动物细胞工程高三一轮复习(超好)PPT课件
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高三生物一轮复习课件动物细胞工程
拓展 提升科学思维
3.科学家已尝试采用多种方法来制备iPS细胞，尝试说出几种获取iPS细 胞的方法。（结合教材46页）
借助载体将特定基因导入细胞中，直接将特定蛋白导入细胞中或者 用小分子化合物等来诱导形成iPS细胞。iPS细胞最初是由成纤维细胞转 化而来的，后来发现已分化的T细胞、B细胞等也能被诱导为iPS细胞。
成纤维细胞 T细胞和B细胞
导入特定基因
导入特定蛋白 小分子化合物诱导
iPS 细胞
治疗阿尔茨海默症 治疗心血管疾病
突破 强化关键能力
1.(2023·山西运城高三模拟)对某种动物的肝肿瘤细胞进行细胞培养，下
列说法错误的是（C ）
A.在利用肝组织块制备细胞悬液时，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理 B.动物细胞培养应在含5%CO2的CO2培养箱中进行，CO2的作用维持培 养液的pH C.为了防止动物细胞培养过程中受污染，可向培养液中加入适量的干扰素 D.在合成培养基中，通常需加入血清等一些天然成分
应用： ①人造皮肤的构建； ②动物分泌蛋白的规模化生产； ③用于药理及细胞发育方面的研究。
考点一 动物细胞培养
4.培养的条件：
糖类、氨基酸、无 机盐、维生素 …
培养基的构成：合成培养基 + 血清等天然成分
将细胞所需的营养物 质按种类和所需量严 格配制而成的培养基
含人类未知、细胞生长增
殖所必需的物质，满足细
动物细胞培养 原理：细胞的增殖
的概念和原理 在适当的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术
动
物
动物细胞培养
(1)营养条件 (2)无菌、无毒的环境
细 的条件
(3)温度、pH和渗透压
胞
(4)气体环境
培 动物细胞培养 取动物 单个 细胞 原代 传代
高三生物一轮复习课件细胞工程【动物】
传代培养
响外，还会发生接触抑制现象）
生 概念 原理
命 观
注意事项
念
动物细胞培养 地位 条件： 过程： 取动物组织
➢ 为什么要传代培养：悬浮培养的细胞会因细胞密度
过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质等因素 制成细胞悬液
传代培养
放入CO2培养 箱中培养
制成细胞悬液
转入培养液进行原代培养 细胞贴壁 接触抑制
分瓶
进行传代培养
生 概念 原理
动物细胞培养 地位 条件： 过程：
命 观
细胞悬液用胰蛋白酶或胶原蛋白酶将组织分散成单个细胞后制成培养液。
念 细胞贴壁大多数体外培养的细胞需要__贴__附__于__某__些__基__质表__面_才能生长
，然后
在 适宜的培养条件 下，让这些细胞生__长___和_增__殖__的技术；
原理： 细胞增殖（有丝分裂） 地位： 动物细胞工程的基础 条件：
✓ 营养 ✓ 无菌、无毒 ✓ 温度、pH 和渗透压 ✓ 气体环境
生 概念 原理
动物细胞培养 地位
命 观
条件：
血清中不仅含有蛋白质、氨基酸、葡
念
萄糖、激素等多种营养物质，还有激
✓ 营养
葡萄糖、不包括 素及多种未知的促细胞生长因子、促
1.成分
淀粉、蔗糖等
贴附因子及其他活性物质，能促进细
①已知成分
胞的生长、增殖和贴附。
将细胞所需的_营__养__物__质_（糖类、氨基酸、无机盐、维生素等）按其
_种__类__和所__需__量___严格配制而成的培养基，称为合__成__培__养__基___
②未知成分
使用合成培养基时，通常需加入_血__清_等一些天然成分
原因：血清中含有尚未全部研究清楚的细胞所需的营养物质 。
生物新高考一轮复习课件：12-4 动物细胞工程
生物新高考一轮复习课件
动物细胞工程
基础梳理——系统化 知识点一 动物细胞培养 1．原理： 细胞增殖。 2．培养条件 （1）营养：糖类、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还
需加入血清 等一些天然成分，一般使用液体培养基。 （2）无菌、无毒的环境：对培养液和所有培养用具进行 灭菌处理 以
