动物细胞工程高三一轮复习(超好)PPT课件
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制备杂交瘤细胞,取免疫后小鼠的B淋巴细胞(染色体数目40条) 与体外培养的骨髓瘤细 胞(染色体数目60条)按一定比例加入试管中,再加入PEG诱导细胞融合,经筛选培养 及抗体检测,得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。
动物细胞工程
.
1
一、过程
一轮材料 P238-239
单个细胞
细胞悬液
考点一.动物细胞培养 2次胰蛋白酶
原代培养
①先用_胰__蛋 __白 __酶 __等处理贴满瓶壁的细胞,
50代后
传传代代培培养养②1再_0_~ 分__瓶_5_0继_代续左培右养时,细胞增殖缓慢,甚至停止 细胞癌变
③部分细胞_核__型 ___发生改变,获得不死性,能无
时期再进行,去核时常采用__显_微__操__作__去__核__法_的方法。 选修三 P49
供体核
(2)经过多次传代后,供体细胞中_遗__传__物_质__(_核__型__)___的稳定性会降低。
因此,选材时必须关注传代次数。
来源
卵母
(3)若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同,从遗传物质的角度分析其
___将__剪_碎__的__组_织__分__散_成__单_;个细第胞二次是_____将__贴__壁_细__胞__从_瓶__壁,上目分离的下是来避
提 免动物细胞的接触抑制。
④将动物细胞分散成单个细胞培养的原因:
保证细胞所需要的营养供应。
保证细胞内有害代谢产物的及时排出。
醒
.
4
(3).培养条件 (1)无菌、无毒的环境:①对培__养___液__和所有_培__养__用 ___具__进行无菌 处理。②加入抗生素。③定期更换培养液。
.
限增殖
3
特
①动物细胞培养原理:___细__胞__增_殖____。其过程所用培养基一般是 ____液_培体 养基。
别
②动物细胞培养时选用幼龄动物组织或胚胎进行细胞培养,因 为_分__化_程__度__低_,__增__殖_能__力__强_,__更__易_于_.培养。
③动物细胞培养过程中两次用到____胰__蛋__白_酶___,第一次的作用是
.
5
1.分析命题热图,明确答题要点 阅读题目 圈出关键词 分析考点
如图,为动物细胞培养过程中细胞增殖情况的变化曲线,图中B、E两点表 示经筛选、分装后继续培养。据图分析:
(1)原代培养和传代培养的分界点是哪个?
B点之前的培养称为原代培养,之后的培养称为传代培养。
(2)AB段和DE段繁殖速度缓慢的原因是什么?
_。
重组细胞 重组胚胎
.
9
阅读题目 圈出关键词 分析考点
1.(2016·全国课标卷Ⅱ,40)下图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动
物(二倍体)的流程。回答下列问题:
供体 性别
(1)图 中A 表示 正 常细 胞核 ,染 色体数 为 2n, 则其 性染 色体的 组成 可 为
__X_X_或__X_Y_。过程①表示去除细胞核,该过程一般要在卵母细胞培养至适当
考点三、动物细胞融合与单克隆抗体的制备
1.动物细胞融合 (1)原理:细胞膜的流动_性_ 。 (2)融合方法:聚乙二醇(PEG)、灭活的病__毒_ 、电激等。 (3)意义:突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交成 为 可 能 , 也为制造_单__克__隆__抗__体_开辟了新途径。
抗体
.
11
2.单克隆抗体 (1)制备过程
无机物:无机盐、_微__量__元_素___等 (2)营养有_动__机物__物血__:清__糖、__、血__氨浆__基:酸补、充促培生养长液因中子没有完全搞清
楚的成分
(3)温度和
温度:3_6_._5_±__0_.5_℃__ pHpH:7_._2_~__7_.4__
(4)气体环境OCO2:2:__细维__胞持__代___培谢 ____养__所_液_必_的_需_p_H的___
妙学妙记
1、制备过程的 “122” 一融合,二筛选,二培养
2、单克隆抗体的优点 可、特、灵
杂交瘤细胞 能产生特异性抗体
(1)优点:特异性强、 灵敏度高,可大量制备。
.
12
问题强化:
1)、本过程利用了哪些原理? 免疫原理,动物细胞融合和动物细胞培养原理
2)、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合? 继承了双亲细胞的遗传物质,能无限增殖又能分泌特异性抗体。
wenku.baidu.com
发生了接触抑制。
癌细胞
(3)E点后细胞大多数具有异倍体核型,这样的细胞有什么特点?
