷却至室温后补加水至刻度（V1）。
取50ml上述提取液置于100ml具塞锥形瓶中，加1ml 10%淀粉酶液和0.5ml 0.2M磷酸盐缓冲液，加塞，置55℃~60℃酶解1小时，再加约为样品体积1%的葡萄糖苷酶于60℃以下再水解1小时候取出（用碘液检验是否水解完全，如不完全可延长水解时间至酶解液加碘液不变蓝色为止），于电炉上小心加热至沸腾做灭酶处理，冷却至室温，定容至100ml，过滤，取滤液沉淀粗多糖。
（2）沉淀粗多糖：准确吸取上述滤液5.0ml（V2），置于50ml离心管中，加入无水乙醇20ml，混匀，与4℃冰箱静置4小时以上，以4000r/min 离心5min，弃去上清液，残渣用80%（V/V）乙醇数毫升洗涤，离心后弃去上清液，反复操作3次。
残渣用水溶解并定容至10~25ml（V3）（根据糖浓度而定），供测定用。
保健食品中肉碱的测定
1 肉碱的测定（来源于《保健食品检验与评价技术规范》（2003年版））1.1 范围本方法规定了片剂、胶囊保健食品中肉碱的测定方法。
本方法适用于以肉碱为主要原料的片剂、胶囊中肉碱的测定。
本方法最低检出量为0.27μg。
本方法最佳线性范围：0.050mg/mL~2.0mg/mL。
1.2 原理：试样中的肉碱以0.5mmol/L的盐酸超声提取，反相色谱分离，与标准品的保留时间比较定性，以峰面积外标法定量。
1.3 试剂除特殊说明，所用试剂均为分析纯。
实验用水为去离子水或同等纯度的蒸馏水。
1.3.1 磷酸氢二钾。
1.3.2 辛烷磺酸钠。
1.3.3 0.50mmol/L盐酸。
1.3.4 肉碱标准溶液：精密称取干燥至恒重的肉碱标准品(含量98％)0.0200g，用0.50mmol/L盐酸溶解并定容为10.0mL，此溶液浓度为2.0mg/mL。
1.4 仪器1.4.1 HPLC系统，配有紫外检测器和色谱工作站。
1.4.2 超声波提取器。
1.4.3 溶剂微孔过滤器带0.45μm水相滤膜。
1.5 分析步骤1.5.1 试样预处理：准确称取粉碎并混合均匀的试样0.50g(含肉碱约40mg)；液体试样取5.0mL，于50mL容量瓶中，加入0.50mmol/L盐酸约35mL，超声提取10min，用0.50mmo/L盐酸定容，混匀，过滤，弃初滤液数毫升，收集滤液，过0.45μm水相滤膜，为试样处理液。
供HPLC分析。
1.5.2 试样分析1.5.2.1 色谱条件：Shim-pakCLCODS柱；4.6×200mm，l0μm。
1.5.2.2 流动相：0.05mol/L(3.4g)磷酸氢二钾溶液，0.002mol/L辛烷磺酸钠；乙腈；pH2.5。
1.5.2.3 流速：0.8mL/min。
1.5.2.4 检测器：紫外检测器；检测波长：210nm。
1.5.3 标准曲线：分别取标准溶液0.0，0.25，0.50，1.0，2.0，2.5，5.0mL标准溶液(1.3.4)于5mL比色管中：用0.50mmol/L盐酸稀释并定容为5.0mL，分别进样20μL进行色谱分析。
婴幼儿食品中左旋肉碱含量测定的不确定度
婴幼儿食品中左旋肉碱含量测定的不确定度
黄浦雁
【期刊名称】《中国乳品工业》
【年(卷),期】2016(044)004
【摘要】介绍了婴幼儿食品中左旋肉碱测定的不确定度评价.检验方法按照国家标准GB 29989--2013进行.结果表明,在样品中左旋肉碱质量分数为20.8mg/100 g 时,取包含因子k=2,扩展不确定度为0.1 mg/100 g.分析婴幼儿乳品中左旋肉碱的质量分数测定方法,其不确定度的主要来源是左旋肉碱的质量分数,而其质量分数的不确定度主要是标准工作曲线的配制和标准品的称量.因此,在实验时,必须准确称量标准品的质量,严格按照标准工作曲线的配制方法进行操作,严格控制实验条件.【总页数】3页(P54-56)