及在无菌环境下进行操作，定期更换培养液以清除代谢物。 （3）适宜的温度、pH和渗透压：温度为 36.5±0.5 ℃ （哺乳动物），
1.细胞工程的两个总结 (1)植物组织培养和动物细胞培养过程都存在细胞的培养过程，但植 物细胞可以先分裂再分化，而动物细胞不分化只分裂。 (2)克隆动物的起点是经过核移植后形成的重组细胞，其遗传物质主 要来自供体，因此形成的个体性状主要同供体，但也有部分性状同受 体。
过程
原代 胰蛋白酶
传代
去核卵母细胞
重组细胞 早期胚胎
结果 应用
获得_细__胞__群___
①生产生物制品 ②用于基因工程 ③检测有毒物质
获得_克__隆__动__物_
①加速家畜遗传改良进程，促进 良种繁育
②保护濒危物种 ③生产医用蛋白 ④提供克隆器官、组织等
任务3 细胞核移植技术 (1)理清克隆动物培育流程
正文）（ × ） 3．多种B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合筛选后，还需经克隆化培养和
抗体检测，才能获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。（选 择性必修3 P49图2－16）（ √ ）
4．抗体—药物偶联物（ADC）通常由抗体、接头、药物（如细胞
毒素）三部分组成。（选择性必修3 P50思考·讨论）（ √ ） 5．单克隆抗体能准确地识别抗原的细微差异，与特定的抗原发生特
择性必修3 P46正文）（ √ ） 5．iPS细胞的应用前景优于胚胎干细胞。（选择性必修3 P46正文）
动物细胞工程
基础梳理——系统化 知识点一 动物细胞培养 1．原理： 细胞增殖。 2．培养条件 （1）营养：糖类、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还
需加入血清 等一些天然成分，一般使用液体培养基。 （2）无菌、无毒的环境：对培养液和所有培养用具进行 灭菌处理 以
及在无菌环境下进行操作，定期更换培养液以清除代谢物。 （3）适宜的温度、pH和渗透压：温度为 36.5±0.5 ℃ （哺乳动物），
1.细胞工程的两个总结 (1)植物组织培养和动物细胞培养过程都存在细胞的培养过程，但植 物细胞可以先分裂再分化，而动物细胞不分化只分裂。 (2)克隆动物的起点是经过核移植后形成的重组细胞，其遗传物质主 要来自供体，因此形成的个体性状主要同供体，但也有部分性状同受 体。
过程
原代 胰蛋白酶
传代
去核卵母细胞
重组细胞 早期胚胎
结果 应用
获得_细__胞__群___
①生产生物制品 ②用于基因工程 ③检测有毒物质
获得_克__隆__动__物_
①加速家畜遗传改良进程，促进 良种繁育
②保护濒危物种 ③生产医用蛋白 ④提供克隆器官、组织等
任务3 细胞核移植技术 (1)理清克隆动物培育流程
正文）（ × ） 3．多种B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合筛选后，还需经克隆化培养和
抗体检测，才能获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。（选 择性必修3 P49图2－16）（ √ ）
4．抗体—药物偶联物（ADC）通常由抗体、接头、药物（如细胞
毒素）三部分组成。（选择性必修3 P50思考·讨论）（ √ ） 5．单克隆抗体能准确地识别抗原的细微差异，与特定的抗原发生特
择性必修3 P46正文）（ √ ） 5．iPS细胞的应用前景优于胚胎干细胞。（选择性必修3 P46正文）
2023届高考生物一轮专题复习课件：动物细胞工程
强化模拟 0533.0 限时训练
题型三 动物细胞培养与动物体细胞核移植
5．克隆猪成功率较低，与早期胚胎细胞异常凋亡有关。Bcl－2基因是细胞凋亡抑制基因，用PCR技术 可以检测该基因转录水平，进而了解该基因与不同胚胎时期细胞凋亡的关系。克隆猪的培育及该基因转 录水平检测流程如图所示。