E点后的细胞属于细胞系,能无限增殖。
.
6
[例 1] 实验小鼠皮肤细胞培养(非克隆培养)的基本过程如下
图所示。下列叙述错误的是
() C
实验 小鼠
―甲―→
皮肤 组织
―乙―→
皮肤 细胞
―丙 ―→
培养 细胞1
―丁 ―→
培养 细胞2
A.甲过程需要对实验小鼠进行消毒 条件
B.乙过程对皮肤组织可用胰蛋白酶消化
C.丙过程得到的细胞大多具有异倍体核型
培养过程过程中
D.丁过程得到的细胞具有异质性
细胞变化
阅读题目 圈出关键词 分析考点
.
7
考点二、动物体细胞核移植技术 和克隆动物
1.动物核移植概念 (1)供体:动物一个细胞的细__胞__核___。 结
3)、两次筛选目的是什么?
第1次-----杂交瘤细胞(多种)。 第2次-----能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。
4)、为什么细胞融合过程中使用病毒需要灭活?不灭活行吗? 灭活的病毒能使细胞膜打开,细胞发生融合,不灭 活的话会感染细胞,而不能诱导细胞融合。
.
13
1.(2014·课标卷Ⅰ,40) 研究者用抗原(A)分别免疫3只小鼠(X、Y和Z),每只 小鼠免疫5次,每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价(能检测出抗原抗 体反应的血清最大稀释倍数),结果如下图所示。
果
(2)受体:去掉细胞核的卵__母__细__胞____。
(3)结果:形成重组胚胎,发育成动__物__个__体__。
2.类型胚 _体__胎细__细胞__胞核__核移__移植__植_
易 难
.
8
3.体细胞核移植的过程
选取10代以内的 细胞,因为:
一__般__能__保__持__正_常__ 的__二__倍__体__核__型___
原因是__卵_母__细__胞_的__细_胞__质__中_的__遗__传_物__质_会__对__克_隆__动_物__的__性_状__产__生_影__响____。
(4)与克隆羊“多莉(利)”培养成功一样,其他克隆动物的成功获得也证明了
______已__经_分__化__的_动__物_. _体_细___胞__核___具_有__全_能__性_______________核__移植技10术
动物细胞工程
.
1
一、过程
一轮材料 P238-239
单个细胞
细胞悬液
考点一.动物细胞培养 2次胰蛋白酶
原代培养
①先用_胰__蛋 __白 __酶 __等处理贴满瓶壁的细胞,
50代后
传传代代培培养养②1再_0_~ 分__瓶_5_0继_代续左培右养时,细胞增殖缓慢,甚至停止 细胞癌变
③部分细胞_核__型 ___发生改变,获得不死性,能无
时期再进行,去核时常采用__显_微__操__作__去__核__法_的方法。 选修三 P49
供体核
(2)经过多次传代后,供体细胞中_遗__传__物_质__(_核__型__)___的稳定性会降低。
因此,选材时必须关注传代次数。
来源
卵母
(3)若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同,从遗传物质的角度分析其
___将__剪_碎__的__组_织__分__散_成__单_;个细第胞二次是_____将__贴__壁_细__胞__从_瓶__壁,上目分离的下是来避
提 免动物细胞的接触抑制。
④将动物细胞分散成单个细胞培养的原因:
保证细胞所需要的营养供应。
保证细胞内有害代谢产物的及时排出。
醒
.
4
(3).培养条件 (1)无菌、无毒的环境:①对培__养___液__和所有_培__养__用 ___具__进行无菌 处理。②加入抗生素。③定期更换培养液。
.
限增殖
3
特
①动物细胞培养原理:___细__胞__增_殖____。其过程所用培养基一般是 ____液_培体 养基。
别
②动物细胞培养时选用幼龄动物组织或胚胎进行细胞培养,因 为_分__化_程__度__低_,__增__殖_能__力__强_,__更__易_于_.培养。
③动物细胞培养过程中两次用到____胰__蛋__白_酶___,第一次的作用是
.
5
1.分析命题热图,明确答题要点 阅读题目 圈出关键词 分析考点
如图,为动物细胞培养过程中细胞增殖情况的变化曲线,图中B、E两点表 示经筛选、分装后继续培养。据图分析:
(1)原代培养和传代培养的分界点是哪个?