【作者】黄浦雁
【作者单位】上海市疾病预防控制中心,上海200336
【正文语种】中文
【中图分类】TS252.7
【相关文献】
1.婴幼儿配方奶粉中左旋肉碱的测量不确定度评定 [J], 崔颖;肖亚兵;王淞;高云;陈文硕
2.分光光度法测定婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的方法探讨 [J], 徐萍
3.婴幼儿奶粉中左旋肉碱测定的不确定度 [J], 张丹妮;曹扬;张华燕;刘丁
4.特殊医学用途婴儿配方乳粉中左旋肉碱含量测定方法优化 [J], 马晓博;吴磊;张斌;
张兰天;盖丽娜
5.婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱测定的方法验证 [J], 石永倩;张天博
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保健食品中肉碱的测定
Determination of carnite in health food
．范围1本方法规定了片剂、胶囊保健食品中肉碱的测定
方法。
胶囊中肉碱的本方法适用于以肉碱为主要原料的片剂、测定。
0.27ug。
本方法最低检出量为。
—本方法最佳线性
范围：0.050mg/mL2.0mg/mL
原理2.的盐酸超声提取，反相色谱试样中的肉碱以
0.5mmol/L 以峰面积外标法定量。
分离，与标准品的保留时间比较定性，试剂 3.除特殊说明，所用试剂均为分析纯。
实验用水为去离子水或同等纯度的蒸馏水。
．
3．1 磷酸氢二钾
3．2 辛烷磺酸钠
3．3 0.50mmol/L盐酸
3．4 肉碱标准溶液：精密称取干燥至恒重的肉碱标准品(含量98%)0.0200g，用0.50mmol/L盐酸溶解并定容为10.0mL，此溶液浓度为2.0mg/mL。
4.仪器
4．1 HPLC系统，配有紫外检测器和色谱工作站；
4．2 超声波提取器；
4．3 溶剂微孔过滤器带0.45um水相滤膜。
5.分析步骤
5．1 试样预处理：准确称取粉碎并混合均匀的式样0.50g （含肉碱约40毫克）；液体试样取5.0mL，于50mL容量瓶中，加入0.50mmol/L盐酸约35mL，超声提取10min，用盐酸定容，混匀，过滤，弃初滤液数毫升，收集0.50mmol/L．滤液，过0.45um水相滤膜，为试样处理液。
供HPLC分析。
5．2 试样分析
5．2．1 色谱条件：Shim—pakCLC ODS 柱；4.6×
200mm,10um；
5．2．2 流动相：0.05mol/L(3.4g) 磷酸氢二钾溶液，
0.002mol/L辛烷磺酸钠; 10%乙腈；PH2.5。
5．2．3 流速：0.8mL/min；
5．2．4 检测器：紫外检测器；检测波长：210nm；
5．3 标准曲线：分别取标准溶液
0.0,0.25,0.50,1.0,2.0,2.5,5.0mL标准溶液（3.4）于5mL比色管中；用0.50mmol/L盐酸稀释并定容为5.0mL，分别进样20uL进行色谱分析。
用标准浓度—峰面积绘制标准曲线。
5．4 试样测定：取20uL试样处理液（5.1）注入色谱仪中，
以保留时间定性，
面积定量。
5.5 色谱图
5. 6分析结果表述
试样中肉碱的含量按5.5.1式计算
5．6．1 计算
C×V
X=
m
；为试样中肉碱的含量，mg/g X—式中：g；m—为试样质量，；—为试样处理液中肉碱的浓度，Cmg/mL 。
—
为试样处理液体积，mL V 5.6.2 结果表示结果保留三位有效数字。
技术参数6 .。
6.0%小于RSD重复测定值的．
回收率：90.3~101.1%。