请回答： (1)图中应选择________期的卵母细胞进行核移植，使用的良种猪体细胞一般都选择传代培养10代以内 的细胞，原因是________________________________________________________________________。 (2)图中X表示________过程，从基因组数据库中查询Bcl－2基因的核苷酸序列，以便根据这一序列设计 合成__________用于PCR扩增，PCR的原理是______________________。在PCR过程中可检测出cDNA 中Bcl－2 cDNA的分子数，进而计算总mRNA中Bcl－2 mRNA的分子数，从而反映出 __________________。
考法四 动物细胞融合技术与单克隆抗体的制备
分考点讲解
3．植物体细胞杂交和制备单克隆抗体的比较
动物细胞融合是制备单克隆抗体的基础，制备单克隆抗体是动物细胞融合的应用。
考法四 动物细胞融合技术与单克隆抗体的制备
分考点讲解
3 [山东2021·15，2分]一个抗原往往有多个不同的抗原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产生一种 抗体，由同一抗原刺激产生的不同抗体统称为多抗。将非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72注入小鼠体内，可利 用该小鼠的免疫细胞制备抗p72的单抗，也可以从该小鼠的血清中直接分离出多抗。下列说法正确的是 () A．注入小鼠体内的抗原纯度对单抗纯度的影响比对多抗纯度的影响大 B．单抗制备过程中通常将分离出的浆细胞与骨髓瘤细胞融合 C．利用该小鼠只能制备出一种抗p72的单抗 D．p72部分结构改变后会出现原单抗失效而多抗仍有效的情况
高三生物一轮复习课件动物细胞工程
条
积累对细胞自身造成危害
件 适宜的温度、 PH和渗透压
36.5°C
7.2~7.4 等渗溶液
气体环境
95%的空气：O2维持细胞代谢 5%的CO2：维持培养液PH
动 基础 物动 细物 胞细 工胞 程培
养
概念
原理 培养 条件
从动物体中取出相关的组织，将它们分散成单个细胞，然 后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术
(2) 写 出 以 小 鼠 甲 的 脾 脏 为 材 料 制 备 单 细 胞 悬 液 的 主 要 实 验 步 骤 ：
取__小___鼠__甲__脾__脏__剪__碎___，__用__胰__蛋__白__酶__处___理__使__其__分__散__成___单__个__细__胞__，__加__入___培__养______ 液__制___成__单__细__胞__悬__液___________。
动
概念
动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物 细胞形成一个细胞的过程。
物
原理 细胞膜的流动性
细 动 方法 PEG融合法、电融合法、灭活病毒
胞 物 应用 制备单克隆抗体 杂交瘤技术
工细 程胞
给小鼠注射特定抗原，得到特定抗体的B淋巴细胞
融
诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合 得到多种杂交细胞
合 过程 筛选杂交瘤细胞 进行克隆化培养和抗体检测
不可以；细胞传代培养一般传至10代后就不易传下去
1.(2023·东北师大附中)实验小鼠皮肤细胞培养的基本过程如图所示。
D 下列叙述错误的是( )
实验小鼠―― 甲→皮肤组织―― 乙→皮肤细胞悬液―― 丙→细胞群体 1―― 丁→细胞群体 2
A.甲过程需要对实验小鼠进行消毒 B.乙过程需要用胰蛋白酶等处理皮肤组织，使细胞分散开 C.丙过程表示原代培养，该过程中会出现接触抑制现象 D.丁过程表示传代培养，此过程中的细胞分瓶后能无限增殖
动物细胞工程高三一轮复习(超好)PPT课件
原因是__卵_母__细__胞_的__细_胞__质__中_的__遗__传_物__质_会__对__克_隆__动_物__的__性_状__产__生_影__响____。
(4)与克隆羊“多莉(利)”培养成功一样，其他克隆动物的成功获得也证明了
______已__经_分__化__的_动__物_. _体_细___胞__核___具_有__全_能__性_______________核__移植技10术
妙学妙记
1、制备过程的 “122” 一融合，二筛选，二培养
2、单克隆抗体的优点 可、特、灵
杂交瘤细胞 能产生特异性抗体
(1)优点：特异性强、 灵敏度高，可大量制备。
.