B点之前的培养称为原代培养,之后的培养称为传代培养。
(2)AB段和DE段繁殖速度缓慢的原因是什么?
_。
重组细胞 重组胚胎
.
9
阅读题目 圈出关键词 分析考点
1.(2016·全国课标卷Ⅱ,40)下图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动
物(二倍体)的流程。回答下列问题:
供体 性别
(1)图 中A 表示 正 常细 胞核 ,染 色体数 为 2n, 则其 性染 色体的 组成 可 为
__X_X_或__X_Y_。过程①表示去除细胞核,该过程一般要在卵母细胞培养至适当
考点三、动物细胞融合与单克隆抗体的制备
1.动物细胞融合 (1)原理:细胞膜的流动_性_ 。 (2)融合方法:聚乙二醇(PEG)、灭活的病__毒_ 、电激等。 (3)意义:突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交成 为 可 能 , 也为制造_单__克__隆__抗__体_开辟了新途径。
抗体
.
11
2.单克隆抗体 (1)制备过程
无机物:无机盐、_微__量__元_素___等 (2)营养有_动__机物__物血__:清__糖、__、血__氨浆__基:酸补、充促培生养长液因中子没有完全搞清
楚的成分
(3)温度和
温度:3_6_._5_±__0_.5_℃__ pHpH:7_._2_~__7_.4__
(4)气体环境OCO2:2:__细维__胞持__代___培谢 ____养__所_液_必_的_需_p_H的___
妙学妙记
1、制备过程的 “122” 一融合,二筛选,二培养
2、单克隆抗体的优点 可、特、灵
杂交瘤细胞 能产生特异性抗体
(1)优点:特异性强、 灵敏度高,可大量制备。
.
12
问题强化:
1)、本过程利用了哪些原理? 免疫原理,动物细胞融合和动物细胞培养原理
2)、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合? 继承了双亲细胞的遗传物质,能无限增殖又能分泌特异性抗体。
wenku.baidu.com
发生了接触抑制。
癌细胞
(3)E点后细胞大多数具有异倍体核型,这样的细胞有什么特点?
E点后的细胞属于细胞系,能无限增殖。
.
6
[例 1] 实验小鼠皮肤细胞培养(非克隆培养)的基本过程如下
图所示。下列叙述错误的是
() C
实验 小鼠
―甲―→
皮肤 组织
―乙―→
皮肤 细胞
―丙 ―→
培养 细胞1
―丁 ―→
培养 细胞2
A.甲过程需要对实验小鼠进行消毒 条件
B.乙过程对皮肤组织可用胰蛋白酶消化
C.丙过程得到的细胞大多具有异倍体核型
培养过程过程中
D.丁过程得到的细胞具有异质性
细胞变化
阅读题目 圈出关键词 分析考点
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考点二、动物体细胞核移植技术 和克隆动物
1.动物核移植概念 (1)供体:动物一个细胞的细__胞__核___。 结
3)、两次筛选目的是什么?
第1次-----杂交瘤细胞(多种)。 第2次-----能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。
4)、为什么细胞融合过程中使用病毒需要灭活?不灭活行吗? 灭活的病毒能使细胞膜打开,细胞发生融合,不灭 活的话会感染细胞,而不能诱导细胞融合。
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1.(2014·课标卷Ⅰ,40) 研究者用抗原(A)分别免疫3只小鼠(X、Y和Z),每只 小鼠免疫5次,每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价(能检测出抗原抗 体反应的血清最大稀释倍数),结果如下图所示。
果
(2)受体:去掉细胞核的卵__母__细__胞____。
(3)结果:形成重组胚胎,发育成动__物__个__体__。
2.类型胚 _体__胎细__细胞__胞核__核移__移植__植_
易 难
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8
3.体细胞核移植的过程
选取10代以内的 细胞,因为:
一__般__能__保__持__正_常__ 的__二__倍__体__核__型___
原因是__卵_母__细__胞_的__细_胞__质__中_的__遗__传_物__质_会__对__克_隆__动_物__的__性_状__产__生_影__响____。
(4)与克隆羊“多莉(利)”培养成功一样,其他克隆动物的成功获得也证明了
______已__经_分__化__的_动__物_. _体_细___胞__核___具_有__全_能__性_______________核__移植技10术