12
问题强化：
1）、本过程利用了哪些原理？ 免疫原理，动物细胞融合和动物细胞培养原理
2）、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？ 继承了双亲细胞的遗传物质，能无限增殖又能分泌特异性抗体。
(1)在制备抗HSVⅠ的单克隆抗体的过程中，先给小鼠注射一种纯化的HSVⅠ蛋白， 一段时间后，若小鼠血清中抗_____H_S__V_Ⅰ__蛋的白抗体检测呈阳性，说明小鼠体内产 生了_____体__液反免应疫，再从小鼠的______脾_中脏获取B淋巴细胞。将该B淋巴细胞与小鼠 的________骨细髓胞瘤融合，再经过筛选、检测，最终可获得所需的杂交瘤细胞，该细 胞具有的特点是_________无__限__增__殖_且__产__生_。特异性抗体
易错点1 动物细胞培养时，可使。
胰蛋白酶为7.2～7.8，而动物细胞培养的适宜pH为7.2～7.4。
易错点2 动物细胞培养液中加入5%CO2的目的是维持气体平衡或用于呼吸。
目的是“维持培养液的pH”。
易错点3 选择MⅡ末期的卵母细胞作核移植的受体细胞。
2024届高考生物一轮总复习选择性必修3第十三单元细胞工程第2讲动物细胞工程课件
合的杂交瘤细胞(“B—瘤”细胞)才能生长 生特异性抗体的细胞群
筛选 目的
得到杂交瘤细胞
得到能分泌所需抗体的杂交瘤细胞
3．单克隆抗体的特点和应用
特点
特异性强，灵敏度高，可大量制备
作为_诊__断__试__剂__，用于疾病诊断和病原体鉴定；作为运 应用 载_药__物__的载体；用于治疗疾病等
————————■链教材资料·发展科学思维■——————— 1．(选择性必修3 P48“相关信息”发掘)灭活病毒诱导细胞融合的原理是_病__毒___表_ _面__含__有__的__糖__蛋__白__和__一__些__酶__能__够__与__细__胞__膜__上__的__糖__蛋__白__发__生__作__用__，__使__细__胞__互__相__凝__聚__，__细__胞__ _膜__上__的__蛋__白__质__分__子__和__脂__质__分__子__重__新__排__布__，__细__胞__膜__打__开__，__细__胞__发__生__融__合______。
答案：(1)XX或XY 显微操作 胚胎移植 (2)遗传物质 (3)卵母细胞的细 胞质中的遗传物质会对克隆动物的性状产生影响 (4)动物已分化体细胞的细胞核 具有全能性
[归纳拓展] 细胞核移植技术中的三个注意点 (1)动物细胞核移植技术，体现了动物细胞核的全能性而非细胞的全能性。 (2)克隆属于无性繁殖，产生新个体的性别、绝大多数性状与供核亲本一致。 (3)核移植技术获得的动物与供核动物性状不完全相同的原因：①克隆动物 线粒体中的DNA来自去核卵母细胞；②性状受环境的影响；③在个体发育过程中 有可能发生基因突变。
题点考法·练全练通 考法(一) 动物细胞培养、干细胞的培养及应用 1．(2021·浙江1月选考)下图为动物成纤维细胞的培养过程示意图。下列叙述正确的是
高中生物高考2022届新教材一轮复习人教版 第十单元 第6课 动物细胞工程 课件(111张)
2.动物细胞培养： (1)原理：_细__胞__增__殖__。 (2)过程：
(3)培养条件： ①无菌、无毒的环境：对_培__养__液__和所有培养用具进行无菌处理；添加 _抗__生__素__；定期更换培养液以便清除_代__谢__产__物__。 ②营养：除糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素之外通常还需加入 _血__清__、__血__浆__等一些天然成分。 ③温度和pH：适宜的温度为_3_6_._5_±__0_._5__℃__；适宜的pH为_7_._2_～__7_._4_。
2.教材选修3 P53：1975年，英国科学家米尔斯坦和德国科学家科勒在前人工 作的基础上，继续探索和尝试，并且充分发挥想象力，设计了一个极富创造 性的实验方案(图2-24)。他们想到，如果把一种B淋巴细胞与能在体外大量增 殖的骨髓瘤细胞进行融合，所得到的融合细胞就能大量增殖，产生足够数量 的特定抗体。 制备单克隆抗体时，为什么要选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细 胞？ 提示：每一个B淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体，但不能无限增殖；骨髓瘤 细胞可快速大量增殖，却不能产生抗体。若将两种细胞融合在一起，则既能产 生特异性抗体又能快速增殖。
第6课 动物细胞工程
核心概念·自查
【概念导图】 一图知全局
【概念梳理】 闭书测基础 一、动物细胞培养和核移植技术 1.动物细胞工程常用的技术手段： _动__物__细__胞__培__养__、动物细胞核移植、_动__物__细__胞__融__合__、生产单克隆抗体等，其 中_动__物__细__胞__培__养__技术是其他动物细胞工程技术的基础。
④气体环境
(4)应用：生产细胞产品，如干扰素、疫苗、单克隆抗体；检测并判断某种物 质毒性的大小；临床医学研究。
3.动物体细胞核移植技术和克隆动物： (1)原理：_动__物__体__细__胞__核__具__有__全__能__性__。 (2)核移植分类：_胚__胎__细__胞__核移植和体细胞核移植。 (3)过程：
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3）、两次筛选目的是什么？
第1次-----杂交瘤细胞（多种）。 第2次-----能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。
4）、为什么细胞融合过程中使用病毒需要灭活？不灭活行吗？ 灭活的病毒能使细胞膜打开，细胞发生融合，不灭 活的话会感染细胞，而不能诱导细胞融合。
.
13
1.(2014·课标卷Ⅰ，40) 研究者用抗原(A)分别免疫3只小鼠(X、Y和Z)，每只 小鼠免疫5次，每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价(能检测出抗原抗 体反应的血清最大稀释倍数)，结果如下图所示。
发生了接触抑制。
癌细胞
(3)E点后细胞大多数具有异倍体核型，这样的细胞有什么特点？
E点后的细胞属于细胞系，能无限增殖。
.
6
[例 1] 实验小鼠皮肤细胞培养(非克隆培养)的基本过程如下
图所示。下列叙述错误的是
() C
实验 小鼠
―甲―→
皮肤 组织
―乙―→
皮肤 细胞
―丙 ―→
培养 细胞1
―丁 ―→
培养 细胞2
.
5
1.分析命题热图，明确答题要点 阅读题目 圈出关键词 分析考点
如图，为动物细胞培养过程中细胞增殖情况的变化曲线，图中B、E两点表 示经筛选、分装后继续培养。据图分析：
(1)原代培养和传代培养的分界点是哪个？
B点之前的培养称为原代培养，之后的培养称为传代培养。
(2)AB段和DE段繁殖速度缓慢的原因是什么？
考点三、动物细胞融合与单克隆抗体的制备
1.动物细胞融合 (1)原理：细胞膜的流动_性_ 。 (2)融合方法：聚乙二醇(PEG)、灭活的病__毒_ 、电激等。 (3)意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成 为 可 能 ， 也为制造_单__克__隆__抗__体_开辟了新途径。
抗体
.
11
2.单克隆抗体 (1)制备过程
无机物：无机盐、_微__量__元_素___等 (2)营养有_动__机物__物血__：清__糖、__、血__氨浆__基：酸补、充促培生养长液因中子没有完全搞清
楚的成分
(3)温度和
温度：3_6_._5_±__0_.5_℃__ pHpH：7_._2_～__7_.4__
(4)气体环境OCO2：2：__细维__胞持__代___培谢 ____养__所_液_必_的_需_p_H的___
果
(2)受体：去掉细胞核的卵__母__细__胞____。
(3)结果：形成重组胚胎，发育成动__物__个__体__。
2．类型胚 _体__胎细__细胞__胞核__核移__移植__植_
易 难
.
8
3．体细胞核移植的过程
选取10代以内的 细胞，因为：
一__般__能__保__持__正_常__ 的__二__倍__体__核
一轮材料 P238-239
单个细胞
细胞悬液
考点一.动物细胞培养 2次胰蛋白酶
原代培养
①先用_胰__蛋 __白 __酶 __等处理贴满瓶壁的细胞，
50代后
传传代代培培养养②1再_0_～ 分__瓶_5_0继_代续左培右养时，细胞增殖缓慢，甚至停止 细胞癌变
③部分细胞_核__型 ___发生改变，获得不死性，能无
___将__剪_碎__的__组_织__分__散_成__单_；个细第胞二次是_____将__贴__壁_细__胞__从_瓶__壁，上目分离的下是来避
提 免动物细胞的接触抑制。
④将动物细胞分散成单个细胞培养的原因：
保证细胞所需要的营养供应。
保证细胞内有害代谢产物的及时排出。
醒
.
4
（3）．培养条件 (1)无菌、无毒的环境：①对培__养___液__和所有_培__养__用 ___具__进行无菌 处理。②加入抗生素。③定期更换培养液。
_。
重组细胞 重组胚胎
.
9
阅读题目 圈出关键词 分析考点
1.(2016·全国课标卷Ⅱ，40)下图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动
物(二倍体)的流程。回答下列问题：
供体 性别
(1)图 中A 表示 正 常细 胞核 ，染 色体数 为 2n， 则其 性染 色体的 组成 可 为
__X_X_或__X_Y_。过程①表示去除细胞核，该过程一般要在卵母细胞培养至适当
A．甲过程需要对实验小鼠进行消毒 条件
B．乙过程对皮肤组织可用胰蛋白酶消化
C．丙过程得到的细胞大多具有异倍体核型
培养过程过程中
D．丁过程得到的细胞具有异质性
细胞变化
阅读题目 圈出关键词 分析考点
.
7
考点二、动物体细胞核移植技术 和克隆动物
1．动物核移植概念 (1)供体：动物一个细胞的细__胞__核___。 结
原因是__卵_母__细__胞_的__细_胞__质__中_的__遗__传_物__质_会__对__克_隆__动_物__的__性_状__产__生_影__响____。
(4)与克隆羊“多莉(利)”培养成功一样，其他克隆动物的成功获得也证明了
______已__经_分__化__的_动__物_. _体_细___胞__核___具_有__全_能__性_______________核__移植技10术
制备杂交瘤细胞，取免疫后小鼠的B淋巴细胞(染色体数目40条) 与体外培养的骨髓瘤细 胞(染色体数目60条)按一定比例加入试管中，再加入PEG诱导细胞融合，经筛选培养 及抗体检测，得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。
时期再进行，去核时常采用__显_微__操__作__去__核__法_的方法。 选修三 P49
供体核
(2)经过多次传代后，供体细胞中_遗__传__物_质__（_核__型__）___的稳定性会降低。
因此，选材时必须关注传代次数。
来源
卵母
(3)若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同，从遗传物质的角度分析其
妙学妙记
1、制备过程的 “122” 一融合，二筛选，二培养
2、单克隆抗体的优点 可、特、灵
杂交瘤细胞 能产生特异性抗体
(1)优点：特异性强、 灵敏度高，可大量制备。
.
12
问题强化：
1）、本过程利用了哪些原理？ 免疫原理，动物细胞融合和动物细胞培养原理
2）、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？ 继承了双亲细胞的遗传物质，能无限增殖又能分泌特异性抗体。
.
限增殖
3
特
①动物细胞培养原理：___细__胞__增_殖____。其过程所用培养基一般是 ____液_培体 养基。
别
②动物细胞培养时选用幼龄动物组织或胚胎进行细胞培养，因 为_分__化_程__度__低_，__增__殖_能__力__强_，__更__易_于_.培养。
③动物细胞培养过程中两次用到____胰__蛋__白_酶___，第一次的作用是
第1次-----杂交瘤细胞（多种）。 第2次-----能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。
4）、为什么细胞融合过程中使用病毒需要灭活？不灭活行吗？ 灭活的病毒能使细胞膜打开，细胞发生融合，不灭 活的话会感染细胞，而不能诱导细胞融合。
.
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1.(2014·课标卷Ⅰ，40) 研究者用抗原(A)分别免疫3只小鼠(X、Y和Z)，每只 小鼠免疫5次，每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价(能检测出抗原抗 体反应的血清最大稀释倍数)，结果如下图所示。
发生了接触抑制。
癌细胞
(3)E点后细胞大多数具有异倍体核型，这样的细胞有什么特点？
E点后的细胞属于细胞系，能无限增殖。
.
6
[例 1] 实验小鼠皮肤细胞培养(非克隆培养)的基本过程如下
图所示。下列叙述错误的是
() C
实验 小鼠
―甲―→
皮肤 组织
―乙―→
皮肤 细胞
―丙 ―→
培养 细胞1
―丁 ―→
培养 细胞2
.
5
1.分析命题热图，明确答题要点 阅读题目 圈出关键词 分析考点
如图，为动物细胞培养过程中细胞增殖情况的变化曲线，图中B、E两点表 示经筛选、分装后继续培养。据图分析：
(1)原代培养和传代培养的分界点是哪个？
B点之前的培养称为原代培养，之后的培养称为传代培养。
(2)AB段和DE段繁殖速度缓慢的原因是什么？
考点三、动物细胞融合与单克隆抗体的制备
1.动物细胞融合 (1)原理：细胞膜的流动_性_ 。 (2)融合方法：聚乙二醇(PEG)、灭活的病__毒_ 、电激等。 (3)意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成 为 可 能 ， 也为制造_单__克__隆__抗__体_开辟了新途径。
抗体
.
11
2.单克隆抗体 (1)制备过程
无机物：无机盐、_微__量__元_素___等 (2)营养有_动__机物__物血__：清__糖、__、血__氨浆__基：酸补、充促培生养长液因中子没有完全搞清
楚的成分
(3)温度和
温度：3_6_._5_±__0_.5_℃__ pHpH：7_._2_～__7_.4__
(4)气体环境OCO2：2：__细维__胞持__代___培谢 ____养__所_液_必_的_需_p_H的___
果
(2)受体：去掉细胞核的卵__母__细__胞____。
(3)结果：形成重组胚胎，发育成动__物__个__体__。
2．类型胚 _体__胎细__细胞__胞核__核移__移植__植_
易 难
.
8
3．体细胞核移植的过程
选取10代以内的 细胞，因为：
一__般__能__保__持__正_常__ 的__二__倍__体__核
一轮材料 P238-239
单个细胞
细胞悬液
考点一.动物细胞培养 2次胰蛋白酶
原代培养
①先用_胰__蛋 __白 __酶 __等处理贴满瓶壁的细胞，
50代后
传传代代培培养养②1再_0_～ 分__瓶_5_0继_代续左培右养时，细胞增殖缓慢，甚至停止 细胞癌变
③部分细胞_核__型 ___发生改变，获得不死性，能无
___将__剪_碎__的__组_织__分__散_成__单_；个细第胞二次是_____将__贴__壁_细__胞__从_瓶__壁，上目分离的下是来避
提 免动物细胞的接触抑制。
④将动物细胞分散成单个细胞培养的原因：
保证细胞所需要的营养供应。
保证细胞内有害代谢产物的及时排出。
醒
.
4
（3）．培养条件 (1)无菌、无毒的环境：①对培__养___液__和所有_培__养__用 ___具__进行无菌 处理。②加入抗生素。③定期更换培养液。
_。
重组细胞 重组胚胎
.
9
阅读题目 圈出关键词 分析考点
1.(2016·全国课标卷Ⅱ，40)下图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动
物(二倍体)的流程。回答下列问题：
供体 性别
(1)图 中A 表示 正 常细 胞核 ，染 色体数 为 2n， 则其 性染 色体的 组成 可 为
__X_X_或__X_Y_。过程①表示去除细胞核，该过程一般要在卵母细胞培养至适当
A．甲过程需要对实验小鼠进行消毒 条件
B．乙过程对皮肤组织可用胰蛋白酶消化
C．丙过程得到的细胞大多具有异倍体核型
培养过程过程中
D．丁过程得到的细胞具有异质性
细胞变化
阅读题目 圈出关键词 分析考点
.
7
考点二、动物体细胞核移植技术 和克隆动物
1．动物核移植概念 (1)供体：动物一个细胞的细__胞__核___。 结
原因是__卵_母__细__胞_的__细_胞__质__中_的__遗__传_物__质_会__对__克_隆__动_物__的__性_状__产__生_影__响____。
(4)与克隆羊“多莉(利)”培养成功一样，其他克隆动物的成功获得也证明了
______已__经_分__化__的_动__物_. _体_细___胞__核___具_有__全_能__性_______________核__移植技10术
制备杂交瘤细胞，取免疫后小鼠的B淋巴细胞(染色体数目40条) 与体外培养的骨髓瘤细 胞(染色体数目60条)按一定比例加入试管中，再加入PEG诱导细胞融合，经筛选培养 及抗体检测，得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。
时期再进行，去核时常采用__显_微__操__作__去__核__法_的方法。 选修三 P49
供体核
(2)经过多次传代后，供体细胞中_遗__传__物_质__（_核__型__）___的稳定性会降低。
因此，选材时必须关注传代次数。
来源
卵母
(3)若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同，从遗传物质的角度分析其
妙学妙记
1、制备过程的 “122” 一融合，二筛选，二培养
2、单克隆抗体的优点 可、特、灵
杂交瘤细胞 能产生特异性抗体
(1)优点：特异性强、 灵敏度高，可大量制备。
.
12
问题强化：
1）、本过程利用了哪些原理？ 免疫原理，动物细胞融合和动物细胞培养原理
2）、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？ 继承了双亲细胞的遗传物质，能无限增殖又能分泌特异性抗体。
.
限增殖
3
特
①动物细胞培养原理：___细__胞__增_殖____。其过程所用培养基一般是 ____液_培体 养基。
别
②动物细胞培养时选用幼龄动物组织或胚胎进行细胞培养，因 为_分__化_程__度__低_，__增__殖_能__力__强_，__更__易_于_.培养。
③动物细胞培养过程中两次用到____胰__蛋__白_酶___，第一次的作用是